Phân lập và xác định một số hợp chất từ cây chân chim ba lá bắc (shefflera tribracteolata bui ) ở việt nam

0 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH DƯƠNG TRỌNG HÙNG PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ CÂY CHÂN CHIM BA LÁ BẮC (SCHEFFLERA TRIBRACTEOLATA BUI ) Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC VINH - 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH DƯƠNG TRỌNG HÙNG PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ CÂY CHÂN CHIM BA LÁ BẮC (SCHEFFLERA TRIBRACTEOLATA BUI ) Ở VIỆT NAM Chuyên ngành :HOÁ HỮU CƠ Mã số: 60.44.01.14 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS TS HOÀNG VĂN LỰU VINH – 2016 LỜI CẢM ƠN Luận văn thực phòng thí nghiệm chun đề Hố Hữu - Khoa Hố học - Trường Đại học Vinh Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn: - PGS TS Hoàng Văn Lựu giao đề tài, tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện suốt trình thực luận văn - PGS.TS Trần Đình Thắng giúp đỡ tơi tận tình q trình làm thí nghiệm, phân tích kết quả, PGS.TS Lê Đức Giang đọc đóng góp nhiều ý kiến quý báu cho luận văn Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn đến thầy, cô, cán bộ mơn Hố Hữu cơ, khoa Hố học, phịng Đào tạo Sau đại học - Trường Đại học Vinh; bạn đồng nghiệp; học viên cao học; sinh viên; gia đình người thân động viên giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Vinh, tháng năm 2016 Tác giả Dương Trọng Hùng MỤC LỤC Trang Lời cảm ơn Mục lục Danh mục hình Danh mục bảng Danh mục sơ đồ Danh mục kí hiệu, chữ viết tắt MỞ ĐẦU…………………………………………………………… 1 Lí chọn đề tài…………………………………………………… Nhiệm vụ nghiên cứu ……………………………………………… Đối tượng nghiên cứu …………………………………………… Chương 1: TỔNG QUAN ………………………………………… 1.1 Họ Nhân sâm Đặc điểm thực vật họ nhân sâm (Araliaceae) …… 1.2 Một số chi thuộc họ Nhân sâm hay họ Ngũ gia bì (Araliaceae) … 1.2.1 Chi Schefflera ………………………………………………… 1.2.2 Chi Polyscias ………………………………………………… 1.2.3 Chi Acanthopanax …………………………………………… 1.2.4 Chi Aralia ……………………………………………………… 1.2.5 Chi Panax ……………………………………………………… 1.3 Chi Schefflera …………………………………………………… 1.3.1 Thành phần hóa học chi chân chim ………………………… 1.3.2 Một số nghiên cứu thành phần hóa học ngũ gia bì chân chim …………………………………………………………… 1.4 Tác dụng dược lý chi Schefflera …………………………… 15 1.5 Cây nghiên cứu ………………………………………………… 18 Chương 2: PHƯƠNG PHÁP VÀ THỰC NGHIỆM 19 2.1 Phương pháp nghiên cứu ……………………………………… 19 2.1.1 Phương pháp lấy mẫu ………………………………………… 19 2.1.2 Phương pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập hợp chất ……………………………………………………………… 19 2.1.3 Phương pháp khảo sát cấu trúc hợp chất………………… 19 2.2 Hoá chất, dụng cụ thiết bị …………………………………… 20 2.2.1 Hoá chất ……………………………………………………… 20 2.2.2 Dụng cụ thiết bị …………………………………………… 20 2.3 Nghiên cứu hợp chất từ cây………………………………… 20 2.3.1 Thu lấy mẫu, xử lý mẫu……………………………………… 20 2.3.2 Xử lý cao, phương pháp tách chiết …………………………… 20 2.3.3 Sơ đồ phân lập………………………………………………… 22 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 3.1 Xác định cấu trúc A………………………………………… 23 3.1.1 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR………………………… 23 3.1.2 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C-NMR, DEPT, HSQC ……… 23 3.2 Hình ảnh phổ xác định cấu trúc A…………………………… 26 3.3 Xác định cấu trúc hợp chất B…………………………………… 41 3.3.1 Phổ 1H-NMR, DEPT HSQC hợp chất B……………… 41 3.3.2 Phổ 13C-NMR, DEPT HSQC hợp chất B……………… 41 3.4 Hình ảnh phổ hợp chất B…………………………………… 45 KẾT LUẬN………………………………………………………… 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO………………………………………… 64 DANH MỤC HÌNH Trang Hình 3.1: Cơng thức Ginsenoside Rgl …………………… 25 Hình 3.2 Phổ 1H-NMR hợp chất A……………………… 26 Hình 3.3 Phổ 1H-NMR hợp chất A………………………… 27 Hình 3.4 Phổ 1H-NMR hợp chất A………………………… 28 Hình 3.5 Phổ 13C-NMR hợp chất A……………………… 29 Hình 3.6 Phổ 13C-NMR hợp chất A……………………… 30 Hình 3.7 Phổ 13C-NMR hợp chất A……………………… 31 Hình 3.8 Phổ DEPT hợp chất A………………………… 32 Hình 3.9 Phổ DEPT hợp chất A………………………… 33 Hình 3.10 Phổ HSQC hợp chất A………………………… 34 Hình 3.11 Phổ HSQC hợp chất A………………………… 35 Hình 3.12 Phổ HSQC hợp chất A………………………… 36 Hình 3.13 Phổ HMBC hợp chất A………………………… 37 Hình 3.14 Phổ HMBC hợp chất A………………………… 38 Hình 3.15 Phổ HMBC hợp chất A………………………… 39 Hình 3.16 Phổ HMBC hợp chất A………………………… 40 Hình 3.17 Cơng thức cấu tạo B…………………………… 44 Hình 3.18 Phổ 1H-NMR hợp chất B………………………… 45 Hình 3.19 Phổ 1H-NMR hợp chất B………………………… 46 Hình 3.20 Phổ 1H-NMR hợp chất B………………………… 47 Hình 3.21 Phổ 1H-NMR hợp chất B………………………… 48 Hình 3.22 Phổ 13C-NMR hợp chất B………………………… 49 Hình 3.23 Phổ 13C-NMR hợp chất B………………………… 50 Hình 3.24 Phổ 13C-NMR hợp chất B………………………… 51 Hình 3.25 Phổ DEPT hợp chất B…………………………… 52 Hình 3.26 Phổ DEPT hợp chất B…………………………… 53 Hình 3.27 Phổ HMBC hợp chất B…………………………… 54 Hình 3.28 Phổ HMBC hợp chất B…………………………… 55 Hình 3.29 Phổ HMBC hợp chất B…………………………… 56 Hình 3.30 Phổ HMBC hợp chất B…………………………… 57 Hình 3.31 Phổ HMBC hợp chất B…………………………… 58 Hình 3.32 Phổ HSQC hợp chất B…………………………… 59 Hình 3.33 Phổ HSQC hợp chất B…………………………… 60 Hình 3.34 Phổ HSQC hợp chất B…………………………… 61 Hình 3.35 Phổ HSQC hợp chất B…………………………… 62 DANH MỤC BẢNG 1Trang Bảng 1.1 Thành phần hóa học chi 14 Bảng 3.1 Dữ liệu phổ hợp chất A 14 Bảng 3.2 Dữ liệu phổ hợp chất B 24 DANH MỤC SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1: Xử lý mẫu 18 Sơ đồ 2.2: Xử lý cặn chiết MeOH 19 Sơ đồ 2.3: Phân lập hợp chất cặn Butanol 20 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT CC Column Chromatography Sắc kí cột FC Flash Chromatography Sắc ký cột nhanh TLC Thin Layer Chromatography Sắc kí lớp mỏng IR Infrared Spectroscopy Phổ hồng ngoại MS Mass Spectroscopy Phổ khối lượng EI-MS Electron Impact-Mass Spectroscopy Phổ khối va chạm electron ESI-MS Electron Spray Impact-Mass Phổ khối lượng phun mù Spectroscopy electron Proton Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt Spectroscopy nhân proton Carbon Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt Spectroscopy nhân cacbon-13 H-NMR 13 C-NMR DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC Heteronuclear Multiple Bond Correlation COSY Correlation Spectroscopy S Singlet br s singlet tù t Triplet D Doublet Dung dịch doublet douplet Dt doublet triplet M Multiplet TMS Tetramethylsilan DMSO Dimethylsulfoxide Đ.n.c Điểm nóng chảy 40 Hình 21 : Phổ 1H-NMR hợp chất B Hình 22: Phổ 1H-NMR hợp chất B 41 Hình 23 : Phổ 1C-NMR hợp chất B Hình 24 : Phổ 1C-NMR hợp chất B 42 Hình 25: Phổ 1C-NMR hợp chất Hình 3.26 : Phổ DEPT hợp chất B 43 Hình 27 : Phổ DEPT hợp chất B 44 Hình 3.28 : Phổ HMBC hợp chất B 45 Hình 3.29 : Phổ HMBC hợp chất B 46 Hình 30: Phổ HMBC hợp chất B 47 Hình 3.31 : Phổ HMBC hợp chất B 48 Hình 32 : Phổ HMBC hợp chất 49 Hình 3.33 : Phổ HSQC hợp chất B 50 Hình 3.34: Phổ HSQC hợp chất B 51 KẾT LUẬN Tiến hành nghiên cứu thành phần hóa học vỏ ngũ gia bì chân chim ba bắc (Schefflera triracteolata Bui) Việt Nam Chúng thu số kết sau: - Bằng phương pháp ngâm chiết vỏ với dung dịch metanol cất phân đoạn thu cao đặc tương ứng là: cao n-hexen; cao etylaxetat; cao clorofom - Từ cao etylaxetat phương pháp sắc kí cột với pha tĩnh silicagen, hệ dung môi rửa giải n-hexan: etylaxetat; n-hexan:axeton với độ phân cực tăng dần dùng phương pháp kết tinh phân đoạn thu chất A B - Sử dụng phương pháp phổ đại: phổ khối lượng (ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1H-NMR; 13 C-NMR; DEPT), phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (HSQC; COSYGP; HMBC) xác định được: Hợp chất A: Ginsenoside Rgl, { 3β, 6α, 12 β, 20S – Tretrahidroxydammar24-en 6-O-[β –D- glucopyranoside]} Hợp chất B: Gypenoside XVII {(3β,12β)-20-{[6-O-(β-D-glucopyranosyl)β-D-glucopyranosyl]oxy}-12-hydroxydammar-24-en-3-yl β-Dglucopyranoside} 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Dược điển Việt Nam (1978) NXB Y học Hà Nội, tập (351,578) Trần Hợp (1996) Phân loại thực vật- NXB ĐH THCN Đỗ Tất Lợi (2000) Cây thuốc vị thuốc Việt Nam –NXB Y học HN Võ Văn Chi, Dương Đức Tiến (1987) Phân loại thực vật, thực vật bậc cao- NXB ĐH THCN Võ Văn Chi (1999) Từ điển thuốc Việt Nam –NXB Y học Võ Văn Chi (2000) Cây thuốc trị bệnh thông dung- NXB Thanh Hóa Phạm Hồng Độ (1992) Montreal Thực hành dược khoa (1972) NXB KH KT Hà Nội Đỗ Huy Bích số tác giả khác (2004) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam NXB KH KT Hà Nội 10 Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985) Các phương pháp nghiên cứu thuốc NXB Y học 11 Lê Khả Kế (1973) Cây cỏ thường thấy Việt Nam, tập 3, NXB Khoa học kỹ thuật Hà Nội 12 Chu Đình Kính (1995) Phương pháp khối phổ NXB Viện hóa hcoj- Trung tâm KHKT CNQG 13 Lê Thị Thu Hương (2004) Nghiên cứu thành phần hóa học ngũ gia bì chân chim Luận văn cử nhân KH ĐH Vinh 14 Lã Đình Mỡi, Châu Văn Minh, Trần Văn Sung, Phạm Quốc Long, Phan Văn Kiệm, Trần Huy Thái, Trần Minh Hợi, Ninh Khắc Bản, Lê Mai Hương Hội nghị khoa học toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ 5: Họ nhân sâm ( Araliaceae Juss)- Nguồn gốc hoạt chất sinh học đa dạng đầy triển vọng Việt Nam.Viện hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam 15 Cao Thị Thanh Phương (2007) Nghiên cứu tách xác định số hợp chất từ rễ ngũ gia bì chân chim Luận văn thạc sỹ KH ĐH Vinh 53 16 Nguyễn Đình Triệu (2001) Các phương pháp phổ ứng dụng hóa học NXB ĐH KHTN-ĐHQG Hà Nội 17 Nguyễn Đình Triệu (2003) Các phương pháp vật lí ứng dụng hóa học NXB ĐH QG Hà Nội 18 Nguyễn Đình Triệu, Nguyễn Đình Thành (2001) Các phương pháp phân tích vật lí hóa học NXB KH KT Hà Nội 19 Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng (1985) Các phương pháp sắc ký NXB KH KT Hà Nội Tài liệu tiếng Anh 20 Braca A et al (2004) Cytotoxic Saponins from Schefflera rotundifolia Planta Med; 70:960-966 21 BrunoDanieli, Monica Luisetti, Sergio Riva, Anna Bertinotti, Enzio Ragg, LeonardoScaglioni, Ezio Bombardelli (1995) Regioselective Enzyme -Mediated Acylation of Polyhydroxy Natural Compounds A Remarkable, Highly Efficient Preparation of 6’-O-Acetyl and 6’-O-Carbocyacetyl Ginsenoside Rg1 J Org.Chem 60,3637-3642 22 Cheng, Le-Qin, Ju-Ryun Na, Myung Kyum Kim, Myun-Ho Bang and Deok-Chun Yang (2007) Microbial Conversion of Ginsenoside Rb1 to Minor Ginsenoside F2 and Gypenoside XVII by Intrasporangium sp.GS603 Isolated from Soil J Microbiol Biotechnol.17(12), 1937-1943 23 G Adam, M Lischewski, H V Phiet, A Preiss, J Schmidt and T V Sung (1992) Phytochemistry, vol 21, No 6, pp 1385-1387, 1982 24 Junichi Kitajima and Yasuko Tanaka (1989) Chem Pharm Bull 37(10) 2727-2730 25 Hegnauer, R (1964) Chemotaxonomie der Pflanzen Vol Birkhauser, Basel-Stuttgart 26 Pant, P and rastogi, R.P (1979) Phytochemistry 18, 1095 54 27 Sholichin, M., Ymasaki, K., R.and Tanaka, O (1980) Chem Pham.Bull(Otokyo) 28, 1066 28 Wenkert, E., Baddeley, G.V., Burfitt, I R And Moreno, L.N (1978) Org Magn Reson 11, 337 29 Junichi Kitajima and Yasuko Tanaka (1989) Chem Pharm Bull 37(10) 2727-2730 - ... chọn đề tài “ Phân lập xác định số hợp chất từ chân chim ba bắc (shefflera tribracteolata Bui. ) Việt Nam? ??, nhằm đóng vào việc xác định thành phần hóa học ngũ gia bì chân chim ba bắc Nhiệm vụ đề... DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH DƯƠNG TRỌNG HÙNG PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ CÂY CHÂN CHIM BA LÁ BẮC (SCHEFFLERA TRIBRACTEOLATA BUI ) Ở VIỆT NAM Chuyên ngành :HOÁ HỮU CƠ Mã số: ... (10 %) Chất A Chất B (20mg) (27mg) Sơ đồ 2.3: Phân lập hợp chất cặn Butanol F5-2 (0.21g) 21 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Xác định cấu trúc A 3.1.1 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR Phổ 1H-NMR hợp