kỹ thuâtj pcr

Kỹ thuật PCR:

Ngày tải lên : 18/08/2012, 23:37

... số kỹ thuật PCR khác: Một số kỹ thuật phát triển trên cơ sở của kỹ thuật PCR có ý nghĩa quan trọng cho định danh và định typ vi sinh vật là nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR ... Dùng kỹ thuật PCR cho ribotyping: Kỹ thuật PCR ribotyping là ứng dụng các cặp mồi đặc hiệu để nhân các vùng gene của ARN (thuộc ribosom hay ARN vận chuyển). Tuy nhiên, trong thực tế kỹ thuật ... này với PCR lồng có tác dụng phát hiện ARN tại thời điểm nhất định của mẫu. Kỹ thuật PCR một chiều được ứng dụng trong phương pháp giải trình tự ADN trực tiếp từ sản phẩm PCR. phẩm PCR. +...

25
1.8K
18

Kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 15/09/2012, 15:49

... số kỹ thuật PCR khác: Một số kỹ thuật phát triển trên cơ sở của kỹ thuật PCR có ý nghĩa quan trọng cho định danh và định typ vi sinh vật là nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR ... Dùng kỹ thuật PCR cho ribotyping: Kỹ thuật PCR ribotyping là ứng dụng các cặp mồi đặc hiệu để nhân các vùng gene của ARN (thuộc ribosom hay ARN vận chuyển). Tuy nhiên, trong thực tế kỹ thuật ... này với PCR lồng có tác dụng phát hiện ARN tại thời điểm nhất định của mẫu. Kỹ thuật PCR một chiều được ứng dụng trong phương pháp giải trình tự ADN trực tiếp từ sản phẩm PCR. phẩm PCR. +...

25
1.6K
6

Ứng dụng kỹ thuật PCR - RFLP xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên giống heo Yorkshire

Ngày tải lên : 29/10/2012, 14:13

... 2.3.2.6 Các vấn đề thƣờng gặp trong PCR và phƣơng pháp khắc phục 16 2.3.2.7 Ứng dụng của PCR 18 2.4 Giới thiệu về kỹ thuật RFLP và kỹ thuật PCR – RFLP 18 2.4.1 Kỹ thuật RFLP ( restricton fragment ... phẩm có nguồn gốc tự nhiên hay là sản phẩm chuyển gen… 2.5 Giới thiệu về kỹ thuật RFLP và kỹ thuật PCR – RFLP 2.5.1 Kỹ thuật RFLP ( restriction fragment length polymorphism) Đây là phƣơng pháp ... gen PRLR, Vincent và cộng sự đã dùng kỹ thuật PCR – RFLP (polymerase chain reaction – restriction fragment length polymorphism). Trƣớc ông dùng kỹ thuật PCR để phân lập một đoạn DNA của gen...

52
1.4K
3

Bản chất của kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 29/10/2012, 14:41

... trình Quy trình PCR gồm 20 đến 30 chu kỳ. Mỗi chu kỳ gồm 3 bước (Hình 2) Một số buffer đã có chứa sẵn loading buffer để có thể điện di ngay sau PCR. Tuy nhiên, độ nhạy của PCR với những buffer ... (94 0 C, 30 giây) Chu trình PCR IV: Chu kỳ phản ứng của PCR Biến tính - Việc tăng nhiệt độ hoặc kéo dài thời gian biến tính có thể làm tăng tính đặc hiệu của PCR nhưng làm giảm tuổi thọ của ... NGHỆ SINH HỌC Câu hỏi: Nội dung I. Khái niệm Bản chất của kỹ thuật PCR( phản ứng chuỗi trùng hợp,phản ứng nhờ chuỗi polymerase) là kỹ thuật tổng hợp nhân tạo nhân AND với tốc độ nhsnh chưa từng...

6
1.6K
21

Chuyên đề: Sinh học phân tử - kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 29/10/2012, 15:17

... – PCR (reverse transcriptase PCR) còn gọi là RNA – PCR hay RT – PCR. RT – PCR nhạy hơn các phương pháp khác được dùng cho sự phân tích ARN. - RT – PCR cạnh tranh (Competitive RT – PCR) là kỹ ... lũy sản phẩm và định lượng qPCR (quantitative PCR – là PCR định lượng). Ngoài ra còn một số kỹ thuật PCR khác nữa… VIII. RT – PCR Như chúng ta đã biết, PCR là kỹ thuật nhân bội ADN mạch kép. ... tương đối và tuyệt đối. IX. REAL – TIME PCR Trong sinh học phân tử, real – time PCR (PCR úng thời điểm) là kỹ thuật phòng thí nghiệm dựa trên phản ứng PCR dùng để nhân bội và định lượng đồng...

25
1.8K
30

XÂY DỰNG QUI TRÌNH CHẨN ĐOÁN BẮP CÓ CHUYỂN CÁC GENE KHÁNG SÂU (CryIA [b]) VÀ GENE TĂNG CƯỜNG CHUYỂN HÓA ĐƯỜNG (Invertase) BẰNG KỸ THUẬT PCR

Ngày tải lên : 30/10/2012, 16:45

... lạnh ở -20 o C để sử dụng cho các phản ứng PCR. Phương pháp khuyếch đại DNA (Kỹ thuật PCR) Sản phẩm DNA sau ly trích được trộn chung với hỗn hợp gồm có PCR buffer, MgCl 2 , dNTP / s, Taq DNA ... GENE KHÁNG SÂU (CryIA [b]) VÀ GENE TĂNG CƯỜNG CHUYỂN HÓA ĐƯỜNG (Invertase) BẰNG KỸ THUẬT PCR OPPTIMIZING PCR PROTOCOLS FOR DETECTIONS OF CRYIA(B) AND INVERTASE GENES IN MAIZE. Buøi Minh ... 2. Kết quả gel điện di các sản phẩm PCR sử dụng primer Gic hoạt động ở các chế độ nhiệt khác nhau Từ hình 2, chúng tôi nhận thấy khi hỗn hợp phản ứng PCR được làm mát nhanh ở khoảng nhiệt...

5
686
4

Kết quả ban đầu trong việc sử dụng kỹ thuật pcr nhằm đánh giá hiện trạng các sản phẩm bắp chuyển gene tại việt nam

Ngày tải lên : 30/10/2012, 16:45

... Bt. Với cặp primer Gic, sản phẩm PCR sau khi chụp hình cho thấy có hai mẫu có band kích thước 226bp (có chuyển gen Invertase). Với cặp primer Bt, sản phẩm PCR sau khi chụp hình cho thấy có ... chuyển gen CryIA(b). KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Kết luận KẾT QUẢ BAN ĐẦU TRONG VIỆC SỬ DỤNG KỸ THUẬT PCR NHẰM ĐÁNH GIÁ HIỆN TRẠNG CÁC SẢN PHẨM BẮP CHUYỂN GENE TẠI VIỆT NAM PREVIOUS RESULTS ... (25:24:1); Isopropanol; Ethanol (70%) vaa2 TE 1X. Các hoá chất dùng cho phản ứng PCR bao gồm: Nước cất 2 laàn; PCR buffer; MgCl 2 dNTP / s; Taq DNA polymerase; Primer Gic và Primers Bt. Các...

5
488
1

Ứng dụng kỹ thuật PCR - RFLP xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên giống heo Yorkshire

Ngày tải lên : 31/10/2012, 09:07

... đoạn. Kỹ thuật RT -PCR cho phép nghiên cứu các mRNA tồn tại với hàm lƣợng thấp, RNA của virus, không thể phát hiện bằng các phƣơng pháp khác nhƣ Northern blot. Một kỹ thuật mới phát triển - kỹ ... RNA. Do Taq polymerase không hoạt động trên RNA nên ngƣời ta sử dụng kỹ thuật phối hợp RT -PCR (Reverse Transcriptase - PCR) . Trƣớc hết RNA đƣợc chuyển thành cDNA (Complement Deoxyribonucleotic ... đọc kết quả (Vũ Triệu Mân, 2003). 2.3.8 Phƣơng pháp RT -PCR (reverse transcriptase - polymerase chain reaction) RT -PCR là một ứng dụng của PCR (Polymerase Chain Reaction) dùng để khuếch đại các...

49
989
3

Ứng dụng kỹ thuật PCR và lây nhiễm nhân tạo kiểm chứng gen kháng bệnh bạc lá ở các dòng đẳng gen

Ngày tải lên : 02/11/2012, 10:09

... Vân Anh, Bùi Văn Công, Hoàng Văn Dương Đề tài: Đề tài: “Ứng dụng kỹ thuật PCR và lây nhiễm nhân tạo “Ứng dụng kỹ thuật PCR và lây nhiễm nhân tạo kiểm chứng gen kháng bệnh bạc lá ở các dòng ... Cỏch tin hnh: + Cỏch tin hnh: ã Phản ứng PCR: thành phần 20 μl dung dịch phản ứng PCR gồm Phản ứng PCR: thành phần 20 μl dung dịch phản ứng PCR gồm có: 12.24 μl nước cất, 0.1 μl có: 12.24 ... Dương + PCR của gen Xa4 và Xa 7 và Xa21 được thực hiện theo chu kì nhiệt: 94ºC trong 4 phút, 30 chu kỳ, 94ºC trong 1 phút, 56ºC trong 1 phút, 72º trong 2 phút, và 72 º C trong 8 phút. + PCR của...

32
1K
2

Xác định giới tính cây đủ đủ bằng kỹ thuật PCR với các cặp Primer được thiết kế dựa vào vùng DNA

Ngày tải lên : 05/11/2012, 14:01

... xuất và trồng trọt 12 2.2. Kỹ thuật PCR 13 2.2.1. Lịch sử PCR 13 2.2.2. Nguyên tắc PCR 14 2.2.3. Các thành phần của phản ứng PCR 14 2.2.4. Ƣu điểm và nhƣợc điểm của PCR 17 2.2.5. Nguyên tắc ... là sản phẩm PCR khi thực hiện PCR mẫu 4 với cặp primer W11. F là sản phẩm PCR khi thực hiện PCR mẫu 4 với cặp primer T1. 1 – 6 là sản phẩm PCR thu đƣợc khi thực hiện multiplex PCR các mẫu ... tinh sạch, chỉ cần pha loãng DNA, vẫn có thể thực hiện thành công phản ứng PCR. Kỹ thuật PCR Dựa vào kết quả chạy PCR có thể xác định đƣợc giới tính cây đu đủ với mức độ chính xác rất cao....

48
585
4

xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên một số giống heo công nghiệp bằng kỹ thuật PCR -RFLP

Ngày tải lên : 06/11/2012, 09:49

... nucleic, thu nhận acid nucleic dạng cô đặc trong ethanol hoặc isopropanol. 2.5 Kỹ thuật PCR 2.5.1 Nguyên tắc Kỹ thuật PCR (Polymerase chain reaction) là phản ứng nhân nhanh số lƣợng mẫu DNA nhờ ... Hình 2.5 Chu trình phản ứng PCR 2.6.2 Các yếu tố ảnh hƣởng 2.6.2.1 DNA mẫu Phản ứng PCR tối ƣu trên DNA thật tinh sạch. Tuy nhiên, có nhiều nghiên cứu cho thấy PCR vẫn tốt trên DNA thu nhận ... ĐỊNH CÁC KIỂU GEN THỤ THỂ PROLACTIN TRÊN MỘT SỐ GIỐNG HEO CÔNG NGHIỆP BẰNG KỸ THUẬT PCR - RFLP LUẬN VĂN KỸ SƢ CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giáo viên hƣớng dẫn Sinh viên...

59
1.3K
7

Ảnh hưởng của nấm Glomus sp. và bốn mức phân lân đến sinh trưởng, phát triển bắp C919 và xác định nấm cộng sinh Mycorrhiza bằng kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 17/11/2012, 09:39

... 2.2.2. Lợi ích của nấm cộng sinh 12 2.3. Sơ lƣợc về kỹ thuật PCR 13 2.3.1. Nguyên tắc của kỹ thuật PCR 13 2.3.2. Các yếu tố ảnh hƣởng đến phản ứng PCR 16 2.3.2.1. DNA mẫu 16 2.3.2.2. Taq polmerase ... 3.4. Thí nghiệm PCR phát hiện trên ba giống: Glomus sp., Gigaspora sp., Scutellospora sp 3.4.1. Vật liệu nghiên cứu trong phản ứng PCR 3.4.1.1. Các hóa chất dùng trong PCR 10X PCR buffer. ... 3 mM MgCl 2 e. Số lƣợng chu kỳ của phản ứng PCR Trong thực tế số chu kỳ cho một phản ứng PCR không nên vƣợt quá 40. Sở dĩ nhƣ vậy vì phản ứng PCR diễn tiến qua hai giai đoạn : Giai đoạn đầu:...

90
814
11

Phát hiện bệnh khảm lá mía bằng kỹ thuật Elisa và bước đầu nghiên cứu phát hiện bệnh cằn mía gốc bằng kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 17/11/2012, 09:45

... PHÁT HIỆN BỆNH KHẢM LÁ MÍA BẰNG KỸ THUẬT ELISA VÀ BƢỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU PHÁT HIỆN BỆNH CẰN MÍA GỐC BẰNG KỸ THUẬT PCR Luận văn kỹ sƣ Chuyên ngành: Công nghệ sinh học ... thuật lai tại vết bệnh (dot blot hybridization) với 7 đầu dò DNA đặc hiệu cho Lxx.  Kỹ thuật PCR. Kỹ thuật PCR đƣợc phát triển nhằm phát hiện Lxx (Pan và các cộng sự, 1998; Taylor và các cộng ... tổng hợp nên một sợi DNA đặc thù. Sơ đồ 2.2. Sơ đồ tổng quát của kỹ thuật RT -PCR (Trích dẫn Vương Hồ Vũ, 2005). Trong kỹ thuật PCR, các đoạn mồi đƣợc chọn nằm ở 2 đầu đoạn DNA cần nhân lên,...

64
610
1

Xác định các kiểu gen thụ thể Prolactin trên một số giống heo công nghiệp bằng kỹ thuật PCR-RFLP

Ngày tải lên : 17/11/2012, 09:47

... nucleic, thu nhận acid nucleic dạng cô đặc trong ethanol hoặc isopropanol. 2.5 Kỹ thuật PCR 2.5.1 Nguyên tắc Kỹ thuật PCR (Polymerase chain reaction) là phản ứng nhân nhanh số lƣợng mẫu DNA nhờ ... Hình 4.1a Sản phẩm PCR Hình 4.1b Sản phẩm PCR Từ kết quả điện di ( thể hiện ở 2 hình chụp 4.1a,b), ta có thể thấy rằng sản phẩm PCR chƣa thật đẹp cụ thể là một số sản phẩm PCR khi chụp lên ... gen PRLR, Vincent và cộng sự đã dùng kỹ thuật PCR – RFLP (polymerase chain reaction – restriction fragment length polymorphism). Trƣớc đó, ông dùng kỹ thuật PCR để phân lập một đoạn DNA của gen...

59
757
0

Ảnh hương của nấm Glomus sp. và bốn mức phân lân đến sinh trưởng, phát triển bắp C919 và xác định nấm cộng sinh Mycorrhiza bằng kỹ thuật PCR

Ngày tải lên : 19/11/2012, 15:14

... 2.2.2. Lợi ích của nấm cộng sinh 12 2.3. Sơ lƣợc về kỹ thuật PCR 13 2.3.1. Nguyên tắc của kỹ thuật PCR 13 2.3.2. Các yếu tố ảnh hƣởng đến phản ứng PCR 16 2.3.2.1. DNA mẫu 16 2.3.2.2. Taq polmerase ... 3 mM MgCl 2 e. Số lƣợng chu kỳ của phản ứng PCR Trong thực tế số chu kỳ cho một phản ứng PCR không nên vƣợt quá 40. Sở dĩ nhƣ vậy vì phản ứng PCR diễn tiến qua hai giai đoạn : Giai đoạn đầu: ... 31 Thành phần hóa chất PCR đƣợc tiến hành theo bảng sau: Bảng 3.2 Thành phần hóa chất PCR Hóa chất Nồng độ đầu Thể tích Nồng độ cuối PCR buffer 10X l 1X MgCl 2 25 M l...