0

Cây rau đắng (polygonum aviculare)

16 6 0
  • Cây rau đắng (polygonum aviculare)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Tài liệu liên quan

Thông tin tài liệu

Ngày đăng: 25/11/2021, 12:18

8.Về hóa học ● Thành phần hóa học chung gì, gồm có nhóm chất gì, nhóm chất gì? Tổng quan nước có nghiên cứu chưa, giới với loài, chi nghiên cứu rồi? ● Tình hình chiết xuất, phân lập, định tính, định lượng sao? (nêu tên chất phân lập được, hàm lượng, phương pháp, quy trình thực có trích dẫn báo, cơng bố nội dung đó) Tham khảo: Nghiên cứu quy trình chiết tách dịch rau đắng ứng dụng sản phẩm sữa tắm: Đề tài nghiên cứu khoa học VŨ THỊ HỒNG PHƯỢNG - 2018 ● Thành phần hóa học chung gì, gồm có nhóm chất gì, nhóm chất gì? ● Trong rau đắng có 0,35% chất tannin, ngồi có vitamin C (tới 900mg% khô kiệt), carotin (tới 39%), flavonozit avicularin C 20H18O11, thuỷ phân avicularin cho quexetin l.arabinoza ● Có tác giả cho ancaloit, có tác giả cho khơng có Trong vỏ có anthraglucozit ● Ngồi đường, tinh dầu, nhựa, sáp Độ tro 2,44% 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA RAU ĐẮNG Rau đắng biển (Bacopa monnieri) [3] Cây rau đắng biển chứa alkaloid: brahmin, có tác dụng giống strychnin độc tính hơn; base: β1- oxalat, β2-oxalat, β3-chloroplatinate sterol Ngoài alkaloid khác herpestin, bacosid A B, monnierin; hersaponin, có tác dụng chủ yếu giống resercin chlororomazin, acid betulic, d–mannitol, stigmastarol, βsitosterol stigmasterol trạng thái tự Hiện nay, nhà khoa học làm sáng tỏ phần loài rau Rau đắng biển có chứa hoạt chất saponin gồm bacoside A bacoside B, có tác dụng gia tăng tuần hồn não, tăng cường dẫn truyền xung động hệ thần kinh, chống oxy hoá tế bào não, giúp cho tỉnh táo (alertness) nhận thức (awareness) Một số người Ấn Độ cổ gọi Phenavati Theo tiếng Phạn “Phena” tạm hiểu tính tạo bọt Quả thật rau đắng nấu với nước, sản sinh lượng bọt nhiều mà ngày người ta cho khối bọt saponin rau đắng biển phóng thích Thành phần hóa học rau đắng biển gồm triterpen tự do, saponin, flavonoid, alkaloid phenylethanoid glycosid Trong thành phần biết đến nhiều saponin Saponin có sapogenin jujubogenin(C30H48O4) : bacosaponin A,bacosid A3, bacopasaponin E, bacosaponin F, bacopasid N1, bacopasid X, bacopasid IV… Saponin có sapogenin pseudojujubogenin ( bacosaponin B, bacopasaponin C, bacosid N2, bacopasid I, bacopasid II, bacopasid III, bacopasid V… Bacobitacin A R=R1=R2=OH Bacobitacin B R=R1=H R2=OH Bacobitacin C R=X R1=R2=H Bacobitacin D R=X R1=OH R2=H Các saponin khác chủ yếu phần đường C-3 C-20 Tất saponin có mạch đường C-3 Mạch đường C3 có từ 1-3 đường Khi đường, mạch đường phân nhánh Chỉ có bacopasaponin A, E F C-20 có thêm mạch đường với đường -L -arabinopyranose Các nghiên cứu hóa học tìm nhiều saponin Rau đắng biển Nhiều thành phần hỗn hợp bacosid A B Ngồi thành phần saponin, Rau đắng biển cịn có nhóm hợp chất khác bao gồm: Các cucurbitacin bacobitacin A,B,C D, cucurbitacin E Triterpen tự do: ebelin lactone, bacogenin A1, A2, A3, jujubogenin, pseudojujubogenin, bacosin, acid betulinic Các phytosterol, Các alkaloid brahmin, lượng nhỏ nicoyin alkaloid khác Rau đắng đất (Molluginaceae): Rau đắng đất chứa chủ yếu saponin flavonoid Từ số tác giả phân lập spergulagenin A [4] Theo tài liệu , chiết tách từ Glinus oppositifolius (L.) hoạt chất spergulin A { 3-O –(b-d -xylopyranosyl 4-sulphate)-spergulagenin A } (1) spergulin B { 3- O-[a-rhamnopyranosyl (1→2) -b-d-xylopyranosyl]pergulatriol} (4) spergulacin (2) spergulacin A (3) Cấu trúc chúng xác định phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều 2D-NMR Công thức cấu tạo sau: [5] Rastogi cộng công bố thành phần rau đắng đất sau Bảng 1.1 Một số thành phần hóa học rau đắng đất Theo nghiên cứu Devendra, Patel Saurabh Shankar ● Tổng quan nước có nghiên cứu chưa, giới với loài, chi nghiên cứu rồi? 1.4 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU TRONG NƯỚC VÀ TRÊN THẾ GIỚI VỀ RAU ĐẮNG 1.4.1 Trên giới Rau đắng biển (Bacopa monnieri, thuộc họ Scrophulariaceae) thường sinh sản mạnh khu vực đầm lầy khắp nước vùng lãnh thổ châu Á Ấn Độ, Nepal, Sri Lanka, Trung Quốc, Đài Loan, tìm thấy Florida, Hawaii tiểu bang miền Nam khác Hoa Kỳ Theo y học Vệ đà (Ayurveda) Ấn Độ, Rau đắng biển gọi Rau sam đắng, có tên khoa học Bacopa monnieriđược sử dụng Y học cổ truyền Ấn Độ cách 3.000 năm, lồi cỏ có tác dụng giúp tăng trí nhớ (phịng bệnh Alzheimer), giảm mệt mỏi tinh thần (trầm cảm), chữa bệnh động kinh, hen suyễn, tắt tiếng, số bệnh đường ruột, trị rắn cắn… Ở Sri Lanca dùng làm thuốc xổ, nấu nước rửa chữa bệnh nhọt độc sưng da bệnh da voi Nghiên cứu gần cho thấy chiết xuất rau đắng biển giúp nâng cao lực nhớ, cải thiện hoạt động trí tuệ, giảm đau, kháng viêm, ức chế tế bào ung thư, cho hội chứng ruột kích thích, cho bệnh nhân Alzheimer, bệnh nhân sau bị đột quỵ… Một số nghiên cứu nhà khoa học rau đắng biển Năm 2006: Holcomb LA cộng công bố nghiên cứu chiết xuất Bacopa monniera làm giảm nồng độ amyloid chuột PSAPP [7] Năm 2008 : Carlo cộng công bố nghiên cứu tạp chí y học tác dụng chiết xuất Bacopa monnieri tiêu chuẩn hóa hiệu suất nhận thức, lo âu trầm cảm người cao tuổi [8] Năm 2011: Kamkaew cộng có cơng bố nghiên cứu : Bacopa monnieri thành phần hạ huyết áp chuột gây mê thuốc giãn mạch loại động mạch khác [9] Năm 2013: Neale cộng cơng bố cơng trình Tác dụng nhận thức hai loại dược phẩm bổ sung Nhân sâm Bacopa so với modafinil: đánh giá so sánh kích cỡ tác dụng [10] Năm 2015 : Neelima cộng nghiên cứu tác dụng cải thiện dược phẩm dinh dưỡng rối loạn thần kinh [11] Trong năm Manjeshwar Shrinath Baliga cộng cơng bố cơng trình Lợi ích sức khỏe thuốc Ayurvedic Rasayana (chống lão hóa) truyền thống Ấn Độ Brahmi Rayasana, bao gồm Brahmi (Bacopa monniera), medhya Rayasana (neurotonic) quan trọng Ở Ayurveda, việc tiêu thụ thường xuyên loại Rayasana cho để cải thiện trí nhớ, khả học tập tập trung [12] Năm 2016 : Jason Pitt công nghiên cứu, Tác dụng nhận thức dược phẩm dinh dưỡng [13] Năm 2018 : Saswati Banerjee cộng cơng bố cơng trình Đánh giá khả tăng cường miễn dịch ức chế ký sinh trùng Leishmania Spergulin-A , Saponin triterpenoid tách chiết từ rau đắng đất 1.4.2 Trong nước Hiện nước cơng trình nghiên cứu rau đắng hạn chế Một số nghiên cứu nước rau đắng Năm 2009 : Nguyễn Thu Hương, Tổng quan dược liệu rau đắng biển [14] Trong năm Trần Thị Thúy Thành, Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học rau đắng đất [5] Năm 2015, Nguyễn Thị Mai Hương, Nghiên cứu thành phần hóa học khả cải thiện hội chứng tự kỳ thực nghiệm phân đoạn n-Butanol từ cao chiết ethanol rau đắng biển [3] Năm 2017, Phạm Thị Nguyệt Hằng, Lê Việt Dũng, Nghiên cứu độc tính cấp, tác dụng bảo vệ gan, chống oxy hố hỗn hợp cao chiết từ actisơ, rau đắng đất bìm bìm biếc, Tạp chí Dược học, ISSN: 0866-7861 [15] 1.4.3 Một số thuốc từ rau đắng Viêm bàng quang cấp: rau đắng 12g; nam tỳ giải, bồ cơng anh vị 20g; sài hồ, hồng cầm, hoạt thạch, cù mạch vị 12g; mộc thống 6g Nếu tiểu tiện máu, thêm sinh địa, rễ cỏ tranh, chi tử (sao đen) vị 10g Sắc uống ngày thang, chia lần, trước bữa ăn 1h30 phút [6] Tiểu buốt, nước tiểu ít: rau đắng, mộc thông, hạt mã đề, hạt dành dành, cù mạch, hoạt thạch vị 12g; đại hoàng 8g, cam thảo 6g Sắc uống ngày thang Nhuận gan, lợi mật, thông tiện (đại tiện, tiểu tiện), giải độc: toàn rau đắng đất 12g, actiso (Cynara scolymus) 15g, hạt bìm bìm biếc (Semen Pharbitis) 2g Sắc uống Giải độc gan, chữa vàng da: rau đắng đất, cỏ xước, rau má, ké đầu ngựa, dây mướp đắng, muồng trâu, rễ cỏ tranh, sài đất vị 6g; nhân trần, dành dành vị 5g; cam thảo 3g Sắc uống ngày thang, trước bữa ăn [2] Trị dị ứng, mẩn ngứa, mụn nhọt: lấy tươi rửa sạch, giã nát, đắp vào nơi ngứa, ghẻ Trị cảm sốt: lấy 30 - 50g tươi, giã vắt nước uống 1.4.4 Một số sản phẩm rau đắng thị trường 1.4.4.1 Thuốc EFTIHEPA Công dụng : Làm giảm men gan phục hồi chức gan Dùng viêm gan siêu vi B mạn tính, mụn nhọt, mẩn ngứa Thơng tiểu, tiết chất độc thể, giúp tiêu hóa tốt Thành phần : Bột Diệp hạ châu 100 mg, bột Actisô 40 mg, bột Rau đắng 20 mg, cao Râu mèo 10 mg 1.4.4.2 Thực phẩm chức Kids Intelligent PM Công dụng : giúp cho phát triển tăng trưởng trẻ, giúp cho hệ thần kinh phát triển, cải thiện độ tập trung, nhận thức, khả học tập trí nhớ Thành phần : Mỗi viên: Dầu cá tự nhiên 125 mg (= DHA 15 mg), dầu cá ngừ 125 mg (= DHA 32 mg), dịch chiết Bacopa Monnieri 50 mg, acetyllevocarnitine HCl 40 mg, phức hợp kẽm amino acid chelate mg (= Zn mg), folic acid 50 mcg Nhà sản xuất : PharmaMetics Products 1.4.4.3 Viên nang Gachi Công dụng: - Giúp tăng cường khả miễn dịch cho thể, điều hòa huyết áp, giảm cholesterol máu - Phòng hỗ trợ điều trị tiểu đường ung thư - Giúp cải thiện trí nhớ phịng ngừa tai biến mạch máu não - Trợ giúp tiêu hóa & tăng cường chức gan Đối tượng sử dụng : - Các bệnh lý tim mạch cao huyết áp, thiểu mạch vành… - Người bị mỡ máu cao, gan nhiễm mỡ, người bị tiểu đường - Suy nhược thần kinh, suy nhược thể, ăn uống đặc biệt người cao tuổi - Các trường hợp suy giảm chức gan, giai đoạn hồi phục bệnh lý khác - Dùng tốt trường hợp ung thư Thành phần : Cho 01 viên nang 600mg Linh chi (Ganoderma Lucidum) - 1000mg; Trà xanh (Camellia sinensis) - 500mg; Sơn tra (Fructus Mali) - 500mg; Rau đắng biển (Bacopa monnieri) - 250mg; Cao Bạch (Extractum Ginkgo biloba) - 10mg; tá dược vừa đủ 01 viên nang 1.4.4.4 Bột rau đắng Nhóm sinh viên trường ĐH Cơng nghiệp Thực phẩm TP.HCM tạo giá trị cho rau đắng việc xây dựng quy trình sản xuất bột rau đắng trở thành loại thực phẩm chức tốt cho sức khỏe người 1.4.4.5 Trà thảo mộc AMINAI EM Trà thảo mộc AMINAI EM Siberian Health có tác dụng hỗ trợ chức GAN khỏe mạnh Trà Aminai Em giúp bảo vệ tế bào gan lợi mật nhẹ nhàng, xuất xứ liên ban Nga Thành phần trà gồm: Cây Ban Âu (Hypericum perforatum); Râu ngô (Zea mays); Quả tầm xuân (Rosa majalis); Rau đắng (Polygonum aviculare); Hoa cúc (Chamomilla officinalis); Hoa cúc trường sinh (Helichrysum arenarium); Rễ bồ công anh Mông Cổ; Hoa cúc ngải vàng (Tanacetum parthenium); Lá bạc hà (Mentha piperita) 1.4.4.6 Thuốc lợi gan mật Bar Thuốc lợi gan mật Bar điều trị bệnh gan mụn, nhọt, ngứa, mề đay, viêm gan cấp mãn tính, vàng da Đồng thời giúp thơng tiểu, nhuận trường (chống táo bón) Thành phần: Bột bìm bìm 75mg, Cao đặc Actisô 100mg, Cao đặc Rau đắng đẩt 75mg Tá dược vừa đủ viên 1.4.4.7 Bacopa monnieri Bacopa monnieri loại thảo dược Ayurvedic đánh giá cao, có lịch sử rộng rãi truyền thống ăn ăn ngon 1.4.4.8 Viên nang Liverbil Phịng hỗ trợ điều trị viêm gan, suy giảm chức gan Thanh nhiệt, giải độc gan bảo vệ gan Điều trị triệu chứng: đầy bụng, rối loạn tiêu hóa, dị ứng, mụn nhọt, mẫn ngứa, mề đay rối loạn chức gan, viêm gan gây Thành phần : Mỗi viên nang cứng chứa: Cao đặc Actisô :40mg; Actisơ (Folium Cynarae scolymi) 400mg; Cao đặc Bìm bìm biếc 40mg; Bìm bìm biếc (Semen Pharbitidis) 400 mg; Cao đặc Rau đắng đất - Diệp hạ châu 80mg; Rau đắng đất : 400mg; Diệp hạ châu 400mg; Tá dược: vừa đủ viên Mỗi viên nang mềm chứa: Cao khô: 320 mg; Actisơ : 400mg, Bìm bìm biếc : 400mg; Rau đắng đất 400mg; Diệp hạ châu 400mg, Tá dược: vừa đủ viên ● Tình hình chiết xuất, phân lập, định tính, định lượng sao? (nêu tên chất phân lập được, hàm lượng, phương pháp, quy trình thực có trích dẫn báo, cơng bố nội dung 3.1 NGUYÊN LIỆU, DỤNG CỤ, THIẾT BỊ, HÓA CHẤT Nguyên liệu : Rau đắng lấy từ khu vực tỉnh Bà rịa – Vũng Tàu Hóa chất, dụng cụ: - Cốc thuỷ tinh, bình tam giác, bếp điện, bếp cách thuỷ, cốc sứ, loại pipet, bình - định mức, bình hút ẩm, giấy lọc… - Ethanol, ethylacetate, methanol, nước cất, ethylacetat, HNO3 loãng, H2SO4, NH4OH, NaOH, FeCl3, Pb(CH3COO), Na2CO3, KI … Thiết bị : - Bộ chiết soxhlet, thiết bị quay chân khơng, Tủ sấy, lị nung, cân phân tích - Máy đo UV-Vis Phịng Thí nghiệm Hóa lý trường đại học Khoa Học Tự nhiên thành phố HCM - Máy GC-MS phịng phân tích trung tâm trường đại học Khoa Học Tự Nhiên thành phố Hồ Chí Minh - Và số thiết bị hỗ trợ khác 3.2 THỰC NGHIỆM Rau đắng lấy từ khu vực tỉnh Bà rịa -Vũng tàu, đem làm sạch, loại tạp chất thô sấy khô nhiệt độ (50-600C) 12 h Sau đem xay nhỏ thành bột rau đắng 3.2.1 Các phương pháp xác định tiêu hóa lý bột rau đắng 3.2.1.1 Xác định độ ẩm : phương pháp sấy đến khối lượng không đổi Dùng chén sứ, đánh số, sấy khoảng 100 – 1500C đến khối lượng khơng đổi Để nguội bình hút ẩm, cân khối lượng m1 (của chén sứ) Cân xác mẫu, mẫu có khối lượng m(g) cho vào chén sứ Chuyển chén sứ vào tủ sấy, sấy nhiệt độ khoảng 800C nâng dần lên khoảng 1000C 3h Lấy để nguội bình hút ẩm, cân ghi kết lần Cho chén sứ vào lại tủ sấy >1000C khoảng 30 phút, lấy để nguội cân ghi kết lần 2, lặp lại đến khối lượng không đổi (khối lượng chênh lần cân không 0.005g) => cân m2 Độ ẩm mẫu tính cơng thức: Trong đó: m1: Khối lượng chén sứ (g) m: Khối lượng rau đắng (g) m2: Khối lượng chén sứ mẫu sau sấy (g) n: Số lần xác định W(%) 3.2.1.2 Xác định hàm lượng hữu cơ: phương pháp tro hóa mẫu Để xác định hàm lượng tro nguyên tố vô thể động vật, thực vật người ta dùng phương pháp tro hóa mẫu Các mẫu rau đắng (khối lượng m2) xác định độ ẩm tiếp tục sử dụng để tro hóa Các mẫu đốt bếp điện, than hóa sơ bộ, sau cho vào lị nung tiến hành tro hoá mẫu nhiệt độ 5005500C thời gian từ - tiếng, thu tro trắng Lấy mẫu làm nguội đến nhiệt độ phịng bình hút ẩm, cân lại mẫu, có khối lượng m3 Khối lượng tro phần chất lại sau nung Hàm lượng tro tính theo cơng thức Trong đó: m1: Khối lượng chén sứ (g) m: Khối lượng rau đắng ban đầu (g) m3: Khối lượng chén sứ mẫu sau tro hoá (g) n: Số lần xác định % tro Hàm lượng hữu : % hữu =100% -%tro → % hữu trung bình 3.2.1.3 Định tính alcaloid Cho khoảng g bột rau đắng vào bình nón, thêm 30ml H2SO4 1N, đun nóng nồi cách thủy 15 phút Để nguội, lọc vào bình gạn Kiềm hóa NH4OH đến khoảng pH = 9- 10 Lắc với 20 ml chloroform Sau dịch chiết CHCl3 cách thủy tới lại cắn Hòa tan cắn với ml H2SO4 1N, cho vào ống nghiệm, ống ml dịch chiết Ống 1: Nhỏ 2-3 giọt TT Mayer Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Ống 2: Nhỏ 2-3 T Dragendorff Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Ống 3: Nhỏ 2-3 giọt TT Bouchardat Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét 3.2.1.4 Định tính flavonoid Cho g bột rau đắng vào bình nón, thêm 30 ml cồn 900 ,đung cách thủy 10 phút, lọc nóng qua giấy lọc Dịch lọc đem làm phản ứng định tính: Phản ứng với kiềm: Nhỏ giọt dịch lọc lên miếng giấy lọc, để khơ Sau hơ lên bình chứa NH4OH đặc Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Lấy ml dịch lọc vào ống nghiệm Nhỏ 10 giọt NaOH 10% Lắc mạnh Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Phản ứng với cyanidin: Lấy 2ml dịch lọc vào ống nghiệm, thêm bột Mg kim loại Nhỏ từ từ 10 giọt HCl đậm đặc Để yên vòng vài phút Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Phản ứng với dung dịch FeCl3 5%: lấy ml dịch lọc, thêm 3-5 giọt FeCl3 5%, lắc Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Phản ứng diazo: Lấy 2ml dịch lọc, thêm ml dung dịch NaOH 10% Nhỏ vài giọt thuốc thử diazo pha Lắc Sau đung nóng nồi cách thủy vài phút Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét 3.2.1.5 Định tính Saponin: Hiện tượng tạo bọt: cho vào ống nghiệm g bột rau đắng, thêm 5ml nước, đun sôi nhẹ, lọc nóng Dịch lộc vào ống nghiệm, thêm 10 ml nước Lắc mạnh vòng phút theo chiều dọc ống nghiệm Để yên vòng 15 phút Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Phản ứng Salkowski: Lấy 2g bột rau đắng vào ống nghiệm, thêm 10ml nước cất, đun nóng khoảng 800C 10 phút, lọc nóng, thu dịch chiết Bốc dịch chiết tới cắn Thêm ml chloroform, lắc cho tan cắn Thêm ml acid sulfuric đặc, lắc Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét 3.2.1.6 Định tính anthranoid Lấy 5g mẫu, thêm 30ml nước cất, đun sôi cách thủy 15 phút Lọc qua giấy lọc, dịch chiết Phản ứng Borntraeger: - Dạng glycosid: Lấy 1ml dịch lọc, thêm ml NaOH 10% Lắc mạnh - Dạng tự do: + Lấy 10 ml dịch lọc vào bình gạn, thêm 15 ml chlorofrôm Gạn lấy phần dịch chloroform (dịch chiết) + Lấy ml dịch chiết, thêm ml NaOH 10% Lắc mạnh Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Vi thăng hoa: Cho g bột rau đắng vào nắp nhôm Đặt lên miệng nắp nhôm lam kính, lam kính có để miếng tầm nước lạnh Đốt nắp nhôm lửa đèn cồn đèn cồn Sau -10 phút, lấy lam kính để nguội Soi kinh hiển vi Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét 3.2.1.7 Định tính glycosid tim Cho 10 g bột rau đắng vào bình nón dung tích 100ml, thêm 50ml cồn 250, lắc để qua 24h Gạn lấy dịch chiết, loại tạp Pb(CH3COO)2 30% Khuấy đều, lọc Lấy dịch lộc đầu vào ống nghiệm nhỏ, thêm tiếp dung dịch Pb(CH3COO)2 30% Thử lại đến khơng cịn kết tủa Gạn lấy dịch lọc vào bình gạn dung tích 100 ml, chiết lần lần với 10 ml hỗn hợp CHCl3: EtOH (4:1) Lấy phần dịch chiết CHCl3 EtOH vào cốc có mỏ sấy khơ, chia vào ống nghiệm nhỏ, bốc cách thủy tới khô để làm phản ứng Phản ứng Liberman: Ống 1: Thêm ml anhydrid acetic, lắc đêfu tan hết cắn Đặt nghiêng ống nghiệm 450, thêm từ từ theo thành ống nghiệm 0,5 ml dung dịch H2SO4 để dịch lỏng ống nghiệm phân thành lớp Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Phản ứng Baljet: Ống 2: Thêm 0,5 ml ethanol 900 lắc Nhỏ vài giọt thuốc thử Baljet pha (gồm phần dung dịch acid piric % phần dung dịch NaOH 10%) Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Phản ứng Legal : Ống 3: Thêm 0,5 ml ethanol 900 , lắc Nhỏ giọt thuốc thử natrinitroprussiat 1% giọt dung dịch NaOH 10% Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Phản ứng Keller -kiliani: Ống 4: Thêm 0,5 ml Etnol 900 , lắc Thêm giọt FeCl3 5% acid acetic, lắc Nghiêng ống 450 , cho 0,5 ml H2SO4 (tránh xáo trộn) Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét 3.2.1.8 Định tính coumarin Cho g bột rau đắng vào bình nón 100 ml, thêm 30 ml cồn 900 Đun cách thủy sôi 15 phút Lọc dịch chiết Phản ứng mở đóng vịng lacton: Cho vào ống nghiệm, ống ml dịch chiết: Ống 1: Thêm 0,5 ml dung dịch NaOH 10% Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Ống 2: Để nguyên Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Đung hai ống nghiệm đến sôi, để nguội Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Thêm vào hai ống nghiệm, cống ml nước cất Lắc đều, Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Thêm vào ống vài giọt HCl đặc, Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Phản ứng diazo hóa: Cho vào ống nghiệm ml dịch chiết, thêm ml dung dịch NaOH 10% Đun cách thủy sôi phút để nguội Thêm vài giọt thuốc thử diazo pha Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét Quan sát huỳnh quang ánh sáng tử ngoại cho tác dụng với dung dịch kiềm Nhỏ vài giọt dịch lọc lên lớp giấy lọc, nhỏ chồng tiếp vài giọt dung dịch NaOH 10% sấy nhẹ Che phần diện tích vết chất đồng kim loại, đặt ánh sáng tử ngoại 366 nm vòng vài phút Bỏ đồng tiền kim loại, tiếp tục quan sát sau vài phút Quan sát tượng ghi kết 3.2.1.9 Định tính acid hữu Cho g bột rau đắng vào ống nghiệm, thêm 10 ml nước cất Đun sôi trực tiếp 10 phút, để nguội trực tiếp 10 phút, lọc Thêm vào dịch lọc bột Na2CO3 Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét 3.2.1.10 Định tính acid amin Cho g bột rau đắng vào ống nghiệm, thêm 10 ml nước cất, đun sơi phút Lọc nóng, lấy ml dịch chiết cho vào ống nghiệm khác, thêm 2-3 giọt thuốc thử ninhydrin 3%, đung cách thủy sôi 10 phút Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét 3.2.1.11 Định tính polysaccharid Cho g bột rau đắng vào cốc có mỏ, thêm 10 ml nước cất, đun cách thủy sôi phút Cho vào ống nghiệm: Ống 1: 4ml dịch chiết giọt thuốc thử Lugol Ống : ml nước cất giọt thuốc thử Lugol (thuốc thử Lugol pha sau: Lấy 0.5 g I2 1.0 g KI pha 100 ml nước cất Đựng lọ màu) Quan sát tượng ghi kết quả, nhận xét 3.2.2 Xây dựng quy trình tách chiết dịch rau đắng Quy trình chiết dịch rau đắng phương pháp chiết soxlet với dung môi 3.2.2.1 Khảo sát chọn dung môi chiết Các loại dung môi: Ethanol, methanol, ethylacetate Phương pháp: ngâm chiết điều kiện (nhiệt độ, thời gian ) ngày Chuẩn bị bình tam giác 250ml rửa sạch, tráng nước cất sấy khô Đánh số thứ tự từ đến Lấy khoảng 3g bột rau đắng khô cho vào bình Thêm vào bình 150ml dung môi: ethylacetate, ethanol, methanol Ngâm khoảng ngày Lọc lấy dung dịch, pha lỗng 50 lần Sau tiến hành đo UV – VIS ta mật độ quang mẫu so sánh chọn loại dung môi 3.2.2.2 Khảo sát tỷ lệ hỗn hợp dung môi Phương pháp: ngâm chiết điều kiện (nhiệt độ, thời gian ) ngày Chuẩn bị bình tam giác 250ml rửa sạch, tráng nước cất sấy khô Đánh số thứ tự từ đến Lấy khoảng 3g bột rau đắng khô cho vào bình Thêm vào bình đánh số 13 bình 150ml hỗn hợp dung môi ethanol + nước với tỉ lệ lần lượt: 70:30, 80:20, 90:10, bình số thêm 150ml ethanol tuyệt đối Ngâm khoảng ngày Lọc lấy dung dịch, pha lỗng 50 lần Sau tiến hành đo UV – VIS ta mật độ quang mẫu so sánh chọn tỉ lệ hỗn hợp dung mơi 3.2.2.3 Khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết nóng soxhlet Phương pháp chiết soxhlet Cân xác lượng mẫu cần chiết soxhlet gói vào giấy lọc (hoặc vải mỏng) Sau cho vào chiết soxhlet gồm bình cầu, thiết bị chiết sinh hàn hồi lưu Dung mơi bình cầu làm bốc phần, dung môi ngưng tụ nhỏ vào chất chiết đựng túi vải mỏng sau lại chảy vào bình Đặc biệt dụng cụ chiết soxhlet có thêm ống xi-phơng đặt bên cạnh, để dung dịch chiết chảy vào bình mức chất lỏng ống chiết đạt khuỷu ống xi-phông Chất chiết cần có tỷ khối lớn dung mơi Trong q trình cấu tử cần tách làm giàu thêm dung môi Cân 5g bột rau đắng khô cho lần chiết, gói vải mỏng Lắp soxhlet cho nguyên liệu vào, thêm 250ml ethanol tuyệt đối Tiến hành chiết 900C (trên bếp cách thủy) thời gian 2h, 4h, 6h, 8h, 10h Thu dịch chiết, pha lỗng 50 lần Tiến hành UV – VIS ta mật độ quang mẫu so sánh chọn thời gian chiết thích hợp 3.2.2.4 Kiểm tra sơ hiệu suất trình chiết soxhlet Để đánh giá sơ hiệu suất trình chiết soxhlet dịch rau đắng lấy toàn dịch thu sau lọc loại bỏ cặn Cho vào bình quay, thực quay chân khơng tạo cắn Tiến hành cân khối lượng cắn Từ khối lượng cắn so với khối lượng cân ban đầu tính sơ hiệu suất trình chiết cơng thức Thực tính hiệu suất mẫu chiết dung môi etanol:H2O = 80: 20, với thời gian chiết 2h, 4h, 6h, 8h, 10h m3 : khối lượng cắn + bình quay (g) m1: khối lượng bình quay (g) m: khối lượng mẫu ban đầu (g) 3.2.3 Kiểm tra định tính cách thành phần hóa học dịch rau đắng GCMS Thành phần hóa học dịch chiết rau đắng xác định phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC – MS) Dịch chiết rau đắng thu tiến hành cất quay chân khơng, thu cao rau đắng Thành phần hóa học dịch chiết rau đắng xác định phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ (GC – MS) TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] N T Bân, "Cẩm nang tra cứu nhận biêt họ thực vật hạt kín Việt Nam," NXB Nơng Nghiệp, p 16, 1997 [2] V V Chi, "Từ điển thực vật thông dụng," NXB KHKT, p 1275, 2003 [3] N T M Hương, "Nghiên cứu thành phần hóa học khả cải thiện hội chứng tự kỳ thực nghiệm phân đoạn n-Butanol từ cao chiết ethanol rau đắng biển," 2015 [4] V V Chi, "Từ điển thuốc Việt Nam," NXB KHKT, vol tập I, p 945 [5] T T T Thành, "Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học rau đắng đất.," 2009 [6] V D Liệu, "Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam," NXB Khoa học kỹ thuật, vol Tập 1, p 579 [7] D M H A Y K R M M B Holcomb LA, "Bacopa monniera extract reduces amyloid levels in PSAPP mice," vol 9(3), pp 243-51, 2006; [8] C Calabrese, "Effects of a Standardized Bacopa monnieri Extract on Cognitive Performance, Anxiety, and Depression in the Elderly: A Randomized, DoubleBlind, Placebo-Controlled Trial," vol 14(6), p 707–713, 2008 Jul; [9] S C I K M P P H T M C K Kamkaew N1, "Bacopa monnieri and its constituents is hypotensive in anaesthetized rats and vasodilator in various artery types," Journal of Ethnopharmacology, vol 137, no 1, pp 790-795, 2011 [10] C D R J S C S A Neale C, "Cognitive effects of two nutraceuticals Ginseng and Bacopa benchmarked against modafinil: a review and comparison of effect sizes," Br J Clin Pharmacol, vol 75(3), pp 728-37 , 2013 [11] J M Neelima B Chauhan, "in Bioactive Nutraceuticals and Dietary Supplements in Neurological and Brain Disease," 2015 [12] R H Manjeshwar Shrinath Baliga, "in Foods and Dietary Supplements in the Prevention and Treatment of Disease in Older Adults," 2015 Trang 62 [13] Y L Jason Pitt, "in Nutraceuticals," 2016 [14] Nguyễn Thu Hương, "Tổng quan dược liệu rau đắng biển," 2009 [15] L V D Phạm Thị Nguyệt Hằng, "Nghiên cứu độc tính cấp, tác dụng bảo vệ gan, chống oxy hoá hỗn hợp cao chiết từ actisơ, rau đắng đất bìm bìm biếc,," Tạp chí Dược học,, pp ISSN: 0866-7861, 2017 [16] N V Đ.- N V Tựu, "Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc," NXB y học Hà Nội, 1985 [17] Đ T Lợi, "Những thuốc vị thuốc Việt Nam," NXB Y Học Hà Nội, 2004 [18] N D Đ P Q K Nguyễn Thiện Luân, "Thực phẩm, thuốc thực phẩm chức Việt Nam," NXB Nông Nghiệp, 1997 ... tách chiết từ rau đắng đất 1.4.2 Trong nước Hiện nước cơng trình nghiên cứu rau đắng cịn hạn chế Một số nghiên cứu nước rau đắng Năm 2009 : Nguyễn Thu Hương, Tổng quan dược liệu rau đắng biển [14]... học dịch rau đắng GCMS Thành phần hóa học dịch chiết rau đắng xác định phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC – MS) Dịch chiết rau đắng thu tiến hành cất quay chân không, thu cao rau đắng Thành... Cao đặc Rau đắng đất - Diệp hạ châu 80mg; Rau đắng đất : 400mg; Diệp hạ châu 400mg; Tá dược: vừa đủ viên Mỗi viên nang mềm chứa: Cao khô: 320 mg; Actisơ : 400mg, Bìm bìm biếc : 400mg; Rau đắng đất
- Xem thêm -

Xem thêm: Cây rau đắng (polygonum aviculare), Cây rau đắng (polygonum aviculare)