Xây dựng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ định lượng quetiapin trong huyết tương người

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ TRANG XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ ĐỊNH LƢỢNG QUETIAPIN TRONG HUYẾT TƢƠNG NGƢỜI LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC HÀ NỘI 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ TRANG XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ ĐỊNH LƢỢNG QUETIAPIN TRONG HUYẾT TƢƠNG NGƢỜI LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 Người hướng dẫn khoa học: TS Tạ Mạnh Hùng HÀ NỘI 2021 LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Tạ Mạnh Hùng – Cục quản lý Dược - Bộ Y tế, người thầy tận tình hướng dẫn quan tâm giúp đỡ suốt trình thực hồn thành luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn thầy cô công tác Bộ mơn Hóa Phân tích - Độc chất dạy giúp đỡ thời gian học tập trường Tôi xin cảm ơn Ban giám đốc - Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương tạo điều kiện cho học tập nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn tới đồng nghiệp Trung tâm đánh giá Tương đương sinh học, Trung tâm Dược điển Dược thư Việt Nam - Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương động viên, giúp đỡ chia sẻ với tơi q trình thực luận văn Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè giúp đỡ động viên để tơi có đủ nghị lực, tâm hồn thành luận văn Một lần nữa, tơi xin chân thành cảm ơn hỗ trợ, động viên, khích lệ quý thầy cô, quan, bạn bè gia đình giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Hà nội, ngày 31 tháng 03 năm 2021 Nguyễn Thị Trang MỤC LỤC DANH MỤC CÁC HÌNH .6 DANH MỤC CÁC BẢNG .7 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan quetiapin 1.1.1 Cơng thức cấu tạo tính chất lý hóa .3 1.1.2 Các đặc tính dược lý, dược động học quetiapin 1.1.3 Các phương pháp định lượng quetiapin dịch sinh học 1.2 Tổng quan phƣơng pháp LC-MS/MS phân tích dịch sinh học 1.2.1 lý m u 1.2.2 Sắc ký lỏng (LC) .8 1.2.3 Chuẩn nội 1.2.4 Phân tích khối (MS/MS) 11 1.3 Thẩm định phƣơng pháp phân tích dịch sinh học 14 1.3.1 Độ đặc hiệu 14 1.3.2 Ảnh hưởng m u 14 1.3.3 Độ nhiễm chéo 15 1.3.4 Giới hạn định lượng 15 1.3.5 Đường chuẩn khoảng tuyến tính 15 1.3.6 Độ độ xác ngày khác ngày 15 1.3.7 Độ thu hồi hoạt chất chuẩn nội 16 1.3.8 Độ ổn định hoạt chất dịch sinh học 16 CHƢƠNG NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .17 2.1 Nguyên liệu, trang thiết bị nghiên cứu .17 2.1.1 Chất chuẩn, dung mơi, hóa chất 17 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ phân tích 17 2.2 Đối tƣợng nghiên cứu 18 2.3 Nội dung phƣơng pháp nghiên cứu .18 2.3.1 ây dựng tối ưu hóa phương pháp định lượng quetiapin 18 2.3.2 Thẩm định phương pháp phân tích 21 2.3.3 Kiểm chứng tính khả thi phương pháp phân tích số m u thực 24 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 25 3.1 Xây dựng phƣơng pháp phân tích 25 3.1.1 ây dựng điều kiện khối phổ phân tích quetiapin 25 3.1.2 ây dựng điều kiện sắc kí lỏng x lý m u 27 3.1.3 ác định phương pháp phân tích QTP LC-MS/MS 36 3.2 Thẩm định phƣơng pháp phân tích 37 3.2.1 Độ thích hợp hệ thống LC-MS/MS 37 3.2.2 Độ đặc hiệu 38 3.2.3 Ảnh hưởng m u 40 3.2.4 Độ nhiễm chéo 41 3.2.5 Đường chuẩn - Khoảng tuyến tính 42 3.2.6 Giới hạn định lượng (LLOQ) 43 3.2.7 Độ độ xác 45 3.2.8 T lệ thu hồi hoạt chất chuẩn nội 49 3.2.9 Độ ổn định m u huyết tương điều kiện bảo quản khác 51 3.3 Kiểm chứng tính khả thi phƣơng pháp phân tích số mẫu thực 57 CHƢƠNG BÀN LUẬN 59 4.1 Về phƣơng pháp xây dựng quy trình phân tích QTP .59 4.2 Về kết thẩm định phƣơng pháp 60 4.3 Về khả triển khai thực tế quy trình phân tích QTP 60 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .62 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo quetiapin .3 Hình 1.2 Kĩ thuật xử lý mẫu phân tích dịch sinh học LC-MS/MS Hình 1.3 Ảnh hưởng nồng độ IS đến tính tuyến tính .10 Hình 1.4 Ion hóa phun sương điện tử (ESI) 12 Hình 1.5 Ion hóa hóa học áp suất khí (APCI) 12 Hình 1.6 Bộ phân tích tứ cực 13 Hình 1.7 Bộ phân tích tứ cực chập ba 13 Hình 1.8 Bộ phân tích bẫy ion 13 Hình 3.1 Phổ đồ dung dịch chuẩn QTP với chế độ ESI (+) 25 Hình 3.2 Các mảnh ion Quetiapin 27 Hình 3.3 Giản đồ lượng phân mảnh [QTP+H]+ 27 Hình 3.4 Sắc ký đồ khảo sát phân tích QTP cột sắc ký 28 Hình 3.5 Sắc ký đồ với phương pháp xử lý mẫu 29 Hình 3.6 Xác suất đạt giá trị mục tiêu Y1, Y2 theo X1, X2 32 Hình 3.7 Sắc ký đồ mẫu phân tích với chuẩn nội khác 34 Hình 3.8 SKĐ mẫu kiểm tra độ thích hợp hệ thống .37 Hình 3.9 SKĐ thẩm định độ đặc hiệu 39 Hình 3.10 Đồ thị phần dư đường chuẩn 43 Hình 3.11 Đường cong nồng độ - thời gian QTP HT NTN 58 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thông số dược động học quetiapin số nghiên cứu Bảng 2.1 Chuẩn bị mẫu xây dựng đường chuẩn 22 Bảng 2.2 Chuẩn bị mẫu LLOQ huyết tương .22 Bảng 2.3 Chuẩn bị mẫu QC huyết tương 23 Bảng 2.4 Cách chuẩn bị mẫu SST huyết tương 23 Bảng 3.1 Kết khảo sát hai loại cột sắc ký 28 Bảng 3.2 So sánh phương pháp xử lý mẫu 29 Bảng 3.3 Thí nghiệm khảo sát kết biến phụ thuộc 30 Bảng 3.4 Kết phân tích phương sai mơ hình Y1 31 Bảng 3.5 Kết phân tích phương sai mơ hình Y2 31 Bảng 3.6 Kết kiểm chứng giá trị Y1 Y2 33 Bảng 3.7 Điều kiện khối phổ chuẩn nội 34 Bảng 3.8 Kết xây dựng đường chuẩn với nồng độ IS .35 Bảng 3.9 Điều kiện sắc kí lỏng phân tích QTP 36 Bảng 3.10 Điều kiện khối phổ phân tích QTP 36 Bảng 3.11 Kết đánh giá độ thích hợp hệ thống .38 Bảng 3.12 Ảnh hưởng mẫu trắng thời điểm trùng Rt QTP IS .39 Bảng 3.13 Kết đánh giá ảnh hưởng mẫu 40 Bảng 3.14 Kết đánh giá độ nhiễm chéo 42 Bảng 3.15 Kết khảo sát xây dựng đường chuẩn 43 Bảng 3.16 Đáp ứng pic mẫu LLOQ mẫu Zero Rt QTP 44 Bảng 3.17 Độ đúng, độ xác mẫu LLOQ 44 Bảng 3.18 Kết khảo sát độ độ xác ngày .45 Bảng 3.19 Kết khảo sát độ xác khác ngày 46 Bảng 3.20 Kết khảo sát độ độ xác mở rộng batch 47 Bảng 3.21 Độ lặp lại tiêm lại 48 Bảng 3.22 Kết khảo sát tỷ lệ thu hồi QTP 50 Bảng 3.23 Kết khảo sát tỷ lệ thu hồi IS 50 Bảng 3.24 Độ ổn định dài ngày dung dịch chuẩn gốc QTP 51 Bảng 3.25 Độ ổn định dài ngày dung dịch chuẩn gốc IS .52 Bảng 3.26 Độ ổn định thời gian ngắn dung dịch chuẩn gốc QTP 53 Bảng 3.27 Độ ổn định thời gian ngắn dung dịch IS làm việc 53 Bảng 3.28 Độ ổn định mẫu huyết tương sau chu kỳ đông rã 54 Bảng 3.29 Độ ổn định mẫu huyết tương 55 Bảng 3.30 Độ ổn định HT autosampler 56 Bảng 3.31 Nồng độ QTP huyết tương NTN .57 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Giải thích ACN Acetonitril APCI Ion hóa hóa học áp suất khí (Atmospheric pressure chemical ionization) AUC Diện tích đường cong (Area under the curve) Cmax Nồng độ đỉnh (Maximum concentration) CV Hệ số biến thiên (Coefficient of variation) EMA Cơ quan quản lý thuốc Châu Âu (European Medicines Agency) ESI Ion hóa kiểu phun sương điện tử (Electrospray ionization) GC-MS GLP Sắc ký khí ghép nối khối phổ (Gas chromatography - mass spectrometry) Thực hành tốt phịng thí nghiệm (Good laboratory practice) HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High performance liquid chromatography) HQC Mẫu kiểm tra nồng độ cao (High quality control samples) HT Huyết tương IS Chuẩn nội (Internal standard) LC Sắc ký lỏng (Liquid chromatography) LC-MS LC-MS/MS LC-UV Sắc ký lỏng ghép nối khối phổ (Liquid chromatography - mass spectrometry) Sắc ký lỏng ghép nối khối phổ hai lần (Liquid chromatography - mass spectrometry/mass spectrometry) Sắc ký lỏng với detector tử ngoại (Liquid chromatography - ultraviolet) LLOQ Giới hạn định lượng (Lower limit of quantification) LQC Mẫu kiểm tra nồng độ thấp (Low quality control samples) MeOH Methanol MQC Mẫu kiểm tra nồng độ trung bình (Medium quality control samples) MW Trọng lượng phân tử (Molecular Weight) NTN Người tình nguyện PPT K thuật tủa protein (Protein Precipitation) QTP Quetiapin RE Sai số dư (Residual Error) S/N Tín hiệu/Nhiễu (Signal/Noise) SKĐ Sắc ký đồ SQC Mẫu kiểm tra bổ sung TDKD Tác dụng kéo dài TĐSH Tương đương sinh học Tmax ULOQ Thời gian đạt nồng độ đỉnh Giới hạn định lượng (Upper limit of quantification) US-FDA Cơ quan quản lý dược phẩm/thực phẩm M (The United States Food and Drug Administration) UV-VIS Tử ngoại- khả kiến (Ultraviolet-visible ) VKNTTW Viện kiểm nghiệm thuốc Trung ương Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 1H NTN11032021\1H.wiff Unknown 03/11/2021 5:04:59 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 4935975 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 610585 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.504(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.477 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.124 (Unknown) 38 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.504 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.477 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 1.5H NTN11032021\1.5H.wiff Unknown 03/11/2021 5:07:35 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 5064268 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 1429240 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.504(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.479 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.282 (Unknown) 39 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.504 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.479 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 2H NTN11032021\2H.wiff Unknown 03/11/2021 5:10:11 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 4957367 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 2808214 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.504(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.475 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.566 (Unknown) 40 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.504 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.475 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 3H NTN11032021\3H.wiff Unknown 03/11/2021 5:12:47 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 5046785 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 4133465 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.503(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.477 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.819 (Unknown) 41 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.503 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.477 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 4H NTN11032021\4H.wiff Unknown 03/11/2021 5:15:23 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 4951682 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 6515687 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.505(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.478 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 1.316 (Unknown) 42 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.505 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.478 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 5H NTN11032021\5H.wiff Unknown 03/11/2021 5:17:59 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 4897854 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 9196210 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.505(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.477 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 1.878 (Unknown) 43 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.505 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.477 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 6H NTN11032021\6H.wiff Unknown 03/11/2021 5:20:38 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 4853622 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 7386210 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.505(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.478 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 1.522 (Unknown) 44 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.505 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.478 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 7H NTN11032021\7H.wiff Unknown 03/11/2021 5:23:14 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 5105762 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 6158961 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.504(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.479 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 1.206 (Unknown) 45 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.504 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.479 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 8H NTN11032021\8H.wiff Unknown 03/11/2021 5:25:50 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 5147846 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 5595632 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.505(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.476 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 1.087 (Unknown) 46 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.505 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.476 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 10H NTN11032021\10H.wiff Unknown 03/11/2021 5:28:23 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 4797527 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 4026020 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.505(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Unknown) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.477 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.839 (Unknown) 47 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.505 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.477 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 12H NTN11032021\12H.wiff Quality Control 03/11/2021 5:30:59 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 4964683 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 2269410 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.504(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Quality Control) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.479 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.457 (Quality Control) 48 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.504 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.479 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 16H NTN11032021\16H.wiff Quality Control 03/11/2021 5:33:32 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 5074793 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 1275247 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.504(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Quality Control) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.477 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.251 (Quality Control) 49 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.504 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.477 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 24H NTN11032021\24H.wiff Quality Control 03/11/2021 5:36:05 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 4978429 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 409898 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.505(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Quality Control) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.475 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.082 (Quality Control) 50 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.505 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.475 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 36H NTN11032021\36H.wiff Quality Control 03/11/2021 5:38:41 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 5127353 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 151637 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.506(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Quality Control) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.477 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.030 (Quality Control) 51 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.506 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.477 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A Phụ lục ANALYST SAMPLE REPORT Sample Name Data File Sample Type Acquisition Date Acquisition Method Project Result Table Instrument Code Operator 48H NTN11032021\48H.wiff Quality Control 03/11/2021 5:41:17 PM Quetiapine.dam Validation\2020_Quetiapine NTN11032021.rdb VKN/TĐSH/53.05 tdsh_53.05-Trang Internal Standard Carbamazepine Injection Vial Injection Volume Algorithm Used Dilution Factor Weight to Volume Instrument Name Area (cps) 5057479 Target Analyte Quetiapine Area (cps) 65388 Carbamazepine (Internal Standard) RT (Exp RT): 0.504(0.501) Concentration: 1.00 ng/mL Sample Type: (Quality Control) Quetiapine (384.000/253.000 Da) RT (Exp RT): 0.476 (0.462) Calculated conc: 0.0 ng/ml Area Ratio: Sample Type: 0.013 (Quality Control) 52 IntelliQuan 0.00 Sciex QTRAP 6500+ RT (min) 0.504 Target conc (ng/mL) 1.00 Calc Conc (ng/mL) - RT (min) 0.476 Target conc (ng/mL) N/A Calc Conc (ng/mL) N/A ... chứa quetiapin thị trường Vì vậy, tiến hành thực đề tài: ? ?Xây dựng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ định lượng quetiapin huyết tương người? ?? với mục tiêu cụ thể sau: 1 Xây dựng thẩm định phương pháp. .. 25 3.1 Xây dựng phƣơng pháp phân tích 25 3.1.1 ây dựng điều kiện khối phổ phân tích quetiapin 25 3.1.2 ây dựng điều kiện sắc kí lỏng x lý m u 27 3.1.3 ác định phương pháp phân... HT Huyết tương IS Chuẩn nội (Internal standard) LC Sắc ký lỏng (Liquid chromatography) LC-MS LC-MS/MS LC-UV Sắc ký lỏng ghép nối khối phổ (Liquid chromatography - mass spectrometry) Sắc ký lỏng