Nghiên cứu thành phần hóa học cây màn màn hoa tím (Cleome chelidonii L.f.) và màn màn hoa vàng (Cleome vicosa L.)

MỞ ĐẦU Việt Nam có nguồn tài nguyên thực vật vô cùng phong phú và đa dạng. Theo Phạm Hoàng Hộ, thực vật Việt Nam khoảng 12.000 loài cây có mạch, không kể rong, rêu và nấm [6] . Số loài cây thuốc đã thống kê được ở Việt Nam là 3948 loài thuộc 307 họ thực vật và nấm, chiếm 37,6 % số loài trong tự nhiên. Thông qua việc khảo sát các đặc điểm hóa thực vật, dược tính… của cây thuốc, chúng ta có thể từng bước lý giải thích việc trị bệnh của thảo dược, đồng thời tiêu chuẩn hoá các bài thuốc cổ truyền nhằm sử dụng một cách hợp lý, có hiệu quả đồng thời góp phần bảo tồn cây thuốc dân tộc. Chính vì vậy, việc nghiên cứu hóa học các hợp chất thiên nhiên định hướng vào hoạt tính sinh học ngày càng được chú trọng. Màn màn hoa tím ( Cleome chelidonii L.f.) và Màn màn hoa vàng (Cleome viscosa L.) mọc hoang khắp Việt Nam. Trong dân gian, Màn màn hoa tím được dùng chữa các chứng cảm cúm nóng lạnh, nhức đầu, ho hen, và chữa cả rắn cắn, lá dùng chữa viêm đau thận. Toàn cây Màn màn hoa vàng nấu nước xông chữa nhức đầu. Rễ có tính kích thích và chống bệnh hoại huyết, bệnh chảy máu chân răng. Quả non ăn kích thích tiêu hoá. Hạt làm thuốc xoa bóp chữa tê thấp và cũng dùng trị giun. Trên thế giới cũng như ở Việt Nam, đã có một số công trình nghiên cứu phục vụ y học nhưng đa số chỉ dừng lại ở mức độ khảo sát hoạt tính sinh học của các dịch chiết, và rất ít công trình nghiên cứu chi tiết về thành phần hóa học của các hợp chất có trong hai loài này. Trên cơ sở đó, chúng tôi tiến hành khảo sát thành phần hóa học hai loài Màn màn hoa tím ( Cleome chelidonii L.f.) và Màn màn hoa vàng (Cleome viscosa L.), xác định hoạt tính sinh học hoạt chất phân lập cũng như cao chiết làm cơ sở khoa học cho việc sử dụng dược liệu hoặc phát hiện ra những hoạt tính mới, góp phần nâng cao giá trị loại dược liệu này tại Việt Nam. Luận án giới thiệu kết quả nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của hai loài Màn màn hoa tím (Cleome chelidonii L.f.) và Màn màn hoa vàng (Cleome vicosa L.). Nội dung chính của luận án bao gồm: 1. Phân lập các hợp chất tinh khiết từ hai loài Màn màn hoa tím và Màn màn hoa vàng. 2. Xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất phân lập được. 3. Thử nghiệm hoạt tính bảo vệ gan của cao chiết và các hợp chất phân lập được.

VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - PHAN NHẬT MINH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÂY MÀN MÀN HOA TÍM (Cleome chelidonii L.f.) VÀ MÀN MÀN HOA VÀNG (Cleome viscosa L.) LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC Tp Hồ Chí Minh – 2016 iii MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Màn 1.2 Mô tả thực vật 1.2.1 Màn hoa tím 1.2.2 Màn hoa vàng 1.3 Vùng phân bố 1.3.1 Màn hoa tím 1.3.2 Màn hoa vàng 1.4 Thành phần hóa học 1.4.1 Màn hoa tím 1.4.2 Màn hoa vàng 1.5 Những nghiên cứu dược tính 1.5.1 Màn hoa tím 1.5.2 Màn hoa vàng 10 1.6 Bệnh gan thuốc bảo vệ gan 13 1.7 Dòng tế bào HepG2 13 CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 15 2.1 Mẫu thực vật 15 2.2 Hóa chất thiết bị 15 2.2.1 Hóa chất 15 2.2.2 Thiết bị 15 2.3 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính sinh học 16 2.3.1 Khảo sát khả gây độc tế bào in vitro phương pháp MTT 16 2.3.2 Khảo sát tác dụng bảo vệ tế bào gan dòng tế bào HepG2 17 2.4 Phân lập hợp chất 18 2.4.1 Phân lập hợp chất từ Màn hoa tím 18 2.4.2 Phân lập hợp chất từ thân Màn hoa tím 18 2.4.3 Phân lập hợp chất từ Màn hoa vàng 20 2.4.4 Phân lập hợp chất từ thân Màn hoa vàng 21 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 22 3.1 Cấu trúc hợp chất phân lập 22 3.1.1 Hợp chất 1: Quercetin-7-O-α-L-rhamnopyranoside 22 3.1.2 Hợp chất 2: Quercitrin 24 3.1.3 Hợp chất 3: Isoquercitrin 25 3.1.4 Hợp chất 4: Quercetin-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside 26 iv 3.1.5 Hợp chất 5:Quercetin-3-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→2)]-α-L-rhamnopyranoside-7O-α-L-rhamnopyranoside 28 3.1.6 Hợp chất 6: Cleomeside A (Mới) 31 3.1.7 Hợp chất 7: Quercetin-3-O-[2"-O-(6'''-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranosyl]-α-Lrhamnopyranoside-7-O-α-L-rhamnopyranoside 33 3.1.8 Hợp chất 8: Cleomeside B (Mới) 35 3.1.9 Hợp chất 9: Visconoside A (Mới) 38 3.1.10 Hợp chất 10: Visconoside B (Mới) 40 3.1.11 Hợp chất 11: Kaempferol-3-O-methylether 43 3.1.12 Hợp chất 12: Kaempferol-3,4'-O-dimethylether 45 3.1.13 Hợp chất 13: Kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside 46 3.1.14 Hợp chất 14: Kaempferol-7-O-α-L-rhamnopyranoside 47 3.1.15 Hợp chất 15: Kaempferol-3-O-(4-O-acetyl-α-L-rhamnopyranoside) 49 3.1.16 Hợp chất 16: Kaempferol-3-O-(2,4-O-diacetyl-α-L-rhamnopyranoside) 51 3.1.17 Hợp chất 17: Kaempferol-3,7-O-α-L-dirhamnopyranoside 53 3.1.18 Hợp chất 18:Kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside 54 3.1.19 Hợp chất 19:Kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside56 3.1.20 Hợp chất 20: Cleomeside C (Mới) 58 3.1.21 Hợp chất 21: Glycerol monostearate 61 3.1.22 Hợp chất 22: Ethyl α-galactopyranoside 63 3.1.23 Hợp chất 23: Adenine 64 3.1.24 Hợp chất 24: 5-(Hydroxymethyl)-2-furaldehyde 65 3.1.25 Hợp chất 25: Emodin-8-O-β-D-glucopyranoside 66 3.2 Khảo sát khả gây độc tế bào tác dụng bảo vệ tế bào gan 68 3.3 Nhận xét chung 74 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 77 KẾT LUẬN 77 KIẾN NGHỊ 78 TÀI LIỆU THAM KHẢO 79 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ 89 v DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.1: Danh mục loài có giá trị họ Màn Việt Nam Bảng 3.1: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 23 Bảng 3.2: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 24 Bảng 3.3: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 26 Bảng 3.4: Dữ liệu phổ NMR hợp chất .27 Bảng 3.5: Dữ liệu phổ NMR hợp chất .30 Bảng 3.6: Dữ liệu phổ NMR hợp chất .32 Bảng 3.7: Dữ liệu phổ NMR hợp chất .34 Bảng 3.8: Dữ liệu phổ NMR hợp chất .36 Bảng 3.9: Dữ liệu phổ NMR hợp chất .39 Bảng 3.10: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 10 41 Bảng 3.11: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 11 44 Bảng 3.12: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 12 45 Bảng 3.13: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 13 47 Bảng 3.14: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 14 48 Bảng 3.15: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 15 50 Bảng 3.16: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 16 52 Bảng 3.17: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 17 53 Bảng 3.18: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 18 55 Bảng 3.19: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 19 57 Bảng 3.20: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 20 59 Bảng 3.21: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 21 62 Bảng 3.22: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 22 63 Bảng 3.23: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 23 65 Bảng 3.24: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 24 66 Bảng 3.25: Dữ liệu phổ NMR hợp chất 25 67 Bảng 3.26: Khả gây độc tế bào cao chiết từ Màn hoa tím dòng tế bào HepG2 69 Bảng 3.27: Khả gây độc tế bào cao chiết từ Màn hoa vàng dòng tế bào HepG2 70 Bảng 3.28: Khả gây độc tế bào hợp chất dòng tế bào HepG2 71 Bảng 3.29: Tác dụng phòng ngừa ức chế tăng trưởng tế bào gan HepG2 CCl4 mM gây sau 24 chất phân lập từ cao MeOH lá/thân Màn hoa tím Màn hoa vàng .72 vi DANH MỤC SƠ ĐỒ VÀ HÌNH ẢNH Trang Sơ đồ 1: Phân lập hợp chất từ Màn hoa tím 18 Sơ đồ 2: Phân lập hợp chất từ thân Màn hoa tím .19 Sơ đồ 3: Phân lập hợp chất từ Màn hoa vàng .20 Sơ đồ 4: Phân lập hợp chất từ thân Màn hoa vàng 21 Hình 2.1: Màn hoa tím 15 Hình 2.2: Màn hoa vàng 15 Hình 3.1: Cấu trúc hóa học hợp chất 22 Hình 3.2: Cấu trúc hóa học hợp chất 24 Hình 3.3: Cấu trúc hóa học hợp chất 25 Hình 3.4: Cấu trúc hóa học hợp chất 28 Hình 3.5: Cấu trúc hóa học hợp chất 28 Hình 3.6: Cấu trúc hóa học hợp chất 31 Hình 3.7: Cấu trúc hóa học hợp chất 33 Hình 3.8: Cấu trúc hóa học hợp chất 37 Hình 3.9: Cấu trúc hóa học hợp chất 38 Hình 3.10: Cấu trúc hóa học hợp chất 10 40 Hình 3.11: Cấu trúc hóa học hợp chất 11 43 Hình 3.12: Cấu trúc hóa học hợp chất 12 45 Hình 3.13: Cấu trúc hóa học hợp chất 13 46 Hình 3.14: Cấu trúc hóa học hợp chất 14 48 Hình 3.15: Cấu trúc hóa học hợp chất 15 49 Hình 3.16: Cấu trúc hóa học hợp chất 16 51 Hình 3.17: Cấu trúc hóa học hợp chất 17 54 Hình 3.18: Cấu trúc hóa học hợp chất 18 54 Hình 3.19: Cấu trúc hóa học hợp chất 19 56 Hình 3.20: Cấu trúc hóa học hợp chất 20 58 Hình 3.21: Cấu trúc hóa học hợp chất 21 62 Hình 3.22: Cấu trúc hóa học hợp chất 22 63 Hình 3.23: Cấu trúc hóa học hợp chất 23 64 Hình 3.24: Cấu trúc hóa học hợp chất 24 66 Hình 3.25: Cấu trúc hóa học hợp chất 25 67 vii DANH MỤC PHỤ LỤC Phụ lục 1a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất PL-1 Phụ lục 1b: Phổ 1H-NMR hợp chất PL-1 Phụ lục 1c: Phổ 13C-NMR hợp chất .PL-2 Phụ lục 1d: Phổ DEPT hợp chất .PL-2 Phụ lục 1e: Phổ HSQC hợp chất PL-3 Phụ lục 1f: Phổ HMBC hợp chất PL-3 Phụ lục 1g: Phổ COSY hợp chất PL-4 Phụ lục 2a: Phổ 1H-NMR hợp chất PL-4 Phụ lục 2b: Phổ 13C-NMR hợp chất .PL-5 Phụ lục 2c: Phổ DEPT hợp chất .PL-5 Phụ lục 2d: Phổ HSQC hợp chất PL-6 Phụ lục 2e: Phổ HMBC hợp chất PL-6 Phụ lục 3a: Phổ 1H-NMR hợp chất PL-7 Phụ lục 3b: Phổ 13C-NMR hợp chất .PL-7 Phụ lục 3c: Phổ DEPT hợp chất .PL-8 Phụ lục 3d: Phổ HSQC hợp chất PL-8 Phụ lục 3e: Phổ HMBC hợp chất PL-9 Phụ lục 4a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất PL-9 Phụ lục 4b: Phổ 1H-NMR hợp chất PL-10 Phụ lục 4c: Phổ 13C-NMR hợp chất .PL-10 Phụ lục 4d: Phổ DEPT hợp chất PL-11 Phụ lục 4e: Phổ HSQC hợp chất PL-11 Phụ lục 4f: Phổ HMBC hợp chất PL-12 Phụ lục 4g: Phổ COSY hợp chất PL-12 Phụ lục 5a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất PL-13 Phụ lục 5b: Phổ 1H-NMR hợp chất PL-13 Phụ lục 5c: Phổ 13C-NMR hợp chất .PL-14 Phụ lục 5d: Phổ DEPT hợp chất PL-14 Phụ lục 5e: Phổ HSQC hợp chất PL-15 Phụ lục 5f: Phổ HMBC hợp chất PL-15 Phụ lục 5g: Phổ COSY hợp chất PL-16 Phụ lục 6a: Phổ UV-Vis hợp chất PL-16 Phụ lục 6b: Phổ IR hợp chất PL-17 Phụ lục 6c: Phổ HR-ESI-MS hợp chất PL-17 Phụ lục 6d: Phổ 1H-NMR hợp chất PL-17 Phụ lục 6e: Phổ 13C-NMR hợp chất .PL-18 Phụ lục 6f: Phổ DEPT hợp chất PL-18 Phụ lục 6g: Phổ HSQC hợp chất PL-19 Phụ lục 6h: Phổ HMBC hợp chất PL-19 Phụ lục 6i: Phổ COSY hợp chất PL-20 viii Phụ lục 7a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất PL-20 Phụ lục 7b: Phổ 1H-NMR hợp chất PL-21 Phụ lục 7c: Phổ 13C-NMR hợp chất .PL-21 Phụ lục 7d: Phổ DEPT hợp chất PL-22 Phụ lục 7e: Phổ HSQC hợp chất PL-22 Phụ lục 7f: Phổ HMBC hợp chất PL-23 Phụ lục 7g: Phổ COSY hợp chất PL-23 Phụ lục 8a: Phổ UV-Vis hợp chất PL-24 Phụ lục 8b: Phổ IR hợp chất PL-24 Phụ lục 8c: Phổ HR-ESI-MS hợp chất PL-24 Phụ lục 8d: Phổ 1H-NMR hợp chất PL-25 Phụ lục 8e: Phổ 13C-NMR hợp chất .PL-25 Phụ lục 8f: Phổ DEPT hợp chất PL-26 Phụ lục 8g: Phổ HSQC hợp chất PL-26 Phụ lục 8h: Phổ HMBC hợp chất PL-27 Phụ lục 8i: Phổ COSY hợp chất PL-27 Phụ lục 9a: Phổ UV-Vis hợp chất PL-28 Phụ lục 9b: Phổ IR hợp chất PL-28 Phụ lục 9c: Phổ HR-ESI-MS hợp chất PL-28 Phụ lục 9d: Phổ 1H-NMR hợp chất PL-29 Phụ lục 9e: Phổ 13C-NMR hợp chất .PL-29 Phụ lục 9f: Phổ DEPT hợp chất PL-30 Phụ lục 9g: Phổ HSQC hợp chất PL-30 Phụ lục 9h: Phổ HMBC hợp chất PL-31 Phụ lục 9i: Phổ COSY hợp chất PL-31 Phụ lục 10a: Phổ UV-Vis hợp chất 10 .PL-32 Phụ lục 10b: Phổ IR hợp chất 10 .PL-32 Phụ lục 10c: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 10 .PL-32 Phụ lục 10d: Phổ 1H-NMR hợp chất 10 PL-33 Phụ lục 10e: Phổ 13C-NMR hợp chất 10 PL-33 Phụ lục 10f: Phổ DEPT hợp chất 10 PL-34 Phụ lục 10g: Phổ HSQC hợp chất 10 PL-34 Phụ lục 10h: Phổ HMBC hợp chất 10 .PL-35 Phụ lục 10i: Phổ COSY hợp chất 10 .PL-35 Phụ lục 11a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 11 .PL-36 Phụ lục 11b: Phổ 1H-NMR hợp chất 11 PL-36 Phụ lục 11c: Phổ 13C-NMR hợp chất 11 PL-37 Phụ lục 11d: Phổ DEPT hợp chất 11 .PL-37 Phụ lục 11e: Phổ HSQC hợp chất 11 .PL-38 Phụ lục 11f: Phổ HMBC hợp chất 11 PL-38 Phụ lục 12a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 12 .PL-39 ix Phụ lục 12b: Phổ 1H-NMR hợp chất 12 PL-39 Phụ lục 12c: Phổ 13C-NMR hợp chất 12 PL-40 Phụ lục 12d: Phổ DEPT hợp chất 12 .PL-40 Phụ lục 12e: Phổ HSQC hợp chất 12 PL-41 Phụ lục 12f: Phổ HMBC hợp chất 12 PL-41 Phụ lục 13a: Phổ 1H-NMR hợp chất 13 PL-42 Phụ lục 13b: Phổ 13C-NMR hợp chất 13 PL-42 Phụ lục 13c: Phổ DEPT hợp chất 13 .PL-43 Phụ lục 13d: Phổ HSQC hợp chất 13 PL-43 Phụ lục 13e: Phổ HMBC hợp chất 13 .PL-44 Phụ lục 14a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 14 .PL-44 Phụ lục 14b: Phổ 1H-NMR hợp chất 14 PL-45 Phụ lục 14c: Phổ 13C-NMR hợp chất 14 PL-45 Phụ lục 14d: Phổ DEPT hợp chất 14 .PL-46 Phụ lục 14e: Phổ HSQC hợp chất 14 PL-46 Phụ lục 14f: Phổ HMBC hợp chất 14 PL-47 Phụ lục 14g: Phổ COSY hợp chất 14 PL-47 Phụ lục 15a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 15 .PL-48 Phụ lục 15b: Phổ 1H-NMR hợp chất 15 PL-48 Phụ lục 15c: Phổ 13C-NMR hợp chất 15 PL-49 Phụ lục 15d: Phổ DEPT hợp chất 15 .PL-49 Phụ lục 15e: Phổ HSQC hợp chất 15 PL-50 Phụ lục 15f: Phổ HMBC hợp chất 15 PL-50 Phụ lục 16a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 16 .PL-51 Phụ lục 16b: Phổ 1H-NMR hợp chất 16 PL-51 Phụ lục 16c: Phổ 13C-NMR hợp chất 16 PL-52 Phụ lục 16d: Phổ DEPT hợp chất 16 .PL-52 Phụ lục 16e: Phổ HSQC hợp chất 16 PL-53 Phụ lục 16f: Phổ HMBC hợp chất 16 PL-53 Phụ lục 16g: Phổ COSY hợp chất 16 PL-54 Phụ lục 17a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 17 .PL-54 Phụ lục 17b: Phổ 1H-NMR hợp chất 17 PL-55 Phụ lục 17c: Phổ 13C-NMR hợp chất 17 PL-55 Phụ lục 17d: Phổ DEPT hợp chất 17 .PL-56 Phụ lục 17e: Phổ HSQC hợp chất 17 PL-56 Phụ lục 17f: Phổ HMBC hợp chất 17 PL-57 Phụ lục 17g: Phổ COSY hợp chất 17 PL-57 Phụ lục 18a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 18 .PL-58 Phụ lục 18b: Phổ 1H-NMR hợp chất 18 PL-58 Phụ lục 18c: Phổ 13C-NMR hợp chất 18 PL-59 Phụ lục 18d: Phổ DEPT hợp chất 18 .PL-59 x Phụ lục 18e: Phổ HSQC hợp chất 18 PL-60 Phụ lục 18f: Phổ HMBC hợp chất 18 PL-60 Phụ lục 18g: Phổ COSY hợp chất 18 PL-61 Phụ lục 19a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 19 .PL-61 Phụ lục 19b: Phổ 1H-NMR hợp chất 19 PL-62 Phụ lục 19c: Phổ 13C-NMR hợp chất 19 PL-62 Phụ lục 19d: Phổ DEPT hợp chất 19 .PL-63 Phụ lục 19e: Phổ HSQC hợp chất 19 PL-63 Phụ lục 19f: Phổ HMBC hợp chất 19 PL-64 Phụ lục 19g: Phổ COSY hợp chất 19 PL-64 Phụ lục 20a: Phổ UV-Vis hợp chất 20 .PL-65 Phụ lục 20b: Phổ IR hợp chất 20 .PL-65 Phụ lục 20c: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 20 .PL-65 Phụ lục 20d: Phổ 1H-NMR hợp chất 20 PL-66 Phụ lục 20e: Phổ 13C-NMR hợp chất 20 PL-66 Phụ lục 20f: Phổ DEPT hợp chất 20 PL-67 Phụ lục 20g: Phổ HSQC hợp chất 20 PL-67 Phụ lục 20h: Phổ HMBC hợp chất 20 .PL-68 Phụ lục 20i: Phổ COSY hợp chất 20 .PL-68 Phụ lục 21a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 21 .PL-69 Phụ lục 21b: Phổ 1H-NMR hợp chất 21 PL-69 Phụ lục 21c: Phổ 13C-NMR hợp chất 21 PL-70 Phụ lục 21d: Phổ DEPT hợp chất 21 .PL-70 Phụ lục 21e: Phổ HSQC hợp chất 21 PL-71 Phụ lục 21f: Phổ HMBC hợp chất 21 PL-71 Phụ lục 22a: Phổ 1H-NMR hợp chất 22 PL-72 Phụ lục 22b: Phổ 13C-NMR hợp chất 22 PL-72 Phụ lục 22c: Phổ DEPT hợp chất 22 .PL-73 Phụ lục 22d: Phổ HSQC hợp chất 22 PL-73 Phụ lục 22e: Phổ HMBC hợp chất 22 .PL-74 Phụ lục 23a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 23 .PL-74 Phụ lục 23b: Phổ 1H-NMR hợp chất 23 PL-75 Phụ lục 23c: Phổ 13C-NMR hợp chất 23 PL-75 Phụ lục 23d: Phổ HSQC hợp chất 23 PL-76 Phụ lục 23e: Phổ HMBC hợp chất 23 .PL-76 Phụ lục 24a: Phổ 1H-NMR hợp chất 24 PL-77 Phụ lục 24b: Phổ 13C-NMR hợp chất 24 PL-77 Phụ lục 24c: Phổ DEPT hợp chất 24 .PL-78 Phụ lục 24d: Phổ HSQC hợp chất 24 PL-78 Phụ lục 24e: Phổ HMBC hợp chất 24 .PL-79 Phụ lục 25a: Phổ HR-ESI-MS hợp chất 25 .PL-79 xi Phụ lục 25b: Phổ 1H-NMR hợp chất 25 PL-80 Phụ lục 25c: Phổ 13C-NMR hợp chất 25 PL-80 Phụ lục 25d: Phổ DEPT hợp chất 25 .PL-81 Phụ lục 25e: Phổ HSQC hợp chất 25 PL-81 Phụ lục 25f: Phổ HMBC hợp chất 25 PL-82 Phụ lục 25g: Phổ COSY hợp chất 25 PL-82 Phụ lục 26a: Khả gây độc tế bào cao chiết Màn hoa tím tế bào HepG2 sau 24 .PL-83 Phụ lục 26b: Khả gây độc tế bào cao chiết Màn hoa tím tế bào HepG2 sau 48 .PL-83 Phụ lục 26c: Khả gây độc tế bào cao chiết Màn hoa tím tế bào HepG2 sau 72 .PL-84 Phụ lục 27a: Khả gây độc tế bào cao chiết thân Màn hoa tím tế bào HepG2 sau 24 .PL-84 Phụ lục 27b: Khả gây độc tế bào cao chiết thân Màn hoa tím tế bào HepG2 sau 48 .PL-85 Phụ lục 27c: Khả gây độc tế bào cao chiết thân Màn hoa tím tế bào HepG2 sau 72 .PL-85 Phụ lục 28a: Khả gây độc tế bào cao chiết Màn hoa vàng tế bào HepG2 sau 24 .PL-86 Phụ lục 28b: Khả gây độc tế bào cao chiết Màn hoa vàng tế bào HepG2 sau 48 .PL-86 Phụ lục 28c: Khả gây độc tế bào cao chiết Màn hoa vàng tế bào HepG2 sau 72 .PL-87 Phụ lục 29a: Khả gây độc tế bào cao chiết thân Màn hoa vàng tế bào HepG2 sau 24 PL-87 Phụ lục 29b: Khả gây độc tế bào cao chiết thân Màn hoa vàng tế bào HepG2 sau 48 PL-88 Phụ lục 29c: Khả gây độc tế bào cao chiết thân Màn hoa vàng tế bào HepG2 sau 72 PL-88 Phụ lục 30a: Khả gây độc tế bào hợp chất dòng tế bào HepG2 PL-89 Phụ lục 30b: Tác dụng phòng ngừa ức chế tăng trưởng tế bào gan HepG2 CCl4 mM gây sau 24 chất phân lập từ cao MeOH lá/thân màn hoa tím màn hoa vàng PL-89 Phụ lục 31a: Định danh tên khoa học Màn hoa tím PL-90 Phụ lục 31b: Định danh tên khoa học Màn hoa vàng .PL-90 Phụ lục 32a: Kết tra Scifinder ngày 26/7/2013 hợp chất cleomeside A PL-91 Phụ lục 32b: Kết tra Scifinder ngày 26/12/2013 hợp chất cleomeside B PL-91 Phụ lục 32c: Kết tra Scifinder ngày 6/12/2014 hợp chất cleomeside C PL-91 Phụ lục 32d: Kết tra Scifinder ngày 7/4/2015 hợp chất visconoside A PL-92 Phụ lục 32e: Kết tra Scifinder ngày 28/5/2015 hợp chất visconoside B PL-92 75 Các hợp chất flavonoid phân lập từ loài Màn hoa tím (C chelidonii L.f.) Hợp chất R1 R2 R3 R4 OH OH Rha H OH OH Glc H OH OH Glc-(1→2)-Rha Rha (Mới) OH OH Glc-(1→2)-Rha 4-acetyl-Rha OH OH (6-Coumaroyl)-Glc-(1→2)-Rha Rha (Mới) OH OH (6-Coumaroyl)-Glc-(1→2)-Rha 4-acetyl-Rha 16 H OH 2,4-Diacetyl-Rha H 19 H OH Rha -(1→6)-Glc H 20 (Mới) H OH [2-(6-Feruloyl)-3-(6-coumaroyl)-Glc]-Rha Rha Các hợp chất flavonoid phân lập từ loài Màn hoa vàng (C viscosa L.) Hợp chất R1 R2 R3 R4 OH OH H Rha OH OH Glc Rha (Mới) OH OH Glc-(1→3)-(4-acetyl)-Rha Rha 10 (Mới) OH OH Sinapinoyl (1→6)- Glc-(1→3)-(4-acetyl)-Rha Rha 11 H OH CH3 H 12 H OCH3 CH3 H 13 H OH Glc 14 H OH H 15 H OH 4-Acetyl-Rha 17 H OH Rha Rha 18 H OH Glc Rha H Rha H 76 21 23 22 24 25 Kết nghiên cứu luận án phân lập xác định cấu trúc 25 hợp chất, có hợp chất lần đầu tìm thấy Thành phần hóa học hai loài hợp chất flavonoid chủ yếu dẫn xuất khung quercetin kaempferol, điều tương đồng với nghiên cứu tác giả trước đây[5, 49] Ngoài hợp chất 2, 3, 5, 7, 11, 12, 13, 15, 16, 21, 22, 23, 24 25 biết từ số loài thực vật khác lần tìm thấy chúng diện chi Cleome Các hợp chất 1, 4, 14, 17, 18 19 tìm thấy loài C amplyocarpa, C brachycarpa, C chrysantha C droserifolia.[91], lần đầu tìm thấy hai loài Màn hoa tím Màn hoa vàng Các hợp chất quercetin-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside (4) kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside (18) có hàm lượng tương đối lớn Màn hoa vàng Có thể sử dụng hợp chất chất chuẩn đối chiếu loài Màn hoa vàng Ngoài ra, kết thử nghiệm hoạt tính bảo vệ gan cao chiết số chất phân lập cho thấy đáp ứng mô hình thử nghiệm Tác dụng bảo vệ gan cao chiết số hợp chất phân lập từ hai loài Màn phù hợp với báo cáo từ nghiên cứu Việt Nam Nguyễn Tuấn Quang cs[4] nghiên cứu giới [13, 31, 55,59, 58, 105] Kết nghiên cứu luận án góp phần giải thích tác dụng trị viêm gan mạn tính dược liệu Màn sử dụng dân gian[1, 6, 8] 77 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Từ hai loài Màn hoa tím (Cleome chelidonii L.f.) Màn hoa vàng (Cleome viscosa L.) tỉnh Bình Dương, phương pháp sắc ký, phân lập 25 hợp chất tinh khiết, hợp chất phân lập chủ yếu flavonoid, có hợp chất 20 hợp chất biết Bằng phương pháp phổ đại IR, UV, 1D-NMR, 2D-NMR, MS, HR-MS xác định cấu trúc 25 hợp chất sau ● Loài Màn hoa tím + hợp chất mới: Cleomeside A (6), cleomeside B (8) cleomeside C (20) + 10 hợp chất biết: Quercitrin (2), isoquercitrin (3), quercetin 3-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→2)]-α-Lrhamnopyranoside-7-O-α-L-rhamnopyranoside (5), quercetin-3-O-[2"-O-(6'''-p- coumaroyl)-β-D-glucopyranosyl]-α-L-rhamnopyranoside-7-O-α-L-rhamnopyranoside (7), kaempferol-3-O-(2,4-O-diacetyl-α-L-rhamnopyranoside) (16), kaempferol-3-O-αL-rhamnopyranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside (19), glycerol monostearate (21), ethyl α-galactopyranoside (22), adenine (23) emodin-8-O-β-D-glucopyranoside (25) ● Loài Màn hoa vàng + hợp chất mới: Visconoside A (9) visconoside B (10) + 10 hợp chất biết: Quercetin-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside (4), quercetin-7-Oα-L-rhamnopyranoside (1), kaempferol-3-O-methylether (11), kaempferol-3,4'-Odimethylether (12), kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside (13), kaempferol-7-O-α-Lrhamnopyranoside (14), kaempferol-3-O-(4-O-acetyl-α-L-rhamnopyranoside) (15), kaempferol-3,7-O-α-L-dirhamnopyranoside (17), kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosyl7-O-α-L-rhamnopyranoside (18) 5-(hydroxymethyl)-2-furaldehyde (24) Các cao chiết từ thân, hai loài hoạt tính độc tế bào, thể tác dụng tác dụng kích thích tăng trưởng tế bào khoảng 20% - 30% sau 72 Cleomeside A (6), cleomeside B (8), cleomeside C (20), visconoside A (9), visconoside B (10), quercetin-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside (4), 78 quercetin-3-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→2)]-α-L-rhamnopyranoside-7-O-α-L-rhamno pyranoside (5), kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside (18) hoạt tính độc tế bào Hợp chất cleomeside C (20) làm tăng tỷ lệ tế bào sống 100% nồng độ 25µM Các hợp chất cleomeside B (8), visconoside A (9), visconoside B (10) kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside (18) thể tác dụng bảo vệ tế bào gan HepG2 phòng ngừa ức chế tăng trưởng tế bào CCl4 mM gây sau 24 tiếp xúc nồng độ 100 µM, hợp chất 9, 10 18 thể tác dụng bảo vệ tế bào gan tốt với tỷ lệ phòng ngừa 65% - 75% KIẾN NGHỊ Đây nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính bảo vệ tế bào gan Màn hoa tím (Cleome chelidonii L.f.) Màn hoa vàng (Cleome viscosa L.) Việt Nam Tiếp tục nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan in vivo số mô hình gây tổn thương gan paracetamol, cyclophosphamide ethanol Dựa kết thu cho thấy dược liệu Màn có khả phát triển thành nguyên liệu cho ngành công nghiệp dược nước ta Cho nên cần có kế hoạch để bảo tồn phát triển loài 79 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT [1] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiểu, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Thu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2003), “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật Hà Nội, tập II, tr 222-223 [2] Đỗ Thị Hồng Tươi, Lê Thị Thu Vân, Huỳnh Thị Kim Loan (2014), “Xây dựng mô hình in vitro mô tình trạng tổn thương tế bào gan tác nhân CCl4 dòng tế bào HepG2”, Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 18(1), tr 273-280 [3] Nguyen Thi Hoai Thu, Lam Phuc Khanh, Nguyen The Duy, Nguyen Thi Kim Chanh, Nguyen Kim Phi Phung, Poul Erik Hansen (2011), “Chemical constituents from leaves of Sonneratia alba J.E Smith (Sonneratiaceae)”, Tạp chí phát triển KH&CN, tập 14, số T6-2011, tr 11-17 [4] Nguyễn Tuấn Quang, Triệu Duy Điệt, Vũ Bình Dương, Chúc Mai Hiên (2011), “Đánh giá số tác dụng sinh học cao thân, lá, Màn tím (Cleome chelidonii L f., Capparaceace)”, Tạp chí Y Dược học quân sự, số 3-2011, tr 7-13 [5] Nguyễn Tuấn Quang, Triệu Duy Điệt, Vũ Bình Dương, Nguyễn Trung Hiếu, Chúc Mai Hiên (2011), “Bước đầu nghiên cứu thành phần hoá học màn tím (Cleome chelidonii L.f.)”, Tạp chí Y Dược học quân sự, số 2-2011, tr 40-45 [6] Phạm Hoàng Hộ (2003), “Cây cỏ Việt Nam”, Nhà xuất trẻ, tập I, tr 597-598 [7] Sỹ Danh Thường (2009), “Tuyển tập báo cáo Hội nghị Sinh thái Tài nguyên sinh vật lần thứ 3”, Viện ST&TNSV-Viện KH&CN Việt Nam, 22/10/2009 [8] Võ Văn Chi (2003), “Từ điển thực vật thông dụng”, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật Hà Nội, tập 1, tr 711-712 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG ANH [9] Ahmed S., Sultana M., Hasan M.M.U., Azhar I (2011), “Analgesic and antiemetic activity of Cleome viscosa”, Pak J Bot., 43, pp 119-122 [10] Ailian Z., Huayi Q., Qi Y., Guolin Z (2006), “Chemical study on Rostellularia procumbens”, Chin J Appl Environ Biol., 12(2), pp 170-175 80 [11] Bainiwal L.K., Vijayvergia P., Vijayvergia R (2013), “Determination of preliminary phytoconstituents, total phenolic and flavonoids contents in the roots, leaves and stems of Cleome viscosa Linn.”, Int J Biol Pharmaceut Res., 4(12), pp 891- 895 [12] Barakat H.H., El-Mousallamy A.M.D., Souleman A.M.A., Awadalla S (1991), “Flavonoids of Ochradenus baccatus”, Phytochemistry, 30(11), pp 3777-3779 [13] Battu G., Pragada R., Murthy P.P., Rao E.S., Kiran P.M., Srikanth M., Praneeth V.S.D., Rao T.M (2012), “In vitro anti-oxidant and hepatoprotective activities of Cleome chelidonii root extracts”, J Pharm Res., 5(6), pp 3155-7 [14] Bawankule D.U., Chattopadhyay S.K., Pal A., Saxena K., Yadav S., Faridi U., Darokar M.P., Gupta A.K., Khanuja S.P.S (2008), “Modulation of inflammatory mediators by coumarinolignoids from Cleome viscosa in female swiss albino mice”, Inflammopharmacology, 16(6), pp 272-277 [15] Biswas S.M., Jana A (2010), “Bioactivity of acid 2-amino-9-(4-oxoazetidin-2-yl) nonanoic from the root exudates Cleome viscosa ”, Bio-Research, 8(1), pp 651-656 [16] Bose A., Gupta J.K., Dash G.K., Ghosh T., Si S., Panda D.S (2007), “Diuretic and antibacterial activity of aqueous extract of Cleome rutidosperma DC.”, Indian J Pharm Sci., 69(2), pp 292-294 [17] Bose A., Khuntia A., Gupta J.K., Si S.(2012), “Evaluation of central nervous system depressant activity of Cleome rutidosperma”, Alt Med Studies, 2(8), pp 38-42 [18] Bose A., Mondal S., Gupta J.K., Ghosh T., Si S., Debbhuti D (2007), “A study on antimicrobial activity of Cleome rutidosperma DC”, J Nat Rem., 7(1), pp 132-134 [19] Bose A., Smith P.J., Lategan C.A., Gupta J.K., Si S (2010), “Studies on in vitro antiplasmodial activity of Cleome rutidosperma”, Drug Res., 67(3), pp 315-318 [20] Bose U., Bala V., Ghosh T.N., Gunasekaran K., Rahman A.A (2011), “Antinociceptive, cytotoxic and antibacterial activities of Cleome viscosa leaves”, Braz J Pharmacog., 21(1), pp 165-169 [21] Chakraborty A.K., Charde M.S., Roy H., Bhanja S., Behera M (2010), “Comparative study of antioxidant activity between ethanolic and aqueous extract of Cleome rutidosperma”, Int J Pharm Sci Res., 1(11), pp 112-116 [22] Chatterjee A., Chattopadhyay S.K., Tandon S., Kaur R., Gupta A.K., Maulik P.R., Kant R (2013), “Isolation of a unique dipyridodiazepinone metabolite nevirapine 81 during large scale extraction of Cliv-92 from the seeds of Cleome viscosa”, Ind Crops Prod., 45, pp 395-400 [23] Chattopadhyay S.K., Kumar S., Kaur R., Tandon S., Rane S (2008), “Identification and quantification of two antihepatotoxic coumarinolignoids cleomiscosin A and cleomiscosin B in the seeds of Cleome viscosa using liquid chromatography-tandem mass spectrometry”, Biomed Chromatogr., 23, pp 340-356 [24] Chauhan J.S., Srivastava S.K., Srivastava S.D (1979), “Kaempferide 3-glucuronide from the roots of Cleome viscosa”, Phytochemistry, 18(4), p 69 [25] Devi B.C., Ramesh C (2015), “Studies on anti-diabetic activity of Cleome viscosa in alloxan-induced diabetic rats”, S Am J Acad Res., 2(1), pp 1-8 [26] Devi B.P., Boominathan R., Mandal S.C (2003), “Evaluation of antipyretic potential of Cleome viscosa Linn (Capparidaceae) extract in rats”, J Ethnopharmacol., 87(1), pp 11-13 [27] Devi B.P., Boominathan R., Mandal S.C.(2004), “Studies on psychopharmacological effects of Cleome viscosa Linn extract in rats and mice”, Phytother Res., 18(2), pp 169-172 [28] Dey P.S.A., Manavalan R (2009), “Effect of the methanolic extract of Cleome chelidonii on drug metabolizing enzymes, antioxidant status, chemomodulatory efficacy in mice”, J Basic Appl Sci., 5(1), pp 37-46 [29] Dhanalakshmi, Kumar D.S., Prasad M.S., Koli V., Kumar B P., Harani A (2011), “Antimicrobial activity evaluation of Cleome viscose Linn.”, Eur J Exp Biol., 1(1), pp.103-105 [30] El-Sayed M.M., Mahmoud M.A.A., El-Nahas H.A.K., El-Toumy S.A.H., El-Wakil E.A., Ghareeb M.A (2010), “Bio-guided isolation and structure elucidation of antioxidant compounds from the leaves of Ficus sycomorus”, Pharmacology online, 3, pp 317-332 [31] Ethadi S., Pragada R., Battu G (2013), “Evaluation of anti-inflammatory and hepatoprotective activities of different extracts of Cleome chelidonii root in albino rats”, Int J Pharma Bio Sci., 4(4), pp 111-119 [32] Faheemuddin M.D., Janarthan M., Durraivel S (2013), “Evaluation of protective effect of Cleome viscosa extract on diet induced atherosclerosis in diabetic rats”, J Chem Pharm Sci., 6(4), pp 238-242 82 [33] Gopal Y.V., Ravindernath A., Kalpana G., Reddy V.P (2012), “Antitumor activity of Cleome viscosa against Ehrlich Ascites carcinoma (EAC) in Swiss albino mice”, Int J Phyto Pharm., 2(2), pp 51-55 [34] Gupta N.K., Dixit V.K (2009), “Evaluation of hepatoprotective activity of Cleome viscosa Linn extract”, Indian J Pharmacol., 41(1), pp 36-40 [35] Gupta N.K., Dixit V.K (2009), “Hepatoprotective activity of Cleome viscosa Linn extract against thioacetamide-induced hepatotoxicity in rats”, Nat Prod Res., 23(14), pp 1289-1297 [36] Hiroyoshi M., Iizuka T., Nagai M., Hoshi K.(2003), “Adenine, an inhibitor of platelet aggregation from the leaves of Cassia alata”, Biol Pharm Bull., 26(9), pp 1361-1364 [37] Holden P.R., James N.H., Brooks A.N., Roberts R.A., Kimber I., Pennie W.D (2000), “Identification of a possible association between CCl4 induced hepatotoxicity and interleukin-8 expression”, J Biochem Mol Toxic., 14(5), pp 283-290 [38] Houglum K., Ramm G.A., Crawford D.H., Witztum J.L., Powell L.W., Chojkier M (1997), “Excess iron induces hepatic oxidative stress and transforming growth factor beta1 in genetic hemochromatosis”, Hepatology, 26(3), pp 605-610 [39] Huang W., Wan C., Zhou S (2013), “Quercetin - A flavonoid compound from Sarcopyramis bodinieri with potential apoptotic activity in HepG2 liver cancer cells”, Trop J Pharm Res., 12(4), pp 529-533 [40] Hwang Y.P., Choi J.H., Kim H.G., Khanal T., Song G.Y., Nam M.S., Lee H.S., Chung Y.C., Lee Y.C., Jeong H.G (2013), “Saponins, especially platycodin D, from Platycodon grandiflorum modulate hepatic lipogenesis in high-fat diet-fed rats and high glucose-exposed HepG2 cell”, Toxico Appl Pharm., 267(2), pp 174-183 [41] Iredale J.P (2007), “Model of liver fibrosis: exploring the dynamic nature of inflammation and repair in a solid organ”, J Clin Invest., 117(3), pp 539-547 [42] Islam M.M., Islam M.Z., Shaekh M.P.E., Das P., Chowdhury H.K., Shahik S.M., Muzahid N.H., Khan M.A., Ekram A.E (2014), “Screening of Cleome viscosa (L.) for dose mortality, insect repellency, cytotoxicity and larvicidal activities in the laboratory condition”, Int J Sci Eng Res., 5(1), pp 2201-2212 [43] Jabloński J., Hołownia A., Jabłońska E., Moniuszko-Jakoniuk J., Braszko J., Iwanowska J., Marcińczyk M (2005), “The effect of ethanol and nitric oxide on the N- 83 nitrosodimethylamine formation in HepG2 cells overexpressing CYP2E1”, Hum Exp Toxicol., 24(9), pp 447-452 [44] Jain G.C., Agarwal S (2006), “Favourable effect of Cleome viscosa L on serum and hepatic lipids in hyperlipidemic rats”, Asian J Exp Sci., 20(2), pp 331-336 [45] Jain N.K., Singhai A.K (2012), “Ameliorative effects of Spinacia oleracea L seeds on carbon tetrachloride (CCl4)-induced hepatotoxicity: In vitro and in vivo studies”, Asian Pac J Trop Biomed., 2(1), pp S232-S237 [46] Jana A., Biswas S.M (2011), “Lactam nonanic acid, a new substance from Cleome viscosa with allelopathic and antimicrobial properties”, J Biosci., 36(1), pp 27-35 [47] Jane R.R., Patil S.D (2012), “Cleome viscosa: An effective medicinal herb for otitis media”, Int J Sci Nat., 3(1), pp 153-158 [48] Jente R., Jaklipwic J., Olatunji G.A (1990), “A cembranoid diterpene from Cleome viscosa”, Phytochemistry, 29(2), pp 666-667 [49] Kapoor B.B.S., Mishra R (2013), “Flavonoid contents from some Capparidaceous medicinal plants of North-West Rajasthan”, Indian J Pharm Biol Res., 1(1), pp 9-11 [50] Kerhoas L., Aouak D., Cingoz A., Routaboul J.M., Lepiniec L., Einhorn J., Birlirakis N (2006), “Structural characterization of the major flavonoid glycosides from Arabidopsis thaliana seeds”, J Agric Food Chem., 54(18), pp 6603-6612 [51] Kook D., Wolf A.H., Yu A.L., Neubauer A.S., Priglinger S.G., Kampik A., WelgeLussen U.C (2008), “The protective effect of quercetin against oxidative stress in the uman RPE in vitro”, Invest Ophth Vis Sci., 49(4), pp 1712-1720 [52] Koppula S., Ammani K., Bobbarala V (2011), “Assessment of medicinal potentials of Cleome viscosa L methanol extract”, Int J Chem Anal Sci., 2(2), pp 12-14 [53] Kristanti A.N., Aminah N.S., Tanjung M (2015), “Phenolic compounds from stem bark of Saccopetalumhors fieldii Benn”, Der Pharm Lett., 7(3), pp 149-152 [54] Kumar S., Ray A.B., Konno C., Oshima Y., Hikino H (1988), “Cleomiscosin D, a coumarino-lignan from seeds Cleome viscosa”, Phytochemistry, 27(2), pp 636-638 [55] Kumar S.V., Christina A.J.M., GeethaRani P.V., Nalini G., Chidambaranathan N (2009), “Antifibrotic effect of Cleome viscosa Linn on CCl4 induced liver fibrosis”, Der Pharma Chemica, 1(2), pp 92-96 [56] Lee T.K., Lau T.C., Irene O.Ng (2002), “Doxorubicin-induced apoptosis and chemo sensitivity in hepatoma cell lines”, Cancer Chemoth Pharm., 49(1), pp 78-86 84 [57] Li Z.C., Chen Z., Li X.R., Xu Q.M., Yang S.L (2012), “Chemical constituents in roots and stems of Physalis alkekengi var franchetii”, Chin Trad Herbal Drugs, 43(10), pp 1910-1912 [58] Lima I.C., Nora R., Carvalho M.G., Douglas S.A (2014), “Distribution and chemotaxonomic significance of phenolic compounds in Spermacoce verticillata (L.) G Mey”, J Pharm Pharmacogn Res., 2(1), pp 14-18 [59] Mali R.G (2010), “Cleome viscosa (wild mustard): A review on ethnobotany, phytochemistry and pharmacology”, Pharm Biol., 48(1), pp 105-112 [60] Martín-Renedo J., Mauriz J.L., Jorquera F., Ruiz-Andrés O., González P., GonzálezGallego J (2008), “Melatonin induces cell cycle arrest and apoptosis in hepatocarcinoma HepG2 cell line”, J Pineal Res., 45(4), pp 532-540 [61] Masuda T., Jitoe A., Kato S., Nakatani N (1991), “Acetylated flavonol glycosides from Zingiber zerumbet”, Phytochemistry, 30(7), pp 2391-2392 [62] McCullough A.J (2006), “Pathophysiology of nonalcoholic steatohepatitis”, J Clin Gastroenterol., 40(1), pp 17-29 [63] Meex S.J., Andreo U., Sparks J.D., Fisher E.A (2011), “Huh-7 or HepG2 cells: which is the better model for studying human apolipoprotein-B100 assembly and secretion?”, J Lipid Res., 52(1), pp 152-158 [64] Mehta K., Balaraman R., Amin A.H., Bafna P.A., Gulati O.D (2003), “Effect of fruits of Moringa oleifera on the lipid profile of normal and hypercholesterolaemic rabbits”, J Ethnopharmacol., 86(2-3), pp 191-195 [65] Merekar A.N., Parjane S.K., Nirmal S.A., Laware R.B., Patel D.S (2011), “Synergistic anthelmintic activity of rhizomes of Acorus calamus and aerial part of Cleome viscosa”, Pharmacology online, 2, pp 1007-1009 [66] Mishra A., Mishra A.K., Jain S.K.(2010), “Anticonvulsant activity of Cleome viscosa seed extracts in Swiss albino mice”, Int J Pharm Pharmaceut Sci., 2(1), pp 177-81 [67] Mismisuraya M.A., Alwi S.R.W., Chua L.S., Mustaffa A.A (2015), “Review of hepatoprotective agents in herbs”, J Eng Sci Technol., Special Issue, pp 14-24 [68] Mobiya A.K., Patidar A.K., Selvam G., Jeyakandan M (2010), “Hepatoprotective effect of Cleome viscosa L seeds in paracetamol induced hepatotoxic rats”, Int J Pharm Biol Arch., 1(4), pp 399-403 85 [69] Mohammed A.E.I (2015), “Phytoconstituents and the study of antioxidant, antimalarial and antimicrobial activities of Rhus tripartita growing in Egypt”, J Pharmacogn Phytochem., 4(2), pp 276-281 [70] Mondal S., Dash G.K., Acharyya S (2010), “Isolation of phytoconstituents from the roots of Cleome rutidosperma DC”, Drug Inv Today, 2(1), pp 92-95 [71] Mondal S., Dash G.K., Acharyya S., Brahma D.K (2009), “Analgesic, antiinflammatory and antipyretic studies of Cleome rutidosperma DC roots”, J Pharm Res., 2(5), pp 819-822 [72] Mondal S., Suresh P (2012), “Wound healing activity of Cleome rutidosperma DC roots”, Int Curr Pharm J., 1(6), pp 151-154 [73] Moya M., Benet M., Guzmán C., Tolosa L., Carmelo G.M., Pareja E., Castell J.V., Jover R (2012), “Foxa1 reduces lipid accumulation in human hepatocytes and is downregulated in nonalcoholic fatty liver”, Plos one, 7(1), e30014 [74] Nair S., Varalakshmi K.N (2011), “Anticancer, cytotoxic potential of Moringa oleifera extracts on HeLa cell line”, J Nat Pharm., 2, pp 138-142 [75] Nakajima K., Yamauchi K., Shigematsu S., Ikeo S., Komatsu M., Aizawa T., Hashizume K (2000), “Selective attenuation of metabolic branch of insulin receptor down-signaling by high glucose in a hepatoma cell line, HepG2 cells”, J Biol Chem., 275(27), pp 20880-20886 [76] Nakatani N., Jitoe A., Masuda T., Yonemori S (1991), “Flavonoid constituents of Zingiber zerumbet Smith”, Agric Biol Chem., 55(2), pp 455-460 [77] Okoro I.O., Umar I.A., Atawodi S.E., Anigo K.M (2015), “Bioassay-guided evaluation of the antidiabetic activity of Cleome rutidosperma DC”, Int J Pharm Pharm Sci., 7(1), pp 198-202 [78] Olszewska M., Wolbis M (2002), “Further flavonoids from the flowers of Prunus spinosa L.”, Acta Pol Pharm., 59(2), pp 133-137 [79] Owis A.I (2012), “Glycosides from Cassia brewsteri flowers growing in Egypt”, Asian J Pharm Life Sci., 2(4), pp 428-435 [80] Pareek A., Godavarthi A., Issarani R., Nagori B.P (2013), “Antioxidant and hepatoprotective activity of Fagonia schweinfurthii extract in CCl4 induced hepatotoxicity in HepG2 cell line and rats”, J Ethnopharmacol., 150(3), pp 973-981 86 [81] Parimaladevi B., Boominathan R., Mandal S.C (2003), “Studies on analgesic activity of Cleome viscosa in mice”, Fitoterapia, 74(3), pp 262-266 [82] Patil R.C., Wavhal S.D., Yadav S.S., Deshpande V.D (2012), “Antibacterial and bioenhancing activity of ethyl acetate extract of Cleome rutidosperma leaves”, J Pharm Res., 5(1), pp 557-559 [83] Priyanka S., Sayanti G., Monideepa B., Lekhya P.C., Bhaskara R.K.V (2014), “Phytochemical composition, antimicrobial, hemolytic activity and HPLC analysis of ethanolic extract Cleome viscosa stems”, Res J Pharm Tech., 7(10), pp 1140-1144 [84] Rahman S.M.M., Munir S., Hossain M.A (2008), “Phytochemical study of the arial parts of Cleome rutidosperma DC Plant”, Indo J Chem., 8(3), pp 459-462 [85] Rao B.S., Reddy K.E., Parveen K., Narendra B.L., Shekhar S.C., Mangala L (2014), “Effects of Cleome viscosa on hyperalgesia, oxidative stress and lipid profile in STZ induced diabetic neuropathy in Wistar rats”, Pak J Pharm Sci., 27(5), pp 1137-45 [86] Ray A.B., Chaitopadhyay S.K., Kumar S (1985), “Structures of cleomiscosins, coumarinolignoids of Cleome viscosa seeds”, Tetrahedron, 41(1), pp 209-214 [87] Sahu S.C (2007), “Hepatotoxicity: From genomics to in vitro and in vivo models”, Wiley, England, pp 25-28 [88] Sakthivadivel M., Gunasekaran P., Mathew J., Samraj A., Arivoli S., Tennyson S (2014), “Evaluation of larvicidal efficacy of Cleome viscosa L (Capparaceae) aerial extracts against Culex quinquefasciatus Say (Diptera: Culicidae)”, Asian Pac J Trop Dis., 4(2), pp S795-S798 [89] Saradha J.K., Rao B.S (2010), “In vitro antibacterial activity of Cleome viscosa Linn.”, Pharma Science Monitor, 1(2), pp 71-78 [90] Senthamilselvi M.M., Kesavan D., Sulochana N (2012), “An anti-inflammatory and anti-microbial flavone glycoside from flowers of Cleome viscosa”, Org Med Chem Lett., 2(19), pp 1-5 [91] Sharaf M., El-Ansari M.A., Saleh N.A.M (1997), “Flavonoids of Four Cleome and Three Capparis Species”, Biochem Syst Ecol., 25(2), pp 161-166 [92] Shimizu Y., Maeda T., Hidaki Y., Tani H., Morita N (2003), “Identification and effect of ethyl galactoside on the properties and baking quality of dough”, Food Res Int., 36, pp 373-379 87 [93] Singletary K., MacDonald C., Wallig M., Fisher C (1996), “Inhibition of 7,12dimethylb enzanthracene (DMBA)-induced mamary tumorigenesis and DMBA-DNA adduct formation by curcumin”, Cancer Lett., 103(2), pp 137-141 [94] Song N., Xu W., Guan H., Liu X., Wang Y., Nie X (2007), “Several flavonoids from Capsella bursa-pastoris (L.) Medic.”, Asian J Tradit Med., 2(5), pp 218-222 [95] Soudamini K.K., Unnikrishnan M.C., Soni K.B., Kuttan R (1992), “Inhibition of lipid peroxidation and cholesterol levels in mice by curcumin”, Indian J Physiol Pharmacol., 36(4), pp 239-243 [96] Sridhar N., Kiran B.V.V.S., Sasidhar D.K., Kanthal L.K (2014), “In vitro antimicrobial screening of methanolic extracts of Cleome chelidonii and Cleome gynandra”, Bangladesh J Pharmacol., 9(2), pp 161-166 [97] Srivastava S.K (1980), “Stigmasta-5,24(28)-diene-3β-O-α-L-rhamnoside from Cleome viscosa”, Phytochemistry, 19(11), pp 2510-2511 [98] Srivastava S.K., Chauhan J.S., Srivastava S.D (1979), “A new naringenin glycoside from Cleome viscosa”, Phytochemistry, 18(12), pp 2057-2058 [99] Sudhakar M., Rao Ch.V., Rao P.M., Raju D.B (2006), “Evaluation of antimicrobial activity of Cleome viscosa and Gmelina asiatica”, Fitoterapia, 77, pp 47-49 [100] Tomar A., Tomar Y., Sati A., Rawat S., Sati S.C (2015), “Antimicrobial activity of Cleome viscosa (seed)”, Eur J Pharm Med Res., 2(4), pp 271-274 [101] Wake R.R., Patil N.A., Khadabadi S.S (2011), “In vitro antimicrobial activity of extracts of seeds of Cleome viscosa”, Int J Pharm Sci Res., 2(8), pp 2232-2236 [102] Wei Y., Xie Q., Fisher D., Sutherland I.A (2011), “Separation of patuletin-3-Oglucoside, astragalin, quercetin, kaempferol and isorhamnetin from Flaveria bidentis Kuntze by elution-pump-out high-performance counter-current chromatography”, J Chromatogr A, 1218, pp 6206-6211 [103] Weng C.J., Chen M.J., Yeh C.T, Yen G.C (2011), “Hepatoprotection of quercetin against oxidative stress by induction of metallo thionein expression through activating MAPK and PI3K pathways and enhancing Nrf2 DNA-binding activity”, New Biotechnology, 28(6), pp 768-777 [104] Williams L.A.D., Vasques E., Reid W., Porter R., Kraus W (2003), “Biological activities of extract from Cleome viscosa”, Naturwissenschaften, 90(10), pp 468-472 88 [105] Yadav N.P., Chanda D., Chattopadhyay S.K., Gupta A.K., Pal A (2010), “Hepato protective effects and safety evaluation of coumarinolignoids isolated from Cleome viscosa seeds”, Indian J Pharm Sci., 72(6), pp 759-765 [106] Yao H.R., Liu J., Plumeri D., Cao Y.B., He T., Lin L., Li Y., Jiang Y.Y., Li J., Shang J (2011), “Lipotoxicity in HepG2 cells triggered by free fatty acids”, Am J Transl Res., 3(3), pp 284-291 [107] Ye N., Qin J., Liu X., Shi W., Lin B (2007), “Characterizing doxorubicin-induced apoptosis in HepG2 cells using an integrated microfluidic device”, Electrophoresis, 28(7), pp 1146-1153 [108] Zhang Y., Morikawa T., Nakamura S., Ninomiya K., Matsuda H., Muraoka O., Yoshikawa M (2007), “Bioactive constituents from chinese natural medicines XXV New flavonol bisdesmosides, sarmenosides I, II, III, and IV, with hepato protective activity from Sedum sarmentosum”, Heterocycles, 71, pp 1565-1576 89 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN ● Phan Nhat Minh, Mai Dinh Tri, Nguyen Tan Phat, Bui Trong Dat, Nguyen Ngoc Hanh, Ngo Quoc Luan, Ma Thi Thu Thanh & Chung Hoang Huynh (2015), “Two new flavonol glycosides from the leaves of Cleome chelidonii L.f.”, Journal of Asian Natural Products Research, 17(4), pp 338-342 ● Phan Nhật Minh, Mai Đình Trị, Nguyễn Tấn Phát, Nguyễn Ngọc Hạnh, Mã Thị Thu Thanh, Chung Hoàng Huynh (2014), “Góp phần khảo sát thành phần hóa học Màn hoa tím”, Tạp chí Dược liệu, số 2-2014, tr 106-109 ● Phan Nhật Minh, Mai Đình Trị, Nguyễn Tấn Phát, Nguyễn Ngọc Hạnh (2013), “Cleomeside A, coumaroyl flavonol glycoside từ Màn tím Cleome chelidonii L.f.”, Tạp chí Hóa Học, T.51(6ABC), tr 78-81 ● Phan Nhật Minh, Phạm Thị Thùy Linh, Nguyễn Thị Diễm Thúy, Mai Đình Trị, Nguyễn Tấn Phát, Lê Tiến Dũng, Nguyễn Thanh Hồng, Nguyễn Trọng Tuân, Nguyễn Ngọc Hạnh (2015), “Phân lập quercetin diglycoside kaempferol tetraglycoside hoạt tính bảo vệ gan cao methanol thân Màn hoa vàng (Cleome viscosa L.) Màn hoa tím (Cleome chelidonii L.f.) mô hình gan chuột bị gây độc CCl4”, Tạp chí Hóa học, T.53(4e3), tr 1-6 ● Phan Nhật Minh, Nguyễn Tấn Phát, Lê Tiến Dũng, Nguyễn Việt Thống, Lê Thị Thùy Dương, Mai Thanh Phong, Mai Đình Trị (2015), “Flavonol glycoside phân lập từ Màn hoa vàng Cleome viscosa L.”, Tạp chí Hóa học, T.53(6e1,2), tr 237-240