cấu trúc và biểu hiện gen ở euk

Phân tích cấu trúc và biểu hiện của văn hoá doanh nghiệp Ngân hàng thương mại Cổ phần Nhà Hà Nội (Habubank). Tác động văn hoá Doanh nghiệp của Habubank tới hoạt động kinh doanh của công ty.doc

Phân tích cấu trúc và biểu hiện của văn hoá doanh nghiệp Ngân hàng thương mại Cổ phần Nhà Hà Nội (Habubank). Tác động văn hoá Doanh nghiệp của Habubank tới hoạt động kinh doanh của công ty.doc

... trọng mở rộng hoạt động thương mại nhằm đối tượng khách hàng doanh nghiệp vừa nhỏ cá nhân tổ chức tài khác bên cạnh việc thực hoạt động hỗ trợ phát triển nhà Thêm vào đó, cấu cổ đông mở rộng ... nghiệp Habubank I Cấu trúc hữu hình Tồ nhà Habubank: Đặc điểm kiến trúc, màu sắc riêng Habubank toàn thể toàn nhà Habubank màu xanh lục -màu xanh tạo tạo nên cảm giác thân thiện gần gũi- Màu ... lưới ngày mở rộng, năm liên tục Ngân hàng Nhà nước Việt Nam xếp loại A công nhân Ngân hàng phát triển toàn diện với hoạt động ổn định an toàn hiệu Tháng 12 năm 2006, Habubank nhận giải thưởng " Ngân...

Ngày tải lên: 03/09/2012, 13:03

9 5,3K 62
Báo cáo nghiên cứu khoa học: "Về cấu trúc và biểu hiện xạ ảnh của nhóm Lie Poin caré" doc

Báo cáo nghiên cứu khoa học: "Về cấu trúc và biểu hiện xạ ảnh của nhóm Lie Poin caré" doc

... trơn nên τ đồng cấu nhóm Lie Đại số Lie nhóm Lie O(3, 1) Aut(R4 ) so(3, 1) Der(R4 ) nên dτ đồng cấu đại số Lie từ so(3, 1) vào Der(R4 ) Theo định nghĩa, đại ... khả quy Ngược lại, cho π ∼ biểu diễn xạ ảnh bất khả quy SO◦ (3, 1) R4 H, ta suy π = π ◦ Ψ biểu diễn xạ ảnh bất khả quy SL(2, C) R4 Theo định lí 2.2, biểu diễn nâng lên biểu diễn unita bất khả quy ... Lie tương ứng sl(2, C) R4 đẳng cấu với so(3, 1) R4 nên theo Mệnh đề 2.1, ta có H sl(2, C) R4 = Suy biểu diễn xạ ảnh π : SL(2, C) R4 → Aut(P(H)) ∼ nâng lên thành biểu diễn unita π : SL(2, C) R4...

Ngày tải lên: 23/07/2014, 00:22

7 325 0
Điều hòa và biểu hiện gen ở sinh vật bậc cao

Điều hòa và biểu hiện gen ở sinh vật bậc cao

... Điều hòa chế phân hủy Các giai đoạn biểu gen điều hòa sinh vật nhân thật Điều hòa biểu gen thay đổi cấu trúc NST hay cấu trúc phân tử DNA • Chủ yếu điều hòa cấu trúc chất nhiễm sắc (chromatin) • ... polypeptid - Sự bền vững mRNA II Cơ chế biểu gen sinh vật bậc cao Có nhiều chế hoạt động biểu gen khác nhau: Điều hòa biểu thay đổi cấu trúc NST hay cấu trúc phân tử DNA Điều hòa mức độ phiên ... hòa biểu gen chúng vào thời điểm định tất gene có biểu liên tục, thơng tin di truyền điều hòa theo cách khác Trong tiểu luận chúng tơi xin trình bày về: “Cơ chế điều hòa hoạt động biểu gen...

Ngày tải lên: 21/12/2015, 02:33

39 1,4K 15
Nghiên cứu tạo đột biến khử độc và biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên tái tổ hợp staphylococcal enterotoxin b (seb) phục vụ cho việc chế tạo kít phát hiện tụ cầu vàng trong thực phẩm

Nghiên cứu tạo đột biến khử độc và biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên tái tổ hợp staphylococcal enterotoxin b (seb) phục vụ cho việc chế tạo kít phát hiện tụ cầu vàng trong thực phẩm

... pET21a+ - Chuẩn bị vector biểu pET21a+ Muốn gen đích biểu thành protein cần thiết kế gen vào vector mang cấu trúc cần thiết cho trình phiên mã dịch mã Các vector gọi vector biểu Các trình tự quan ... 28,336 KDa dạng hoạt động protein SEB có cấu trúc gồm: cấu trúc xoắn α, 14 phiến gấp nếp β cầu nối disulphit nối cystein vị trí 120 140 [46] Theo Gleason cs (2009), protein SEB có vùng cấu trúc đặc ... le gen seb 32 3.2 Kết thiết kế vector biểu pET21a+ mang gen seb đột biến 34 3.2.1 Xử lý enzym hạn chế tạo đầu cắt so le pET21a+ 34 3.2.2 Phản ứng gắn đoạn gen đích seb vào vector biểu...

Ngày tải lên: 12/11/2012, 18:00

67 1,1K 3
Phân lập và biểu hiện gen mã hóa yếu tố đông máu IX của người ở vi khuẩn e  coli

Phân lập và biểu hiện gen mã hóa yếu tố đông máu IX của người ở vi khuẩn e coli

... gồm exon intron 1.4 Cấu trúc biến đổi sau dịch mã yếu tố đông máu IX 1.4.1 Cấu trúc phân tử protein FIX người, phân tử protein FIX protein phụ thuộc vào vitamin K, tham gia vào q trình đơng máu ... hóa Fxa 1.3 Cấu trúc gen mã hóa yếu tố đơng máu IX Gen FIX gen mã hóa cho yếu tố đông máu IX (human factor IX, protein FIX), nằm cánh tay dài nhiễm sắc thể giới tính X vị trí Xq27.1 Gen FIX có ... pJET1.2/blunt (Fermentas)  Vector biểu hiện: pET32a (Novagen)  Các cặp mồi Các cặp mồi dùng để phân lập, chọn dòng biểu gen thiết kế dựa trình tự cDNA chuẩn công bố Genbank (NM_000133) đặt tổng hợp...

Ngày tải lên: 10/02/2014, 20:39

18 671 1
So sánh sự biểu hiện gen ở vi khuẩn, archaea và sinh vật nhân thật pptx

So sánh sự biểu hiện gen ở vi khuẩn, archaea và sinh vật nhân thật pptx

... gia vào trình phiên mã dịch mã liên giới vi khuẩn cực đoan giúp sáng tỏ nhiều điều tiến hóa q trình ba liên giới sinh vật Tuy có khác biệt trình biểu gen giới sinh vật khác nhau, khái niệm gen ... vật nhân thật Sự khởi đầu dịch mã khác vi khuẩn sinh vật nhân thật Nhưng trình diễn archaea giống với vi khuẩn Sự khác biệt quan trọng vi khuẩn sinh vật nhân thật trình biểu gen tế bào vi khuẩn ... mã dịch mã mặt không gian; đông thời dành phần không gian nhân tế bào cho trình hồn thiện ARN Giai đoạn hồn thiện gòm số bước bổ sung mà điều bước góp thêm phần giúp điều tiết hoạt động phức tạp...

Ngày tải lên: 25/03/2014, 22:20

3 542 2
Cấu trúc nghĩa biểu hiện của câu có vị ngữ là vị từ mang ý nghĩa trao/tặng (trên cơ sở tiếng Việt và tiếng Anh)

Cấu trúc nghĩa biểu hiện của câu có vị ngữ là vị từ mang ý nghĩa trao/tặng (trên cơ sở tiếng Việt và tiếng Anh)

... CẤU TRÚC NGHĨA BIỂU HIỆN RÚT GỌN MỞ RỘNG CỦA CÂU VỚI VỊ TỪ TRAO/TẶNG 3.1 Dẫn nhập Tuỳ trường hợp cụ thể, diễn tố khiếm diện, làm rút gọn cấu trúc nghĩa biểu câu Ngược lại, cấu trúc nghĩa biểu ... tìm hiểu yếu tố bề sâu Nói cách khác, cấu trúc cú pháp ánh xạ (mapping) cấu trúc nghĩa biểu câu phải dựa vào cấu trúc cú pháp để nghiên cứu cấu trúc nghĩa biểu câu Dĩ nhiên, nhiều tác giả khẳng ... bước thứ ba quy trình phân tích cấu trúc nghĩa biểu câu: bước xác định tư cách, vị tham thể sau nhận diện 13 CHƯƠNG 4: SỰ THỂ HIỆN CẤU TRÚC NGHĨA BIỂU HIỆN TRÊN CẤU TRÚC CÚ PHÁP CỦA CÂU VỚI VỊ TỪ...

Ngày tải lên: 04/04/2014, 23:58

24 1,1K 0
Nghiên cứu tách dòng và biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên bề mặt của tiên mao trùng (Trypanosoma Evansi) lưu hành ở Việt Nam

Nghiên cứu tách dòng và biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên bề mặt của tiên mao trùng (Trypanosoma Evansi) lưu hành ở Việt Nam

... http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 27 1.3 VECTOR BIỂU HIỆN 1.3.1 Khái niệm Vector biểu gen vector tách dòng mang promoter mạnh, cho phép biểu đồng thời gen thị gen tách dòng tạo nên protein lai Một vector biểu gen gồm thành phần ... trở hoạt hố tự nhiên điểm biểu gen Cách thứ hai là, tập hợp lại đoạn ADN khác để tái tổ hợp gen, mà việc tái tổ hợp cho phép thay hoàn toàn phần gen; việc thay diễn dựa vào chuyển đổi gen dựa vào ... mảnh hình thoi, cuối thân nhọn Nhìn chung, cấu trúc T evansi giống nhƣ cấu trúc loài tiên mao trùng khác thuộc họ Trypanosomatidae Cấu trúc từ ngồi vào đƣợc chia thành phần chính: - Vỏ: lớp vỏ...

Ngày tải lên: 01/07/2014, 23:45

78 502 1
Phân lập và biểu hiện gen mã hóa protein vỏ p10 của virus gây bệnh lúa lùn sọc đen ở việt nam

Phân lập và biểu hiện gen mã hóa protein vỏ p10 của virus gây bệnh lúa lùn sọc đen ở việt nam

... đoạn gen P10 41 3.1.5 Giải trình tự đoạn gen P10 chủng SRBSDV 44 3.2 BIỂU HIỆN TINH SẠCH PROTEIN TÁI TỔ HỢP P10 45 3.2.1 Thiết kế vector biểu pET28a mang đoạn gen P10 .45 3.2.2 Biểu ... trung vào nghiên cứu phân tử nhƣ giải trình tự gen, tạo giống chống chịu virus công nghệ gen nhƣ công nghệ RNAi Hiện Viện Di truyền đăng ký 14 trình tự gen virus vàng lùn lùn xoắn lúa Ngân hàng gen; ... đây, dựa vào kết nghiên cứu môi giới truyền bệnh, cấu trúc chất hệ gen virus, nhà khoa học Trung Quốc kết luận nguyên nhân gây bệnh chủng virus với tên gọi SRBSDV Kết luận dựa vào sở khoa học...

Ngày tải lên: 05/07/2015, 13:33

89 384 0
Nhân dòng promoter và terminatorheat shock protein 18 2 từ arabidopsis thaliana làm nguyên liệu thiết kế vector biểu hiện gen ở thực vật

Nhân dòng promoter và terminatorheat shock protein 18 2 từ arabidopsis thaliana làm nguyên liệu thiết kế vector biểu hiện gen ở thực vật

... nucleotide phía đầu 5’ điểm khởi đầu phiên mã, đóng vai trò then chốt việc biểu gen đích, giúp xác định thời gian, vị trí mức độ biểu gen đích [2] Promoter có cấu trúc phức tạp chứa nhiều yếu ... [5-7] Sự biểu gen đích phụ thuộc vào trình tự đầu 3’ khơng dịch mã terminator Các terminator khác có ảnh hưởng rõ rệt đến mức độ biểu gen [8,9] Sử dụng HSP 18.2 terminator làm tăng mức độ biểu miraculin ... động phiên mã gen HSP 18.2 Arabidopsis, hoạt động promoter cảm ứng nhiệt độ Nhiều nghiên cứu sử dụng promoter để nghiên cứu phản ứng sốc nhiệt thuốc chuyển gen cho thấy hoạt động gen β-glucuronidase...

Ngày tải lên: 24/08/2015, 18:06

8 380 1
Luận văn nghiên cứu phát triển hệ vector SFV (semliki forest virut) nhằm nhân dòng và biểu hiện gen mã thụ thể neurokinin 1 phục vụ các nghiên cứu dược lý và phát triển thuốc ở việt nam

Luận văn nghiên cứu phát triển hệ vector SFV (semliki forest virut) nhằm nhân dòng và biểu hiện gen mã thụ thể neurokinin 1 phục vụ các nghiên cứu dược lý và phát triển thuốc ở việt nam

... mã hóa vùng gen cấu trúc không dùng để cấu thành virut Các protein cấu trúc mã hóa đoạn ARN ký hiệu 26S, protein phi cấu trúc dịch mã từ ARN 42S hệ gen Cả protein cấu trúc phi cấu trúc tạo thành ... học Hình Cấu trúc vector pSFV 1.2.2.2 Cấu trúc pHelper Vùng gen mã hóa cho protein phi cấu trúc vector pHelper bị xóa bỏ phần lớn, giữ lại nguyên vẹn vùng gen mã hóa cho protein cấu trúc (sPs) ... Sĩ) gồm vector nhân dòng gen quan tâm pSFV dài 11489 bp vector biểu protein cấu trúc pHelper dài 8650 bp Hai vector có chất ADN, cấu trúc cụ thể chúng nêu 1.2.2.1 Cấu trúc pSFV pSFV chứa trình...

Ngày tải lên: 23/10/2015, 11:28

73 903 0
Phân lập và biểu hiện gen mã hóa yếu tố đông máu IX của người ở vi khuẩn e coli

Phân lập và biểu hiện gen mã hóa yếu tố đông máu IX của người ở vi khuẩn e coli

... Hình Cấu trúc phân tử mRNA phiên mã từ gen FIX [63] 15 1.4 Cấu trúc biến đổi sau dịch mã yếu tố đông máu IX 1.4.1 Cấu trúc phân tử protein FIX người, phân tử protein FIX protein phụ thuộc vào ... sinh Hình Biểu đồ thể đơng máu 12 Hình Vị trí gen mã hóa yếu tố đông máu IX nhiễm sắc thể 14 X Hình Cấu trúc gen FIX mã hóa cho yếu tố đơng máu IX 15 Hình Cấu trúc phân tử mRNA phiên mã từ gen FIX ... Ngoài ra, hệ gen λDE3 có gen marker khác lacI, ind1, sam7, nin5 Tuy nhiên, gen marker không ảnh hưởng tới biểu gen ngoại lai E coli BL21(DE3) vật chủ có nhiều điểm thuận lợi cho việc biểu gen DNA...

Ngày tải lên: 04/11/2015, 05:17

88 800 0
Nghiên Cứu Tách Dòng Và Biểu Hiện Gen Mã Hóa Kháng Nguyên Bề Mặt Của Tiên Mao Trùng (Trypanosomma Evansi) Lưu Hành Trên Trâu Ở Tỉnh Tuyên Quang

Nghiên Cứu Tách Dòng Và Biểu Hiện Gen Mã Hóa Kháng Nguyên Bề Mặt Của Tiên Mao Trùng (Trypanosomma Evansi) Lưu Hành Trên Trâu Ở Tỉnh Tuyên Quang

... →ARN →Protein protein sản phẩm biểu gene Trong kĩ thuật di truyền, biểu gene tượng protein gene ngoại lai tổng hợp tế bào chủ 28 Hiện nay, có hệ sau hay sử dụng biểu gene Escherichia coli, Bacillus ... thuộc vào nhận biết thể vật chủ Hiện có phổ rộng thể biểu gene ngoại lai (cả Prokaryot Eukaryot) đa số sản phẩm sản xuất công nghệ ADN tái tổ hợp tổng hợp E coli 2.3.2 Vector biểu Vector biểu gene ... 2.2 Tách dòng gene 2.2.1 Khái niệm phương pháp Tách dòng gene gọi với nhiều tên khác nhau: tạo dòng gene, nhân dòng gene, phân lập gene… Tách dòng gene tập hợp kỹ thuật nhằm đưa gene, đoạn ADN...

Ngày tải lên: 03/06/2016, 18:47

72 423 0
Phân lập và biểu hiện gen mã hóa protein vỏ p10 của virus gây bệnh lúa lùn sọc đen ở việt nam

Phân lập và biểu hiện gen mã hóa protein vỏ p10 của virus gây bệnh lúa lùn sọc đen ở việt nam

... HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - PHẠM THỊ VÂN PHÂN LẬP BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA PROTEIN VỎ P10 CỦA VIRUS GÂY BỆNH LÚA LÙN SỌC ĐEN VIỆT NAM Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60420114 ... ĐOẠN GEN P10 PROTEIN VỎ NGOÀI SRBSDV Error! Bookmark not defined 1.4 CÁC PHƢƠNG PHÁP CHẨN ĐOÁN PHÁT HIỆN SRBSDV Error! Bookmark not defined 1.5 KHÁNG THỂ ĐA DÒNG ... plasmid tái tổ hợp pGEMT mang đoạn gen P10 Error! Bookmark not defined 3.1.5 Giải trình tự đoạn gen P10 chủng SRBSDV Error! Bookmark not defined 3.2 BIỂU HIỆN TINH SẠCH PROTEIN TÁI TỔ HỢP...

Ngày tải lên: 08/07/2016, 22:11

18 452 0
Nghiên cứu tạo đột biến khử độc và biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên tái tổ hợp staphylococcal enterotoxin b (seb) phục vụ cho việc chế tạo kít phát hiện tụ cầu vàng trong thực phẩm

Nghiên cứu tạo đột biến khử độc và biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên tái tổ hợp staphylococcal enterotoxin b (seb) phục vụ cho việc chế tạo kít phát hiện tụ cầu vàng trong thực phẩm

... cắt so le gen pET21a+ - Chuẩn bị vector biểu pET21a+ Muốn gen đích biểu thành protein cần thiết kế gen vào vector mang cấu trúc cần thiết cho trình phiên mã dịch mã Các vector gọi vector biểu Các ... 28,336 KDa dạng hoạt động protein SEB có cấu trúc gồm: cấu trúc xoắn α, 14 phiến gấp nếp β cầu nối disulphit nối cystein vị trí 120 140 [46] Theo Gleason cs (2009), protein SEB có vùng cấu trúc đặc ... le gen seb 32 3.2 Kết thiết kế vector biểu pET21a+ mang gen seb đột biến 34 3.2.1 Xử lý enzym hạn chế tạo đầu cắt so le pET21a+ 34 3.2.2 Phản ứng gắn đoạn gen đích seb vào vector biểu...

Ngày tải lên: 19/03/2017, 15:23

67 329 0
Nghiên Cứu Tách Dòng Và Biểu Hiện Gen Mã Hóa Kháng Nguyên Bề Mặt Của Tiên Mao Trùng (Trypanosoma Evansi) Lưu Hành Ở Việt Nam

Nghiên Cứu Tách Dòng Và Biểu Hiện Gen Mã Hóa Kháng Nguyên Bề Mặt Của Tiên Mao Trùng (Trypanosoma Evansi) Lưu Hành Ở Việt Nam

... 126 27 1.3 VECTOR BIỂU HIỆN 1.3.1 Khái niệm Vector biểu gen vector tách dòng mang promoter mạnh, cho phép biểu đồng thời gen thị gen tách dòng tạo nên protein lai Một vector biểu gen gồm thành phần ... cản trở hoạt hoá tự nhiên điểm biểu gen Cách thứ hai là, tập hợp lại đoạn ADN khác để tái tổ hợp gen, mà việc tái tổ hợp cho phép thay hoàn toàn phần gen; việc thay diễn dựa vào chuyển đổi gen ... suốt mảnh hình thoi, cuối thân nhọn Nhìn chung, cấu trúc T evansi giống nhƣ cấu trúc loài tiên mao trùng khác thuộc họ Trypanosomatidae Cấu trúc từ vào đƣợc chia thành phần chính: - Vỏ: ngồi lớp...

Ngày tải lên: 14/05/2017, 02:00

78 381 0
DSpace at VNU: CẤU TRÚC NGHĨA BIỂU HIỆN CỦA CÂU VỚI NHÓM VỊ TỪ TRAO TẶNG (TRONG TIẾNG ANH VÀ TIẾNG VIỆT) Tác giả: Lâm Quang Đông Nhà xuất bản Khoa học Xã hội, Hà Nội, 2008, 264 trang

DSpace at VNU: CẤU TRÚC NGHĨA BIỂU HIỆN CỦA CÂU VỚI NHÓM VỊ TỪ TRAO TẶNG (TRONG TIẾNG ANH VÀ TIẾNG VIỆT) Tác giả: Lâm Quang Đông Nhà xuất bản Khoa học Xã hội, Hà Nội, 2008, 264 trang

... Như vậy, từ cấu trúc nghĩa câu, ta nhìn xa tới cấu trúc nghĩa văn Có thể nói, việc quan tâm nghiên cứu nghĩa câu hướng vào chiều sâu ngôn ngữ ngôn ngữ học thời kỳ hậu cấu trúc luận Việt Nam, ... nghĩa câu không nằm chương mở đầu mà tác giả diễn giải “tích hợp” cách thuyết phục hiệu chương 230 trang sách đây, độc giả thấy rõ mơ hình tiêu biểu cấu trúc nghĩa biểu câu với nhóm động từ trao/ ... 1995), sách Lâm Quang Đông với tiêu đề Cấu trúc nghĩa biểu câu với nhóm vị từ trao/tặng (trong tiếng Anh tiếng Việt) tập trung nghiên cứu cấu trúc nghĩa biểu câu với loại vị từ có tính điển hình...

Ngày tải lên: 14/12/2017, 21:28

2 206 0
Tạo dòng và biểu hiện gen chitinase từ nấm trichoderma

Tạo dòng và biểu hiện gen chitinase từ nấm trichoderma

... [67] 1.5 TẠO DÒNG BIỂU HIỆN GEN TRONG E coli Theo Baneyx (1999), E coli vật chủ sử dụng rộng rãi để biểu sản phẩm protein ngoại lai từ sinh vật khác [17] Hiện việc tạo dòng biểu gen E coli nhiều ... DÒNG BIỂU HIỆN GEN TRONG NẤM MEN Trong việc tạo dòng biểu gen vào đối tượng khác vật chủ yếu tố định đến thành công hiệu suất trình Bên cạnh ưu điểm E coli vòng đời ngắn, khả sinh trưởng phát ... trình tự gen chitinase phân lập đƣợc gen ech42 Dấu * thể giống trình tự gen 3.6 Biến nạp gen chitinase vào nấm men Đoạn gen chitinase chèn vào vùng tạo dòng vector pYES2 hình 3.7 Sau biến nạp vào...

Ngày tải lên: 29/10/2012, 15:17

59 1,4K 25
Phân lập và biểu hiện gen fljB mã hoá kháng nguyên roi H: 1,2 của Salmonella typhimurium trong Escherichia coli BL21

Phân lập và biểu hiện gen fljB mã hoá kháng nguyên roi H: 1,2 của Salmonella typhimurium trong Escherichia coli BL21

... gen quan tâm 1.4.1.1 Phân lập gen từ ngân hàng gen Đặc trưng cấu trúc hệ gen sinh vật nhân sơ gồm gen mã hoá liên tục khơng phân đoạn, sinh vật nhân chuẩn gen cấu trúc vùng mã hoá (exon) nằm xen ... Nếu gen phân lập gen điều khiển sử biểu trình tạo ngân hàng gen tiến hành tương tự sinh vật nhân sơ, gen quan tâm gen cấu trúc phải thơng qua mARN để tạo ngân hàng cDNA Sau có ngân hàng gen, ... BL2.1 BIỂU HIỆN GEN fljB BIỂU HIỆN GEN fljB Hình 3.1 Sơ đồ tiến hành thí nghiệm phân lập, biểu gen fliB mã hoá kháng nguyên roi H: 1, S typhimurium E coli BL21 44 3.1 Tách chiết ADN hệ gen S...

Ngày tải lên: 07/04/2013, 23:51

75 719 3
w