Kết quả nghiên cứu cho thấy muối kim loại ảnh hưởng đến sự tsoj chồi và rễ của cây Cúc.
MỤC LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC BIỂU ĐỒ vi DANH MỤC HÌNH .vii MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ABA : Absisic acid DNA : Deoxynucleotic acid BA : Benzyl adenine IAA : 3-indoleacetic acid IBA : 3-indolebutyric acid GA3 : Gibberellic acid KHCN : Khoa học công nghệ KT – XH : Kinh tế – xã hội MS : Murashige Skoog, 1962 NAA : Napthaleneaxetic acid NT : Nghiệm thức 2,4-D : 2,4-dichlopophenoxyacetic acid DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Giá trị xuất nhập hoa cúc hàng năm số nước giới 34 Bảng 1.2 Tình hình sản xuất hoa thành phố Đà Lạt .36 Bảng 2.1 Khảo sát ảnh hưởng bạc nitrate (AgNO 3) lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) 53 Bảng 2.2 Khảo sát ảnh hưởng loại mẫu cấy lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) 55 Bảng 2.3 Khảo sát ảnh hưởng GA3 lên khả tạo chồi bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) 56 Bảng 2.4 Khảo sát ảnh hưởng đồng sulphate (CuSO 4) lên khả tạo rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) 56 Bảng 2.5 Khảo sát ảnh hưởng cobalt nitrate Co(NO 3)2 lên khả tạo rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) 57 Bảng 3.1 Ảnh hưởng bạc nitrate (AgNO3) lên khả tăng trưởng chồi cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy 60 Bảng 3.2 Ảnh hưởng loại mẫu cấy lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy .67 Bảng 3.3 Ảnh hưởng GA3 lên khả tạo chồi từ mẫu cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy 73 Bảng 3.4 Ảnh hưởng CuSO4 đến trình hình thành rễ bất định mẫu cấy từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy .79 Bảng 3.5 Ảnh hưởng Co(NO3)2 đến trình hình thành rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy .89 Bảng 3.8 Ảnh hưởng chất CTVN điều kiện chiếu sáng lên phát triển hoa cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy…… 98 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Ảnh hưởng bạc nitrate (AgNO 3) lên khả tăng trưởng chồi cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.2 Ảnh hưởng loại mẫu cấy lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.3 Ảnh hưởng GA3 lên khả tạo chồi từ mẫu cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.4 Ảnh hưởng CuSO4 đến trình hình thành rễ bất định mẫu cấy từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.5 Ảnh hưởng CuSO4 đến trình hình thành rễ bất định mẫu cấy từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.6 Ảnh hưởng Co(NO3)2 đến trình hình thành rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.7 Ảnh hưởng Co(NO3)2 đến trình hình thành rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium)sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.8 Ảnh hưởng chất CTVN điều kiện chiếu sáng lên phát triển hoa cúc Chrysanthemum morifolium sau tuần nuôi cấy 99 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Gibberellic Acid 18 Hình 1.2 Hộp chất giấy…………………………………… 33 thị vạn dạng Hình 1.3 Chất thị vạn dạng dung dịch…………………………………… 34 Hình 1.4 Cơng thức cấu tạo Cyanidin 3,5-diglucoside……………………………34 Hình 1.5 Cúc Trắng (Chrysanthemum morifolium) 48 Hình 1.6 Sự đa dạng hình thái màu sắc hoa Cúc Chrysanthemum sp 52 Hình 2.1 Ảnh hưởng loại mẫu lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) 54 Hình 3.1 Ảnh hưởng bạc nitrate (AgNO3) lên khả tăng trưởng chồi cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy 62 Hình 3.2 Ảnh hưởng bạc nitrate (AgNO3) lên khả tăng trưởng chồi cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần ni cấy…………… 63 Hình 3.2 Ảnh hưởng loại mẫu cấy lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy 69 Hình 3.3 Ảnh hưởng loại mẫu cấy lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy 70 Hình 3.4 Ảnh hưởng GA3 lên khả tạo chồi từ mẫu cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần ni cấy 75 Hình 3.5 Ảnh hưởng GA3 lên khả tạo chồi từ mẫu cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy 76 Hình 3.6 Ảnh hưởng CuSO4 đến trình hình thành rễ bất định mẫu cấy từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần ni cấy 82 Hình 3.7 Ảnh hưởng CuSO4 đến trình hình thành rễ bất định mẫu cấy từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần ni cấy 83 Hình 3.8 Ảnh hưởng CuSO4 đến trình hình thành rễ bất định mẫu cấy từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần ni cấy 84 Hình 3.9 Ảnh hưởng Co(NO3)2 đến trình hình thành rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium)sau tuần nuôi cấy 92 Hình 3.10 Ảnh hưởng Co(NO3)2 đến trình hình thành rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy 93 Hình 3.11 Ảnh hưởng Co(NO3)2 đến trình hình thành rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium)sau tuần nuôi cấy 94 Hình 3.12 Ảnh hưởng chất CTVN điều kiện chiếu sáng lên phát triển hoa cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần ni cấy………………………………………………………………………100 Hình 3.13 Ảnh hưởng chất CTVN điều kiện chiếu sáng lên phát triển hoa cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy………………………………………………………………………101 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Cây hoa cúc loài hoa phổ biến nhân giống chủ yếu phương pháp vơ tính qua phương pháp giâm cành truyền thống Nhiều năm qua, thực tế cho thấy phương pháp không đáp ứng kịp nhu cầu giống, mặt khác mang nguy làm lây lan bệnh hại làm thối hóa giống Vì để sản xuất số lượng lớn giống bệnh với tốc độ nhanh, chất lượng đồng đồng mặt di truyền, phương pháp nhân giống vơ tính in vitro hoa cúc hiệu Vài năm gần việc nghiên cứu xây dựng quy trình cơng nghệ nhân giống hoa cúc phương pháp nuôi cấy mô có nhiều tiến Bằng phương pháp cho phép từ lượng nhỏ giống ban đầu nhân nhanh với tốc độ cao thời gian ngắn cung cấp lượng lớn giống đồng nhất, bệnh, ngồi giống có nước ta cịn nhập nội giống cúc Sự thành cơng q trình nghiên cứu tái sinh thực vật in vitro có nhờ tìm điều kiện ni cấy thích hợp cho phát triển tế bào mô thực vật Cây cúc khơng nằm ngồi số Do đó, yếu tố đóng vai trị quan trọng mơi trường, nồng độ chất điều hịa trinh trưởng thực vật, nhiệt độ nuôi cấy, pH môi trường, độ ẩm, thành phần khí,… Trong q trình nhân giống cúc in vitro nhà khoa học nghiên cứu chi tiết AgNO3 chất có khả điều khiển q trình sinh trưởng, phát triển chồi thơng qua tác động vào trình trao đổi ethylene (Biddington 1992), AgNO3 ức chế hoạt động ethylene (Beyer 1976), nên bổ sung chất vào môi trường nuôi cấy ức chế việc tổng hợp ethylene chức ethylene cách tác động lên trình tổng hợp tác động lên tín hiệu trao đổi chất (Pua and Chi, 1993), qua ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển trồng (Tao Li, 2006), quan sát hiệu cho bạc nitrate lên sinh trưởng chồi loài Torenia Fournieri CuSO4 Co(NO3)2 có khả ức chế tổng hợp ethylene (Lau and Yang, 1976), bên cạnh chất nguồn kháng ảnh hưởng đến phát sinh hình thái thực vật ni cấy tạo rễ bất định Schwambach cộng sự, (2005) chứng minh Cu, Co, Ca Zn môi trường ni cấy có ảnh hưởng đáng kể đến tạo rễ bất định đối tượng Eucalyptus globulus Labill Trong năm gần đây, chất điều tiết sinh trưởng ngày nhiều nhà khoa học Việt Nam nghiên cứu để tăng suất, chất lượng hoa cúc GA3 acid gibberellin có tác dụng sinh lý mạnh, chất dùng nhiều thực tiễn Khi nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng GA đến sinh trưởng phát triển chất lượng số giống hoa cúc thí nghiệm, tác giả Đặng Ngọc Chi (2006) thử nghiệm bổ sung GA vào môi trường nuôi cấy cho thấy chất lượng mang cành hoa tất giống cúc Đồng Tiền Trắng, CN19, CN20, Cao bồi tím Tua Vàng nâng cao đặc biệt chiều cao Bên cạnh đó, việc phát sớm mẫu nhiễm phịng thí nghiệm có vai trị quan trọng ngành công nghệ sinh học, lĩnh vực nuôi cấy mô thực vật, nhằm hạn chế lây lan vi sinh vật, tìm nguồn nhiễm sớm cứu mẫu bị nhiễm vi sinh Vậy nên, việc tìm phương pháp để nhận biết mẫu vật nhiễm vi sinh nhanh chóng trước hình thành khuẩn lạc vấn đề cấp thiết Trong suốt lịch sử ngành cơng nghệ sinh học, có nhiều thí nghiệm nghiên cứu tiến hành để giải vấn đề thành công Tuy nhiên, hóa chất ứng dụng từ nghiên cứu (ví dụ MTT) lại đắt đỏ khó tìm thị trường Việt Nam Vì chúng tơi sử dụng chất thị vạn (CTVN), vốn sử dụng rộng rãi khắp nơi giới với chi phí khơng q đắt tiền, làm để nghiên cứu Vì chất CTVN có phổ màu rộng, khoảng chuyển màu tương đối hẹp phản ứng xảy nhanh, nên có khả nhận biết với điều kiện thay đổi pH mơi trường có vi sinh vật xuất Với mục đích ứng dụng cơng nghệ sinh học việc phát triển nông nghiệp bền vững, vừa tăng suất trồng, giống khơng bị thối hố, giảm tỷ lệ nhiễm nuôi cấy mô Chúng tiến hành nghiên cứu đề tài: “Khảo sát ảnh hưởng GA3 số muối kim loại lên tạo chồi, rễ bất định Cúc (Chrysanthemum morifolium) in vitro.” Mục đích đề tài − Xác định ảnh hưởng đồng sulphate, cobalt nitrate, bạc nitrate, lên khả tăng trưởng Cúc (Chrysanthemum morifolium) − Xác định loại mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) thích hợp cho nhân giống − Xác định ảnh hưởng chất thị vạn lên môi trường nuôi cấy phát triển (chồi, rễ, ) mẫu cấy cúc (Chrysanthemum morifolium) Nội dung đề tài − Khảo sát ảnh hưởng bạc nitrate (AgNO 3) lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) − Khảo sát ảnh hưởng loại mẫu cấy lên khả tăng trưởng chồi Cúc − (Chrysanthemum morifolium) Khảo sát ảnh hưởng đồng sulphate (CuSO4) lên khả tạo rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) − Khảo sát ảnh hưởng cobalt nitrate Co(NO 3)2 lên khả tạo rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) − Khảo sát ảnh hưởng CTVN lên khả tăng trưởng mẫu cấy Cúc (Chrysanthemum morifolium) Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài nghiên cứu Ý nghĩa khoa học: Kết nghiên cứu đưa biện pháp kỹ thuật nhân giống Cúc (Chrysanthemum morifolium) phương pháp in vitro để đánh giá hoạt tính kích thích tăng trưởng bổ sung GA tạo chồi bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) Và nhằm hạn chế sinh ethylene bình ni cấy để khắc phục tượng thủy tinh thể, trình già hóa, lão hóa mẫu cấy trường hợp hay gặp nuôi cấy mô môi trường đặc sử dụng agar, cấy chuyền mẫu nhiều lần thời gian thực đề tài Đồng thời, kết nghiên cứu đưa chất để bổ sung vào môi trường nhằm phát sớm mẫu nhiễm vi sinh thông qua đổi màu môi trường, hạn chế lây lan mẫu nhiễm, lại không ảnh hưởng xấu đến phát triển Cúc (Chrysanthemum morifolium) Ý nghĩa thực tiễn: Kết nghiên cứu sở để tạo môi trường nuôi cấy thích hợp nhân nhanh giống Cúc (Chrysanthemum morifolium) quy mơ lớn, nhằm cung cấp giống có suất, chất lượng hoa tốt có hiệu kinh tế cao, bên cạnh cịn tìm chất – dễ tìm, phổ biến khơng tốn q nhiều chi phí để đầu tư, nhằm thay cho MTT thuốc thử đắt đỏ khác lại có hiệu tương tự - nhận biết mẫu nhiễm vi sinh thời gian ngắn trước khuẩn lạc hình thành Kết đạt đề tài − Xác định nồng độ thích hợp bạc nitrate (AgNO3) lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) − Xác định loại mẫu cấy thích hợp lên khả tăng trưởng chồi Cúc − (Chrysanthemum morifolium) Xác định nồng độ thích hợp đồng sulphate (CuSO 4) lên khả tạo rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) 10 PHỤ LỤC Phụ lục A: Thành phần môi trường MS Các yếu tố mơi trường Muối khống đa lượng Muối khống vi lượng Vitamin thành phần hữu khác Thành phần Nồng độ (mg/l) CaCl2 2H2O KH2PO4 KNO3 MgSO4.7H2O NH4NO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O H3BO3 KI NaMoO4.2H2O 440 170 1900 370 1650 22,3 8,6 6,2 0,83 0,25 FeSO4.7H2O 27,8 Na2EDTA CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O Glyxin Myo – inositol Acid nicotinic (Niaxin) Thiamin HCl (vitamin B1) Pyridoxin HCl (vitamin B6 ) 37,3 0,025 0,025 100 0,5 0,1 0,5 Phụ lục B: Thống kê xử lý số liệu chương trình Statistical Analysis Systems 9.1 (SAS) 127 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng bạc nitrate (AgNO 3) lên khả tăng trưởng mẫu cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy Chiều cao Sum of DF Squares Mean Square F Value Pr > F 8.61160000 1.72232000 8.64 0.0011 Error 12 2.39340000 0.19945000 Corrected Total 17 11.00500000 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.782517 9.652700 0.446598 4.626667 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 8.61160000 1.72232000 8.64 0.0011 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.19945 Number of Means Critical Range 1.114 1.161 1.192 1.213 1.229 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 5.4033 10 A2 A 4.9700 10 A1 A 4.9633 10 A0 A 4.6233 10 A3 A 4.6000 10 A4 B 3.2000 10 A5 Source Model Chiều cao chồi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 9.15376111 1.83075222 66.05 F NT 9.15376111 1.83075222 66.05 F Model 3.41617778 0.68323556 3.61 0.0317 Error 12 2.26906667 0.18908889 Corrected Total 17 5.68524444 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.600885 21.15455 0.434844 2.055556 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 3.41617778 0.68323556 3.61 0.0317 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.189089 Number of Means Critical Range 7736 8097 8316 8461 8562 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 2.4667 10 A1 A 2.4500 10 A5 A 2.4033 10 A3 B A 1.9367 10 A4 B A 1.8067 10 A0 B 1.2700 10 A2 Số rễ Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 96.4748500 19.2949700 6.33 0.0042 Error 12 36.6008000 3.0500667 Corrected Total 17 133.0756500 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.724962 60.46546 1.746444 2.888333 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 96.47485000 19.29497000 6.33 0.0042 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 3.050067 Number of Means Critical Range 3.107 3.252 3.340 3.398 3.439 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A A B A B B C B C B C B C B C C 129 7.110 10 A3 4.553 10 A0 2.223 10 A4 1.890 10 A1 1.553 10 A5 C 0.000 10 A2 Chiều dài rễ Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 25.94817778 5.18963556 6.25 0.0045 Error 12 9.97000000 0.83083333 Corrected Total 17 35.91817778 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.722425 67.96608 0.911501 1.341111 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 25.94817778 5.18963556 6.25 0.0045 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.830833 Number of Means Critical Range 2.273 2.370 2.432 2.476 2.509 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 3.5333 10 A0 B A 1.7567 10 A3 B A 1.5667 10 A1 B A 1.1900 10 A4 B 0.0000 10 A2 B 0.0000 10 A5 Đường kính Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 4.62151111 0.92430222 49.17 F NT 4.62151111 0.92430222 49.17 F 0.0012 Pr > F 0.0012 Chiều dài Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 5.00037333 1.25009333 14.69 0.0003 Error 10 0.85100000 0.08510000 Corrected Total 14 5.85137333 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.854564 32.97502 0.291719 0.884667 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 5.00037333 1.25009333 14.69 0.0003 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.0851 Number of Means Critical Range 7548 7867 8066 8204 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 1.5233 10 B4 A A 1.5067 10 B1 A 131 B B B C C A 0.7933 10 B3 C 0.6000 10 B5 0.0000 10 B2 Đường kính Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 3.51109333 0.87777333 18.78 0.0001 Error 10 0.46740000 0.04674000 Corrected Total 14 3.97849333 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.882518 28.92877 0.216194 0.747333 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 3.51109333 0.87777333 18.78 0.0001 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.04674 Number of Means Critical Range 5594 5830 5978 6080 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 1.2933 10 B1 A A 1.2600 10 B4 Số chồi B B C C C 0.6267 B 10 B3 0.5567 0.0000 10 B5 10 B2 Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 60.73036000 15.18259000 4.37 0.0267 Error 10 34.73773333 3.47377333 Corrected Total 14 95.46809333 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.636133 63.45232 1.863806 2.937333 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 60.73036000 15.18259000 4.37 0.0267 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 3.473773 Number of Means Critical Range 3.391 3.543 3.633 3.691 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 6.223 10 B5 132 A B B B B B B B A A A 3.273 10 B4 3.080 10 B1 2.110 10 B3 0.000 10 B2 Số Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 1566.932173 391.733043 7.73 0.0042 Error 10 506.884867 50.688487 Corrected Total 14 2073.817040 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.755579 42.25774 7.119585 16.84800 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 1566.932173 391.733043 7.73 0.0042 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 50.68849 Number of Means Critical Range 12.95 13.54 13.88 14.10 Duncan Grouping Mean N NT A 29.693 10 B5 A B A 23.357 10 B1 B A B A 19.333 10 B4 B B C 11.857 10 B3 C C 0.000 10 B2 Trọng lượng khô Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.00277400 0.00069350 16.00 0.0002 Error 10 0.00043333 0.00004333 Corrected Total 14 0.00320733 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.864893 16.59531 0.006583 0.039667 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 0.00277400 0.00069350 16.00 0.0002 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000043 Number of Means Critical Range 01198 01251 01283 01303 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT 133 A B B C B C C D D D 0.061667 0.047000 10 10 B1 B5 0.038000 10 B2 0.026667 10 B4 0.025000 10 B3 Trọng lượng tươi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.93398240 0.23349560 8.35 0.0031 Error 10 0.27956200 0.02795620 Corrected Total 14 1.21354440 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.769632 30.00737 0.167201 0.557200 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 0.93398240 0.23349560 8.35 0.003 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.027956 Number of Means Critical Range 3042 3179 3259 3311 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 0.9670 10 B1 A B A 0.7173 10 B5 B B C 0.4150 10 B4 C C 0.3983 10 B3 C C 0.2883 10 B2 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng GA3 lên khả tạo chồi bất định từ mẫu cúc Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy Chiều cao chồi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 1.56371667 0.31274333 5.08 0.0099 Error 12 0.73813333 0.06151111 Corrected Total 17 2.30185000 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.679330 139.0735 0.248014 0.178333 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 1.56371667 0.31274333 5.08 0.0099 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 134 Error Mean Square 0.061511 Number of Means Critical Range 4412 4618 4743 4826 4883 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 0.8233 10 C1 B 0.1667 10 C4 B B 0.1285 10 C3 B B 0.0080 10 C0 B B 0.0000 10 C2 B B 0.0000 10 C5 Số chồi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 67.19642778 13.43928556 15.16 F NT 67.19642778 13.43928556 15.16 F Model 0.05636894 0.01127379 5.32 0.0083 Error 12 0.02542667 0.00211889 Corrected Total 17 0.08179561 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.689144 40.99777 0.046031 0.112278 135 Source NT DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F 0.05636894 0.01127379 5.32 0.0083 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.002119 Number of Means Critical Range 08189 08571 08803 08957 09063 Duncan Grouping Mean N NT A 0.21267 10 C1 A A 0.16533 10 C2 B 0.07633 10 C5 B B 0.07433 10 C3 B B 0.07300 10 C4 B B 0.07200 10 C0 Trọng lượng tươi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.42402944 0.08480589 4.76 0.0174 Error 10 0.17825800 0.01782580 Corrected Total 15 0.60228744 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.704032 20.64572 0.133513 0.646688 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 0.42402944 0.08480589 4.76 0.0174 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.017826 Harmonic Mean of Cell Sizes 2.571429 Number of Means Critical Range 2624 2742 2811 2856 2885 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 0.8877 10 C1 A A 0.8700 10 C2 A B A 0.6180 10 C3 B B 0.5627 10 C4 B B 0.5290 10 C5 B B 0.4777 10 C0 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng đồng sulphate (CuSO4) lên khả tạo rễ bất định từ mẫu Cúc Chrysanthemum morifolium Trọng lượng tươi 136 Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.50558636 0.12639659 8.10 0.0047 Error 0.14046050 0.01560672 Corrected Total 13 0.64604686 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.782585 17.30974 0.124927 0.721714 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 0.50558636 0.12639659 8.10 0.0047 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.015607 Harmonic Mean of Cell Sizes 2.727273 Number of Means Critical Range 3476 3621 3711 3772 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 0.9270 10 D3 A B A 0.8833 10 D1 B A B A C 0.8105 10 D4 B C B C 0.5547 10 D0 C C 0.4627 10 D5 Trọng lượng khô Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.02119828 0.00423966 11.38 0.0003 Error 12 0.00446933 0.00037244 Corrected Total 17 0.02566761 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.825877 21.86147 0.019299 0.088278 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 0.02119828 0.00423966 11.38 0.0003 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.000372 Number of Means Critical Range 03433 03594 03691 03755 03800 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 0.13700 10 D1 A A 0.13200 10 D2 B B B B B 137 0.08233 10 D3 0.07233 10 D0 0.05400 10 D5 B B 0.05200 10 D4 Chiều dài rễ Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 915.710444 183.142089 18.42 F NT 915.7104444 183.1420889 18.42 F Model 194.1427611 38.8285522 6.13 0.0048 Error 12 75.9563333 6.3296944 Corrected Total 17 270.0990944 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.718783 34.65676 2.515888 7.259444 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 194.1427611 38.8285522 6.13 0.0048 138 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 6.329694 Number of Means Critical Range 4.476 4.685 4.812 4.895 4.953 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 13.467 10 D4 B 8.677 10 D2 B C B 7.813 10 D1 C B C B 5.087 10 D3 C B C B 5.003 10 D0 C C 3.510 10 D5 Thí nghiệm 5: Ảnh hưởng cobalt nitrate (Co(NO 3)2) lên khả tạo rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) sau tuần nuôi cấy Trọng lượng tươi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.35153427 0.07030685 1.96 0.0300 Error 10 0.35783517 0.03578352 Corrected Total 15 0.70936944 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.495559 31.70258 0.189165 0.596688 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 0.35153427 0.07030685 1.96 0.0300 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.035784 Harmonic Mean of Cell Sizes 2.571429 Number of Means Critical Range 3717 3884 3983 4046 4088 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 0.9295 10 E2 A B A 0.7070 10 E3 B A B A 0.5897 10 E4 B A B A 0.5627 10 E1 B B 0.4983 10 E5 B 139 B 0.4407 10 E0 Trọng lượng khô Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.00729444 0.00121574 8.36 0.0014 Error 11 0.00160000 0.00014545 Corrected Total 17 0.00889444 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.820112 14.45327 0.012060 0.083444 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 0.00729444 0.00121574 8.36 0.0014 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 11 Error Mean Square 0.000145 Harmonic Mean of Cell Sizes 2.210526 Number of Means Critical Range 02525 02641 02710 02756 02786 02808 Duncan Grouping Mean N NT A 0.11800 10 E2 A B A 0.09933 10 E3 B B C 0.08367 10 E1 C D C 0.07233 10 E0 D C D C 0.06900 10 E4 D D 0.05500 10 E5 Số rễ Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 172.1891778 34.4378356 8.05 0.0015 Error 12 51.3272667 4.2772722 Corrected Total 17 223.5164444 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.770365 32.39368 2.068157 6.384444 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 172.1891778 34.4378356 8.05 0.0015 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 4.277272 Number of Means Critical Range 3.679 3.851 3.955 4.024 4.072 Duncan Grouping Mean N NT A 12.500 10 E2 B 6.980 10 E3 B B 6.937 10 E1 B B 5.043 10 E0 140 B B B B 3.453 10 E5 3.393 10 E4 Chiều dài rễ Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 452.4498667 90.4899733 3.25 0.0439 Error 12 334.5099333 27.8758278 Corrected Total 17 786.9598000 R-Square Coeff Var Root MSE CDR Mean 0.574934 19.43946 5.279756 27.16000 Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F NT 452.4498667 90.4899733 3.25 0.0439 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 27.87583 Number of Means Critical Range 9.39 9.83 10.10 10.27 10.40 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NT A 36.867 10 E2 A B A 29.930 10 E1 B B 26.223 10 E0 B B 24.817 10 E3 B B 22.927 10 E4 B B 22.197 10 E5 141 ... “Khảo sát ảnh hưởng GA3 số muối kim loại lên tạo chồi, rễ bất định Cúc (Chrysanthemum morifolium) in vitro.” Mục đích đề tài − Xác định ảnh hưởng đồng sulphate, cobalt nitrate, bạc nitrate, lên. .. Khảo sát ảnh hưởng đồng sulphate (CuSO 4) lên khả tạo rễ bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium) 56 Bảng 2.5 Khảo sát ảnh hưởng cobalt nitrate Co(NO 3)2 lên khả tạo rễ bất định từ mẫu Cúc. .. 2.2 Khảo sát ảnh hưởng loại mẫu cấy lên khả tăng trưởng chồi Cúc (Chrysanthemum morifolium) 55 Bảng 2.3 Khảo sát ảnh hưởng GA3 lên khả tạo chồi bất định từ mẫu Cúc (Chrysanthemum morifolium)