XÁC NHẬN GIÁ TRN sử DỤNG PHƯƠNG PHÁP ước LƯỢNG độ KHÔNG đảm bảo đo TRONG PHÂN TÍCH VI SINH vật

XÁC NHẬN GIÁ TRN SỬ DỤNG PHƯƠNG PHÁP & ƯỚC LƯỢNG ĐỘ KHƠNG ĐẢM BẢO ĐO TRONG PHÂN TÍCH VI SINH VẬT ThS Trương Huỳnh Anh Vũ Phòng Vi Sinh Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang: NỘI DUNG 1.  PHÂN LOẠI PHƯƠNG PHÁP 2.  XÁC NHẬN GIÁ TRN SỬ DỤNG PHƯƠNG PHÁP 3.  MỘT SỐ THUỘC TÍNH CẦN XÁC ĐNNH 4.  ƯỚC LƯỢNG ĐỘ KHÔNG ĐẢM BẢO ĐO 2/20/19 5.  ĐẢM BẢO CHẤT LƯỢNG KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM 6.  THỰC HÀNH ƯỚC LƯỢNG ĐKĐBĐ Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 2/20/19 PHÂN LOẠI PHƯƠNG PHÁP Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : PHÂN LOẠI PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 2/20/19 Phương pháp tiêu chuẩn - Phương pháp thử theo tiêu chuẩn quốc gia, quốc tế, hiệp hội khoa học chấp nhận rộng rãi giới - Phương pháp thử công nhận hiệu lực phạm vi quốc tế quốc gia áp dụng rộng rãi VD: ISO, FDA, BS, TCVN,… Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : PHÂN LOẠI PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH (tt) 2/20/19 Phương pháp không tiêu chuẩn/phương pháp nội - Phương pháp phòng thử nghiệm tự xây dựng, phương pháp theo hướng dẫn nhà sản xuất thiết bị, phương pháp theo tạp chí, tài liệu chuyên ngành VD: Kit phát hiện, phương pháp phát hiện/định lượng nhanh VSV,… Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 2/20/19 LỰA CHỌN PHƯƠNG PHÁP Yêu cầu chung: •  PTN cần lựa chọn phương pháp phân tích có thể cho kết phù hợp với mục đích sử dụng cụ thể, nói cách khác: có thể đưa kết đáng tin cậy trước u cầu cụ thể •  Nếu có nhiều phương pháp thì PTN cần nêu rõ tiêu chí sử dụng loại Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 2/20/19 LỰA CHỌN PHƯƠNG PHÁP (tt) ISO 17025 nói gì: Mục 5.4.2 •  PTN phải sử dụng phương pháp, kể phương pháp lấy mẫu, đáp ứng yêu cầu khách hàng thích hợp với phép thử •  Ưu tiên sử dụng phương pháp tiêu chuẩn quốc tế, quốc gia khu vực •  PTN phải đảm bảo sử dụng tiêu chuẩn nhất, trừ khơng phù hợp với mục đích khơng có khả thực •  PTN có thể sử dụng phương pháp thử nội bộ, phương pháp thử khơng tiêu chuẩn thích hợp với mục đích sử dụng phải xác nhận giá trị Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 2/20/19 XÁC NHẬN GIÁ TRN SỬ DỤNG PHƯƠNG PHÁP Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 2/20/19 XNGTSD CỦA PHƯƠNG PHÁP ? Theo ISO/TR 13843:2000 Quy trình thực để chứng minh phương pháp thử phát hay định lượng vi sinh vật mục tiêu nhóm vi sinh vật phù hợp với độ chụm độ xác Theo ISO 17025:2005 Việc khẳng định kiểm tra cung cấp chứng khách quan yêu cầu xác định cho việc sử dụng cụ thể đáp ứng Kết việc XNGTSD phương pháp sử dụng để đánh giá chất lượng, độ tin cậy kết phân tích Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 2/20/19 “XNGTSD phương pháp phân tích phần khơng thể thiếu muốn có kết phân tích đáng tin cậy” Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 10 2/20/19 TẠI SAO CẦN XNGTSD CỦA PHƯƠNG PHÁP ? •  Đáp ứng yêu cầu tổ chức đánh giá •  Đảm bảo phương pháp cho kết •  Bằng chứng khách quan cho việc kiểm sốt chất lượng thử nghiệm •  Đáp ứng kỳ vọng khách hàng chất lượng kết thử nghiệm Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 11 2/20/19 Theo ISO 17025, phương pháp phân tích phải XNGTSD khi: - Phương pháp áp dụng phương pháp tiêu chuẩn (non standard method) - Trước áp dụng phương pháp vào thử nghiệm mẫu thực: + Kiểm tra khả PTN có đáp ứng liệu cơng bớ + Kiểm tra tính phù hợp phương pháp so với yêu cầu thử nghiệm - Có thay đổi đối tượng áp dụng nằm đối tượng áp dụng phương pháp thẩm định phương pháp tiêu chuẩn - Có thay đổi điều kiện thực phương pháp thẩm định (ví dụ: thiết bị phân tích với đặc tính khác biệt, mẫu, người phân tích…) - Sau khoảng thời gian khơng sử dụng phương pháp Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 12 2/20/19 AI XNGTSD PHƯƠNG PHÁP? •  Thử nghiệm viên/ người phân tích - Xây dựng phương pháp thử nội bộ, XNGTSD phương pháp - Kiểm tra thực nghiệm thông số phương pháp xác nhận trước •  Phịng thí nghiệm Triển khai phương pháp, định hình thức XNGTSD, phân công thực phê duyệt áp dụng •  Các tở chức tiêu chuẩn hóa/ tở chức nghề nghiệp/ ban chuyên đề XNGTSD phương pháp tiêu chuẩn/ thức, thơng qua nghiên cứu liên phịng Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 13 2/20/19 QUI TRÌNH XNGTSD CỦA PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH VI SINH VẬT Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 14 CHUẨN BN CHO XNGTSD PHƯƠNG PHÁP 2/20/19 - PTN cần biên soạn Qui trình nội bợ (SOP) văn bản, dựa phương pháp tham chiếu mô tả ngắn gọn, xác u cầu: hóa chất, thiết bị, điều kiện môi trường … bước tiến hành - Lập kế hoạch chi tiết cho trình XNGTSD phương pháp - Phân cơng trách nhiệm/ thực Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 15 2/20/19 LẬP KẾ HOẠCH XNGTSD PHƯƠNG PHÁP PTN cần xem xét đặc điểm: •  Nhu cầu chi tiết khách hàng yêu cầu từ quan quản lí liên quan •  Cái gì thực tế có thể phân tích được/ mẫu? •  Các điều kiện thực nghiệm PTN - Điều kiện kỹ thuật cụ thể phép thử? - Thiết bị? Chủng chuẩn/ vật liệu chuẩn? - Các nguồn lực khác? •  Nhân viên thực cần có đủ kiến thức có kinh nghiệm thích hợp •  Xác định thông số đặc trưng phương pháp mức u cầu •  Phạm vi áp dụng có thể mở rộng Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 16 1.  2.  3.  4.  Mẫu thử Chủng chuẩn Kiểm nghiệm viên Môi trường nuôi cấy 2/20/19 Thu thập số liệu Không Có Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Phương pháp XNGTSD Trang : 17 2/20/19 MỘT SỐ THUỘC TÍNH CẦN XÁC ĐNNH Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 18 2/20/19 KHÁI NIỆM MỘT SỐ THUỘC TÍNH CẦN XÁC ĐNNH Độ (trueness) Độ mức độ gần giá trị trung bình kết thử nghiệm giá trị thực giá trị chấp nhận Độ chụm (precision) Độ chụm mức độ dao động kết thử nghiệm độc lập quanh trị giá trung bình Có thước đo độ chụm, thể độ lặp lại (Sr) độ tái lập (SR) Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 19 Minh họa khái niệm độ xác (độ chụm độ đúng) Chụm‌/Khơng Khơng xác 2/20/19 Khơng chụm‌/Khơng Khơng xác Đúng/Khơng chụm Khơng xác Đúng/Chụm Chính xác Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 20 Độ xác (accuracy:AC) Độ xác mức độ giống kết phân tích với giá trị tham chiếu 2/20/19 Độ đặc hiệu (specificity:SP) Độ đặc hiệu khả phân biệt vi sinh vật đích với vi sinh vật khác Độ nhạy (sensitivity:SE) Độ nhạy tỷ lệ vi sinh vật đích phát Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 21 2/20/19 Trong đó: TP (True Positive): Dương tính (Mẫu chứng có kết dương tính, kết phân tích cho kết dương tính) FP (False Positive): Dương tính giả (Mẫu chứng có kết âm tính, kết phân tích cho kết dương tính) FN (False Negative): Âm tính giả (Mẫu chứng có kết dương tính, kết phân tích cho kết âm tính) TN (True Negative): Âm tính (Mẫu chứng có kết âm tính, kết phân tích cho kết âm tính) N = TP + FP + FN + TN: Tổng số kết Tải FULL (51 trang): bit.ly/3aAhSvD Dự phịng: fb.com/TaiHo123doc.net Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 22 Độ lặp lại (repeatability)/ Độ lệch chuẩn lặp lại Sr (Repeatability standard deviation) Quá trình thực thử nghiệm mẫu thử đồng nhất, phương pháp, phịng thí nghiệm, người thao tác sử dụng thiết bị, khoảng thời gian ngắn Sr = n ∑ 2/20/19 i =1 (x i − x )2 n −1 Trong đó: Sr: Độ lệch chuẩn lặp lại Tải FULL (51 trang): bit.ly/3aAhSvD Dự phòng: fb.com/TaiHo123doc.net n: Số lần thực xi: Kết phân tích lần thực _ x= n ∑ i =1 xi n x = log10 (CFU) Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 23 5.1 Độ lặp lại phương pháp áp dụng phịng thí nghiệm Sr = ∑S ri Trong đó: Sri độ lặp lại KNV 2/20/19 5.2 Giới hạn lặp lại (r) phương pháp r = 2,8 × S r Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 24 Độ tái lặp reproducibility/ Độ lệch chuẩn tái lặp SR (Reproducibility standard deviation) Quá trình thực thử nghiệm mẫu thử đồng thực phương pháp, phòng thí nghiệm khác nhau, với người thao tác khác nhau, sử dụng thiết bị khác ( y iA − y iB ) SR = ∑ n i =1 2/20/19 n Trong đó: SR: Độ lệch chuẩn tái lập n: Số lần thực yiA: log10(CFUKNV1) yiB: log10(CFUKNV2) 5448313 Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ Chí Minh Trang : 25 ...NỘI DUNG 1.  PHÂN LOẠI PHƯƠNG PHÁP 2.  XÁC NHẬN GIÁ TRN SỬ DỤNG PHƯƠNG PHÁP 3.  MỘT SỐ THUỘC TÍNH CẦN XÁC ĐNNH 4.  ƯỚC LƯỢNG ĐỘ KHƠNG ĐẢM BẢO ĐO 2/20/19 5.  ĐẢM BẢO CHẤT LƯỢNG KẾT QUẢ THỬ... Trang : 20 Độ xác (accuracy:AC) Độ xác mức độ giống kết phân tích với giá trị tham chiếu 2/20/19 Độ đặc hiệu (specificity:SP) Độ đặc hiệu khả phân biệt vi sinh vật đích với vi sinh vật khác Độ nhạy... khách quan yêu cầu xác định cho vi? ??c sử dụng cụ thể đáp ứng Kết vi? ??c XNGTSD phương pháp sử dụng để đánh giá chất lượng, độ tin cậy kết phân tích Trung Tâm Dịch Vụ Phân Tích Thí Nghiệm Thành Phố Hồ