Đang tải... (xem toàn văn)
MỞ ĐẦU Tiểu đường là một nhóm bệnh rối loạn chuyển hóa cacbohydrat, mỡ và protein khi hormone insulin của tuyến tụy bị thiếu hay giảm tác động trong cơ thể, biểu hiện bằng mức đường trong máu luôn cao. Trong giai đoạn mới phát bệnh bệnh nhân thường đi tiểu nhiều, tiểu ban đêm và do đó làm khát nước, về lâu dài gây phá hủy các hệ thống trên cơ thể, đặc biệt là các mạch máu và dây thần kinh. Theo thời gian, bệnh tiểu đường có thể dẫn đến mù, suy thận và tổn thương thần kinh. Tiểu đường cũng là một trong những yếu tố quan trọng thúc đẩy quá trình hình thành xơ vữa động mạch, dẫn đến đột quỵ, bệnh tim mạch. Các biến chứng mãn tính xảy ra sớm hay muộn, nặng hay nhẹ rất khác biệt ở từng bệnh nhân. Nhưng nói chung, nếu kiểm soát tốt đường huyết, chúng ta có thể ngăn ngừa hoặc làm chậm hay nhẹ đi các biến chứng mãn tính của bệnh tiểu đường [1]. Xu hướng sử dụng nguồn dược liệu tự nhiên nói chung, đặc biệt là các hợp chất thiên nhiên có nguồn gốc từ thực vật để chữa trị một số bệnh nhiệt đới và những bệnh hiểm nghèo đã và đang là mối quan tâm không chỉ của ngành dược ở nước ta mà còn của các nước trong khu vực cũng như các nước trên thế giới. Nhiều cây thuốc bản địa đã được phát hiện có tác dụng làm hạ đường huyết. Đây là một lợi thế vì khả năng cung cấp nguyên liệu để điều trị cũng như ít tác dụng phụ. Theo thống kê, trên thế giới có khoảng 800 loài được cho là có khả năng điều trị bệnh tiểu đường [2]. Tiêu biểu trong số đó là các loài: dây thìa canh (G. sylvestre), mướp đắng (Momordica charantia), cải bẹ xanh (Brassica Juncea), bồ công anh (Elephantopus scaber), cỏ tóc tiên (Liriope spicata), thầu dầu (Ricinus communis), khoai sâm (Smallanthus sonchifolius), trạch lan (Vernonia anthelmintica), … Các loài thuộc chi Gymnema thuộc họ Trúc đào (Apocynaceae) đã nhận được rất nhiều quan tâm của các nhà khoa học trên thế giới. Các loài thuộc chi Gymnema được coi như là nguồn cung cấp các hoạt chất và thể hiện các hoạt tính sinh học (hạ đường huyết, kháng tế bào ung thư, chống oxi hóa, kháng viêm, …). Đặc biệt, loài G. sylvestre được sử dụng rộng rãi như là một loại thảo dược chuyên trị bệnh tiểu đường từ trên 2000 năm ở Ấn Độ. Loài này còn được dùng để điều trị hen suyễn, đau mắt, viêm và rắn cắn. Bên cạnh đó, G. sylvestre có tính kháng khuẩn và bảo vệ tế bào gan. Tuy nhiên ở Việt Nam chỉ mới có một vài nghiên cứu về thành phần hóa học và dược học của loài Gymnema sp. Xuất phát từ điểm đó,2 chúng tôi đề xuất đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase và α-amylase của loài dây thìa canh - Gymnema sylvestre (Retz.) R.Br. ex Sm. và dây thìa canh lá to - Gymnema latifolium Wall. ex Wight”. Mục tiêu của luận án: Mục tiêu của luận án là xác định được thành phần hóa học chủ yếu của thân và lá của hai loài Gymnema sylvestre và Gymnema latifolium ở Việt Nam và đánh giá được tác dụng ức chế enzyme α-glucosidase và α-amylase in vitro của các hợp chất phân lập được. Nội dung luận án bao gồm: 1. Phân lập các hợp chất từ thân và lá loài G. sylvestre và G. latifolium ở Việt Nam. 2. Xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất phân lập được bằng các phương pháp vật lý, hóa học. 3. Đánh giá tác dụng ức chế enzyme α-glucosidase và α-amylase của các hợp chất phân lập được từ loài G. sylvestre và G. latifolium.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Dương Thị Hải Yến NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYM -GLUCOSIDASE VÀ -AMYLASE CỦA LỒI DÂY THÌA CANH - Gymnema sylvestre (RETZ.) R.BR EX SM VÀ DÂY THÌA CANH LÁ TO - Gymnema latifolium WALL EX WIGHT Hà Nội - 2021 iii MỤC LỤC CHƯƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 Giới thiệu chi Gymnema 1.1.1 Đặc điểm thực vật chi Gymnema 1.1.2 Giới thiệu loài Gymnema sylvestre Gymnema latifolium 1.1.2.1 Loài Gymnema sylvestre 1.1.2.2 Loài Gymnema latifolium 1.1.3 Tình hình nghiên cứu thành phần hóa học chi Gymnema 1.1.3.1 Các hợp chất steroid 1.1.3.2 Các hợp chất triterpenoid 1.1.3.3 Phenolic hợp chất khác 17 1.1.4 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học chi Gymnema 19 1.1.4.1 Hoạt tính trị bệnh tiểu đường 19 1.1.4.2 Hoạt tính chống béo phì 21 1.1.4.3 Hoạt tính chống oxi hóa 21 1.1.4.4 Tác dụng bảo vệ gan 23 1.1.4.5 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 23 1.1.5 Tình hình nghiên cứu chi Gymnema Việt Nam 24 1.2 Khái quát bệnh tiểu đường .26 1.3 Khái quát vai trò enzyme α-glucosidase enzyme α-amylase 28 1.3.1 Khái niệm enzyme 28 1.3.2 Enzyme α-amylase (EC 3.2.1.1) 28 1.3.3 Enzyme α-glucosidase (EC 3.2.1.20) 29 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 31 2.1 Đối tượng nghiên cứu 31 2.1.1 Loài Gymnema sylvestre (Retz.) R.Br ex Sm 31 2.1.2 Loài Gymnema latifolium Wall ex Wight 31 2.2 Phương pháp nghiên cứu .32 2.2.1 Phương pháp phân lập hợp chất 32 2.2.1.1 Sắc ký lớp mỏng (TLC) 32 2.2.1.2 Sắc ký cột (CC) 32 2.2.1.3 Sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 32 2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc 32 2.2.2.1 Phổ khối lượng phun mù điện tử phân giải cao (HR-ESI-MS) 32 2.2.2.2 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 32 2.2.2.3 Độ quay cực 33 2.2.2.4 Phương pháp xác định đường 33 2.2.3 Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học 34 iv 2.2.3.1 Phương pháp đánh giá hoạt tính ức chế enzyme α -glucosidase 34 2.2.3.2 Phương pháp đánh giá hoạt tính ức chế enzyme α -amylase 35 2.3 Phân lập hợp chất 36 2.3.1 Các hợp chất phân lập từ loài G sylvestre 36 2.3.2 Các hợp chất phân lập từ loài G latifolium 39 2.4 Thông số vật lý liệu phổ hợp chất phân lập 42 2.4.1 Các thơng số vật lí hợp chất phân lập từ loài G sylvestre 42 2.4.1.1 Hợp chất GS1: gymsyloside A (hợp chất mới) 42 2.4.1.2 Hợp chất GS2: gymsyloside B (hợp chất mới) 42 2.4.1.3 Hợp chất GS3: gymsyloside C (hợp chất mới) 42 2.4.1.4 Hợp chất GS4: gymsyloside D (hợp chất mới) 42 2.4.1.5 Hợp chất GS5:gymsyloside E (hợp chất mới) 42 2.4.1.6 Hợp chất GS6: gymnepregoside R (hợp chất mới) 43 2.4.1.7 Hợp chất GS7: gymnepregoside T (hợp chất mới) 43 2.4.1.8 Hợp chất GS8: vetircilloside M 43 2.4.1.9 Hợp chất GS9: verticilloside D 43 2.4.1.10 Hợp chất GS10: gymnepregoside F 43 2.4.1.11 Hợp chất GS11: 12-O-(E)-cinnamoylgymnepregoside F 44 2.4.1.12 Hợp chất GS12: stephanoside I 44 2.4.1.13 Hợp chất GS13:3β-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl oleanolic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester 44 2.4.1.14 Hợp chất GS14: gymnemoside-W1 44 2.4.1.15 Hợp chất GS15: 3β-O-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl oleanolic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester 44 2.4.1.16 Hợp chất GS16: alternoside XIX 45 2.4.2 Các thông số vật lí hợp chất phân lập từ loài G latifolium 45 2.4.2.1 Hợp chất GL1: gymlatifoside A (hợp chất mới) 45 2.4.2.2 Hợp chất GL2: gymlatifoside B (hợp chất mới) 45 2.4.2.3 Hợp chất GL3: gymlatifoside C (hợp chất mới) 45 2.4.2.4 Hợp chất GL4: gymlatifoside D (hợp chất mới) 45 2.4.2.5 Hợp chất GL5: verticilloside J 46 2.4.2.6 Hợp chất GL6: lucyoside H 46 2.4.2.7 Hợp chất GL7: 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl oleanolic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester (xem hợp chất GS13) 46 2.4.2.8 Hợp chất GL8: 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl oleanolic acid-28-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl ester 46 2.5 Kết thử hoạt tính sinh học hợp chất phân lập .46 2.5.1 Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase hợp chất 46 2.5.2 Hoạt tính ức chế enzyme α-amylase hợp chất 47 CHƯƠNG THẢO LUẬN KẾT QUẢ 49 v 3.1 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập 49 3.1.1 Một số đặc điểm chung hợp chất pregnane glycoside phân lập 50 3.1.1.1 Đặc điểm phổ 1H NMR hợp chất pregnane glycoside phân lập từ G latifolium G sylvestre 51 3.1.1.2 Đặc điểm phổ 13C NMR hợp chất pregnane glycoside phân lập từ G latifolium G sylvestre 52 3.1.2 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ loài G sylvestre 53 3.1.2.1 Hợp chất GS1: gymsyloside A 53 3.1.2.2 Hợp chất GS2: gymsyloside B 62 3.1.2.3 Hợp chất GS3: gymsyloside C 64 3.1.2.4 Hợp chất GS4: gymsyloside D 66 3.1.2.5 Hợp chất GS5: gymsyloside E 68 3.1.2.6 Hợp chất GS6: gymnepregoside R 70 3.1.2.7 Hợp chất GS7: gymnepregoside T 73 3.1.2.8 Hợp chất GS8: Vetircilloside M 75 3.1.2.9 Hợp chất GS9: verticilloside D 77 3.1.2.10 Hợp chất GS10: gymnepregoside F 79 3.1.2.11 Hợp chất GS11: 12-O-(E)-cinnamoylgymnepregoside F 81 3.1.2.12 Hợp chất GS12: stephanoside I 83 3.1.2.13 Hợp chất GS13: 3β-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl acid oleanolic 28-O-β-D-glucopyranosyl ester 84 3.1.2.14 Hợp chất GS14: gymnemoside-W1 87 3.1.2.15 Hợp chất GS15: 3β-O-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl oleanolic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester 89 3.1.2.16 Hợp chất GS16: alternoside XIX 91 3.1.3 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ loài G latifolium 93 3.1.3.1 Hợp chất GL1: gymlatifoside A 93 3.1.3.2 Hợp chất GL2: gymlatifoside B 95 3.1.3.3 Hợp chất GL3: gymlatifoside C 98 3.1.3.4 Hợp chất GL4: gymlatifoside D 100 3.1.3.5 Hợp chất GL5: verticilloside J 102 3.1.3.6 Hợp chất GL6: lucyoside H 104 3.1.3.7 Hợp chất GL7:3β-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl acid oleanolic 28-O-β-D-glucopyranosyl ester 106 3.1.3.8 Hợp chất GL8: 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl oleanolic acid-28-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl ester 106 3.2 Hoạt tính sinh học hợp chất phân lập .108 3.2.1 Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase hợp chất 108 3.2.2 .Hoạt tính ức chế enzyme α-amylase hợp chất 110 KẾT LUẬN 112 vi NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN 114 KIẾN NGHỊ 115 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 116 vii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Tiếng Anh Diễn giải 13 C NMR Carbon-13 nuclear magnetic resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon 13 spectroscopy H NMR Proton nuclear magnetic resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton spectroscopy 2-NBDG 2-Deoxy-2-[ (7-nitro-2,1,3benzoxadiazol-4-yl)amino]-D-glucose 3T3-L1 ABTS All 2-Deoxy-2-[ (7-nitro-2,1,3benzoxadiazol-4-yl)amino]-D-glucose Tế bào mô mỡ 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline- 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline- 6-sulfonic acid 6-sulfonic acid 6-Deoxy-3-oxymethylallopyranose Đường 6-deoxy-3oxymethylallopyranose ALP Alkaline phosphatase Enzymme alkaline phosphatase ALT Alanine aminotransferase Enzymme alanine aminotransferase BHT Butylated hydroxytoluene Butylated hydroxytoluene C.C Chromatography column Sắc ký cột Can Canaropyranose Đường canaropyranose Correlation spectroscopy Phổ COSY Cym Cymaropyranose Đường cymanopyranose DEPT Distortionless enhancement by Phổ DEPT COSY polarization transfer DMSO Dimethylsulfoxide Dimethylsulfoxide DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl Glucose Đường glucose High density lipoprotein cholesterol Lipoprotein mật độ cao Glc HDL HL7702 HMBC Tế bào gan người Heteronuclear mutiple bond correlation Phổ tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết HPLC High pressure liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao HSQC Heteronuclear singlequantum Phổ tương tác dị hạt nhân qua liên kết correlation IC50 Inhibitory concentration at 50% Nồng độ ức chế 50% đối tượng thử nghiệm LDH Lactate dehydrogenase Enzyme lactate dehydrogenase viii LDL Low density lipoprotein lipoprotein mật độ thấp MIC Minimum inhibitory concentration Nồng độ ức chế tối thiểu MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide diphenyltetrazolium bromide ROESY Rotating frame Overhause Effect Phổ ROESY Spectroscopy OD Optical density Mật độ quang Ole Oleandropyranose Đường oleandropyranose 4-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside 4-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside pNPG TBARS Thiobarbituric acid reactive substances Các chất phản ứng với axit thiobarbituric TGs Triglyceride Triglyceride Thv Thevetopyranose Đường thevetopyranose TLC Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng TLTK VLDL Tài liệu tham khảo Very low density lipoprotein Lipoprotein mật độ thấp ix DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Danh sách nơi phân bố loài thuộc chi Gymnema Bảng 1.2 Danh sách loài thuộc chi Gymnema Việt Nam Bảng 1.3 Các hợp chất pregnane glycoside từ chi Gymnema Bảng 1.4 Các hợp chất triterpennoid khung oleanane từ chi Gymnema Bảng 1.5 Các hợp chất khung dammarane lupane từ chi Gymnema 16 Bảng 1.6 Phenolic số hợp chất khác từ chi Gymnema 17 Bảng 2.1 Giá trị độ quay cực riêng đường đơn sau thủy phân 34 Bảng 2.2 Hoạt tính ức chế α-glucosidase hợp chất từ G.sylvestre 47 Bảng 2.3 Hoạt tính ức chế α-glucosidase hợp chất từ G latifolium 47 Bảng 2.4 Hoạt tính ức chế α-amylase hợp chất phân lập từ G sylvestre 47 Bảng 2.5 Hoạt tính ức chế α-amylase hợp chất từ loài G latifolium 48 Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR hợp chất GS1 57 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất GS2 hợp chất tham khảo 63 Bảng 3.3 Số liệu phổ NMR hợp chất GS3 chất tham khảo 65 Bảng 3.4 Số liệu phổ NMR hợp chất GS4 chất tham khảo 67 Bảng 3.5 Số liệu phổ NMR hợp chất GS5 chất tham khảo 69 Bảng 3.6 Số liệu phổ NMR hợp chất GS6 chất tham khảo 71 Bảng 3.7 Số liệu phổ NMR hợp chất GS7 74 Bảng 3.8 Số liệu phổ NMR hợp chất GS8 76 Bảng 3.9 Số liệu phổ NMR hợp chất GS9 hợp chất tham khảo 78 Bảng 3.10 Số liệu phổ NMR hợp chất GS10 hợp chất tham khảo 80 Bảng 3.11 Số liệu phổ NMR hợp chất GS11 hợp chất tham khảo 82 Bảng 3.12 Số liệu phổ NMR hợp chất GS12 hợp chất tham khảo 84 Bảng 3.13 Số liệu phổ NMR hợp chất GS13 hợp chất tham khảo 86 Bảng 3.14 Số liệu phổ NMR hợp chất GS14 hợp chất tham khảo 88 Bảng 3.15 Số liệu phổ NMR hợp chất GS15 hợp chất tham khảo 90 Bảng 3.16 Số liệu phổ NMR hợp chất GS16 hợp chất tham khảo 92 Bảng 3.17 Số liệu phổ NMR hợp chất GL1 94 Bảng 3.18 Số liệu phổ NMR hợp chất GL2 97 Bảng 3.19 Số liệu phổ NMR hợp chất GL3 99 Bảng 3.20 Số liệu phổ NMR hợp chất GL4 101 Bảng 3.21 Số liệu phổ NMR hợp chất GL5 hợp chất tham khảo 103 Bảng 3.22 Số liệu phổ NMR hợp chất GL6 hợp chất tham khảo 105 Bảng 3.23 Số liệu phổ NMR hợp chất GL8 hợp chất tham khảo 107 x DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Hình ảnh số lồi thuộc chi Gymnema Hình 1.2 Cấu trúc hợp chất pregnane glycoside từ chi Gymnema Hình 1.3 Cấu trúc hợp chất khung oleanane từ chi Gymnema 15 Hình 1.4 Cấu trúc hợp chất khung dammarane lupane từ chi Gymnema 17 Hình 1.5 Cấu trúc phenolic số hợp chất khác từ chi Gymnema 19 Hình 1.6 Ý nghĩa việc ức chế enzyme α-glucosidase enzyme α-amylase giảm đường huyết 27 Hình 2.1 Dây thìa canh (G sylvestre) 31 Hình 2.2 Dây thìa canh to (G latifolium) 31 Hình 2.3 Sơ đồ phân lập hợp chất từ loài G sylvestre 38 Hình 2.4 Sơ đồ phân lập hợp chất từ loài G.latifolium 41 Hình 3.1 Cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ loài G sylvestre 49 Hình 3.2 Cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ lồi G latifolium 50 Hình 3.3 Cấu trúc khung pregnane 51 Hình 3.4 Cấu trúc hóa học hợp chất GS1 53 Hình 3.5 Các tương tác HMBC, COSY NOESY hợp chất GS1 55 Hình 3.6 Phổ HR-ESI-MS hợp chất GS1 58 Hình 3.7 Phổ 1H NMR hợp chất GS1 58 Hình 3.8 Phổ 13C-NMR hợp chất GS1 59 Hình 3.9 Phổ DEPT-135 hợp chất GS1 59 Hình 3.10 Phổ HSQC hợp chất GS1 60 Hình 3.11 Phổ HMBC hợp chất GS1 60 Hình 3.12 Phổ COSY hợp chất GS1 61 Hình 3.13 Phổ ROESY hợp chất GS1 61 Hình 3.14 Cấu trúc hóa học hợp chất GS2 62 Hình 3.15 Các tương tác HMBC, COSY hợp chất GS2 63 Hình 3.16 Cấu trúc hóa học hợp chất GS3 64 Hình 3.17 Các tương tác HMBC COSY hợp chất GS3 65 Hình 3.18 Cấu trúc hóa học hợp chất GS4 66 Hình 3.19 Các tương tác HMBC COSY hợp chất GS4 66 Hình 3.20 Cấu trúc hóa học hợp chất GS5 68 Hình 3.21 Các tương tác HMBC COSY hợp chất GS5 70 Hình 3.22 Cấu trúc hóa học hợp chất GS6 70 Hình 3.23 Các tương tác HMBC COSY hợp chất GS6 72 xi Hình 3.24 Cấu trúc hóa học hợp chất GS7 73 Hình 3.25 Các tương tác HMBC COSY hợp chất GS7 75 Hình 3.26 Cấu trúc hóa học hợp chất GS8 75 Hình 3.27 Các tương tác HMBC COSY hợp chất GS8 77 Hình 3.28 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GS9 77 Hình 3.29 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GS10 79 Hình 3.30 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GS11 81 Hình 3.31 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GS12 83 Hình 3.32 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GS13 84 Hình 3.33 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GS14 87 Hình 3.34 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GS15 89 Hình 3.35 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GS16 91 Hình 3.36 Cấu trúc hóa học hợp chất GL1 93 Hình 3.37 Các tương tác HMBC, COSY hợp chất GL1 95 Hình 3.38 Cấu trúc hóa học hợp chất GL2 95 Hình 3.39 Các tương tác HMBC, COSY hợp chất GL2 96 Hình 3.40 Cấu trúc hóa học hợp chất GL3 98 Hình 3.41 Các tương tác HMBC, COSY hợp chất GL3 98 Hình 3.42 Cấu trúc hóa học hợp chất GL4 100 Hình 3.43 Các tương tác HMBC, COSY hợp chất GL4 102 Hình 3.44 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GL5 102 Hình 3.45 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GL6 104 Hình 3.46 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất GL8 106 Hình 3.47 Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase hợp chất cặn chiết từ loài G sylvestre 109 Hình 3.48 Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase hợp chất cặn chiết từ loài G latifolium .109 Hình 3.49 Hoạt tính ức chế enzyme α-amylase hợp chất cặn chiết từ loài G sylvestre .110 Hình 3.50 Hoạt tính ức chế enzyme α-amylase hợp chất cặn chiết từ loài G latifolium .110 89 20.3 Phổ 13C NMR hợp chất GL4 20.4 Phổ HSQC hợp chất GL4 90 20.5 Phổ HMBC hợp chất GL4 20.6 Phổ COSY hợp chất GL4 91 20.7 Phổ ROESY hợp chất GL4 92 21 Phụ lục phổ hợp chất GL5 Verticilloside J CTPT: C53H88O22 KLPT: 1104 - Phổ 1H NMR - Phổ 13C NMR - Phổ HSQC - Phổ HMBC 93 21.1 Phổ 1H NMR hợp chất GL5 21.2 Phổ 13C NMR hợp chất GL5 94 21.3 Phổ HSQC hợp chất GL5 21.4 Phổ HMBC hợp chất GL5 95 22 Phụ lục phổ hợp chất GL6 Lucyoside H CTPT: C42H68O13 KLPT: 780 - Phổ 1H NMR - Phổ 13C NMR - Phổ HSQC - Phổ HMBC 96 22.1 Phổ 1H NMR hợp chất GL6 22.2 Phổ 13C NMR hợp chất GL6 97 22.3 Phổ HSQC hợp chất GL6 22.4 Phổ HMBC hợp chất GL6 98 23 Phụ lục phổ hợp chất GL7 3β-O-β-D-Glucopyranosyl (1 →6)-β-D-glucopyranosyl axit oleanolic 28-O-β-Dglucopyranosyl ester CTPT: C48H78O18 KLPT: 942 - Phổ 1H NMR - Phổ 13C NMR - Phổ HSQC - Phổ HMBC 99 23.1 Phổ 1H NMR hợp chất GL7 23.2 Phổ 13C NMR hợp chất GL7 100 23.3 Phổ HSQC hợp chất GL7 23.4 Phổ HMBC hợp chất GL7 101 24 Phụ lục phổ hợp chất GL8 3-O-β-D-glucopyranosyl (1→6)-β-D-glucopyranosyl oleanolic acid-28-β-Dglucopyranosyl (1→6)-β-D-glucopyranosyl ester CTPT: C54H88O23 KLPT: 1104 - Phổ 1H NMR - Phổ 13C NMR - Phổ HSQC - Phổ HMBC 102 24.1 Phổ 1H NMR hợp chất GL8 24.2 Phổ 13C NMR hợp chất GL8 103 24.3 Phổ HSQC hợp chất GL8 24.4 Phổ HMBC hợp chất GL8 ... ? ?Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase α-amylase lồi dây thìa canh - Gymnema sylvestre (Retz.) R.Br ex Sm dây thìa canh to - Gymnema latifolium Wall ex Wight? ?? Mục tiêu... 79 80 Lá Lá Lá Lá Lá Lá Lá Lá Lá Lá Lá Lá Lá Lá Thân G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre. .. 2α,3β-Dihydroxyolean-12-ene-23,28-dioic Lá acid-3-O-β-D-glucopyranoside 118 2α,3β,15β-Trihydroxyolean-12-eneLá 23,28-dioic acid-3-O-β-D-glucopyranoside G sylvestre G sylvestre G sylvestre G sylvestre