Nghiên cứu và chế tạo cảm biến sinh học trên cơ sở công nghệ polyme in phân tử ứng dụng phát hiện một số phân tử nhỏ (protein, kháng nguyên, kháng sinh)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI PHÍ VĂN TỒN BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI PHÍCẢM VĂN BIẾN TỒNSINH HỌC TRÊN CƠ SỞ NGHIÊN CỨU VÀ CHẾ TẠO CÔNG NGHỆ POLYME IN PHÂN TỬ ỨNG DỤNG PHÁT HIỆN MỘT SỐ PHÂN TỬ NHỎ (PROTEIN, KHÁNG NGUYÊN, KHÁNG SINH) LUẬN ÁN TIẾN SĨ VẬT LÝ KỸ THUẬT Hà Nội - 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI PHÍ VĂN TỒN NGHIÊN CỨU VÀ CHẾ TẠO CẢM BIẾN SINH HỌC TRÊN CƠ SỞ CÔNG NGHỆ POLYME IN PHÂN TỬ ỨNG DỤNG PHÁT HIỆN MỘT SỐ PHÂN TỬ NHỎ (PROTEIN, KHÁNG NGUYÊN, KHÁNG SINH) Ngành: Vật lý Kỹ thuật Mã số: 9520401 LUẬN ÁN TIẾN SĨ VẬT LÝ KỸ THUẬT NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS.TS Trương Thị Ngọc Liên PGS.TS Yuzuru TAKAMURA Hà Nội - 2021 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, tác giả xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Trường Đại Học Bách khoa Hà Nội Viện Vật lý Kỹ thuật tạo điều kiện cho tác giả trình học tập nghiên cứu Tác giả xin bày tỏ lời cám ơn chân thành kính trọng tập thể hướng dẫn PGS.TS Trương Thị Ngọc Liên trường Đại học Bách Khoa Hà Nội, GS.TS Yuzuru TAKAMURA, Nhật Bản người hướng dẫn tác giả thực Luận án Thầy cô tận tình bảo, định hướng hướng dẫn mặt khoa học để tác giả hồn thành luận án tiến sĩ Những kiến thức mà tác giả tiếp nhận không Luận án mà hết cách nhìn nhận, đánh phương thức giải vấn đề khoa học trải nghiệm sống Tác giả xin chân thành cảm ơn thành viên phịng thí nghiệm Cảm biến Sinh học (BioGroup) - Bộ môn Vật liệu Điện tử, phịng thí nghiệm GS Yoshiakia Ukita thuộc Đại học Yamanashi Nhật Bản, Công ty Cổ phần KHKT Bách Khoa, Công ty Cổ phần Sáng Tạo Bách Khoa giúp đỡ trang thiết bị phụ trợ tạo điều kiện thuận lợi cho tác giả thực thí nghiệm thời gian nghiên cứu Đề tài thực hỗ trợ Quỹ Phát triển Khoa học Công nghệ Quốc Gia (NAFOSTED), mã số 103.99-2017.333 Tiếp theo, tác giả xin cảm ơn tới tập thể thầy cô, anh chị bạn bè đồng nghiệp Bộ môn Vật liệu điện tử - Viện Vật lý Kỹ thuật - ĐH BKHN, Viện Hóa học - ĐH BKHN, hỗ trợ đóng góp ý kiến q báu mặt chun mơn q trình thực nhiệm vụ nghiên cứu sinh hoàn thành luận án Cuối cùng, tác giả muốn dành lời cảm ơn cho người thân yêu Bản Luận án q q giá tơi xin tặng cho gia đình cha mẹ thân u tơi Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Tác giả Phí Văn Toàn i LỜI CAM ĐOAN Tác giả xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tác giả thực hướng dẫn PGS TS Trương Thị Ngọc Liên GS TS Yuzuru TAKAMURA Các số liệu kết luận án trung thực chưa tác giả khác công bố cơng trình Tất cơng trình cơng bố chung với thầy hướng dẫn khoa học đồng nghiệp đồng ý tác giả trước đưa vào luận án Hà Nội, ngày…… tháng……năm 2021 TM tập thể hướng dẫn Tác giả luận án PGS.TS Trương Thị Ngọc Liên Phí Văn Tồn ii MỤC LỤC MỤC LỤC iii DANH MỤC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG xi DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ xii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cảm biến sinh học điện hóa 1.1.1 Điện cực điện hóa 1.1.2 Cảm biến phổ tổng trở điện hóa .9 1.2 Công nghệ polyme in phân tử (MIP) 14 1.2.1 Lịch sử hình thành phát triển công nghệ MIP 15 1.2.2 Nguyên lý đánh dấu phân tử 17 1.2.3 Thành phần MIPs 19 1.2.3.1 Khuôn 19 1.2.3.2 Các monome chức .20 1.2.3.3 Các liên kết chéo .21 1.2.3.4 Tác nhân Porogen (tạo xốp) .22 1.2.3.5 Chất khơi mào 23 1.2.4 Ưu điểm công nghệ MIP .24 1.2.5 Ứng dụng 24 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM VÀ CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Hóa chất thiết bị .26 2.1.1 Hóa chất 26 2.1.2 Vật tư, thiết bị 27 2.2 Quy trình cơng nghệ chế tạo đầu thu sinh học nhân tạo MIP 27 2.2.1 Chuẩn bị điện cực in carbon biến tính hạt vàng (AuNPs-SPCE) .28 2.2.2 Tạo lớp màng SAM (p-ATP) điện cực AuNPs-SPCE 29 2.2.3 Gắn phân tử chất in vào màng SAM .30 2.2.4 Tạo màng polyme MIP .30 2.2.4.1 Cảm biến ENRO-MIP 31 iii 2.2.4.2 Cảm biến Chloramphenicol (CAP)-MIP 33 2.2.4.3 Cảm biến Norfloxacin (NOR)-MIP .33 2.2.4.4 Cảm biến Ciprofloxacin (CF)-MIP .34 2.2.5 Loại bỏ phân tử chất in khỏi màng polyme MIP 37 2.3 Quy trình phân tích dư lượng hàm lượng kháng sinh Norfloxacin 37 2.3.1 Phân tích dư lượng kháng sinh NOR nước hồ nuôi thủy sản 37 2.3.2 Phân tích hàm lượng kháng sinh Norfloxacin dược phẩm 39 2.4 Các thông số đánh giá hoạt động cảm biến 41 2.4.1 Độ nhạy cảm biến 41 2.4.2 Khoảng tuyến tính cảm biến 41 2.4.3 Độ lặp lại cảm biến .42 2.4.4 Giới hạn phát cảm biến 42 2.4.5 Độ chọn lọc cảm biến 42 2.5 Các phương pháp nghiên cứu .42 2.5.1 Phương pháp phân tích phổ Raman 42 2.5.2 Phương pháp phân tích phổ UV-VIS 43 2.5.3 Phương pháp phân tích HPLC .45 2.5.4 Phương pháp đo phổ tổng trở điện hóa 47 CHƯƠNG CẢM BIẾN MIP/EIS PHÁT HIỆN PROTEIN PHÂN TỬ NHỎ SARCOSINE VÀ 17-ESTRADIOL .50 3.1 Cảm biến Sarcosine-MIP/EIS 51 3.1.1 Ảnh hưởng vật liệu đế lên hình thành màng polyme MIP 51 3.1.2 Phân tích đặc tính điện hóa cảm biến qua bước quy trình cơng nghệ 54 3.1.3 Khảo sát hoạt động cảm biến sarcosine-MIP/SPAuE .57 3.1.4 Đánh giá hoạt động cảm biến sarcosine-MIP/AuNPs-SPCE .59 3.1.4.1 Ảnh hưởng số vòng quét tạohạt vàng điện cực SPCE .60 3.1.4.2 Ảnh hưởng số vòng quét tổng hợp polyme MIP 61 3.1.5 Xây dựng đường đặc trưng chuẩn cảm biến sarcosine-MIP (NIP)/AuNPsSPCE .63 3.1.6 Khảo sát độ lặp lại độ ổn định cảm biến .65 3.1.7 Tính chọn lọc cảm biến 66 iv 3.2 Cảm biến 17-estradiol (E2) 68 3.2.1 Khảo sát hình thái màng E2-MIP phương pháp chụp ảnh hiển vi điện tử quét (SEM) 68 3.2.2 Khảo sát hoạt động cảm biến E2-MIP/EIS 68 3.2.3 Khảo sát đặc tính chọn lọc cảm biến E2-MIP 70 CHƯƠNG CẢM BIẾN MIP/EIS PHÁT HIỆN KHÁNG NGUYÊN ENROFLOXACIN .72 4.1 Khảo sát hoạt động cảm biến miễn dịch sử dụng đầu thu sinh học tự nhiên 73 4.2 Khảo sát hoạt động cảm biến xác định kháng nguyên ENRO sử dụng đầu thu sinh học nhân tạo ENRO-MIP 76 4.2.1 Khảo sát ảnh hưởng độ dày màng polyme đến độ nhạy cảm biến 76 4.2.2 Khảo sát hoạt động cảm biến xác định kháng nguyên ENRO sử dụng đầu thu sinh học nhân tạo ENRO-MIP 77 4.2.3 Đặc trưng quang phổ Raman .79 4.3 Cảm biến điện hóa enzyme HRP-SAM HRP-MIP 82 4.3.1 Cảm biến enzyme HRP-SAM/AuNPs/SPCE xác định H2O2 83 4.3.2 Cảm biến enzyme HRP-MIP/AuNPs/SPCE nhận biết enzyme HRP .85 CHƯƠNG CẢM BIẾN MIP/EIS PHÁT HIỆN KHÁNG SINH TRONG NƯỚC HỒ NUÔI THUỶ SẢN, DƯỢC PHẨM 88 5.1 Cảm biến CAP-MIP/EIS 89 5.1.1 Đặc trưng cảm biến CAP-MIP .89 5.1.2 Hoạt động cảm biến 91 5.1.3 Độ chọn lọc cảm biến 91 5.2 Cảm biến NOR-MIP/EIS 92 5.2.1 Đặc trưng cảm biến NOR-MIP/EIS 92 5.2.2 Khảo sát hoạt động cảm biến NOR-MIP/EIS 97 5.2.3 Độ lặp lại cảm biến .100 5.2.4 Đường đặc trưng chuẩn cảm biến 102 5.2.5 Độ chọn lọc cảm biến 104 5.3 Xác định dư lượng kháng sinh Norfloxacin nước hồ nuôi thủy sản 105 5.3.1 Kết phân tích sử dụng cảm biến NOR-MIP/EIS 105 5.3.2 Kết phân tích sử dụng phương pháp HPLC 107 5.4 Xác định hàm lượng kháng sinh Norfloxacin dược phẩm 108 v 5.4.1 Kết phân tích sử dụng cảm biến NOR-MIP/EIS 108 5.4.2 Kết phân tích sử dụng quang phổ UV-VIS 110 5.5 Cảm biến CF-MIP 112 5.5.1 Khảo sát hình thái bề mặt điện cực cảm biến .112 5.5.2 Khảo sát hoạt động cảm biến với đầu thu CF-MIP chế tạo theo phương pháp 113 5.5.2.1 Đặc trưng phổ tán xạ Raman 113 5.6.2.2 Xây dựng đường chuẩn cảm biến sử dụng đầu thu CF-MIP phương pháp phổ tổng trở điện hóa 114 5.5.3 Khảo sát hoạt động cảm biến với đầu thu CF-MIP chế tạo theo phương pháp 120 5.5.3.1 Xây dựng đường chuẩn cảm biến CF-MIP/EIS 120 5.5.3.2 Xác định dư lượng kháng sinh CF mẫu nước hồ nuôi thủy sản 122 5.6 Công nghệ vi lưu kết hợp quay ly tâm gắn vi mẫu lên điện cực cảm biến 124 5.6.1 Đặt vấn đề .124 5.6.3 Nghiên cứu ảnh hưởng dòng dung dịch buồng phản ứng CMF .127 5.6.4 Khảo sát hoạt động cảm biến MIP-QCM sử dụng CMF quy trình chế tạo 130 KẾT LUẬN 137 TÀI LIỆU THAM KHẢO 138 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN 150 PHỤ LỤC .a PHỤ LỤC C5.1 .a PHỤ LỤC C5.2 .c PHỤ LỤC C5.3 .d PHỤ LỤC C5.4 .e PHỤ LỤC C5.5 .g PHỤ LỤC C5.6 .h PHỤ LỤC C5.7 i PHỤ LỤC C5.8 j PHỤ LỤC C5.9 .k vi DANH MỤC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Tiếng Anh Tiếng Việt Ab Antibody Kháng thể AE Auxiliary electrode Điện cực phụ trợ AFP Alpha-fetoprotein Alpha-fetoprotein Ag Antigen Kháng nguyên ATTP Food safety An toàn thực phẩm AuNPs Gold nano-particles Hạt nano vàng BSA Bovine serum albumin Albumin huyết bò CA Chronoamperometry Kỹ thuật dòng – thời gian CAP Chloramphenicol Chloramphenicol CE Courter electrode Điện cực đối CF Ciprofloxacin Ciprofloxacin CFIA Canadian Food Inspection Agency Cơ quan tra thực phẩm Canada CMF Chip Microfluidic Centrifugation Chíp vi lưu kết hợp quay ly tâm CV Cyclic voltammetry Kỹ thuật quét điện tuần hoàn DAFF Australian Department of Agriculture, Forestry and Fisheries Bộ nông lâm ngư nghiệp Australia DNA Deoxyribo nucleic acid Axít deoxyribonucleic DPV Different pulse voltammetry Kỹ thuật dịng-thế xung vi phân Da Dalton Dalton EDC 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodimide 1-ethyl-3-(3dimethylaminopropyl) carbodimide EDS Energy dispertive spectroscopy (EDS) Phổ tán xạ lượng vii EIS Electrochemical impedance spectroscopy (EIS) Phổ tổng trở điện hóa ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay Xét nghiệm ELISA ENRO Enrofloxacin Enrofloxacin EST Estradiol Estradiol FAD Flavin adenine dinucleotide Flavin adenine dinucleotide FDA Food and Drug Administration Cơ quan quản lý thực phẩm JFCRF Japan Food Chemical Research Organization Tổ chức nghiên cứu hóa chất thực phẩm Nhật GCE Glassy carbon electrode Điện cực bon thủy tinh GDH Glucose dehydrogenase Enzyme glucose dehydrogenase GMC Graphitized mesoporous carbon Các bon lỗ xốp trung bình GOx Glucose oxidase Enzyme glucose oxidase hCG Human chorionic gonadotropin Human chorionic gonadotropin HPLC High performance liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao IGCA Immunogold chromatographic assay Xét nghiệm sắc ký miễn dịch sử dụng hạt vàng IUPAC Internatonal union of pure and applied chemistry Hiệp hội Quốc tế hóa học hóa học ứng dụng LCMS Liquid chromatography mass spectrometry Sắc ký lỏng khối phổ LOD Limit of detection Giới hạn phát mAb monoclonal antibody Kháng thể đơn dòng MHDA 16-Mercaptohexadecanoic acid Axít 16-mercaptohexadecanoic MIP Molercularly imprinted polyme Polyme in phân tử MIP-CSP Asymmetric stationary phase molecular printing polymes Polyme in phân tử pha tĩnh bất đối viii [130] S Bayoudh, A Othmane, L Ponsonnet, and H Ben Ouada, “Electrical detection and characterization of bacterial adhesion using electrochemical impedance spectroscopy-based flow chamber,” Colloids Surfaces A Physicochem Eng Asp., vol 318, no 1–3, pp 291–300, 2008, doi: 10.1016/j.colsurfa.2008.01.005 [131] J Paredes, S Becerro, F Arizti, A Aguinaga, J L Del Pozo, and S Arana, “Interdigitated microelectrode biosensor for bacterial biofilm growth monitoring by impedance spectroscopy technique in 96-well microtiter plates,” Sensors Actuators B Chem., vol 178, pp 663–670, 2013, doi: 10.1016/j.snb.2013.01.027 [132] I I Suni, “Impedance methods for electrochemical sensors using nanomaterials,” TrAC - Trends Anal Chem., vol 27, no 7, pp 604–611, 2008, doi: 10.1016/j.trac.2008.03.012 [133] J G Li, C Y Tsai, and S W Kuo, “Fabrication and characterization of inorganic silver and palladium nanostructures within hexagonal cylindrical channels of mesoporous carbon,” Polymers (Basel)., vol 6, no 6, pp 1794– 1809, 2014, doi: 10.3390/polym6061794 [134] J Hodkiewicz and T F Scientific, “Characterizing Carbon Materials with Raman Spectroscopy,” Prog Mater Sci., vol 50, pp 929–961, 2010, doi: 10.1088/0022-3727/46/12/122001 [135] M Osawa, N Matsuda, K Yoshii, and I Uchida, “Charge transfer resonance Raman process in surface-enhanced Raman scattering from paminothiophenol adsorbed on silver: Herzberg-Teller contribution,” J Phys Chem., 1994, doi: 10.1021/j100099a038 [136] S Sahoo, C K Chakraborti, P K Behera, and S C Mishra, “FTIR and Raman Spectroscopic Investigations of a Norfloxacin/Carbopol934 Polymerie Suspension,” J Young Pharm., 2012, doi: 10.4103/0975-1483.100017 [137] K J Huang, X Liu, W Z Xie, and H X Yuan, “Electrochemical behavior and voltammetric determination of norfloxacin at glassy carbon electrode modified with multi walled carbon nanotubes/Nafion,” Colloids Surfaces B Biointerfaces, vol 64, no 2, pp 269–274, 2008, doi: 10.1016/j.colsurfb.2008.02.003 [138] L Chierentin and H R N Salgado, “Performance Characteristics of UV and Visible Spectrophotometry Methods for Quantitative Determination of Norfloxacin in Tablets,” J Sci Res., vol 6, no 3, pp 531–541, 2014 [139] M M Ghoneim, A Radi, and A M Beltagi, “Determination of Norfloxacin by square-wave adsorptive voltammetry on a glassy carbon electrode,” J Pharm Biomed Anal., 2001, doi: 10.1016/S0731-7085(00)00475-1 [140] H Da Silva, J Pacheco, J Silva, S Viswanathan, and C Delerue-Matos, “Molecularly imprinted sensor for voltammetric detection of norfloxacin,” Sensors Actuators, B Chem., vol 219, pp 301–307, 2015, doi: 10.1016/j.snb.2015.04.125 [141] M Córdoba-Borrego, M Córdoba-Díaz, and D Córdoba-Díaz, “Validation of a high-performance liquid chromatographic method for the determination of 154 norfloxacin and its application to stability studies (photo-stability study of norfloxacin),” J Pharm Biomed Anal., vol 18, no 6, pp 919–926, 1999, doi: 10.1016/S0731-7085(98)00037-5 [142] R Aura, I Silvia, M Eleonora, and H Gabriel, “Quinolone Antibacterials: Commentary and Considerations Regarding UV Spectra and Chemical Structure.,” Acta Medica Marisiensis, vol 61, no 4, pp 328–336, 2015, doi: 10.1515/amma-2015-0084 [143] Mukthi Thammana, “A Review on High Performance Liquid Chromatography (HPLC)” Department of Pharmacy, Vignan Institute of Pharmaceutical Technology, Duvvada, Visakhapatanam, Andhra Pradesh, India [144] Andrzej Lasia, “Electrochemical Impedance Spectroscopy and its Applications”, DOI https://doi.org/10.1007/978-1-4614-8933-7] [145] R Elshafey, C Tlili, A Abulrob, A C Tavares, and M Zourob, “Label-free impedimetric immunosensor for ultrasensitive detection of cancer marker Murine double minute in brain tissue,” Biosens Bioelectron., vol 39, no 1, pp 220–225, 2013 [146] E Asav and M K Sezgintürk, “A novel impedimetric disposable immunosensor for rapid detection of a potential cancer biomarker.,” Int J Biol Macromol., vol 66, pp 273–80, 2014 [147] E Arkan, R Saber, Z Karimi, A Mostafaie, and M Shamsipur, “Multiwall carbon nanotube-ionic liquid electrode modified with gold nanoparticles as a base for preparation of a novel impedimetric immunosensor for low level detection of human serum albumin in biological fluids,” J Pharm Biomed Anal., vol 92, pp 74–81, 2014 [148] S K Arya and S Bhansali, “Anti-Prostate Specific Antigen (Anti-PSA) Modified Interdigitated Microelectrode-Based Impedimetric Biosensor for PSA Detection,” Biosens J., vol 1, pp 1–7, 2012 155 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN Phí Văn Tồn, Nguyễn Quốc Hảo Trương Thị Ngọc Liên, Vai trò hạt nano vàng công nghệ polyme in phân tử ứng dụng chế tạo cảm biến phát Chloramphenicol, Hội nghị VLCR khoa học Vật liệu toàn quốc lần thứ X, (10/2017), pp743-746, 2017, ISBN: 978-604-95-0326-9 Tin Phan Nguy, Toan Van Phi, Do T N Tram, Truong T N Lien, Kasper Eersels, Patrick Wagner, Development of an impedimetric sensor for the label-free detection of the amino acid sarcosine with molecularly imprinted polymer receptors, Sensors and Actuators B 246 (2017) 461–470, ISSN 0925-4005 Toan Van Phi, Yoshiaki Ukita, Lien T N Truong, Development of centrifugal microfluidic technology for ultra low-volume and ultra sensitive QCM-based biosensing system, The 5th Academic Conference on Natural Science for Young Scientists, Master and PhD Students from Asean Countries, 4-7 October, 2018, Da Lat, Vietnam Phí Văn Tồn, Nguyễn Quốc Hảo, Trương Thị Ngọc Liên, Cơng nghệ polyme in phân tử (MIP) ứng dụng chế tạo cảm biến xác định kháng sinh Chloramphenicol, Tạp chí khoa học & công nghệ trường Đại học Kỹ thuật, Số 129/ 2018 pp 74-78, ISSN:2354-1083 T N Lien Truong, Phi Van Toan and Nguyen Quoc Hao, Using AuNPsmodified screen-printed electrode in the development of molecularly imprinted polymer for artificial bioreceptor fabrication to improve biosensor sensitivity for 17β-estradiol detection, Adv Nat Sci.: Nanosci Nanotechnol IOP Publishing, 10 (2019) 015015 (6pp) online 20/3/2019, ISSN: 20436262 Bằng độc quyền sáng chế, Thiết bị vi dòng để gắn vi mẫu lên cảm biến sinh học phương pháp gắn vi mẫu lên cảm biến sinh học, số 21439, chủ đơn trường Đại học Bách Khoa Hà Nội (VN), tác giả Phí Văn Toàn (VN), Trương Thị Ngọc Liên (VN), Yoshiaki Ukita (JP), số điểm bảo hộ 14, Quyết định cấp số: 53603/QĐ-SHTT, ngày 01/07/2019, Cục Sở Hữu Trí Tuệ, Bộ Khoa Học Công Nghệ 156 157 PHỤ LỤC PHỤ LỤC C5.1 Kết phân tích HPLC nồng độ chất chuẩn khác nhau: a)10 ppb, b)20 ppb, c)30 ppb, d) 50 ppb, e)100 ppb f)150 ppb g) 200 ppb a b PHỤ LỤC C5.2 Kết phân tích HPLC a) mẫu nước hồ nuôi, b) mẫu nước hồ nuôi thêm 20 ppb kháng sinh NOR, c) mẫu nước hồ nuôi thêm 40 ppb kháng sinh NOR, d) mẫu nước hồ nuôi thêm 60 ppb kháng sinh NOR c PHỤ LỤC C5.3 Ảnh thực tế khu vực hồ nuôi thủy sản cung cấp mẫu nước sử dụng để phân tích d PHỤ LỤC C5.4 Sắc kí đồ rửa giải kháng sinh CF nồng độ 25 ppb, 50 ppb, 100 ppb, 250 ppb, 500 ppb, 750 ppb 1000 ppb đường chuẩn e f PHỤ LỤC C5.5 Sắc kí đồ mẫu nước hồ nuôi tôm sú, ngao mẫu nước hồ nuôi ngao sau phân cho thêm 50 ppb kháng sinh CF g PHỤ LỤC C5.6 Chíp vi lưu kết hợp quay ly tâm (CMF) tích hợp thiết bị QCM h PHỤ LỤC C5.7 Kích thước QCM thương mại cấu tạo đĩa CD với chíp vi lưu i PHỤ LỤC C5.8 Khảo sát CMF-QCM dạng overflow với dung dịch mẫu thử 15µL, 18µL 20µL j PHỤ LỤC C5.9 Khảo sát CMF-QCM dạng siphon với dung dịch mẫu thử 15µL 8µL k ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI PHÍ VĂN TỒN NGHIÊN CỨU VÀ CHẾ TẠO CẢM BIẾN SINH HỌC TRÊN CƠ SỞ CÔNG NGHỆ POLYME IN PHÂN TỬ ỨNG DỤNG PHÁT HIỆN MỘT SỐ PHÂN TỬ NHỎ (PROTEIN, KHÁNG NGUYÊN,... nano vàng ứng dụng cảm biến sinh học phát định lượng phân tử nhỏ Nghiên cứu chế tạo cảm biến sinh học phổ tổng trở điện hóa (EIS) sử dụng đầu thu sinh học nhân tạo MIP phát protein (sarcosine... cơng nghệ chế tạo đầu thu sinh học nhân tạo MIP Quy trình cơng nghệ chế tạo đầu thu sinh học nhân tạo MIP cho cảm biến phát phân tử nhỏ, kháng nguyên kháng sinh trình bày hình 2.1 Quy trình cơng