BÁO CÁO TIỂU LUẬN_NGHIÊN CỨU VACXIN HPV

Vacxin đầu tiên gắn với tên tuổi của Edward Jenner, một bác sĩ người Anh. Năm 1796, châu Âu đang có dịch đậu mùa, Jenner đã thực hiện thành công thử nghiệm vacxin ngừa căn bệnh này. Thời của Jenner, các virut vẫn chưa được khai phá, còn vi khuẩn tuy đã được tìm ra nhưng vai trò gây bệnh của chúng chưa được biết. Thời điểm 1708, khi Jenner công bố kết quả thí nghiệm của mình, người ta chỉ hình dung là các “mầm bệnh” gây nên sự truyền nhiễm. Đây là lần đầu tiên trong lịch sử, con người đã thanh toán được bệnh hiểm nghèo.

Trường Đại Học Công Nghiệp Thực Phẩm Tp.HCM Khoa Công Nghệ Sinh Học Kỹ Thuật Môi Trường Học Phần: NHẬP MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC HPV VACCINE Nhóm TP.HCM, 30/9/2014 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu Danh sách thành viên GVHD: Trần Hoàng Ngâu Dương Thị Ngọc Huyền 2008120314 Nguyễn Thị Phương 2008120301 Nguyễn Thị Diễm Phương 2008120315 Nguyễn Thị Thu Sang .2008120279 Nguyễn Thị Hưng Nguyên 2008120309 Nguyễn Thị Hoài Kha .2008120286 Trần Thị Kim Duyên 2008120302 Nhóm HPV VACCINE Mục lục Nhóm GVHD: Trần Hoàng Ngâu HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu Sơ lược vaccine 1.1 Lịch sử Vacxin đầu tiên gắn với tên tuổi Edward Jenner, bác sĩ người Anh Năm 1796, châu Âu có dịch đậu mùa, Jenner thực thành công thử nghiệm vacxin ngừa bệnh Thời Jenner, virut chưa khai phá, vi khuẩn tìm vai trị gây bệnh chúng chưa biết Thời điểm 1708, Jenner công bố kết thí nghiệm mình, người ta hình dung “mầm bệnh” gây nên truyền nhiễm Đây lần đầu tiên lịch sử, người toán bệnh hiểm nghèo Tám mươi năm sau, Louis Pasteur nghiên cứu bệnh tả dịch tả tàn sát đàn gà Ơng làm thí nghiệm đàn gà phát số vi khuẩn gây bệnh dịch tả gà, nuôi cấy vài tuần tiếp xúc với môi trường không thuận lợi, bị thay đổi độc tính Ơng thử nghiệm ngun tắc cách cấy số vi khuẩn động vật nhận động vật miễn dịch khỏi virut về sau Pasteur tìm nguyên tắc tiêm chủng với mầm bệnh suy yếu Ông áp dụng nguyên tắc dịch bệnh động vật khác (bệnh than cừu, bệnh đóng dấu lợn), sau bệnh dại Pasteur thành cơng việc hạn chế mà không cần phải nhận dạng tác nhân gây bệnh dại Đó vacxin đầu tiên chống lại bệnh này, áp dụng năm 1885 Qua đó, Pasteur xác nhận giả thuyết Jenner mở đường cho khoa học miễn dịch đại Từ chủng ngừa đẩy lùi nhiều bệnh: triệt tiêu bệnh đậu mùa tồn cầu, tốn gần bệnh bại liệt, giảm đáng kể bệnh sởi, bạch cầu, ho gà, quai bị, thương hàn, uốn ván… Nhóm HPV VACCINE GVHD: Trần Hồng Ngâu Người ta hướng tới triển vọng dùng vacxin để điều trị số bệnh nan y ung thư, AIDS… Tuy nhiên, nhiều bệnh thách thức người, chưa có vacxin đủ hiệu để ngăn ngừa phải kể nhiều bệnh kí sinh trùng (sốt rét, giun, sán), vi khuẩn (lao), virus (cúm, sốt xuất huyết, AIDS…) Một số lý tác nhân gây bệnh biến đổi thường xuyên khiến cho miễn dịch khơng cịn hữu hiệu chí công vào hệ miễn dịch trường hợp HIV 1.2 Hướng phát triển Trong tương lai vacxin phát triển theo hướng • Sử dụng chất phụ gia mới: nhằm gây loại đáp ứng miễn dịch mong muốn Ví dụ, chất nhơm photphat oligonucleotit chứa CpG demetyl hóa đưa vào vacxin khiến đáp ứng miễn dịch phát triển theo hướng dịch thể ( tạo kháng thể) thay tế bào • Vacxin polypeptit: tăng cường tính sinh miễn dịch nhờ liên kết tốt với phân tử MHC; peptit nhân tạo ½ giống virut ½ gắn MHC; đoạn peptit mơ định kháng nguyên (epitop) • Anti-idiotyp: idiptyp cấu trúc khơng gian kháng thể vị trí gắn kháng nguyên, đặc hiệu với kháng nguyên tương ứng Anti-idiotyp kháng thể đặc hiệu idiotyp, anti-idiotyp xét về mặt đặc hiệu lại tương ứng với kháng nguyên Vậy, thay dùng kháng nguyên X làm vacxin, người ta dùng idiotyp anti-anti-X • Vacxin DNA: DNA tác nhân gây bệnh biểu tế bào người chủng ngừa Lợi DNA rẻ, bền, dễ sản xuất số lượng lớn nên thích hợp cho chương trình tiêm chủng rộng rãi Ngòai vacxin DNA giúp định hướng đáp ứng miễn dịch: tác nhân gây bệnh ngoại bào trình diện qua MHC loại II, dẫn đến đáp ứng CD4 (dịch thể tế bào) Khi Nhóm HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu kháng nguyên tác nhân thể người biểu hiện, trình diện qua MHC loại I, lúc đáp ứng miễn dịch qua CD8 kích thích Tuy nhiên phương pháp dao hai lưỡi lẽ tế bào mang DNA lạ có nguy nhận diện “khơng ta” sinh bệnh tự miễn • Sử dụng vector tái tổ hợp: dùng vi khuẩn thuần tính tế bào chuyển gen để biểu kháng nguyên mong muốn HPV Vaccine 2.1 Tổng quan virus HPV 2.1.1 Cấu trúc hình dạng HPV Hình 1: Hình ảnh 3D virus HPV HPV ( Human Papilloma Virus) virus khơng có vỏ ngồi, kích thước nhỏ, đường kính trung bình khoảng 45 -55 nm Vỏ capsid 20 mặt, cấu thành từ 72 capsomer Mỗi đơn vị capsomer gồm hai loại protein capsid protein L1 protein L2 Bộ gen HPV phân tử DNA vòng kép, chứa khoảng 7900 cặp bazơ nitơ, có kích thước từ 7,2 kb đến 8,1 kb Nhóm HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu Cấu trúc genome HPV bao gồm hai gen L1, L2 mã cho capsid vỏ Các gen E1, E2, E3, E4, E6 mã cho protein sớm, vùng LCR vùng điều hồ ngược Hình 2: Cấu trúc gen virus HPV 2.1.2 Phân loại virus HPV HPV định týp dựa khác biệt về trình tự ADN Đến nhà khoa học xác định 200 týp HPV khác Trong 80 týp giải trình tự tồn hệ gen týp lại giải mã phần Dựa vào đích lây nhiễm HPV, nhà virút học chia týp HPV thành hai nhóm sau: o Nhóm (Cutaneous types): lây nhiễm chủ yếu tế bào dưỡng bì (epidermitrophic), đa số týp HPV thuộc nhóm lây nhiễm da o Nhóm (Mucosal types): lây nhiễm lớp niêm mạc chủ yếu lớp lót khoang miệng, khoang họng, ống dẫn khí lớp biểu bì lót đường sinh dục Nhóm HPV VACCINE GVHD: Trần Hồng Ngâu Dựa khả gây tổn thương mô học, đặc biệt khả gây ung thư cổ tử cung, HPV chia làm hai nhóm:  Nhóm HPV nguy cao (High-risk HPV) gồm týp HPV16, 18, 31, 45, 33, 35, 39, 51, 52, 56, 58, 66, 68 ,70 Trong HPV16, 18 chiếm tỷ lệ cao Các týp HPV nguy cao nguyên nhân gây tổn thương nghiêm trọng phát triển thành ung thư cổ tử cung  Nhóm HPV nguy thấp (Low-risk HPV) gồm týp HPV1, 2, 6, 8, 9, 11, 42, 43, 44, 48, 49, 50, 64 phổ biến HPV6, 11 Các týp nguy thấp tác nhân gây nên đa số dạng mụn cơm, mụn cóc sinh dục (HPV6, 11), sùi mào gà chân (HPV1), sùi mào gà tay (HPV2) dạng viêm nhiễm khác Dựa theo chức năng, genome HPV chia thành ba vùng chính:  Vùng gen mã hố cho protein muộn bao gồm gen mã hoá cho protein cấu trúc L1 L2 hình thành vỏ capsid virút  Vùng gen mã hoá cho protein sớm gồm gen E1, E2, E3, E4, E6 E7 Các gen mã hóa cho protein có vai trị quan trọng trình nhân lên virút tiến triển ung thư cổ tử cung  Vùng điều hồ ngược cịn gọi vùng điều khiển dài (LCR) khơng có chức mã hố, vùng có kích thước 400-1000 bp Vùng LCR mang trình tự điều khiển trình chép HPV Dựa cấu trúc gen vùng L1 E6, E7 phân HPV thành týp khác 2.1.3 Cơ chế xâm nhiễm nhân lên HPV lớp biểu mô Cổ tử cung nơi tiếp giáp loại mô khác nhau: biểu mô tế bào trụ tuyến biểu mô lát tầng không sừng hóa HPV tác động chủ yếu vào tế bào biểu mơ lát tầng khơng sừng hóa - lớp biểu mơ có chức che chở, bảo vệ phát triển dần lên hướng bề mặt sau bong ngồi Virút cơng vào Nhóm HPV VACCINE GVHD: Trần Hồng Ngâu phần có khả sinh sản cao lớp tế bào nền biểu mô lát sừng gây tượng phát triển mạnh bình thường sau nhiều lớp tế bào biểu mơ Chu trình nhân lên HPV bắt đầu xâm nhập virút vào lớp tế bào nền biểu mô cổ tử cung Sự nhiễm HPV vào lớp tế bào yêu cầu phải có tổn thương trầy da nhẹ trấn động nhẹ lớp biểu bì Một số týp HPV cịn cần có trợ giúp thụ thể đặc hiệu Ví dụ thụ thể α6-Integrin bề mặt tế bào biểu bì cần cho xâm nhập HPV6 vào tế bào Thụ thể heparin sulfate cần cho xâm nhập HPV11 HPV33 Đa số týp HPV nguy cao nguy thấp xâm nhập vào biểu mô cổ tử cung mà không cần thụ thể đặc hiệu Ngay sau xâm nhập vào tế bào chủ, ADN HPV nhân lên theo chu trình biệt hoá tế bào nền phát triển tiến đến bề mặt biểu bì Trong lớp nền, nhân lên virút khơng có hiệu quả, virút tồn dạng thể bổ sung (episome) nhân lên nhờ máy chép tế bào chủ Trung bình copy tổng hợp sau chu trình nhân lên tế bào Trong tế bào keratin biệt hố phía lớp nền biểu bì, genome virút tái Do số copy ADN virút nhân lên nhiều Protein capsid vỏ HPV tổng hợp lắp ráp với ADN để hình thành vơ số hạt virion Nhóm HPV VACCINE GVHD: Trần Hồng Ngâu Hình 3: Mức độ gây hại tăng dần DNA HPV 2.1.4 Đáp ứng miễn dịch nhiễm HPV Những tổn thương ban đầu xảy biểu mô lát vốn không tiếp xúc với mạch máu Do ban đầu lây nhiễm vào tế bào chủ, HPV hầu khơng gây tình trạng viêm, khơng hoạt hóa hệ miễn dịch Một số kết nghiên cứu miễn dịch học cho thấy có gia tăng nồng độ kháng thể với HPV sau bị nhiễm tự nhiên nồng độ kháng thể chưa đủ để gây đáp ứng miễn dịch Trường hợp người mắc hội chứng suy giảm miễn dịch (AIDS), khả bảo vệ chống virút hệ miễn dịch giảm đáng kể Do bệnh nhân dễ bị nhiễm HPV nhiễm tiến triển tiền ung thư nhanh nghiêm trọng Không giống nhiễm hầu hết virút khác, sau lây nhiễm HPV lượng kháng thể thể người sinh khơng đủ để chống lại lần tái nhiễm về sau Nguyên nhân HPV gây miễn dịch chỗ hàm lượng kháng thể sinh thấp Kháng thể sinh nhiễm tự nhiên không tạo khả bảo vệ đầy đủ cho thể chống lại lần tái nhiễm với týp HPV với týp HPV khác có tương đồng hệ gen Nhóm 10 HPV VACCINE GVHD: Trần Hồng Ngâu Mặc dù tiêm vaccine phụ nữ phải khám định kì Pap Hình 6: Nhận biết tế bào bị nhiễm virus HPV qua kính hiển vi điện tử Ngồi vắcxin phịng bệnh, chẳng hạn Gardasil Cervarix, nghiên cứu phịng thí nghiệm số thử nghiệm lâm sàng người tập trung vào việc phát triển vắc-xin HPV điều trị Bệnh HPV liên quan trở nghiệm lý tưởng miễn dịch đặc hiệu kháng nguyên biểu oncoproteins virus cung cấp không tự nhắm mục tiêu kháng nguyên khối u cụ thể Khả tiếp cận tương đối đường sinh dục làm cho dễ dàng để nghiên cứu hiệu lực vắc xin điều trị hệ tuần hoàn mơ đích Nói chung, loại vắc-xin tập trung vào HPV gây ung thư , E6 E7 Từ biểu E6 E7 cần thiết để thúc đẩy tăng trưởng tế bào ung thư cổ tử cung (và tế bào mụn cóc), hy vọng đáp ứng miễn dịch chống lại hai nhân gây ung thư tiêu diệt thành lập khối u Có thuốc chủng ngừa HPV trị liệu làm việc thử nghiệm lâm sàng Mexico Phát triển Ricardo Rosales Nó trải qua thử nghiệm lâm sàng chấp thuận cho sử dụng phủ Mexico Đó MVA dựa vaccine với protein E2 bò thêm vào Nó chứng Nhóm 17 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu minh để loại bỏ hoàn toàn HPV đến mức bệnh nhân xét nghiệm âm tính diện HPV xét nghiệm máu Thuốc chủng thức gọi vắc xin MEL-1 mà gọi vắc-xin MVA-E2 Vắc-xin chứng minh an toàn biết có khơng có tác dụng phụ vấn đề khác Vắc-xin đến khu vực bị nhiễm bệnh có giải pháp cụ thể nhiễm trùng nhẹ 2.3 Cơ chế tác dụng vaccine HPV Khi bệnh nhân sau nhận vắc-xin, hệ miễn dịch sản xuất kháng thể chống lại protein thể gặp lại hình thức virus HPV thực tế trang bị để xử lý tiêu diệt virus Các vắc-xin HPV dựa hạt virus rỗng (VLPs) lắp ráp từ protein tái tổ hợp vỏ HPV Virút có sợi đơi DNA vỏ bao gồm 72 capsomeres Mỗi tiểu đơn vị virus bao gồm hai phân tử protein, L1 L2 Lý virus có khả ảnh hưởng đến da lớp niêm mạc cấu trúc Các cấu trúc thể E1 E2, gen chịu trách nhiệm cho chép virus E1 protein bảo tồn cao virus, chịu trách nhiệm sản xuất virus tham gia vào bước trình chép Thành phần thứ hai trình E2 đảm bảo khơng có tương tác khác E1 thực trình chép Kết đảm bảo sản xuất nhiều số lượng tế bào chủ Khi biết cấu trúc virus, phát triển vắc xin ngày có hiệu hơn, chẳng hạn Gardasil Cervarix Gardasil protein tổng hợp nấm men Saccharomyces cerevisiae Gardasil có chứa protein L1 hoạt động từ bốn chủng HPV khác nhau: 6, 11, 16, 18 Mỗi liều vắc-xin chứa 225 mg nhôm, 9,56 mg natri clorua, 0,78 mg L-histidine, 50 mg polysorbate 80, 35 mg borat natri nước Sự kết hợp Nhóm 18 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu thành phần tổng cộng 0,5 ml Cùng với nhau, hai loại HPV gây khoảng 70% tất bệnh ung thư cổ tử cung Gardasil nhằm kháng lại HPV tuýp 11, gây khoảng 90% tất trường hợp mụn cóc sinh dục Hình 7: Cơ chế tác dụng vaccine HPV Nhóm 19 HPV VACCINE GVHD: Trần Hồng Ngâu 2.4 Quy trình sản xuất vaccine HPV Hình 8: Quy trình sản xuất vaccine HPV qua kỹ thuật chuyển gen Gardasil loại vắc-xin tái tổ hợp, hình loại vắcxin Gardasil tái tổ hợp thực cách lấy gen mã hóa cho protein capsid loại HPV 6, 11, 16, 18 chèn chúng vào men vector biểu hiện, trịn mảnh DNA có chứa trình tự cụ thể cho phép dịch gen vào protein HPV gen mã hóa protein thể vectơ men để tạo lượng lớn protein, sau tinh chế sử dụng vắc-xin Nhóm 20 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu Các phương pháp tinh HPV 16 L1 tái tổ hợp 2.4.1 Nguyên liệu & phương pháp:  Môi trường YPDG, đệm sucrose  S cerevisiae Y2805 chứa plasmid YEGa-HPV 16  Nuôi cấy 48h, lắc 300C  Dịch phân  Siêu ly tâm Tủa amonium sunfate  Sắc ký kích trước-loại trừ  Sắc ký trao đổi cation 2.4.2 Kết quả: 2.4.2.1 Sự phụ thuộc sản xuất HPV 16 protein L1 nguồn carbon: Để nghiên cứu ảnh hưởng nguồn carbon sản xuất protein HPV 16 L1, sử dụng biến thể môi trường YPDG: điều kiện (1% glucose, 1% galactose), điều kiện (0% glucose, 4% galactose), điều kiện (0,5% glucose , 3,5% galactose), điều kiện (1% glucose, 3% galactose) Tất mơi trường có chứa 1% chiết xuất nấm men 2% peptone Sản phẩm HPV 16 L1 phân tích Western blotting điều kiện 4% carbon cao gấp 2,2 - 2,7 lần điều kiện 2% carbon Hỗn hợp nguồn carbon tối ưu 1% glucose 3% galactose (điều kiện 4); cường độ band với 1% glucose 3% galactose cao 23% so với 4% galactose Nhóm 21 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu Kết cho thấy hàm lượng carbon tỷ lệ glucose galactose ảnh hưởng quan trọng đến sản xuất HPV 16 L1 Nhóm 22 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu  Sự phụ thuộc HPV 16 L1 S.cerevisiae nguồn carbon Cường độ band protein L1 ứng với điền kiện nguồn carbon, cường độ band tăng hàm lượng carbon tăng từ 2% lên 4%, nguồn carbon tối ưu 1% glucose & 3% galactose 2.4.2.2 Tối ưu hóa tinh HPV 16 L1: Siêu ly tâm sử dụng đệm sucrose: Sự phụ thuộc hiệu suất thu hồi HPV 16 L1 hàm lượng sucrose đệm sucrose sau: hiệu suất thu hồi HPV 16 L1 sử dụng đệm sucrose 40% 6h (phương pháp b) 27%, sử dụng đệm sucrose 45% 10h (phương pháp a) 18,1% Tuy nhiên, độ tinh khiết protein L1 sử dụng phương pháp (a) cao so với phương pháp (b) Do đó, tăng hàm lượng sucrose làm tăng độ tinh khiết giảm hiệu suất thu hồi Tủa Ammonium sulfate: Sự phụ thuộc hiệu suất thu hồi HPV 16 L1 vào hàm lượng ammonium sulfate sử dụng (40%, 45% 50%) phân tích SDS-PAGE Western blotting Hiệu suất thu hồi cách sử dụng tủa ammonium sulfate 78,3% sử dụng siêu ly tâm (a) (b) tương ứng 18,1% 27% Những kết chứng tỏ 45% ammonium sulfate tối ưu cho thu hồi L1 từ dịch phân tế bào tủa ammonium sulfate hiệu siêu ly tâm sử dụng đệm sucrose Sắc ký kích thước – loại trừ (size – exclusion chromatography): Sắc ký kích thước – loại trừ sử dụng cột kích thước Sephacryl S-1000 Các phân đoạn thu kiểm tra bước sóng 280nm phân tích SDS-PAGE Western blotting Protein L1 (55,9 kDa) phát phân đoạn Nhóm 23 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu 42-74 Độ tinh khiết HPV 16 L1 phân đoạn 42-54 cao phân đoạn 56-70 Sắc ký trao đổi cation: Các phân đoạn 42-54 hay tất phân đoạn thu từ sắc ký kích thướcloại trừ cho vào cột trao đổi cation Poly-Prep sử dụng đệm có chứa 0,1 M NaCl Hiệu suất thu hồi HPV 16 L1 xác định SDS-PAGE, ELISA Western blotting Độ tinh khiết cuối trường hợp 98,5-100% Trong phương pháp (a), phân đoạn 42-54 từ sắc ký kích thước-loại trừ thu nhận đem sắc ký trao đổi cation Độ tinh khiết mẫu phương pháp (a) 19,2% (mức cao độ tinh khiết), cột rửa đệm có chứa 0,35 M NaCl Các mẫu thu phương pháp (b) (c) có chứa nhiều tạp Sử dụng đệm rửa có chứa 0,6 M NaCl để loại bỏ tạp chất Độ tinh khiết HPV 16 L1 tăng từ 1% đến 98,5% theo phương pháp (c) Sắc ký trao đổi cation thực phương pháp (a), (b) (c) Kết tinh phương pháp (a), (b) (c) hiển thị gel SDS-PAGE tương ứng (A), (B) (C); 1: phân đoạn thu nhận từ sắc ký kích thước - loại trừ; 2: khơng ràng buộc; 3: qua rửa; 4: eluted Protein HPV 16 L1 tách phương pháp (c) phát Western blotting (D)  Tự lắp ráp protein tinh khiết HPV 16 L1 thành VLPs: HPV 16 L1 tinh chế phương pháp (c) tự lắp ráp thành VLPs khác nhau, đường kính từ 35 nm đến 64 nm với đường kính 49 nm Hiệu suất thu hồi phương pháp (a), (b) (c) tương ứng 1,9%, 10,2% 30,6% Những kết chứng tỏ tủa ammonium sulfate hiệu cho thu Nhóm 24 HPV VACCINE GVHD: Trần Hồng Ngâu hồi HPV 16 L1, tạp chất từ bước loại bỏ cách tối ưu sắc ký kích thước-loại trừ sắc ký trao đổi cation Nhóm 25 HPV VACCINE GVHD: Trần Hồng Ngâu Như điều kiện tối ưu để sản xuất tinh protein HPV 16 L1 nuôi cấy chủng nấm men S cerevisiae Y2805 chứa plasmid YEGa-HPV 16 L1 môi trường YPDG với nguồn carbon 4% (1% glucose 3% galactose), tủa protein L1 sau dịch phân ammonium sunfate (phương pháp c), sau đem sắc ký kích thước– loại trừ sắc ký trao đổi cation thu protein HPV 16 L1 tinh khiết có khả tự lắp ráp thành VLPs, thành phần vaccine ngừa HPV ung thư cổ tử cung 2.5 Các vấn đề liên quan Ung thư cổ tử cung mối nguy hại tới sức khỏe tâm lý chị em phụ nữ, người quan tâm, phịng ngừa khắc phục ung thư Nguyên nhân bắt nguồn từ nhiều lí Khi biết lí giúp chị em giảm gánh nặng bệnh tất, điều trăn trở cần giải đáp Hằng năm giới có khoảng 500.000 người mắc bệnh, có 200.000 chị em phụ nữ bị mắc bệnh ung thư cổ tử cung Ung thư cổ tử cung bệnh đứng sau ung thư vú Đề phòng ngừa ung thư cổ tử cung, nhà khoa học tìm loại vaccine phịng ngừa virus HPV gây ung thư cổ tử cung Sau đây, số vấn đề liên quan tới vaccine ngừa HPV ung thư cổ tử cung 2.5.1 Nguyên nhân - Do nhiễm virus papilloma (HPV) Nhưng loại HPV gây bệnh, 100 loại HPV có khoảng 15 loại có nguy gây bệnh cao, cịn lại gây bệnh lành tính - Phụ nữ đối tượng xâm nhiễm HPV, đặc biệt phụ nữ thời thời kì sinh đẻ phụ nữ tuổi trung niên - Các trường hợp nhiễm HPV có khả tự khỏi Nhóm 26 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu - Một số bệnh liên quan tới ung thư cổ tử cung như: ung thư âm đạo âm hộ phụ nữ, ung thư hậu môn hầu họng (mặt sau cổ họng, kể gốc lưỡi amidan) nam giới nữ giới HPV cụng gây mụn cơm sinh dục mụn cơm cổ họng 2.5.2 Tại phải tiêm vaccine HPV - Vaccine HPV dùng để ngăn ngừa HPV Có thể dùng vaccine HPV cho nam nữ - Ngồi ra, cịn ngừa ung thư âm đạo âm hộ phụ nữ, mụn cơm sinh dục ung thư hậu môn cà nam nữ - Mặc dù tiêm vaccine phụ nữ phải khám định kì Pap 2.5.3 Liều lượng tiêm Tiêm vắc xin HPV đợt liều: - Liều thứ nhất: Hiện - Liều thứ hai: Sau liều từ đến tháng - Liều thứ ba: Sau liều tháng 2.5.4 Vaccine có nguy gì? Bất kì loại vaccine đều có tác dụng phụ, gây vấn đề trầm trọng phản ứng dị ứng nặng, vaccine HPV khơng loại trừ khả Đối với vaccine HPV, phản ứng đe dọa tính mạng Nếu xảy kéo dài vài phút tới vài sau tiêm chúng Các phản ứng cánh tay có vết tiêm: - Đau ( khoảng 8/10 người) - Da bị đỏ sưng tấy (1/4 người) - Sốt - Nhức đầu - Ngất xỉu: Ngất xỉu thời gian ngắn triệu chứng có liên quan khác (như động tác co giật) xảy sau thủ thuật y tế nào, bao gồm tiêm chủng Ngồi nằm xuống khoảng 15 phút sau tiêm chủng giúp ngăn ngừa ngất xỉu thương tích ngã Cho bác sĩ biết bệnh nhân cảm thấy chóng mặt chống Nhóm 27 HPV VACCINE GVHD: Trần Hồng Ngâu váng có thay đổi thị lực ù tai Giống tất loại vắc xin, người ta tiếp tục theo dõi vắc xin HPV để phát vấn đề bất thường trầm trọng 2.5.5 Hiệu vaccine HPV nào? Loại vắc xin nghiên cứu phụ nữ trẻ chưa mắc bốn type virus HPV 6, 11, 16, 18 nhà nghiên cứu nhận thấy hiệu vắc xin đạt 100% ngăn ngừa ung thư cổ tử cung bốn type HPV gây Tương tự, họ ghi nhận hiệu bảo vệ 100% cho ung thư âm hộ, âm đạo bệnh mụn cóc đường sinh dục Loại vắc xin tỏ hiệu phụ nữ chưa quan hệ tình dục, hiệu phụ nữ trẻ mắc bốn loại HPV có tác dụng phịng ngừa khơng có tác dụng điều trị người mắc ung thư cổ tử cung, âm hộ, âm đạo hay mụn cóc đường sinh dục 2.5.6 Tên loại vắc xin có Việt Nam - Gardasil: định cho phụ nữ từ 9-26 tuổi, phòng chống HPV type 16, 18, 6, 11 - Cervarix: định cho phụ nữ 10-25 tuổi, phòng chống HPV type 16, 18 2.5.7 Giá thành vắc xin Khoảng 120 đô la Mỹ đợt tiêm Ở Việt nam, giá thành vắc xin thay đổi khoảng triệu đồng tùy theo sở tiêm vắc xin loại vắc xin 2.5.8 Vắc xin ngừa HPV có an toàn Tổ chức FDA (Food and Drug Administration) cơng nhận tính an tồn hiệu vắc xin ngừa HPV Vắc xin thử nghiệm 11000 phụ nữ (tuổi từ 9-26 tuổi) nhiều quốc gia giới Những nghiên cứu vắc xin không gây tác dụng phụ nghiêm trọng Tác dụng phụ Nhóm 28 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu thường thấy đau vùng tiêm Tuy nhiên giống loại vắc xin khác, có số chống định khơng sử dụng phụ nữ dị ứng với thành phần thuốc, hoãn tiêm phụ nữ sốt Vì vắc xin sử dụng đường tiêm bắp nên phụ nữ bị rối loạn đông máu hay sử dụng chất chống đông phải cẩn thận dùng Đối với người bị suy giảm miễn dịch hay điều trị chất ức chế miễn dịch, hiệu vắc xin giảm 2.5.9 Phụ nữ tiêm ngừa khơng cần thực test tầm sốt ung thư cổ tử cung? Khơng phải Có nhiều lý để phải tầm soát ung thư tử cung người tiêm ngừa Thứ nhất, loại vắc xin khơng có tác dụng bảo vệ chống lại tất type HPV có khả gây ung thư cổ tử cung HPV type 16 18 gây 70% ung thư cổ tử cung type 11 gây 90% mụn cóc đường sinh dục Bởi vắc xin khơng có tác dụng chống tất type nên có tác dụng phịng ngừa 30% ung thư cổ tử cung nói chung Thứ hai, khơng phải chích ngừa đầy đủ mũi vắc xin hiệu vắc xin khơng phát huy đầy đủ Thứ ba, phụ nữ đạt hiệu bảo vệ 100% họ chích ngừa sau mắc phải bốn loại HPV Do sau tiêm ngừa phụ nữ mắc ung thư rơi vào ba trường hợp 2.5.10HPV liên quan với ung thư cổ tử cung? Vài type HPV gây nhiễm trùng cổ tử cung gây nên biến đổi tế bào cổ tử cung, từ chỗ gây loạn sản cổ tử cung đến ung thư chỗ cuối ung thư lan tràn Nếu tác nhân gây biến đổi bị loại bỏ, tế bào cổ tử cung phục hồi bình thường, kích thích tiếp tục dẫn đến ung thư Nhưng phụ nữ nhiễm HPV phát triển thành ung thư cổ tử cung sau đó, có khoảng 60-70% phụ nữ quan hệ tình dục có nhiễm HPV, sau năm cịn lại 30% số tiếp tục mang HPV sau Nhóm 29 HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu năm số 9%, điều có nghĩa chế bảo vệ tự nhiên thể miễn dịch chỗ miễn dịch tồn thân góp phần quan trọng loại bỏ HPV khỏi thể 2.5.11 Thời gian bảo vệ loại vắc xin này? Thời gian bảo vệ loại vắc xin chưa hiểu rõ Những tính tốn nghiên cứu gần cho thấy thời gian bảo vệ khoảng 30 năm 2.5.12Phụ nữ có nên làm test tầm sốt ung thư cổ tử cung trước chích ngừa? Khơng cần thiết PAP’smear hay HPV test cho bệnh nhân biết họ có biến đổi tiền ung thư hay khơng họ có nhiễm HPV khơng khơng thể cho biết xác type HPV bị nhiễm Thậm chí họ nhiễm loại HPV vắc xin có tác dụng bảo vệ chống type lại 2.5.13Phụ nữ có thai chích ngừa? Vắc xin khơng có định phụ nữ có thai Số lượng nghiên cứu cịn hạn chế việc chứng tỏ tính an toàn vắc xin cho mẹ thai Hiện phụ nữ có thai nên sinh xong nên chích ngừa, họ phát mang thai sau chích hai đợt nên chờ thai kỳ chấm dứt chích tiếp Tài liệu tham khảo [1] HPV Vaccines and Screening in the Prevention of Cervical Cancer Vaccine, Vol 24, Sup3, Aug 2006 ELSEVIER [2] Weinstock H, Berman S, Cates W Jr Sexually transmitted diseases among American youth: incidence and prevalence estimates, 2000 Perspect Sex Reprod Health 2004;36:6 10 Nhóm 30 HPV VACCINE [3] GVHD: Trần Hoàng Ngâu Karen Soren, MD, The HPV Vaccine: A Clinical Update , Columbia University Medical Center [4] HPV Vaccines and Screening in the Prevention of Cervical Cancer Vaccine, Vol 24, Sup3, Aug 2006 ELSEVIER [5] Weinstock H, Berman S, Cates W Jr Sexually transmitted diseases among American youth: incidence and prevalence estimates, 2000 Perspect Sex Reprod Health 2004;36:6 10 [6] http://luanvan.net.vn/luan-van/human-papilloma-virus-hpv-59390/ [7] http://www.scribd.com/doc/95395941/Cac-Phuong-Phap-San-Xuat- Vacxin-CNVS-Voi-Vacxin-the-He-Moi [8] http://www-scf.usc.edu/~uscience/gardasil_vaccine.html [9] http://www.tiin.vn/chuyen-muc/yeu/xong-truyen-tranh-chan-dung-su- xam-nhap-cua-virus-hpv.html [10] http://baigiang.violet.vn/present/show/entry_id/4005403 Video tham khảo: [1] [2] [3] [4] [5] Nhóm https://www.youtube.com/watch?v=yxF05eaDFXI https://www.youtube.com/watch?v=kVokACvuLUI https://www.youtube.com/watch?v=EZtDrju_gwM https://www.youtube.com/watch?v=wQSTUIw8_1U https://www.youtube.com/watch?v=iD2i7YYAID4 31 ... tế bào chuyển gen để biểu kháng nguyên mong muốn HPV Vaccine 2.1 Tổng quan virus HPV 2.1.1 Cấu trúc hình dạng HPV Hình 1: Hình ảnh 3D virus HPV HPV ( Human Papilloma Virus) virus khơng có vỏ ngồi,... sinh dục Nhóm HPV VACCINE GVHD: Trần Hoàng Ngâu Dựa khả gây tổn thương mô học, đặc biệt khả gây ung thư cổ tử cung, HPV chia làm hai nhóm:  Nhóm HPV nguy cao (High-risk HPV) gồm týp HPV1 6, 18,... 68 ,70 Trong HPV1 6, 18 chiếm tỷ lệ cao Các týp HPV nguy cao nguyên nhân gây tổn thương nghiêm trọng phát triển thành ung thư cổ tử cung  Nhóm HPV nguy thấp (Low-risk HPV) gồm týp HPV1 , 2, 6,