Bài viết trình bày kết quả nghiên cứu về ảnh hưởng của một số yếu tố môi trường đến khả năng nhân nhanh chồi cây Hoàng tinh hoa đỏ - là vị thuốc quý được sử dụng phổ biến trong Y học cổ truyền phương Đông. Nghiên cứu đã xác định được ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng, nồng độ đường sucrose, adenin bổ sung vào môi trường nuôi cấy để đạt hiệu quả cao trong giai đoạn nhân nhanh chồi.
Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 07(128)/2021 CqSWEET genes contain ve or six exons, as rmed in other plant species Our expression analysis indicated that the CqSWEET genes had di erentially expressed in the major organs Interestingly, CqSWEET09 and 20 have been noted to exclusively express in both owers and fruits Taken together, our study could provide a solid foundation for further investigation of the function of the CqSWEET genes related to the mechanism of stress response in quinoa Keywords: Chenopodium quinoa, big data, SWEET, bioinformatics Ngày nhận bài: 25/6/2021 Ngày phản biện: 02/7/2021 Người phản biện: TS Trần Đức Trung Ngày duyệt đăng: 30/7/2021 ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ MƠI TRƯỜNG ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN NHANH CHỒI CÂY HỒNG TINH HOA ĐỎ (Polygonatum kingianum) Nguyễn ị Xuyên1, Đinh Trường Sơn2, Phan úy Hiền1, Đinh anh Giảng1, Nguyễn ị Hương1, Vũ Hồi Sâm1* TĨM TẮT Bài báo trình bày kết nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố môi trường đến khả nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ - vị thuốc quý sử dụng phổ biến Y học cổ truyền phương Đông Nghiên cứu xác định ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng, nồng độ đường sucrose, adenin bổ sung vào môi trường nuôi cấy để đạt hiệu cao giai đoạn nhân nhanh chồi Kết nghiên cứu cho thấy, môi trường MS (1962) + 1,0 mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA + 40g/L đường sucrose + mg/L adenine mơi trường thích hợp để nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ in vitro Tỷ lệ tạo cụm chồi đạt 100% với 6,2 chồi/mẫu, cụm chồi lớn sinh trưởng tốt sau tuần ni cấy Từ khóa: Hồng tinh hoa đỏ, chất điều hòa sinh trưởng, kinetin, sucrose, adenin I ĐẶT VẤN ĐỀ Hoàng tinh hoa đỏ (Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl), loài thuốc quý sử dụng phổ biến Y học cổ truyền với tên gọi “ ục hồng”, thuộc dạng thân thảo sống lâu năm, có phân bố tự nhiên Myanmar, Lan, Trung Quốc Ở Việt Nam, Hoàng tinh hoa đỏ phát số tỉnh miền núi, nơi có độ cao 1.300 1.600 m so với mực nước biển Do môi trường sống bị thu hẹp bị khai thác liên tục nhiều năm nên Hoàng tinh hoa đỏ đưa vào Sách đỏ Việt Nam năm 2007 (Bộ Khoa học Công nghệ, 2007) Gần đây, nhiều tác dụng chữa bệnh từ thân rễ Hoàng tinh hoa đỏ phát hiện, đặc biệt tác dụng ngăn chặn phát triển bệnh tiểu đường (Lu et al., 2016; Yan et al., 2017) Nhiều sản phẩm thảo dược có nguồn gốc hồng tinh hoa đỏ đời thúc đẩy nhu cầu dược liệu phát triển diện tích trồng trọt Các biện pháp nhân giống từ hạt Viện Dược liệu, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tác giả 24 từ hom (thân rễ) tỏ hiệu quả, đậu thấp, khả nảy mầm hạt kém, từ hom (3 - đốt) năm tuổi thu Ứng dụng kỹ thuật nhân giống in vitro Hoàng tinh hoa đỏ xem giải pháp tối ưu để sản xuất nhiều giống thời gian ngắn Một số kết nghiên cứu nhân giống in vitro Hoàng tinh hoa đỏ công bố, nhiên kết đạt chồi dạng chồi sơ cấp (La Việt Hồng ctv., 2017), hay hệ số nhân thấp, hiệu chưa cao (Yang et al., 2016; Hồng Lê u Hà, 2017) Với mục đích nâng cao hệ số nhân chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ, thực hiện: “Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố môi trường nuôi cấy đến khả nhân nhanh chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ” nhằm xác định mơi trường thích hợp cho giai đoạn nhân nhanh chồi góp phần nâng cao hiệu quy trình nhân giống in vitro lồi Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 07(128)/2021 II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Chồi sơ cấp Hoàng tinh hoa đỏ in vitro tái sinh (sau tuần nuôi cấy) từ mầm củ Hoàng tinh hoa đỏ in vivo năm tuổi 2.2 Phương pháp nghiên cứu Sử dụng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật thường quy, mơi trường Murashige and Skoog (1962), có bổ sung chất điều tiết sinh trưởng, pH môi trường 5,8 trước hấp khử trùng 121oC 20 phút, áp suất atm Các thí nghiệm in vitro tiến hành nuôi cấy điều kiện: Nhiệt độ phịng ni: 25 ± 2oC, cường độ ánh sáng: 2.000 - 3.000 Lux, chế độ chiếu sáng: 16h sáng/8h tối, độ ẩm phịng ni ~70% 2.2.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm - Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng (CĐHST) đến khả nhân nhanh chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ thực BAP Kinetin (Kin) đơn chất với dải nồng độ từ - 2,0 mg/L, tổ hợp Kin IBA/α-NAA (0-0,4 mg/L) mơi trường MS (1962) có bổ sung 30 g/L sucrose - Khảo sát ảnh hưởng nồng độ đường sucrose đến khả nhân nhanh chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ thực với công thức (0, 30, 40, 50, 60g/L) môi trường MS có bổ sung CĐHST tốt (MS + mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA) - Khảo sát ảnh hưởng nồng độ adenin sulphat với công thức (0, 5, 10, 15, 20 mg/L) môi trường MS có bổ sung hàm lượng đường CĐHST tốt (MS + mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA + 40 g/L đường sucrose) Chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ tạo cụm chồi (%), số chồi /mẫu (chồi), đường kính cụm chồi (cm), chiều cao TB chồi (cm) ghi nhận sau tuần ni cấy í nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, nhắc lại lần, thống kê 10 mẫu/1 công thức/lần nhắc lại 2.2.2 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu theo dõi sau tuần nuôi cấy xử lý thống kê phần mềm Excel 2016 phần mềm SPSS (Statistical Program Scienti c System) 20 Giá trị bảng trình bày là: Mean ± SD lần lặp lại; chữ nhỏ a, b, c, biểu diễn phân hạng theo Duncan’s Test, a max giảm dần theo thứ tự bảng chữ 2.3 ời gian địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực từ tháng 01 năm 2020 đến tháng năm 2020 Trung tâm Nghiên cứu nguồn gen giống Dược liệu Quốc gia III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Ảnh hưởng BAP/Kin đến khả nhân nhanh chồi in vitro BAP, Kin chất điều hòa sinh trưởng thuộc nhóm cytokinin, có hoạt tính sinh học cao, dùng để thúc đẩy phân chia lớn lên mô nuôi cấy Kết nghiên cứu ảnh hưởng BAP/Kin đến khả nhân nhanh chồi in vitro Hồng tinh hoa đỏ trình bày bảng Bảng Ảnh hưởng BAP/Kin đến khả nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần) Công thức CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8 CT9 BAP (mg/L) 0,5 1,0 1,5 2,0 - Kin (mg/L) 0,5 1,0 1,5 2,0 CV (%) Tỷ lệ tạo cụm chồi (%) 53,33 66,67 73,33 83,33 76,67 83,33 93,33 86,67 80,00 Số chồi/mẫu (chồi) 1,47f ± 0,05 2,13e ± 0,15 2,33d ± 0,06 2,70c ± 0,10 2,66c ± 0,05 2,46d ± 0,15 3,27a ± 0,25 3,00b ± 0,10 2,67c ± 0,12 4,0 Chiều cao chồi (cm) 2,58b ± 0,07 2,64b ± 0,13 2,73b ± 0,06 3,04a ± 0,05 2,93a ± 0,08 2,62b ± 0,11 2,93a ± 0,06 2,37c ± 0,08 2,27c ± 0,07 3,1 Đường kính cụm chồi (cm) 0,37c ± 0,04 0,63b ± 0,05 0,65b ± 0,03 0,74ab ± 0,09 0,74ab ± 0,08 0,73ab ± 0,07 0,84a ± 0,04 0,77a ± 0,06 0,75ab ± 0,05 8,8 Ghi chú: Các số trung bình có chữ (mẫu tự) theo sau cột khơng có sai khác có ý nghĩa độ tin cậy 95% (theo Duncan) 25 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 07(128)/2021 Đánh giá ảnh hưởng BAP/Kin đến khả nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần), kết ra: BAP Kin riêng lẻ kích thích tăng sinh chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ Tỷ lệ tạo cụm chồi số chồi/mẫu công thức đối chứng (CT1) thấp Khi nồng độ BAP/Kin tăng tiêu tăng đạt cao nồng độ 1,5 mg/L BAP (Hình 1A) 1,0 mg/L Kin (Hình 1B) Vượt mức nồng độ này, công thức CT5 CT8, CT9, tỷ lệ tạo cụm chồi số chồi/cụm có xu hướng giảm Quy luật tương tự quan sát thấy qua biểu hình thái chồi (chiều cao đường kính cụm) Kết xử lý thống kê cho thấy công thức CT7 (Kin 1,0 mg/L) cho tỷ lệ tạo cụm chồi (93,33%) số chồi/mẫu (3,27 chồi) đạt cao sai khác có ý nghĩa thống kê với cơng thức cịn lại Mẫu cấy tăng sinh chồi mơi trường MS có bổ sung đơn chất Kin 1,0 mg/L hiệu so với bổ sung BAP (Bảng 1) Kết nghiên cứu tương tự kết nghiên cứu ghi nhận nuôi cấy dưa chuột (Saeid et al., 2015) 3.2 Ảnh hưởng K n IBA/α-NAA đến nhân nhanh chồi in vitro Q trình phân hóa chồi phụ thuộc vào tỷ lệ cytokinin auxin môi trường nuôi cấy ghi nhận nhiều đối tượng trồng Trong nghiên cứu này, tổ hợp 1,0 mg/L Kin với mức nồng độ IBA α-NAA thực nhằm khảo sát ảnh hưởng khả nhân nhanh chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ Kết nghiên cứu trình bày bảng Bảng Ảnh hưởng Kin IBA/α-NAA đến nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần) Kin (mg/L) IBA (mg/L) NAA (mg/L) Tỷ lệ tạo cụm chồi (%) Số chồi/mẫu (chồi) Chiều cao chồi (cm) Đường kính cụm chồi (cm) 1,0 - - 93,33 3,27b ± 0,05 2,91b ± 0,04 0,85c ± 0,07 1,0 0,2 - 83,33 2,93c ± 0,15 2,62cd ± 0,08 0,83c ± 0,02 1,0 0,4 - 56,67 2,60d ± 0,10 3,11a ± 0,06 0,50d ± 0,04 1,0 - 0,2 93,33 3,53a ± 0,12 2,56d ± 0,03 1,37a ± 0,06 1,0 - 0,4 86,67 2,80c ± 0,10 2,71c ± 0,03 1,09b ± 0,08 3,6 1,9 6,1 CV (%) Ghi chú: Các số trung bình có chữ (mẫu tự) theo sau cột khơng có sai khác có ý nghĩa độ tin 95% (theo Duncan) Đánh giá ảnh hưởng Kin IBA/α-NAA đến nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần), kết cho thấy α-NAA kết hợp với Kin 1,0 mg/L cho hiệu tạo chồi cao so với IBA Ở công thức bổ sung 0,2 mg/L α-NAA, tỷ lệ tạo cụm chồi (93,33%) số chồi (3,53 chồi) đường kính cụm chồi (1,37 cm) đạt cao vượt trội so với đối chứng Chứng tỏ việc bổ sung α-NAA 0,2 mg/L hiệu cho trình tạo chồi nhân nhanh Hoàng tinh hoa đỏ (Bảng 2) eo kết nghiên cứu tác giả Hoàng Lê u Hà, mơi trường nhân chồi Hồng tinh hoa đỏ tốt sử dụng tổ hợp CĐHST mg/L BAP + 0,5 mg/L NAA + 0,3 mg/L Kin (Hoàng Lê u Hà, 2017) Tuy nhiên, hệ số nhân chồi đạt 3,37 (chồi/mẫu) thấp hệ số nhân chồi thu (3,53 chồi/mẫu) Điều tỷ lệ cytokinin/auxin ngoại sinh nhóm tác giả sử dụng lớn, ức chế khả phát sinh nhiều chồi Mặt khác, thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BAP đơn chất, kết nghiên 26 cứu sử dụng BAP đơn chất ghi nhận BAP cho hiệu nhân chồi Hoàng tinh hoa đỏ so với Kinetin Từ kết thu cho thấy, CĐHST thích hợp để bổ sung vào mơi trường MS + 30 g/L sucrose nhân nhanh chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ tổ hợp mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA cho tỷ lệ tạo cụm chồi đạt 93,33%, 3,53 chồi/mẫu (Hình 1C) 3.3 Ảnh hưởng sucrose đến nhân nhanh chồi in vitro Đường thúc đẩy khả quang hợp sinh trưởng mẫu cấy mà cịn đóng vai trị quan trọng hình thành quan dự trữ nhiều loài trồng nhân giống điều kiện in vitro (Kozai, 1991) Kết khảo sát ảnh hưởng mức nồng độ đường sucrose (0, 30, 40, 50, 60 g/L) môi trường MS + mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA trình bày bảng Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 07(128)/2021 Bảng Ảnh hưởng sucrose đến nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần) Sucrose (g/L) Tỷ lệ tạo cụm chồi (%) 30 40 50 60 33,33 96,67 100 100 100 CV (%) Số chồi/mẫu Chiều cao chồi (cm) Đường kính cụm chồi (cm) 1,30e ± 0,00 3,53b ± 0,12 4,37a ± 0,06 3,20c ± 0,10 2,67d ± 0,11 3,0 1,02d ± 0,04 3,15b ± 0,09 3,52a ± 0,07 2,84c ± 0,10 2,17d ± 0,05 2,8 0,87d ± 0,08 1,40c ± 0,07 2,04b ± 0,14 2,41a ± 0,06 1,95b ± 0,13 5,9 Ghi chú: Các số trung bình có chữ (mẫu tự) theo sau cột khơng có sai khác có ý nghĩa độ tin 95% (theo Duncan) Khi đánh giá ảnh hưởng sucrose đến nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần), kết cho thấy, sucrose có tác động đáng kể đến tăng sinh phát triển chồi Hồng tinh hoa đỏ Ở mơi trường khơng có sucrose, tỷ lệ tạo cụm chồi đạt 33,33% với 1,02 chồi/mẫu Kết xử lý thống kê cho thấy, số chồi/mẫu, chiều cao chồi đường kính cụm chồi công thức mức phân hạng thấp thí nghiệm Tỷ lệ tạo cụm chồi tăng vượt trội bổ sung 30 g/L sucrose vào môi trường (96,67%) đạt mức tối đa (100%) bổ sung 40 - 60 g/L sucrose (Bảng 3) Mặc dù vậy, tỷ lệ tạo cụm chồi tăng nồng độ đường tăng, số chồi/mẫu chiều cao chồi đạt cực đại mức nồng độ sucrose 40 g/L, vượt mức nồng độ này, tiêu có xu hướng giảm Nồng độ đường tối ưu nhân tố quan trọng thúc đẩy tích lũy tinh bột tạo thành thân rễ (microrhizome) in vitro (Podwyszyeska, 2012) Vì vậy, tiêu đường kính cụm đường kính gốc đường kính thân rễ tiêu quan trọng nuôi cấy loài dạng thân rễ (rhizome) Bổ sung nồng độ đường cao (60 g/L) vào môi trường MS chứa NAA hợp chất nhóm cytokinin hiệu đến tăng trưởng đường kính cụm tạo thành thân rễ in vitro gừng (Zahid et al., 2021) Trong nghiên cứu này, đường kính cụm Hồng tinh hoa đỏ tăng nồng độ sucrose tăng đạt cực đại cơng thức có bổ sung 50 g/L sucrose (Hình 1D) Tuy vậy, cơng thức sucrose 50 - 60 g/L, đường kính cụm chồi, số chồi chiều cao chồi lại giảm Điều chứng tỏ, nồng độ sucrose 40 g/L thích hợp để nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ in vitro, nồng độ cao làm áp suất thẩm thấu mơi trường tăng, khiến q trình lưu thơng chất dinh dưỡng giảm, kìm hãm sinh trưởng, phát triển chồi ức chế hình thành chồi 3.4 Ảnh hưởng adenin đến nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ Adenin nguồn nitơ hữu cơ, thường bổ sung vào mơi trường ni cấy có khả thúc đẩy phát sinh chồi bên trực tiếp từ mẫu cấy kích thích bật chồi từ mô sẹo (callus) (Stedan et al., 2008; Kadhimi et al., 2014) Trong nghiên cứu này, mức nồng độ adenin bổ sung vào môi trường MS + mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA + 40 g/L sucrose để khảo sát tác động đến hệ số nhân chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ Kết nghiên cứu sau tuần trình bày bảng Bảng Ảnh hưởng adenin đến nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần) Adenin sulfat (mg/L) 2,5 5,0 7,5 10,0 CV (%) Số chồi/mẫu (Chồi) 4,37d ± 0,06 5,67b ± 0,15 6,20a ± 0,10 5,10c ± 0,20 4,20d ± 0,10 2,6 Chiều cao chồi (cm) 3,54a ± 0,06 3,17b ± 0,07 3,14b ± 0,04 2,61c ± 0,09 2,35d ± 0,05 2,1 Đường kính cụm chồi (cm) 1,96d ± 0,12 2,89b ± 0,04 3,24a ± 0,03 2,20c ± 0,14 1,97d ± 0,05 4,4 Ghi chú: Các số trung bình có chữ (mẫu tự) theo sau cột khơng có sai khác có ý nghĩa độ tin 95% (theo Duncan) 27 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 07(128)/2021 Đánh giá ảnh hưởng adenin đến nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần), kết ra: Số chồi/mẫu tăng nồng độ adenin tăng đạt cực đại cơng thức có bổ sung 5,0 mg/L Adenin (Hình 1E) Kết xử lý thống kê cho thấy, số chồi/mẫu giảm mạnh tăng hàm lượng adenin sulfat (7,5 mg/L 10 mg/L) Số liệu quan trắc đường kính chồi biến thiên theo quy luật (bảng 4) Tuy nhiên, theo nhận định chúng tơi, adenin sulfat khơng kích thích tăng trưởng đường kính chồi Hồng tinh hoa đỏ ni cấy, đường kính tăng/giảm số chồi tăng/giảm Khơng theo quy luật đó, chiều cao dường bị kìm hãm hàm lượng adenin sulfat tăng Đây ghi nhận Afshan (2013) thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng adenin sulfat đến phát sinh tăng trưởng chồi vối rừng (Afshan et al., 2013) Hình Chồi Hồng tinh hoa đỏ in vitro nghiên cứu Ghi chú: A) MS + 1,5 mg/L BAP + 30 g/L sucrose; B) MS + 1,0 mg/L Kin + 30 g/L sucrose; C) MS + 1,0 mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA + 30 g/L sucrose; D) MS + 1,0 mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA + 40 g/L sucrose; E) MS + 1,0 mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA + 40 g/L sucrose + mg/L adenin IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Môi trường nhân nhanh chồi thích hợp Hồng tinh hoa đỏ mơi trường MS (1962) + 1,0 mg/L Kin + 0,2 mg/L α-NAA + 40 g/L sucrose + mg/L adenin sulfat Hiệu tạo cụm chồi đạt 100% với 6,20 chồi/mẫu, trạng thái chồi tốt (thể qua số liệu chiều cao đường kính cụm) 4.2 Đề nghị Áp dụng kết vào nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ sử dụng chồi để tạo rễ LỜI CẢM ƠN Nghiên cứu cung cấp kinh phí từ đề tài: “Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống hoàng tinh hoa đỏ (Polygonatum kingianum Coll et Hermsl) phương pháp nuôi cấy mô” (2019 2022) cấp Bộ Y tế Chúng xin trân trọng cảm ơn TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Khoa học Công Nghệ, 2007 Sách đỏ Việt Nam, Phần II - ực vật NXB Khoa học tự nhiên Cơng nghệ 28 Hồng Lê u Hà, 2017 Nghiên cứu đặc điểm sinh học loài hoàng tinh hoa đỏ (Polygonatum kingianum Coll et Herml) Bắc Quang, Hà Giang nhân giống in vitro Luận văn ạc sỹ Lâm học, Trường Đại học Nguyên La V ệt Hồng, Trần Hồng u, Phạm ị Quy, Đ nh Phương ảo, Nguyễn ị anh, Phạm Ngọc Khánh, 2017 Xác định thị phân tử tá s nh chồ n v tro loà Hoàng t nh hoa đỏ (Polygonatum k ng anum Coll et Hemsl) thu tạ Sa Pa - Lào Ca Tạp chí khoa học công ngh ệp Chuyên san khoa học nông ngh ệp - Lâm ngh ệp - Y dược Đạ học nguyên, 164 (04): 189-193 Afshan N., Anwar S., & Mohammad A., 2013 E ect of adenine sulphate interaction on growth and development of shoot regeneration and inhibition of shoot tip necrosis under in vitro condition in adult Syzygium cumini L a multipurpose tree Applied biochemistry and biotechnology, 173 (1): 90-102 Kadh m A.A., Alhasnaw A.N., Mohamad A., Yuso W.M.W., & Za n C.R.B.C.M., 2014 Tissue culture and some of the factors a ecting them and the micropropagation of strawberry Life Science Journal , 11 (8): 484-493 Kozai T., 1991 Photoautotrophic micropropagation In vitro Cellular and Developmental Biology – Plant, 27 (2): 47-51 Lu J.M., Wang Y.F., Yan H.L., Lin P., Gu W and Yu J., 2016 Antidiabetic e ect of total saponins from Polygonatum Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 07(128)/2021 kingianum in streptozotocin-induced diabetic rats Journal of Ethnopharmacol, 179: 291-300 tissue culture e background Plant growth regulators II, vol Springer, e Netherlands: 205-226 Murashige T and Skoog f., 1962 A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures Physiologia Plantarum, 15: 373-497 Yan H., Lu J., Wang Y., Gu W., Yang X and Yu J., 2017 Intake of total saponins and polysaccharides from Polygonatum kingianum a ects the gut microbiota in diabetic rats Phytomedicne, 26: 45-54 Podwyszyeska M., 2012 e mechanisms of in vitro storage organ formation in ornamental geophytes Floric Ornam Biotechnol., 6: 9-23 Saeid M.A., Khaldoun A.A, Abdullah R.A., 2015 Kinetin is the most efective cytokinin on shoot multiplication from Cucumber J Agric Sci., (10): 159-165 Stedan Van J., Zazimalova E., George E.F., 2008 Cytokinins, their analogues and antagonist In: George EF, Hall M, Delkleck GJ (eds) Plant Propagation by Yang B.M., Huang Y.L and Li YP., 2016 Tissue culture quick propagation method of Polygonatum kingianum CN106171978A Zahid N.A., Jaafar H.Z.E., Hakiman M., 2021 Microrhizome induction, shoot multiplication and rooting of ginger (Zingiber o cinale Roscoe) var Bentong with regards to sucrose and plant growth regulators application Agronomy, 11: 320 E ect of di erent medium factors on in vitro shoot multiplication of Polygonatum kingianum Nguyen Dinh i Xuyen, Dinh Truong Son, Phan uy Hien, anh Giang, Nguyen i Huong, Vu Hoai Sam Abstract is article presents the e ects of using di erent medium factors, such as plant growth regulators, sucrose and adenine sulfate contents on the shoot multiplication of P kingianum, a precious medicinal plant e study results showed that MS + 1.0 mg/L Kin + 0.2 mg/L α-NAA + 40 g/L sucrose and mg/L adenine sulfate were the best medium for shoot multiplication 100% of shoot cluster formed 6.2 shoots/explant and the best quality of shoots a er weeks of culturing Keywords: Polygonatum kingianum, regulators, kinetin, sucrose, adenine sulphate Ngày nhận bài: 28/6/2021 Ngày phản biện: 05/7/2021 Người phản biện: TS Nguyễn Văn Khiêm Ngày duyệt đăng: 30/7/2021 ẢNH HƯỞNG CỦA LƯỢNG BÓN PHÂN HỮU CƠ VÀ NPK ĐẾN SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA GIỐNG HOA LAN HUỆ HỒNG ĐÀO Phạm Nguyễn Anh Đức , Đặng ị Minh Phượng 1*, Bùi Ngọc Tấn1, ị Hường1, Nguyễn Xuân Trường2 TÓM TẮT Nghiên cứu thực nhằm xác định lượng bón phân hữu NPK phù hợp cho sinh trưởng phát triển giống hoa Lan huệ Hồng Đào Gia Lâm, Hà Nội Kết cho thấy bón lót 4kg phân hữu cơ/m2 (40 tấn/ha) có ảnh hưởng tốt đến sinh trưởng phát triển Lan huệ Hồng đào (cây cao 88,8 cm, chu vi củ 30,1 cm khối lượng củ 491,1 g, đường kính hoa 19,8 cm độ bền trang trí 15,3 ngày) Bón thúc phân Đầu Trâu NPK 13:13:13 + TE với lượng 20 g/m2/đợt bón, bón đợt/năm (tương đương 800 kg/ha/năm) làm tăng chất lượng hoa (cây cao 89,9 cm, chu vi củ 25,6 cm, khối lượng củ 380,9 g, đường kính hoa 19,3 cm độ bền cụm hoa 15,6 ngày) Từ khóa: Lan huệ (Hippeastrum sp.), phân hữu cơ, phân NPK Khoa Nông học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Viện Sinh học Nông nghiệp, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tác giả 29 ... nuôi cấy Kết nghiên cứu ảnh hưởng BAP/Kin đến khả nhân nhanh chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ trình bày bảng Bảng Ảnh hưởng BAP/Kin đến khả nhân nhanh chồi Hồng tinh hoa đỏ (sau tuần) Cơng thức... α-NAA thực nhằm khảo sát ảnh hưởng khả nhân nhanh chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ Kết nghiên cứu trình bày bảng Bảng Ảnh hưởng Kin IBA/α-NAA đến nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần) Kin... sucrose để khảo sát tác động đến hệ số nhân chồi in vitro Hoàng tinh hoa đỏ Kết nghiên cứu sau tuần trình bày bảng Bảng Ảnh hưởng adenin đến nhân nhanh chồi Hoàng tinh hoa đỏ (sau tuần) Adenin sulfat