I. GIỚI THIỆU LUẬN ÁN 1. Mở đầu Việt Nam là quốc gia sở hữu nguồn tài nguyên thực vật vô cùng phong phú. Đây chính là điều kiện thuận lợi cho việc nghiên cứu hóa thực vật, nhằm phát triển nguồn dược liệu của nước ta. Qua nghiên cứu sàng lọc hoạt tính sinh học của một số loài cây thuốc dân tộc đã cho thấy, dịch chiết EtOAc của vỏ cây Côm (Elaeocarpus griffithii (Wight) A. Gray, Elaeocarpaceae), dịch chiết EtOAc của lá cây Mắc niễng bạc (Eberhardtia aurata (Pierre ex Dubard) Lecomte, Sapotaceae) và dịch chiết EtOH của lá cây Sói đứng (Chloranthus erectus (Buch.-Ham.) Verdcourt, Chloranthaceae) có một số hoạt tính sinh học đáng chú ý. Ngoài ra, cây Sói đứng được sử dụng trong y học dân gian chữa các bệnh chống viêm, phong thấp tê liệt, viêm khớp xương, lá cây Mắc niễng bạc được sử dụng trong y học dân gian dùng làm thuốc trị ho, ho gà, tuy nhiên cho đến nay còn chưa được nghiên cứu sâu. Cây Côm thì cho đến nay chưa có công trình nghiên cứu nào về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học. Chính vì vậy chúng tôi lựa chọn 3 loài thực vật trên làm đối tượng nghiên cứu của Luận án: 2. Nhiệm vụ của luận án - Nghiên cứu và xác định cấu trúc hóa học của các chất phân lập được từ 3 loài thực vật là: lá cây Sói đứng, lá cây Mắc niễng bạc và vỏ cây Côm, nhằm tìm kiếm các hợp chất có hoạt tính sinh học làm cơ sở khoa học cho những nghiên cứu tiếp theo, đồng thời góp phần giải thích tác dụng của các loài cây này trong y học cổ truyền. - Thử một số hoạt tính sinh học của dịch chiết và các chất phân lập được từ 3 loài thực vật trên. 3. Ý nghĩa khoa học và những đóng góp của luận án 3.1. Ý nghĩa khoa học Luận án đã đóng góp những hiểu biết mới về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của 3 loài thực vật: lá cây Sói đứng, lá cây Mắc niễng bạc và vỏ cây Côm ở Việt Nam. Ứng dụng những phương pháp vật lý hiện đại trong nghiên cứu cấu trúc hóa học của các hợp chất hữu cơ. 3.2. Những đóng góp mới của luận án
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGUYỄN VĂN THÔNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC & HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LỒI THỰC VẬT: CÂY SÓI ĐỨNG (CHLORANTHUS ERECTUS, CHLORANTHACEAE), CÂY MẮC NIỄNG BẠC (EBERHARDTIA AURATA, SAPOTACEAE) VÀ CÂY CÔM (ELAEOCARPUS GRIFFITHII, ELAEOCARPACEAE) Chun ngành: Hóa Hữu Mã số: 62440114 TĨM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội - 2015 Cơng trình hồn thành tại: Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Trần Thu Hương PGS TSKH Phạm Văn Cường Phản biện 1: GS.TS Phạm Quốc Long Phản biện 2: GS.TS Phạm Thanh Kỳ Phản biện 3: PGS.TS Phan Minh Giang Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấp Trường họp Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Vào hồi …… giờ, ngày … tháng … năm ……… Có thể tìm hiểu luận án thư viện: Thư viện Tạ Quang Bửu - Trường ĐHBK Hà Nội Thư viện Quốc gia Việt Nam I GIỚI THIỆU LUẬN ÁN Mở đầu Việt Nam quốc gia sở hữu nguồn tài ngun thực vật vơ phong phú Đây điều kiện thuận lợi cho việc nghiên cứu hóa thực vật, nhằm phát triển nguồn dược liệu nước ta Qua nghiên cứu sàng lọc hoạt tính sinh học số loài thuốc dân tộc cho thấy, dịch chiết EtOAc vỏ Côm (Elaeocarpus griffithii (Wight) A Gray, Elaeocarpaceae), dịch chiết EtOAc Mắc niễng bạc (Eberhardtia aurata (Pierre ex Dubard) Lecomte, Sapotaceae) dịch chiết EtOH Sói đứng (Chloranthus erectus (Buch.-Ham.) Verdcourt, Chloranthaceae) có số hoạt tính sinh học đáng ý Ngồi ra, Sói đứng sử dụng y học dân gian chữa bệnh chống viêm, phong thấp tê liệt, viêm khớp xương, Mắc niễng bạc sử dụng y học dân gian dùng làm thuốc trị ho, ho gà, nhiên chưa nghiên cứu sâu Cây Cơm chưa có cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Chính chúng tơi lựa chọn loài thực vật làm đối tượng nghiên cứu Luận án: Nhiệm vụ luận án - Nghiên cứu xác định cấu trúc hóa học chất phân lập từ loài thực vật là: Sói đứng, Mắc niễng bạc vỏ Cơm, nhằm tìm kiếm hợp chất có hoạt tính sinh học làm sở khoa học cho nghiên cứu tiếp theo, đồng thời góp phần giải thích tác dụng lồi y học cổ truyền - Thử số hoạt tính sinh học dịch chiết chất phân lập từ loài thực vật Ý nghĩa khoa học đóng góp luận án 3.1 Ý nghĩa khoa học Luận án đóng góp hiểu biết thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi thực vật: Sói đứng, Mắc niễng bạc vỏ Côm Việt Nam Ứng dụng phương pháp vật lý đại nghiên cứu cấu trúc hóa học hợp chất hữu 3.2 Những đóng góp luận án Hai lồi Cây sói đứng (Chloranthus erectus) Côm (Elaeocarpus griffithii) Việt Nam lần đầu nghiên cứu cách có hệ thống thành phần hóa học hoạt tính sinh học 3.2.1 Về thành phần hóa học ● Từ Sói đứng lần phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất chloranerectuslacton V (CE1), chloranthalacton B (CE2), -sitosterol (CE3), 9-hydroxyheterogorgiolid (CE4), isofraxidin (CE5), eleutherosid B1 (CE6) acid 3,4 dihydroxybenzoic (CE7) Trong đó, hợp chất chloranerectuslacton V (CE1) hợp chất ● Từ vỏ Côm, phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất là: acid ellagic (EG1), 3,3’,4’-tri-O-methylellagic acid 4-O-β-D-2”-O-acetylglucopyranoside (EG2), 3,3’-di-O-metyl acid 4-O-α-rhamnosid-ellagic (EG3), 3-O-metyl acid 4-O-α-rhamnosidellagic (EG4), octacosyl ferulat (EG5), acid gallic (EG6), β-sitosterol (EG7) 6-hydroxy-1,12-oleanadien-3-on (EG8) Trong đó, hợp chất 6-hydroxy-1,12-oleanadien-3-on (EG8) xác định hợp chất 3.1.2 Về hoạt tính sinh học: Các cặn chiết chất phân lập khảo sát hoạt tính sinh học Theo đó, hợp chất phân lập từ Mắc niễng bạc Cơm khảo sát hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư, KB, LU-1, Hep-G2 MCF-7 Cặn chiết EtOH (SD-2012) Sói đứng thể hoạt tính gây độc tế bào, khả chống viêm số dòng tế bào ung thư thử nghiệm Kết thu cho thấy số hợp chất phân lập từ vỏ Cơm (Elaeocarpus griffithii), hợp chất EG2 có hoạt tính ức chế dòng tế bào KB MCF-7 với giá trị IC50 7,04 μg/ml 24,8 μg/ml Hợp chất EG8 có hoạt tính ức chế dòng tế bào KB, MCF-7, LU1 Hep-G2 với giá trị IC50 57,27; 49,88; 45,99 62,33 μg/ml Ngoài ra, hợp chất EG3 thể hoạt tính ức chế chọn lọc phát triển tế bào ung thư KB với giá trị IC50 28,3 μg/ml Bố cục luận án Luận án dày 125 trang với 15 bảng số liệu, 94 hình 91 tài liệu tham khảo kết cấu sau: Mục lục, Danh mục kí hiệu chữ viết tắt, Danh mục hình, Danh mục bảng Danh mục phụ lục Mở đầu (2 trang) Chương 1: Tổng quan (33 trang) Chương 2: Đối tượng phương pháp nghiên cứu (5 trang) Chương 3: Thực nghiệm (23 trang) Chương 4: Kết thảo luận (50 trang) Kết luận kiến nghị (2 trang) Danh mục cơng trình liên quan đến luận án (1 trang) phần tài liệu tham khảo (9 trang), ngồi luận án cịn có phần phụ lục gồm phổ hợp chất phân lập được; minh chứng thử hoạt tính sinh học II NỘI DUNG LUẬN ÁN MỞ ĐẦU Phần mở đầu đề cập đến ý nghĩa khoa học, tính thực tiễn, đối tượng nhiệm vụ nghiên cứu luận án CHƯƠNG TỔNG QUAN Giới thiệu sơ lược thực vật họ Hoa sói (Chloranthaceae) Giới thiệu chi Chloranthus Các nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học chi Chloranthus Một số nghiên cứu Sói đứng (Chloranthus erectus) Giới thiệu sơ lược thực vật họ Hồng xiêm (Sapotaceae) Giới thiệu chi Eberhardtia Các nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học chi Eberhardtia Giới thiệu sơ lược thực vật họ Côm (Elaeocarparceae) Giới thiệu chi Elaeocarpus Các nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học chi Elaeocarpus Một số nghiên cứu Côm CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU 2.1 Thu mẫu xác định tên khoa học Mẫu Sói đứng (Chloranthus erectus), thu hái vùng núi Tam Đảo, Vĩnh Phúc PGS.TS Trần Huy Thái-xác định tên khoa học Mẫu Mắc niễng bạc (Eberhardtia aurata), thu hái Thuận Châu-Sơn La) Vỏ Côm (Elaeocarpus griffithii) thu hái Quỳ Châu, Nghệ An Hai mẫu TS Nguyễn Quốc Bình định tên 2.2 Phương pháp xử lý chiết mẫu Các mẫu thực vật sau thu hái thái nhỏ, phơi bóng mát, sấy khơ nhiệt độ 40-45 o C, sau đem nghiền nhỏ ngâm chiết với dung môi ethyl acetat, MeOH nhiệt độ phòng Gộp dịch chiết lọc, cất loại dung môi áp suất thấp thu cặn chiết EtOAc, MeOH tương ứng 2.3 Phương pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập hợp chất từ mẫu thực vật Việc phân tích phân tách phần dịch chiết thực phương pháp kết tinh phương pháp sắc kí như: sắc kí lớp mỏng (TLC, dùng để khảo sát), sắc kí cột thường (CC), sắc kí cột nhanh với pha tĩnh silicagel (Merck), sắc kí cột pha đảo với chất hấp phụ RP-18 sắc kí rây phân tử Sephadex LH-20 Dung môi rửa giải chủ yếu hệ dung môi n-hexan/CH2Cl2, n-hexan/EtOAc, n-hexan/aceton, CH2Cl2/MeOH, CH2Cl2/EtOAc với tỷ lệ thích hợp 2.4 Các phương pháp xác định cấu trúc hóa học chất phân lập từ mẫu thực vật nghiên cứu Các phương pháp phổ như: phổ hồng ngoại (FT-IR), phổ khối (ESI-MS), phổ khối phân giải cao (HR-ESI-MS), phương pháp phổ 1D-NMR 2D-NMR 2.5 Phương pháp thử hoạt tính sinh học dịch chiết chất phân lập 2.5.1 Thử hoạt tính gây độc tế bào Hoạt tính gây độc tế bào thử nghiệm Viện Công nghệ Sinh học-VAST Phương pháp thử độ độc tế bào in vitro Viện Ung thư Quốc gia Hoa Kỳ (National Cancer Institute-NCI) xác nhận phép thử độ độc tế bào chuẩn nhằm sàng lọc, phát chất có khả kìm hãm phát triển diệt TBUT điều kiện in vitro Phép thử thực theo phương pháp Monks (1991) 2.5.2 Thử hoạt tính kháng viêm 2.5.2.1 Phương pháp gây viêm cục hoạt chất EPP Phương pháp gây viêm tiến hành theo phương pháp Mrudula Kale (2007), Jaijoy K (2010) cụ thể bôi vào tai chuột lượng EPP 1mg/1 tai chuột pha 20 l aceton 2.5.2.2 Phương pháp gây viêm cục formalin 1% Phương pháp gây viêm tiến hành theo phương pháp Miklos Gabor (2009) cụ thể tiêm da gan bàn chân chuột 20 l formalin 1% pha PBS 2.5.2.3 Phương pháp xác định khả kháng viêm Xác định khả kháng viêm hoạt chất tiến hành theo phương pháp Miklos Gabor (2009) CHƯƠNG THỰC NGHIỆM 3.1 Tách chiết, phân lập chất từ Sói đứng (Chloranthus erectus) Hình 3.1.1 Sơ đồ ngâm chiết Sói đứng Hình 3.1.2 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết n-hexan Sói đứng Hình 3.1.3 Sơ đồ phân lập hợp chất từ dịch chiết ethyl acetat Sói đứng Bột khơ Sói đứng (1,0 kg) Ngâm chiết với EtOH Dịch chiết EtOH Cất loại Dung môi Cặn EtOH SD-2012 (70 g) Bã Hình 3.1.4 Sơ đồ ngâm chiết tạo dịch chiết EtOH (SD-2012) từ Sói đứng Dữ kiện phổ số vật lý hợp chất phân lập từ Sói đứng Chloranerectuslacton V (CE1): Chất kết tinh dạng tinh thể hình kim, màu trắng; đ.n.c: 202oC; [α]D25=-33,5o (c 0,4, CHCl3); Rf = 0,57 (TLC silica gel, n-hexan/ethyl acetat, 5/1, v/v); ESI-MS: m/z 293,13797 [M+H]+ (theo tính tốn: m/z= 293,13825 với CTPT C16H21O5); H-NMR (CDCl3, 500 MHz) 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz): Bảng 4.1 Chloranthalacton B (CE2): Chất kết tinh dạng tinh thể hình kim, màu trắng; đ.n.c: 145-146oC; Rf = 0,53 (TLC silica gel, n-hexan/ethyl acetat, 7/1, v/v); ESI-MS: m/z 245 [M+H]+ (C15H16O3) H-NMR (CDCl3, 500 MHz) 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz): Bảng 4.2 -Sitosterol (CE3): Chất kết tinh hình kim, màu trắng; đ.n.c: 136-138oC; Rf = 0,46 (TLC silica gel, n-hexan/ethyl acetat, 5/1, v/v); 9-Hydroxyheterogorgiolid (CE4): Chất kết tinh dạng tinh thể hình kim, khơng màu; đ.n.c: 238-239oC; [α]D25 = -187,0o (c 0,15, CHCl3); Rf = 0,51 (TLC silica gel, n-hexan/EtOAc, 7/3, v/v); ESI-MS: m/z 277 [M+H]+ (C16H21O4); H-NMR (CDCl3, 500 MHz) 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz): Bảng 4.3 Isofraxidin hay 6,8-dimethoxy-7-hydroxycoumarin (CE5): Chất kết tinh dạng tinh thể hình kim, màu vàng nhạt; đ.n.c: 148-149oC; Rf = 0,44 (TLC silica gel, CH2Cl2/MeOH, 5/1, v/v); H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 3,94 (3H, s, 6-OCH3); 4,09 (3H, s, 8-OCH3); 6,28 (1H, d, J = 9,5 Hz, H-3); 6,16 (1H, s, OH); 6,66 (1H, s, H-5); 7,60 (1H, d, J = 9,5 Hz, H-4); 13 C-NMR (CDCl3, 125 MHz) δ (ppm): 56,54 (6-OCH3); 61,01 (8OCH3); 103,28 (C-5); 111,25 (C-4a); 113,54 (C-3); 143,1 (C-6); 142,51 (C-7); 134,6 (C-8); 143,79 (C-4); 144,64 (C-8a); 160,59 (C-2) Eleutherosid B1 hay Isofraxidin-7-O- -D-glucopyranosid (CE6): Chất kết tinh dạng chùm rẻ quạt, màu trắng; đ.n.c: 207-208oC; Rf = 0,32 (TLC silica gel, CH2Cl2/MeOH, 8/2, v/v); H-NMR (CD3OD, 500 MHz) δ (ppm): 3,24-3,81 (6H, m), 3,93 (3H, s, 6OCH3), 4,05 (3H, s, 8-OCH3), 5,22 (1H, d, J = 7,5 Hz, H-1’), 6,37 (1H, d, J = 9,5 Hz, H-3), 7,03 (1H, s, H-5), 7,92 (1H, d, J = 9,5 Hz, H-4); 13 C-NMR (CD3OD, 125 MHz) δ (ppm): 57,18 (6-OCH3); 62,50 (8OCH3); 62,54 (C-6’); 71,43 (C-4’); 75,73 (C-2’); 77,91 (C-3’); 78,56 (C-5’); 104,26 (C-1’); 106,23 (C-5); 115,81 (C-3); 116,73 (C-4a); 142,38 (C-8); 143,53 (C-7); 144,09 (C-8a); 145,84 (C-4); 151,52 (C6); 162,63 (C-2) Acid 3,4-dihydroxybenzoic (CE7): Chất rắn, màu vàng nhạt; đ.n.c: 198-200oC; Rf = 0,43 (TLC silica gel, CH2Cl2/MeOH, 20/1, v/v); H-NMR (CD3OD, 500 MHz) δ (ppm): 6,81-6,82 (d, J = 8,0 Hz , H5); 7,43 (1H, d, J = 2,5 Hz, H-2); 7,46 (1H, dd, J = 2,5, 8,0 Hz, H-6) 13 C-NMR (CD3OD, 125 MHz) δ (ppm): 115,8 (C-6); 117,7 (C-2); 123,1 (C-1); 123,9 (C-3), 146,1 (C-4); 151,5 (C-5); 170,2 (C-7) 3.2 Tách chiết, phân lập chất từ Mắc niễng bạc Bột khô Mắc niễng bạc (1,0 kg) Ngâm chiết với EtOAc Dịch chiết EtOAc Ngâm chiết với MeOH Dịch chiết MeOH Cất loại dung môi Cặn EtOAc EEA(53,29g) Bã Cất loại dung mơi Cặn MeOH ME (60,0 g) Bã Hình 3.2.1a Sơ đồ ngâm chiết Mắc niễng bạc 46,4 (C-19); 47,5 (C-9); 55,2 (C-5); 69,7 (C-28); 80,5 (C-3); 122,3 (C-12); 144,2 (C-13); 173,6 (C-1’) Spinasterol (EA5): chất rắn, màu trắng đ.n.c: 193-1950C;[α]D25=-2,2 (c 0,18, CHCl3); Rf = 0,636 (TLC, silica gel, n-hexan/ethyl acetat: 9/1, v/v); ESI-MS: m/z 412,69 [M+H]+ H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm): 0,55 (3H, s, CH3-18); 0,79 (3H, s, CH3-19); 0,81 (3H, t, J = 7,0 Hz, CH3-29); 0,83 (3H, d, J= 6,0 Hz, CH3-27); 0,85 (3H, d, J= 6,0 Hz, CH3-26); 1,03 (3H, d, J= 6,0 Hz, CH3-21); 1,09 (1H, m, H-1a); 1,18 (1H, m, H-28a); 1,23 (1H, m, H-12a); 1,26 (3H, m, H-4a, H-16a, H-17); 1,39 (3H, m, H-2a, H-5, H-15a); 1,42 (1H, m, H-28b); 1,48 (1H, m, H-11a); 1,52 (1H, m, H15b); 1,55 (2H, m, H-24, H-25); 1,58 (1H, m, H-11b); 1,65 (1H, m, H-9); 1,72 (1H, m, H-4); 1,75 (2H, m, H-6b, H-16b); 1,78 (1H, m, H-2b); 1,82 (2H, m, H-1b, H-14); 2,03 (2H, m, H-12b, H-20); 3,59 (1H, m, H-3); 5,03 (1H, dd, J= 9,0; 15,5 Hz; H-23); 5,16 (1H, br s, H-7); 5,16 (1H, dd, J= 9,0; 15,5 Hz; H-22) 13 C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm): 12,0 (C-18); 12,2 (C-29); 13,0 (C-19); 19,0 (C-27); 21,1 (C-26); 21,4 (C-21); 21,6 (C-11); 23,0 (C15); 25,4 (C-28); 28,5 (C-16); 29,6 (C-6); 31,5 (C-2); 31,9 (C-25); 34,2 (C-10); 37,2 (C-1); 38,0 (C-4); 39,5 (C-12); 40,3 (C-5); 40,8 (C20); 43,3 (C-13); 49,5 (C-9); 51,2 (C-24); 55,1 (C-14); 55,9 (C-17); 70,1 (C-3); 117,5 (C-7); 129,5 (C-23); 138,1 (C-22); 139,6 (C-8) 3.3 Tách chiết, phân lập chất từ vỏ Côm (Elaeocarpus griffithii) Bột khô vỏ Côm (1,44 kg) Ngâm chiết với EtOAc Dịch chiết EtOAc Ngâm chiết với MeOH Dịch chiết MeOH Cất loại Cặn EtOAc EA (52 g) dung môi Bã Cất loại dung môi Cặn MeOH ME (172,8 g) Bã Hình 3.3.1a Sơ đồ ngâm chiết vỏ Cơm 11 Hình 3.3.1b Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết ethyl acetat Cặn ME (172,0 g) CC, Silica gel CH2Cl2/MeOH; (100:0-0:100, v/v) ME1 (10,0 g) ME3-ME8 (30,0 g) ME2 (15,0 g) Sephadex: MeOH ME2.1 (5,5 g) ME2.2 (1,5 g) CC, Silica gel CH2Cl2/MeOH/HCOOH; (90/8/2, v/v/v) ME2.3 (2,5 g) CC, Silica gel CH2Cl2/MeOH; (9/1, v/v) EG1 (64 mg) EG6 (10 mg) Hình 3.3.1c Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết methanol 12 Dữ kiện phổ số vật lý hợp chất phân lập từ vỏ Côm (Elaeocarpus griffithii) Acid ellagic (EG1): Chất rắn, màu trắng đ.n.c: 300-301oC; Rf = 0,22 (TLC silica gel, MeOH/EtOAc/HCOOH: 88/10/2, v/v/v); ESI-MS: m/z 303 [M+H]+; IR (KBr): νmax (cm-1): 3064; 1713; 1618; 1581; 1441; 1333;1184; 1104 H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) (ppm): 7,45 (2H, s, H-5, H-5’) 13 C-NMR (125 MHz, DMSO-d6) (ppm): 107,6 (C-1; C-1’); 110,2 (C-5; C-5’); 112,3 (C-6; C-6’); 136,4 (C-3; C-3’); 139,6 (C-2; C-2’); 148,1 (C-4; C-4’); 159,1 (C-7; C-7’) 3,3’,4’-Tri-O-methylellagic acid 4-O-β-D-2”-O-acetylglucopyranoside (EG2): Chất rắn, màu trắng; Rf = 0,40 (TLC silica gel, + CH2Cl2/MeOH: 95/5, v/v); ESI-MS: m/z 571 [M+Na] H-NMR (DMSO-d 6, 500 MHz) δ (ppm): 2,10 (3H, s, H-8”); 3,36 (1H, m, H-5”); 3,39 (1H, m, H-4”); 3,55 (1H, d, J=5,0 Hz, H-6”a); 3,58 (1H, m, H-3”); 3,75 (1H, d, J=11,0 Hz, H-6”b); 3,91 (3H, s, 4’-OCH3); 3,97 (3H, s, 3’-OCH3); 3,99 (3H, s, 3OCH3); 4,92 (1H, t, J=8,5 Hz, H-2”); 5,369 (1H, d, J=8,5 Hz, H1”); 7,31 (1H, s, H-5’); 7,70 (1H, s, H-5) 13 C-NMR (DMSO-d6, 125 MHz) δ (ppm): 20,9 (-OCOCH3); 56,7 (4’OCH3); 60,4 (CH2-6”); 61,2 (3’-OCH3); 61,5 (3-OCH3); 69,6 (C-5”); 73,5 (C-3”); 73,7 (C-2”); 77,4 (C-4”); 98,9 (C-1”); 107,3 (C-5’); 111,9 (C-5 & C-1’); 112,1 (C-6’); 112,3 (C-1); 113,5 (C-6); 140,7 (C-2); 140,7 (C-2’); 140,9 (C-3’); 141,7 (C-3); 151,3 (C-4); 154,2 (C-4’); 157,6 (C-7’); 157,8 (C-7); 169,56 (C-7”) 3,3’-Di-O-metyl acid 4-O-α-L-rhamnoside-ellagic (EG3): Chất rắn, mầu trắng; đ.n.c: 186-187oC Rf = 0,30 (TLC silica gel, + CH2Cl2/MeOH: 9/1, v/v); ESI-MS: m/z 477 [M+H] ; H-NMR (DMSO-d 6, 500 MHz) δ (ppm): 1,14 (3H, d, J=6,0 Hz, CH3 -6”); 3,34 (1H, m, H-3”); 3,52 (1H, m, H-4”); 3,71 (1H, m, H-5”); 3,96 (1H, br s, H-2”); 4,05 (3H, s, 3’-OCH3); 4,06 (3H, s, 3-OCH3); 4,88 (1H, s, OH); 4,99 (1H, s, OH); 5,22 (1H, s, OH); 5,58 (1H, br s, H-1”); 7,52 (1H, s, H-5’); 7,78 (1H, s, H-5) 13 C-NMR (DMSO-d 6, 125 MHz) δ (ppm): 17,9 (CH3 -6”); 60,9 (3’-OCH3); 61,6 (3-OCH3 ); 70,0 (C-2”); 70,3 (C-4”); 70,4 (C5”); 71,5 (C-3”); 99,8 (C-1”); 110,9 (C-1’); 111,6 (C-5’); 111,7 (C-5); 111,9 (C-1); 112,6 (C-6’); 114,1 (C-6); 140,2 (C-3’); 13 141,0 (C-2); 141,5 (C-2’); 141,8 (C-3); 150,2 (C-4); 152,8 (C4’); 158,2 (C-7’); 158,4 (C-7) 3-O-Metyl acid 4-O-α-L-rhamnosid-ellagic (EG4): Chất rắn, màu trắng; Rf = 0,25 (TLC silica gel, CH2Cl2/(CH3)2CO/HCOOH: 63/35/2, v/v/v); ESI-MS: m/z 463 [M+H] +; H-NMR (DMSO-d 6, 500 MHz) δ (ppm): 1,14 (3H, d, J=5,5 Hz, H-6”); 3,37 (1H, m, H-3”); 3,54 (1H, m, H-4”); 3,85 (1H, m, H5”); 4,01 (1H, s, H-2”); 4,06 (3H, s, 3-OCH3); 4,94(1H, s, OH); 4,95 (1H, s, OH); 5,11 (1H, s, OH); 5,48 (1H, s, H-1”); 7,52 (1H, s, H-5’); 7,73 (1H, s, H-5) 13 C-NMR (DMSO-d 6, 125 MHz) δ (ppm): 17,8 (CH3 -6”); 60,9 (3-OCH3); 69,8 (C-2”); 69,9 (C-5”); 70,1 (C-3”); 71,8 (C-4”); 100,1 (C-1”); 106,8 (C-6’); 111,2 (C-6); 111,4 (C-5’); 111,6 (C5); 112,9 (C-1’); 114,2 (C-1); 136,1 (C-2’); 140,1 (C-2); 141,7 (C-4); 141,3 (C-3’); 146,4 (C-3); 152,6 (C-4’); 158,6 (C-7’); 158,6 (C-7) Octacosyl ferulat (EG5): Chất rắn, màu trắng; Rf = 0,3 (TLC silica gel, n-hxan/(CH3)2CO: 98/2, v/v); ESI-MS: m/z 584,8 [M-H]-; H-NMR (CDCl3 + CD3OD, 500 MHz) δ (ppm): 0,88 (3H, t, J = 7,0 Hz, CH3 -28’); 1,24 (48H, m, 24 x CH2); 1,43 (2H, m, CH2 27’); 1,71 (2H, m, CH2 -12); 3,92 (3H, s, OCH3); 4,19 (1H, t, J=7,0 Hz, OCH2 -1’); 6,29 (1H, d, J=16,0 Hz, H-8); 6,86 (1H, d, J=8,0 Hz, H-5); 7,05 (1H, dd, J=2,0; 8,0 Hz, H-6); 7,08 (1H, d, J=2,0 Hz, H-2); 7,61 (1H, d, J=16,0 Hz, H-7) 13 C-NMR (CDCl + CD3OD, 125 MHz) δ (ppm): 13,4 (CH3 28’); 22,2 (C-27’); 25,5 (C-13), 28,3 (C-2’); 28,8 (CH2); 28,9 (CH2); 29,1 (CH2); 29,1 (CH2); 29,2 (CH2) n; 31,5 (C-36); 55,3 (OCH3); 64,3 (C-1’); 109,9 (C-2); 114,4 (C-8); 114,9 (C-5); 122,6 (C-6); 126,1 (C-1); 144,9 (C-7); 147,4 (C-3); 148,5 (C-4); 167,8 (C-9) Acid Galic (EG6): Tinh thể hình kim, màu trắng; đ.n.c: 248-250oC; Rf = 0,5 (TLC, silica gel, n-hexan/EtOAc/HCOOH: 90/9/1, v/v/v) H-NMR (CD3OD): δ 7,08 (2H, s, H-2, H-6) 13 C-NMR/DEPT (CD3OD): δ 110,3 (C-2, C-6); 122,1 (C-1); 139,6 (C-3, C-5); 146,4 (C-4);170,5 (C-7) 14 β-Sitosterol (EG7): Chất rắn, màu trắng; Rf = 0,35 (TLC, silica gel, n-hexan/aceton: 9/1, v/v) H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm): 0,68 (3H, s, CH3-18); 0,81 (3H, d, J = 7,0 Hz, CH3-26); 0,83 (3H, d, J = 7,0 Hz, CH3-27); 0,85 (3H, t, J = 7,5 Hz, CH3-29); 0,92 (3H, d, J = 6,5 Hz, CH3-21); 1,01 (3H, s, CH319); 3,51 (1H, m, H-3); 5,35 (1H, d br, J = 5,0 Hz, H-6) 13 C-NMR (125,76 MHz, CDCl3) δ (ppm): 37,3 (C-1); 31,6 (C-2); 71,8 (C-3); 42,3 (C-4); 140,8 (C-5); 121,7 (C-6); 31,9 (C-7); 31,8 (C8); 50,0 (C-9); 36,6 (C-10); 21,1 (C-11); 39,8 (C-12); 42,3 (C-13); 56,7 (C-14); 24,3 (C-15); 28,3 (C-16); 56,0 (C-17); 11,9 (C-18); 19,4 (C-19); 36,2 (C-20); 18,8 (C-21); 34,0 (C-22); 26,1 (C-23); 29,5 (C25); 19,1 (C-26); 19,8 (C-27); 23,1 (C-28); 12,0 (C-29); 45,6 (C-24) 6-Hydroxy-1,12-oleanadien-3-on (EG8): Chất rắn, màu trắng; đ.n.c: 280oC Rf = 0,4 (TLC, silica gel, n-hexan/aceton: 95/5, v/v); [α]D25 = + 168,18o (c 0,45; MeOH); ESI-MS: m/z 887,4 [2M+H]+; HR-ESI-MS: m/z 439,3594 [M+H]+ (Theo tính toán: m/z= 439,3576 với CTPT C30H48O2) H-NMR (500 MHz, CDCl3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) Xem bảng 4.9 3.4 THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC Hoạt tính gây độc tế bào cặn chiết, phân đoạn nhỏ tương ứng số hợp chất phân lập từ Mắc niễng bạc (Eberhardtia aurata), Sói đứng (Chloranthus erectus) vỏ Côm (Elaeocarpus griffithii), hoạt tính kháng viêm cặn chiết EtOH Sói đứng theo phương pháp gây viêm cục hoạt chất EPP, gây viêm cục formalin 1% phương pháp xác định khả kháng viêm theo đường uống, độc tính cấp cặn chiết EtOH Sói đứng thử nghiệm Viện Cơng nghệ Sinh học-VAST Kết thử hoạt tính gây độc tế bào, hoạt tính kháng viêm thử độc tính trình bày phần 4.4 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Các hợp chất phân lập từ Sói đứng Từ cặn chiết n-hexan ethyl acetat Sói đứng, sau tiến hành kết tinh, sắc kí cột nhiều lần cột Sephadex silica gel thu hợp chất CE1-CE7 Các hợp chất bao gồm, hợp chất khung sesquiterpen (CE1, CE3, CE4), hợp chất thuộc lớp chất 15 cumarin (CE5-CE6), hợp chất sterol (CE2) hợp chất phenolic, dẫn chất acid benzoic (CE7) Hình 4.1 Các hợp chất phân lập từ Sói đứng Bảng 4.1 Số liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR hợp chất CE1 C C 25,5 7,3 29,0 91,6 44,4 27,0 10 11 12 13 14 15 127,0 166,2 202,0 56,7 139,2 (C) 170,1 (C) 16,4 (CH3) 15,6 (CH3) 31,3 (CH3) H (m, J, Hz) 1,76 (m) 0,74 (m) 0,79 (m) 1,67 (m) 2,61 dd (6,0; 12,7) 2,03 t (12,7) (Hax ) 2,46 dd (6,0; 12,7) (Heq) DEPT CH CH2 HMBC (1H13C) H1/C10 CH C CH CH2 H3/C4 C C CH C C C CH3 CH3 CH3 9,60 (s) 1,99 (s) 1,21 (s) 1,54 (s) 16 H5/C4, C7, C10 H6/C7, C8, C11 H9/C10, C14 H13/C11, C12 H14/C1, C10 H15/C3, C4, C5 Bảng 4.2 Số liệu phổ 1H-NMR; 13C-NMR hợp chất CE2 C 10 11 12 13 14 15 C# 23,9 16,8 23,0 150,0 50,6 21,3 162,3 87,9 54,4 41,1 129,1 170,4 9,0 16,9 106,8 H (m, J , Hz) 1,46 (m) 0,92 (m), 0,83 (m) 2,82 (m) C 23,9 16,4 24,2 151,2 48,2 24,2 160,5 91,1 53,3 41,7 129,4 172,3 8,9 19,9 106,8 3,06 (m) 2,32 (m), 2,10 (m) 3,77 (m) 1,78 (s) 0,54 (s) 5,09 (m), 4,81 (m) Bảng 4.3 Số liệu phổ 1H-NMR; 13C-NMR hợp chất CE4 C C C C 22,83 79,62 15,71 10 43,82 23,68 152,23 51,82 3,32 (m) 22,51 2,29 (m) 11 12 13 14 128,03 171,08 8,48 20,16 156,38 15 106,06 105,87 16OMe OH-9 H (m, J in Hz) 2,11 (br, dt, 3,9, 8,7) 0,67 (dt, 3,9; 5,3) 0,82 (dt, 5,3; 8,7) 1,96 (m) 17 50,35 H (m, J in Hz) 3,83 (d, 7,4) 1,87 (t, 1,5) 0,51 (s) 4,70 (br, t); 5,01(m) 3,22 (s) 3,41 (d, 7,4) C C 158,6 123,7 205,2 45,5 53,7 68,5 40,5 10 11 39,9 42,5 38,9 23,5 12 13 14 15 121,3 145,0 42,8 26,1 16 26,9 17 18 19 32,6 47,5 46,6 20 21 31,1 34,7 22 37,1 23 24 25 26 27 28 29 30 27,1 23,8 18,9 19,3 26,9 28,3 23,9 33,3 Bảng 4.9 Dữ liệu phổ NMR hợp chất EG8 H (m, J , Hz) DEPT HMBC (1H13C) 6,96, d (10,0) CH H1/C2, C3, C10 5,76, d (10,0) CH H2/C1, C3 C C 1,63, overlap CH 4,57, br s CH H6/C5, C7, C8 1,61, m CH2 1,83, br dd (3,7; 14,0) C 1,88, dd (6,0; 12,0) CH C 2,14, m CH2 2,19, m 5,29, m CH C C 1,01, m CH2 1,86, m 0,84, m CH2 2,0, br d (4,0; 13,0) C 2,0, dd (4,0; 13,2) CH 1,02, m CH2 1,67 t (13,5) C 1,11, m CH2 1,32 dt (3,5; 13,5) 1,23, m CH2 1,43, m 1,24, s CH3 H23/C3, C4, C5 1,42, s CH3 H24/C3, C4, C5 1,54, s CH3 H25/C1, C5, C9, C10 1,37, s CH3 H26/C7, C8, C9 1,12, s CH3 H27/C8, C13, C14, C15 0,85, s CH3 H28/C16, C17, C18, C22 0,88, s CH3 H29/C19, C20 0,87, s CH3 H30/C20, C21 18 4.2 Các hợp chất phân lập từ Mắc niễng bạc Từ cặn dịch chiết EtOAc Mắc niễng bạc, sau tiến hành kết tinh, sắc kí cột nhiều lần cột silica gel thu hợp chất EA1-EA5 Như vậy, từ dịch chiết Mắc niễng bạc, hợp chất phân lập xác định cấu trúc hóa học Các hợp chất bao gồm, hợp chất khung taraxeren (EA1-EA3), hợp chất khung olean (EA4) hợp chất sterol (EA5) Hình 4.2 Cấu trúc hợp chất phân lập từ Mắc niễng bạc 4.3 Cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ vỏ Côm Như vậy, từ dịch chiết vỏ Côm, hợp chất phân lập xác định cấu trúc hóa học có chất (EG8) Có thể thấy hợp chất vỏ chủ yếu acid ellagic (EG1) dẫn xuất glycosid (EG2-EG4) Ngồi cịn có có mặt acid gallic (EG6), β-sitosterol (EG7) octacosyl ferulat (EG5) 19 Hình 4.3.9 Các hợp chất phân lập từ vỏ Côm (Elaeocarpus griffithii (Wight) A Gray, Elaeocarpaceae) 4.4 Hoạt tính sinh học cặn chiết chất phân lập 4.4.1 Hoạt tính gây độc tế bào khả kháng viên dịch chiết EtOH (SD-2012) từ Sói đứng Bảng 4.10 Hoạt tính độc tế bào dịch chiết EtOH (SD-2012) từ Sói đứng IC50 (μg/ml) STT Chất thử KB SD-2012 CE1 CE4 Elipticine 54,77 > 100 > 100 1,009 MCF-7 44,09 > 100 > 100 0,927 20 LU-1 45,80 > 100 > 100 0,992 Hep-G2 46,66 > 100 > 100 1,002 Hợp chất CE1 CE4 khơng thể hoạt tính dòng tế bào ung thư thử nghiệm (KB, MCF-7, LU-1 Hep-G2) với giá trị IC50 >100 μg/ml Bảng 4.11 Khả ức chế viêm cục mẫu SD-2012 Trọng lượng tai (mg) % ức chế STT mẫu khối viêm so Thí nghiệm Đối chứng với đối chứng 42,50 ± 0,80 43,20 ± 0,10 11,73 SD-2012 Dexamethason 39,33 ± 0,25 43,90 ± 0,46 68,51 Đối chứng âm 37,23 ± 0,90 Bảng 4.12 Kết khả kháng viêm hoạt chất theo đường uống mẫu SD-2012 TT Tên mẫu Trọng lượng chân (mg) % ức chế Tiêm Không tiêm so với đối chứng formalin formalin 159,8 ± 6,87 128,6 ± 5,18 55,56 SD-2012 Dexamethason 158,4 ± 7,44 132,6 ± 6,31 63,25 Đối chứng âm 201,4 ± 6,23 131,2 ± 5,63 0,00 Bảng 4.13 Kết xác định khả kháng viêm SD-2012 theo đường uống TT Tên mẫu Trọng lượng chân (mg) % ức chế Tiêm Không tiêm so với đối chứng formalin formalin SD-2012 154,3 ± 5,86 126,5 ± 3,58 60,40 g/kg SD-2012 159,8 ± 6,87 128,6 ± 5,18 55,56 g/kg SD-2012 196,7 ± 7,32 132,1 ± 4,95 17.92 0,5 g/kg SD-2012 197,0 ±4,44 129,4 ± 6,76 2,64 0,25 g/kg ED50 (mg/kgP) Dexamethason Đối chứng âm 946,8 mg/kg thể trọng 158,4 ± 7,44 132,6 ± 6,31 201,4 ± 6,23 131,2 ± 5,63 21 63,25 0,00 4.4.2 Hoạt tính gây độc tế bào cặn chiết ethyl axetat (EEA) chất phân lập từ Mắc niễng bạc Cặn dịch chiết ethyl acetat (EEA) chất phân lập từ cặn dịch chiết ethyl acetat EEA (EA1), (EA2), (EA3), (EA4) (EA5) Mắc niễng bạc thử hoạt tính gây độc tế bào dịng tế bào ung thư: KB, MCF-7, LU-1, Hep-G2 Bảng 14 Hoạt tính độc tế bào chất phân lập từ Mắc niễng bạc IC50 (μg/ml) STT Chất thử KB MCF-7 LU-1 Hep G2 80,52 33,80 74,99 91,17 EEA >100 >100 >100 >100 EA1 >100 >100 >100 >100 EA2 >100 >100 >100 >100 EA3 >100 >100 >100 >100 EA4 >100 >100 >100 >100 EA5 Elipticine 0,39 0,46 0,52 0,47 4.4.3 Hoạt tính gây độc tế bào cặn chiết ethyl acetat chất phân lập từ vỏ Côm (Elaeocarpus griffithii, Elaeocarpaceae) Cặn dịch chiết EtOAc chất phân lập từ cặn EtOAc vỏ Côm (EG1; EG2; EG3; EG4; EG5; EG6; EG7) thử độc tế bào với 02 dòng tế bào ung thư đặc trưng lựa chọn KB MCF-7 Hợp chất EG8 thử độc tế bào với dòng tế bào ung thư đặc trưng lựa chọn: KB; MCF-7; LU-1 Hep-G2 Bảng 15 Hoạt tính độc tế bào chất phân lập từ vỏ Côm IC50 (μg/ml) STT Chất thử KB MCF-7 LU-1 Hep G2 Cặn chiết EtOAc < 1,0 >100 >100 EG1 EG2 7,04 24,8 >100 EG3 28,3 >100 >100 EG4 >100 >100 EG5 >100 >100 EG6 >100 >100 EG7 EG8 57,27 49,88 45,99 62,33 10 Elipticine 0,31 0,53 0,52 0,47 (-): Không thử 22 Kết thu cho thấy hợp chất EG2 có hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư KB MCF-7 với giá trị IC50 7,04 24,8 μg/ml Ngoài ra, hợp chất EG3 thể hoạt tính ức chế chọn lọc phát triển tế bào ung thư KB với giá trị IC50 28,3 μg/ml Các hợp chất EG1, EG4, EG5, EG6 EG7 hoạt tính dịng tế bào ung thư thử nghiệm (KB MCF-7) với giá trị IC50 >100 μg/ml Hợp chất EG8 có hoạt tính ức chế dòng tế bào KB, MCF-7, LU-1 Hep-G2 với giá trị IC50 57,27; 49,88; 45,99 62,33 μg/ml Như vậy, hợp chất phân lập từ cặn chiết EtOAc vỏ Côm có hoạt tính gây độc tế bào ung thư yếu nhiều so với kết thu cặn tổng ban đầu Điều giải thích hợp chất có hoạt tính mạnh có hàm lượng thấp, nên chưa phân lập chất bị phân hủy trình tinh chế KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Về thành phần hóa học 1.1 Lá Sói đứng (Chloranthus erectus (Buch.-Ham.) Verdcourt, Chloranthaceae) nghiên cứu hóa học, phân lập xác định cấu trúc hợp chất là: chloranerectuslacton V (CE1), chloranthalacton B (CE2), -sitosterol (CE3), 9-hydroxyheterogorgiolid (CE4), isofraxidin (CE5), eleutherosid B1 (CE6) acid 3,4dihydroxybenzoic (CE7) Trong hợp chất Chloranerectuslactone V (CE1) hợp chất 1.2 Từ Mắc niễng bạc (Eberhardtia aurata (Pierre ex Dubard) Lecomte, Sapotaceae), phân lập xác định cấu hợp chất gồm: β-taraxerol (EA1), taraxeron (EA2), taraxeryl acetat (EA3), 3β-octacosanoyloxy-12-oleanen-28-ol (EA4) spinasterol (EA5) 1.3 Từ vỏ Côm (Elaeocarpus griffithii (Wight) A Gray, Elaeocarpaceae), phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất là: acid ellagic (EG1), 3,3’,4’-tri-O-methylellagic acid 4O-β-D-2”-O-acetylglucopyranoside (EG2), 3,3’-di-O-metyl acid 4-O-αrhamnosid-ellagic (EG3), 3-O-metyl acid 4-O-α-rhamnosid-ellagic (EG4), octacosyl ferulat (EG5), acid gallic (EG6), β-sitosterol (EG7) 6-hydroxy-1,12-oleanadien-3-on (EG8) Trong hợp chất 6-hydroxy-1,12-oleanadien-3-on (EG8) xác định hợp chất Về nghiên cứu hoạt tính sinh học 23 Đã tiến hành thử hoạt tính kháng viêm; hoạt tính gây độc tế bào cặn chiết chất phân lập được: Dịch chiết EtOH Sói đứng thể hoạt tính gây độc tế bào số dịng tế bào ung thư thử nghiệm Ngồi ra, dịch chiết cịn thể hoạt tính kháng viêm theo đường uống Hai hợp chất CE1 CE4 phân lập từ Sói đứng khơng thể hoạt tính gây độc tế bào khảo sát dòng tế bào ung thư thử nghiệm Các hợp chất phân lập từ Mắc niễng bạc khơng thể hoạt tính gây độc tế bào khảo sát dòng tế bào ung thư thử nghiệm, dịch chiết EtOAc thể hoạt tính Hợp chất EG2 phân lập từ vỏ Cơm có hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư KB MCF-7 với giá trị IC50 7,04 24,8 μg/ml Hợp chất EG8 phân lập từ vỏ Cơm có hoạt tính ức chế dịng tế bào ung thư KB, MCF-7, LU-1 Hep-G2 với giá trị IC50 57,27; 49,88; 45,99 62,33 μg/ml Ngoài ra, hợp chất EG3 phân lập từ vỏ Côm thể hoạt tính ức chế chọn lọc phát triển tế bào ung thư KB với giá trị IC50 28,3 μg/ml Kết luận chung: Các kết Luận án làm rõ mục tiêu đề luận án xác định thành phần hóa học lồi thực vật Việt Nam: Sói đứng, Mắc niễng bạc, vỏ Cơm khảo sát hoạt tính sinh học chúng Trong số 20 hợp chất phân lập xác định cấu trúc tìm hợp chất mới, hợp chất thể hoạt tính gây độc tế bào Dịch chiết EtOH Sói đứng thể hoạt tính gây độc tế bào số dịng tế bào ung thư thử nghiệm Ngoài ra, dịch chiết cịn thể hoạt tính kháng viêm theo đường uống KIẾN NGHỊ: - Cần khảo sát hoạt tính hợp chất đích sinh học khác nhằm tìm kiếm khả khai thác hợp chất - Thực tế, hợp chất phân lập từ vỏ Côm Mắc niễng bạc thể hoạt tính thấp nhiều so với cặn chiết Do vậy, cần tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học chi tiết để hiểu rõ thành phần tạo hoạt tính - Dịch chiết EtOH Sói đứng thể hoạt tính gây độc tế bào số dòng tế bào ung thư thử nghiệm Ngồi ra, dịch chiết cịn thể hoạt tính kháng viêm theo đường uống Cần nghiên cứu sâu thêm để hướng đến khả ứng dụng trực tiếp dịch chiết 24 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN [1] Nguyễn Văn Thơng, Trần Thu Trang, Trịnh Thị Thanh Vân, Đồn Thị Mai Hương, Nguyễn Văn Hùng, Marc Litaudon, Trần Thu Hương, Phạm Văn Cường (2012), Các dẫn xuất axit Ellagic từ vỏ Cơm (Elaeocarpus griffithii-Elaeocarpaceae), Tạp chí Hóa học, T 50(4A) tr 481-483 [2] Trần Thu Hương, Nguyễn Văn Thông, Lê Huyền Trâm,Trần Thị Minh, Trần Thượng Quảng, Phạm Văn Cường (2012), Nghiên cứu thành phần hóa học Sói đứng (Chloranthus erectus (Buch.-Ham) Vercourt), Tạp chí Hóa học 50(4A), tr 78-80 [3] Tran Thu Huong, Nguyen Van Thong, Tran Thi Minh, Le Huyen Tram, Nguyen Tuan Anh, Ho Duc Cuong, Pham Van Cuong and Diep V Ca (2014), chloranerectuslactone V, a New Sesquiterpene from Chloranthus erectus, Letters in Organic Chemistry, 11, pp 639-642 [4] Nguyen Van Thong, Pham Van Cuong, Doan Thi Mai Huong, Truong Bich Ngan, Tran Thu Huong, Marc Litaudon, Chau Van Minh (2014), Chemical Consituents of the Leaves of Eberhardtia aurata (Sapotaceae), Malaysian Journal of Chemistry, Vol 16, pp 32-37 [5] Nguyễn Văn Thông, Trần Thị Minh, Lê Huyền Trâm, Trần Thượng Quảng, Đỗ Thị Thảo, Phạm Văn Cường, Trần Thu Hương (2014), Thành phần hóa học số hoạt tính sinh học sói đứng (Chloranthus erectus (Buch - ham) Verdcourt), Tạp chí Khoa học Cơng nghệ 52(5A) tr 27-34 .. . 6-hydroxy-1,12-oleanadien -3- on (EG8) xác định hợp chất 3. 1.2 Về hoạt tính sinh học: Các cặn chiết chất phân lập khảo sát hoạt tính sinh học Theo đó, hợp chất phân lập từ Mắc niễng bạc Cơm khảo sát hoạt tính gây .. . luận án 3. 1 Ý nghĩa khoa học Luận án đóng góp hiểu biết thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi thực vật: Sói đứng, Mắc niễng bạc vỏ Côm Việt Nam Ứng dụng phương pháp vật lý đại nghiên cứu cấu .. . erectus) Hình 3. 1.1 Sơ đồ ngâm chiết Sói đứng Hình 3. 1.2 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết n-hexan Sói đứng Hình 3. 1 .3 Sơ đồ phân lập hợp chất từ dịch chiết ethyl acetat Sói đứng Bột khơ Sói đứng (1,0