Nghiên cứu hoạt tính sinh học của rau dền cơm (Amaranthus lividus L.) thu hái tại Gia Lai

Rau dền cơm là loại thực vật phổ biến ở Gia Lai, có tác dụng chống ung thư, chống oxy hóa và kháng khuẩn. Nghiên cứu trình bày kết quả thử nghiệm hoạt tính sinh học của rau dền cơm (Amaranthus lividus L.) thu hái tại tỉnh Gia Lai. Đánh giá giá hoạt tính kháng tế bào ung thư (IC50) cho kết quả tốt lần lượt với cao chiết EtOAc và n-hexan là 8,0 µg/ml và 11,2 µg/ml ( 20 μg/ml, NCI).

Kỷ yếu Hội nghị: Nghiên cứu “Khoa học Trái đất Môi trường” DOI: 10.15625/vap.2019.000196 NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA RAU DỀN CƠM (AMARANTHUS LIVIDUS L.) THU HÁI TẠI GIA LAI Phạm Thiết Quốc1, Nguyễn Trung Hiếu1, Phan Thị Thu Sương1, Đoàn Thị Quỳnh Trâm2, Nguyễn Minh Kỳ2* Trường THPT Hà Huy Tập, Gia Lai Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh, e-mail: nmky@hcmuaf.edu.vn TÓM TẮT Rau dền cơm loại thực vật phổ biến Gia Lai, có tác dụng chống ung thư, chống oxy hóa kháng khuẩn Nghiên cứu trình bày kết thử nghiệm hoạt tính sinh học rau dền cơm (Amaranthus lividus L.) thu hái tỉnh Gia Lai Đánh giá giá hoạt tính kháng tế bào ung thư (IC50) cho kết tốt với cao chiết EtOAc n-hexan 8,0 µg/ml 11,2 µg/ml ( 20 μg/ml, NCI) Kết so sánh cho thấy, cao chiết EtOAc từ dền cơm có hoạt tính kháng khuẩn tốt so với cao chiết MeOH Tuy nhiên, cao chiết từ Amaranthus lividus L chưa có khả kháng oxy hóa nồng độ khảo sát thấp Từ khóa: Rau dền cơm, chống ung thư, Gia Lai, hoạt tính sinh học MỞ ĐẦU Bên cạnh tăng trưởng kinh tế mạnh mẽ, tình trạng mắc bệnh ung thư ngày diễn biến phức tạp Các nhà khoa học tìm kiếm nguồn dược phẩm nguồn gốc thực vật có khả đẩy lùi chứng bệnh ung thư Trong Việt Nam thuộc vùng nhiệt đới gió mùa nên phong phú thực vật, có nhiều lồi sử dụng y học cổ truyền [1,2] Rau dền tên gọi chung lồi chi Dền, mọc hoang dại nhiều dễ tìm kiếm Amaranthus viridis L thấy nhiều vùng khí hậu khác nhau, từ đồng tới vùng núi độ cao 1.000 m Hơn nữa, hợp chất có hoạt tính sinh học tìm thấy từ thiên nhiên dùng trực tiếp y học [2] Amaranthus viridis L cịn sử dụng điều trị táo bón, viêm nhiễm, bệnh mụn nhọt da, thiếu máu [3] Đây loại rau phổ biến nhiều tỉnh thành nước, thu hái quanh năm, rửa sạch, phơi khô sử dụng rễ, thân, Các nghiên cứu sinh học dược lý đại cho thấy rễ, thân, rau dền có chứa vitamin, hợp chất steroids, saponin, flavonoids, lipid [4] Do đó, đề tài “Nghiên cứu hoạt tính sinh học rau dền cơm (Amaranthus lividus L.) thu hái Gia Lai” có ý nghĩa thực tiễn Mục tiêu nghiên cứu nhằm khảo sát so sánh hoạt tính sinh học (kháng tế bào ung thư gan, kháng khuẩn kháng oxy hóa) loại cao chiết MeOH, n - hexan, EtOAc từ rau dền rơm PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU * Vật liệu: Nguyên liệu Amaranthus lividus L thu thập địa bàn thị trấn Kông Chro, huyện Kông Chro tỉnh Gia Lai Nguyên liệu tuyển chọn với khỏe, sạch, không bị sâu bọ Nguyên liệu sau thu hái, rửa cẩn thận để trình chiết tách đạt hiệu cao, đồng thời loại bỏ bị hư trước phơi khô thái nghiền nhỏ * Phương pháp chiết xuất tạo cao chiết: Amaranthus lividus L thu hái, rửa sạch, phơi khô, thái nhỏ để tạo mẫu nguyên liệu khô Mẫu khô (3kg) nghiền nhỏ, sau ngâm chiết với dung mơi MeOH Q trình chiết thực lần, thời gian 24h/lần Dịch chiết lần chiết gom lại tiến hành cất loại dung môi áp suất giảm nhiệt độ ≤450C, thu cao chiết Cao chiết tổng pha lỗng nước cất sau chiết phân bố với dung môi n-hexan EtOAc Cất loại hết dung môi từ dịch thu cao chiết: MeOH, n-hexan EtOAc [5] * Phương pháp thử hoạt tính sinh học: Thử kháng độc tế bào phương pháp thử độ độc tế bào in vitro nhằm sàng lọc, phát chất có khả kìm hãm phát triển diệt tế bào ung thư điều kiện in vitro Thí nghiệm hoạt tính kháng nấm, kháng khuẩn kiểm định theo phương pháp khuếch tán thạch phương pháp pha loãng đa nồng độ để xác định IC50 527 Kỷ yếu Hội nghị: Nghiên cứu “Khoa học Trái đất Môi trường” Nguyên tắc thử hoạt tính kháng oxy hóa sử dụng 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) Những thí nghiệm thử hoạt tính sinh học thực Viện Hóa học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Nhìn chung, rau dền có tác dụng chống ung thư, chống oxy hóa kháng khuẩn [6] Dịch chiết rau dền thể chức ức chế enzym α-amylase, tác dụng chống viêm tốt, có khả bảo vệ gan chống oxy hóa [7] Nghiên cứu tiến hành thử hoạt tính gây độc tế bào ung thư gan cao chiết với nồng độ khác thu kết Bảng Bảng Kết thử hoạt tính gây độc tế bào ung thư gan Phần trăm ức chế dòng tế TT T n mẫu Nồng độ mẫu thử ( g/ml) bào ung thư gan Hep-G2 256 46 64 40 16 24 MeOH 20 14 IC50 >256 256 89 64 63 16 54 n- hexan 44 40 IC50 11,2 256 98 64 76 16 52 EtOAc 49 32 IC50 8,0 Ellipticine IC50 0,30 Căn giá trị IC50 tính dựa kết số liệu phần trăm kìm hãm phát triển tế bào ung thư cho thấy: Cao chiết EtOAc có hoạt tính kháng tế bào ung thư cao (IC50 = 8,0 µg/ml) Cao chiết n - hexan hoạt tính kháng tế bào ung thư mức cao (IC50 =11,2 µg/ml) Theo tiêu chuẩn Viện Ung thư Quốc gia Hoa Kỳ (NCI), cao chiết đánh giá có hoạt tính tốt với giá trị IC50 20 μg/ml [8] Điều biểu thị loại cao chiết n-hexan EtOAc từ Amaranthus lividus L thu hái Gia Lai có nồng độ chất kháng tế bào ung thư gan cao Đối với cao chiết MeOH khơng thể hoạt tính gây độc tế bào ung thư nồng độ 256 (µg/ml) thấp Ảnh hưởng cao chiết lên phát triển vi khuẩn, nấm khảo sát mẫu thử (cao chiết MeOH), (cao chiết n-hexan) khơng thể hoạt tính ức chế vi sinh vật kiểm định nồng độ thấp 256 g/ml ẫu thử (cao chiết EtOAc) hoạt tính ức chế nhẹ với chủng vi sinh vật gram ( ) khơng thể hoạt tính với chủng kiểm định khác Kết so sánh cho thấy, cao chiết EtOAc từ dền cơm có hoạt tính kháng khuẩn tốt so với cao chiết MeOH Có thể nhận thấy cao chiết rau dền có dấu hiệu diệt số chủng vi khuẩn nấm kiểm định mức độ thấp 528 Hồ Chí Minh, tháng 11 năm 2019 Tên mẫu Nồng độ thử ( g/ml) Bảng Kết thử hoạt tính kháng khuẩn Phần trăm ức chế nồng độ thử (%) Gram (+) Gram (-) Nấm Pseudo monas Candida aerugin albican osa 256 0 28 0 0 64 0 0 0 Cao 16 0 0 0 chiết 0 0 0 MeOH 0 0 0 IC50 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 256 0 0 0 64 0 0 0 Cao 16 0 0 0 chiết n4 0 0 0 hexan 0 0 0 IC50 >256 >256 >256 >256 >256 >256 >256 256 41 45 52 0 0 64 33 10 19 0 0 Cao 16 14 0 0 0 chiết 0 0 0 EtOAc 0 0 0 IC50 >256 >256 244,4 >256 >256 >256 >256 Các hợp chất chống oxy hóa polyphenol flavonoid có tác dụng làm gốc tự peroxide, hydroperoxide lipid peroxide ức chế chế oxy hóa dẫn đến bệnh thối hóa Cao chiết dền cơm khảo sát thành phần hoá học tannin, ankaloid flavonoid [9] Flavonoid có khả kìm hãm q trình oxy hóa dây truyền gây gốc tự hoạt động Hoạt động kháng khuẩn kháng oxy hố cao chiết dền cơm tác động flavonoid Trong nghiên cứu này, hiệu trung hòa gốc tự DPPH cao chiết MeOH EtOAc nồng độ 256 µg/ml tương ứng 12 15% Kết cho thấy cao chiết từ Amaranthus lividus L chưa có khả kháng oxy hóa nồng độ khảo sát, cần nghiên cứu thêm khả kháng oxy hóa cao chiết nồng độ cao KẾT LUẬN Nghiên cứu tiến hành thử hoạt tính sinh học rằng, cao chiết EtOAc có hoạt tính kháng tế bào ung thư mạnh (IC50 8,0 µg/ml), cao chiết n- hexan có hoạt tính kháng tế bào ung thư mạnh (IC50 11,2 µg/ml), riêng cao chiết eOH chưa thấy có hoạt tính kháng tế bào ung thư gan nồng nộ nghiên cứu Kết hoạt tính kháng khuẩn cao chiết MeOH n-hexan khơng thể hoạt tính ức chế vi sinh vật kiểm định nồng độ thấp 256µg/ml Cao chiết EtOAc hoạt tính ức chế nhẹ với chủng vi sinh vật gram ( ) (IC50 244,4 g/ml) hoạt tính với chủng kiểm định khác Ngồi ra, với hoạt tính kháng oxy hóa loại cao chiết chưa có kết thể rõ Như vậy, cao chiết từ Amaranthus lividus L (n-hexan EtOAc) có hoạt tính sinh học q kháng tế bào ung thư gan kháng khuẩn nhẹ (đối với cao chiết EtOAc) Qua việc thử hoạt tính sinh học loại cao chiết từ Amaranthus lividus L cho thấy chúng có hoạt tính kháng tế bào ung thư gan (đối với cao chiết nhexan EtOAc), cần nghiên cứu sâu để tạo chế phẩm có khả chữa bệnh ung thư gan Staphylo coccus aureus Bacillu s su btilis Lactobacill us fermentum 529 Salmonella enterica Escheric hia coli Kỷ yếu Hội nghị: Nghiên cứu “Khoa học Trái đất Môi trường” TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Đỗ Tất Lợi, (2004) Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội [2] Nguyễn Văn Đàn, Ngô Ngọc Khuyến, (2009) Hợp chất thiên nhiên dùng làm thuốc NXB Y học, Hà Nội [3] L Nguyễn Thành, Cao Thị Huệ, i Thu Hà, Nguyễn Văn Quyền, Phan Anh Thư, (2017) Nghi n cứu đặc điểm sinh học hoạt tính sinh học Rau dền cơm (Amaranthus lividus L.) thu hái Hưng n Hội nghị khoa học Toàn quốc Sinh thái Tài nguy n Sinh vật lần thứ 7, tr 1468-1474 [4] Ragasa C.Y., Austria J P M., Subosa A F., Torres O.B, Shen CC., (2015) Chemical Constituents of Amaranthus viridis Chemistry of Natural Compounds, 51(1), 146-147 [5] Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007 Phương pháp cô lập hợp chất hữu NX Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh [6] Jin Y.S., Xuan Y., Chen M., Chen J., Jin Y., Piao J., Tao J., (2013) Antioxidant, antiinflammatory and anticancer activities of Amaranthus viridis L Extracts Asian Journal of Chemistry, 25(16), 8901-8904 [7] Vivek K.R., Satish K., Shashidhara S., Anitha S., (2011) Invitro Antioxidant, AntiAmylase, AntiArthritic and Cytotoxic Activity of Important Commonly Used Green Leafy Vegetables Int J PharmTech Res, 3(4), 2096-2103 [8] Monks A., Scudiero D., Skehan P., Shoemake R., Paull K., Vistica D., Hose C., Langley, Cronise J.P., Campbell H., Mayo J., Boyd M., (1991) Feasibility of a high-flux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines Journal of National Cancer Institute, 11, 757 [9] Nazish N., Sonia M & Rajinder K.G., (2016) Nutritional and phytochemical evaluation of A lividus L syn Amaranthus blitum subsp oleraceus (L.) Costea leaves Indian Journal of Traditional Knowledge, 15(4), 669-674 STUDY OF BIOLOGICAL ACTIVITIES OF SLENDER AMARANTH (AMARANTHUS LIVIDUS L.) IN GIALAI PROVINCE Pham Thiet Quoc1, Nguyen Trung Hieu1, Phan Thi Thu Suong1, Doan Thi Quynh Tram2, Nguyen Minh Ky2* Ha Huy Tap High School, Gialai Province Nong Lam University of Ho Chi Minh City, e-mail: nmky@hcmuaf.edu.vn ABSTRACT Slender amaranth (Amaranthus lividus L.) is a popular plant in Gia Lai, with anti-cancer, antioxidant and antibacterial effects The study presents the experimental results of biological activity of Amaranthus lividus L collected in Gia Lai province Evaluation of antitumor activity (IC50) showed good results with EtOAc and n-hexane which extracts respectively 8.0 µg/ml and 11.2 µg/ml ( 20 μg/ml, NCI) The comparison results showed that EtOAc extract from Amaranthus lividus L has better antibacterial activity than MeOH extract However, the investigated extracts from Amaranthus lividus L were incapable of inhibiting oxidation at low concentrations Keywords: Amaranthus lividus L., anti-cancer, Gialai, biological activities 530 ... thu? ??c NXB Y học, Hà Nội [3] L Nguyễn Thành, Cao Thị Huệ, i Thu Hà, Nguyễn Văn Quyền, Phan Anh Thư, (2017) Nghi n cứu đặc điểm sinh học hoạt tính sinh học Rau dền cơm (Amaranthus lividus L.) thu. .. hóa nồng độ khảo sát, cần nghiên cứu thêm khả kháng oxy hóa cao chiết nồng độ cao KẾT LUẬN Nghiên cứu tiến hành thử hoạt tính sinh học rằng, cao chiết EtOAc có hoạt tính kháng tế bào ung thư... EtOAc) Qua việc thử hoạt tính sinh học loại cao chiết từ Amaranthus lividus L cho thấy chúng có hoạt tính kháng tế bào ung thư gan (đối với cao chiết nhexan EtOAc), cần nghiên cứu sâu để tạo chế