Xác định mức độ và thời điểm xuất hiện triệu chứng đặc trưng lùn xoắn lá lúa ở điều kiện nhà lưới

Chuyên đề thực hiện nhằm so sánh và đánh giá mức độ, thời điểm xuất hiện triệu chứng xoắn lá, xoắn chóp, rách lá lúa trên giống OM 6976 ở hình thức chủng bệnh cá thể trong điều kiện nhà lưới. Các chỉ tiêu ghi nhận như tỷ lệ bệnh, thời gian ủ bệnh và phần trăm triệu chứng biểu hiện bệnh trên từng nghiệm thức.

AGU International Journal of Sciences – 2021, Vol 28 (2), 78 – 84 XÁC ĐỊNH MỨC ĐỘ VÀ THỜI ĐIỂM XUẤT HIỆN TRIỆU CHỨNG ĐẶC TRƯNG LÙN XOẮN LÁ LÚA Ở ĐIỀU KIỆN NHÀ LƯỚI Nguyễn Phú Dũng1, Trần Văn Thơ2 Trường Đại học An Giang, ĐHQG-HCM Công ty PPC Thông tin chung: Ngày nhận bài: 04/12/2019 Ngày nhận kết bình duyệt: 27/07/2020 Ngày chấp nhận đăng: 03/2021 Title: Determine the level and the infected stage of the symptom Rice Ragged Stunt Virus in nethouse conditions Keywords: Rice Ragged Stunt Virus, twisted leaf, twisted leaf tip and serrated leaf tissue symptoms Từ khóa: Virus Lùn xoắn lá, triệu chứng xoắn lá, xoắn chóp rách ABSTRACT The study’s objectives were to compare and evaluate the level, the infected stage of the symptom of twisted leaf, twisted leaf tip and serrated leaf tissue on OM 6976 rice plant in the nethouse condition Indicators include the incidence, the incubation period and the percent of infected Rice Ragged Stunt Virus (RRSV) in rice plant Results showed that the incidence in the third inoculation was higher than the first and the second in the individual method The incubation period in rice plants were 18.2 – 24.2 days and did not depend on the number of times inoculation by viruliferous Brown Plant Hopper The symptom of twisted leaf tip showed the highest incidence of disease and the incubation period of twisted leaf, twisted leaf tip and serrated leaf tissue symptoms were 19.4 – 25.2 days TÓM TẮT Chuyên đề thực nhằm so sánh đánh giá mức độ, thời điểm xuất triệu chứng xoắn lá, xoắn chóp, rách lúa giống OM 6976 hình thức chủng bệnh cá thể điều kiện nhà lưới Các tiêu ghi nhận tỷ lệ bệnh, thời gian ủ bệnh phần trăm triệu chứng biểu bệnh nghiệm thức Kết cho thấy, phương pháp chủng bệnh cá thể cho kết chủng lần ln có tỷ lệ bệnh cao so với chủng bệnh lần chủng bệnh lần Thời gian ủ bệnh lúa từ 18,2 – 24,2 ngày phương pháp chủng cá thể không phụ thuộc vào số lần chủng rầy mang virus chích hút truyền bệnh Triệu chứng xoắn chóp có tỷ lệ biểu cao thời gian ủ bệnh triệu chứng điển hình bệnh lúa từ 19,4 – 25,2 ngày trùng gây hại lớn lúa Việt Nam nước trồng lúa Khi dịch bùng phát làm suất lúa giảm nghiêm trọng, có thiệt hại lên đến 70% trắng (Lương Minh Châu ctv., 2006) GIỚI THIỆU Nghề trồng lúa gặp phải trở ngại khó khăn, điều kiện thâm canh khí hậu gió mùa nóng ẩm quanh năm tạo điều kiện thuận lợi cho nhiều loại sâu bệnh hại phát triển Trong đó, rầy nâu (Nilaparvatar lugens) 78 AGU International Journal of Sciences – 2021, Vol 28 (2), 78 – 84 Ở Việt Nam, vào năm 2006 nước ta xuất đại dịch bệnh virus vàng lùn lùn xoắn (VL – LXL) lúa Đồng sông Cửu Long (ĐBSCL) Theo Nguyễn Thơ, 2007 lặp luận bệnh sau lan nhiều tỉnh khác Đông Nam Bộ miền Trung gây thiệt hại hàng nghìn hecta lúa hè thu nhiều tỉnh (Nguyễn Phú Dũng, 2011) Bệnh lùn xoắn virus Rice Ragged Stunt Virus (RRSV) bệnh lùn lúa cỏ (vàng lùn) virus Rice Grassy Stunt Virus (RGSV) hai bệnh nghiêm trọng lúa, khó phịng trị nỗi lo lắng người nông dân Hai bệnh không lây truyền qua hạt giống, nước, khơng khí, đất tác nhân giới mà chủ yếu qua môi giới truyền bệnh rầy nâu (Phạm Văn Kim, 2016) Hiện chưa có giống kháng tuyệt đối biện pháp phòng trừ chưa áp dụng cách đắn nên bệnh xuất số nơi đồng ruộng Bệnh gây hại nghiêm trọng ảnh hưởng lớn đến suất lúa thiệt hại đời sống kinh tế cho bà bị nhiễm bệnh VL – LXL để xác định bệnh từ giai đoạn đầu nhằm hạn chế lây lan phát tán bệnh, đảm bảo sinh trưởng phát triển lúa VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Chuẩn bị nguồn vật liệu truyền bệnh Thực theo qui trình nghiên cứu Nguyễn Phú Dũng ctv (2016): 2.1.1 Chuẩn bị nguồn rầy bệnh Tiến hành thu thập mẫu rầy từ đồng ruộng (Hình 1), mẫu rầy sau thu thập cho đẻ trứng (trên nhóm khơng thuộc phổ ký chủ rau mác theo Nguyễn Phú Dũng ctv., 2016), sau đẻ rầy mẹ chết, trứng rầy nở sau – ngày, nguồn rầy không mang virus, sử dụng cho nghiên cứu truyền bệnh 2.1.2 Chuẩn bị lúa khỏe Hạt giống lúa OM 6976 ngâm nước 48 giờ, sau ủ thêm 24 giờ, hạt giống nẩy mầm gieo chậu đất, đặt lồng lưới, nhằm cách ly lúa khỏi bị chích hút nguồn rầy bên Đây nguồn vật liệu sử dụng cho công tác nghiên cứu sử dụng làm nguồn thức ăn cho rầy (Hình 2) Theo Cục BVTV (2014) tỉnh phía Nam, sâu bệnh phát sinh chủ yếu lúa Hè Thu giai đoạn đẻ nhánh, làm địng trỗ bơng Đáng ý, diện tích nhiễm rầy nâu đạo ơn giảm nhiều so với năm 2013, bệnh VL – LXL có chiều hướng tăng Tổng diện tích lúa bị nhiễm bệnh VL – LXL 3.040 ha, tăng 3.000 so với năm 2013 Bệnh xuất chủ yếu tỉnh Đồng Tháp, Vĩnh Long, Cần Thơ, Bến Tre, Vũng Tàu Long An Vì để góp phần hạn chế lây lan phát tán bệnh VL – LXL việc biết biểu nhiễm bệnh, để nhanh chóng xác định bị nhiễm để có biện pháp đối phó quan trọng Mục tiêu nhằm so sánh đánh giá mức độ, thời điểm xuất triệu chứng xoắn lá, xoắn chóp, rách lúa giống OM 6976 hình thức chủng bệnh cá thể điều kiện nhà lưới nên đề tài cần thực hiện, góp phần xác định xu hướng thể chủ đạo 2.1.3 Chuẩn bị lúa bệnh Thu thập lúa bệnh (Hình 3) từ vùng có dịch bệnh, nhận dạng bệnh triệu chứng bên qua phương pháp ELISA để xác định xác triệu chứng bệnh, bệnh tiếp tục trồng điều kiện nhà lưới để làm nguồn vật liệu truyền bệnh 2.1.4 Tạo nguồn rầy mang virus Cho rầy khoẻ chích hút lúa bệnh mang triệu chứng bệnh lùn xoắn để tạo nguồn rầy mang virus Đây nguồn rầy bệnh mang virus sử dụng để truyền bệnh cho lúa khoẻ (Hình 4) 79 AGU International Journal of Sciences – 2021, Vol 28 (2), 78 – 84 Hình Thu mẫu rầy từ đồng ruộng Hình Nguồn thức ăn ni rầy Hình Thu mẫu bệnh LXL đồng ruộng Hình Tạo nguồn rầy mang Virus 2.2 Phương pháp nghiên cứu (lần chủng 1, 3) với lặp lại lần điều kiện nhà lưới 2.2.1 So sánh đánh giá xu hướng thể triệu chứng xoắn lá, xoắn chóp, rách giống lúa OM 6976 hình thức chủng cá thể * Cách thực chủng bệnh cá thể (Nguyễn Phú Dũng ctv., 2016): - * Bố trí: Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên ống nghiệm gồm có nghiệm thức 80 Sử dụng phương pháp chủng bệnh ống nghiệm với lúa – 10 ngày tuổi giống OM 6976 điều kiện nhà lưới AGU International Journal of Sciences – 2021, Vol 28 (2), 78 – 84 - - - - Cho rầy nâu tuổi – lấy virus bệnh ngày ủ bệnh/lúa ngày (để đảm bảo rầy nhiễm/mang virus) Cho 01 rầy nhiễm virus vào ống nghiệm với mạ – 10 ngày tuổi cách sử dụng ống hút rầy đậy ống nghiệm lại nắp nhựa Cho rầy chích hút mạ ống nghiệm 24 (lần chủng 1) Sử dụng giá (racks) đựng ống nghiệm (40 ống/rack = 120 ống nghiệm 16x160 mm) cho thí nghiệm Ngày (sau chủng 24 giờ), lấy mạ khỏi ống nghiệm thay mạ Cứ tiếp tục ngày (lần chủng 3) Cây mạ chủng cấy bể chứa đất 20 cây/hàng giữ nhà kính (lưới) triệu chứng bệnh xuất tính trung bình thời gian ủ bệnh/nghiệm thức Tỷ lệ bệnh (%) = (Tổng số nhiễm bệnh/Tổng số quan sát) x 100 - Tính trung bình thời gian ủ bệnh RRSV lúa: Quan sát, theo dõi ngày ghi nhận thời điểm (ngày) lúa/nghiệm thức (lần chủng bệnh 1, 3) bắt đầu biểu triệu chứng bệnh sau chủng bệnh Sau Tính trung bình tỷ lệ (%) số lúa thể triệu chứng = (Tổng số nhiễm bệnh riêng triệu chứng/Tổng số nhiễm bệnh quan sát) x 100: Được ghi nhận nghiệm thức (lần chủng 1, 3) triệu chứng bệnh điển xoắn lá, xoắn chóp, rách mép theo mô tả triệu chứng Hibino (1979) Pepito Q et al.(2009) - Tính trung bình thời gian ủ bệnh triệu chứng RRSV lúa: Quan sát, theo dõi ngày ghi nhận thời điểm (ngày) lúa bắt đầu biểu riêng cho triệu chứng bệnh sau lần chủng bệnh 2.2.2 Phân tích liệu Số liệu thu thập, xử lý phân tích phương sai ANOVA, DUNCAN tiêu theo dõi tồn thí nghiệm phần mềm Excel SAS * Chỉ tiêu theo dõi: - - KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tỷ lệ bệnh Từ kết Bảng cho thấy tỷ lệ lúa bị nhiễm bệnh LXL nghiệm thức có gia tăng khác biệt thống kê mức ý nghĩa 5% 1% qua lần chủng, cụ thể sau: Bảng Tỷ lệ (%) lúa bị nhiễm bệnh sau chủng Tỷ lệ (%) nhiễm bệnh lúa sau chủng bệnh (NSC) Nghiệm thức 15 ngày 20 ngày 25 ngày 30 ngày T1 (chủng lần 1) 8,2 b 24,6 b 32,9 b 42,5 b T2 (chủng lần 2) 12,9 ab 31,3 ab 41,8 a 46,6 b T3 (chủng lần 3) 18,4 a 37,5 a 45,8 a 58,8 a Ý nghĩa * * ** * CV (%) 18,5 12,17 13,7 10,4 Các số có chữ số theo sau cột bảng khơng khác biệt có ý nghĩa mức 5% (*) (**): 1% - Ở thời điểm 15 – 20 NSC: Có khác biệt thống kê mức ý nghĩa 5% nghiệm thức Tỷ lệ bệnh cao nghiệm thức chủng lần (18,4 – 37,5%) Kết ghi nhận triệu chứng bệnh xuất kể từ sau 15 ngày chủng bệnh thấp so đồng với ghi nhận 81 AGU International Journal of Sciences – 2021, Vol 28 (2), 78 – 84 Hồ Văn Chiến ctv (2012) cho rầy nâu lấy nguồn siêu vi khuẩn với thời gian ủ bệnh 15 ngày lây nhiễm quần thể rầy nâu lên lúa cho tỷ lệ nhiễm bệnh lùn xoắn lên đến 90% Đối với mạ sau lây nhiễm 15 ngày tỷ lệ xuất bệnh lùn xoắn trung bình 2,32% Theo Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn (2006) cho rầy nâu chích hút lúa bệnh sau đến 19 phút mang mầm bệnh thể khoảng 10 ngày sau lan truyền virus gây bệnh sang lúa khỏe khác - Ở thời điểm 25 NSC: Có khác biệt thống kê mức ý nghĩa 1% nghiệm thức Tỷ lệ cao nghiệm thức chủng lần (45,8%) thấp nghiệm thức chủng lần (32,9%) - Ở thời điểm 30 NSC: Tiếp tục có khác biệt thống kê mức ý nghĩa 5% nghiệm thức Tỷ lệ cao nghiệm thức chủng lần (58,8%) thấp lần chủng (42,5%) ủ bệnh Thời gian ủ bệnh lúa dao động từ 15 – 30 ngày Kết ghi nhận nghiên cứu Cao Thị Xuân Thẩm (2012) cho thời gian ủ bệnh lúa bệnh LXL từ 14 – 30 ngày Trung bình thời gian ủ bệnh phương pháp chủng cá thể cao chủng lần (24,2 ngày) thấp lần chủng thứ (18,2 ngày) Kết cho thấy thời gian ủ bệnh lúa không phụ thuộc vào số lần rầy mang bệnh chích hút vào thời gian ủ bệnh khoảng 18,2 – 24,2 ngày phương pháp chủng cá thể Kết ghi nhận Hồ Văn Chiến ctv (2012) thời gian ủ bệnh lùn xoắn lúa 23,08 ngày Nguyễn Phú Dũng ctv., (2016) chứng minh thời gian (ngày) thể triệu chứng thời gian rầy nâu cho chích hút lúa bệnh biến động với từ 15 – 30 ngày trung bình từ 18 – 25,9 ngày Kết tương tự ghi nhận nghiên cứu Phạm Văn Dư ctv., (2010) cho rằng, triệu chứng bệnh xuất sau bị rầy nâu bay đến chích hút 15 – 20 ngày Kết tương đồng với ghi nhận nghiên cứu Vương Thị Thắm (2010) với trung bình biến động từ 17,5 – 18,9 ngày Cabunagan et al., (2010) cho rằng, trung bình thời gian ủ vi rút RGSV giống lúa TN1 18,7 ngày Như vậy, thời điểm ghi nhận điều cho kết lần chủng thứ có tỷ lệ bệnh cao (18,4 – 58,8%) 3.2 Thời gian ủ bệnh Dựa Hình cho thấy khơng có khác biệt ý nghĩa thống kê nghiệm thức thời gian Ngày 24,2 25 20,6 18,2 20 15 10 chủng lần chủng lần chủng lần Hình Trung bình thời gian ủ bệnh lúa 82 Nghiệm thức AGU International Journal of Sciences – 2021, Vol 28 (2), 78 – 84 48,3%) so với rách (29,9 – 35%) thấp triệu chứng xoắn (19,5 – 21,7%) biện pháp chủng bệnh cá thể Kết có ý nghĩa thực tiễn điều tra, chẩn đốn phát triệu chứng điển hình sớm bệnh lùn xoắn lá, góp phần sở cho nhận diện quản lý dịch hại nhanh nghiên cứu đồng ruộng 3.3 Triệu chứng biểu bệnh Từ kết Bảng cho thấy có chênh lệch trung bình tỷ lệ (%) thể triệu chứng bệnh với dạng đặc trưng xoắn (XL), rách (RL), xoắn chóp (XC) ba lần chủng bệnh Qua lần chủng bệnh triệu chứng xoắn chóp với tỷ lệ (%) thể triệu chứng cao (45,5 – Bảng Trung bình tỷ lệ (%) số lúa thể triệu chứng Triệu chứng Chủng lần Chủng lần Chủng lần Xoắn chóp 45,5 48,4 48,3 Rách 35,0 29,9 31,1 Xoắn 19,5 21,7 20,6 3.4 Thời gian ủ bệnh triệu chứng nhận Hồ Văn Chiến ctv (2012) thời gian ủ bệnh lùn xoắn lúa 23,08 ngày Như vậy, thời gian ủ bệnh triệu chứng điển hình bệnh RRSV khơng có biến động lớn so với thời gian ủ bệnh lùn xoắn lúa Kết cho thấy thời gian ủ bệnh triệu chứng xoắn (XL), rách (RL), xoắn chóp (XC) ba lần chủng bệnh dù có chênh lệch thời gian ủ bệnh, khơng phụ thuộc vào số lần rầy mang bệnh chích hút vào cây, tập trung biến động từ 19,4 – 25,2 ngày (Bảng 3) Theo ghi Bảng Trung bình thời gian (ngày) ủ bệnh triệu chứng sau chủng Triệu chứng Chủng lần Chủng lần Chủng lần Xoắn chóp 22,3 22,7 19,4 Rách 23,2 23,5 22,6 Xoắn 25,2 22,0 23,1 KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 4.2 Khuyến nghị 4.1 Kết luận Tiếp tục khảo sát xu hướng phối hợp thể dạng triệu chứng khác bệnh lùn xoắn Tỷ lệ (%) bệnh lùn xoắn chủng lần cao so với chủng bệnh lần chủng bệnh lần Tìm hướng nghiên cứu để biết khả truyền bệnh rầy nâu qua lúa ngày? Thời gian ủ bệnh lúa từ 18,2 – 24,2 ngày không phụ thuộc vào số lần rầy mang virus chích hút truyền bệnh TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Nông nghiệp phát triển nông thơn (2006) Sổ tay hướng dẫn phịng trừ rầy nâu truyền bệnh vàng lùn, lùn xoắn hại lúa Hà Nội: Trung Tâm Khuyến Nông Quốc Gia (Bộ Nông nghiệp phát triển nông thôn) Tỷ lệ (%) triệu chứng thể xoắn chóp cao so với rách xoắn lần chủng bệnh, thời gian ủ bệnh triệu chứng điển hình bệnh tập trung biến động từ 19,4 – 25,2 ngày 83 AGU International Journal of Sciences – 2021, Vol 28 (2), 78 – 84 Nguyễn Phú Dũng (2011) Hiện trạng quản lý bệnh lùn lúa cỏ (Rice Grassy Stunt Virus, RGSV) tương quan sinh học virus vectơ truyền bệnh An Giang Đề tài nghiên cứu khoa học cấp trường Khoa nông nghiệp tài nguyên thiên nhiên Trường Đại học An Giang Cabunagan R.C., Cabauatan P.Q., Cuong L.C., Chien H.V., & Choi I.R (2010) On-Site Research and Hands-On Training on Brown Planthopper-Transmitted Viruses Truy cập từ http://ricehoppers.net/wpcontent/uploads/2009 /10/report-of-on-siteresearch-and-hands-ontraining-on-brownplanthopper-transmittedviruses.pdf 22/11/2015 Nguyễn Phú Dũng., Phạm Văn Dư., & Nguyễn Văn Huỳnh (2016) Nghiên cứu đặc tính truyền vi rút lùn lúa cỏ (RICE GRASSY STUNT VIRUS, RGSV) rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal) Tạp chí khoa học Trường Đại học Cần Thơ Số chuyên đề: Nông nghiệp (2016)(3),136-144 Cao Thị Xuân Thẩm (2012) So sánh thời gian ủ virus vàng lùn lùn xoắn lúa điều kiện nhà lưới khu B Đại học An Giang Đề tài nghiên cứu khoa học cấp Khoa Khoa Nông nghiệp Tài nguyên thiên nhiên Đại học An Giang Cục Bảo vệ thực vật (2014) Ngăn chặn kịp thời rầy nâu, bệnh vàng lùn, lùn xoắn hại lúa Truy cập từ http://phanbonvinaphap.com/index.php/tinnha-nong/shop/81-ngan-ch-n-k-p-th-i-r-y-naub-nh-vang-lun-lun-xo-n-la-h-i-lua Pepito Q Cabauatan, Rogelio C Cabunagan, and Il-Ryong Choi, (2009) New threats to the sustainability of intensive rice production systems in Asia Los Baños (Philippines): International Rice Research Institute In Heong KL, Hardy B, editors 2009 Planthoppers:357368 Hibino H., (1979) Rice ragged stunt, a new virus disease occurring in tropical Asia Rev Plant Prot Res 12:98 Phạm Văn Kim (2016) Các bệnh hại lúa quan trọng Đồng sông Cửu Long Hà Nội: Nhà xuất Nông nghiệp Hồ Văn Chiến., L.Q Cường., L.T Dung., R.Cabunagan, K.L Heong., M.Matsumura., N.H Huân., & I.R.Choi (2012) Nhìn lại nguyên nhân bộc phát rầy nâu, bệnh vàng lùn, lùn xoắn hại lúa vùng Đồng Sơng Cửu Long định hướng quản lí rầy nâu, bệnh vàng lùn-lùn xoắn bền vững Bài viết trình bày kỷ yếu hội nghị quốc gia Phịng chống rầy nâu, bệnh vàng lùn, lùn xoắn hại lúa Hà Nội: Nhà xuất Nông nghiệp Phạm Văn Dư., Phạm Văn Quỳnh., Lê Hữu Hải., Nguyễn Văn Phương., Nguyễn Văn Dương., Trần Quang Củi., Nguyễn Văn Khang., Hồ Văn Chiến., & Nguyễn Hữu Huân (2010) Hiệu giải pháp “Gieo sạ đồng loạt né rầy diện rộng” để phòng trừ bệnh lùn lúa cỏ lùn xoắn ĐBSCL Bài viết trình bày hội thảo quốc gia lần Bệnh hại thực vật Việt Nam Nhà Xuất Bản Nông nghiệp Lương Minh Châu., Lương Thị Phương., & Bùi Chí Bửu (2006) Đánh giá tính kháng tổ hợp lúa suất cao, phẩm chất tốt quần thể rầy nâu Đồng Bằng Sơng Cửu Long 2003-2005 Tạp chí Nơng nghiệp phát triển nông thôn, 2, 16-20 Vương Thị Thắm (2010) Tương quan sinh học vi rút lùn lúa cỏ (Rice Grassy Stunt Virus, RGSV) rầy nâu lúa điều kiện nhà lưới Truy cập từ sở liệu Trường Đại học An Giang, An Giang, Việt Nam 84 ... sánh đánh giá mức độ, thời điểm xuất triệu chứng xoắn lá, xoắn chóp, rách lúa giống OM 6976 hình thức chủng bệnh cá thể điều kiện nhà lưới nên đề tài cần thực hiện, góp phần xác định xu hướng... Chuẩn bị lúa bệnh Thu thập lúa bệnh (Hình 3) từ vùng có dịch bệnh, nhận dạng bệnh triệu chứng bên qua phương pháp ELISA để xác định xác triệu chứng bệnh, bệnh tiếp tục trồng điều kiện nhà lưới để... bệnh vàng lùn, lùn xoắn hại lúa vùng Đồng Sông Cửu Long định hướng quản lí rầy nâu, bệnh vàng lùn- lùn xoắn bền vững Bài viết trình bày kỷ yếu hội nghị quốc gia Phòng chống rầy nâu, bệnh vàng lùn,