TRẦN THỊ NGỌC BÍCH bước đầu bào CHẾ PELLET BERBERIN BAO TAN tại đại TRÀNG KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ NGỌC BÍCH BƯỚC ĐẦU BÀO CHẾ PELLET BERBERIN BAO TAN TẠI ĐẠI TRÀNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2020 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ NGỌC BÍCH MÃ SINH VIÊN: 1501045 BƯỚC ĐẦU BÀO CHẾ PELLET BERBERIN BAO TAN TẠI ĐẠI TRÀNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: ThS Lê Ngọc Khánh Nơi thực hiện: Bộ môn Công Nghiệp Dược HÀ NỘI - 2020 Lời cảm ơn Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS TS Đàm Thanh Xuân, ThS Lê Ngọc Khánh, tận tâm hướng dẫn, động viên giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu thực khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PGS TS Nguyễn Thị Thanh Duyên dành quan tâm đưa góp ý trình thực nghiên cứu Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến DS Phạm Văn Hùng, người anh đồng hành em trình nghiên cứu, ln tận tình bảo đưa lời khun, giúp đỡ em hồn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến toàn thể thầy cô giáo, anh chị kỹ thuật viên Bộ môn Công nghiệp Dược, Viện Công nghệ Dược phẩm quốc gia - Trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện để em hồn thành khóa luận Em xin cảm ơn thầy cô giáo, cán viên chức trường Đại học Dược Hà Nội dạy dỗ, bảo, giúp đỡ em năm học qua Em xin gửi lời cảm ơn tới thành viên phịng thí nghiệm Bào chế cơng nghiệp, người bạn đồng hành, gắn bó, động viên, chia sẻ em suốt khoảng thời gian thực nghiên cứu Cuối em xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè quan tâm, động viên, giúp đỡ em trình học tập Do thời gian làm thực nghiệm kiến thức thân cịn có hạn, khóa luận cịn nhiều thiếu sót, em mong nhận góp ý thầy bạn để khóa luận hồn thiện Hà Nội, tháng năm 2020 Sinh viên Trần Thị Ngọc Bích MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đại cương berberin clorid 1.1.1 Công thức hóa học 1.1.2 Nguồn gốc 1.1.3 Tính chất lý hóa 1.1.4 Tác dụng dược lý 1.1.5 Đặc điểm dược động học 1.1.6 Một số chế phẩm thị trường 1.2 Đại cương pellet 1.2.1 Khái niệm 1.2.2 Thành phần pellet 1.2.3 Các phương pháp bào chế pellet 1.2.4 Các tiêu đánh giá chất lượng pellet 1.2.5 Một số nghiên cứu bào chế pellet berberin clorid 1.3 Thuốc giải phóng đại tràng 10 1.3.1 Đặc điểm sinh lý đại tràng liên quan đến dạng thuốc 10 1.3.2 Các hệ giải phóng thuốc đại tràng 11 1.3.3 Một số nghiên cứu dạng bào chế giải phóng đại tràng 12 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .15 2.1 Nguyên liệu, thiết bị 15 2.1.1 Nguyên liệu 15 2.1.2 Thiết bị 15 2.2 Nội dung nghiên cứu 16 2.3 Phương pháp nghiên cứu 16 2.3.1 Phương pháp bào chế 16 2.3.2 Phương pháp đánh giá 19 2.3.3 Phương pháp xử lý số liệu 22 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 23 3.1 Xây dựng thẩm định phương pháp quang phổ hấp thụ UV-VIS để định lượng berberin clorid 23 3.1.1 Tính đặc hiệu 23 3.1.2 Khoảng tuyến tính 23 3.1.3 Độ 25 3.1.4 Độ lặp lại 25 3.2 Kết bào chế pellet nhân berberin clorid 26 3.2.1 Khảo sát thành phần công thức bào chế pellet berberin clorid 26 3.2.2 Khảo sát số thông số kỹ thuật trình bào chế pellet berberin clorid 29 3.2.3 Chọn điều kiện bào chế pellet berberin clorid đánh giá số tiêu chất lượng pellet nhân 32 3.3 Bước đầu khảo sát ảnh hưởng số yếu tố thuộc màng bao pellet berberin clorid hướng giải phóng đại tràng 35 3.3.1 Lựa chọn thành phần polyme công thức dịch bao 35 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng độ dày màng 36 3.3.3 Đánh giá số tiêu chất lượng pellel berberin clorid sau bao 37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .39 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT BBR Berberin clorid BCS Biopharmaceutics classification system (Hệ thống phân loại sinh dược học) DBP Dibutyl phtalat DC Dược chất DĐVN Dược điển Việt Nam EC Ethylcellulose HPMC Hydroxypropyl methylcellulose HPMCAS Hydroxypropyl methylcellulose acetat succinat HPMCP Hydroxypropyl methylcellulose phthalat kl Khối lượng MCC Microcrystalline cellulose (Cellulose vi tinh thể) PEG Polyethylen glycol RSD Relative standard deviation (Độ lệch chuẩn tương đối) TB Trung bình TEC Triethyl citrat tt Thể tích USP United States Pharmacopeia (Dược điển Mỹ) DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU Bảng 1.1 Một số chế phẩm chứa berberin clorid thị trường Bảng 2.1 Các nguyên liệu sử dụng nghiên cứu 15 Bảng 2.2 Các thiết bị sử dụng đề tài 15 Bảng 2.3 Thành phần công thức bào chế pellet nhân 16 Bảng 2.4 Các thông số kỹ thuật trình bào chế pellet .16 Bảng 2.5 Thành phần công thức dịch bao hướng giải phóng đại tràng 18 Bảng 2.6 Thơng số q trình bao pellet máy bao tầng sôi .18 Bảng 3.1 Kết thẩm định tính đặc hiệu 23 Bảng 3.2 Kết thẩm định độ 25 Bảng 3.3 Kết thẩm định độ lặp lại 25 Bảng 3.4 Các thông số kỹ thuật sử dụng khảo sát thành phần công thức bào chế pellet nhân 26 Bảng 3.5 Các công thức bào chế pellet với tỷ lệ tá dược độn thay đổi 27 Bảng 3.6 Đặc điểm q trình bào chế tính chất pellet tạo thành thay đổi tỷ lệ tá dược độn 27 Bảng 3.7 Đặc điểm q trình bào chế tính chất pellet tạo thành thay đổi nồng độ tá dược dính 27 Bảng 3.8 Đặc điểm trình bào chế tính chất pellet tạo thành thay đổi lượng nước tinh khiết 28 Bảng 3.9 Thành phần công thức CT5.3 (Cho mẻ 50 g bột kép) 29 Bảng 3.10 Đặc điểm trình bào chế pellet thay đổi thời gian ủ 29 Bảng 3.11 Đặc điểm q trình bào chế tính chất pellet tạo thành thay đổi tốc độ đùn 30 Bảng 3.12 Đặc điểm trình bào chế tính chất pellet tạo thành thay đổi tốc độ tạo cầu .31 Bảng 3.13 Ảnh hưởng thời gian vo tạo cầu lên chất lượng pellet 31 Bảng 3.14 Bảng phân bố kích thước pellet nhân 33 Bảng 3.15 Kết đánh giá số tiêu chất lượng pellet nhân berberin clorid 33 Bảng 3.16 Độ hòa tan dược chất từ pellet nhân (TB ± SD), (n = 3) .34 Bảng 3.17 Một số tiêu chất lượng đề xuất cho pellet nhân 34 Bảng 3.18 Các công thức khảo sát thành phần polyme .35 Bảng 3.19 Các công thức với độ dày màng bao thay đổi 36 Bảng 3.20 Kết đánh giá số tiêu chất lượng pellet sau bao 38 DANH MỤC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo berberin clorid .2 Hình 2.1 Sơ đồ bào chế pellet berberin clorid theo phương pháp đùn - tạo cầu 17 Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn mối tương quan mật độ quang nồng độ berberin clorid môi trường pH 1,2 (a), đệm phosphat pH 7,4 (b) pH 6,8 (c) 24 Hình 3.2 Hình ảnh pellet nhân CT7 kính soi (độ phóng đại x45) 32 Hình 3.3 Đồ thị giải phóng dược chất từ pellet nhân berberin clorid 33 Hình 3.4 Đồ thị giải phóng dược chất từ pellet bao cơng thức B1, B2, B3 35 Hình 3.5 Đồ thị giải phóng dược chất từ pellet bao cơng thức B3, B4, B5 37 Hình 3.6 Hình ảnh pellet sau bao (a) pellet sau bao cắt ngang (b) cơng thức bao B4 kính soi (độ phóng đại x45) .38 ĐẶT VẤN ĐỀ Berberin clorid (BBR) hoạt chất kháng khuẩn có nguồn gốc tự nhiên dùng để điều trị bệnh tiêu chảy, lỵ, viêm đường tiêu hóa phẩy khuẩn tả, amip đường ruột, E coli [5] Đặc biệt, với tác dụng chống viêm, chống oxy hóa, BBR chứng minh có hiệu bệnh viêm đại tràng mạn tính [33] ung thư đại tràng [32] Các thuốc điều trị viêm đại tràng dạng bào chế quy ước thường gây tác dụng toàn thân lượng nhỏ thuốc tới đại tràng Do đó, để đạt nồng độ thuốc điều trị đại tràng cần phải đưa liều lượng thuốc lớn thời gian dài, điều sẽ gây tác dụng không mong muốn Nhằm khắc phục nhược điểm nâng cao hiệu điều trị, dạng thuốc giải phóng đại tràng dạng bào chế quan tâm nghiên cứu Pellet bào chế phương pháp đùn tạo cầu có kích thước đồng đều, độ cầu độ trơn chảy tốt, hiệu suất tạo pellet cao, tạo điều kiện thuận lợi cho bước bào chế (ví dụ bao pellet) Hiện nay, dạng thuốc pellet giải phóng đại tràng nhà bào chế quan tâm nghiên cứu có ưu điểm lớn: tăng nồng độ dược chất giải phóng đích, từ tăng hiệu điều trị giảm tác dụng không mong muốn; thuốc phân bố thời gian lưu ổn định đường tiêu hóa, giảm tượng dồn liều, bùng liều… [3] Tại Việt Nam chưa có cơng bố khoa học thức nghiên cứu bào chế pellet BBR điều trị bệnh đại tràng Do vậy, đề tài “Bước đầu bào chế pellet berberin bao tan đại tràng” thực với mục tiêu sau: Bào chế pellet BBR theo phương pháp đùn - tạo cầu Bước đầu khảo sát ảnh hưởng số yếu tố thuộc màng bao pellet BBR hướng giải phóng đại tràng 1 CHƯƠNG TỔNG QUANNNNNNNNNN 1.1 Đại cương berberin clorid 1.1.1 Cơng thức hóa học - Cơng thức cấu tạo: Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo berberin clorid - Tên khoa học: 9,10-dimethoxy-5,6-dihydro[1,3]dioxolo[4,5-g]isoquino[3,2-a] isoquinolin-7-ium clorid dihydrat - Công thức phân tử: C20H18NO4Cl.2H2O - Dạng dược dụng thường dùng muối clorid sulfat berberin [1] 1.1.2 Nguồn gốc Berberin thường có rễ, thân rễ, thân, vỏ thuộc chi Berberis, Hydrastis candensis, Coptis với hàm lượng khoảng 1,5 – 3,0% chiếm 82% so với alkaloid toàn phần [5] 1.1.3 Tính chất lý hóa Tinh thể hay bột kết tinh màu vàng, khơng mùi, vị đắng Tan nước nóng, khó tan ethanol nước, khó tan cloroform, không tan ether [1] Độ tan nước 25oC 37oC 2,15±0,12 mg/mL 3,47±0,16 mg/mL [10] Độ tan nước phụ thuộc vào pH, độ tan cao đệm phosphat pH ~ (3,95±0,15 mg/mL 37oC) [10] BBR bền dung dịch pH từ 1,2 - 9,0 nhiệt độ 25 40oC với 5% dược chất bị phân hủy sau tháng [10] Theo Hệ thống phân loại sinh dược học (BCS), BBR phân loại vào nhóm III [27] nhóm IV [20] Bảng 3.12 Đặc điểm q trình bào chế tính chất pellet tạo thành thay đổi tốc độ tạo cầu Yếu tố đánh giá Tốc độ vo (vịng/phút) Q trình vo tạo cầu CT11 CT7 CT12 250 300 400 Bình thường Đặc điểm pellet Pellet hình trứng, nhẵn Hiệu suất tạo pellet (%) 72,2 Hạt bị văng mạnh lên thành thiết bị Độ cầu giảm, Pellet cầu, đồng đều, đồng đều, khơng nhẵn nhẵn Bình thường 73,7 73,1 Ghi chú: Thành phần cơng thức bào chế trình bày bảng 3.9, thông số kỹ thuật gồm: tổng thời gian ủ 120 phút, tốc độ đùn 30 vòng/phút, thời gian tạo cầu 10 phút Tốc độ vo tạo cầu ảnh hưởng tới độ cầu, tính chất bề mặt độ xốp pellet Khi tốc độ vo cao (công thức CT12), hạt bị văng mạnh, va đập với thành máy, độ cầu pellet giảm bề mặt không nhẵn Khi tốc độ vo thấp (công thức CT11), hạt sẽ khó cầu, thường hình trứng Từ kết khảo sát, thơng số tốc độ vo 300 vịng/phút (cơng thức CT7) lựa chọn 3.2.2.4 Khảo sát thời gian vo tạo cầu Công thức CT7 sử dụng để khảo sát ảnh hưởng thời gian vo tạo cầu đến chất lượng pellet Kết khảo sát thời gian tạo cầu thể bảng 3.13 Bảng 3.13 Ảnh hưởng thời gian vo tạo cầu lên chất lượng pellet Hình thức pellet Thời gian tạo cầu phút Sợi hình trụ dài chưa cắt phút Kích thước pellet chưa đồng đều, hình trứng phút Pellet gần cầu, đồng 10 phút Pellet cầu, đồng 15 phút Pellet cầu, đồng Thời gian vo lâu pellet sẽ cầu Sau khảo sát thấy thời gian vo tối thiểu 10 phút cho pellet cầu có độ cao 31 3.2.3 Chọn điều kiện bào chế pellet berberin clorid đánh giá số tiêu chất lượng pellet nhân 3.2.3.1 Chọn điều kiện bào chế pellet berberin clorid Bào chế mẻ pellet với quy mô 100 g bột kép/mẻ với thành phần công thức thông số kỹ thuật sau: Thành phần hỗn hợp bột kép: BBR : 30,0% Avicel PH-101 : 67,5% Talc : 2,5% Tá dược dính: Nước tinh khiết: ủ lần 74 mL, ủ lần hai 26 mL Các thơng số q trình đùn - tạo cầu: Thời gian ủ : Ủ lần 60 phút, ủ lần hai 60 phút Tốc độ đùn : 30 vòng/phút Tốc độ vo : 300 vòng/phút Thời gian vo : 10 phút Pellet bào chế xong, sấy nhiệt độ 55 - 60oC đến độ ẩm 3,00%, rây lựa chọn kích thước hạt từ 750 - 1200 µm 3.2.3.2 Đánh giá số tiêu chất lượng pellet berberin clorid nhân Pellet nhân BBR đánh giá số tiêu chất lượng theo mục 2.3.2 Kết thể hình 3.2, bảng 3.14 3.15 Hình 3.2 Hình ảnh pellet nhân CT7 kính soi (độ phóng đại x45) 32 Bảng 3.14 Bảng phân bố kích thước pellet nhân Khoảng kích thước (µm) Tỷ lệ (%) Dưới 750 750 - 1000 1000 - 1200 Trên 1200 5,53 ± 2,39 94,09 ± 2,78 0,08 ± 0,02 0,30 ± 0,37 Bảng 3.15 Kết quả đánh giá số tiêu chất lượng pellet nhân berberin clorid Chỉ tiêu STT Kết Màu vàng, cầu đều, nhẵn, kích thước từ 750 – 1200 µm Hình thức Mất khối lượng làm khơ (TB ± SD, n = 3) (%) Khối lượng riêng biểu kiến (TB ± SD, n = 3) (g/mL) Độ mài mòn (TB ± SD, n = 3) (%) Hàm lượng BBR pellet (TB ± SD, n = 3) (%) Hiệu suất tạo pellet (TB ± SD, n = 3) (%) 2,17 ± 0,07 0,919 ± 0,028 0,327 ± 0,011 31,081 ± 0,963 70,27 ± 1,82 Pellet bào chế có màu vàng, hình dạng cầu, nhẵn (Hình 3.2) Pellet tương đối đồng kích thước, chủ yếu nằm khoảng kích thước từ 750 đến 1000 µm (Bảng 3.14) Hàm lượng BBR ổn định (31,081 ± 0,963%), hiệu suất tạo pellet tương đối cao (70,27 ± 1,82%) Các tiêu chất lượng khác độ ẩm, độ mài mòn, khối lượng riêng biểu kiến tương đối ổn định mẻ bào chế khác Kết thử hòa tan pellet nhân BBR theo phương phác mục 2.3.2.4 thể đồ thị hình 3.3 bảng 3.16 100,00 90,00 % DC giải phóng 80,00 70,00 60,00 50,00 40,00 30,00 20,00 10,00 0,00 Thời gian (giờ) Hình 3.3 Đồ thị giải phóng dược chất từ pellet nhân berberin clorid 33 Bảng 3.16 Độ hòa tan dược chất từ pellet nhân (TB ± SD), (n = 3) Thời gian (giờ) % BBR giải phóng 9,24± 1,03 12,71± 53,10± 68,15± 81,29± 87,98± 90,79± 91,60± 0,84 1,01 0,38 1,04 0,77 0,77 0,88 Kết cho thấy, sau pH 1,2, pellet giải phóng dược chất chậm (12,71± 0,84%) dược chất BBR tan mơi trường pH 1,2 [10] Pellet giải phóng ạt dược chất chuyển sang môi trường đệm phosphat pH 7,4 (trên 80,00% sau giờ) Các môi trường đệm pH 6,8, tốc độ giải phóng dược chất chậm dần lượng dược chất cịn lại pellet quãng đường khuếch tán dược chất từ lõi pellet dài Sau tổng thời gian giờ, pellet giải phóng 90% dược chất Điều giải thích tỷ lệ Avicel lớn công thức bào chế pellet, tạo dạng cốt trơ khuếch tán, kéo dài thời gian giải phóng DC Khi so sánh pellet BBR bào chế theo phương pháp đùn tạo cầu đề tài với vi nang BBR bào chế phương pháp nhỏ giọt đông tụ của tác giả Trần Thị Kim Anh (2019) [2], pellet thu cầu, đều, hiệu suất tạo pellet cao hàm lượng dược chất pellet cao hẳn (đạt 31,081±0,009% so với 3,467±0,220%), tạo điều kiện thuận lợi để bao màng hướng giải phóng đại tràng Theo kết thử hòa tan pellet nhân BBR bảng 3.16, dược chất giải phóng 80,00% sau môi trường pH 1,2 pH 7,4 Do vậy, để pellet giải phóng dược chất đại tràng cần tiến hành bao màng để hạn chế dược chất giải phóng mơi trường pH 1,2 pH 7,4 sau lượng BBR giải phóng pH 6,8 mô dịch đại tràng cao Từ kết trên, tiêu chuẩn pellet BBR để bao màng hướng giải phóng DC đại tràng đề xuất sau (bảng 3.17): Bảng 3.17 Một số tiêu chất lượng đề xuất cho pellet nhân STT Chỉ tiêu Hình thức Kích thước (µm) Mất khối lượng làm khơ (%) Khối lượng riêng biểu kiến (g/mL) Độ mài mòn (%) Hàm lượng BBR pellet (%) Độ hòa tan (%) 34 Tiêu chuẩn Màu vàng, cầu, đồng đều, nhẵn 750 - 1200 ≤ 3,00 0,84 - 1,00 ≤ 0,5 28,0 - 34,0 > 80,00% sau môi trường pH 1,2 7,4 3.3 Bước đầu khảo sát ảnh hưởng số yếu tố thuộc màng bao pellet berberin clorid hướng giải phóng đại tràng 3.3.1 Lựa chọn thành phần polyme công thức dịch bao Pellet BBR nhân sau bào chế đạt tiêu chất lượng đề xuất bao màng hướng giải phóng đại tràng Thơng qua tham khảo tài liệu [2], [25], tiến hành khảo sát thành phần polyme công thức dịch bao cho mẻ 50 g pellet nhân BBR Các công thức khảo sát trình bày bảng 3.18 Pellet bao theo phương pháp mục 2.3.1.2 sau bao được đánh giá số tiêu chất lượng theo phương pháp mục 2.3.2 Bảng 3.18 Các công thức khảo sát thành phần polyme Công thức B1 B2 B3 Eudragit L100 (g) 10,8 6,0 - Eudragit S100 (g) - - 6,0 EC N7 (g) 7,2 12,0 12,0 Ghi chú: Các công thức thêm thành phần khác giống gồm: 3,6 g PEG 6000, 3,6 g DBP, 3,6 g talc, 300 mL ethanol 80% Độ dày màng bao dự kiến 30% Pellet sau bao thử hòa tan theo phương pháp mục 2.3.2.4 thu kết hình 3.4 100,00 90,00 % DC giải phóng 80,00 70,00 60,00 50,00 40,00 30,00 20,00 10,00 0,00 Thời gian (giờ) B1 B2 10 11 12 B3 Hình 3.4 Đồ thị giải phóng dược chất từ pellet bao công thức B1, B2, B3 35 Kết cho thấy, với độ dày màng bao 30%, công thức bao cho khả bảo vệ pellet môi trường pH 1,2 mô dịch dày (dưới 1% dược chất giải phóng) Trong hai cơng thức bao B1, B2 (tỷ lệ Eudragit L100:EC 3:2 1:2) sử dụng Eudragit L100, khả kiểm sốt giải phóng dược chất khơng có khác đáng kể thay đổi tỷ lệ Eudragit L100 EC N7 Dược chất pellet bị giải phóng nhanh sau chuyển sang môi trường đệm phosphat pH 7,4 (lượng dược chất giải phóng từ pellet bao cơng thức B1, B2 53,46 52,79% sau giờ) Công thức bao B3 sử dụng Eudragit S100 (tỷ lệ Eudragit S100:EC 1:2) cho khả kiểm sốt giải phóng tốt (sau có 5,50% dược chất giải phóng) Kết giải thích mơi trường đệm phosphat pH 7,4, tốc độ hòa tan Eudragit L100 nhanh Eudragit S100 nên màng bao sử dụng Eudragit S100 cho khả kiểm sốt giải phóng tốt Tuy nhiên, sau 12 giờ, lượng dược chất giải phóng cịn thấp, đạt 44,80% Do vậy, cơng thức bao B3 sử dụng để khảo sát tiếp độ dày màng bao 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng độ dày màng Tiến hành bao pellet với thành phần dịch bao công thức B3 thay đổi độ dày màng bao thể bảng 3.19 Bảng 3.19 Các công thức với độ dày màng bao thay đổi STT Tên nguyên liệu B3 Eudragit S100 6,0 g EC N7 12,0 g PEG 6000 3,6 g DBP 3,6 g Talc 3,6 g Ethanol 80% Độ dày màng bao thu (%) B4 B5 Các thành phần giống công thức B3, lượng dùng 2/3 Các thành phần giống công thức B3, lượng dùng 1/2 22,2 15,9 300 mL 32,0 Pellet sau bao thử hòa tan theo phương pháp mục 2.3.2.4 thu kết hình 3.5 36 % DC giải phóng 100,00 90,00 80,00 70,00 60,00 50,00 40,00 30,00 20,00 10,00 0,00 Thời gian (giờ) B3 B4 10 11 12 B5 Hình 3.5 Đồ thị giải phóng dược chất từ pellet bao công thức B3, B4, B5 Từ đồ thị hình 3.5 ta thấy, khả kiểm sốt giải phóng dược chất từ pellet tỷ lệ thuận với độ dày màng bao Sau giờ, pellet bao công thức B3, B4, B5 giải phóng dược chất 5,50, 26,74 45,91% Sau 12 thử hòa tan, pellet bao cơng thức B4, B5 giải phóng dược chất 90,00% pellet bao công thức B3 giải phóng 44,80% dược chất Do vậy, đề tài lựa chọn công thức bao B4 (độ dày màng bao 22,2%) với khả giải phóng DC sau: sau môi trường pH 1,2 pH 7,4 giải phóng 26,74% DC, mơi trường pH 6,8, pellet giải phóng 60% DC Nghiên cứu vi nang berberin clorid hướng giải phóng đại tràng Trần Thị Kim Anh (2019) [2] sử dụng polyme màng bao gồm Eudragit L100, EC, chitosan cho kết thử độ hòa tan sau: vi nang bảo vệ môi trường dày pH 1,2 (giải phóng 2,56% DC) Tại mơi trường pH 7,4 mô dịch ruột non pH 6,8 mơ dịch đại tràng, pellet giải phóng 18,54 74,45% DC Màng bao đề tài có khả bảo vệ tốt môi trường pH 1,2 Trong mơi trường pH 7,4, pellet giải phóng dược chất nhiều (26,74% so với 18,54%) môi trường pH 6,8, DC giải phóng kéo dài 3.3.3 Đánh giá số tiêu chất lượng pellel berberin clorid sau bao Pellet BBR sau bao đánh giá số tiêu chất lượng theo mục 2.3.2 Kết thể hình 3.6 bảng 3.20 37 a) b) Hình 3.6 Hình ảnh pellet sau bao (a) pellet sau bao cắt ngang (b) cơng thức bao B4 kính soi (độ phóng đại x45) Bảng 3.20 Kết quả đánh giá số tiêu chất lượng pellet sau bao Chỉ tiêu STT Kết Cầu, nhẵn bóng, lớp màng bao đồng nhất, màu vàng nhạt Hình thức Mất khối lượng làm khô (TB ± SD, n = 3) (%) Khối lượng riêng biểu kiến (TB ± SD, n = 3) (g/mL) Phân bố kích thước (TB ± SD, n = 3) (%) 38 2,02 ± 0,07 0,840 ± 0,006 Trên 1200 µm: 2,13 ± 0,89 1000 – 1200 µm: 40,98 ± 1,72 750 – 1000 µm: 56,89 ± 1,07 Dưới 750 µm: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Sau thời gian thực nghiệm, khóa luận bước đầu đạt số kết sau: Đã bào chế pellet berberin clorid theo phương pháp đùn tạo cầu, mẻ pellet 100 g với thành phần công thức thông số kỹ thuật sau: Thành phần hỗn hợp bột kép: BBR : 30,0% Avicel PH 101 : 67,5% Talc : 2,5% Tá dược dính: Nước tinh khiết: ủ lần 74 mL, ủ lần hai 26 mL Các thông số kỹ thuật trình đùn - tạo cầu: Thời gian ủ : Ủ lần 60 phút, ủ lần hai 60 phút Tốc độ đùn : 30 vòng/phút Tốc độ vo : 300 vòng/phút Thời gian vo : 10 phút Đã đề xuất tiêu chuẩn chất lượng cho pellet nhân bào chế với tiêu: hình thức, kích thước, độ ẩm, độ mài mòn, khối lượng riêng biểu kiến, hàm lượng dược chất, độ hòa tan Đã khảo sát ảnh hưởng số yếu tố thuộc màng bao pellet hướng giải phóng dược chất đại tràng Thành phần công thức màng bao bước đầu lựa chọn sau: Eudragit S100:EC (tỷ lệ 1:2) : 6,0 g PEG 6000 : 1,2 g DBP : 1,2 g Talc : 1,2 g Ethanol 80% : 100 mL Kiến nghị Tiếp tục khảo sát hồn thiện cơng thức màng bao pellet hướng giải phóng đại tràng Tiến hành thử nghiệm giải phóng in vivo để đánh giá xác khả giải phóng dược chất đại tràng pellet 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ y tế (2018), Dược điển Việt Nam V, NXB Y học, 1, tr.142-144, chuyên luận berberin clorid Trần Thị Kim Anh (2019), Nghiên cứu bào chế vi nang Berberin clorid hướng giải phóng đại tràng, Luận văn thạc sĩ dược học Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Bộ môn bào chế (2005), Một số chuyên đề bào chế đại, phần kĩ thuật bào chế pellet, Nhà xuất Y học, tr 56-123 Nguyễn Thị Thanh Duyên (2009), Nghiên cứu bào chế viên nang Propranolol tác dụng kéo dài, Luận án tiến sĩ dược học, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, tr 189-191 Lê Nguyễn Thành Nam (2018), Nghiên cứu bào chế viên nén berberin clorid giải phóng đại tràng với tá dược pectin kết hợp muối calci, Luận văn thạc sĩ dược học, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Nguyễn Thị Hồng Thúy (2016), Nghiên cứu bào chế viên nén berberin clorid giải phóng đại tràng phương pháp bao bồi từ bột pectin, Luận văn thạc sĩ dược học, Trường Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Tiếng Anh Akhgari A et al (2005), "Statistical optimization of indomethacin pellets coated with pH-dependent methacrylic polymers for possible colonic drug delivery", International journal of pharmaceutics, 305(1-2), pp 22-30 Amidon S et al (2015), "Colon-targeted oral drug delivery systems: design trends and approaches", Aaps Pharmscitech, 16(4), pp 731-741 10 Battu S K et al (2010), "Physicochemical characterization of berberine chloride: a perspective in the development of a solution dosage form for oral delivery", Aaps Pharmscitech, 11(3), pp 1466-1475 11 Birdsall T C (1997), "Berberine: Therapeutic potential of alkaloid found in several medicinal plants", Altern Med Rev., 2, pp 94-103 12 Chang Y (1959), "Effectiveness of berberine in bacillary dysentery", Zhonghua nei ke za zhi, 7, pp 741-743 13 Chourasia M., Jain S (2004), "Polysaccharides for colon targeted drug delivery", Drug Delivery, 11(2), pp 129-148 14 Chun Y et al (1979), "A biochemical study on the hypotensive effect of berberine in rats", General Pharmacology: The Vascular System, 10(3), pp 177182 15 Evans D et al (1988), "Measurement of gastrointestinal pH profiles in normal ambulant human subjects", Gut, 29(8), pp 1035-1041 16 Gao Y et al (2018), "Production and investigation of sustained berberine pellet drug release system", Advanced Powder Technology, 29(3), pp 682-691 17 Jeong Y.-I et al (2001), "Evaluation of an intestinal pressure-controlled colon delivery capsules prepared by a dipping method", Journal of controlled release, 71(2), pp 175-182 18 Kong W et al (2004), "Berberine is a novel cholesterol-lowering drug working through a unique mechanism distinct from statins", Nature medicine, 10(12), pp 1344-1351 19 Kuo C.-L et al (2004), "The anti-inflammatory potential of berberine in vitro and in vivo", Cancer letters, 203(2), pp 127-137 20 Li G et al (2019), "Preparation and in vitro-in vivo evaluation of intestinal retention pellets of Berberine chloride to enhance hypoglycemic and lipid-lowing efficacy", Asian Journal of Pharmaceutical Sciences, 14(5), pp 559-568 21 Ma J Y et al (2013), "Excretion of berberine and its metabolites in oral administration in rats", Journal of pharmaceutical sciences, 102(11), pp 41814192 22 Mantena S K et al (2006), "Berberine, a natural product, induces G1-phase cell cycle arrest and caspase-3-dependent apoptosis in human prostate carcinoma cells", Molecular cancer therapeutics, 5(2), pp 296-308 23 Maroni A et al (2013), "Film coatings for oral colon delivery", International journal of pharmaceutics, 457(2), pp 372-394 24 Pan G y et al (2002), "The involvement of P‐glycoprotein in berberine absorption", Pharmacology & toxicology, 91(4), pp 193-197 25 Patel M M., Amin A F (2011), "Design and optimization of colon-targeted system of theophylline for chronotherapy of nocturnal asthma", Journal of pharmaceutical sciences, 100(5), pp 1760-1772 26 Peng W.-H et al (2007), "Berberine produces antidepressant-like effects in the forced swim test and in the tail suspension test in mice", Life Sciences, 81(11), pp 933-938 27 Sahibzada M U K et al (2018), "Berberine nanoparticles with enhanced in vitro bioavailability: characterization and antimicrobial activity", Drug design, development and therapy, 12, pp 303 28 Scheline R R (1973), "Metabolism of foreign compounds by gastrointestinal microorganisms", Pharmacol Rev., 25, pp 451-523 29 Szeto S et al (2002), "Characterization of berberine on human cancer cells in culture", Turkish Journal of Medical Sciences, 32(5), pp 363-368 30 Tan X.-S et al (2013), "Tissue distribution of berberine and its metabolites after oral administration in rats", PloS one, 8(10) 31 Tsai P.-L., Tsai T.-H (2002), "Simultaneous determination of berberine in rat blood, liver and bile using microdialysis coupled to high-performance liquid chromatography", Journal of Chromatography A, 961(1), pp 125-130 32 Wang L et al (2012), "Berberine induces caspase-independent cell death in colon tumor cells through activation of apoptosis-inducing factor", PloS one, 7(5) 33 Xu L et al (2020), "A phase I trial of berberine in Chinese with ulcerative colitis", Cancer Prevention Research, 13(1), pp 117-126 34 Yan F et al (2012), "Berberine promotes recovery of colitis and inhibits inflammatory responses in colonic macrophages and epithelial cells in DSStreated mice", American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology, 302(5), pp G504-G514 35 Ye M et al (2009), "Neuropharmacological and pharmacokinetic properties of berberine: a review of recent research", Journal of Pharmacy and Pharmacology, 61(7), pp 831-837 36 Yin J et al (2008), "Efficacy of berberine in patients with type diabetes mellitus", Metabolism, 57(5), pp 712-717 37 Zhou J et al (2009), "Protective effect of berberine on beta cells in streptozotocin-and high-carbohydrate/high-fat diet-induced diabetic rats", European journal of pharmacology, 606(1-3), pp 262-268 38 Kong W.-J et al (2009), "Berberine reduces insulin resistance through protein kinase C–dependent up-regulation of insulin receptor expression", Metabolism, 58(1), pp 109-119 39 Leopold C S., Eikeler D (2000), "Basic coating polymers for the colon-specific drug delivery in inflammatory bowel disease", Drug development and industrial pharmacy, 26(12), pp 1239-1246 Website 40 Cục quản lý dược, Ngân hàng liệu ngành dược https://drugbank.vn/, (truy cập gần lúc 12h00 ngày 22/06/2020) PHỤ LỤC Phụ lục 1: Một số kết xây dựng thẩm định phương pháp định lượng berberin clorid Bảng PL1 Kết quả thẩm định khoảng tuyến tính Nồng độ (µg/mL) Mật độ quang pH 1,2 pH 7,4 pH 6,8 0,121 0,125 0,116 0,241 0,254 0,235 0,353 0,374 0,353 0,454 0,487 0,484 10 0,578 0,615 0,589 Phụ lục 2: Một số kết xây dựng cơng thức pellet berberin clorid hướng giải phóng đại tràng Bảng PL Kết quả thử hòa tan cơng thức bao pellet % giải phóng dược chất (TB±SD), n= Thời gian (giờ) B1 B2 B3 B4 B5 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00 1,09±0,01 0,68±0,11 23,74±1,87 13,69±0,88 0,00±0,00 9,32±1,89 3,43±0,26 37,79±1,72 38,91±1,11 1,17±0,13 28,00±1,03 13,98±1,79 53,46±1,86 52,69±1,83 5,50±0,02 45,91±1,39 26,74±1,90 68,26±1,32 61,33±1,07 11,38±0,21 59,87±1,90 43,57±1,12 79,53±0,79 76,64±0,98 17,23±0,70 71,69±2,17 55,99±2,44 86,45±0,99 84,97±1,45 23,66±0,60 80,31±1,86 64,95±2,40 89,95±1,05 87,93±1.23 30,01±1,00 86,20±1,51 70,65±2,58 10 93,22±1,33 89,64±0,97 34,76±1,02 93,71±0,86 79,06±2,00 11 96,34±1,43 95,75±0,74 39,97±1,11 95,69±0,74 85,48±1,63 12 98,37±0,37 96,97±0,44 44,80±0,03 97,50±0,88 90,59±1,73 Phụ lục 3: Hình ảnh số sản phẩm nghiên cứu a) b) c) Hình PL.3.1 Hình ảnh pellet hình quả tạ (a), pellet hình dùi trống (b), pellet kích thước lớn bị dính chập vo (c) kính soi (độ phóng đại x15) a) b) Hình PL.3.2 Hình ảnh cắt ngang pellet BBR cơng thức bao B3, B4 sau thử hòa tan 12 kính soi (độ phóng đại x45) ... Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ NGỌC BÍCH MÃ SINH VIÊN: 1501045 BƯỚC ĐẦU BÀO CHẾ PELLET BERBERIN BAO TAN TẠI ĐẠI TRÀNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: ThS Lê Ngọc Khánh... [3] Tại Việt Nam chưa có cơng bố khoa học thức nghiên cứu bào chế pellet BBR điều trị bệnh đại tràng Do vậy, đề tài ? ?Bước đầu bào chế pellet berberin bao tan đại tràng? ?? thực với mục tiêu sau: Bào. .. chuyên luận berberin clorid Trần Thị Kim Anh (2019), Nghiên cứu bào chế vi nang Berberin clorid hướng giải phóng đại tràng, Luận văn thạc sĩ dược học Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Bộ môn bào chế (2005),