ĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNA

ĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNAĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNA

TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG ………… o0o………… ĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC Mã:7720201 XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN TS THIỀU VĂN ĐƯỜNG SINH VIÊN THỰC HIỆN Họ tên: MSSV: Lớp: Cần Thơ , 2021 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG ………… o0o………… ĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC Mã:7720201 XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN TS THIỀU VĂN ĐƯỜNG SINH VIÊN THỰC HIỆN Họ tên: MSSV: Lớp: Cần Thơ , 2021 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề cương này, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban giám hiệu trường Đại Học Tây Đô Thành phố Cần Thơ tạo điều kiện sở vật chất với hệ thống thư viện đại, đa dạng loại sách, tài liệu thuận lợi cho việc tìm kiếm, nghiên cứu thơng tin Xin cảm ơn giảng viên môn – Ts.Thiều Văn Đường giảng dạy tận tình, chi tiết để em có đủ kiến thức vận dụng chúng vào đề cương nghiên cứu Do chưa có nhiều kinh nghiệm làm để tài hạn chế kiến thức, tiểu luận chắn không tránh khỏi thiếu sót Rất mong nhận nhận xét, ý kiến đóng góp, phê bình từ phía Thầy để tiểu luận hoàn thiện Cuối cùng, muốn cảm ơn bạn bè dành cho chúng tơi tình cảm,sự cổ vũ đóng góp ý kiến cho chúng tơi hồn thành đề cương Sinh viên thực Nguyễn Thị Phương Anh LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề cương “Xác định tên khoa học rau húng thị hình thái giải trình tự gen DNA” thực hướng dẫn Ts Thiều Văn Đường với nội dung phương pháp nghiên cứu hồn tồn trung thực Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm chịu hình thức kỷ luật theo quy định cho lời cam đoan Sinh viên thực Nguyễn Thị Phương Anh TĨM TẮT TÍNH CẤP THIẾT Cây Rau Húng gọi Cây Bạc Hà Nam Mentha arvensis L vị thuốc sử dụng từ nhiều năm để điều trị nhiều bệnh phổ biến như: Chữa cảm sốt, nhức đầu, sổ mũi, đau họng, khản tiếng, kích thích tiêu hố bệnh đường ruột, sát trùng giảm đau Theo tài nguyên Cây Thuốc Việt Nam, Bạc Hà có tác dụng kháng khuẩn thí nghiệm in vitro chủng vi khuẩn tả Vibro Choreia Elto, Vibro Choreia Inaba, Vibro Choreia Ogawa Vì vậy, việc “Xác định tên khoa học rau húng thị hình thái giải trình tự gen DNA” cần thiết nên tơi thực đề cương để xác định xác tên khoa học rau húng chi thị hình thái, thị phân tử nêu số vai trò rau húng chữa trị bệnh cho người PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Chỉ thị hình thái - Phương pháp phân loại thực vật để tìm hiểu rau húng theo thị hình thái - Phương pháp thị phân tử để xác định xác gen đặc trưng rau húng Giải trình tự gen DNA - Xác định công bố tác dụng rau húng việc chữa trị số bệnh vai trò với sức khỏe người KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Đề tài tổng hợp trình bày tương đối đầy đủ tên khoa học Rau Húng (Mentha arvensis L).Chiết xuất tinh DNA, giải trình tự gen DNA theo phương pháp Sanger trình tự gen ITS rau húng làm thị phân tử phân loại KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Đề tài cơng bố 02 kết luận xác, tin cậy xác định tên khoa học Rau Húng Đưa 02 kiến nghị hợp lý nhằm mở rộng đề tài, nghiên cứu rộng vai trò Rau Húng phát triển kinh tế, xã hội Tiền Giang MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 LƯỢC SỬ NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN .2 1.1.1 Trên giới .2 1.1.2 Ở Việt Nam 1.2 TỔNG QUAN VỀ CHỈ THỊ HÌNH THÁI CÂY RAU HÚNG .3 1.2.1 Khái niệm thị 1.2.2 Phân loại 1.2.3 Đặc điểm hình thái 4 Đặc điểm vi phẫu Đặc điểm sinh thái 1.3 CHỈ THỊ PHÂN TỬ 10 1.3.1 Khái niệm .10 1.3.2 Chiết xuất tin DNA 10 1.3.3 Phương pháp PCR 10 1.3.4 Giải trình tự gen (DNA) 12 1.4 VAI TRÒ CỦA CÂY RAU HÚNG VỚI SỨC KHỎE CON NGƯỜI 12 1.4.1 Dược liệu 12 1.4.2 Một số thuốc cổ truyền .13 1.4.3 Vai trò sức khỏe người 13 1.4.4 Một số lưu ý sử dụng Rau Húng (Bạc Hà Nam) .14 1.4.5 Một số chế phẩm sử dụng hôm 14 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .16 2.1.ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU .16 1 Thời gian, chọn mẫu nguyên vật liệu nghiên cứu 16 2 Nguyên liệu, Hóa chất, Thiết bị 17 Thời gian nghiên cứu 17 2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .17 2.2.1 Phương pháp thị hình thái .17 2 Phương pháp thị phân tử 18 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU LÝ THUYẾT 22 2.3.1 Nghiên cứu lý thuyết .22 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu tài liệu 22 2.4 VẤN ĐỀ ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU 22 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 KẾT QUẢ THU THẬP MẪU VÀ CHỈ THỊ HÌNH THÁI 22 3.1.Mẫu rau húng thu thập Tiền Giang vị trí: 22 1.1 Thân 23 HỒN THIỆN QUI TRÌNH CHIẾT X́T TINH SẠCH DNA VÀ PCR 23 3.2.1 Quy trình chiết xuất tinh DNA rút gọn 23 3.2.2 Quy trình thực phản ứng PCR rút gọn 23 3 KẾT QUẢ TẠO LẬP CHỈ THỊ PHÂN TỬ DNA CÂY RIỀNG NẾP 23 3.3.1 Kết chiết xuất tinh DNA 23 3.3.2 Kết giải trình tự gen DNA 23 3.3.3 Kết phân tích độ tương đồng NCBI 23 MỘT SỐ KẾT QUẢ BỔ SUNG VAI TRÒ DƯỢC CHẤT CÂY …………… 23 23 23 23 2 23 23 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 25 4.1 KẾT LUẬN 25 4.1.1.Mẫu rau húng thu thập Tiền Giang vị trí: 25 4.1.2.Đặc điểm thị hình thái thu phù hợp với …… mô tả đề tài .25 4.1.3 Hoàn thiện quy trình chiết xuất tinh DNA chu kỳ PCR rau húng 25 4.1.4 Kết chiết xuất tinh DNA rau húng trình tự gen 25 4.2 KIẾN NGHỊ 25 TÀI LIỆU THAM KHẢO 26 PHỤ LỤC 27 Phụ lục A .27 Phụ lục B 28 Phụ lục C CÁC HÌNH ẢNH CÂY RAU HÚNG TẠI TIỀN GIANG 30 DANH MỤC HÌNH Hình 1-1:Cây Rau Húng Hình 1-2: Thân Hình 1-3: Lá Hình 1-4: Hoa Hình 1-5: Quả Hình 1-6: Vi phẫu vuông Hình 1-7: Nội bì Hình 1-8: Gỗ .8 Hình 1-9: Lá Hình 1-10: Phiến Hình 1-11: Hoa thức hoa đồ Hình 1-12: Viên kẹo ngậm Eugica 15 Hình 1-13: Thuốc trị ho Eugica 15 Hình 1-14: Dung dịch vệ sinh phụ nữ .16 Hình 1-15: Tinh dầu bạc hà .16 Hình 1-16: Trà túi lọc bạc hà 16 DANH MỤC BẢNG Bảng 2-1: Bảng hoá chất 20 Bảng 2-2: Thành phần thứ tự phản ứng PCR .21 Bảng 2-3: Chương trình cài đặt bước 21 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT SỐ THỨ THỰ KÝ HIỆU TIẾNG ANH DNA RNA PCR RELP RAPD AFLP 10 EB ITS SDS EDTA Deoxy Ribonucleic Acid Acid Ribonucleic Polymerase Chain Reaction Restriction Fragment Length Polymorphison Randomly Amplified Polymorphicdnas Amplified Fragment Length Polymorphism Extraction Buffer Internal Transcribed Spacer Sodium Đoecyl Sulfate Ethylendiamin Tetraacetic Acid Cắt thành đoạn 3mm – 5mm vào ống eppendoft 2ml, lượng khoảng 2/3 ống Mỗi ống cho vào viên bi sắt chuyên dụng, đậy nắp lại Cho eppendoft chứa vào nitơ lỏng ( sau ng m dụng cụ đựng eppendoft vào nitơ lỏng), đủ độ lạnh lấy dụng cụ eppendoft chứa mẫu Lắp vào máy nghiền phút, chưa mịn ta cho thêm chu k phút Cho thêm vào eppendoft 1ml Extraction buffer (EB) đun cách thủy 650C trước 20 phút, trộn đều, cắm nước đá Thêm vào eppendoft 50 µl D 10% (lượng S.D.S cho vào theo tỉ lệ 50µl/ml W/v) Ủ máy lắc nước thời gian 30 phút nhiệt độ 650C Chú ý trước cho dịch EB vào eppendoft ta cho thêm β- Mecaptoethanol 0,2% theo tỷ lệ 7µl BME/10ml EB, trộn Trong trình ủ 650C, phút ta lại đảo tay lần Ly tâm máy ly tâm lạnh 40C, tốc độ 13.500 vòng/phút 20 phút Lấy đổ dịch phía sang ống eppendoft 2ml khác (ghi lại số mẫu) Thêm 1ml isopropanol (đã giữ tủ lạnh – 200C), đảo tay cách nhẹ nhàng phút Rồi để vào tủ lạnh 40C 30 phút qua đêm Ly tâm lạnh 40C tốc độ 13.500 vòng/phút 15 phút Đổ hết dịch phía giữ lại tủa đáy eppendoft để khơ tự nhiên, thêm vào 400µl TE 8.0 (10:0.1) Cho vào ủ 650C phút Lấy búng cho tan tủa dùng pipetteman 200 20 để hịa tan tủa (có thể để tan tự nhiên qua đêm nhiệt độ 0C) Cho 3µl RNase (10mg/1ml) vào ống, trộn eppendoft tay Ly tâm cho lắng xuống tốc độ đạt 2000 vịng dừng lại Ủ 370C giờ, sau cho vào giữ 0C (có thể ủ qua đêm) làm tiếp bước 10 10 Thêm vào eppendoft 400µl đệm CTAB ủ bình cách thủy 650C, 15 phút Thỉnh thoảng đảo trộn tay 11 Cho vào tủ hood, cho thêm 800µl Choloroform: isomylalcohol (24:1) vào eppendoft, lắc trộn tay từ 5-7 phút 12 Ly tâm 13.500 vòng/phút 10 phút 13 Dùng pipetteman hút chuyển dịch phía sang ống eppendoft (ghi lại số ống) 14 Lặp lại bước 11 15 Lặp lại bước 12 16 Lặp lại bước 13 17 Thêm 1400 µl ethanol 96% (đã làm lạnh) giữ tủ lạnh – 200C qua đêm 18 Ly tâm 13.500 vòng/phút 0C 30 phút, loại bỏ cồn giữ lại kết tủa đáy ống 18 19 Rửa tiếp 400 µlethanol 70% (đã làm lạnh) ly tâm 13.500 vòng/phút phút 0C au đổ ethanol giữ tủa lại 20 (Lặp lại bước 19) 21 Đổ ethanol giữ tủa lại để khô tự nhiên cho vào máy ly tâm khô chân không khoảng 10 phút để làm khô DNA 22 Cho thêm vào eppendoft 50µl TE (10 0,1) để hòa tan DNA 23 Giữ DNA tủ lạnh – 200C, dùng dần Chuẩn bị dung dịch đệm hóa chất 2 2 Kiểm tra độ tinh xác định nồng độ DNA * Đệm CTAB (EB) 500ml + CTAB 2% 10 gam CTAB + EDTA(pH:8) 0,5M 50ml + NACL 2M 200ml 5M + Tris Cl (pH = 7.5) 0,2M 100ml 1M(pH= 7,5) + H2O khử trùng lần thêm vào cho đủ tổng số 500ml Bảng 2-1: Bảng hoá chất *isopropanol (2-Propanol) * SDS 10% *β-Mercaptoethanol : 0,2% * TE pH (10:0,1) + 600µl Tris.HCL 1M pH = + 12µl EDTA 0,5M pH = + Thêm dH2O cho đủ V = 60ml * RNase – 10mg Nase/10ml H2O đun sôi 10-15 phút, giữ -200C * Hỗn hợp Chloroform: isoamylalcohol (24:1) * Ethanol tuyệt đối ethanol 70% giữ - 200C 2 Kỹ thuật phân tích DNA thị vi vệ tinh (SSR) Kỹ thuật thực theo phương pháp Phịng thí nghiệm Di truyền phân tử, Khoa thực vật Thổ nhưỡng, thuộc trường ĐH Cơng nghệ Texas, Hịa K Chuẩn bị phản ứng chuỗi PCR  Để làm phản ứng, Pha DN khn (template) mẫu đồng 30ng/lµl  Kiểm tra mồi để làm phản ứng, với mồi cịn tốt dùng 0,32µl (10µM/µl) cho phản ứng (tổng số 20µl)  Trình tự primer ITS ITS 5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’ ITS 5’-TCCTCCGCTTATTG ATATGC Thành phần thứ tự phản ứng PCR: Thành phần Thứ tự thêm 19 Thể tích (µl) Nồng độ cuối vào Nước cất lần khử ion, khử trùng 5xPCR Buffer (với dNTP, loại 10µl + 10µl BSA +450 µl dH2O) MgCl2 Mồi thuận (10µM) Mồi nghịch (10µM) TaqDNA polymerase (5units/µl) ADN khn (30ng/µl) Tổng thể tích X 4 0,64 Y * 1x(dNTP = 200µl) 15mM 0,2µM 0,2µM 1.5 Units ≈90ng/20µl 0,3 20µl Bảng 2-2: Thành phần thứ tự phản ứng PCR  Sau làm xong phản ứng ta ly t m 2000v/phút, cho mẫu lắng xuống máy ly t m c n Khi tốc độ đạt 2000v/phút ta lấy  Tiến hành phản ứng PCR Mỗi phản ứng PCR thường chạy 30 chu kỳ Chường trình chạy phụ thuộc nhiệt độ ủ (annealing) mồi Thường nhiệt độ ủ 550 , ta có chương trình cài đặt sau: (Nguồn: Sổ tay thực hành SHPT Trần Nhân Dũng, NXB: ĐHCT, 2011) Nhiệt độ(℃) Thời gian 94 5’ 950 1:30” 55 1:30” 72 1:30” 720 Cho đến lấy Bảng 2-3: Chương trình cài đặt bước Các bước I Số chu kỳ II 30 III IV Trường hợp nhiệt độ ủ 600C hay 630C ta thay đổi nhiệt độ ủ 550C bước II thành 600C hay 630C 2 Phương pháp xử lý số liệu Phân tích phân ly di truyền Các số liệu phân tích phân ly di truyền tính trạng kháng rầy xử lý thống kê (Gomez and Gomez, 1984) theo phép thử “x2 ” Như đ y, có lớp phân ly (m=2), ta có: X2 = Cịn trường hợp có lớp phân ly (m>2), ta có: 20 X2 = Trong đó: i= 1, 2, …., m m số lớp phân ly Qi tần số quan sát thực tế lớp i Li tần số xuất lý thuyết lớp i Từ giá trị « X2 tìm , tra bảng thống kê để tìm giá trị P tương ứng Nếu P>0,05 tỉ lệ phân ly thực nghiệm coi phù hợp với lý thuyết Tương dồng di truyền khoảng cách di truyền Phân tích mức tương đồng di truyền khoảng cách di truyền theo chương trình PopGene, theo cơng thức Nei (1972) [146] : I= D = - ln (I) Trong : I – mức tương đồng di truyền D – khoảng cách di truyền mẫu q12 – số alen đồng mẫu Q1 Q2 tổng số alen mẫu mẫu Phân tích liên kết Phân tích liên kết thị phân tử với locut gen kháng rầy nâu định vị locut gen kháng rầy nâu nhiễm sắc thể lúa tiến hành theo chương trình máy tính MapMarker Phân tích liên kết Phân tích liên kết thị phân tử với locut gen kháng rầy nâu định vị locut gen kháng rầy nâu nhiễm sắc thể lúa tiến hành theo chương trình máy tính MapMarker 2 Giải trình tự DNA xác định gen ITS Kỹ thuật dựa phương pháp Sanger ( Sanger er al.,1977) Mỗi loại dideoxynucleotid đánh dấu chất hu nh quang có màu khác Nhờ oligonucleotid cuùng chấm dứt dideoxxynucleotid có màu DNA giải trình tự cơng ty DNA Sequencing ServicesGeneral Order Information, Hàn Quốc máy đọc trình tự tự động 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU LÝ THUYẾT 2.3.1 Nghiên cứu lý thuyết -Phương pháp thu thập thơng tin, ph n tích, so sánh, tổng hợp - Phân loại thông tin nghiên cứu 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu tài liệu - Nội dung cần thu thập trình nghiên cứu tài liệu - Nguồn tài liệu Bài báo, Hội thảo khoa học, giáo trình Hóa sinh, -Luận văn Luận án khoa học liên quan đến Rau Húng, trang Web liên quan 21 - Phân tích tài liệu -Tổng hợp tài liệu 2.4 VẤN ĐỀ ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU - Các thông tin thu thập phải đảm bảo xác, có độ tin cậy cao - Kết nghiên cứu không làm ảnh hưởng đến hoạt động kinh doanh - Sản xuất quan nghiên cứu CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN KẾT QUẢ THU THẬP MẪU VÀ CHỈ THỊ HÌNH THÁI 3.1.Mẫu rau húng thu thập Tiền Giang vị trí: - Kinh độ: … - Vĩ độ: …… Passifloraedulis Loài (species): … Chi (genus): … Họ (familia): … Bộ (ordo):… Lớp: Giới (regnum): Hình Tọa độ địa lý Tên khác: 1.1 Thân Lá 3 Rễ Hoa 3.1.5 Quả Hạt 22 HOÀN THIỆN QUI TRÌNH CHIẾT XUẤT TINH SẠCH DNA VÀ PCR 3.2.1 Quy trình chiết xuất tinh DNA rút gọn 3.2.2 Quy trình thực phản ứng PCR rút gọn 3.2.2.1 Chuẩn bị phản ứng chuỗi PCR 3.2.2.2 Thành phần thứ tự phản ứng PCR: 3.2.2.3 Tiến hành phản ứng PCR 3.2.2.4 Kiểm tra độ tinh xác định nồng độ DNA 3 KẾT QUẢ TẠO LẬP CHỈ THỊ PHÂN TỬ DNA CÂY RIỀNG NẾP 3.3.1 Kết chiết xuất tinh DNA 3.3.2 Kết giải trình tự gen DNA 3.3.3 Kết phân tích độ tương đồng NCBI MỢT SỐ KẾT QUẢ BỔ SUNG VAI TRỊ DƯỢC CHẤT CÂY …………… 3.4.1.1 3.4.1.2 1.3 ………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………… 4 2 ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………… 23 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 KẾT LUẬN Quá trình nghiên cứu, tổng hợp tài liệu qua báo cáo khoa học khẳng định 4.1.1.Mẫu rau húng thu thập Tiền Giang vị trí: - Kinh độ: - Vĩ độ: Tên khoa học: Loài (species): Chi (genus): Họ (familia): Lớp: Giới (regnum): Plantae Hình Tọa độ địa lý Tên khác: 4.1.2.Đặc điểm thị hình thái thu phù hợp với …… mô tả đề tài Thân Lá Rễ Hoa Quả Hạt Kết luận: 4.1.3 Hồn thiện quy trình chiết xuất tinh DNA chu kỳ PCR rau húng 4.1.4 Kết chiết xuất tinh DNA rau húng trình tự gen của 4.2 KIẾN NGHỊ - TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước Bộ Y tế, 2017 Dược điển Việt Nam V Nhà xuất Y học, tập 2, Tr.1301 24 Bộ Y Tế, 2009 Dược điển Việt Nam V Nhà xuất Y học Tr 590 Cổng thông tin điện tử Bộ Y tế (MOH) Trung tâm liệu thực vật Việt Nam Mai Trần Ngọc Tiếng, 2001 Thực vật cấp cao Nhà xuất Đại học Quốc gia TP HCM, Tr 45-61, Tr 183-193 Dược Thư Quốc Gia 2002-2009 Tr 3081-3087 Tài liệu nước Adnyana, I.K., F Setiawan and M Insanu, 2013 From ethnopharmacology to clinical study of Orthosiphon stamineus Benth Int J Pharm Pharmaceut Sci., 5: 66-73 Akowuah, G.A., Z Ismail, I Norhayati and A Sadikun, 2005 The effects of different extraction solvents of varying polarities on polyphenols of Orthosiphon stamineus and evaluation of the free radical-scavenging activity Food Chem., 93: 311-317 Wedsite Https://Duoclieu.vn truy cập ngày 28 tháng năm 2021 Http://uphcm.edu.vn/caythuoc/index.php?q=node/109 truy cập ngày 28 tháng năm 2021 http://uphcm.edu.vn/caythuoc/index.php?q=node/73truy cập ngày tháng 10 năm 2021 https://www.ydhvn.com/news/cay-duoc-lieu-cay-bac-ha-hay-bac-ha-nam-menthaarvensis Truy cập ngày tháng 10 năm 2021 25 PHỤ LỤC Phụ lục A 26 Phụ lục B: Quytrìnhlytrích DNA Tách chiết DNA: - Nghiền 200l mẫu túp eppendorf máy nghiền - Thêm 1ml dung dịch trích (EB) 50l SDS (10%) - Ủ 65 30’ (5’ đảo nhẹ) - Li tâm 13.000rpm 10’ - Chuyển phần (800l) vào túp thêm lượng tương đương Isopropanol, ủ -20oC - Li tâm 13.000rpm 10’, hoà tan DNA 400 l TE - Thêm 10l Rnase (10mg/ml) ủ 37 15’ - Thêm 400l CTAB buffer ủ 65 15’, đảo ngược ống túp để trộn - Thêm 800l Chloroform/Isoamylalcohol (24:1) trộn đều.Litâm 13.000rpm 5’ - Chuyển phần dung dịch qua túp 2.2 ml mới, thêm 1ml Ethanol 96% ủ nhiệt độ phòng 15’ - Li tâm 13.000rpm 10’, đổ bỏ phần rửa phần cặn với ethanol 70% 700l.Li tâm lần để loại bỏ ethanol - Để vào máy li tâm chân khơng 45 10’ - Hồ tan DNA 200l TE 0.1 (Nguồn: Sổ tay thực hành SHPT Trần Nhân Dũng, NXB: ĐHCT, 2011) Phản ứng PCR Sau tinh DNA, tiến hành phản ứng PCR với cặp mồi (White et al., 1990) có trình tự sau: ITS 1: 5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’ ITS 4: 5’-TCCTCCGCTTATTG ATATGC-3’ Quá trình thực phản ứng PCR: Hóa chất H20 PCR buffer (10X Taq buffer (NH4)2SO4) Polymerisation MgCl2 (25mM) dNTPS Primer F Primer R Taq DNA polymerase (5u/µL) DNA Tổng cộng Giai đoạn Tên giai đoạn Biến tính Thể tích (µl) 34,5 3 1 0,5 50 Chu kỳ 30 27 Nhiệt độ (0C) 95 95 Thời gian phút 60 giây Bắt cặp 30 Kéo dài 30 54 72 72 50 giây 90 giây giây Sản phẩm PCR tinh giải trình tự hệ thống giải trình tự tự động Kết so sánh với sở liệu GenBank trang web NCBI công cụ BLASTN 28 Phụ lục C CÁC HÌNH ẢNH CÂY RAU HÚNG TẠI TIỀN GIANG 29 XÁC NHẬN CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN TP Cần Thơ, ngày… tháng… năm 202 GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN TS THIỀU VĂN ĐƯỜNG 30 NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA GIẢNG VIÊN CHẤM Họ Tên:… Nhận xét: ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………… ĐIỂM KÝ TÊN 31 NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA GIẢNG VIÊN CHẤM Họ Tên:……………………………… …………………………………… Nhận xét: ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………… ĐIỂM KÝ TÊN 32 .. .KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG ………… o0o………… ĐỀ CƯƠNG KHOA HỌC Mã:7720201 XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÂY RAU HÚNG TRỒNG TẠI TIỀN GIANG BẰNG CHỈ THỊ HÌNH THÁI VÀ GIẢI TRÌNH TỰ GEN DNA GIẢNG... BÀN LUẬN Đề tài tổng hợp trình bày tương đối đầy đủ tên khoa học Rau Húng (Mentha arvensis L).Chiết xuất tinh DNA, giải trình tự gen DNA theo phương pháp Sanger trình tự gen ITS rau húng làm... húng thị hình thái giải trình tự gen DNA? ?? cần thiết nên thực đề cương để xác định xác tên khoa học rau húng chi thị hình thái, thị phân tử nêu số vai trò rau húng chữa trị bệnh cho người PHƯƠNG