Nghiên cứu phân lập các hợp chất phenolic từ quả cây Na biển (annona glabra)

Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp MỞ ĐẦU Nước ta có khí hậu thảm thực vật phong phú đa dạng Dân tộc Việt Nam có truyền thống sử dụng lồi thảo mộc làm thuốc chữa bệnh Những năm gần xu hướng tìm kiếm số hoạt chất lồi thảo mộc có tác dụng chữa bệnh ngày tăng, thu hút nhà khoa học nghiên cứu Theo số liệu thống kê thảm thực vật Việt Nam có 12000 lồi, số có 3200 loài sử dụng làm thuốc y học dân gian [1] Từ xưa đến nay, thuốc dân gian đóng vai trò quan trọng việc chăm sóc sức khỏe cho người Ngày hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học phân lập từ cỏ ứng dụng nhiều ngành công nghiệp, nông nghiệp chăm sóc sức khỏe người Chúng sử dụng làm thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, làm nguyên liệu cho ngành công nghiệp thực phẩm mỹ phẩm… Mặc dù cơng nghiệp tổng hợp hóa dược ngày phát triển mạnh mẽ, tạo biệt dược khác sử dụng cơng tác phòng, chữa bệnh, nhờ giảm tỷ lệ tử vong nhiều song đóng góp thảo dược khơng mà chỗ đứng Y học Nó tiếp tục dùng nguồn nguyên liệu trực tiếp, gián tiếp cung cấp chất đầu cho cơng nghiệp bán tổng hợp nhằm tìm kiếm dược phẩm cho việc điều trị chứng bệnh thông thường bệnh nan y Mặt khác cơng tác phòng chữa bệnh, Đảng Nhà nước ta ln chủ trương khuyến khích sử dụng ngun liệu từ thực vật chúng có chứa nhiều biệt dược khó tổng hợp không gây tác dụng phụ Trong giới thực vật mn màu, nhiều lồi cỏ sử dụng dược liệu quý Trong số có Na biển (tên khoa học Annona Đỗ Thị Dung K35C – CN Hóa học glabra), hầu hết phận có tác dụng riêng, đặc biệt Các dân tộc Trung Mỹ, Nam Mexico, Brazil Peru sử dụng nước sắc để trị bệnh giun sán giã nát đắp mụn nhọt, áp xe loét Theo kinh nghiệm dân gian, Na biển chín trị bệnh khí hư (huyết trắng) phụ nữ chứng thiếu máu Hạt giã nát dùng đắp quanh nướu để làm giảm nhức răng, có tác dụng hút mủ, giải nhiệt, ban đỏ, nhuận phế, mát gan giải khát Ngoài sử dụng làm thuốc trị tiêu chảy, kiết lỵ làm thuốc sát trùng, làm thuốc trị bướu, dùng trị viêm khí quản mạn tính [2] Đây thuốc quý, cần nghiên cứu để giải thích tác dụng chữa bệnh cây, tạo sở để tìm kiếm phương thuốc điều trị bệnh Nhằm mục đích thực tập tìm hiểu cách thức chiết, phân lập xác định cấu trúc hợp chất có thành phần hố học Na biển nên em lựa chọn đề tài khóa luận tốt ngiệp là: ‘‘Nghiên cứu phân lập hợp chất phenolic từ Na biển( Annona glabra)‘‘ với nội dung sau : Thu mẫu Na biển (Annona glabra), xử lý mẫu tạo dịch chiết nước Phân lập số hợp chất phenolic từ Na biển (Annona glabra) Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Na biển [2] 1.1.1 Thực vật học Tên khoa học: Annona glabra Tên tiếng việt: Na biển Tên khác: Nê, bình bát nước Họ: Mãng cầu hay họ Na (Annonaceae) Chi: Annona Na biển loại gỗ nhỏ, cao - 5m, cành phân nhánh, dáng giống mãng cầu xiêm Lá không lông,mọc cách; phiến hình bầu dục, hình trái xoan hình thn, cỡ 10-15 × 5-7 cm; chóp nhọn; gốc gần tròn; gân bên - đơi Hoa phần lớn mọc đơn độc Lá đài xanh, hình tam giác; cánh hoa màu vàng, cánh hoa dài - 3cm, cánh hoa vòng ngồi thường lớn có dạng hình tam giác rộng, cánh hoa vòng thường nhỏ, có bớt đỏ mặt trong; nhị nhiều; nỗn nhiều; bầu có lơng Quả hình trứng dài - 10cm, vàng xanh, vỏ nhẵn, không gai, nạc, thịt trắng Hạt màu nâu nhạt Hình 1.1 Cành Na biển mang Hình 1.2 Hoa Na biển 1.1.2 Phân bố, sinh thái Cây mọc rải rác khu vực dọc bờ biển từ Quảng Ninh đến Quảng Nam (Cù Lao Chàm) tỉnh phía Nam Một số ý kiến cho rằng, Na biển có nguồn gốc vùng ven biển nhiệt đới Châu Mĩ Châu Phi, nhập trồng Việt Nam Cây trồng dựa bờ rạch có nước lợ, mọc mương dù nước vừa phèn, vừa mặn 1.1.3 Công dụng Hầu hết phận Na biển có tác dụng riêng như: Quả Na biển chín ăn được, mùa hoa gần quanh năm Các dân tộc Trung Mỹ, Nam Mexico, Brazil Peru sử dụng nước sắc để trị bệnh giun sán giã nát đắp mụn nhọt, áp xe loét Theo kinh nghiệm dân gian, Na biển chín trị bệnh khí hư (huyết trắng) phụ nữ chứng thiếu máu Hạt giã nát dùng đắp quanh nướu để làm giảm nhức răng, có tác dụng hút mủ, giải nhiệt, ban đỏ, nhuận phế, mát gan giải khát Ngoài hạt dùng hạt bình bát làm thuốc trị tiêu chảy, kiết lỵ làm thuốc sát trùng Vỏ giã có tác dụng tương tự dịch dùng để trừ chấy Ở Cu Ba, gỗ bình bát nước nhẹ, dùng làm phao giữ lưới đánh cá mặt nước làm thuyền đánh cá Ở Trung Quốc, toàn dùng làm thuốc trị bướu, dùng trị viêm khí quản mạn tính Ngồi trồng để làm gốc ghép mãng cầu xiêm vừa tạo mãng cầu có to, cơm dày, vị thanh, thích hợp với vùng trũng, đất phèn 1.1.4 Thành phần hoá học Trong nghiên cứu trước đây, kết nghiên cứu công bố cho thấy thành phần hóa học chủ yếu Na biển (Annona glabra) ditecpenoit (khung kauran), steroit, acetogenin Trong thành phần hóa học Na biển, nhà khoa học tìm thấy hợp chất diterpenoid có khung kauran annoglabasin A ( metyl16 β - axetoxy-19-al-ent-kauran-17-oate) (29) annoglabasin B (16α -hydro- 19-axetoxy-ent-kauran-17-oic acid) (30), annoglabasin C (16α -axetoxyent- kauran-19-oic acid-17-metyl ester) (31), annoglabasin D (16α - axetoxy-ent- kauran-19-al-17-metyl ester) (32), annoglabasin E (16α hydro-19-ol-ent- kauran-17-oic acid) (33), annoglabasin F (16α -axetoxy-19-nor-ent-kauran- α -ol-17-metyl ester) (34) [4, 5] Tiếp tục điều tra thành phần hóa học nó, nhà khoa học phân lập 28 hợp chất có 19 hợp chất diterpenoid có khung kauran (annoglabasin G (16α -hydro-19-acetoxy-ent-kauran-17-al) (1), 16 β -hydroent-kauran-17-oic acid (2), 16α -hydro-entkauran-17-oic acid (3), 19-norent- kauran-4α -ol-17-oic acid (4), 16α -hydro-19-ol-ent-kauran-17-oic acid(5), ent-kaur-16-en-19-oic acid (6), 16α -hydroxy-ent-kauran-19-oic acid (7), 16α , 17-dihydroxy-entkauran-19-oic acid (8), 16 β ,17-dihydroxy-entkauran19-oic acid (9), 16α -hydro-ent-kauran-17,19-dioic acid (10), 16 β -hydroxy17-acetoxy-ent-kauran-19-oic acid (11), 16 β -hydro-17-hydroxy-ent-kauran- 19-al(12), 16α -hydro-17-hydroxy-ent-kauran-19-al (13), 16 β ,17dihydroxyent-kauran-19-al (14), 16α -hydro-19-al-ent-kauran-17-oic acid (15), 16α hydro-17-acetoxy-ent-kauran-19-al (16), 16α -hydro-19-acetoxy-ent- kauran- 17-oic acid (17), ent-kaur-15-en-19-oic acid (18) andent-kaur-15en-17-ol-19- oic acid (19)), hợp chất acetogenin (annomontacin (20), annonacin (21), isoannonacinone (22) squamocin (23)), hợp chấtsteroid ( β -sitosterol (24), stigmasterol (25), β -sitosteryl-D-glucoside stigmasteryl-Dglucoside (27)) 1hợp chất oxoaporphine (liriodenine (28) [6] Cấu trúc hóa học hợp chất sau: (26), R1 CHO CH2OAc 29 30 12 R2 OAc COOH 13 11 18 31 32 33 20 14 10 R3 COOCH3 H R2 16 R3 17 15 R1 19 R1 COOH CHO CH2OH R2 COOCH3 COOCH3 COOH R3 OAc OAc H 34 Hình 1.3 Cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ Na biển Trong đó, hợp chất methyl-16α -hydro-19-alent-kauran-17-oate có khả chống lại nhân lên HIV tế bào lympho H9, hợp chất 16α ,17-dihydroxy-entkauran-19-oic acid (8) cho thấy khả ức chế đáng kể chép HIV [4] 1.2 Lớp chất phenolic, thành phần hóa học có Na biển 1.2.1 Giới thiệu chung [3, 7] Các hợp chất phenolic hợp chất có nhiều vòng thơm nhiều nhóm hydroxyl (-OH) tự kết hợp với nhóm chức khác ether, ester glycosid Các hợp chất phenolic tan nước phần lớn dạng kết hợp với đường glycosid thường không bào Các hợp chất phenol có màu sắc tự nhiên nên lợi dụng màu sắc chúng để theo dõi q trình chiết suất phân lập Có hai hướng thơm hóa để sinh phenolic thực vật: - Hướng phổ biến qua Shikimate (axit Shikimic), từ monosaccarit tạo thành aminoaxit (Phenyl amin Tyrosime), sau loại nhóm amin cho axit Cinnamic dẫn xuất chúng gồm: Axit benzoic, Acetophenone, Lignan, Lignin Caumarin - Con đường thứ hai từ axetat dẫn đến tạo thành Poly-βketoester Polyketit dài phản ứng đóng vòng (phản ứng ngưng tụ Claisen Andol) Các sản phẩm thường polycyclic gồm: Choromen, Isocaumarin, Orcinol, Depside, Depsidoen, Xanthone, Quinone Cấu trúc đa dạng hợp chất phenol có q trình sinh tổng hợp tăng dần tần số kết hợp hai đường Shikimate acetate hợp chất tạo thành hỗn hợp Khả tham gia thành tố thứ ba hoàn toàn với tần số thấp Sự kết hợp tạo thành tố tạo hai đường Shikimate Mevalonate, ví dụ số loại Quinone khung Furano Poly-coumarin 3.2 Hằng số vật lý liệu phổ hợp chất: 3.2.1.ợp chất Các thông số vật lý hợp chất 1,các liệu sau : Chất bột vơ định hình màu trắng Cơng thức phân tử C20H30O13 Khối lượng phân tử M = 478 H-NMR (CD3OD-d4, 600 MHz) δH: 6.44 (2H, s, H-2, H-6), 4.95 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-1ʹʹ), 4.78 (1H, d, J = 7.6 Hz, H-1ʹ), 4.02 (1H, d, J = 8.9 Hz, H-6ʹa), 3.93 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-4ʹʹa), 3.72 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-4ʹʹb), 3.89 (overlapped, H-2ʹ), 3.85 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-2ʹʹ), 3.78 (6H, s, 3-OMe, 5OMe), 3.69 (3H, s, 4-OMe), 3.56 (2H, overlapped, H-5ʹ, H-6ʹb), 3.52 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-5ʹʹ), 3.42 (overlapped, H-3ʹ), 3.30 (overlapped, H-4ʹ) 13 C-NMR (CD3OD-d4, 150 MHz) δC: 155.96 (C-1), 154.80 (C-3, C-5), 134.58 (C-4), 110.84 (C-1ʹʹ), 103.17 (C-1ʹ), 96.29 (C-2, C-6), 80.48 (C-3ʹʹ), 77.92 (C-3ʹ), 77.84 (C-2ʹʹ), 77.01 (C-5ʹ), 74.91 (C-4ʹʹ), 74.91 (C-2ʹ), 71.59 (C4ʹ), 68.75 (C-6ʹ), 65.33 (C-5ʹʹ), 61.24 (4-OMe), 56.70 (2C, 3,5-OMe) 3.2.2.ợp chất Các thông số vật lý hợp chất 2, liệu sau : Chất bột vơ định hình màu trắng Cơng thức phân tử C18H26O10 Khối lượng phân tử M = 402 H-NMR (CD3OD-d4, 400 MHz) δH: 7.41 (2H, d, J = 6.8 Hz, H-2, H- 6), 7.34 (2H, t, J = 6.8 Hz, H-3, H-5), 7.25 (1H, t, J = 6.8 Hz, H-4), 5.03 (1H, d, J = 2.4 Hz, H-1ʹʹ), 4.87 (overlapped, H-7b), 4.63 (1H, d, J = 11.6 Hz, H7a), 4.31 (1H, d, J = 7.6 Hz, H-1ʹ) 13 C -NMR (CD3OD-d4, 100 MHz) δC: 139.07 (C-1), 129.43 (C-2), 129.43 (C-6), 129.39 (C-3), 129.39 (C-5), 128.3 (C-4), 111.11 (C-1ʹʹ), 103.26 (C-1ʹ), 80.61 (C-3ʹʹ), 78.09 (C-3ʹ), 78.06 (C-2ʹʹ), 77.03 (C-5ʹ), 75.13 (C-2ʹ), 75.02 (C-4ʹʹ), 71.83 (C-7), 71.83 (C-4ʹ), 68.71 (C-6ʹ), 65.59 (C-5ʹʹ) CHƯƠNG THẢO LUẬN KẾT QUẢ 4.1 Xác định cấu trúc hợp chất Hợp chất phân lập dạng bột vơ định hình, màu trắng Trên phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton hợp chất nhận thấy tín hiệu cộng hưởng hai proton thơm (δH 6.44, 2H, s), hai tín hiệu cộng hưởng anome proton (δH 4.78, 1H, d, J = 7.6 Hz 4.95, 1H, d, J = 2.5 Hz), tín hiệu cộng hưởng ba nhóm methoxy (δH 3.78, 6H, s 3.69, 3H, s) tín hiệu cộng hưởng cacbinol proton vùng δH 3.30-4.02 (Hình 4.1.a) Hìn h 4.1.a Phổ proton 1H-NMR hợp chất Các phân tích phổ 13C-NMR DEPT cho thấy phân tử hợp chất có chứa 20 nguyên tử cacbon bao gồm: năm nguyên tử cacbon bậc (bốn cacbon olefin cacbon cacbinol), chín nguyên tử cacbon bậc (hai cacbon olefin bảy cacbon cacbinol), ba nguyên tử cacbon bậc (ba cacbon hydroxymetylen), ba nguyên tử cacbon bậc (ba metoxi cacbon) Các kiện cho thấy cấu trúc hóa học hợp chất1 có dạng dẫn xuất phenyl glycoside Sự xuất cặp tín hiệu cộng hưởng tương đương nhận phổ 1H, 13 C-NMR [H-2/H-6 (δH 6.44); 3-OMe/5-OMe (δH 3.78); C- 3/C-5 (δC 154.80); C-2/C-6 (δC 96.29); 3-OMe/5-OMe (δC 56.70)] cho phép dự đoán aglycone hợp chất có cấu trúc đối xứng dạng phenyl bốn vị trí 1,3,4,5 Hình 4.1.b Phổ 13C-NMR hợp chất Hình 4.1.c Phổ DEPT 135 hợp chất Tiếp đó, vị trí nhóm thế, liên kết glycoside hợp chất đưa qua tín hiệu tương tác nhận phân tích phổ chiều HMBC HSQC Hình 4.1.d Phổ chiều HMBC hợp chất Hình 4.1.e Phổ chiều HMQC hợp chất Tương tác HMBC proton metoxi δH (3.78) C-3/C-5 (δC 154.80) cho phép khẳng định nhóm metoxi vị trí C-3 C-5 So sánh với tài liệu công bố dẫn xuất 1,3,4,5-tetrahydroxybenzen, [10,11] tín hiệu cộng hưởng δC 134.58 gán cho nguyên tử C-4 Kết hợp với tương tác HMBC nhận tín proton metoxi lại δH (3.69) với C-4 (δC 134.58) khẳng định nhóm metoxi lại vị trí C-4 Tương tác HMBC proton anome đơn vị đường δH 4.87 C-1 (δC 155.96) cho thấy liên kết glucoside vị trí C-1 Sự có mặt hai đơn vị đường hợp chất hai tín hiệu cộng hưởng anome proton (δH 4.78 4.95) tương ứng với hai tín hiệu cộng hưởng anome cacbon (δC 103.17 110.84) quan sát phổ hai chiều HMQC Hơn nữa, đơn vị đường xác định glucose apiose việc thủy phân hợp chất mơi trường axit, chiết với CHCl3, sau phân tích TLC (CHCl3:CH3OH:H2O, 3:2:0.3) lớp nước so sánh với đường chuẩn (Glucose Rf 0.29, Apiose Rf 0.48) Đơn vị apiose liên kết với glucose vị trí C-6ʹ dịch chuyển vùng trường thấp nguyên tử C-6ʹ (δC 68.75) nhận phổ 13C-NMR tương tác HMBC quan sát H2-6ʹ(δH 4.02, 3.56)/C-1ʹʹ (δC 110.84) H-1ʹʹ (δH 4.95)/C-6ʹ (δC 68.75) Do đó, cấu trúc hóa học hợp chất xác định 3,4,5trimethoxyphenyl 1-O-β-apiofuranosyl-(1ʹʹ→6ʹ)-β-glucopyranoside [14] với cơng thức phân tử C20H30O13 có số khối M = 478, 1686 hồn tồn phù hợp (Hình 4.1.f) Hình 4.1.f Cấu trúc hóa học hợp chất Bảng 4.1 Kết phổ NMR hợp chất a,c #,d δC [12] No #,a δC [13] #,a δC [14] a,b δC δH (mult., J in Hz) - HMBC (H→C) 154.9 156.1 134.6 155.96 95.6 96.2 96.4 96.29 6.44 (s) C-1, C-3, C-4, C-6 154.1 154.8 154.8 154.80 - - 134.1 134.5 156.0 134.58 - - 154.2 154.8 154.8 154.80 - - 95.6 96.2 96.6 96.29 6.44 (s) C-1, C-2, C-4, C-5 3,5-OMe 56.2 56.6 56.7 56.70 3.78 (s) C-3, C-5 60.6 61.2 61.2 61.24 3.69 (s) C-4 1ʹ 102.2 103.2 103.2 103.17 4.78 (d, 7.6) C-1 2ʹ 74.4 75.0 74.9 74.91 3.89* 3ʹ 77.3 78.4 77.9 77.92 3.42* 4ʹ 71.0 71.7 71.6 71.59 3.30* 5ʹ 75.5 78.1 77.0 77.01 3.56* 6ʹ 64.6e 62.8 68.8 68.75 1ʹʹ 110.9 110.84 4.95 (d, 2.5) 2ʹʹ 77.9 77.84 3.85 (d, 2.5) 3ʹʹ 80.5 80.48 - 4ʹʹ 74.9 74.91 65.4 65.33 4-OMe - 1-O-Glc 4.02 (d, 8.9) 3.56* C-1′′ 6ʹʹ-O-Api 5ʹʹ a) c) d) 3.93 (d, 9.6) 3.72 (d, 9.6) 3.52 (d, 2.0) CD3OD-d4, 150MHz, 600 MHz, Acetone-d6 + CD3OD-d4, e)6′-O-galloyl,*)Overlapped signal s b) C-6ʹʹ OMe O O OH O OH OH OH OH O OMe OMe OH Hình 4.1.g Các tương tác HMBC hợp chất 4.2 Xác định cấu trúc hợp chất (Icariside F2) Hợp chất phân lập dạng bột vơ định hình màu trắng Phổ cộng hưởng từ proton hợp chất nhận thấy xuất tín hiệu cộng hưởng nhóm phenyl với ba nhóm tín hiệu cộng hưởng 7.25 (1H, t, J = 6.8 Hz, H-4), 7.34 (2H, t, J = 6.8 Hz, H-3/H-5), 7.41 (2H, d, J = 6.8 Hz, H2/H-6) Hai tín hiệu cộng hưởng proton anome quan sát thấy vị trí cộng hưởng H-1’ (4.31 1H, d, J = 7.6 Hz) H-1’’ (5.03 1H, d, J = 2.4 Hz) Hình 4.2.a Phổ proton1H-NMR hợp chất Phân tích phổ 13 C -NMR hợp chất cho thấy tín hiệu 18 nguyên tử cacbon Trong 11 nguyên tử cacbon thuộc phần đường, nguyên tử cacbon thơm nguyên tử cacbon hydroximetylen δC 71.83 thuộc aglycon Từ kiện cho phép dự đoán hợp chất có dạng benzyl glycoside Sự xuất tín hiệu cacbon anome δC 111.11, cacbinol cacbon bậc δC 80.61 hydroximetylen cacbon δC 75.02 cho thấy tồn đơn vị đường apiose phân tử hợp chất Các tín hiệu cộng hưởng δC 103.26, 75.13, 78.09, 71.83, 77.03, 68.71 cho phép dự đốn đơn vị đường lại glucose Sự chuyển dịch tín hiệu C-6’ (δC 68.71) glucose vùng trường thấp cho phép dự đoán đơn vị đường apiose liên kết với glucose C-6’ Hơn nữa, có mặt đường apiose glucose hợp chất lần khẳng định phương pháp thủy phân môi trường acid, phân tích TLC (CHCl3:CH3OH:H2O, 3:2:0.3) so sánh với đường chuẩn (Glucose Rf 0.29, Apiose Rf 0.48) Hình 4.2.b Phổ cacbon13C-NMR hợp chất Cuối cùng, so sánh kết phân tích phổ 1H 13C-NMR hợp chất hợp chất benzyl O-β-D-apiofuranosyl(1''→6')-β-D- glucopyranoside cho thấy tín hiệu cộng hưởng 1H, 13C-NMR hợp chất giống với hợp chất benzyl O-β-D-apiofuranosyl(1''→6')-β-Dglucopyranoside thơng báo [15] Như cấu trúc hóa học hợp chất xác định benzyl O-β-D-apiofuranosyl(1''→6')-β-D-glucopyranoside hay Icariside F2 có cơng thức phân tử C18H26O10 (M=402) (Hình 4.2.c) Hình 4.2.c Cấu trúc hóa học hợp chất Bảng 4.2 Kết phổ NMR hợp chất No #,d δC [15] a,b a,c δH (mult., J in Hz) 138.9 δC 139.07 128.7 129.43 7.41 (d, 6.8) 128.7 129.39 7.34 (t, 6.8) 127.9 128.3 7.25 (t, 6.8) 128.7 129.39 7.34 (t, 6.8) 128.7 129.43 7.41 (d, 6.8) 71.0 71.83 1ʹ 103.7 103.26 4.31 (d, 7.6) 2ʹ 75.1 75.13 3.22-3.38* 3ʹ 78.6 78.09 3.22-3.38* 4ʹ 72.0 71.83 3.22-3.38* 5ʹ 77.3 77.03 3.22-3.38* - 4.63 (d, 11.6) 4.87* 7-O-Glc 6ʹ 4.00* 69.1 68.71 1ʹʹ 111.2 111.11 5.03 (d, 2.4) 2ʹʹ 78.0 78.06 3.92 (d, 2.4) 3ʹʹ 80.6 80.61 - 4ʹʹ 75.1 75.02 5ʹʹ 65.7 65.59 3.61* 6ʹ-O-Api 3.97 (d, 9.6) 3.76 (d, 9.6) 3.58 (2H, s) CD3OD-d4, a)100 MHz, c)400MHz, *)Overlapped signals a) KẾT LUẬN Bằng phương pháp chiết sắc ký kết hợp sắc kí cột nhồi silica gel pha thường, sắc kí cột nhồi silica gel pha đảo, sắc kí lớp mỏng điều chế, em phân lập hợp chất phenolic từ dịch chiết nước Na biển Các hợp chất là: Hợp chất (1): 3,4,5-trimethoxyphenyl 1-O-β-apiofuranosyl-(1ʹʹ→6ʹ)-βglucopyranoside Hợp chất (2): benzyl O-β-D-apiofuranosyl(1''→6')-β-D- glucopyranoside (Icariside F2) Cấu trúc hợp chất xác định nhờ vào phương pháp phổ đại phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1H-NMR, 13 C- NMR, DEPT 135 DEPT 90), hai chiều (HSQC, HMBC), Phổ khối lượng phun mù điện tử (ESI) TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Trung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Thu, Nguyễn Tập Trần Toàn, Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học Công Nghệ Hà Nội, tập I, trang 827 – 828 (2004) [2] Võ Văn Chi,Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học (1997) [3] TS Phạm Văn Thanh, TS Nguyễn Bích Thu, Một số hợp chất phenol dược liệu chứa hợp chất phenol Tiếng Anh [4] Fang-Rong Chang, Pey-Yuh Yang, Jun-Yan-lin, Kuo-Hsiung Lee, and Yang-Chang Wu, J Nat Prod, 61, 437 – 439 (1998) [5] Chung-Yi Chen, Fang-Rong Chang, Chun-Ping Cho and Yang-Chang Wu,“ent – Kaurane Diterpenoids from Annona glabra”, J Nat Prod, 63, 1000 – 1003 (2000) [6] Tian-Jye H., Yang-Chang W., Su-Ching C., Ching-Shan H and ChungYi C., Chemical constituents from Annona glabra Journal of the Chinese Chemical Society, 51, 869-876 (2004) [7] Dai, J.; Mumper, R J., “Plant Phenolics: Extraction, Analysis and Their Antioxidant and Anticancer Properties”, Molecules, 15, pp 73137352 (2010) [8] Garcia-Salas, P., Morales-Soto, A., Segura-Carretero, A., FernándezGutiérrez, A., “Phenolic-Compound-Extraction Systems for Fruit and Vegetable Samples”, Molecules, 15, pp 8813-8826 (2010) [9] Ross, H.A.; McDougall, G.J.; Stewart, D Antiproliferative activityis predominantly associated with ellagitannins inraspberry extracts, Phytochemistry, 68, 218-228 (2007) [10] Sarkar, F.H.; Li, Y Mechanisms of cancer chemoprevention by soy isoflavone genistein Cancer Metastasis Rev 2002, 21, 265-280 [11] Manthey, J.A.; Grohmann, K.; Guthrie, N Biologicalproperties of citrus flavonoids pertaining to cancer and inflammation Curr Med Chem., 8, 135-153 (2001) [12] Gen-Ichiro Nonaka, Hiroaki Nishimura and Itsuo Nishioka, Chem Pharm Bull, 30, 2061-2067 (1982) [13] Achenbach H., Benirschke G., Phytochemistry, 45, 149-157 (1997) [14] Tripetch Kanchanapoom, Ryoji Kasai and Kazuo Yamasaki, Phytochemistry, 59, 551-556 (2002) [15] T Miyase, A Ueno, N Takizawa, H Kobayashi and H Oguchi, “studies on the Glycosides ofEpimedium grandiflorun Morr.Var thunbergianum (MIQ.) Nakai.III”, Chem Pharm Bull, 36, 2475-2484 (Comp 12) (1988) ... hợp chất có thành phần hoá học Na biển nên em lựa chọn đề tài khóa luận tốt ngiệp là: ‘ Nghiên cứu phân lập hợp chất phenolic từ Na biển( Annona glabra) ‘ với nội dung sau : Thu mẫu Na biển (Annona. .. (Annona glabra), xử lý mẫu tạo dịch chiết nước Phân lập số hợp chất phenolic từ Na biển (Annona glabra) Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Na biển. .. vực dọc bờ biển từ Quảng Ninh đến Quảng Nam (Cù Lao Chàm) tỉnh phía Nam Một số ý kiến cho rằng, Na biển có nguồn gốc vùng ven biển nhiệt đới Châu Mĩ Châu Phi, nhập trồng Việt Nam Cây trồng dựa