Tài liệu PHƯƠNG PHÁP THU NHẬN CÁC CHẤT TỪ THỰC VẬT docx

[...]... (1200gdu/g hay 1800mcu/g) 27 Đề tài: Thu nhận bromelin và papain Hình IV.5: Chất chiết từ lá và thân dứa (Ananas comosus) với hàm lượng bromelain cao, được sản xuất dưới dạng viên nén, mỗi viên chứa 200mg bromelin 28 Đề tài: Thu nhận bromelin và papain PHẦN 3: THU NHẬN PAPAIN TỪ ĐU ĐỦ I TỔNG QUAN VỀ ENZYM PAPAIN [2]: 29 Đề tài: Thu nhận bromelin và papain Hình I.1: Nguồn ngun liệu thu nhựa để sản xuất papain... BAEE cao hơn gấp 140 lần 4 Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính bromelin Giống như các chất xúc tác sinh học khác, bromelin chịu ảnh hưởng bởi các yếu tố như cơ chất, nồng độ cơ chất, nồng độ enzyme, nhiệt độ, pH, ion kim loại, một số nhóm chức, phương pháp trích ly, phương pháp tinh sạch 18 Đề tài: Thu nhận bromelin và papain  Anh hưởng bởi cơ chất : Trên những loại cơ chất khác nhau thì bromelin... bằng cách đơng khơ Thế nhưng, cùng với việc tinh chế loại trừ những chất lẫn theo, tính dễ hỏng của enzym cũng tăng lên Các chế phẩm enzym thơ có thể được duy trì khá lâu ở 40oC  Các phương pháp khác: Ngồi những phương chính kể trên còn có một số phương pháp khác sử dụng cho từng trường hợp riêng cụ thể và được áp dụng khi các phương pháp nêu trên khơng đem lại hiệu quả cao Có thể kể đến ba phương pháp. .. chất ức chế protease: Trong tế bào cơ quan động thực vật tồn tại các chất ức chế enzym, trong đó có các chất ức chế protease Các chất ức chế trong tế bào thường có bản chất protein như enzym Hiện nay trong cơng nghiệp và y tế thường sử dụng rộng rãi các chất ức chế này Chế phẩm bromelin được sử dụng để thu nhận các chất ức chế các chất ức chế protein có chứa nhóm – SH Bromelin được tinh sạch sau đó... tài: Thu nhận bromelin và papain 32.100** 35.500*** * : tính từ phương pháp sa lắng- khuếch tán : tính từ hằng số sa lắng và độ nhớt bên trong *** : tính bằng phương pháp Archibald ** c Hoạt tính của bromelin:  Hoạt tính phân giải của bromelin: Bromelin có ba hoạt tính khác nhau: peptidase, amidase và esterase Bromelin thân có nhiều cơ chất tự nhiện và có thể thu phân cả cơ chất tự nhiên lẫn cơ chất. .. (H2N-CH(R)-CO-)k 31 Đề tài: Thu nhận bromelin và papain Các exopeptidase thu phân các peptid thành các amino acid (H2N-CH(R)-CO-NH-CH(R)-CO-)n + HOH (H2N-CH(R)-COOH)n’ + (H2N-CH(R)-CO-)k’ n’ + k’ = n So với các protease có nguồn gốc động vật và vi sinh vật khác thì papain có khả năng thủy phân sâu hơn Tính đặc hiệu cơ chất của papain rất rộng vì nó có khả năng phân hủy hầu hết các liên kết peptide trừ các liên... độ sạch của chế phẩm enzym cao gấp 2 lần, thời gian nhanh hơn và tiến hành thu n lợi Tủa thu được sau đó đem sấy chân khơng ở nhiệt độ 40 oC để thu nhận chế phẩm enzym III PHƯƠNG PHÁP TINH SẠCH BROMELIN [2]: Enzym bromelin được tinh sạch bằng phương pháp thẩm tích, lọc qua sephadex, phương pháp sắc kí 1 Tinh sạch bằng phương pháp thẩm tích: Tiến hành: - Cân 1g protein thơ - Dung dịch đệm sử dụng là... vào để tinh sạch và thu được dung dịch cơ đặc Thu nhận tủa bằng cách sử dụng acetone hoặc sấy thăng hoa dung dịch cơ đặc Để tăng khả năng tinh sạch, ta có thể tiến hành theo kiểu lọc lơ và lọc thể tích khơng đổi  Phương pháp sử dụng CMC: Phương pháp tách bromelin bằng CMC cho phép thu được bromelin ở dạng bột trắng có hoạt tính cao, thời gian nhanh và đơn giản hơn so với các phương pháp khác CMC vải... dược, mỹ phẩm……Phần thân, chồi và lá sau khi thu 14 Đề tài: Thu nhận bromelin và papain hoạch quả có thể được sử dụng để thu nhận enzym bromelin làm giấy, lấy sợi hoặc làm phân bón Hình I.1.1: Chồi dứa Hình I.1.2: Cây dứa 2 Đặc điểm enzym bromelin: Bromelin là tên gọi chung cho nhóm enzym thực vật chứa nhóm –SH, có khả năng phân giải protein được thu nhận từ họ Bromeliaceae, đặc biệt là ở cây dứa (thân,... tăng nồng độ enzym trong dung dịch Trong tất cả các phương pháp phân đoạn enzym (điện di, sắc kí…), cần phải loại trừ những ion kim loại nặng, chất oxi hóa… độc đối với enzym có trong dung dịch muối trong nước hoặc những pha rắn bất động bằng cách dùng thu c thử tiolic, các chất khử thích hợp (EDTA, mercaptoethanol, unitiol), complexon… 12 Đề tài: Thu nhận bromelin và papain III NHỮNG TIÊU CHUẨN TINH