Nghiên cứu phòng trừ bệnh đốm nâu thanh long do nấm Neoscytalidium dimidiatum gây ra bằng Nano bạc được thực hiện từ tháng 9 đến 12 năm 2016 tại Viện khoa học kỹ thuật nông nghiệp miền nam với 2 thí nghiệm gồm thí nghiệm xác định hiệu lực của Nano bạc đối với nấm Neoscytalidium dimidiatum ở điều kiện in-vitro và thí nghiệm đánh giá hiệu lực phòng trừ bệnh đốm nâu thanh long của nano ở điều kiện nhà kính. Mời các bạn cùng tham khảo!
NGHIÊN CỨU PHÒNG TRỪ BỆNH ĐỐM NÂU THANH LONG DO NẤM NEOSCYTALIDIUM DIMIDIATUM GÂY RA BẰNG NANO BẠC, NANO ĐỒNG, ALBIT VÀ ANOLIT Chu Trung Kiên1, Nguyễn Thị Lan Anh2 Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Miền Nam Viện Khoa học Ứng dụng, trường Đại học Công nghệ TP HCM (HUTECH) TĨM TẮT Nghiên cứu phịng trừ bệnh đốm nâu long nấm Neoscytalidium dimidiatum gây Nano bạc thực từ tháng đến 12 năm 2016 Viện khoa học kỹ thuật nơng nghiệp miền nam với thí nghiệm gồm thí nghiệm xác định hiệu lực Nano bạc nấm Neoscytalidium dimidiatum điều kiện in-vitro thí nghiệm đánh giá hiệu lực phòng trừ bệnh đốm nâu long nano điều kiện nhà kính Kết cho thấy Nano bạc nồng độ 250ppm có khả ức chế 100% phát triển nấm N dimiditatum điều kiện in-vitro, phun Nano bạc nồng độ 250ppm trước nhiễm nấm N dimidiatum 10 ngày làm giảm > 90% số bệnh đốm nâu điều kiện nhà kính Keyword: Nano bạc, nấm Neoscytalidium dimidiatum, bệnh đốm nâu long GIỚI THIỆU Bệnh đốm nâu long nấm Neoscytalidium dimidiatum gây ra, phát sinh gây hại nghiêm trọng vùng trồng long xuất chủ lực Việt Nam gồm Bình Thuận, Long An, Tiền Giang với gần 50% tổng số 35.000ha bị nhiễm có xu hướng gia tăng mạnh diện tích mức độ gây hai dẫn đến không đáp ứng tiêu chuẩn xuất khẩu, gây thiệt hại kinh tế lớn cho nơng dân Biện pháp phịng trừ loại hóa chất trừ bệnh chính, hiệu nên phải phun thuốc thường xuyên gây thiệt hại nặng kinh tế cho người trồng long, ô nhiễm môi trường cân sinh thái Trên giới, loại sản phẩm nano Nano bạc, Nano đồng, Nano Coban hay Albit, Anolit ứng dụng rộng rãi nông nghiệp từ nhiều năm để tăng suất bảo vệ trồng khỏi loài dịch hại (Pal cs., 2007 Ouda, 2014) Ở Việt Nam, gần sản phẩm nano sử dụng dinh dưỡng vi lượng giúp tăng suất trồng, bên cạnh số nghiên cứu in vitro đánh giá khả kiểm soát nấm gây hại trồng thực cho thấy Nano bạc, Nano đồng có khả ức chế tốt phát triển nấm Colletotrichum sp., Fusarium oxysporum Rhizoctonia sonali (Chu Trung Kiên, 2015), chưa kiểm chứng với nấm Neoscytalidium dimidiatum gây bệnh đốm nâu long VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 2.1 Xác định hiệu lực nano bạc nấm Neoscytalidium dimidiatum điều kiện in vitro – Vật liệu thí nghiệm chính: nano bạc, nano đồng, Albit Anolit thiết bị phịng thí nghiệm 788 – Phương pháp nghiên cứu: – Bố trí thí nghiệm: Nano bạc nồng độ 50, 100, 150, 200, 250, 300ppm đối chứng khơng nhiễm Nano bạc bố trí hồn tồn ngẫu nhiên (RCD), lần nhắc lại Mỗi đĩa Petri ô sở – Chuẩn bị môi trường PDA thí nghiệm: Nấm N dimidiatum ni cấy môi trường PDA (MT1) để sử dụng làm nguồn nấm thí nghiệm 10ml mơi trường PDA trộn Nano bạc nồng độ thí nghiệm (MT2) 10ml môi trường PDA (MT0) cho vào đĩa Petri 9cm, môi trường đặc nguội, miếng MT1 chứa sợi nấm N dimidiatum có đường kính 2mm cấy vào tâm đĩa Petri chứa MT2 MT0 Sau đĩa Petri ủ điều kiện nhiệt độ phòng – Theo dõi phát triển nấm N dimidiatum: quan sát đo đường kính tản nấm 24 42 sau cấy Mỗi đĩa Petri đo đường kính tản nấm vị trí cách theo chu vi đĩa để tính đường kính tản nấm/ đĩa Tính hiệu lực Nano bạc dựa đường kính tản nấm phát triển mơi trường PDA (ɸ), cụ thể: – Hiệu lực ức chế (%) = [(A - B)/A)] x 100 Trong đó: A ɸ đĩa môi trường PDA không trộn nano; B ɸ đĩa môi trường PDA trộn nano 2.2 Đánh giá hiệu lực phòng trừ bệnh đốm nâu long Nano bạc, Nano đồng, Albit Anolit điều kiện nhà kính – Cơ sở thiết lập thí nghiệm: từ thí nghiệm phịng, chọn mức nồng độ Nano bạc có hiệu ức chế nấm N dimidiatum cao để đánh giá khả phòng trừ bệnh đốm nâu long điều kiện nhà lưới, đồng thời xác định phương pháp xử lý thuốc có hiệu cao – Phương pháp nghiên cứu: + Cách tiến hành thí nghiệm: Nano bạc nồng độ 250ppm Albit, Anolit, Nano đồng nồng độ khuyến cáo 2‰, 35ppm, 100ppm tương ứng sử dụng để phun ướt long thời điểm ký hiệu C1 C2: C1 phun lần đầu thời điểm trước nhiễm nấm 10 ngày, lần sau nhiễm nấm 10 ngày lần thời điểm 10 ngày sau phun lần 2, tổng số lần phun C2 phun lần đầu thời điểm phun lần C1, lần cách 10 ngày, tổng số lần phun C1 + Bố trí thí nghiệm: nghiệm thức (4 loại nano x thời điểm xử lý đối chứng khơng phun) bố trí hồn tồn ngẫu nhiên (RCD), nghiệm thức chậu + Chuẩn bị nguồn nấm N dimidiatum nhiễm nấm: nguồn nấm làm nhân mật số môi trường PDA, sau ngày nuôi cấy, thu thập bào tử, pha loãng nước cất trước phun lên Các hom long bệnh trồng chậu nhựa có dung tích 20 lít chứa giá thể đất (3 hom/chậu), thời điểm 30 ngày sau cành thứ xuất tiến hành gây 10 vết thương/cành kim vô trùng phun dung dịch bào tử nấm mật số 1,3 x 106cfu/ml ướt cây/chậu vào buổi chiều mát – Phương pháp theo dõi: theo dõi bệnh thời điểm trước xử lý nano ngày sau lần phun nano theo C2 – Chỉ tiêu theo dõi: + Tỷ lệ hại (TLH) (%) = (A/B) x 100 Trong đó: A: Tổng số cành bị hại; B: Tổng số cành điều tra + Chỉ số hại (CSH) tính theo cơng thức Townsend- Heuberger: 789 CSH (%) (a.b) 100 N T Trong đó: (a.b): Tổng tích số cành bị hại với cấp hại tương ứng N: Tổng số cành điều tra T: Cấp hại cao bảng phân cấp Thang phân cấp bệnh hại sau: Cấp 1: < 1% diện tích bị hại Cấp 3: - 5% diện tích bị hại Cấp 5: > – 25% diện tích bị hại Cấp 7: >25 – 50% diện tích bị hại Cấp 9: > 50% diện tích bị hại + Đánh giá hiệu lực phòng trừ thuốc theo công thức Abbott + Hiệu (%) = [1 – (Ta/Ca)] x 100 Trong đó: Ta: mức gây hại lơ thí nghiệm sau xử lý Ca: mức gây hại lô đối chứng sau xử lý KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Hiệu lực nano bạc (Nano bạc) nấm Neoscytalidium dimidiatum điều kiện in vitro Hiệu lực ức chế phát triển nấm N dimidiatum gây bệnh đốm nâu long Nano bạc ghi nhận Bảng cho thấy đường kính tản nấm mơi trường ni cấy có nano phát triển chậm có ý nghĩa thống kê (p 91% bệnh đốm nâu long so với đối chứng không phun nano, cao có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức phun Albit, nano đồng, Nano bạc-C2 792 Anolit-C2, nghiệm thức Anolit-C1 cho thấy khả phòng trừ bệnh đốm nâu làm giảm > 68% bệnh Bảng 3.3 Hiệu phòng trừ bệnh đốm nâu long nano điều kiện nhà lưới Nghiệm thức Giảm so với đối chứng (%) AUDPC (%.ngày) Tỷ lệ Chỉ số Tỷ lệ Chỉ số Albit 2‰-C1 989,97cde 261,45bc 46,11bcd 55,31bc Albit 2‰-C2 1.475,89abc 381,18ab 19,65de 34,84ed Anolit 35ppm-C1 584,27ef 144,81cd 68,19ab 75,25ab Anolit 35ppm-C2 834,20de 294,24bc 54,59bc 49,70bc Nano bạc 250ppm-C1 151,41f 19,99d 91,76a 96,58a Nano bạc 250ppm-C2 1.723,82ab 581,82a 6,15e 0,55e Nano đồng 100ppm-C1 1.278,46bcd 342,78bc 30,40cde 41,41bcd Nano đồng 100ppm-C2 1.575,85ab 416,99ab 14,21de 28,72ed 1.836,87a 585,01a 0,000 0,000 0,001 0,000 ĐC Prob Ghi chú: AUDPC số diện tích đường cong diễn tiến bệnh, C1 phun nano lần thứ trước nhiễm nấm 10 ngày, C2 phun nano lần thứ sau nhiễm nấm 10 ngày, ĐC không xử lý nano Các giá trị cột có ký tự theo sau khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê qua trắc nghiệm Duncan mức p = 0,05 Các số liệu chuyển đổi sang arcsin x1/2 trước xử lý thống kê, số chuyển thành 1/4n trước arcsin x1/2 KẾT LUẬN Sử dụng Nano bạc nồng độ ≥ 250ppm có khả ức chế hoàn toàn phát triển nấm Neoscytalidium dimidiatum gây bệnh đốm nâu long điều kiện in-vitro, Phun Nano bạc nồng độ 250ppm trước nhiễm nấm Neoscytalidium dimidiatum 10 ngày làm giảm > 96% bệnh đốm nâu long điều kiện nhà lưới TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Chu Trung Kiên, 2015 Ảnh hưởng nano bạc đến phát triển nấm Colletotrichum sp., Fusarium oxysporum Rhizoctonia sonali điều kiện in-vitro Báo cáo khoa học thường niên, Viện Khoa Học Kỹ Thuật Nông Nghiệp Miền Nam năm 2015 [2] Pal S., Tak Y.K., and Song J.M., 2007 Does the antibacterial activity of silver nanoparticles depend on the shape of the nanoparticle: A study of the gram-negative bacterium Escherichia coli Applied environ Microbiol., 73: 1712 – 1720 [3] Ouda S.M., 2014 Antifungal activity of silver and copper nanoparticles on two plant pathogens, alternaria alternate and botrytis cinerea Research journal of Microbiology 9(1): 34 – 42 793 ... phun Anolit cho thấy hiệu phòng trừ bệnh đốm nâu long, nghiệm thức khác hầu hết khơng có hiệu phòng trừ bệnh thời điểm theo dõi Kết phân tích thống kê cho thấy hiệu lực phòng trừ bệnh đốm nâu long. .. xử lý thống kê 3.2 Hiệu lực phòng trừ bệnh đốm nâu long nano điều kiện nhà lƣới 3.2.1 Diễn biến bệnh đốm nâu long thí nghiệm điều kiện nhà lưới Diễn biến bệnh đốm nâu long thí nghiệm ghi nhận Hình... nhiễm nấm 10 ngày; C2 phun nano lần thứ sau nhiễm nấm 10 ngày; TNN trước nhiễm nấm, TP trước phun nano, NSP ngày sau phun nano, ĐC không phun nano 3.3 Hiệu lực phòng trừ bệnh đốm nâu long nano