quá trình chiết xuất và phân lập 1 số chất từ rễ cây sáo tam phân, quá trình thực tập tại viện khoa học hàn lâm. sử dụng phương pháp ngâm chiết, sắc ký lớp mỏng, sắc ký cột và sử dụng các thiết bị phân tích như LCMS để định danh 1 số hợp chất có hoạt tính sinh học trong rễ cây sáo tam phân
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA KỸ THUẬT THỰC PHẨM & MÔI TRƯỜNG BÁO CÁO THỰC TẬP TỐT NGHIỆP Tên đơn vị thực tập : VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM Thời gian thực tập : từ 01/03/2021 đến 31/05/2021 Người hướng dẫn : TS PHÙNG VĂN TRUNG Giáo viên hướng dẫn : NGUYỄN THỊ NGỌC LAN SV thực tập : UNG NGUYỄN HOÀNG KIẾM Mã số sinh viên : 1711546095 Lớp : 17DHH1A Tp HCM, tháng 05 năm 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA KỸ THUẬT THỰC PHẨM & MÔI TRƯỜNG BÁO CÁO THỰC TẬP TỐT NGHIỆP QUÁ TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN TỪ RỄ CÂY XÁO TAM PHÂN Tên đơn vị thực tập : VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM Thời gian thực tập : từ 01/03/2021 đến 31/05/2021 Người hướng dẫn : TS PHÙNG VĂN TRUNG Giáo viên hướng dẫn : NGUYỄN THỊ NGỌC LAN SV thực tập : UNG NGUYỄN HOÀNG KIẾM Mã số sinh viên : 1711546095 Lớp : 17DHH1A Tp HCM, tháng 05 năm 2021 LỜI NĨI ĐẦU Trong vịng hai thập kỉ gần đây, xu hướng quay lại sử dụng sản phẩm thuốc có nguồn gốc thảo dược để phịng trị bệnh trở nên phổ biến Dược điển nước khu vực châu Á Việt Nam, Hàn Quốc, Trung Quốc, Nhật Bản có chuyên luận dược liệu Một số chuyên luận dược liệu đưa vào Dược điển Mĩ, châu Âu Theo ước tính, 70% dân số toàn cầu sử dụng thuốc từ dược liệu chăm sóc sức khỏe ban đầu cộng đồng Sự phát triển nhanh chóng thuốc từ cỏ xu hướng nước phương Tây nhằm tăng cường tự điều trị, lo lắng tác dụng bất lợi chế phẩm hóa dược nâng cao nhận thức cộng đồng vai trò thuốc từ dược liệu điều trị bệnh mạn tính, bệnh thơng thường Chính lý mà em chọn Viện Hàn Lâm khoa học nơi để thực tập nhằm học hỏi tích góp kinh nghiệm nơi có đầy đủ trang thiết bị phân tích đại giúp cho việc tách chiết, nghiên cứu xác định cấu trúc tác dụng dược lí hợp chất thiên nhiên Và lí để em chọn đề tài chiết xuất phân lập số hợp chất thiên nhiên từ rễ xáo tam phân, loại có tiềm phát triển sản phẩm hoá dược sau Em xin chân thành cảm ơn Thầy Cô ngành Công nghệ Kỹ thuật Hóa học tạo điều kiện cho em trình thực tập Em cảm ơn Thầy Phùng Văn Trung, Cô Nguyễn Thị Ngọc Lan anh chị nghiên cứu viên tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em hồn thành đợt thực tập Do cịn nhiều hạn chế mặt kiến thức mặt kinh nghiệm nên báo cáo không tránh khỏi việc có thiếu sót Kính mong Quý Thầy/Cơ cho em ý kiến chia sẻ kinh nghiệm để báo cáo em trở nên hồn thiện Xin chân thành cảm ơn! Ung Nguyễn Hoàng Kiếm i TRƯỜNG ĐH NGUYỄN TẤT THÀNH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA KỸ THUẬT THỰC PHẨM VÀ MÔI TRƯỜNG Độc lập - Tự - Hạnh phúc Tp Hồ Chí Minh, ngày 31 tháng 05 năm 2021 NHẬN XÉT CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên: Ung Nguyễn Hoàng Kiếm Mã số sinh viên: 1711546095 Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ Lớp: 17DHH1A Tên đề tài: QUÁ TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN TỪ RỄ CÂY XÁO TAM PHÂN Nhận xét Về hình thức: Về nội dung: Đánh giá Trưởng Bộ môn (Ký ghi rõ họ tên) Người hướng dẫn (Ký ghi rõ họ tên) Nguyễn Đình Phúc Nguyễn Thị Ngọc Lan ii NHẬT KÝ THỰC TẬP Tuần Thời gian Nội dung thực tập Từ 01/03/2021 Đọc tìm hiểu rễ Xáo tam phân Đến 05/03/2021 thông qua báo Học cách vận hành, nguyên lý cấu tạo Từ 08/03/2021 số thiết bị phân tích: GC-MS, Đến 12/03/2021 MS Xử lý rễ trước thực Từ 15/03/2021 trình chiết Đến 19/03/2021 Tiến hành ngâm chiết thu cao tổng Xử lý rễ trước thực Từ 22/03/2021 trình chiết Đến 26/03/2021 Tiến hành ngâm chiết thu cao tổng Tiến hành ngâm chiết thu cao tổng Học cách chấm sắc ký bảng mỏng, Từ 29/03/2021 nguyên lý sắc ký bảng mỏng Đến 02/04/2021 Chấm bảng mỏng xác định sơ thành phần cao tổng Lắc phân đoạn cao tổng để thu cao phân đoạn n-hexane, EtOAc, MeOH Từ 05/04/2021 Đến 09/04/2021 Chấm bảng mỏng cao phân đoạn để xác định sơ thành phần cao phân đoạn Phân lập hỗn hợp chất cao phân đoạn EtOAc sử dụng sắc ký cột (cột 1) Từ 12/04/2021 Đến 16/04/2021 Chấm bảng mỏng phân đoạn nhỏ cột 1, gom phân đoạn giống thành phân đoạn lớn cột Từ 19/04/2021 Phân lập chất phân đoạn lớn Đến 23/04/2021 cột sử dụng sắc ký cột (cột 2) iii Chữ ký người hướng dẫn đơn vị thực tập Chấm bảng mỏng phân đoạn nhỏ cột 2, gom phân đoạn giống thành phân đoạn lớn cột Rửa kết tinh thu được, làm Phân lập chất phân đoạn lớn cột sử dụng sắc ký cột (cột 3) Từ 26/04/2021 Chấm bảng mỏng phân đoạn nhỏ Đến 30/04/2021 cột 3, gom phân đoạn giống thành phân đoạn lớn cột Rửa kết tinh thu được, làm Phân lập chất phân đoạn lớn cột sử dụng sắc ký cột (cột 4) 10 Từ 03/05/2021 Chấm bảng mỏng phân đoạn nhỏ Đến 07/05/2021 cột 4, gom phân đoạn giống thành phân đoạn lớn cột Rửa kết tinh thu được, làm Làm chất phân lập 11 12 Từ 10/05/2021 Xác định công thức phân tử chất dựa Đến 14/05/2021 phương pháp: sắc ký bảng mỏng phương pháp khối phổ MS Gom làm chất xác định Từ 17/05/2021 công thức Đến 21/05/2021 Viết báo cáo Nhận xét người hướng dẫn đơn vị thực tập: … … … … … … … … iv Thông tin liên hệ: Họ tên người trực tiếp hướng dẫn: .…… Chức vụ: Số điện thoại: Email: Tp Hồ Chí Minh, ngày 31 tháng 05 năm 2021 Người hướng dẫn Sinh viên thực (Ký ghi rõ họ tên) (Ký ghi rõ họ tên) TS Phùng Văn Trung Ung Nguyễn Hồng Kiếm v MỤC LỤC Trang Lời nói đầu i Nhận xét giảng viên hướng dẫn ii Nhật ký thực tập iii Mục lục vi Danh mục bảng biểu, hình viii Danh mục cụm từ viết tắt x Chương GIỚI THIỆU VỀ VIỆN HÀN LÂM 1.1 Sơ lược Viện .1 1.2 Chức nhiệm vụ 1.2.1 Chức 1.2.2 Nhiệm vụ .2 1.3 Cơ cấu tổ chức quản lý đơn vị thực tập 1.4 Các thành tựu hợp tác quốc tế 1.4.1 Các thành tựu 1.4.2 Hoạt động hợp tác quốc tế .5 Chương QUÁ TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN TỪ RỄ CÂY XÁO TAM PHÂN 2.1 Nguyên liệu Các hợp chất phân lập .7 2.1.1 Rễ xáo tam phân 2.1.2 Hóa chất, dụng cụ thiết bị .10 2.1.3 Các hợp chất phân lập 10 2.2 Quy trình chiết phân lập chất .12 2.2.1 Quy trình xử lý cao tổng cao phân đoạn 12 vi 2.3 Xác định công thức phân tử chất 23 2.3.1 Xác định chất thông qua sắc ký bảng mỏng: .23 2.3.2 Xác định hợp chất MS 25 2.4 Các thiết bị 27 Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 31 vii DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU, HÌNH Bảng 2.1 Tên xuất sứ hóa chất sử dụng Hình 1.1 Trung tâm nghiên cứu chuyển giao công nghệ thuộc viện hàn lâm Hình 2.1 Xáo tam phân Bình Dương Hình 2.2 Cơng thức cấu tạo hợp chất: ostruthin (1), 8-methoxyostruthin (2), 7hydroxycoumarin (3), 7-methoxycoumarin (4), oriciacridon (5), 5hydroxynoracronycin (6), citruscinin-I (7), and glycocitrin-III (8) .8 Hình 2.3 Cơng thức cấu tạo hợp chất: luvangetin (1), 6-(2-hydroxyethyl)-2,2dimethyl-2H-1-benzopyran (2), 8-geranyl-7-hydroxycoumarin (3), 6-(6’,7’-dihydroxy3’,7’-dimethylocta-2’-enyl)-7-hydroxycoumarin (4) and 6-(7-hydroperoxy 3,7dimethylocta-2,5-dienyl)-7-hydroxycoumarin (5) .9 Hình 2.4 Rễ cắt lát Hình 2.5 Công thức cấu tạo Ostruthin 10 Hình 2.6 Cơng thức cấu tạo β-Sitosterol .11 Hình 2.7 Cơng thức cấu tạo 7-Hydroxycoumarin 12 Hình 2.8 Quy trình chiết cao tổng 12 Hình 2.9 Quy trình xử lý cao n-hexane 13 Hình 2.10 Quy trình xử lý cao EtOAc 14 Hình 2.11 Bản mỏng cao phân đoạn soi UV 15 Hình 2.12 Quy trình phân lập hợp chất từ cao phân đoạn EoAT 16 Hình 2.13 Sắc ký cột 18 Hình 2.14 SKLM cột 19 Hình 2.15 Hợp chất PT01 20 Hình 2.16 SKLM cột 21 viii Hình 2.13 Sắc ký cột Bước 3: Gom phân đoạn Để kiểm tra thành phần phân đoạn, ta sử dụng SKLM với hệ dung môi giải ly phân đoạn hứng, tiến hành nhúng với thuốc thử 10% H2SO4/EtOH Sau đợi SKLM khơ Kiểm tra chất hấp phụ tia UV: Tiến hành soi tia UV với bước sóng 254 nm Kiểm tra chất khơng hấp phụ tia UV: SKLM tiếp tục đem sấy cho màu phút 105oC Quan sát mỏng: Các bảng mỏng có vết tương tự gom thành phân đoạn Ta gọp phân đoạn lớn HE2, HE4 EM2 Với khối lượng phân đoạn cao 19.3 g, 9.6g 10.1 g Quy trình phân lập chất từ cao phân đoạn HE2 sắc ký cột Bước trộn silicagel bước chuẩn bị cột phương pháp tương tự cột Kích thước cột: 4,2 cm x 60 cm Lót lớp bơng gịn mỏng trí van để tránh silica gel bị chảy nạp vào cột 18 Lượng silica gel: 450 g silica gel Dung môi lên cột 100% n-hexane ta gom phân đoạn cột dung môi giải ly H:E (80:20), để khơng bỏ sót chất nên ta chọn dung mơi có độ phân cực độ phân cực hệ dung môi giải ly đặt tên HE1A Ta tăng độ phân cực dung môi lên, sử dụng hệ dung môi H:E (90:10) lần tăng 10% để ta khơng bỏ sót chất tách Đối với hệ dung môi H:E (90:10), thao tác tiến hành tương tự Lúc bây giờ,ta hứng phân đoạn với thể tích hũ hứng 100 ml, tên hũ đặt HE2A:1, hũ thứ hai HE2A:2,… Tương tự vậy, ta thay hệ dung môi H:E với tỷ lệ 80:20, 70:30, 60:40, 50:50, 40:60, 30:70, 20:80, 10:90 Cách đặt tên tương ứng Rồi đến E:M với tỷ lệ 100:0, 60:40, 40:60, 0:100 Ta hứng phân đoạn đặt tên tương tự Khi cột chạy đến hệ dung mơi H:E (80:20) Thì xuất kết tinh quanh vị trí van Chất kết tinh phần dạng tinh thể bám van, phần dạng lỏng chảy vào bình hứng Kết xuất từ hũ tên HE3A:2 Cho đến tên HE3A:6 Kết bám van gom lại vào hũ Còn chất kết tinh dạng lỏng lẩn dung dịch đem quay Sau tiến hành rửa thu kết tinh (dung mơi chọn có khả hòa tan chất trừ kết tinh) Kết tinh bám van rửa Hình 2.14 SKLM cột Thu 4.5 g chất Chất kết tinh đặt tên PT01 19 Hợp chất PT01 có dạng bột màu vàng nhạt vơ định hình Hình 2.15 hợp chất PT01 a) dạng bột vàng nhạt b) dạng tinh thể vàng Quy trình phân lập chất từ cao phân đoạn HE4 sắc ký cột Bước trộn silicagel bước chuẩn bị cột phương pháp tương tự cột Kích thước cột: 2,4 cm x 74 cm Lót lớp bơng gịn mỏng trí van để tránh silica gel bị chảy nạp vào cột Lượng silica gel: 950 g silica gel Dung môi lên cột hệ H:E (30:80) ta gom phân đoạn cột dung môi giải ly H:E (40:60), để khơng bỏ sót chất nên ta chọn dung mơi có độ phân cực độ phân cực hệ dung môi giải ly chấm mỏng với nhiều hên dung mơi hệ H:E (30:80) cho vệt chất có rf nên em chọn hệ dung môi đặt tên HE1B Ta tăng độ phân cực dung môi lên, sử dụng hệ dung môi H:E (90:10) lần tăng 10% để ta khơng bỏ sót chất tách Đối với hệ dung môi H:E (40:60), thao tác tiến hành tương tự Lúc bây giờ,ta hứng phân đoạn với thể tích hũ hứng 100 ml, tên hũ đặt HE2B:1, hũ thứ hai HE2B:2,… Tương tự vậy, ta thay hệ dung môi H:E với tỷ lệ 40:60, 30:70, 20:80, 10:90 Cách đặt tên tương ứng Rồi đến E:M với tỷ lệ 100:0, 60:40, 40:60, 0:100 Ta hứng phân đoạn đặt tên tương tự 20 Khi cột chạy đến hệ dung môi H:E (40:60) xuất kết tinh quanh vị trí van Chất kết tinh phần dạng tinh thể bám van, phần dạng lỏng chảy vào bình hứng Kết xuất từ hũ tên HE2B:4 Cho đến tên HE2B:5 Kết bám van gom lại vào hũ Còn chất kết tinh dạng lỏng lẩn dung dịch đem cô quay Sau tiến hành rửa thu kết tinh (dung mơi chọn có khả hòa tan chất trừ kết tinh) Kết tinh bám van rửa Hình 2.16 SKLM cột Thu 94 mg chất Chất kết tinh đặt tên PT02 Hợp chất PT02 có dạng bột trắng vơ định hình Hình 2.17 hợp chất PT02 21 Quy trình phân lập chất từ cao phân đoạn EM2 sắc ký cột Bước trộn silicagel bước chuẩn bị cột phương pháp tương tự cột Kích thước cột: 2,7 cm x 74 cm Lót lớp bơng gịn mỏng trí van để tránh silica gel bị chảy nạp vào cột Lượng silica gel: 500 g silica gel Dung môi lên cột hệ dung môi E:M (70:30) ta gom phân đoạn cột dung môi giải ly E:M (60:40), để không bỏ sót chất nên ta chọn dung mơi có độ phân cực độ phân cực hệ dung môi giải ly chấm mỏng với nhiều hệ dung mơi hệ E:M (70:30) cho vệt chất có rf nên em chọn hệ dung môi đặt tên EM1C Ta tăng độ phân cực dung môi lên, sử dụng hệ dung môi E:M (60:40) lần tăng 10% để ta khơng bỏ sót chất tách Đối với hệ dung môi E:M (60:40), thao tác tiến hành tương tự Lúc bây giờ,ta hứng phân đoạn với thể tích hũ hứng 100 ml, tên hũ đặt EM2C:1, hũ thứ hai EM2C:2,… Tương tự vậy, ta thay hệ dung môi E:M với tỷ lệ 50:50, 40:60, 30:70, 20:80, 10:90 Cách đặt tên tương ứng.Ta hứng phân đoạn đặt tên tương tự Khi cột chạy đến hệ dung mơi EM2 Thì xuất kết tinh quanh vị trí van Chất kết tinh phần dạng tinh thể bám van, phần dạng lỏng chảy vào bình hứng Kết xuất từ hũ tên EM2C:2 Cho đến tên EM2C:4 Kết bám van gom lại vào hũ Còn chất kết tinh dạng lỏng lẩn dung dịch đem quay Sau tiến hành rửa thu kết tinh (dung mơi chọn có khả hòa tan chất trừ kết tinh) Kết tinh bám van rửa 22 Hình 2.18 SKLM cột Thu 25 mg chất Chất kết tinh đặt tên PT03 Hợp chất 03 có dạng bột màu nâu sáng vơ định hình Hình 2.19 Hợp chất PT03 2.3 Xác định công thức phân tử chất 2.3.1 Xác định chất thông qua sắc ký bảng mỏng: Hợp chất 01 có dạng kết tinh màu vàng Thực sắc ký mỏng TCL với hệ dung môi pha động CHCl3:MeOH (9:1) Điểm xuất tia UV có bước sóng 254 nm Sau phun thuốc thử , vệt màu vàng xuất có Rf = 0,7 23 Hình 2.20 SKLM hợp chất PT01 soi tia UV So sánh với kết báo Trịnh Hồng Dương đồng nghiệp hợp chất dự đoán Ostruthin [4] Hợp chất 02 có dang bột trắng vơ định hình Thực sắc ký mỏng TCL hợp chất 02 chất chuẩn với hệ dung môi pha động CHCl3:MeOH (9:1), điểm không xuất tia UV bước sóng 254 nm.Sau phun thuốc thử với sấy 105°C có vệt màu tím tối xuất có Rf = 0,7 Hình 2.21 SKLM hợp chất PT02 soi tia UV So sánh với kết báo Trịnh Hoàng Dương đồng nghiệp hợp chất dự đốn β-Sitosterol [4] Hợp chất 03 có dang bột màu nâu sáng vơ định hình Thực sắc ký mỏng TCL với hệ dung môi pha động CHCl3:MeOH (85:15), điểm nhìn thấy tia 24 UV bước sóng 254 nm.Sau phun thuốc thử với sấy 105°C có vệt màu vàng tối xuất có Rf = 0,7 Hình 2.22 SKLM hợp chất PT03 soi tia UV So sánh với kết báo Trịnh Hồng Dương đồng nghiệp hợp chất dự đoán Hydroxycoumarin [4] 2.3.2 Xác định hợp chất MS Bước chuẩn bị mẫu: Lấy khoảng mg chất hoà tan với MeOH, mẫu chạy MS không cần cân hay định lượng Thông số chạy máy: Nhiệt độ đầu dò: 349°C hiệu điện kim dò: kV hiệu điện đầu cảm biến: 1200 V lượng ion: 0,5 V mức hao hụt lượng ion: 0,3 V Dung mơi chạy đẳng dịng H2O:MeOH (15:85) phút, tốc độ dòng 0.2 ml/phút Chạy phân tích khối phổ: 25 Hợp chất PT01: Pha mẫu phân tích khối phổ MS (hình 2.23) cho thấy mũi ion [M - H] m/z 297.3 Tương ứng với cơng thức phân tử C19H22O3 Hình 2.23 Kết phân tích khối phổ hợp chất PT01 Hợp chất PT02:Pha mẫu phân tích khối phổ MS (hình 2.24) cho thấy mũi ion [M - H] m/z 397,34 Tương ứng với công thức phân tử C29H50O Hình 2.24 Kết phân tích khối phổ hợp chất PT02 26 Hợp chất PT03: Pha mẫu phân tích khối phổ MS (hình 2.25) cho thấy mũi ion [M - H] m/z 161,06 Tương ứng với cơng thức phân tử C9H6O3 Hình 2.25 Kết phân tích khối phổ hợp chất PT03 2.4 Các thiết bị Thiết bị ngâm chiết có ray lọc và van chiết tách: Thể tích: 10 L Xuất sứ: Malaysia Vật liệu: thép không gỉ bọc vỏ inox Hình 2.26 bình ngâm chiết 27 Thiết bị quay chân không lớn Buchi R-220 pro Buchi R-300 : Hãng: Buchi Xuất sứ: Thụy Sĩ Nguyên lí hoạt động: Khi máy quay vận hành, bình cầu chứa mẫu dung dịch đặt ngập bể gia nhiệt nước gia tăng đến nhiệt độ cần thiết Lúc này, bơm hút chân không hút khơng khí bên ngồi bình khiến áp suất bị giảm Áp suất sau hạ xuống nhiệt độ sôi dung dịch giảm theo nhiệt độ sôi mức nhiệt bể, dung dịch sơi lên Suốt q trình vận hành, bình chứa mẫu dung dịch liên tục quay tròn, làm tăng diện tích tiếp xúc dung dịch với nguồn nhiệt giúp nhiệt phân bố đều, tránh tượng tập trung cục vào chỗ Kích thước (WxDxH): Tối đa 1200x710x1750 mm Khối lượng: Tối đa 100kg Vôn: 200 V, 230-240 V, 400V Tần số: 50 / 60 Hz Tiêu chuẩn:UL/CSA Lắp ráp thủy tinh: cấu hình bọc an toàn khác Tốc độ quay: 5-150 rpm Bể gia nhiệt: Môi trường xung quanh đến 180°C Vật liệu sử dụng: Vỏ thép không gỉ 1.4301; bể thép không gỉ 1.4404 Hình 2.27 máy quay chân khơng Buchi r220 pro 28 Kích thước 400x615x320 mm (WxHxD): Khối lượng: 13-13.5 kg Nguồn điện: 50/60Hz 100-240VAC, Điện tiêu thụ : 100W Cấp độ bảo vệ: IP21 Khả điều chỉnh góc nghiêng ngưng tụ: – 40° Tốc độ quay: 10 – 280 rpm Khối lượng bình quay tối đa: kg Đạt chuẩn CE/CSA 2.28 Máy quay chân khơng Buchi R-300 Máy phân tích khối phổ MS: Hãng: Thermo Scientific Xuất sứ: Hoa Kì Nguyên lý hoạt lý hoạt động: Khối phổ kỹ thuật phân tích đo phổ khối lượng phân tử tích điện chúng di chuyển điện trường Mẫu ion hóa trở thành phân tử tích điện khác phân tách dựa vào sai khác giá trị m/z Dữ liệu phổ khối tự động ghi lại sử dụng để nhận dạng protein công cụ tin sinh học Phương dùng để xác định xem hợp chất có phải chất chất hay không chất củ (dựa báo) có thơng tin thời gian lưu, kiểu peak khối lượng phân tử Nếu khơng có có khả chất chất Muốn xác định xác cơng thức phân tử cần gửi mẫu để phân tích NMR 29 Bơm sắc ký lỏng hiệu cao áp LPG3400SD: - Hai piston, chương trình thành phần bốn (04) dịng dung mơi - Thang tốc độ dòng: 0,2 đến 10 mL/phút - Độ xác tốc độ dòng: ± 0,1%, Bơm mẫu tự động WPS-3000SL: - Số lọ mẫu: 120 lọ 2mL 216 lọ 1,2mL, ba vi đĩa 96- 384-giếng - Thể tích bơm mẫu thay đổi, độ lặp lại 0,25% RSD μL lớn Đầu dò VWD-3100 - Thang bước sóng: 190-600 nm (Lên đến 900 nm option thêm đèn Tungsten) 2.19 Máy phân tích khối phổ MS - Độ xác bước sóng: ± 1,0 nm, Thermo Scientific 3000 - Độ lặp lại bước sóng: ± 0,1 nm, - Độ rộng khe đo: nm Cột sắc ký thủy tinh: Khóa van PTFE Hãng: cilab Xuất sứ: Hàn Quốc 2.30 Cột sắc ký thủy tinh 30 Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luân: Từ mục tiêu ban đầu đề phương án nghiên cứu thích hợp rễ xáo tam phân phân lập thành công vài hợp chất cao EtOAc, loại hợp chất thiên nhiên phân lập từ rễ xáo tam phân dự đoán gồm Ostruthin, βSitosterol 7-Hydroxycoumarin hợp chất xác định dựa phân tích khối phổ MS Đây đề tài có tiềm cho việc phát triễn sản phẩm hoá dược phục vụ cho ngành y học Việt Nam.Tuy nhiên, thời gian hạn chế nên chưa có kết hàm lượng chất tách rễ xáo tam phân Qua tháng thực tập Trung tâm Nghiên cứu Chuyển giao Công nghệ (CRETECH) em nhận thấy lượng kiến thức học lớp trình tham gia nghiên cứu còn hạn chế nhiều Bên cạnh đó, em học hỏi thêm nhiều kiến thức kinh nghiệm làm việc mà không dạy trường Kiến nghị: Em mong muốn tiếp tục khảo sát thành phần hóa học cao chiết phân đoạn khác rễ xáo tam phân để góp phần tìm hiểu thêm thành phần hóa học cơng dụng hợp chất có loại thử nghiệm, đánh giá hoạt tính sinh học hợp chất tách động vật loại nấm, vi khuẩn Bên cạnh đó, em mong có thêm nhiều tiết thực hành lĩnh vực phân lập hợp chất thiên nhiên, bổ sung thêm trang thiết bị phân tích để phục vụ cho việc học tập thực hành nhằm bổ sung thêm kinh nghiệm sau trường 31 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tham khảo tiếng Việt [1] “Beta sitosterol la thuoc gi?”.https://www.vinmec.com/vi/tin-tuc/thong-tin-suc- khoe/suc-khoe-tong-quat/beta-sitosterol-la-thuoc-gi-thanh-phan-lieu-dung-va-tacdung/?link_type=related_posts&fbclid=IwAR1RFUV56bPU1LcGmx_u5ze5mpqqDn3 zwHxnEIwSMZOjDZDap-pudm-arA.2019 Tài liệu tham khảo tiếng Anh [2] Garg, S S., Gupta, J., Sharma, S., & Sahu, D (2020) An insight into the therapeutic applications of coumarin compounds and their mechanisms of action European Journal of Pharmaceutical Sciences, 105424 [3] Bowyer, M C., Van Vuong, Q., Van Altena, I A., & Scarlett, C J (2015) Phytochemicals and antioxidant capacity of Xao tam phan (Paramignya trimera) root as affected by various solvents and extraction methods Industrial Crops and Products, 67, 192-200 [4] Duong H T., Phuong T T., Ly D H., Ly T N., Son V D., Hoa L D N (2016) Coumarins and Acridone Alkaloids from the roots of Paramignya trimera Journal of Science, Hanoi National University, Department of Science and Technology 32 (4): 115-123 [5]“Ostruthin”.https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Ostruthin#section=BioAs sa-Results [6] Anh T L H., Cheol D K., Wonmin K., Ha M T., Nhiem X N., Yen H P., Tai H B., Truong H L., Long N V., Gioi T., Quang H T., Minh V C., Hyuyncheol O., Chul Y K., Kiem V P (2017) Anti-inflammatory coumarins from Paramignya trimera, Pharmaceutical Biology 55 (1): 1195-1201 32 ... trường Chương Q TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN TỪ RỄ CÂY XÁO TAM PHÂN 2.1 Nguyên liệu Các hợp chất phân lập 2.1.1 Rễ xáo tam phân Sơ lược: Cây xáo tam phân biết đến loại... DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA KỸ THUẬT THỰC PHẨM & MÔI TRƯỜNG BÁO CÁO THỰC TẬP TỐT NGHIỆP QUÁ TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN TỪ RỄ CÂY XÁO TAM PHÂN... 1711546095 Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ Lớp: 17DHH1A Tên đề tài: QUÁ TRÌNH CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN TỪ RỄ CÂY XÁO TAM PHÂN Nhận xét Về hình thức: