Các hợp chất diterpenoit từ lá cây na ( annona squamosa l ) ở việt nam

1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH NGUYỄN THỊ HỒNG CÁC HỢP CHẤT DITERPENOIT TỪ LÁ CÂY NA (ANNONA SQUAMOSA L.) Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ HOÁ HỌC Vinh - 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CÁC HỢP CHẤT DITERPENOIT TỪ LÁ CÂY NA (ANNONA SQUAMOSA L.) Ở VIỆT NAM Chuyên ngành : HOÁ HỮU CƠ Mã số: 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SĨ HOÁ HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS TRẦN ĐÌNH THẮNG Học viên cao học: Vinh – 2011 NGUYỄN THỊ HỒNG LỜI CẢM ƠN Luận văn thực phịng thí nghiệm chuyên đề Hoá hữu - khoa Hoá, Trung tâm Kiểm định An tồn Thực phẩm Mơi trường, Trường Đại học Vinh, Viện Hố học-Viện Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Tôi xin chân thành cảm ơn TS Trần Đình Thắng - Khoa Hố, Trường Đại học Vinh giao đề tài, tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện suốt trình thực luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn PGS TS Hồng Văn Lựu, PGS TS Lê Văn Hạc - Khoa Hoá - Trường Đại học Vinh tạo điều kiện thuận lợi, động viên tơi q trình làm luận văn ThS Đỗ Ngọc Đài giúp thu mẫu thực vật TS.Trần Huy Thái (Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam) giúp định danh mẫu thực vật Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô, cán bộ mơn hố Hữu cơ, khoa Hố, khoa Đào tạo Sau đại học, bạn đồng nghiệp, học viên cao học, sinh viên, gia đình người thân động viên giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Vinh, ngày 10 tháng 12 năm 2011 Nguyễn Thị Hồng DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 1.2.4 : Hàm lượng dinh dưỡng Na Bảng 1.2.5 : Các hợp chất diterpenoit kauran từ Na 19 Bảng 3.2: Số liệu phổ 13C-NMR 1H-NMR hợp chất 25 1(ASTE14) Bảng 3.3: Số liệu phổ 13C-NMR 1H-NMR hợp chất 29 2(ASTE1- 43) Bảng 3.4: Số liệu phổ 13C-NMR 1H-NMR hợp chất 35 (ASTE-26 Bảng 3.5: Số liệu phổ 13C-NMR 1H-NMR hợp chất 40 (ASTE5-45) Bảng 3.6: Số liệu phổ 13C-NMR 1H-NMR hợp chất 45 DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 3.2.1: Phổ khối lượng va chạm (EI-MS) hợp chất 26 Hình 3.2.2 Phổ 1H-NMR hợp chất 27 Hình 3.2.3: Phổ 13C-NMR hợp chất 27 Hình 3.2.4: Phổ 13C-NMR hợp chất (phổ dãn) 28 Hình 3.2.5: Phổ 13C-NMR hợp chất (phổ dãn) 28 Hình 3.3.4: Phổ 1H-NMR hợp chất (phổ dãn) 33 Hình 3.3.5: Phổ 13C-NMR hợp chất 33 Hình 3.3.6: Phổ 13C-NMR hợp chất (phổ dãn) 34 Hình 3.4.1: Phổ khối lượng va chạm electron (EI-MS) hợp chất 36 Hình 3.4.2: Phổ 1H-NMR hợp chất 37 Hình 3.4.3: Phổ 13C-NMR hợp chất 37 Hình 3.4.4: Phổ 13C-NMR hợp chất 38 Hình 3.4.5: Phổ DEPT hợp chất 38 Hình 3.4.6: Phổ DEPT hợp chất 39 Hình 3.4.7: Phổ DEPT hợp chất 39 Hình 3.5.1: Phổ 1H chất 42 Hình 3.5.2: Phổ 1H chất (phổ dãn) 42 Hình 3.5.3: Phổ 1H-NMR hợp chất (phổ dãn) 43 Hình 3.5.4: Phổ 13C-NMR hợp chất 43 Hình 3.5.5: Phổ DEPT hợp chất 44 Hình 3.5.6: Phổ DEPT hợp chất (phổ dãn) 44 Hình 3.6.1: Phổ UV hợp chất 47 Hình 3.6.2: Phổ IR cđa hợp chất 47 Hình 3.6.3: Phổ khối lượng va chạm electron (EI 48 Hình 3.6.7: Phổ 1H-NMR hợp chất 48 Hình 3.6.8: Phổ 1H-NMR hợp chất 49 Hình 3.6.9: Phổ 1H-NMR hợp chất 49 Hình 3.6.10: Phổ 13C-NMR hợp chất 50 Hình 3.6.11: Phổ 13C-NMR hợp chất 50 Hình 3.6.12: Phổ DEPT hợp chất 51 Hình 3.6.13: Phổ DEPT hợp chất 51 Hình 3.6.14: Phổ HMBC hợp chất 52 Hình 3.6.16: Phổ HMBC hợp chất 53 Hình 3.6.16: Phổ HMBC hợp chất 54 Hình 3.6.17: Phổ HMBC hợp chất 55 Hình 3.6.18: Phổ HSQC hợp chất 56 Phổ HSQC hợp chất 57 Hình 3.19: DANH SÁCH SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1: Phân lập hợp chất na squamosa L- trang 21 MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Nhiệm vụ nghiên cứu Chương Tổng quan 1.1 Mô tả thực vật họ Na 1.2 Cây Na 1.2.1 Thực vật học 1.2.2 Phân bố sinh thái 1.2.3 Hoạt tính cồng dụng 1.2.4 Thành phần dinh dưỡng 1.2.5 Thành phần hoá học 1.2.5.1 Hợp chất acetogenin 1.2.5.2 Các hợp chất ligan 13 1.2.5.3 Ankaloit 14 1.2.5 Hợp chất Xiclopeptit 15 1.2.5.5 Hợp chất diterpenoit kauran từ Na 17 Chương THỰC NGHIỆM 20 2.1 Nguyên liệu, phương pháp thiết bị 20 2.1.1 Phương pháp lấy mẫu 20 2.1.2 Phương pháp phân tích, phân tách hỗn hợp 20 phân lập hợp chất 2.1.3 Phương pháp khảo sát cấu trúc hợp chất 20 2.2 Phân lập hợp chất 21 2.3 Một số kiện phổ tử ngoại, phổ khối phổ 22 cộng hưởng từ hạt nhân chất phân lập Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 3.1 Phân lập hợp chất 24 3.2 Phân lập xác định cấu trúc hợp chất 24 3.3 Phân lập xác định cấu trúc hợp chất 29 3.4 Phân lập xác định cấu trúc hợp chất 34 3.5 Phân lập xác định cấu trúc hợp chất 40 3.6 Xác định cấu trúc hợp chất 45 Danh mục cơng trình 59 Tài liệu tham khảo 60 10 danh mục kí hiệu, chữ viÕt t¾t CC: Column Chromatography (S¾c kÝ cét) FC: Flash Chromatography (S¾c ký cét nhanh) TLC: Thin Layer Chromatography (S¾c kÝ líp máng) IR: Infrared Spectroscopy (Phỉ hång ngo¹i) MS: Mass Spectroscopy (Phỉ khèi l-ỵng) EI-MS: Electron Impact-Mass Spectroscopy (Phỉ khèi va ch¹m electron) ESI-MS: Electron Spray Impact-Mass Spectroscopy (Phỉ khèi l-ỵng phun mï electron) H-NMR: Proton Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng h-ởng từ hạt nhân proton) 13 C-NMR: Carbon Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng h-ởng từ hạt nhân cacbon-13) DEPT: Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC: Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC: Heteronuclear Multiple Bond Correlation COSY: Correlation Spectroscopy s: singlet br s: singlet tï t: triplet d: dublet dd: dublet cña duplet dt: dublet cña triplet m: multiplet TMS: Tetramethylsilan DMSO: DiMethylSulfoxide 59 Hình 3.6.8: Phổ 1H-NMR hợp chất Hình 3.6.9: Phổ 1H-NMR hợp chất 60 Hình 3.6.10: Phổ 13C-NMR hợp chất Hình 3.6.11: Phổ 13C-NMR hợp chất 61 Hình 3.6.12: Phổ DEPT hợp chất Hình 3.6.13: Phổ DEPT hợp chất 62 Hình 3.6.14: Phổ HMBC hợp chất 63 Hình 3.6.15: Phổ HMBC hợp chất 64 Hình 3.6.16: Phổ HMBC hợp chất 65 Hình 3.6.17: Phổ HMBC hợp chất 66 Hình 3.6.18: Phổ HSQC hợp chất 67 Hình 3.19: Phổ HSQC hợp chất 68 KẾT LUẬN Nghiên cứu thành phần hoá học Na (Annona squamosa L.) Việt Nam, thu số kết sau: - Bằng phương pháp ngâm chiết với dung môi chọn lọc cất thu hồi dung môi thu cao tương ứng cao etylaxetat (47g), cao butanol (60g) - Phân lập hợp chất từ cao etyl axetat việc sử dụng phương pháp sắc ký silicagel kết tinh phân đoạn thu chất ditecpernoit 1,2,3,4,5 - Sử dụng phương pháp phổ đại: phổ tử ngoại (UV), hồng ngoại (IR), phổ khối lượng (EI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC, HSQC để xác định cấu trúc hợp chất tách Các kết phổ cho phép khẳng định chất : axit-16- hydro-entkauran -17,19-dioic, 16,17-dihydroxy-ent-kauran-19-al, axit-16- hydro-19al-ent-kauran-17-oic, axit-16-hydro-17-axetoxy-ent-kauran-19-oic, axit entkaur-16-en-19-oic 69 DANH MỤC CƠNG TRÌNH Bùi Thị Minh Nguyệt, Nguyễn Thị Bích Ngọc, Nguyễn Thị Hồng, Trần Đình Thắng, Các hợp chất diterpenoit từ Na (Annona squamosa L ) Việt Nam, Tạp chí Khoa Học Cơng Nghệ, 49 (3A) (2011) 106-111 70 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Tiến Bân (Chủ biên) (2003), Danh lục lồi thực vật Việt Nam, Nhà xuất Nơng nghiệp, Hà Nội Nguyễn Tiến Bân (2003), Họ Na (Annonaceae), Thực vật chí Việt Nam, Flora of Vietnam, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học Hà Nội, Nguyễn Thượng Dong người khác (2006), Nghiên cứu thuốc từ thảo dược, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Trần Đình Đại (1998) Khái quát hệ thực vật Việt Nam, Hội thảo Việt-Đức Hoá học hợp chất thiên nhiên, Hà Nội, 16-18, tr 17-27 Nguyễn Văn Hùng, Đoàn Thị Mai Hương, Nguyễn Thị Minh Hằng, , (2010), Giới thiệu hợp chất thiên nhiên, NXB Viện khoa học công nghệ Việt Nam Đỗ Thị Thu Hương (2004) Nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính Trần Văn Sung(2002) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân hoá hữu Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng, Trần Thị Mỹ Linh, Phạm Hùng Việt (1985), Các phương pháp sắc ký, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Tiếng Anh 10 Gales L And Damas A M (2005), Xanthones–A Structural 71 Perspective Current Medicinal Chemistry, 2,2499-2515 A C de Q Pinto, M C R Cordeiro,S R M de Andrade,F R 11 Ferreira,H A de C Filgueiras,R E Alves,D I Kinpara, Annona species(2005), International Centre for Underutilised Crops, University of Southampton, Southampton, UK R Ranjan and M Sahai(2008) Cumarinolignans from the Seeds of 12 Annona squamosa Linn, Department of Medicinal Chemisry, Institute of Medical Sciences, Sciences, Banaras Hindu University, Varanasi221005, UP, India Wu Y C., Hung Y C., Chang F R., Cosentino M., Wang H K., Lee K H (1996), “Identification of ent-16β,17-Dihydroxykauran-19-oic 13 Acid as an Anti-HIV Principle and Isolation of the New Diterpenoids Annosquamosins A and B from Annona squamosa”, J Nat Prod, 59, ,635 – 637 Hiroshi A.(2004), Studies Annonaceous Tetrahydrofuranic 14 Acetogenins from Annona squamosa L.Seeds.Bull Natl Inst AgroEnviron.Sci., 23, 77-149 Hai H E., Xiao Y W., Ji D W., Mei F L., Ren Z Y., A New 15 Cytotoxic Acetogenin from the Seeds of Annona squamosa L South China Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510- 650 Yu L Y., Kuo F H., Pei H C.,Shih H W., Kuen Y W., Fang R C., 16 and Yang C W.,.New Cyclic Peptides from the Seeds of Annonasquamosa L and Their Anti-inflammatory Activities Jounal of Agricultural and food Chemistry 17 Yoshinori F., Chikako M., Hiroyasu S., Seiichi N., Kasumi K., Sanjewon S., Manorama S., Yogesh K G., and Mahendra S., 72 Annonaceous Acetogenins from the Seeds of Annona squamosa Nonadiacent Bis-Tetrahydrofuranic Acetogenins(1994), Department of Chemistry, okyo Institute of technology, Meruro-ku, Tokyo 152 Jaan and Department of Medicinal Chemistry, I.M.S., Banaras Hindu University, Varanasi 221005, India Kazuyoshi K., Jocelyn P and Akio K (1989), Isollation and Structure 18 of Neoannonin, Novel Insecticidal Compound from the Seeds of Annona squamosa.Laboratory of ioresources Chemistry, Department of Agricutural Science,Okayama University, Okayama 700, Japan Hsieh T J, Wu Y C, Chen S C, Huang C S, Chen C Y (2004), 19 Chemical constituents from Annona glabra Journal of the Chinese Chemical Society 51, 869-876 20 EshietI T U., Akisanya A (1971), Diterpenes from Annona senegalensis, phytochemistry 10, 3294-3295 Chen C.Y., Chang F R., Wu Y C (1997), The constituents from the 21 stems of Annona cherimola Journal of the Chinese Chemical Society 44, 313-319 Liaw C C., Yang Y L., Chen M., Chang F R., Chen S L., Wu S H., 22 Wu Y C (2008), Mono-tetrahydrofuran Annonaceous acetogenins from Annona squamosa as cytotoxic A and calcium ion chelators Journal Natural of Products 71, 764-771 Jakupovic J., Grenz M., Bohlmann F., Mungai G M.(1990), 12- 23 hydroxyabieta-7,13-diene and otherconstituents from east African Helichrysum species, phytochemistry 29, 1589-1590 Nguyen H D., Zhang X F., Zheng M.S., Son K H., Chang H W., 24 Kim H P., Bae K H., Kang S S (2005), Inhibitory constituents against cyclooxygenases from Aralia cordata, Arch Pharm Res 73 28(1), 28-33 25 Kayode A E., James I.(1976), Durodola, Antitumour and antibiotic principles of Annona senegalensis, phytochemistry 15, 1311-1312 ... Tháp,chiết, l? ??c với dung mơi thích để thu hợp chất từ Na (Annona squamosa L. ) Phân l? ??p xác định cấu trúc hợp chất từ na (Annona squamosa L. ) 13 Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Mô tả thực vật họ Na Họ Na (Annonaceae)... (4 8) OCH Duguevallin (4 9) 25 Hợp chất benzylisoquinolin tách từ Annona squamosa gåm: reticulin (5 0) chất thường thấy benzyltetrahydroisoquinolin, coclaurin (5 1) N-methylcoclaurin (5 2) H3CO N HO R1... biệt Polythia longifoliapendula (l? ? bó sát thân) Các loại thân gỗ cịn dùng l? ?m củi Một số loại có l? ??n, nhiều thịt ăn bao gồm loại chi Annona (na, na Nam Mỹ, mãng cầu xiêm) hay chi 12 Asimina (? ?u