Sự lưu hành và đề kháng kháng sinh của vi khuẩn Enterohaemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O45, O121, O157 trên bò tại huyện Ba Tri, tỉnh Bến Tre

Nghiên cứu kiểm tra sự đề kháng kháng sinh của các chủng vi khuẩn E. coli O45, O121 phân lập được bằng phương pháp khuếch tán trên đĩa thạch đối với 10 loại kháng sinh. Các chủng vi khuẩn E. coli O45, O121 trên bò nhạy cảm cao với amikacin và doxycycline (100%), kế đến là ofloxacin (85,71%) và ceftazindime (71,43%); tuy nhiên, đã đề kháng với streptomycin (50,00%), colistin (57,14%) và ampicillin (64,29%). Mời các bạn tham khảo!

KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 SỰ LƯU HÀNH VÀ ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN ENTEROHAEMORRHAGIC ESCHERICHIA COLI (EHEC) O45, O121, O157 TRÊN BÒ TẠI HUYỆN BA TRI, TỈNH BẾN TRE Lê Hồng Nghị, Nguyễn Khánh Thuận*, Trần Thị Lệ Triệu, Lý Thị Liên Khai1, Trần Ngọc Bích Bộ mơn Thú y, Khoa Nông nghiệp, Trường Đại học Cần Thơ *Email: nkthuan@ctu.edu.vn TÓM TẮT Trong thời gian từ tháng 8/2020 đến 12/2020, tổng cộng 121 mẫu phân bò khỏe thu thập tất giống bị, lứa tuổi, giới tính hộ chăn ni bị thuộc huyện Ba Tri, Bến Tre Bằng phương pháp PCR, tỷ lệ diện vi khuẩn EHEC O45, O121 4,13% 7,44% mẫu phân bị; khơng có khác biệt giới tính, độ tuổi Tuy nhiên, diện chủng E coli O45 bò sữa (10,81%) có tỷ lệ cao bị thịt (1,19%) Khơng tìm thấy diện vi khuẩn E coli O157 đàn bò khảo sát nghiên cứu Kiểm tra đề kháng kháng sinh chủng vi khuẩn E coli O45, O121 phân lập phương pháp khuếch tán đĩa thạch 10 loại kháng sinh Các chủng vi khuẩn E coli O45, O121 bò nhạy cảm cao với amikacin doxycycline (100%), ofloxacin (85,71%) ceftazindime (71,43%); nhiên, đề kháng với streptomycin (50,00%), colistin (57,14%) ampicillin (64,29%) Từ khóa: Bị, Bến Tre, đề kháng kháng sinh, EHEC, serotype Prevalence and antimicrobial resistance of Enterohaemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O45, O121, O157 in cattle in Ba Tri, Ben Tre province Le Hong Nghi, Nguyen Khanh Thuan, Tran Thi Le Trieu, Ly Thi Lien Khai, Tran Ngoc Bich SUMMARY From August 2020 to December 2020, a total of 121 fecal samples were collected from healthy cattle on all of the breeders, ages, gender at the household farms in Ba Tri, Ben Tre province Applying PCR assay, the prevalence of positive EHEC O45, O121 was 4.13% and 7.44% respectively; there was no significant difference in gender, ages However, the prevalence of E coli O45 in dairy cattle (10.81%) was higher than that in beaf cattle (1.19%) E coli O157 was not found in cattle in this study The antimicrobial resistance of the E coli O45, O121 isolates was carried out following the disk infusion method with 10 antibiotics E coli O45, O121 strains were extremely sensitive to amikacin, doxycycline (100%), followed by ofloxacin (85.71%), and ceftazindime (71.43%); however, those strains were resistant against streptomycin (50,00%), colistin (57.14%) and ampicillin (64.29%) Keywords: Antimicrobial resistance; Ben Tre province; cattle; ETEC; serotype I ĐẶT VẤN ĐỀ Enterohaemorrhagic Escherichia coli (EHEC) vi khuẩn sản sinh độc tố shiga (Stx), gây ngộ độc thực phẩm nghiêm trọng người EHEC tồn đường ruột nhiều loài gia súc, chủ yếu lồi nhai lại bị nguồn mang trùng chủ yếu (Amstrong cs., 1996) Các chủng vi 21 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 khuẩn EHEC không gây bệnh cho vật mang trùng, nguồn dự trữ tự nhiên làm phát tán mầm bệnh thông qua phân, làm vấy nhiễm vào nước, sữa, thịt tươi sống, rau củ, môi trường EHEC tồn thịt tươi sống thịt nấu chín; với số lượng thấp gây tử vong cho người già trẻ nhỏ (Griffin Tauxe, 1991) Khảo sát trại chăn ni bị Hoa Kỳ cho thấy chủng vi khuẩn E coli O45, O121 diện với tỉ lệ 14,6%, 2,0% (Dewsbury cs., 2015) Ngoài ra, nhiều ca bệnh nguy hiểm trẻ em EHEC gây ghi nhận nhiều quốc gia, có Nhật Bản từ 20102013 (Kanayama cs., 2005) Từ đó, cho thấy nguy hiểm sức khỏe cộng đồng chủng vi khuẩn EHEC vai trò trung gian quan trọng bò việc phát tán mầm bệnh Bên cạnh đó, việc điều trị bệnh vi khuẩn E coli người động vật ngày trở nên phức tạp kháng thuốc vi khuẩn E coli Medina cs (2011) phân tích chủng E coli EHEC phân lập gia súc châu Âu châu Mỹ cho thấy chủng có đề kháng cao với kháng sinh tetracycline, trimethoprim/sulfamethoxazole Heydari cs (2020) xác định có đề kháng kháng sinh chủng E coli EHEC phân lập người bệnh tiêu chảy Iran; vi khuẩn đề kháng với ampicillin, ciprofloxacin (54.5%) Ngoài ra, EHEC đề kháng kháng sinh lây nhiễm sang người bị phát tán môi trường từ nguồn phân gia súc (Nguyen Sperandio, 2012) Điều cho thấy mức độ nguy hiểm EHEC đề kháng thuốc sức khoẻ người; đặc điểm đề kháng kháng sinh EHEC phân lập bò cần nghiên cứu Tại Bến Tre, chăn ni bị ngày phát triển chọn làm phương thức chăn nuôi giúp người nông dân thoát nghèo phát triển kinh tế Tuy nhiên, điều kiện vệ sinh, chăn ni cịn hạn chế, dễ làm lây lan phát tán mầm bệnh đàn gia súc động vật - người Do nghiên cứu thực nhằm mục đích cung cấp thông tin đặc điểm diện khả đề kháng kháng sinh vi 22 khuẩn E coli O45, O121, O157 phân lập đàn bò II NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu - Phân lập vi khuẩn Escherichia coli từ mẫu phân bò tất độ tuổi, giống, giới tính huyện Ba Tri, tỉnh Bến Tre - Định danh vi khuẩn Enterohaemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O45, O121, O157 phương pháp PCR với đoạn mồi đặc hiệu - Xác định đề kháng kháng sinh chủng EHEC định danh phương pháp kháng sinh đồ 2.2 Phương pháp nghiên cứu - Phương pháp thu thập mẫu Điều tra cắt ngang thực với tổng số mẫu dự kiến tính theo công thức Thrusfield (2018) tỷ lệ lưu hành E coli O157 phân bò Đồng sông Cửu Long nghiên cứu trước 2,1% (Ly cs., 2009) Tổng số mẫu phân bò dự kiến thu thập 32 mẫu Tuy nhiên, trình khảo sát thu thập 121 mẫu phân bị khoẻ lấy hộ chăn ni bị huyện Ba Tri, tỉnh Bến Tre Bò lấy mẫu bao gồm bò thịt bò sữa HF tất lứa tuổi địa bàn khảo sát Đĩa kháng sinh chuẩn sử dụng công ty Nam Khoa (Việt Nam): amikacin (Ak) 30 μg, ampicillin (Am) 10 μg, amoxicillin/clavulanic acid (Ac) 20/10 μg, bactrim (Bt) 1,25/23,75 μg, ceftazidime (Cz) 30 μg, colistin (Co) 10 μg, doxycycline (Dx) 30 μg, ofloxacin (Of) μg, streptomycin (Sm) 10 μg, tetracycline (Te) 30 μg - Phân lập vi khuẩn E coli từ phân bò Phân bò khoẻ lấy trực tiếp từ trực tràng găng tay vô trùng Sau đó, mẫu phân chuyển vào bọc nilon vơ trùng, ghi ký hiệu, bảo quản điều kiện lạnh 2-8oC, đưa phịng thí nghiệm phân tích 24 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 Mẫu phân sau thu thập tiến hành phân lập vi khuẩn E coli theo TCVN:5155-90 dựa theo miêu tả Barrow Feltham (2003) Mỗi mẫu phân lấy 25g cho vào môi trường tăng sinh Buffer peptone water (BPW, Merck, Đức), ủ 37oC 24 Sau đó, mẫu tăng sinh cấy môi trường chuyên biệt Macconkey (MC, Merck, Đức), ủ 37oC 24 Chọn tất khuẩn lạc điển hình vi khuẩn E coli môi trường MC cấy lại môi trường MC, ủ 37oC 24 Khuẩn lạc E coli nghi ngờ kiểm tra đặc điểm sinh hóa trên: mơi trường KIA (Kligler Iron Agar), Indole, VP (Voges – Proskauer), MR (Methyl Red) Simmons Citrate (Merck, Đức) - Phương pháp định danh vi khuẩn EHEC O45, O121, O157 phương pháp PCR Ly trích DNA Tất chủng E coli khẳng định sau kiểm tra sinh hóa, tăng sinh mơi trường Tryptycase soy agar (TSA, Merck, Đức) ly trích DNA phương pháp shock nhiệt Soumet cs (1994) DNA khn mẫu sau ly trích trữ -20°C Thực phản ứng PCR Phản ứng PCR sử dụng kit Mastermix 2X (Promega, Mỹ) với tổng thể tích 25µl: Mastermix 2X (12,5µl), mồi xi (F: 0.5µl), mồi ngược (R: 0,5µl), nước tinh khiết (9,5µl), DNA (2 µl) Chu trình nhiệt thực phản ứng PCR: 95oC - phút; 30 chu kỳ: 94oC - 30 giây, 57oC - 90 giây, 72oC - 90 giây; 72oC - phút Trình tự nucleotide cặp primer sử dụng nghiên cứu thể qua Bảng Bảng Trình tự nucleotide cặp mồi primer định danh EHEC O45, O121, O121 Chủng O45 O121 O157 Kích thước (bp) Trình tự primer (5’-3’) F: TGCAGTAACCTGCACGGGCG R: AGCAGGCACAACAGCCACTACT F: TCCAACAATTGGTCGTGAAA 628 R: AGAAAGTGTGAAATGCCCGT F: CAGGTGAAGGTGGAATGGTTGTC R:TTAGAATTGAGACCATCCAATAAG Sản phẩm PCR điện di hiệu điện 50V, 60 phút đọc kết tia UV để xác định diện gene mã hoá Mẫu đối chứng dương: DNA vi khuẩn E coli O45, O121, O157; mẫu đối chứng âm: nước tinh khiết không chứa enzyme DNA RNA - Phương pháp khảo sát nhạy cảm vi khuẩn EHEC O45, O121 kháng sinh Kiểm tra đề kháng vi khuẩn E coli kháng sinh dựa theo phương pháp khuếch tán đĩa thạch Kirby-Bauer (CLSI, 2019) Vi khuẩn khuyếch tán đĩa thạch MullerHilton agar (MHA, Merck, Đức) nồng độ tương 255 296 Tài liệu tham khảo DebRoy cs., 2011 Bertrand Roig, 2007 đương ống Mac Farland 0.5 (106-108 CFU/ml); sau đó, đĩa kháng sinh đặt lên ủ 37oC 24 Kết đường kính vịng vơ khuẩn so sánh theo tiêu chuẩn CLSI, 2019 - Phương pháp xử lý số liệu Số liệu thu thập xử lý phần mền Excel 2010 Phân tích tỷ lệ phép thử Chi-square Test phần mềm Minitab 16 (ở mức ý nghĩa 5%) III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Sự diện chủng vi khuẩn EHEC O45, O121, O157 bò huyện Ba Tri, Bến Tre 23 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 Kết khảo sát diện chủng EHEC O45, O121, O157 phân lập phân bò huyện Ba Tri tỉnh Bến Tre qua Bảng Bảng Tỷ lệ diện chủng vi khuẩn E.coli O45, O121, O157 bò (n=121) Chủng EHEC Số mẫu dương tính Tỷ lệ (%) E coli O45 4,13a E coli O121 7,44a E coli O157 0,00 Tổng 14 11,57 Các giá trị chữ mũ cột khơng khác khác khơng có ý nghĩa thống kê (P>0,05) Hình Kết điện di sản phẩm PCR xác định chủng vi khuẩn (a) E.coli O45 (255bp) (b) E coli O121 (628bp) M: 100 bp DNA marker; P: đối chứng dương; N: đối chứng âm (a): Giếng 1, 2, 4: (+); Giếng 3:(-); (b): Giếng 1, 2, 4: (+); Giếng 3:(-) Kết cho thấy tỷ lệ lưu hành chủng EHEC tương đối thấp (11,57%) khơng có khác biệt mặt thống kê tỷ lệ diện hai chủng E coli O45 (4,13%) O121 (7,44%) (P>0,05); khơng tìm thấy diện vi khuẩn E coli O157 nghiên cứu Các chủng vi khuẩn EHEC có khả tồn đường ruột loài nhai lại phần hệ vi sinh vật tự nhiên Trong đó, vắng mặt vi khuẩn E coli O157 bị ảnh hưởng độ tuổi vật chủ, hầu hết bò thời điểm khảo sát trưởng thành Gannon cs (2002) ghi nhận E coli O157 diện bê cao hơn bò trưởng thành Đồng thời, thiếu mất các thụ 24 thể Gb3 cần thiết cho sự bám dính của E coli O157 lên các tế bào ruột, từ đó làm suy giảm số lượng vi khuẩn tồn tại, phát triển đường ruột, cũng như số lượng vi khuẩn được đào thải theo phân ngoài (Brown cs., 1997) Nghiên cứu Paddock cs (2012) 216 mẫu phân gia súc Mỹ cho thấy tỷ lệ diện vi khuẩn E coli O45 50% E coli O121 47,69% Mainga cs (2018) khảo sát diện chủng vi khuẩn EHEC bò Nam Phi với tỷ lệ E coli O45 (2.9%) Qua kết nghiên cứu cho thấy bò nguồn mang vi khuẩn E coli O45, O121 nguy hiểm địa bàn khảo sát KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 3.2 Sự diện chủng vi khuẩn E coli O45, O121 bị theo mục đích sử dụng Tại huyện Ba Tri, bị ni với mục đích để lấy thịt lấy sữa Tuy nhiên, Việt Nam nói chung, Đồng sơng Cửu Long khơng có nghiên cứu đặc điểm lưu hành EHEC hai đối tượng bò Do đó, nghiên cứu này, tỷ lệ diện vi khuẩn E coli O45 O121 hai nhóm bị phân tích thể kết qua Bảng Bảng Tỷ lệ diện chủng vi khuẩn E coli O45, O121 bò theo mục đích sử dụng Chủng E coli O45 Giống bị Số mẫu khảo sát Số lượng Chủng E coli O121 Tỷ lệ (%) Số lượng Tỷ lệ (%) Bò thịt 84 1,19 4,76 Bò sữa 37 10,81 13,51 Tổng 121 (P≤ 0,05) Kết khảo sát cho thấy khơng có khác biệt mặt thống kê tỷ lệ diện chủng vi khuẩn E coli O121 bò sữa (13,51%) bò thịt (4,76%) (P> 0,05) Tuy nhiên, diện vi khuẩn E coli O45 bò sữa (10,81%) cao bò thịt (1,19%) khác biệt có ý nghĩa thống kê (P=0,05) Trong khảo sát này, nguyên nhân sai khác số lượng mẫu thu thập chênh lệch hai nhóm bị địa bàn nghiên cứu (do thực tế chăn ni bị thịt nhiều đây) Vì vậy, cần có nghiên cứu với quy mơ lớn để xác định đặc điểm diện chủng EHEC hai nhóm bị tỉnh Bến Tre Kết nghiên cứu thấp kết nghiên cứu Mellor cs (2016) kiểm 4,13 (P>0,05) 7,44 tra mẫu phân thu thập bò thịt, bò sữa Úc, tỷ lệ hiên diện vi khuẩn E coli O45 bò thịt (22,7%), bò sữa (19,6%), chủng O121 bò thịt (21,0%), bò sữa (20,3%) Tuy vậy, kết nghiên cứu bò sữa bò thịt nguồn mang chủng vi khuẩn E coli O45 O121 3.3 Sự diện chủng vi khuẩn E coli O45, O121 bò theo giới tính Một số nghiên cứu giới ghi nhận đặc điểm diện EHEC hai giới tính (đực, cái) bị Do đó, nghiên cứu tỷ lệ diện chủng vi khuẩn E coli O45 O121 dựa giới tính phân tích thể qua Bảng Bảng Tỷ lệ diện chủng vi khuẩn E coli O45, O121 bị theo giới tính Chủng E coli O45 Giới tính Số mẫu khảo sát Số lượng Tỷ lệ (%) Đực 55 Cái 66 Chủng E coli O121 Số lượng Tỷ lệ (%) 1,82 5,45 6,06 9,09 (P>0,05) Tổng 121 Kết nghiên cứu cho thấy có lưu hành chủng vi khuẩn E coli O45 O121 4,13 (P>0,05) 7,44 bò đực bò cái; đồng thời, khơng có khác biệt mặt thống kê tỷ lệ diện 25 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 hai chủng hai giới tính (P>0,05) Lồi nhai lại nguồn mang trùng; đồng thời, tình trạng nuôi nhốt gia súc đực gia súc chuồng làm gia tăng khả vấy nhiễm mầm bệnh Jeffrey cs (2001) ghi nhận chủng vi khuẩn EHEC tồn khoảng 245 ngày máng ăn máng ăn gia súc ổ chứa lâu dài cho vi khuẩn EHEC trang trại Hutchison cs (2005) cho biết tỷ lệ nhiễm chủng vi khuẩn EHEC không bị ảnh hưởng giới tính 3.4 Sự diện chủng vi khuẩn E coli O45, O121 bò theo lứa tuổi Các chủng EHEC ghi nhận có khả diện bê cao bò trưởng thành (Hussein Sakuma, 2005) Do đó, độ tuổi bò thu thập mẫu nghiên cứu phân tích nhằm xác định đặc điểm lưu hành EHEC nhóm tuổi Tuy nhiên, thực tế khảo sát, bò huyện Ba Tri chủ yếu mua để tiếp tục nuôi thịt lấy sữa, nên bò độ tuổi lớn Vì vậy, diện chủng vi khuẩn E coli O45, O121 đàn bò chia làm hai nhóm bị ≤12 tháng tuổi bò >12 tháng tuổi, kết thể qua Bảng Bảng Tỷ lệ diện chủng vi khuẩn E coli O45, O121 bò hai huyện theo lứa tuổi Chủng E coli O45 Chủng E coli O121 Lứa tuổi Số mẫu khảo sát Số lượng Tỷ lệ (%) Số lượng Tỷ lệ (%) ≤ 12 tháng tuổi 0 11,11 >12 tháng tuổi 112 4,46 7,14 Tổng 121 4,13 (P>0,05) Các chủng vi khuẩn E coli O45 tìm thấy bò >12 tháng tuổi với tỷ lệ 4,46% Trong đó, tỷ lệ diện chủng E coli O121 khơng có khác biệt thống kê hai nhóm tuổi (P>0,05) Nguyên nhân số lượng bò ≤12 tháng tuổi khảo sát cịn dẫn đến chênh lệch Ngồi ra, nghiên cứu Vilte cs (2008) cho sữa non bị mẹ có kháng thể IgG lactoferrin có khả đề kháng làm giảm khả gây bệnh chủng vi khuẩn EHEC Donkersgoed cs (1999) nghiên cứu đàn gia súc Canada cho biết tỷ lệ diện vi khuẩn EHEC không phụ thuộc vào yếu tố độ tuổi đàn gia súc Các nghiên cứu khác cần tiếp tục thực huyện Ba Tri tỉnh Bến Tre để xác định xác tỷ lệ diện chủng EHEC bò độ tuổi khác 3.5 Kết khảo sát tính đề kháng kháng sinh chủng vi khuẩn E.coli O45, O121 phân lập kháng sinh 26 7,44 Vi khuẩn EHEC khơng gây bệnh cho bị, tác nhân gây bệnh nguy hiểm người bị vấy nhiễm từ phân bò Đồng thời, đề kháng kháng sinh EHEC lưu hành bị có ảnh hưởng lớn đến khả điều trị bệnh chủng gây người bị vấy nhiễm (Nguyen and Sperandio, 2012) Do đó, chủng vi khuẩn E coli O45, O121 phân lập bò huyện Ba Tri kiểm tra kháng sinh đồ nhằm cung cấp thông tin tham khảo việc lựa chọn kháng sinh điều trị bệnh EHEC gây Kết khảo sát thể qua Bảng Các chủng vi khuẩn E coli O45, O121 nhạy cảm cao với kháng sinh amikacin doxycycline (100%), ofloxacin (85,71%), ceftazidime (71,43%) bactrim, tetracycline (69,29%) (Bảng 6) Các chủng vi khuẩn cịn nhạy cảm cao với kháng sinh chăn nuôi gia súc nhai lại, kháng sinh hạn chế sử dụng ảnh hưởng đến hệ vi sinh vật KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 cỏ Tuy nhiên, chủng biểu đề kháng streptomycin (50,00%), colistin (57,14%) ampicillin (64,29%) Vi khuẩn EHEC đề kháng kháng sinh khả tự đề kháng tự nhiên vi khuẩn, tiếp xúc với tác nhân gây đề kháng kháng sinh xung quanh môi trường (Heydari cs., 2020) Ngoài ra, việc trao đổi mua bán giống tự địa bàn tỉnh Bến Tre tạo điều kiện cho chủng vi khuẩn đề kháng kháng sinh phát tán phạm vi lớn Um cs (2018) phân tích đề kháng kháng sinh E coli EHEC (O26, O103, O111, O145, O157) Pháp ghi nhận đa kháng thuốc ampicillin, streptomycin, nalidixic acid, tetracycline Rubab Oh (2020) phân tích chủng EHEC (O26, O45, O103, O104, O113, O121, O145, O157) phân lập người gia súc cho thấy có tương đồng khả đề kháng kháng sinh chủng người gia súc; chủng đề kháng cao với ampicillin, streptomycin, gentamycin, tetracycline Do đó, việc kiểm soát chủng EHEC đề kháng kháng sinh cần thiết nhằm bảo vệ sức khoẻ vật nuôi người Bảng Kết kiểm tra tính đề kháng sinh chủng vi khuẩn E coli O45, O121 phân lập bò huyện Ba Tri, tỉnh Bến Tre (n= 14) Loại kháng sinh Nhạy Kháng Số mẫu Tỷ lệ (%) Số mẫu Tỷ lệ (%) Amikacin 14 100,00 0,00 Doxycycline 14 100,00 0,00 Ofloxacin 12 85,71 14,29 Amoxicillin/clavulanic acid 11 78,57 21,43 Ceftazidime 10 71,43 28,57 Bactrim* 64,29 35,71 Tetracycline 64,29 35,71 Streptomycin 50,00 50,00 Colistin 42,86 57,14 Ampicillin 35,71 64,29 *Trimethoprim/ sulfamethoxazole IV KẾT LUẬN Trên đàn bò huyện Ba Tri, tỉnh Bến Tre, có lưu hành vi khuẩn EHEC O45 O121, khơng tìm thấy diện chủng EHEC O157 Sự lưu hành chủng E coli O45, O121 không phụ thuộc vào giới tính, độ tuổi; nhiên, diện E coli O45 bò sữa cao bò thịt nghiên cứu Đồng thời, vi khuẩn E.coli O45, O121 có đề kháng cao số kháng sinh colistin ampicillin Cần có nghiên cứu để đánh giá độc lực khả gây bệnh chủng EHEC Lời cảm ơn: Nghiên cứu thực với hỗ trợ Chi cục Chăn nuôi Thú y, đơn vị liên quan tỉnh Bến Tre Nguồn kinh phí thực nghiên cứu từ đề tài cấp tỉnh Sở KHCN Bến Tre 27 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 TÀI LIỆU THAM KHẢO Armstrong G.L., Hollingsworth J., and Morris J.G.Jr., 1996 Emerging foodborne pathogens: Escherichia coli O157:H7 as a model of entry of a new pathogen into the food supply of the developed world. Epidemiol Rev.,18(1): 29-51 Barrow G.I., and Feltham R.K.A., 2003 Cowan and Steel’s manual for identification of medical bacteria Cambridge press, 3rd (ed): 140-142 Bertrand R and Roig B., 2007 Evaluation of enrichmentfree PCR-based detection on the rfbE gene of Escherichia coli O157-application to municipal wastewater Water Res., 41(6): 1280-1286 Brown C.A., Barry G.H., Tong Z., and Micheal P.D., 1997 Experimental Escherichia coli O157:H7 carriage in calves Appl Environ Microbiol., 63(1): 27-32 CLSI, 2019 Performance Standard for AntimicrobialSusceptibility Testing 28th edition Clinical and Laboratory Standard Institute M100S, Wayne, PA, USA Debroy C., Robert E., and Fratamico P.M., 2011 Detection of O antigens in Escherichia coli Anim Health Res Rev., 12(2): 169-185 Dewsbury D.M.A., Renter D.G., Shridhar P.B., Noll L.W., Shi X., Nagaraja T.G., and Cernicchiaro N., 2015 Summer and winter prevalence of Shiga toxin–producing Escherichia coli (STEC) O26, O45, O103, O111, O121, O145, and O157 in feces of feedlot cattle. Foodborne Pathog Dis., 12(8): 726-732 Donkersgoed V.J., Berg J., Potter A., Hancock D., Besser T., Rice D., LeJeune J., and Klashinsky S., 2001 Environmental sources and transmission of Escherichia coli O157 in feedlot cattle Can Vet J., 42(9), pp 714-20 Gannon V.P.J., Graham T.A., King R., Michel P., Read S., Ziebell K., and Johnson R.P., 2002 Escherichia coli O157:H7 infection in cows and calves in a beef cattle herd in Alberta, Canada Epidemiol Infect., 129: 163–172 10 Griffin P.M and Tauxe R.V., 1991 The epidemiology of infections caused by Escherichia coli O157: H7, other enterohemorrhagic E coli and the associated hemolytic uremic syndrome Epidemiol Rev., 13: 60-98 11 Heydari F.E., Mojtaba B., Moshtaghi H., and Sami M., 2020 Prevalence and antibiotic resistance profile of Shiga toxinproducing Escherichia coli isolated from diarrheal samples Iran J Microbiol., 12(4): 289-295 12 Hussein H.S., and Sakuma T., 2005 Prevalence of shiga toxin-producing Escherichia coli in dairy cattle and their products J Dairy Sci., 88(2): 450-465 13 Hutchison M.L., Walters L.D., Avery S.M., Munro F., and Moore A., 2005 Analyses of livestock production, waste storage, and pathogen levels and prevalences in farm manures. Appl Environ Microbiol., 71(3): 1231-1236 14 Jeffrey T.L.,  Besser T.E.,  and Hancock D.D., 2001 Cattle water troughs as reservoirs of Escherichia coli O157 Appl Environ Microbiol., 67(7): 3053-3057 15 Kanayama A., Yahata Y., Arima Y., Takahashi T., Saitoh T., Kanou K., Kawabata K., Sunagawa T., Matsui T., and Oishi 28 K., 2015 Enterohemorrhagic Escherichia coli outbreaks related to childcare facilities in Japan, 2010-2013 BMC Infect Dis., 15: 539 16 Ly T.L.K., Tran T.P., Nguyen T.T., Iwata T., Kobayashi H., Okatani A.T., Taniguchi T., Ha T.T., and Hayashidani H., 2009 Prevalence of Escherichia coli O157 from cattle and foods in the Mekong Delta, Vietnam J Vet Epidemiol., 13(2): 107-113 17 Mainga A.O., Cenci Goga B.T., Malahlela M.N., Tshuma T., Kalake A., and Karama M., 2018 Occurrence and characterization of seven major Shiga toxin producing Escherichia coli serotypes from healthy cattle on cow–calf operations in South Africa. Zoonoses and Public health, 65(7): 777-789 18 Medina A., Horcajo P., Jurado S., Fuente R.D.L., Ruiz-SantaQuiteria J.S., Dominguez-Bernal G., and Orden J.A., 2011 Phenotypic and genotypic characterization of antimicrobial resistance in enterohemorrhagic Escherichia coli and atypical enteropathogenic E coli strains from ruminants J Vet Diagn Invest., 23: 91–95 19 Mellor G.E., Fegan N., Duffy L.L., McMillan K.E., Jordan D., and Barlow R.S., 2016 National survey of shiga toxin– producing Escherichia coli serotypes O26, O45, O103, O111, O121, O145, and O157 in Australian beef cattle feces.  J Food Prot., 79 (11): 1868–1874 20 Nguyen Y., and Sperandio V., 2012 Enterohemorrhagic  E coli  (EHEC) pathogenesis Front Cell Infect Microbiol., 2(90): 1-7 21 Paddock Z., Shi X., Bai J., and Nagaraja T.G., 2012 Applicability of a multiplex PCR to detect O26, O45, O103, O111, O121, O145, and O157 serogroups of Escherichia coli in cattle feces Vet Microbiol., 156: 381-388 22 Rubab M., and Oh D.H., 2020 Virulence characteristics and antibiotic resistance profiles of shiga toxin-producing Escherichia coli isolates from diverse sources Antibiotics, 9(9): 587-602 23 Soumet C., Ermel G., Fach P., and Colin P., 1994 Evaluation of different DNA extraction procedures for the detection of Salmonella from chicken products by polymerase chain reaction. Lett Appl Microbiol., 19(5): 294-298 24 Thrusfield M., 2018 Veterinary epidemiology 4th Edition John Wiley and Sons Ltd., UK., 276-277 25 Um M.M., Hubert B., Monique K., Eric O., and Delphine B., 2018 Antimicrobial resistance profiles of Enterohemorrhagic and Enteropathogenic Escherichia coli of serotypes O157:H7, O26:H11, O103:H2, O111:H8, O145:H28 compared to Escherichia coli isolated from the same adult cattle Microb Drug Resist., 24(6): 852-859 26 Vilte D.A., Larzábal M., Cataldi Á.A., and Mercado E.C., 2008 Bovine colostrum contains immunoglobulin G antibodies against intimin, EspA, and EspB and inhibits hemolytic activity mediated by the type three secretion system of attaching and effacing Escherichia coli.  Clin Vaccine Immunol., 15(8): 1208-1213 Ngày nhận 1-6-2021 Ngày phản biện Ngày đăng 15-8-2021 ... KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Sự diện chủng vi khuẩn EHEC O45, O121, O157 bò huyện Ba Tri, Bến Tre 23 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVIII SỐ - 2021 Kết khảo sát diện chủng EHEC O45, O121, O157 phân... phân bò huyện Ba Tri tỉnh Bến Tre qua Bảng Bảng Tỷ lệ diện chủng vi khuẩn E .coli O45, O121, O157 bò (n=121) Chủng EHEC Số mẫu dương tính Tỷ lệ (%) E coli O45 4,13a E coli O121 7,44a E coli O157. .. đó, vi? ??c kiểm soát chủng EHEC đề kháng kháng sinh cần thiết nhằm bảo vệ sức khoẻ vật nuôi người Bảng Kết kiểm tra tính đề kháng sinh chủng vi khuẩn E coli O45, O121 phân lập bò huyện Ba Tri, tỉnh