Tài liệu Bài giảng Hướng dẫn hực hành kiểm nghiệm thuốc pptx

` Học viện quân y bộ môn dược học quân sự **** Hướng dẫn thực hành kiểm nghiệm thuốc (Tài liệu sử dụng cho sinh viên đại học Dược). Hà nội - 2008. Bài 1 giới thiệu dụng cụ và pha dung dịch chuẩn (NaOH 0,1N; HCl 0,1N; AgNO 3 0,1N và NaCl 0,1N). I/ Cân: Nhiều loại cân: - Cân phân tích độ chính xác 0,1mg. - Cân đòi hỏi: + Đúng: Nghĩa là khi ta cân 1 vật chuẩn xác thì cho kết quả đúng với kết luận của nó. + Nhậy: biểu diễn bằng số vạch chia trờn cõn. Khi cân thăng bằng, chỉ thêm 0,1mg đã làm lệch kim chỉ của cân. + Tin: Tức là với một lượng ta cân thì cân lần trứoc và cân lần sau phải cho kết quả lặp lại. - Cõn: + Kiểm tra cân: Mở 2 bên lồng kính trước 5 - 10 phút để lưu thông không khí, kiểm tra 3 - 5 lần vị trí + Mở hãm cân nhẹ nhàng. + Mỗi khi thêm, bớt mẫu trên đĩa cân phải hãm cân. + Sau khi cân phải hãm cân đưa về vị trí số 0 và làm vệ sinh cân. II/ Dụng cụ đo thể tích: 1. ống hút: - Tư thế các dụng cụ đo phải thẳng đứng. - Khi hút chất lỏng bao giờ cũng hút quá vạch 2 – 3 cm, điều chỉnh để chất lỏng thừa chảy ra khỏi pipet, khi quan sỏt phải để vạch của pipet ngang tầm mắt. - Đặt ống hút vào thành bình định mức rồi thả với tốc độ 10ml/phút, giọt cuối cùng chấm vào thành bình nón, tuyệt đối khụng được vẩy. - Cách đọc kết quả: Đối với dung dịch không màu đọc ở phần đáy của phần cong, dung dịch có màu đọc phần phía trên của mặt lõm. 2. Buret: - Tư thế dụng cụ đo phải thẳng đứng. - Bôi vaselin vào khoá → Tránh lấp lỗ khoá. - Khi đổ dung dịch chuẩn bao giờ cũng quá vạch 2 – 3 cm, điều chỉnh để chất lỏng thừa chảy ra khỏi buret, khi quan sát phải để vạch của buret ngang tầm mắt. - Khi mở khoá cũng điều chỉnh tốc độ không quá 10ml/phút, gần tới điểm tương đương thì điều chỉnh khoá cho tốc độ chậm lại. Thể tích dung dịch chuẩn tiêu tốn không được vượt quá dung tích một buret.aa - Cách đọc kết quả: Đối với dung dịch không màu đọc ở phần đáy của phần cong, dung dịch có màu đọc phần phía trên của mặt lõm. 3. Bình định mức: - Chất cần thử khó tan: hoà tan trong cốc có mỏ với khoảng 30 – 40% dung tích bình, rồi chuyển vào bình định mức. Tráng cốc và đũa thuỷ tinh 3 lần, gộp dịch tráng vào bình, thêm dung môi cho đến lúc gần tới vạch, dùng pipet thêm dần cho đến vạch. - Với dung môi và các chất rắn dễ tan, hoà tan trực tiếp trong bình với 1/2 hay 1/3 dung tích bình, lắc đều cho tan hoàn toàn, thêm dung môi cho đến lúc gần tới vạch, dùng pipet thêm dần cho đến vạch. Chú ý: Nếu gặp dung dịch toả nhiệt thì phải đợi cho nguội mới chuyển vào bình định mức. - Cách đọc kết quả: Đối với dung dịch không màu đọc ở phần đáy của phần cong, dung dịch có màu đọc phần phía trên của mặt lõm. III/ Định Lượng bằng phương pháp đo thể tích: 1. Nguyên tắc: - Bất kỳ 1 chất nào cần thử A thì phản ứng hoàn toàn với đương lượng gam của 1 chất B đã biết, luôn có phương trình sau: N A . V A = N B . VB B trong đó: N A , V A là nồng độ đương lượng, thể tích chất thử. N B , VB B là nồng độ đương lượng, thể tích chất chuẩn. 2. Pha 1 chất chuẩn A: - Pha từ ống chuẩn quốc gia, K = 1. - Pha từ hoá chất chưa tinh khiết, tiến hành định lượng lại bằng dung dịch chuẩn, sử dụng hệ số điều chỉnh. N 1 (Dung dịch ta pha) K = N chuẩn IV/ Thực Hành: - Pha 250 ml dung dịch NaOH 0,1N: Cân 1,1g NaOH thêm nước đủ 500ml. - Pha 1000 ml dung dịch chuẩn HCl 0,1N từ ống chuẩn. - Định lượng dung dịch NaOH vừa pha, tớnh hệ số hiệu chỉnh K. BÀI 2 KIỂM NGHIỆM THUỐC TIấM TRUYỀN NATRI CLORID ĐẲNG TRƯƠNG NaCl P.t.l. 58,4 Là dung dịch vô khuẩn của natri clorid trong nước để pha thuốc tiêm. Chế phẩm phải đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc tiêm, thuốc tiêm truyền" và các yêu cầu sau đây: 1. Tớnh chất Dung dịch trong, khụng màu, vị mặn. pH: 4,5 – 7,0 2. Định tính * Xỏc định ion natri (kiến tập). - Nguyờn tắc: Na + + Zn [(UO 2 ) 3 (CH 3 COO - ) 8 ] + CH 3 COO - + 9H 2 O = NaZn[(UO 2 ) 3 (CH 3 COO - ) 9 ] . 9 H 2 O Tinh thể vàng, hình mặt nhẫn (soi kinh hiển vi) 1 giọt dd Na + Hơ khô, để nguội 1 g iọt TT Stren g - Tiến hành: Trộn 0,2 ml dung dịch natri clorid 0,9% với 0,2 ml dung dịch kẽm uranylacetat (TT): xuất hiện tủa kết tinh màu vàng, soi trờn kinh hiển vi thấy tinh thể hỡnh mặt nhẫn màu vàng lục nhạt * Xỏc định ion clo: - Nguyờn tắc: Cl - + AgNO 3 = AgCl + NO 3 - AgCl + 2 NH 3 = [Ag(NH 3 ) 2 ] + Cl - Phức tan - Lấy 2 ml chế phẩm. Acid hoỏ bằng vài giọt acid nitric loóng (TT). Thờm 0,5 ml dung dịch bạc nitrat (TT): xuất hiện tủa trắng lổn nhổn. Tủa khụng tan trong cỏc acid mà tan trong dung dịch amoniac. 2 ml cp 3 giọt HNO 3 10% 3 giọt AgNO 3 5% ↓ trắng lổn nhổn 3. Kim loại nặng: < 0,3ppm 4. Độ vô khuẩn: Đạt vụ khuẩn (PL 10.8). 5. Nội độc tố vi khuẩn: Khụng được quỏ 0,5 EU (PL 10.3). 6. Định lượng: - Nguyờn tắc: phương pháp kết tủa, định lượng trực tiếp. Cl - + AgNO 3 = AgCl ↓ (trắng) + NO 3 - AgNO 3 (thừa) + K 2 CrO 4 = Ag 2 CrO 4 ↓ (hồng thịt) + 2KNO 3 - Tiến hành: Hỳt chớnh xỏc 5 ml dung dịch NaCl 0,9% cho vào bỡnh nún 100, thờm 3 giọt chỉ thị kali cromat. Chuẩn độ bằng dung dịch bạc nitrat 0,1N cho đến khi xuất hiện tủa hồng. (hỡnh vẽ trang sau). AgNO 3 0,1N 5 ml NaCl 0,9% 3 giọt CT K 2 CrO 4 màu hồng thịt - Tớnh toỏn: 1 ml dung dịch AgNO 3 0,1N tương ứng với 0,005844 gam NaCl 0,005844 x V(AgNO 3 ) Hàm lượng = V NaCl x 100 - Yờu cầu: hàm lượng NaCl trong chế phẩm từ 0,850% - 0,950% BÀI 3 KIỂM NGHIỆM THUỐC TIấM TRUYỀN GLUCOSE 5% Cụng thức: O OH OH OH OH CH 2 OH C 6 H 12 O 6 P.t.l: 180,2 Tờn khoa học: D (+) glucopyranose. Chế phẩm đạt yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc tiờm truyền" và các yêu cầu sau đây: 1. Tớnh chất Dung dịch trong suốt, khụng màu. 2. Định tớnh. Lấy 1ml thuốc tiờm truyền, thờm 5 ml thuốc thử Fehling. Đun sụi sẽ xuất hiện tủa đồng (I) oxyd cú màu đỏ gạch. 3. Kim loại nặng: < 0,5ppm 4. Chất gõy sốt: PL 10.5 5. Sự nhiễm tiểu phõn lạ: Đạt yờu cầu của phộp thử “Tiểu phõn khụng nhỡn thấy bằng mắt thường” (PL 8.9). 6. Định lượng: * DĐVN III: đo năng suất quay cực. ** DĐVN I - Phương phỏp: Phương phỏp oxy hoỏ khử, chuẩn độ thừa trừ, chỉ thị hồ tinh bột. - Nguyờn tắc: Oxy hoỏ Glucose thành acid Gluconic trong mụi trường kiềm bằng I 2 thừa. Định lượng I 2 thừa bằng Na 2 S 2 O 3 0,1N với chỉ thị hồ tinh bột trong mụi trường acid. Phương trỡnh phản ứng: R-CHO + I 2 + H 2 O = R-COOH + 2HI I 2 + H 2 O ↔ HIO + HI I 2 + Na 2 S 2 O 3 = 2 NaI + Na 2 S 4 O 6 1 x C +1 - 2 e -> C +3 1 x I 2 0 + 2 e -> 2 I - - Tiến hành: Lấy chớnh xỏc 1ml dung dịch glucose 5%, chớnh xỏc 10 ml dung dịch I 2 0,1N, lấy khoảng 10ml dung dịch Na 2 CO 3 5% cho vào bỡnh nún 250ml. Lắc đều rồi cho vào búng tối khoảng 10 phỳt. Lấy bỡnh nún ra, acid hoỏ dung dịch định lượng bằng 15ml dung dịch H 2 SO 4 10%, lắc kỹ. Tiến hành định lượng bằng dung dịch Na 2 S 2 O 3 0,1N đến khi chuyển màu vàng rơm (vàng nhạt) thỡ thờm 3 giọt CT hồ tinh bột vào chuyển màu tớm đen. Tiếp tục chuẩn độ đến khi dung dịch mất màu. Na 2 S 2 O 3 0,1N 15 ml H 2 SO 4 10%, lắc kỹ Khi dd màu vàng rơm thỡ: 3 giọt CT hồ tinh bột Mất màu 1 ml glucose 5% 10 ml I 2 0,1N 10 ml Na 2 CO 3 5% 10 phỳt Song song làm mẫu trắng: khụng cú glucose Cụng thức tớnh: (V tr - V thử ) 0,009008.K.n.100 V glc C% = 1 ml I 2 0,1N tđ 0,009008 g glucose Yờu cầu: Hàm lượng phải từ 95,0 – 105,0% so với lượng ghi trờn nhón. BÀI 4 KIỂM NGHIỆM THUỐC TIấM CALCI CLORID 10% - Cụng thức: CaCl 2 P.t.l: 272,7 Là dung dịch vụ khuẩn. Chế phẩm đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc tiêm" và các yêu cầu sau đây: 1. Tớnh chất: Dung dịch trong, khụng màu. 2. Định tính: Nguyờn tắc: * Phản ứng của Ca 2+ : CaCl 2 + (NH 4 ) 2 C 2 O 4 → CaC 2 O 4 ↓ trắng Tủa này khụng tan trong CH 3 COOH, tan trong HCl (TT) * Phản ứng của Cl - : Cl - + AgNO 3 = AgCl ↓ trắng Tủa này khụng tan trong HNO 3 , tan trong NH 4 OH dư (TT) AgCl + NH 3 = [Ag(NH 3 ) 2 ] + Cl - phức tan Tiến hành: 2 ml CaCl 2 10% 10 ó (NH 4 ) 2 C 2 O 4 4% 2 ó AgNO 3 2% ↓ trắng N H 4 OH 10% dư ↓ trắng CH 3 COOH 10% dư HCl 10% dư - ↓ tan ↓ tan 3. pH: 5,0 – 7,0. 4. Định lượng: Dung dịch CaCl 2 10%. Nguyờn tắc: Phương phỏp Complexon Định lượng trực tiếp Ca 2+ bằng dung dịch EDTA, phản ứng tiến hành trong mụi trường kiềm mạnh. Chỉ thị Murexit tạo phức với Ca 2+ màu đỏ, tại điểm tương đương chỉ thị chuyển sang màu tớm hay xanh. Natri ethylendiamintetraacetat (Na 2 EDTA), cũn gọi là Complexon III hay Trilon B: NaOOC-CH 2 CH 2 -COOH N-CH 2 -CH 2 -N HOOC-CH 2 CH 2 COONa Tạo phức với Ca 2+ O = C – O O - C = O CH 2 Ca CH 2 NaOOC- CH 2 – N N – CH 2 – COONa CH 2 CH 2 Tiến hành: Lấy chớnh xỏc một thể tớch chế phẩm tương ứng với 0,5g CaCl 2 , pha loóng với nước vừa đủ 200 ml. Lấy chớnh xỏc 25 ml dung dịch thu được, chuẩn độ bằng Na 2 EDTA 0,05M. Khi cũn cỏch điểm tương đương 2 ml, thờm 5ml dung dịch NaOH 20% và 3 giọt Muexit (CT), tiếp tục chuẩn độ tới khi dung dịch cú màu tớm hay xanh. 1ml Na 2 EDTA 0,05M tương đương với 7,35 mg CaCl 2 .2H 2 O Yờu cầu: Hàm lượng CaCl 2 .2H 2 O từ 95 – 105% so với hàm lượng ghi trờn nhón. [...]... so với hàm lượng ghi trên nhón: Hàm lượng thực tế x 100 Hàm lượng ghi trờn nhón - Yờu cầu: Hàm lượng của novocain hydroclorid từ 95,0 đến 105,0% so với hàm lượng ghi trên nhón BÀI 8 KIỂM NGHIỆM THUỐC TIấM VITAMIN B12 Là dung dịch vô khuẩn của vitamin B12 (cyanocobalamin) trong nước để pha thuốc tiêm Chế phẩm đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc tiêm, thuốc tiêm truyền" và các yêu cầu sau đây:... Vitamin B12 hấp thụ bức xạ UV – VIS Tiến hành: Pha loóng dung dịch chế phẩm với nước để cú nồng độ 25 mcg/ml Đo độ hấp thụ ở bước sóng 361 nm, mẫu đối chứng là nước Tính hàm lượng vitamin B12 theo E1%1cm = 207 ở λ max = 361 nm Chỳ ý: trong suốt quá trình đo phải tránh ánh sáng BÀI 9 KIỂM NGHIỆM THUỐC MỠ BENZOSALI COOH OH COOH Acid benzoic Acid salicylic Là thuốc mỡ dựng ngoài da cú chứa acid benzoic...BÀI 5 KIỂM NGHIỆM THUỐC TIấM PROCAIN HYDROCLORID - Cụng thức: C 2 H5 H2N COOCH 2 CH 2 HCl N C 2 H5 P.t.l: 272,7 C13H20O2N2.HCl - Tờn khoa học: 2-(diethylamino) ethyl p-aminobenzoat monohydroclorid Là dung dịch vô khuẩn, được đẳng trương bằng cách thêm natri clorid Chế phẩm đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc tiêm" và các yêu cầu sau đây: 1 Tớnh chất:... và acid salicylic trong cỏc chất nhũ hoỏ thớch hợp Cụng thức thuốc mỡ Benzosali Acid benzoic (bột mịn) 60g Acid salicylic (bột mịn) 30g Chất nhũ hoỏ 910g Nghiền mịn dược chất, thêm đồng lượng chất nhũ hoá, nghiền tiếp đến hết Chế phẩm phải đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận Thuốc mỡ” và các yêu cầu sau: 1 Tớnh chất Thuốc mỡ phải mịn, thành phần phải thật đồng nhất, không được chảy lỏng ở nhiệt... 7,6 ml 1 g chế phẩm chứa: + 0,057g – 0,063g acid benzoic (4,7 – 5,2 ml NaOH 0,1N) + 0,027g – 0,033g acid salicylic (2,0 – 2,4 ml NaOH 0,1N) BÀI 11 KIỂM NGHIỆM VIÊN NÉN BERBERIN CLORID Là viên nénn chứa Berberin clorid Chế phẩm đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc viên nén" và các yêu cầu sau đây: 1 Tính chất : Viên màu vàng 2 Định tính : A Bột chứa 0,1g cp, 10 ml H2O, đun nóng nhẹ Lọc 5ml dịch... tâm hoặc chờ lắng cặn thì ta tiến hành lọc, bỏ 10ml dịch lọc đầu tiến hành đo ở dịch lọc còn lại - Tránh sai số: Làm 3 mẫu (Pha từ dung dịch gốc) - Song song làm mẫu chuẩn: Cân 50mg Ber HCl chuẩn 1 Tính toán kết quả: Công thức tính: Hàm lượng của Ber HCl so với hàm lượng ghi trên nhãn Et x mtb mt Ec x 50 mc x 100 Trong đó: Et: Giá trị đo độ hấp thụ UV của mẫu thử (Thuốc viên) Ec: Giá trị đo độ hấp... nm Do vậy ta có thể sử dụng phương pháp đo phổ hấp thụ tử ngoại để định lượng Berberin HCl (Có thể dùng để định tính) Chọn λ = 345nm để định lượng Berberin HCl Tiến hành: Dung dịch thử: Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình và nghiền thành bột mịn Cân chính xác một lượng bột viên tương đương với khoảng 50mg Berberin clorid, thêm 10ml nước để thấm đều bột viên, sau đó thêm khoảng 100ml nước sôi, khuấy... hoà tan và tách novocain base giải phóng từ phản ứng khỏi môi trường phản ứng, do đó không ảnh hưởng tới pH của tướng alcol nước nữa Alcol thường acid với phenolphtalein nên cần trung tính trước - Tiến hành: Hỳt chớnh xỏc 10 ml chế phẩm cho vào bỡnh nún 250 ml, thờm 10 ml cồn 900 đó trung tớnh với phenolphtalein, thờm 10 ml cloroform Định lượng bằng NaOH 0,1 N cho tới khi lớp nước có mầu hồng NaOH 0,1N... Na+ + H2O Muối diazoni HO HO (Ar - N+ ≡ N) → + Muối diazoni β Naphtol Ar - N = N Phẩm màu nitơ (màu đỏ) Phản ứng clorid: Cl - + AgNO 3 AgCl + 2 NH3 = AgCl ↓(trắng) = [Ag(NH3)2]+ ClPhức tan + NO 3- Tiến hành: dung dịch chế phẩm 2% - 2,5 ml dung dịch chế phẩm thờm 1 giọt HCl 0,5N, 1 giọt NaNO2 1% (mới pha), sau 1 – 2 phút, thêm 0,5 ml dung dịch 10% của beta - naphtol pha trong NaOH 15% có tủa mầu đỏ cam... có nhóm – COOH trong phân tử, nhóm chức acid, do đó có thể định lượng 2 acid này bằng một base mạnh như NaOH (phương pháp acid acid – base), chỉ thị phenolphtalein R – COOH + NaOH = RCOONa + H2O - Tiến hành: Lấy 2g chế phẩm cho vào binh non, thờm 150 ml nước, đun nóng nhẹ cho chảy, thêm 3 giọt chỉ thị phenolphtalein Chuẩn độ bằng NaOH 0,1N chuẩn, tới khi dung dịch xuất hiện màu hồng NaOH 0,1N 2g chế . bộ môn dược học quân sự **** Hướng dẫn thực hành kiểm nghiệm thuốc (Tài liệu sử dụng cho sinh viên đại học Dược). . K. BÀI 2 KIỂM NGHIỆM THUỐC TIấM TRUYỀN NATRI CLORID ĐẲNG TRƯƠNG NaCl P.t.l. 58,4 Là dung dịch vô khuẩn của natri clorid trong nước để pha thuốc