Tạo cây hoàn chỉnh và huấn luyện thích nghi giống hoa đồng tiền gerbera jamesoni

TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA SINH HỌC - - NG TH KIM OANH TạO CÂY HOàN CHỉNH Và HUấN LUYệN THíCH NGHI GIốNG HOA ĐồNG TIỊN GERBERA JAMESONI KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH SƯ PHẠM SINH HỌC VINH - 2012 TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA SINH HỌC - - TạO CÂY HOàN CHỉNH Và HUấN LUYệN THíCH NGHI GIèNG HOA §åNG TIỊN GERBERA JAMESONI KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH SƯ PHẠM SINH HỌC Người thực : Đặng Thị Kim Oanh Lớp : 49A1 - Sinh Người hướng dẫn : ThS Phạm Thị Như Quỳnh VINH - 05.2012 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới cô giáo - ThS Phạm Thị Như Quỳnh - cán hướng dẫn khoa học, thầy giáo Phùng Văn Hào - cán phịng thí nghiệm, tận tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ suốt thời gian nghiên cứu hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành cảm ơn ý kiến đóng góp vơ quý báu thầy cô tổ Sinh Lý - Hóa Sinh thầy khoa Sinh học, tạo điều kiện ủng hộ cán Phịng thí nghiệm ni cấy mơ - tế bào thực vật Khoa Sinh học, Trường Đại học Vinh Xin chân thành cảm ơn giúp đỡ, cung cấp tư liệu, hóa chất, nguồn giống Viện Công nghệ Sinh học (thuộc Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam) Cảm ơn gia đình, bạn bè ln động viên giúp đỡ tơi suốt q trình thực khóa luận tốt nghiệp Đây lần tham gia nghiên cứu khoa học thân khơng tránh khỏi thiếu sót, mong nhận ý kiến đóng góp quý báu thầy giáo, cô giáo bạn bè để đề tài tơi hồn thiện Vinh, tháng năm 2012 Sinh viên thực hiện: Đặng Thị Kim Oanh MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC NHỮNG CHỮ VIẾT TẮT TRONG KHĨA LUẬN DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC HÌNH MỞ ĐẦU 10 CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số nét hoa đồng tiền 1.1.1 Nguồn gốc, phân bố, vị trí phân loại hoa đồng tiền 1.1.1.1 Nguồn gốc 1.1.1.2 Phân loại thực vật 1.1.2 Đặc điểm thực vật học yêu cầu sinh thái hoa đồng tiền 1.1.2.1 Đặc điểm thực vật học 1.1.2.2 Yêu cầu sinh thái 1.1.3 Giá trị sử dụng hiệu kinh tế hoa đồng tiền 1.2 Tình hình nghiên cứu nhân giống invitro hoa đồng tiền giới Việt Nam 1.2.1 Trên giới 1.2.2 Ở Việt Nam CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 2.1 Đối tượng, địa điểm thời gian nghiên cứu 10 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 10 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 10 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 10 2.2 Nội dung nghiên cứu 10 2.3 Phương pháp nghiên cứu 11 2.3.1 Quy trình ni cấy mơ tế bào invitro 11 2.3.2 Vật liệu khởi đầu 12 2.3.3 Giai đoạn rễ, tạo hoàn chỉnh 12 2.3.4 Giai đoạn huấn luyện thích nghi 13 2.3.5 Giai đoạn trồng vườn ươm 14 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 16 3.1 Kết qủa nghiên cứu giai đoạn rễ, tạo hoàn chỉnh 16 3.2 Kết nghiên cứu giai đoạn huấn luyện thích nghi 23 3.3 Một số khó khăn cần ý tình thực đề tài 30 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 31 A Kết luận 31 B Đề nghị 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 32 NHỮNG CHỮ VIẾT TẮT TRONG KHÓA LUẬN BAP: Axit β - Indol acetic CNSH: Công nghệ sinh học CT: Công thức ĐC: Đối chứng ĐTST: Điều tiết sinh trưởng IAA: Axit Indol axetic KI: Kinetin Mm: Milimol MS: (Môi trường dinh dưỡng) Murashine & Sknoog 1962 NCM - TB: Nuôi cấy mô tế bào ppm: part per millon α - NAA: Axit α - Naphtyl acetic DANH MỤC CÁC BẢNG SỐ LIỆU Bảng 3.1: Ảnh hưởng nồng độ IAA đến thời gian rễ khả rễ hoa đồng tiền in vitro (sau tuần nuôi cấy) 17 Bảng 3.2: Ảnh hưởng nồng độ IAA đến khả sinh trưởng rễ hoa đồng tiền in vitro (sau tuần nuôi cấy) 19 Bảng 3.3: Ảnh hưởng loại giá thể đến sức sống hoa đồng tiền in vitro (sau tuần theo dõi) 23 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1 Ảnh hưởng nồng độ IAA đến thời gian rễ chồi 17 Hình 3.2: Ảnh hưởng nồng độ IAA đến số lượng rễ chiều dài rễ 19 Hình 3.3 Ảnh hưởng loại giá thể đến sức sống hoa đồng tiền in vitro giai đoạn vườn ươm 24 MỞ ĐẦU Từ thời xa xưa người biết thưởng thức đẹp thiên nhiên Hoa vào đời sống nét đẹp thiếu ngày lễ tết, hội hè, đình đám, trang trí nhà cửa Để đáp ứng nhu cầu tiêu thụ hoa ngày tăng, nhiều giống hoa, loài hoa có giá trị thẩm mỹ, có giá trị kinh tế, giá trị văn hoá đưa vào sản xuất quy mô lớn, dùng nhiều phương thức tạo giống khác nhau, ni cấy mơ tế bào thực vật invitro đánh giá phương pháp tiên tiến ưu việt Trong loài hoa ưa chuộng giới nay, đồng tiền đứng hàng thứ (chỉ sau hoa hồng, cẩm chướng, cúc đại đố, tulip) Đồng tiền lồi hoa có nhiều ưu điểm bật: hoa to, cánh dày, xếp nhiều tầng, màu sắc phong phú (đỏ, vàng, cam, trắng, phấn hồng, tím…) Trên bơng hoa có màu đơn hoăc nhiều màu sắc xen kẽ Hoa đồng tiền có cuống hoa to hoa lý tưởng để làm bó hoa, lẵng hoa, cắm nghệ thuật Ngồi đồng tiền trồng vào chậu để chơi chậu thời gian dài, đặt phòng làm việc, phòng khách phù hợp [24] Trong sản xuất, hoa đồng tiền loài hoa có giá trị kinh tế cao Hoa đồng tiền trồng lần cho thu hoạch quanh năm, cho khoảng 50 - 60 bơng / năm Một đất trồng tới 60000 hoa đồng tiền Giá bán hoa đồng tiền vào ngày thường 20003000 đồng / bông, vào ngày lễ tết 5000-6000 đồng / bơng.Vì giá hoa đồng tiền không cao hiệu kinh tế thu đơn vị diện tích cao [24] Hoa đồng tiền nước ta nhập nội từ năm 1940 đến phát triển nhiều tỉnh thành nước Tuy nhiên diện tích trồng hoa đồng tiền thấp, chất lượng hoa số vùng Nguyên nhân gặp nhiều khó khăn giống hoa đồng tiền Một khó khăn sản xuất hoa đồng tiền nguồn giống cung cấp cho trình trồng trọt chủ yếu tách thân, sinh trưởng mạnh giai đoạn đầu sau sinh trưởng chậm, nhanh già cỗi Do suất thấp, chất lượng sản phẩm hoa không cao, không ổn định Bên cạnh phương pháp tách thân số lượng giống lần tạo không nhiều khơng đáp ứng đủ nhu cầu thị trường sản xuất Phương pháp nhân giống vơ tính invitro bổ sung hạn chế cho kỹ thuật tạo giống cách tách thân sản xuất hoa đồng tiền ngày ý Kỹ thuật nhân giống invitro có ưu từ lượng nhỏ mẹ tạo quần thể đồng đêù, giữ đặc tính mẹ, có hệ số nhân giống cao, dễ khắc phục gặp điều kiện bất lợi, đặc biệt tạo lượng lớn bệnh, phẩm chất tốt đáp ứng nhu cầu giống Hiện Việt Nam có nhiều cơng trình nghiên cứu quy trình nhân giống vơ tính loại hoa công bố ứng dụng Tuy nhiên việc tiếp tục hoàn thiện đề xuất các quy trình kỹ thuật cho giống hoa cần thiết Đặc biệt điều kiện trồng trọt vùng nhiệt đới nước ta giai đoạn tạo hồn chỉnh huấn luyện thích nghi giống quy trình nhân giống vơ tính invitro cần quan tâm nghiên cứu Xuất phát từ thực tế trên, để góp phần hồn thiện quy trình nhân giống vơ tính invitro hoa đồng tiền chúng tơi thực đề tài: “Tạo hồn chỉnh huấn luyện thích nghi giống đồng tiền Gerbera jamesonii” Mục tiêu đề tài: Áp dụng sở khoa học công nghệ vi nhân giống để tìm điều kiện ni cấy invitro thích hợp cho giai đoạn tạo hồn chỉnh huấn luyện thích nghi giống đồng tiền quy trình nhân giống vơ tính invitro Góp phần hồn thiện quy trình nhân giống hoa đồng tiền phương pháp nuôi cấy mô, phục vụ cho cơng tác trì sản xuất giống hoa đồng tiền chất lượng cao để cung ứng cho sản xuất CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số nét hoa đồng tiền 1.1.1 Nguồn gốc, phân bố, vị trí phân loại hoa đồng tiền 1.1.1.1 Nguồn gốc Hoa đồng tiền có tên khoa học Gerbera Jamesonii (còn gọi hoa mặt trời hay hoa Phu Lăng), tìm thấy tỉnh Transvaal, Natal Swaziland Nam Phi Năm 1697 Relomen phát phía nam Châu Phi (Delasia) ông đưa vườn thực nghiệm nước Anh Irwin Lynch người tiến hành lai tạo giống đồng tiền với Sau người Pháp người Hà Lan tiến hành lai tạo dần hai nước trở thành trung tâm tạo giống đồng tiền giới Đến hoa đồng tiền trồng nhiều nước giới điển hình là: Hà Lan, Mỹ, Đức, Nhật Bản, Trung Quốc [15] Hoa đồng tiền phong phú đa dạng với nhiều màu sắc khác như: đỏ, cam, vàng, trắng, phấn hồng, tím bơng hoa có màu đơn nhiều màu xen kẽ với Hoa đồng tiền có cuống hoa to, hoa lý tưởng dùng để làm bó hoa, lẵng hoa, cắm nghệ thuật ưa chuộng Ngoài hoa đồng tiền trồng vào chậu để chơi chậu hoa suốt thời gian dài, đặt phòng làm việc, phòng tiếp khách phù hợp Hoa đồng tiền mười loại hoa ưa thích giới (sau hoa hồng, cúc, lan, cẩm chướng, lay ơn) Các nước có sản lượng hoa đồng tiền lớn là: Hà Lan, Colombia, Pháp, Trung Quốc [13], [15] Ở Việt Nam, hoa đồng tiền người Pháp đưa vào năm 1940 kỷ XX phát triển đến ngày chủ yếu giống đồng tiền đơn, hoa nhỏ Cây sinh trưởng phát triển tốt, thích nghi với điều Bảng 3.2: Ảnh hưởng nồng độ IAA đến khả sinh trưởng rễ hoa đồng tiền in vitro (sau tuần nuôi cấy) Công Số Số Độ dài Đặc điểm hình Chất thức chồi cấy rễ/ rễ (cm) thái rễ lượng rễ (ĐC) 30 0,38 2,11 Trắng đục Rễ CT1 30 2,61 3,21 Trắng mập, ngắn Rễ trung bình CT2 30 2,89 3,52 Trắng mập, ngắn Rễ trung bình CT3 30 3,09 4,21 Trắng mập, ngắn Rễ tốt CT4 30 3,28 5,62 Trắng mập, dài Rễ tốt 3.5 2.5 1.5 Số rễ / Chiều dài rễ (cm) Chiều dài rễ Số rễ / 1 0.5 0 ppm ppm ppm ppm ppm Nồng độ IAA Hình 3.2: Ảnh hưởng nồng độ IAA đến số lượng rễ chiều dài rễ 19 Nhận xét kết quả: - Chiều dài rễ, đặc điểm hình thái rễ tiêu quan trọng để giúp xác định nồng độ chất kích thích rễ thích hợp để tạo hoàn chỉnh - Qua nghiên cứu sau tuần nuôi cấy, số rễ / chiều dài rễ cơng thức khác nhau, có sai khác mặt thống kê Trong bổ sung - ppm IAA số rễ chiều dài rễ / có xu hướng tăng dần Cụ thể: + Số rễ / có xu hướng tăng từ 2,61 - 3,28 rễ / bổ sung vào môi trường nồng độ IAA từ - ppm, nồng độ ppm số rễ / nhiều đạt 3,28 rễ / + Chiều dài rễ / có xu hướng tăng từ 3,21 - 5,62 cm bổ sung vào môi trường nồng độ IAA từ - ppm, nồng độ ppm chiều dài rễ lớn đạt 5,62 cm + Về chất lượng rễ cơng thức thí nghiệm cho thấy: Sau tuần nuôi cấy CT1, CT2 rễ có màu trắng đục độ dài rễ thu tương ứng 3,21 cm 3,52 cm; Ở CT cho rễ trắng, mập ngắn, độ dài rễ sau tuần nuôi cấy đạt 4,21 cm; Ở CT4 rễ tốt sau tuần nuôi cấy cho rễ trắng, mập dài, độ dài rễ đạt 5,62 cm Nhận xét chung: Qua nghiên cứu thấy bổ sung vào môi trường nuôi cấy ppm IAA cho khả sinh trưởng chất lượng rễ chồi hoa đồng tiền in vitro đạt tốt thấy môi trường rễ thích hợp hoa đồng tiền in vitro là: (MS + 8g/l Agar + 45 g/l saccaroza +8 ppm IAA + ppm KI + 15% nước dừa + 0.5g than hoạt tính) 20 MỘT SỐ HÌNH ẢNH CỦA CÂY INVITRO Ở GIAI ĐOẠN RA RỄ Cây sau tuần rễ Công thức Công thức Công thức Công thức 21 Cây sau tuần rễ Cây sau tuần rễ 22 3.2 Kết nghiên cứu giai đoạn huấn luyện thích nghi Huấn luyện thích nghi giai đoạn khởi đầu in vitro bắt đầu bước sang giai đoạn (giai đoạn ngồi vườn ươm) Vì cần tạo mơi trường sống thích hợp với chế độ như: ánh sáng, ẩm độ, nhiệt độ hợp lý để thích nghi kịp thời đạt tỷ lệ sống sinh trưởng tối ưu Xuất phát từ yêu cầu trên, chúng tơi tiến hành nghiên cứu: - Thí nghiệm: Ảnh hưởng loại giá thể đến tỷ lệ sống, khả sinh trưởng phát triển hoa đồng tiền in vitro giai đoạn vườn ươm Kết giai đoạn huấn luyện thích nghi trình bày bảng Bảng 3.3: Ảnh hưởng loại giá thể đến sức sống hoa đồng tiền in vitro (sau tuần theo dõi) Công thức (giá thể) Đất mùn Số mẫu Tỷ lệ Số Chiều sống mới/ cao (%) (cm) Tăng trưởng Hình thái chiều cao/ in- vitro Đường kính 30 80,81 2,45 4,36 1,69 nhỏ, mỏng, màu xanh nhạt Cây sinh trưởng Trấu hun 30 69,17 3,67 5,47 2,26 tốt, mập, to màu xanh đậm, hay bị héo Đất mùn + Trấu Cây mập khỏe, 30 90,83 3,43 5,32 2,64 to, phiến dày, bị héo, sinh trưởng mạnh hun(1:1) 23 Tăng trưởng chiều cao / Số / 3.5 2.5 2.5 1.5 1.5 Số / Tăng trưởng chiều cao / (cm) 0.5 0.5 0 Đất mùn Trấu hun Đất mùn + trấu hun Giá thể Hình 3.3 Ảnh hưởng loại giá thể đến sức sống hoa đồng tiền in vitro giai đoạn vườn ươm Từ kết bảng hình cho thấy: - Giá thể đất mùn: Đối với giá thể đất mùn tỷ lệ sống sót cao (80,81%) tăng trưởng chiều cao / số tạo thấp so với hai giá thể lại Sau tuần trồng giá thể đất mùn chiều cao trung bình 4,36 cm, tăng trưởng chiều cao / 1,69 cm, số tạo 2,45 \ Cây invitro có đường kính nhỏ, mỏng có màu xanh nhạt - Giá thể trấu hun: Là giá thể khơng thích hợp để huấn luyện hoa đồng tiền inviro Do khả giữ nước trấu hun nên thời gian ngắn độ ẩm giá thể giảm, thiếu nước nên thường bị héo đổ rạp xuống Sau tuần trồng giá thể trấu hun, tỷ lệ sống in vitro cịn 69,17%, chiều cao trung bình 5,47 cm; tăng trưởng chiều cao 2,26 cm 24 số tăng thêm 3,67 / Cây in vitro sinh trưởng tốt, mập, to, dày phiến màu xanh đậm - Giá thể hỗn hợp trấu hun + đất mùn (1:1): Là giá thể phù hợp để huấn luyện hoa đồng tiền giá thể lại Đối với giá thể này, tỷ lệ sống in vitro đạt 90,83%; chiều cao trung bình / 5,32 cm, tăng trưởng chiều cao 2,64 cm; số mới/cây 3,43 Đường kính thân lớn, to, phiến dày màu xanh đậm, sinh trưởng tốt Như vậy: Trong điều kiện huấn luyện thích nghi, với ẩm độ khơng khí 80 - 85%, ẩm độ giá thể 65 - 80%, nhiệt độ 25 - 30%, nguồn khoáng bổ sung dung dịch dinh dưỡng MS giá thể thích hợp để huấn luyện thích nghi hoa đồng tiền in vitro hỗn hợp đất mùn + trấu hun (tỷ lệ 1:1) 25 MỘT SỐ HÌNH ẢNH CỦA CÂY ĐỒNG TIỀN Ở GIAI ĐOẠN HUẤN LUYỆN THÍCH NGHI Cây invitro trước lúc đưa vườn ươm 26 Cây invitro sau tuần đưa vườn ươm Giá thể đất mùn Giá thể trấu hun Giá thể hỗn hợp đất mùn + trấu hun 27 Cây hoa đồng tiền sau tuần đưa vườn ươm Giá thể đất mùn Giá thể trấu hun Giá thể hỗn hợp đất mùn + trấu hun 28 Nhận xét chung: Từ kết thu được, đề xuất giai đoạn rễ giai đoạn huấn luyện thích nghi quy trình nhân giống hoa đồng tiền in vitro sau: Điều kiện ni cấy Quy trình Cây giống Các đỉnh sinh trưởng Giai đoạn vào mẫu, cấy gây Mẫu in vitro Giai đoạn nhân nhanh Môi trường rễ MS + 8g/l Agar + 45g/l saccaroza + 150ml nước dừa + ppm IAA + ppm KI + 0.5g than hoạt tính Thời gian rễ là tuần Chồi in vitro Giai đoạn rễ, tạo hoàn chỉnh Cây in vitro hoàn chỉnh Giá thể sử dụng để huấn luyện: Giai đoạn huấn luyện Đất hỗn hợp trấu hun + đất mùn thích nghi Thời gian huấn luyện tuần Cây in vitro Vườn ươm 29 3.3 Một số khó khăn cần ý tình thực đề tài a Giai đoạn rễ Nói đến khó khăn thường gặp NCM - TB, khó khăn khó khăn lớn xuyên suốt giai đoạn rễ nhiễm nấm, vi khuẩn Nhất vào thời gian thực đề tài (từ tháng 10 / 2011 tháng / 2012) khoảng thời gian có độ ẩm khơng khí cao nên thích hợp cho nấm vi khuẩn phát triển Trong lần đầu cấy mẫu, hầu hết bình nhiễm nấm chúng tơi phải thực lại nhiều lần Các môi trường NCM - TB yêu cầu vô trùng cần sơ suất nhỏ thao tác kỹ thuật, thời tiết, độ ẩm phịng khơng đảm bảo, bào tử nấm mốc, vi khuẩn rơi vào bình ni Mơi trường thuận lợi bình ni tạo điều kiện cho vi khuẩn, nấm phát triển nhanh chóng, gây thiệt hại nhiều mặt Do NCM - TB cần trọng đến kỹ thuật phịng thí nghiệm, đảm bảo thao tác khử trùng phòng cấy, box cấy thao tác kỹ thuật người cấy để đảm bảo độ vô trùng cao b Giai đoạn huấn luyện Ở giai đoạn huấn luyện đưa vườn ươm, nấm vi khuẩn đối tượng gây nhiều khó khăn Trong giai đoạn tiếp xúc với nấm vi khuẩn tránh khỏi, song cần ý để tiếp xúc khơng có ảnh hưởng đến phát triển Cần ý tăng cường sức đề kháng cho tạo điều kiện môi trường thích hợp cho phát triển Cây invitro đưa từ bình ni vốn có đầy đủ chất dinh dưỡng, nhiệt độ, độ ẩm, ánh sáng tốt nhất, đưa môi trường sức đề kháng yếu, khó tồn tại, giai đoạn đầu phải tạo cho môi trường tự nhiên gần giống với mơi trường phịng thí nghiệm Ngồi việc đảm bảo chất dinh dưỡng phải ý đến chế độ tưới tiêu chiếu sáng hợp lý, sau điều chỉnh dần để từ từ thích nghi với mơi trường bình thường 30 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ A Kết luận Từ kết nghiên cứu thu chúng tơi có số kết luận sau: Giai đoạn rễ tạo in vitro hồn chỉnh Mơi trường rễ thích hợp cho chồi hoa đồng tiền Gerbera Jamesonii Bolus là: MS +8 g/l Agar + 45 g/l saccaroza + 15% nước dừa + ppm IAA + ppm KI + 0,5 g / l than hoạt tính Thời gian rễ tạo in vitro hoàn chỉnh tuần Điều kiện ni cấy phịng thí nghiệm là: 25 ± 20 C, ẩm độ 65 70%, cường độ ánh sáng 2000 - 2500 lux thời gian chiếu sáng 10 h / ngày Giai đoạn huấn luyện thích nghi Giá thể thích hợp để huấn luyện hoa đồng tiền in vitro hỗn hợp đất mùn + trấu hun Điều kiện huấn luyện thích nghi là: Độ ẩm khơng khí 80 - 85%, độ ẩm giá thể 65 - 80%, nhiệt độ 25 - 300C, nguồn khoáng bổ sung dung dịch dinh dưỡng MS phun lên dạng sương mù Thời gian huấn luyện thích nghi tuần B Đề nghị Vì thời gian nghiên cứu có hạn nên chúng tơi đề xuất số kiến nghị sau: Cần tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng IAA nồng độ lớn ppm trình phát sinh rễ hoa đồng tiền (giai đoạn rễ tạo hoàn chỉnh) Nghiên cứu ảnh hưởng IBA, -NAA, than hoạt tính đến khả rễ giống hoa đồng tiền Gerbera Jamesonii Bolus để từ lựa chọn chất ĐTST thích hợp khả rễ giống hoa đồng tiền 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhị, Lê Thị Muội (1997), CNSH thực vật cải tiến giống trồng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội Đặng Văn Đông, Nguyễn Xuân Linh (2000), Hiện trạng giải pháp phát triển hoa cảnh ngoại thành Hà Nội, Kết nghiên cứu khoa học rau (1998 - 2000), Nxb Văn hóa dân tộc Hà Nội, tr 32 - 47 Đặng Văn Đông, Đinh Thế Lộc (2004), Công nghệ trồng hoa cho thu nhập cao, Nhà xuất Lao động Xã hội Nguyễn Xuân Hải, Nguyễn Thị Kim Lý (2004), Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể dinh dưỡng cho hoa cúc sau nhân giống phương pháp nuôi cấy mô tế bào Tạp chí NN&PTNT, số 11, tr 1539 1541 Đặng Thị Thanh Hương (2002), Nghiên cứu giống hoa Đồng Tiền phương pháp nuôi cấy in vitro Luận văn tốt nghiệp Trường đại học Nông Nghiệp I Hà Nội Nguyễn Xuân Linh, Nguyễn Thị Kim Lý (2005), Ứng dụng công nghệ sản xuất hoa, Nxb Lao động Hà Nội Trần Đình Long (1997), Chọn giống trồng, Nhà xuất Nơng nghiệp Nguyễn Hồng Lộc, Lê Việt Dũng, Nuôi cấy mô tế bào thực vật, Viện tài nguyên môi trường & Công nghệ sinh học, Đại học Huế Dương Minh Nga cs (2003), Những vấn đề khoa học sống, Hội nghị cơng nghệ sinh học tồn quốc 10 Trần Duy Quý (1997), Các phương pháp chọn tạo giống trồng, Nhà xuất Nông nghiệp 11 Hoàng Thị Sản (1999), Phân loại thực vật học, Nhà xuất Giáo dục 32 12 Vũ Quang Sáng, Nguyễn Thị Nhẫn, Mai Thị Tân, Nguyễn Thị Kim Thanh (2007), Sinh lý thực vật ứng dụng, Bộ GD & ĐT, Trường Đại học Nông nghiệp I Hà Nội 13 Nguyễn Quang Thạch, Hoàng Thị Nga, Nguyễn Thị Phương Hoa (2003), Báo cáo xây dựng quy trình nhân giống hoa Đồng Tiền kỹ thuật ni cấy mơ, Tạp chí Nơng nghiệp & PTNT, Số 8/2003 14 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Thị Phương Thảo (2004), Giáo trình công nghệ sinh học nông nghiệp, Nhà xuất Nông nghiệp 15 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Phương Hoa (2005), Nghiên cứu thăm dò ảnh hưởng Colchicine, tia Gama nguồn Co60 hoa Đồng Tiền Nam Phi (Gerberra Jamesonii) in vitro - Luận án thạc sỹ nông nghiệp 16 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật - nghiên cứu áp dụng, Nhà xuất Nông nghiệp, tr - 54 17 Nguyễn Văn Tới (2007), Ứng dụng Khoa học công nghệ sản xuất hoa Đà Lạt, Thông tin khoa học công nghệ số 3/2007, Sở khoa học công nghệ Lâm Đồng 18 Nguyễn Văn Uyển chủ biên tác giả (1998), Nuôi cấy mô thực vật phục vụ cho công tác chọn giống trồng Trung tâm CNSH 19 Đỗ Văn Vịnh (2002), Công nghệ sinh học trồng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 20 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2006), Công nghệ sinh học, tập Nxb Giáo dục Hà Nội 21 Vũ Văn Vụ (chủ biên) (2005), Sinh lý thực vật Nxb Giáo dục Hà Nội 22 http://www.Dalat.gov.nn/rauhoadl/Desktop.aspx? 23 http://www.khoahoc.com.vn 24 http://www.Rauhoaquavietnam.vn 33 ... nhân giống vơ tính invitro hoa đồng tiền chúng tơi thực đề tài: ? ?Tạo hồn chỉnh huấn luyện thích nghi giống đồng tiền Gerbera jamesonii” Mục tiêu đề tài: Áp dụng sở khoa học cơng nghệ vi nhân giống. .. loại hoa nghi? ?n cứu nhân nhanh công nghệ hoa đồng tiền, hoa loa kèn, hoa lily, hoa cẩm chướng, hoa chuông [3], [13] Đồng tiền trồng từ lâu, song chủ yếu giống hoa đồng tiền đơn việc nghi? ?n cứu giống. .. cho trình nghi? ?n cứu chồi nuôi cấy ống nghi? ??m cụm chồi hoa đồng tiền sử dụng để làm nguyên liệu tạo hoàn chỉnh huấn luyện thích nghi chồi có - đồng 2.3.3 Giai đoạn rễ, tạo hoàn chỉnh Để nghi? ?n cứu