Nghiên cứu này góp phần làm rõ thành phần hóa học của cây Thường xuân nhằm sử dụng làm thuốc trong lĩnh vực dược liệu và y học cổ truyền. Lá Thường xuân thu hái vào tháng 12 năm 2019 tại Lạng Sơn, được so sánh đặc điểm hình thái với các tài liệu mô tả thực vật. Để hiểu rõ hơn mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết của bài viết này.
Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 29 T ng xuân (Hedera helix L.) Nghiên c u thành ph n hóa h c c N T T H * , H H Mỹ N K N T T * nguyenhiend10242@gmail.com Tóm t t Ở Vi t Nam, T ng xuân (Hedera helix L.) ch y c dùng làm c nh u nghiên c u v thành ph n hóa h c, tác d ư ng d ng làm thuốc chữa b nh Nghiên c u góp ph n làm rõ thành ph n hóa h c c a T ng xuân nh m s d ng làm thuố c li u y h c c truy n Lá T ng xuân iL S c so sánh m hình thái với tài li u mô t th c v L c làm s bóng râm; kg kh c chi t xu t với c n 70 % cô gi c 30 g cao c n B t s c kí c t nhanh phân tách cao c P n có ti c tinh ch phân l p qua c o Cn th c p ph n He-2 (0,15 g – Hederacoside C) He-3 (0,45 g – Rutin) Hederacoside C có tác d m, gi m ho, gi qu R ® 2021 Journal of Science and Technology - NTTU 1M u Vi t Nam n m vùng khí h u nhi ới gió mùa nên có h th c v c bi t ph i k n nhóm tài nguyên thuốc Trong h th c v T ng xuân (Hedera helix L.) thu c h c nhà khoa h c th giới ch ng minh có nhi u tác d c lí u tr b nh v hô h p [1], nhi m khu n [2 ng [3], viêm khớp [4], tác d ng b o v gan [5 … c phát tri n thành thuố u tr b ng hô h p c p m n tính (Prospan) Tuy v y, Vi N T ng xuân ch y c dùng làm c u nghiên c c công bố v thành ph n hóa h c, tác d c lí , ng d ng làm thuốc chữa b nh Vì v y, vi c phân l p m t số h p ch T ng xuân c n thi làm sáng tỏ thành thành ph n hóa h c làm cho cơng tác tiêu chu n hóa nguyên li m, góp ph n nâng cao ch ng thuốc s n xu t t c li u N Nh n 08.12.2020 c t 25.03.2021 Cơng bố 09.04.2021 T khóa c T Hedera helix, Hederacoside C, Rutin N Lá T ư t iL S c li c so sánh m hình thái với tài li u mô t th c v t [6] S c làm s o qu P ư c li c ng m ki t với c n 70 % phịng Cơ thu h i dung mơi áp su t gi cao lỏng nhi c T cao c n 70 % với thu t s c kí c t nhanh phân n C t s c kí b ng th ng kính c t lớn (8 cm), s d ng silicagel cỡ h t trung bình (40 – 63 μ ng silicagel dùng n p c t g p 10 l ng m u Phân c ch n l c d a s c kí lớp mỏ K Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 30 Ch t phân l p t c c ki m tra qua s c kí lớp mỏng Ch c ch m ki tinh t b n mỏng khác khai tri n với h dung môi phân c c khác - Etyl acetat – Methanol – Nước (100:17:13) - Chloroform – Methanol – Nước (55:35:10; lớ ưới) - n-Butanol – Methanol (50:12) Ki m tra s UV UV nhúng với thuốc th phù h p Ch t tinh c phân tích b , bao g m Ph UV, ph khố MS NMR ối chi u với li u v ph UV, MS, NMR c a ch công bố tài li u - Ph UV c kí lỏng hi I f L ; u dò 1260 DAD VL - Ph MS ối ph (Micromass Quattro microTM API – Water) - Ph c ng t h NMR máy BRUKER – AV – 500, t i Vi n Hàn lâm Khoa h c Công ngh Vi t Nam, Hà N i M c hòa tan dung môi phù h p với TMS ch t chu n n i Ph 1H-NMR 500 MHz, ph 13C-NMR c MHz d ch chuy n hóa h c tính theo thang ppm với chu n tín hi u c TMS δTMS = Các h ng số ghép (J) tính b ng Hertz (Hz) K t qu bàn lu n T T ư c ng m ki t với c n 70 % cô gi c 30 g cao c n Cao c c ki m tra b ng SKLM với h dung môi Chloroform – Methanol – Nước (55:35:10; lớ ưới) P c phân tách thành phân t s c kí c t nhanh với thơng số n sau - C t s c kí th y tinh (7 x 50) ng kính x chi u ưới xốp G–3, r a s ch, tráng c n, s y khơ -P t trung bình (40 – 63) µm -P ng h dung mơi Chloroform – Methanol với phân c n t (100: n (74:26) Cao c Đại học Nguyễn Tất Thành - M u 30 g cao c c ho t hóa với silicagel - Th tích h ng 500 mL - Ki m tra g c ki m tra b ng SKLM khai tri n với h n Chloroform – Methanol – Nước (55:35:10; lớ ưới), phát hi n b ng UV 254 nm, UV 365 nm thuốc th VS G p d ch h ng có s nhau, cô ưới áp su t gi nh khố ng Hình S K n c t nhanh n, s c kí c c6 n khác K t qu c trình bày Hình Nh n xét số n có thành ph n, v t tách rõ ràng nên c l a ch ti p t c phân tách c o C-18 P ữ í - thơng số - C t s c kí th y tinh (3,5 x 50) ng kính x chi ưới xốp G-3, r a s ch, tráng c n, s y khô -P g Silia BondR C18 (40 – 63) μ -P ng h dung môi MeOH – H2O vớ phân c n t (2:98) n (10:90) -M u n - Th tích h n 100 mL - Ki m tra g c ki m tra b ng SKLM khai tri n với h dung môi Chloroform - Methanol - Nước (55:35:10; lớ ưới), phát hi n v t b ng UV 254 nm UV 365 nm thuốc th VS G p d ch h ng có s ưới áp su t gi nh khố ng Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 Hình S K T c c kí c n khác K t qu 31 o C- n5 b ng UV 254 nm, UV 365 nm với thuốc th VS, ti n hành l p l i c t Sephadex nữ u ki n G n có s nhau, ưới áp su t gi nh khố ng K T S LH – 20 thu o n khác K t qu c trình bày Hình P n 5.2.3 h có m t v t với thuốc th VS ư ng MeOH tối thi u, l l nh cho k t tinh L c r a b ng MeOH l nh, thu c tinh th hình kim, màu vàng Ki m tra SKLM với h dung mơi cho th y ch có v t nh t tên He-3 c4 c trình bày Hình -P n 5.2 (1,3 g) có ch t ti cs d phân l p c t Sephadex LH-20 -P n 5.3 (0,86 g) h u có m t v t với thuốc th VS ư ng MeOH tối thi u, l l nh cho k t tinh L c r a b ng MeOH l cb nh hình màu tr ng Ki m tra SKLM với h dung mơi cho th y ch có v t nh t tên He-2 (0,15 g) 3.2.3 Phân P S LH – ố - C t s c kí c t th ng kính x chi ưới xốp G-3, r a s ch, tráng c n, s y khô -P S LH – 20 (pharmacia) -P ng MeOH 100 % - M u 1,3 g - Th tích h n mL - Ki nc c ki m tra b ng SKLM khai tri n với h dung môi Chloroform Methanol - Nước (55:35:10; lớ ưới), phát hi n v t Hình S n t c t Sephadex K Ki m tra tinh t He-2, He-3 b ng SKLM với h phân c c khác - Chloroform – Methanol – Nước (55:35:10; lớ ưới) - Etyl acetat – Methanol – Nước (100:17:13) - n-Butanol – Methanol (50:12) Ti n hành SKLM với h dung môi khác nhau, phát hi n b ng UV 254 nm, UV 365 nm, thuốc th VS 3.3.1 -2 Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 32 Hình SKLM ki Nhận xét He-2 không t t quang UV 254, không phát quang UV 365 cho màu tím với thuốc th VS V t c a He-2 b n mỏng g n không tinh t c a He-2 xu t hi n v tinh t 3.3.2 -3 k t lu n He-2 ch t Hình SKLM ki m tra tinh t He-3 ận He-3 t t quang UV 254, UV 365 cho màu vàng với thuốc th VS V t c a He-3 b n mỏng g n không xu t hi n v b k t lu n He-3 ch t tinh t 3.4 X H H -3 3.4.1 -2 He- c phân l p t cao c n c T He-2 c d ng b nh hình, màu tr ng, Đại học Nguyễn Tất Thành He-2 không t t quang UV 254, không phát quang UV 365 cho màu tím với thuốc th vanilin-sulfuric (VS) Phổ MS Ph (-) ESI-MS c a He-2 cho phân m nh m/z = 219,80 [M – H]- cho phép nh nh khố ng phân t M = 220 Da, công th c phân t C59H96O26 Ω = 12) Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 33 Hình Ph MS c a He-2 Phổ NMR Quan sát ph 13 C-NMR xu t hi n 59 carbon, u c a khung aglycon saponin triterpenoid Các tín hi u ph 13C-NMR c a khung aglycon bao g m - nhóm -CH3- (13,8; 16; 17,4; 25,9; 33; 23,6) - 10 nhóm –CH2- (38,9; 26; 18; 32,6 23.7; 28,2; 23,2; 46,1; 33,8; 32,4; 65,1) - nhóm –CH- (81; 47,5; 48,0; 122,8; 41,5) - Cacbon –CIV- (43,3; 39,8; 37,6; 144;42; 46.9; 30,6) với m t COOH (δC 176,5) Tín hi u 23-H δH 4,28; 3,72), 3-H δH 4,24) vùng ng th u car ng cho th y s xu t hi n c a nhóm th –OR C-23 C-3 Trên ph 1H-NMR xu t hi n tín hi u c a proton olefin 13 12-H (δH 5,39 C-NMR xu t hi n tín hi u CδC 122,8) CδC 144) g i ý v trí c a liên k i C-12/C-13, ngồi cịn tín hi u δC 176,5 cho th y nhóm acid cơng th c K t h p với li u ph tài li u tham kh y khung aglycon Hederagenin B ng Dữ li u ph 13C-NMR 1H-NMR c a He-2 Hederacosid C He-2 (pyridin-d5, 500 MHz) C DEPT δc(ppm) δH (số H b i, J= Hz) ppm -CH238,9 1,50 (1H, d; 1,5); 1,03 (1H, m) -CH226,0 2,21 (1H, m); 1,97 (1H, m) >CH81,0 4,23 (1H, m) CIV 43,3 >CH47,5 1,69 (1H, m) -CH218,0 1,64 (2H, m) -CH232,6 1,57 (1H, m); 1,31 (1H, m) CIV 39,8 -CH248,0 1,69 (1H, m) 10 CIV 36,7 11 -CH223,7 1,91 (2H,m) 12 >CH122,8 5,36 (1H, s) 13 CIV 144,0 14 CIV 42,0 15 -CH228,2 2,21 (1H, m); 1,07 (1H, m) 16 -CH223,2 1,86 (2H, m) Hederacosid C (pyridin-d5, 600 MHz) [7] δc(ppm) δH (số H b i, J= Hz) ppm 38,89 1,54; 1,02 26,07 2,18; 2,01 80,91 4,24 43,36 47,56 1,69 18,05 1,66; 1,40 32,66 1,56; 1,30 39,77 48,05 1,73 36,76 23,72 1,90 122,73 5,39 143,96 42,00 28,18 2,26; 1,08 23,21 2,02; 1,87 Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 34 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Ara – 1' Ara – 2' Ara – 3' Ara – 4' Ara – 5' Glu – 1'' Glu – 2'' Glu – 3'' Glu – 4'' Glu – 5'' Glu – 6'' Glu – 1''' Glu – 2''' Glu – 3''' Glu – 4''' Glu - 5''' Glu - 6''' Rham – 1'''' Rham – 2'''' Rham – 3'''' Rham – 4'''' Rham – 5'''' Rham – 6'''' Rham - 1''''' Rham - 2''''' Rham - 3''''' Rham - 4''''' Rham - 5''''' Rham - 6''''' CIV >CH-CH2CIV -CH2-CH2-CH2-CH3 -CH3 -CH3 -CH3 CIV -CH3 -CH3 -O-CHO -O-CH -O-CH -O-CH -O-CH -O-CHO -O-CH -O-CH -O-CH -O-CH -O-CH2 -O-CHO -O-CH -O-CH -O-CH -O-CH -O-CH2 -O-CHO -O-CH -O-CH -O-CH -O-CH -CH3 -O-CHO -O-CH -O-CH -O-CH -O-CH -CH3 Đại học Nguyễn Tất Thành 46,9 41,5 46,1 30,6 33,8 32,4 65,1 13,8 16,0 17,4 25,9 176,5 33,0 23,6 104,0 75,7 74,0 69,0 63,8 95,5 78,3 73,6 70,5 77,8 68,8 104,5 75,0 76,2 78,3 76,9 61,1 101,5 72,0 72,3 73,8 69,6 18,4 102,6 72,3 72,4 73,7 70,2 18,3 3,12 (1H, m) 1,69 (1H, m); 1,16 (1H, m) 1,27 (1H, m); 1,07 (1H, m) 1,81 (1H, m); 1,69 (1H, m) 3,71 (2H, m) 1,00 (3H, s) 0,82 (3H, s) 1,07 (3H, s) 1,13 (3H, s) 0,83 (3H, s) 0,92 (3H, s) 5,10 (1H, d; 6) 4,57 (1H, m) 4,13 (1H, m) 4,18 (1H, m) 4,16 (1H, m) 7,19 (1H, m) 4,09 (1H, m) 4,30 (1H, m) 4,09 (1H, m) 4,63 (1H, m); 4,32 (1H, m) 4,93 (1H, d; 8) 3,88 (1H, m) 4,13 (1H, m) 3,67 (1H, m) 4,18 (1H, m); 4,07 (1H, m) 6,17 (1H, s) 4,66 (1H, m) 4,28 (1H, m) 4,66 (1H, m) 1,64 (1H, m) 5,75 (1H, s) 4,66 (1H, m) 4,52 (1H,m) 4,93 (1H, d; 8) 46,90 41,53 46,04 30,59 33,85 32,40 65,39 13,81 16,06 17,43 25,93 176,54 32,96 23,56 104,13 75,67 74,43 69,10 63,86 95,47 78,54 73,73 70,66 77,88 69,03 104,63 75,16 76,37 78,13 76,99 61,14 101,49 72,18 72,41 73,96 69,58 18,40 102,57 72,41 72,60 73,84 70,19 18,40 3,13 1,69; 1,18 1,26; 1,08 1,85; 1,69 4,28; 3,72 1,08 0,86 1,12 1,17 0,87 0,98 5,12 4,56 4,13 4,19 4,15; 3,72 6,22 7,21 4,12 4,30 4,09 4,64; 4,32 4,98 3,94 4,13 4,38 3,65 4,18; 4,07 6,22 4,73 4,68 4,29 4,68 1,63 5,84 4,68 4,54 4,33 4,95 1,70 Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 35 K bàn lu n 4.1 K t qu T 30 g cao c n 70 % vớ P Hình H Trong vùng (60 - 80) ppm có 22 tín hi u với tín hi δ hi δ ; i ý c u trúc O-glycosid với ư ng hexose Qua bi n gi i t ph NMR, c u trúc c a He-2 c gi nh Hederacosid C (hederagenin 3-O-L-rhamnopyranosyl-(12)-O--L-arabinopyranoside 28-O--L-rhamnopyranosyl-(14)-O- -D-glucopyranosyl-(16)-O- -Du c xác nh n l n nữ ối chi u với tài li u tham kh c công bố ướ ng Hình H H -3 Hình R He- c phân l p t cao c n c T Heư c d ng b He-3 t t quang UV 254, UV 365 cho màu vàng với thuốc th vanilin-sulfuric (VS) Ch m s c kí so sánh He-3 với Rutin chu n cho k t qu trùng khớ H K t lu H R H t s c kí c t nhanh n ti p t c n c phân l p qua c o CT thu t k c ch t He-2 (0,15 g) P c phân l p c t Sephadex LH20 k c ch t He-3 (0,45 g) + Hai ch c phân tích b , bao g m ph UV, ph khố ng (MS), NMR, so ối chi u với li u v ph UV, NMR, MS c a ch ư c công bố c He-2 Hederacoside C - C59H96O26 He-3 Rutin C27H30O16 Phân l nh c c2h p ch t He-2, He-3 l H R 4.2 Bàn lu n Vi c phân l c ti ướ u với c t nhanh giúp n nhỏ ối h p với c o nh m h n ch m t m u b h p ph có c u trúc ph c t p Hederacosid C saponin triterpen vịng c u trúc khung oleanan, có ph n aglycon hederagenin; ph n glycon g m m t ng pentose bốn ng hexose Hederacosid C m t thành ph n loài H helix c phân l p b ng s c kí c t s c kí lớp mỏ u ch nghiên c ước [8 H c ch ng minh tác d ng tác d ng gi m co th t, giãn ph qu n, … [1] P tách ư - -Oư c tìm th t flavonoid có khung quercetin ph ng rutinose (6-O--L-rhamnopyranosyl- D-glucopyranose) – h p ch tiên Hedera helix 99 R o v d dày, b o v gan h ng huy t, chống viêm gi m lo l ng [9] Lời cảm ơn Nghiên c c tài tr b i Quỹ Phát tri n Khoa h c Công ngh - i h c Nguy n T T tài mã số 2020.01.78 H -NCKH Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 36 T J Julien., M Gasquet., C Maillard., G Balansard and P Timon-David (1985), "Extracts of the ivy plant, Hedera helix, and their anthelminthic activity on liver flukes", Planta Medica, 51(03), pp 205-208 MARZENA Dworacka., ALDONA Krawczyk and VALENTYNA Brytska (2017), "Anti-inflammatory, antimicrobial activity and influence on the lungs and bronchus of Hedera helix leaves extracts", Development (OECD), 9, p 10 Andreas Trute., Jan Gross., Ernst Mutschler and Adolf Nahrstedt (1997), "In vitro antispasmodic compounds of the dry extract obtained from Hedera helix", Planta Medica, 63(02), pp 125-129 Anuradha Rai (2013), "The antiinflammatory and antiarthritic properties of ethanol extract of Hedera helix", Indian Journal of Pharmaceutical Sciences, 75(1), p 99 Hye Gwang Jeong and Hyeon Yong Park (1998), "The prevention of carbon tetrachloride‐induced hepatotoxicity α‐hederin Inhibiton of cytochrome P450 2E1 expression", IUBMB Life, 45(1), pp 163-170 T ố V N V V 99 , Nhà X b Y ọ , tr 396 E Vidal-Ollivier., A Babadjamian., R Faure., R Chemli., K Boukef., et al (1989), "Two-Dimensional NMR Studies of Triterpenoid Glycosides II)-1 H NMR Assignment of Arvensoside A and B, Calenduloside C and D", Spectroscopy Letters, 22(5), pp 579-584 S H Z J w “I z f H P fH L I ” Iraqi J Pharm Sci, 23(2), pp 33-41 Alberto Hernandez-Leon., María E González-Trujano and Alonso Fernández-Guasti (2017), "The anxiolyticlike effect of rutin in rats involves GABAA receptors in the basolateral amygdala", Behavioural Pharmacology, 28(4), pp 303-312 Study on chemical composition of Ivy’s le ves Hedera helix L.) Nguyen Thi Thu Hien*, Dang Duc Huy, Ha My Nhan Department of Pharmacy, Nguyen Tat Thanh University * nguyenhiend10242@gmail.com Abstract In Viet Nam, Ivy (Hedera helix L.) is usually used as a ornamental plant and there have not been many studies on chemical constituents, pharmacological effects as well as medicinal applications This study contributes to clarify the chemical constituents of ivy to use it as medicine in the field of herbal medicine and traditional medicine Ivy leaves were collected in December 2019 in Lang Son and compared its morphological characteristics with the available documents Leaves were cleaned, dried in shade; kg of dried leaves were extracted with ethanol 70 % using low-pressure technique to obtain 30 g cataplasm By rapid column chromatography technique to obtain six fractions The fraction has some potential and been crystalized using reverse-phase chromatography C-18 to get four sub-fractions and identified two constituents as He-2 (0.15 g – Hederacoside C) l and He-3 (0.45 g – Rutin) Hederacoside C has effects of expectorant, cough suppressant and bronchial smooth muscle reduction Rutin is commonly used as a vessel wall stabilizing element Keywords Ivy, Hedera helix, Hederacoside C, Rutin Đại học Nguyễn Tất Thành ... Hedera helix L.) Nguyen Thi Thu Hien*, Dang Duc Huy, Ha My Nhan Department of Pharmacy, Nguyen Tat Thanh University * nguyenhiend10242@gmail.com Abstract In Viet Nam, Ivy (Hedera helix L.) is... dung môi khác nhau, phát hi n b ng UV 254 nm, UV 365 nm, thuốc th VS 3.3.1 -2 Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 32 Hình SKLM ki Nhận xét He-2 không t t quang UV 254, khơng... 36,76 23,72 1,90 122,73 5,39 143,96 42,00 28,18 2,26; 1,08 23,21 2,02; 1,87 Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 13 34 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Ara – 1' Ara