Nghiên cứu được thực hiện nhằm khảo sát đáp ứng miễn dịch của chó sau tiêm phòng vaccine dại. Mẫu huyết thanh được thu thập từ 40 chó ở huyện Phú Tân, tỉnh An Giang. Những chó này đã được tiêm vaccine phòng bệnh dại sau thời gian 9 tháng và 12 tháng. Mẫu huyết thanh sẽ được kiểm tra bằng phương pháp ELISA với bộ kít SERELISA® Rabies Ab Mono Indirect từ hãng Synbiotic của Pháp.
KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 KHẢO SÁT MIỄN DỊCH SAU TIÊM PHÒNG VACXIN DẠI TRÊN ĐÀN CHÓ Ở HUYỆN PHÚ TÂNTỈNH AN GIANG Huỳnh Ngọc Trang1, Võ Bão Duy1, Phạm Huỳnh Khiết Tâm2, Hồ Thị Việt Thu1 *Email: TÓM TẮT Nghiên cứu thực nhằm khảo sát đáp ứng miễn dịch chó sau tiêm phịng vaccine dại Mẫu huyết thu thập từ 40 chó huyện Phú Tân, tỉnh An Giang Những chó tiêm vaccine phịng bệnh dại sau thời gian tháng 12 tháng Mẫu huyết kiểm tra phương pháp ELISA với kít SERELISA® Rabies Ab Mono Indirect từ hãng Synbiotic Pháp Kết nghiên cứu cho thấy chó khảo sát có kháng thể đạt tỷ lệ bảo hộ sau tiêm phòng vaccine dại 100,0% Hiệu giá kháng thể dao động từ 1,4 EU/ml đến 12,78 EU/ml Trong mức hiệu giá kháng thể từ lớn đến 10 EU/ml chiếm 45,0% Hiệu giá kháng thể trung bình đạt mức bảo hộ chó trì đến 12 tháng sau tiêm phòng hàm lượng kháng thể thấp so với thời điểm sau tiêm phòng tháng Hiệu giá kháng thể chó tiêm phịng có khác biệt gữa giống thời gian sau tiêm phòng khơng có khác biệt giới tính tuổi Từ khóa: Bệnh dại, hiệu giá kháng thể, huyện Phú Tân, tỉnh An Giang, Survey on immunity of rabies - vaccinated dogs in Phu Tan district, An Giang province Huynh Ngoc Trang, Vo Bao Duy, Pham Huynh Khiet Tam, Ho Thi Viet Thu SUMMARY The investigation was conducted to survey humoral immune response of dogs vaccinated against rabies Serum samples were collected from forty dogs in Phu Tan district, An Giang province The dogs were vaccinated against rabies after months and 12 months Serum of vaccinated dogs was measured by Enzyme- linked immunosorbent assay (ELISA) test with SERELISA® Rabies Ab Mono Indirect kit from Synbiotic – France The results indicated that protection rate from surveyed dogs was 100.0% Antibody titer ranged from 1.4 EU/ml to 12.78 EU/ml and level from greater than 5-10 EU/ml accounted for 45.0% Protection antibody titer maintained until 12 months after vaccination though it was lower than titer at months There were significant differences in antibody titer of vaccinated dogs between breeds and number of days after vaccination, but not between genders or age Keywords: Rabies, antibody titer, Phu Tan district, An Giang province I ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh dại bệnh truyền lây từ động vật sang người virus thuộc chi Lyssavirus, họ Rhabdovirridae Ở Châu Phi Châu Á, có khoảng 40,0% ca bệnh trẻ em 15 tuổi Chó động vật đóng vai trị quan trọng Đại học Cần Thơ Chi cục Chăn nuôi Thú y An Giang 76 việc truyền lây virus dại có đến 99,0% bệnh dại người lây truyền từ chó (WHO, 2018) Hầu hết ca bệnh dại người bị chó mắc bệnh dại cắn Chương trình tiêm vaccine hàng loạt chó góp phần kiểm soát bệnh dại ngăn truyền lây virus dại đàn chó giảm truyền lây từ chó sang người động vật hữu nhũ khác (WHO, 2018) KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 Nguồn lây truyền bệnh dại Việt Nam chủ yếu từ chó ni khơng tiêm phịng Theo khuyến cáo WHO, OIE, tỷ lệ tiêm phịng đàn chó đạt 70,0% liên tiếp năm loại trừ bệnh dại đàn chó ni, làm sở loại trừ bệnh dại người động vật khác (Bộ Nông Nghiệp Phát Triển Nông Thôn- Bộ Y tế, 2016) Theo Chi cục Chăn nuôi Thú y tỉnh An Giang năm 2020 tổng số hộ có ni chó tồn tỉnh 25.291 hộ với tổng đàn chó 37.596 Nhằm khống chế tiến đến loại trừ bệnh dại tiêm vaccine phịng bệnh dại cho đàn chó cần thiết để bảo vệ sức khỏe cho vật nuôi sức khỏe cho cộng đồng Bên cạnh việc giám sát miễn dịch sau tiêm phòng quan trọng Nghiên cứu thực nhằm mục tiêu khảo sát tình trạng miễn dịch đàn chó sau thời gian tiêm phịng sở để khuyến cáo thời gian thực việc tái chủng kịp thời hiệu II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Thời gian, đia điểm vật liệu nghiên cứu Mẫu huyết chó tiêm phịng vaccine phòng bệnh dại thu thập năm 2020 huyện Phú Tân tỉnh An Giang Mẫu huyết chó tiêm vaccine phịng bệnh dại sau tháng 12 tháng Các mẫu huyết xét nghiệm kiểm tra kháng thể Trung Tâm chẩn đoán xét nghiệm điều trị bệnh động vật thuộc Chi cục Chăn ni Thú y Thành phố Hồ Chí Minh 2.2 Phương pháp nghiên cứu - Phương pháp điều tra: Các thơng tin tổng số lượng chó ni, số lượng chó tiêm phịng thu thập qua phương pháp hồi cứu từ số liệu lưu trữ Chi cục Chăn nuôi Thú y tỉnh An Giang Trong trình lấy mẫu tiến hành điều tra thu thập thơng tin giống chó, giới tính, lứa tuổi, thời gian tiêm phịng - Phương pháp lấy mẫu xét nghiệm: Các mẫu huyết thu thập theo phương pháp nghiên cứu điều tra cắt ngang, chọn ngẫu nhiên lấy 40 mẫu (40 con) từ chó tiêm vaccine dại sau tháng 12 tháng Mỗi mẫu lấy khoảng 2-3 ml máu/con Các mẫu huyết xét nghiệm phương pháp ELISA Qui trình thực phản ứng theo tiêu chuẩn kit ELISA hãng Synbiotic Đọc kết bước sóng 450 nm Nếu hiệu giá kháng thể > 0,6 EU/ml huyết vật có khả bảo hộ Nếu hiệu giá kháng thể ≤ 0,6 EU/ml huyết vật không đủ khả bảo hộ 2.3 Xử lý số liệu So sánh hiệu giá kháng thể trung bình chó sau tiêm phịng giống, lứa tuổi, thời gian sau tiêm phòng phương pháp thống kê sinh học với phép thử t phần mềm Mintab version16 III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tình hình tiêm phịng bệnh dại chó tỉnh An Giang từ năm 2016 đến năm 2020 Tổng đàn chó ni tỷ lệ chó tiêm vaccine phòng bệnh dại tỉnh An Giang năm gần được trình bày Bảng Bảng Tỷ lệ tiêm phòng dại từ năm 2016 đến năm 2020 Năm Tổng đàn (con) Số lượng tiêm phòng (con) Tỷ lệ (%) 2016 45.442 27.247 59,96 2017 41.492 32.525 78,39 2018 38.382 33.210 86,52 2019 43.224 32.439 75,05 2020 37.596 28.420 75,59 Trung bình 41.227 30.768 74,63 Qua kết ghi nhận Bảng cho thấy tổng đàn chó ni tỉnh An Giang từ năm 2016 đến năm 2020 từ 37.596 đến 45.442 con, trung bình 41.227 Năm 2016, số lượng chó tiêm vaccine phòng 77 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 bệnh dại đạt tỷ lệ 59,96% Những năm sau đó, tỷ lệ chó tiêm phòng tăng lên từ 75,05% - 86,52% Trong giai đoạn từ năm 2017-2020, tỷ lệ tiêm phòng bệnh dại đàn chó An Giang đạt 70,0% Theo khuyến cáo WHO, tỷ lệ tiêm phòng đàn chó đạt 70,0% liên tiếp 03 năm loại trừ bệnh dại đàn chó nuôi (WHO, 2018) Số lượng chó tiêm phịng đạt tỷ lệ cao nhờ thực tốt định phê duyệt kế hoạch khống chế tiến tới loại trừ bệnh dại địa bàn tỉnh An Giang giai đoạn 2018 – 2021 Ủy ban nhân dân tỉnh An Giang, thực tốt “Chương trình Quốc gia khống chế loại trừ bệnh dại giai đoạn 2017-2021” Trong năm 2020, việc triển khai cơng tác tiêm phịng cho đàn chó bị ảnh hưởng phần dịch Covid-19 hạn chế tiếp xúc thực giãn cách xã hội tỷ lệ tiêm phòng đạt cao (75,59%) 3.2 Kết kiểm tra kháng thể chó sau tiêm phịng vaccine dại Kết khảo sát miễn dịch chó sau tiêm phịng vaccine dại trình bày qua bảng sau Bảng Tỷ lệ chó đạt bảo hộ sau thời gian tiêm phòng Thời gian sau tiêm phòng Số mẫu khảo sát Số mẫu bảo hộ Tỷ lệ bảo hộ (%) Hiệu giá kháng thể (EU/ml) (±SE) P tháng 20 20 100,0 8,82±0,66 0,01 12 tháng 20 20 100,0 6,36±0,66 : Hiệu giá kháng thể trung bình; SE: sai số chuẩn EU/ml: EU/ml huyết Qua kết trình bày Bảng nhận thấy chó tiêm vaccine rabisin phịng bệnh dại có miễn dịch tốt Tất chó khảo sát vào thời điểm sau tiêm phịng 12 tháng đạt tỷ lệ bảo hộ 100,0% hiệu giá kháng thể cao (6,36-8,82 EU/ml) Qua cho thấy vaccine rabisin sử dụng có hiệu phịng bệnh dại tên chó Theo Trần Ngọc Bích Nguyễn Thu Tâm (2017) đáp ứng miễn dịch trình phức tạp theo quy định chặt chẽ Kết tốt hay xấu, mạnh hay yếu, nhanh chóng hay bền vững phụ thuộc lớn đến kháng nguyên kích thích, yếu tố đề kháng cá thể Ở chó tiêm phòng sau 12 tháng đạt tỷ lệ bảo hộ cao thời điểm sau tháng tiêm phòng kháng thể giảm Hàm lượng kháng thể chó sau tiêm phịng vaccine khoảng thời gian tháng (8,82 EU/ml) cao so với hàm lượng kháng thể chó sau thời gian tiêm phịng 12 tháng (6,36 EU/ml) Sự sai khác có ý nghĩa thống kê (P=0,01) Trong tự nhiên, kháng thể giảm theo thời gian không tiếp xúc với kháng nguyên Do để đảm bảo tỷ lệ bảo hộ nhà sản xuất vaccine khuyến cáo nên tiêm phòng lặp lại sau năm Theo nghiên cứu Mansfield cs (2004) hàm lượng kháng thể thời điểm tiêm phòng sau 12 tháng giảm so với thời điểm tháng Bảng Hiệu giá kháng thể đạt bảo hộ theo lứa tuổi Lứa tuổi Số mẫu khảo sát Số mẫu bảo hộ Tỷ lệ (%) Hiệu giá kháng thể (EU/ml) (±SE) P 1-2 năm 17 17 100,0 8,13±0,76 0,22 2-3 năm 16 16 100,0 7,8 ± 0,78 > năm 7 100,0 5,71±1,19 : Hiệu giá kháng thể trung bình; SE: sai số chuẩn EU/ml: EU/ml huyết 78 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 Từ kết Bảng cho thấy sau tiêm phòng vaccine, hàm lượng kháng thể trung bình kháng virus dại cao ghi nhận nhóm chó từ 1-2 năm tuổi, nhóm chó từ 2-3 năm tuổi thấp nhóm chó năm tuổi Mặc dù hàm lượng kháng thể trung bình có khuynh hướng giảm dần theo lứa tuổi, khác biệt khơng có ý nghĩa mặt thống kê (P=0,22) Theo Trần Ngọc Bích Nguyễn Thu Tâm (2017), thể thú trưởng thành hệ thống quan tế bào miễn dịch hoàn thiện cho đáp ứng miễn dịch mạnh lượng kháng thể sinh nhiều Khi già quan miễn dịch suy giảm, đáp ứng miễn dịch giảm, đặc biệt giảm miễn dịch tế bào nên lượng kháng thể giảm Nghiên cứu Louise cs (2011) nhận định độ tuổi có ảnh hưởng lớn đến đáp ứng miễn dịch hàm lượng kháng thể sau tiêm phòng Bảng Hiệu giá kháng thể đạt bảo hộ theo giống Giống Số mẫu khảo sát Số mẫu bảo hộ Tỷ lệ (%) Hiệu giá kháng thể (EU/ml) (±SE) P Chó nội 29 29 100,0 6,95±0,56 0,04 Chó ngoại 11 11 100,0 9,29±0,92 : Hiệu giá kháng thể trung bình; SE: sai số chuẩn EU/ml: EU/ml huyết Qua kết khảo sát Bảng cho thấy, tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể đạt bảo hộ bệnh dại giống chó nội giống chó ngoại 100,0% Tuy nhiên hàm lượng kháng thể trung bình giống chó ngoại (9,29 EU/ml) cao giống chó nội (6,95 EU/ml) khác biệt hàm lượng kháng thể hai giống chó có ý nghĩa mặt thống kê (P=0,04) Sự khác biệt chó nội thường ni vùng nơng thơn với mục đích giữ nhà nên khơng chăm sóc tốt giống chó ngoại thú cưng Theo Nguyễn Bá Hiên Trần Thị Lan Hương (2010), có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến đáp ứng miễn dịch tiêm phòng như: trạng thái sức khỏe vật, stress, điều kiện ngoại cảnh, chăm sóc ni dưỡng sau tiêm phịng Bên cạnh đó, giống chó ngoại thú cưng thường có tầm vóc nhỏ giống chó nội Kennedy cs (2007), khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh kháng thể đàn chó Anh nhận thấy giống chó có ảnh hưởng đến đáp ứng miễn dịch sau tiêm phòng vaccine dại Những giống chó có tầm vóc nhỏ có hàm lượng kháng thể cao so với giống chó có tầm vóc lớn Bảng Hiệu giá kháng thể đạt bảo hộ theo giới tính Giới tính Số mẫu khảo sát Số mẫu bảo hộ Tỷ lệ (%) Hiệu giá kháng thể (EU/ml) (±SE) P Đực 22 22 100,0 7,81±0,69 0,64 Cái 18 18 100,0 7,33±0,76 : Hiệu giá kháng thể trung bình; SE: sai số chuẩn EU/ml: EU/ml huyết Kết Bảng cho thấy, tỷ lệ mẫu huyết chó có kháng thể bảo hộ chó đực chó 100,0% Hàm lượng kháng thể trung bình chó đực chó khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (P=0,64) Theo nghiên cứu Mansfield cs (2004) ; Jakel cs (2008), tác giả cho khơng có khác biệt giới tính việc tạo kháng thể kháng lại virus dại Qua kết kiểm tra kháng thể từ 40 mẫu huyết chó tiêm vaccine dại có hiệu 79 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 giá kháng thể thấp 1,4 EU/ml cao 12,78 EU/ml Trên sở dựa vào hiệu giá kháng thể tối thiểu đạt mức bảo hộ số pha loãng mẫu huyết cho thấy hiệu giá kháng thể phân bố vào ba mức thể Bảng Bảng Tỷ lệ mẫu huyết có kháng thể bảo hộ theo hàm lượng kháng thể (n=40) Mức hiệu giá kháng thể (EU/ml) Số mẫu có kháng thể bảo hộ Tỷ lệ (%) P 1,4-5 11 27,50 0,16 >5-10 18 45,0 >10-12,78 11 27,50 EU/ml: EU/ml huyết Từ kết Bảng cho thấy, hàm lượng kháng thể chó tiêm vaccine thời gian 12 tháng đạt cao từ 1,4 EU/ml trở lên Trong đó, hàm lượng kháng thể tập trung với tỷ lệ cao (45,0%) mức lớn 5-10 EU/ml Qua khảo sát miễn dịch chó tiêm phòng vaccine dại Brazil, Fernandes cs (2017) ghi có phân bố khác hiệu giá kháng thể sau tiêm phòng từ 0,5-16 IU/ml, mức hiệu giá cao IU/ml, chiếm 18,0% Khi hàm lượng kháng thể cao trì miễn dịch thời gian dài Đối với cá thể kiểm tra phát có kháng thể bảo hộ, phải quan tâm kháng thể bảo hộ giảm theo thời gian gặp điều kiện thích hợp vật bị bệnh IV KẾT LUẬN Huyết chó khảo sát có hiệu giá kháng thể đạt bảo hộ bệnh dại 100,0% (40/40) kháng thể đạt bảo hộ trì đến 12 tháng sau tiêm phòng Hàm lượng kháng thể chó tiêm phịng sau 12 tháng giảm so với hàm lượng kháng thể chó đựơc tiêm phịng sau tháng Có khác biệt hiệu giá kháng thể sau tiêm phò ng giống, thời gian sau tiêm phòng TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Nông Nghiệp Phát Triển Nông Thôn- Bộ Y tế, 2016 Chương trình quốc gia khống chế tiến tới loại trừ bệnh dại giai đoạn 2017-2021 Chi cục Chăn nuôi Thú y tỉnh An Giang, 2020 Báo cáo hoạt động chăn nuôi thú hàng năm từ 80 năm 2016 đến 2020 Fernandes K.G., Mathias M., Amaral B.P., Cargnelutti J.F., Weiblen R and Flores E.F., 2017 Antibodies against rabies virus in dogs with and without history of vaccination in Santa Maria – RS – Brazil Ciência Rural 47 (11): 1-7 J akel V., König M., Cussler K., Hanschmann K and Thiel H.J., 2008 Factors influencing the antibody response to vaccination against rabies Dev Biol (Basel) 131: 431-437 Kennedy L.J., Lunt M., Barnes A., McElhinney L., Fooks A.R., Baxter D.N and Ollier W.E R., 2007 Factors influencing the antibody response of dogs vaccinated against rabies Vaccine 25 (51): 8500-8507 L ouise T.B., Ann-Kristin J.N., Esteban R and Berndt K., 2011 Factors associated with the success of rabies vaccination of dogs in Sweden Acta Veterinaria Scandinavica 53 (22): 2-7 Mansfield K.L., Burr P.D., Snodgrass D.R., Saye R and Fooks A.R., 2004 Factors affecting the dogs and serological response of cats to rabies vaccination Vet.Rec 154 (14): 423-426 Nguyễn Bá Hiên Trần Thị Lan Hương, 2010 Giáo trình Miễn dịch học ứng dụng Nhà Nông nghiệp Hà Nội Trần Ngọc Bích Nguyễn Thu Tâm, 2017 Giáo trình miễn dịch học Nhà xuất đại học Cần Thơ 10 WHO, 2018 Weekly Epidemiological record, 16, 93: 201-220 Ngày nhận 14-6-2021 Ngày phản biện 22-7-2021 Ngày đăng 15-8-2021 ... Bên cạnh việc giám sát miễn dịch sau tiêm phòng quan trọng Nghiên cứu thực nhằm mục tiêu khảo sát tình trạng miễn dịch đàn chó sau thời gian tiêm phòng sở để khuyến cáo thời gian thực việc tái... lệ tiêm phòng đạt cao (75,59%) 3.2 Kết kiểm tra kháng thể chó sau tiêm phòng vaccine dại Kết khảo sát miễn dịch chó sau tiêm phịng vaccine dại trình bày qua bảng sau Bảng Tỷ lệ chó đạt bảo hộ sau. .. phịng bệnh dại chó tỉnh An Giang từ năm 2016 đến năm 2020 Tổng đàn chó ni tỷ lệ chó tiêm vaccine phịng bệnh dại tỉnh An Giang năm gần được trình bày Bảng Bảng Tỷ lệ tiêm phòng dại từ năm 2016