ôn tập thi cuối kì KTPTTB

. An toàn phòng thí nghiệm, vật dụng, dụng cụ, thức ăn trong phòng thí nghiệm. •Chỉ được làm thí nghiệm khi có sự hiện diện của giáo viên trong phòng thí nghiệm. •Đọc kỹ hướng dẫn và suy nghĩ trước khi làm thí nghiệm.•Luôn luôn nhận biết nơi để các trang thiết bị an toàn. •Phải mặc áo choàng của phòng thí nghiệm. •Phải mang kính bảo hộ. •Phải cột tóc gọn lại. •Làm sạch bàn thí nghiệm trước khi bắt đầu một thí nghiệm. •Không bao giờ được nếm các hóa chất thí nghiệm. Không ăn hoặc uống trong phòng thí nghiệm. •Không được nhìn xuống ống thí nghiệm. •Nếu làm đổ hóa chất hoặc xảy ra tai nạn, báo cho giáo viên ngay lập tức. •Rửa sạch da khi tiếp xúc với hóa chất. •Nếu hóa chất rơi vào mắt, phải đi rửa mắt ngay lập tức.

GỢI Ý KIỂM TRA KỸ THUẬT PHÂN TÍCH & THIẾT BỊ (CS126) - 10-2021 Sinh viên cần ôn tất kiến thức học từ chương trở trước Sau số gợi ý cho ôn tập 1/ An tồn phịng thí nghiệm, vật dụng, dụng cụ, thức ăn phịng thí nghiệm  Chỉ làm thí nghiệm có diện giáo viên phịng thí nghiệm  Đọc kỹ hướng dẫn suy nghĩ trước làm thí nghiệm  Ln nhận biết nơi để trang thiết bị an tồn  Phải mặc áo chồng phịng thí nghiệm  Phải mang kính bảo hộ  Phải cột tóc gọn lại  Làm bàn thí nghiệm trước bắt đầu thí nghiệm  Khơng nếm hóa chất thí nghiệm Khơng ăn uống phịng thí nghiệm  Khơng nhìn xuống ống thí nghiệm  Nếu làm đổ hóa chất xảy tai nạn, báo cho giáo viên  Rửa da tiếp xúc với hóa chất  Nếu hóa chất rơi vào mắt, phải rửa mắt  Bỏ chất thải thí nghiệm vào nơi quy định hướng dẫn  Nếu bạn chưa rõ vấn đề nào, hỏi  Cách bỏ rác thủy tinh.kính vỡ vật nhọn - Ln vứt bỏ kính vỡ thùng thủy tinh thùng vật sắc nhọn, không bỏ rác vào thùng rác chung  Ai chịu trách nhiệm cung cấp thiết bị bảo vệ cá nhân cho người lao động?  Ngưởi sử dụng sức lao động  Luật quy định chung phịng thí nghiệm - thức ăn đồ uống khơng phép phịng thí nghiệm - khơng dùng ống pipet miệng - không phép làm phịng thí nghiệm - mặc thiết bị bảo hộ cá nhân - khơng hút thuốc phịng thí nghiệm - phải trì thói quen vệ sinh tốt  Các dụng cụ thủy tinh xác - Bình định mức, ống đong, Buret, Pipet  Các loại pipet: A, AS, B - A: xác loại khác Giới hạn sai số loại thiết bị đo thể tích thủy tinh quy định DIN EN ISO 9712 - AS: áp dụng với pipet có đầu mở rộng - B: khác biết loại A/AS loại B sai số cho phép loại B gấp đôi so với loại A/AS Pipet loại B làm nhựa  Loại thủy tinh có khả chống vỡ cao nung nóng ảnh hưởng hóa học chứa Borosilicate  Pyrex ( bình đun sơi Borosilicate)  Tiêu chuẩn quốc gia (TCVN 7150:2007 - ISO 835:2007) dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - pipet chia độ  Lưu ý sử dụng bình gas, Ni-tơ lỏng, thiết bị điện, hóa chất, mẫu động vật  Bình gas: - cần đào tạo thức để sử dụng giảm thiếu số lượng phịng thí nghiệm - lưu trữ bên ngồi - bình gas nặng gây thiệt hại quan trọng chúng rơi - cần xích sử dụng - di chuyển với xe đẩy xilanh - sưr dụng đề chỉnh thiết bị điều khiển phù hợp với khí liên quan - xem xét kĩ lưỡng bình gas bị gò rỉ  Ni- tơ lỏng - Khi lỏng lạnh gây bỏng - Khi lỏng bay nhiều chất gây ngạt - Nếu cần mang chất làm lạnh vào thang máy, cần tn thủ nhũng quy trình đặc biệt, khơng báo với người có trách nhiệm - Phải đào tạo đặc biệt để sử dụng chúng  Thiết bị điện - Luôn kiểm tra trực quan thiết bị điện trước sử dụng, tìm kiếm hao mòn khiếm khuyết rõ ràng - Tất thiết bị cầm tay phải có nhãn dán - Không sử dụng thiết bị bị lỗi  Hóa chất - Sổ lưu hóa chất tồn kho - Thủ tục mua hàng - Xử lý cách: + sử dụng nhãn MSDS + khơng nên thử mùi vị hóa chất + axit đổ vào nước không làm ngược lại + ý sử dụng thiết bị thích hợp khuấy đun chất lỏng dễ cháy + tuân theo tiêu chuẩn cơng nghiệp nhãn hiệu hóa chất  Mẫu động – thực vật - Quy trình chăm sóc động vật thực vật bao gơm cho ăn tưới nước - Quy trình vệ sinh lồng ni - Quy trình làm khử trùng phịng địa điểm - Thủ tục vào khỏi khu vực bị nhiễm - Quy trình xử lý động vật thực vật - Quy trinh phòng trị bị động vật cắn vết trầy xước - Thủ tục xử lý để ngăn ngừa lây lan bệnh  Lưu ý giảm thiểu thiệt hại hỏa hoạn an toàn cháy nổ - Giảm thiểu thiệt hại cháy nổ: chắn cửa chống cháy hành lang cửa phịng thí nghiệm ln đóng kín - An tồn cháy nổ: Cần biết phải làm gì: + có cháy nổ + nghe báo cháy ( đội ngũ nhân viên, sinh viên đặc biệt sinh viên sau đại học phải tham gia huấn luyện chữa cháy năm)  Lưu ý bỏ xử lý chất thải - Người đào tạo định để xử lý - Đáp ứng tất quy tắc quy định bắt buộc - Bộ sưu tập cách - Hợp đồng thu gom chất thải - Không phơi nhiễm cho người động vật thực vật,v.v thải bỏ- bao gồm khử nhiễm khử trùng trùng thiêu hhuyr hấp khử trùng 2/ Các nguyên lý thí nghiệm - Xây dựng câu hỏi/ mục tiêu trước - So sánh/ kiểm soát - Nhân rộng - Ngẫu nhiên - Phân tầng( giới hạn) - Số lượng mẫu thu đủ lớn có lặp lại - Các kiểu bố trí thí nghiệm/ thí nghiệm nhiều nhân tố/ thí nghiệm thừa số  Cách thức bố trí thí nghiệm cho tốt - Bố trí thí nghiệm cho tốt: khơng thiên vị/ độ xác cao/ đơn giản/ phạm vi ứng dụng rộng/ ước tính khơng chắn  Thí nghiệm có lặp lại, phải lặp lại thí nghiệm? tính ngẫu nhiên, số mẫu thu thập đủ lớn - Thí nghiệm có lặp lại: giảm ảnh hưởng biến động khơng kiểm sốt nhằm tăng độ xác; định lượng khơng chắn - Tính ngẫu nhiên: tránh thiên lệch; kiểm sốt vai trị ngẫu nhiên; làm ngẫu nhiên cách rõ ràng sử dụng máy tính, tiền xu, xúc xắc rút thẻ - Số mẫu thu thập đủ lớn: để đảm bảo tính xác; phù hợp vớ phương pháp nghiên tuân theo quy định phổ biến loại nghiên cứu  Kiểu thí nghiệm truyền thống - Mục đích điều tra mối quan hệ nhân biến - Nhóm thử nghiệm so với kiểm sốt - Mỗi nhóm xử lý khác - Ln quan tâm xử lý biến độc lập - Trả lời câu hỏi “ điều xảy ra”  Đặc điểm thí nghiệm tốt - Khơng thiên vị: ngẫu nhiên; khơng rõ ràng - Độ xác cao: vật liệu đồng nhất; lặp lại; chặn giới hạn - Đơn giản: ngăn sai lầm - Phạm vi ứng dụng rộng: cân nhắc thay đổi; bố trí thừa số - Có thể ước tính khơng chắn: lặp lại; ngẫu nhiên 3/ Tương quan trọng lượng thể tích nước nhiệt độ thay đổi + Biến thiên từ 10-300C + Nhiệt độ tăng => thể tích nước dãn nở (nhiệt độ cao=> thể tích nước lớn) + Nước 40C tích lớn nhất, khổi lượng riêng lớn 4/ Sự thay đổi màu sắc phenolphthalein pH khác - Phạm vi pH thay đổi màu sắc: 8.0-9.8 - Trong môi trường acid: không màu - Trong môi trường base: màu đỏ hồng 5/ Khái niệm chất độc theo Paracelsus "Mọi thứ chất độc, thứ có chất độc Chỉ có liều lượng làm cho thứ chất độc" 6/ Nguồn gốc chất độc, đường phơi nhiễm chất độc, thời gian phơi nhiễm, tác dụng chất độc Nguồn phơi nhiễm đường phơi nhiễm chất độc Phơi nhiễm cấp tính, phơi nhiễm mãn tính - Nguồn gốc: Tất chất độc tùy theo liều lượng chúng Liều lượng tự định tính độc Tát chất – tự nhiên hay tổng hợp – gây độc - Con đường phơi nhiễm chất độc: tiếp xúc (da), xông (hít vào phổi) nguy hiểm nhất/ vi độc (qua đường tiêu hóa)/ tiêm chích - Thời gian phơi nhiễm: Thời gian tần số liên quan đến liều gây độc làm thay đổi ảnh hưởng gây độc + Phơi nhiễm cấp tính: Tiếp xúc lần + Phơi nhiễm mãn tính: Tiếp xúc nhiều lần - Tác dụng chất động: chỗ lưu dẫn  Những nhóm chất dễ gây độc, loại thực phẩm, nguồn chứa chất độc chất độc có lồi điển hình: Cá nóc, khoai mì, khoai tây, nấm độc, cóc… - Nhóm chất dễ gây độc: + Methyl amin (betain) + Amin có mạch kín (ptomain) - Các loại thực phẩm chưa độc: + Histidin (thstamin) + Chất béo bị biến chất + Nitrat, nitrit (Chất bảo quản) + Bản thân thực phẩm có chất độc - Các nguồn chứa chất độc chất độc có lồi điển hình: + Khoai tây mọc mầm: selarin có hàm lượng cao + Khoai mì: Glucoside sinh HCN + Măng: Glucoside => HCN + Nấm độc: Muscarin, Phallin, Phalloidin, amanitin + Cóc: Bufotoxin, butidin, bufonin + Cá nóc: Tetrodotexin, hepafexin 7/ Nồng độ liều lượng gây độc Liều hữu dụng, liều gây độc Ví dụ chất có lợi nồng độ cao gây độc vitamin A, oxy… - Mức độ đáp ứng độc hại tương ứng với nồng độ (bao nhiêu) hóa chất targer site - Nồng độ chất hóa học target site liều định tương ứng với liều dùng - Liều hữu dụng ED50: nồng độ hóa chất khơng gây chết phơi nhiễm - Liều gây độc LD50: Nồng độ hóa chất gây chết phơi nhiễm  VD chất có lợi nồng độ cao gây độc: + Aspirin: 300-1000mg 1000-30K + Vitamin A: ED50: 5000 untis/ngày LD50: 50000 untis/ngày + Oxygen: ED50: 20% (KK) LD50 50-80% (KK) 8/ Độc chất thực phẩm: vi sinh, sinh hóa, hóa chất thêm vào - Chất độc sinh thủy phân sản phẩm giàu đạm HCl nhiệt độ cao Công thức 3-MCPD Melamine Melamine 3-MCPD - Chất độc động vật, thực vật, vi sinh vật (cá nóc, cóc, thầu dầu vi sinh vật độc thực phẩm) * động vật - nhuyển thể tích trữ thịt loại tảo, rong độc chứa độc tố Mytilotoxin, PSP,DSP - cóc: bufotoxin, bufidin, bufonin - cá nóc: tetrodotoxin, hepatoxin * thực vật: - khoai tây mọc mầm: solarrin có hàm lượng cao - khoai mì: Glucoside sinh HCN - măng, đậu độc: Glucoside sinh HCN - nấm độc: Muscarin, phallin, pjalloidin, amanitin - có hàng nghìn loại thực vật có chứa chất độc 9/ Ký hiệu màu sắc thị độ độc Các vạch màu quy định độ độc thuốc bảo vệ thực vật - Ký hiệu màu sắc gồm màu: o Cẩn thận: màu xanh cây, khơng có ký hiệu cụ thể, có chữ cẩn thận o Cảnh báo: màu xanh biển, hình tượng đen, trắng o Nguy hiểm: màu vàng, hình tượng đen, trắng o Độc: màu đỏ, hình tượng đen, trắng - Màu sắc thị độ độc: o Thuốc độc nhóm I vạch đỏ (pantone 199-C) (độc nhất) o Thuốc độc nhóm II vạch vàng (pantone yellow-C) (ít độc hơn) o Thuốc độc nhóm III vạch xanh nước biển (pantone blue 293-C) (ít độc nhất) - LD50  Lethal Dose: Liều lượng hóa chất phơi nhiễm thời điểm, gây chết cho 50% nhóm động vật dùng thử nghiệm LD50 cách thức đo lường khả ngộ độc ngắn hạn (độc tính cấp tính) hóa chất 10/ Cách xác định ẩm độ mẫu - Cân 2g mẫu o Cân xác khối lượng W1 o Sấy khơ 1050 C 3h, trọng lượng không đổi o Làm mát bình hút ẩm - Cân xác khối lương W2 Hàm lượng độ ẩm Wd (%) = Cần cân khối lượng đĩa trước sau rửa sấy khơ ( W0 ) - Cân xác khối lượng ban đầu - Sử dụng vật liệu chịu nhiệt phù hợp chứa mẫu sấy,xử lý kỹ mẫu trước sấy,thực sấy mẫu theo qui định sử dụng tủ sấy, sấy khô 105 C 3h ( đến trọng lượng không đổi) - Làm mát bình hút ẩm - Cân xác khối luongự sau sấy - Cần cân khối lượng đĩa trước sau rửa sấy khô Lưu ý: làm 11/ Nguyên tắc phương pháp phân tích khối lượng phân tích thể tích  Nguyên tắc phương pháp phân tích khối lượng: phương pháp định lượng hóa học mẫu đo xác cách cân khối lượng hợp phần tách trạng thái tinh khiết hóa học dạng hợp chất có thành phần biết trước  Nguyên tắc phương pháp phân tích thể tích: - phương pháp phân tích dựa việc đo xác thể tích dung dịch thuốc thử ( dung dịch chuẩn) phản ứng vừa đủ với dung dịch phân tích Từ thể nồng độ dung dịch chuẩn tính hàm lượng chất cần phân tích - Để đo thể tích xác dung dịch chuẩn độ ta dùng buret ( chuẩn độ ) đựng dung dịch phân tích gọi bình tam giác ( erlenmeyer, bình nón)  Các yêu cầu phản ứng dùng phân tích thể tích? 12/ Yêu cầu dạng kết tủa dạng cân Chất kết tủa phải thỏa mãn u cầu phân tích khối lượng cần độ xác cao?  Yêu cầu dạng kết tủa dạng cân: - Kết tủa cần thực tế không tan Muốn tiến hành kết tủa phải chọn điều kiện tối ưu, nồng độ thuốc thử, nhiệt độ thích hợp để kết tủa hình thành thực tế khơng tan chất phân tích kết tủa cách định lượng thí dụ kết tủa tới 99,99% - Kết tủa thu cần phải tinh khiết không hấp thu nội hấp tạp chất vậy, mẫu cân có thành phần xác định ứng với cơng thức hóa học - Kết tủa cần thu dạng dễ lọc rửa để tách khỏi dung dịch cách nhanh chóng thuận lợi - Trọng lượng cuối mẫu phải xác định ẩm độ 13/ Khái niệm nguyên tắc trích ly lỏng - lỏng  Khái niệm: chiết lỏng – lỏng phương pháp hữu ích để tách thành phần (hợp chất) hỗn hợp  Nguyên tắc: - Chiết lỏng – lỏng dựa vận chuyển chất tan từ pha lỏng vào pha lỏng khác tùy theo tính tan - Sự trích ly trở thành cơng cụ hữu ích dung mơi chiết xuất phù hợp chọn cách trích ly để tách chất định trước từ hỗn hợp, để loại bỏ tạp chất không mong muốn từ dung dịch Trong thực tế, thường dùng phân đoạn nước dung dịch có nước, giải pháp phân đoạn khác dung môi hữu không tan với nước - Sự thành công phương pháp phụ thuộc vào khác biệt độ hịa tan hợp chất dung mơi khác Đối với hợp chất định, sựkhác biệt dung mơi hịa tan định lượng ‘ hệ số phân bố’ 14/ Dung môi gì? Tính phân cực nước số điện mơi liên quan đến tính phân cực dung mơi, dung mơi khơng trộn lẫn nỗi chìm Cách trích ly Hệ số phân bố K - Dung mơi chất lỏng, rắn, khí dùng để hòa tan chất tan rắn, lỏng, khí khác tạo thành dd hịa tan thể tích dung mơi định nhiệt độ quy định - Tính phân cực nước: mạnh, 200C, số điện 80,10 - Dung môi không phân cực: dung môi mà phân tử cấu thành khơng có phân cực đầu phân tử VD: Benzen, dầu hỏa, xăng, acetone, chloroform,… - Dung mơi phân cực: có thành phần phân tử phân cực, thường dùng hòa tan chất vơ có khả điện ly VD: nước, ethanol, methanol, acetic acid,… - Hằng số điện môi liên quan đến tính phân cực dung mơi: + Các số điện môi dung môi phản ánh sơ tính phân cực dung mơi Tính phân cực lấy làm chuẩn, 200C, số điện môi 80,1 Các dung mơi có số điện mơi 80,10 15/ Sức mạnh hấp phụ nhóm phân cực (chất tan) lên hỗ trợ phân cực - Các dung mơi có số điện mơi tĩnh tương đối lớn 15 chia thành protic aprotic - Dung mơi protic hịa tan anion (các chất mang điện tích âm) mạnh nhờ liên kết hidro - Nước dung môi protic Các dung mơi protic acetone dichloromethane có xu hướng mang moment lưỡng cực lớn (tách phần điện tích dương phần điện tích âm phân tử) hòa tan dạng mang điện tích dương thơng qua lưỡng cực âm - Trong phản ứng hóa học, việc sử dụng dung mơi protic phân cực tạo điều kiện cho chế phản ứng SN1, dung môi aprotic phân cực tạo điều kiện cho chế SN2 16/ Máy quang phổ: Nguyên tắc, cấu tạo máy quang phổ, định luật Lambert Beer, loại đèn, lưu ý sử dụng máy quang phổ Máy quang phổ UV-VIS có dịng sáng dịng ánh sáng (double beam) gì? Độ hấp thu cực đại Ứng dụng máy quang phổ để phân tích vi tamin C peroxidase - Nguyên tắc: so màu, quang phổ, hấp thụ ánh sáng - Định luật Lambert- Beer: chiếu chùm sáng đơn sắc có bước sóng , ta có: I0 = In + Ip + I; - Các loại đèn: đèn Tungsten, đèn Deuterium, đèn xenon - Các lưu ý sử dụng máy quang phổ: lưu ý độ xác/ lưu ý ý độ an tồn - Mẫu: đồng nhất, pha lỗng nồng độ thích hợp, thống thể tích mẫu thí nghiệm - Culvet: không trầy xước, chọn culvet phù hợp với bước sóng, thủy tinh ( nhưạ)  vùng nhìn thấy Thạch anh  vùng cực tím NaCl, KBr  vùng hồng ngoại không chạm tay vào mặt láng culvet, cầm vào cạnh chạm tay vào mặt nhám - Máy quang phổ: chọn bước sóng thích hợp khởi động 30p trước sử dụng, không sử dụng máy thời gian dài làm máy nóng dẫn đến sai số lần đo nên cách 15p - Máy quang phổ UV-VIS có : o dịng sáng ( double beam)  liên tục so mẫu đo với mẫu chuẩn, tự động hiệu chỉnh thay đổi tính hiệu điện hay cường độ sáng o dòng sáng  mẫu thật mẫu trắng đo xen kẽ vị trí chứa mẫu - Độ hấp thu cực đại: - Ứng dụng máy quang phổ để phân tích vitamin C peroxidase: 17/ Lược sử sắc ký Sắc khí gì? Ngun tắc TLC, sắc ký giấy loại sắc ký cột, sắc ký chiều Các chất dùng phổ biến cột sắc ký hấp phụ? Các pha sắc ký Pha động sắc ký khí gì? Kể tên chất dùng pha động máy sắc ký khí? Yêu cầu chất dùng pha động sắc ký khí sắc ký lỏng? - Lịch sử sắc ký: Mikhail Tswett  Nhà thực vật học người Nga (1872-1919).vao năm 1906, Tswett dùng kỹ thuật tách săc tố thực vật.ông gọi kĩ thuật lỹ thuật sắc ký ( chromatography) kết việc phân tích biết màu dọc theo chiều dài cột hấp thụ - Sắc ký phương pháp vật lý phân tách thành phần tách phân phối hai pha - Một pha đứng yên ( pha tĩnh) phần ( pha động) di chuyển qua theo mọt hướng định - Quá trình sắc ký xảy khác biệt phân bố bất biến thành phần mẫu riêng biệt - Nguyên tắc TLC:  TLC phương pháp xác định chất thử độ tinh hợp chất  TLC kỹ thuật hữu dụng tương đối nhanh yêu cầu số lượng mẫu nhỏ  Các thành phần khác độ hòa tan cề sức bề mặt chúng chất tham gia hấp thụ vài thành phần mang xa TLC so với thành phần khác  Khi dung môi lên đến đỉnh TLC, lấy khỏi buồng sắc ký, sấy khô, thành phần tách biệt hỗn họp nhận diện  Nếu hợp chất có màu nhận diện đơn giản Thông thường hợp chất khơng màu xác định đèn cực tím - Nguyên tắc sắc ký chiều:  Khi số lượng lớn chất cần phân tách sắc ký đồ  Việc thực theo hướng trực gioa với lần đầu tiên, với hệ thống dung môi khác với dung môi sử dụng ban đầu  Các mẫu áp dụng góc mảnh giấy vng sau thực với mọt dung môi giấy sấy khô, xoay gốc 90 độ phát triển theo hướng thứ  Thong thường hệ thống dung môi khác sử dụng theo hướng điều cần thiết dung môi bay hoàn toàn - Nguyên tắc loại sắc ký cột:  Pha tĩnh nhồi cột  Pha động chất lỏng chất khí di chuyển - Các chất dùng phổ biến cột săc ký hấp thụ: Alumina & Silica gel  tương tác với phân tử chất tan nhóm OH bề mặt chúng Nhiều phân tử phân cực hấp thụ mạnh đó, rửa giải chậm - Các pha sắc ký:  Pha động: chất lỏng di chuyển hướng lên pha tĩnh mang theo mẫu khảo sát với  Pha tĩnh: lớp mỏng vật liệu hấp thụ ( thường silica gel nhôm) phủ mỏng - Pha động sắc ký: - Kể tên chất dùng pha động máy sắc ký: - Yêu cầu chất dùng pha động sắc ký khí sắc ký lỏng:  Chất lỏng pha tĩnh động nên có khác biệt đáng kể tính phân cực mạnh hay yếu dung môi  Nước tinh khiết > methanol > ethanol> propanol> acetone > ethyl ether> chloroform> dichloromethane> benzene> toluene> carbon tetrachloroide> cyclohexane> hexane> pentane - Ứng dụng sắc ký - Các ứng dụng sắc ký trao đổi ion  Làm mềm nước loại bỏ ion Ca2+, Mg2+ ion hóa trị khác gây độ cứng nước cách lọc qua lớp polymer cation mạnh  Lọc nước khử khoáng loại ion hòa tan nước  Trung hòa  chất trao đổi cation dạng H+ sử dụng để trung hòa hydroxide kiềm trao đổi chất anion OH - để trung hịa tính acid  Sự phân tách chất điện giải từ chất không điện giải  Sự phân tách carbonhydrate dẫn xuất chúng: uronic acid: phân tách với chất anion loại đường: chuyển đổi thành dạng ion hóa cách sử dụng borate tách với chất troa đổi anion mạnh hexosamines: tách với chất trao đổi cation mạnh - Cách nhồi cột săc ký Việc lựa chọn phương pháp nhồi cột dùng cho sắc ký  Cách nhồi cột: việc lựa chọn phương pháp nhồi cột phụ thuộc chủ yếu vào mật độ chất rắn kỹ thuật sử dụng phương pháp ướt, khô hồ sệt trông tất trường hợp phải loại bỏ bong bóng khí  - Thuốc thử dùng để nhận diện alkaloid, đường khử amino acid  Alkaloids  thuốc thử Dragendorff: dung dịch potassium bismuth iodide pha từ bismuth nitrate ( Bi(NO 3)3), tartaric acid potassium iodide ( KI)  Đường khử: Aniline phthalate  Aminno acid: ninhydrin 18/ Tóm lược quy trình trích protein hợp chất phi protein - Tách protein sắc ký lọc gel  Được tách nởi khối lượng: điện di SDS-PAGE  Độ nhạy 0.02ug protein nhuộm với bạc  Độ phân giải: khác biệt khối lượng 2%  Được tách điểm đẳng điện (pI): polyampholytes pH gradient gel  Độ phân giải 0.01 pI - Tinh protein  săc ký trao đổi ion  Phân tách phân tử protein theo điện tích phân tử chúng  Trong kỹ thuật này, hạt cột có điện tích đặc biệt với chúng Đây kết phân tử gắn liền với hạt  Các hạt có điện tích dương cách gắn chúng với DEAE ( diethylamainoethyl) cellulose có điện tích âm cách gắn chúng vào carboxymethy cellulose  Các hạt cột phụ thuộc vào protein muốn lọc  Nếu protein có điện tích âm cẩn phải sử dụng hạt có tích điện dương ngược lại - Làm hoạt động: Ví dụ, protein quan tâm có điện tích âm, sử dụng cột DEAEcellulose  Protein liên kết với hạt điện tích dương  Protein gắn vào hạt giải phóng cách tăng nồng độ NaCl (or muối khác)  Các ion Na+ ( or ion khác) cạnh tranh liên kết với hạt cột thay đổi protein  Protein có điện tích dương cao xuất dầu tiên chúng bị đẩy lùi hạt 19/ Sự khác biệt máy cô quay chân không đông khô chân không - Máy cô quay chân không: loại bỏ dung môi - Máy đông khô chân không : loại bỏ nước, đông khô hạn chế bỏ buffer 20/ Nguyên tắc hoạt động phận GC, HPLC khối phổ Các giá trị ghi nhận việc phân tích GC, HPLC khối phổ Các lưu ý ghép GC HPLC với khối phổ - Nguyên tắc hoạt động - Các phận GC Tốt cho mẫu dễ bay ( lên đến khoảng 250o C) 0,1-1,0 microlit chất lỏng 110ml Có thể phát < ppm với số đầu dò định Có thể dễ dàng tự động hóa để tiêm phân tích liệu Nguồn cung cấp khí gas ( N2 or Fe) Cổng bơm mẫu Cột sắc ký (column) Đầu dị ( detector) HPLC - Dung mơi - Hệ thống phân phối dung môi ( bơm) - Vòi phun - Mẫu vật - Cột - Đầu dò ( dãy diode) - Bộ phận thu chất thải - Máy ghi( thu thập liệu) MS - Có loại nguồn ion hóa: MALDI ESI - Nguồn ion hóa mẫu - Bộ phận phân tích khối - Bộ phận ghi phổ ( detector) - Giá trị ghi nhận phân tích Lưu ý - Chiều cao peak tỷ lệ với lượng vật liệu rửa giải khỏi cột thời điểm - Diện tích đỉnh thước đo tổng lượng vật liệu rửa giải khỏi cột - Bộ tích hợp điện tử sử dụng để đo diện tích GC thương mại ALGEBBRA sử dụng  ... hạt 19/ Sự khác biệt máy cô quay chân không đông khô chân không - Máy cô quay chân không: loại bỏ dung môi - Máy đông khô chân không : loại bỏ nước, đông khô hạn chế bỏ buffer 20/ Nguyên tắc... sử dụng chúng  Thi? ??t bị điện - Luôn kiểm tra trực quan thi? ??t bị điện trước sử dụng, tìm kiếm hao mịn khiếm khuyết rõ ràng - Tất thi? ??t bị cầm tay phải có nhãn dán - Khơng sử dụng thi? ??t bị bị lỗi... vết trầy xước - Thủ tục xử lý để ngăn ngừa lây lan bệnh  Lưu ý giảm thi? ??u thi? ??t hại hỏa hoạn an toàn cháy nổ - Giảm thi? ??u thi? ??t hại cháy nổ: chắn cửa chống cháy hành lang cửa phịng thí nghiệm