Thông tin tài liệu
Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nội dung đồ án tốt nghiệp công trình nghiên cứu thực tơi hướng dẫn Th.S Trịnh Thị Lan Anh – giảng viên trường đại học Công Nghệ TP.HCM Đề tài thực sở nghiên cứu lý thuyết, tiến hành nghiên cứu thực nghiệm phòng thí nghiệm Cơng nghệ Sinh học Thực vật, khoa Công nghệ Sinh học – Thực phẩm – Môi trường, trường Đại học Công nghệ TP.HCM Các số liệu, bảng hoàn toàn trung thực Đồ án không chép hình thức nào, có phát gian lận tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm TP.HCM, ngày 17, tháng 08, năm 2016 Sinh viên thực Nguyễn Hoàng Cẩm Tú Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến thầy cô giảng dạy khoa Công nghệ Sinh học – Thực phẩm – Môi trường tồn thể q thầy cơng tác trường Đại học Cơng Nghệ TP.HCM tận tình giúp đỡ truyền đạt kiến thức cho em suốt quãng thời gian học tập bồi dưỡng trường Để hoàn thành đồ án tốt nghiệp em xin đặc biệt chân thành cảm ơn cô Th.S Trịnh Thị Lan Anh người tận tình diều dắt, hướng dẫn, giúp đỡ góp ý cho em Đồng thời, em xin chân thành cảm ơn anh chị, bạn, em phòng Cơng nghệ Sinh học Thực vật giúp đỡ nhiệt tình, hỗ trợ, đóng góp ý kiến cho em suốt q trình làm đồ án, giúp em thực tốt đề tài Mặc dù em cố gắng để hoàn thiện đồ án tất nhiệt huyết lực mình, nhiên khơng trách khỏi thiếu sót, mong nhận đóng góp quý báu thầy cô bạn TP.HCM, Ngày 17, tháng 8, năm 2016 Sinh viên thực Nguyễn Hoàng Cẩm Tú Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC i Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC BIỂU ĐỒ vii DANH MỤC HÌNH viii LỜI MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục đích nghiên cứu Đối tượng phạm vi nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài Kết đạt Kết cấu đề tài CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu kỹ thuật nuôi cấy in vitro 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Sơ lược trình phát triển nuôi cấy in vitro Việt Nam .5 1.2 Cơ sở khoa học chung nuôi cấy in vitro 1.3 Các bước nhân giống in vitro 1.4 Môi trường nuôi cấy in vitro 1.5 Các chất điều hòa sinh trưởng thực vật ni cấy in vitro 1.5.1 Auxin 1.5.2 Gibberellin (GA) 10 1.5.3 Cytokinin 11 1.5.4 Abscisic acid (ABA) 13 1.5.5 Ethylene 13 i Đồ án tốt nghiệp 1.6 Ưu nhược điểm kỹ thuật nhân giống in vitro 14 1.7 Tình hình nghiên cứu hoa lan giới Việt Nam 16 1.7.1 Tình hình nghiên cứu hoa Lan giới 16 1.7.2 Tình hình nghiên cứu hoa Lan Việt Nam 17 1.8 Sơ lược chitosan 20 1.8.1 Giới thiệu 20 1.8.2 Tình hình nghiên cứu ứng dụng chitosan 21 1.9 Sơ lược chất kháng ethylene 27 1.9.1 Ảnh hưởng ethylene lên thực vật 27 1.9.2 Các chất kháng ethylene 29 1.10 Dịch chiết xuất hữu từ trái cây, củ 30 1.11 Sự phát sinh hình thái thực vật 33 1.12 Sự hình thành phát sinh hình thái mơ sẹo 34 1.12.1 Sự hình thành mơ sẹo 34 1.12.1.1 Nuôi cấy mô sẹo 34 1.12.1.2 Vai trò loại quan, tuổi quan ánh sáng tạo mô sẹo 37 1.12.1.3 Môi trường nuôi cấy tạo mô sẹo 38 1.12.2 Các hình thức phát sinh hình thái mơ sẹo 39 1.12.3 Lịch sử nghiên cứu mô sẹo 41 1.13 Giới thiệu lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 42 1.13.1 Nguồn gốc phân bố 42 1.13.2 Phân loại khoa học 45 1.13.3 Đặc điểm hình thái 45 1.13.4 Điều kiện sinh thái lan Hồ Điệp 47 1.13.5 Các phương pháp nhân giống lan Hồ điệp 49 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 52 i Đồ án tốt nghiệp 2.1 Địa điểm nghiên cứu 52 2.2 Vật liệu phương pháp nghiên cứu 52 2.2.1 Nguồn mẫu 52 2.2.2 Môi trường nuôi cấy 52 2.2.3 Thiết bị dụng cụ 53 2.2.4 Điều kiện thí nghiệm 53 2.3 Bố trí thí nghiệm 53 2.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng chitosan lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 53 2.3.2 T hí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng gibberellin lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 54 2.3.3 T hí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng bạc nitrate lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 55 2.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng cobalt nitrate lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 56 2.3.5 T hí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng dịch chiết lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 57 2.4 Phương pháp thống kê xử lý số liệu 57 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 59 3.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng chitosan lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 59 3.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng gibberellin lên hình thành PLB tạo chồi từ mơ sẹo lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 67 3.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng bạc nitrate lên hình thành PLB tạo chồi i Đồ án tốt nghiệp từ mô sẹo lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 74 3.4 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng cobalt nitrate lên hình thành PLB tạo chồi từ mô sẹo lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 81 3.5 Thí nghiệm 5: Ảnh hưởng dịch chiết lên hình thành PLB tạo chồi từ mô sẹo lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 89 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 97 4.1 Kết luận 97 4.2 Kiến nghị 97 TÀI LIỆU THAM KHẢO 99 i Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC 3ii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ABA : Absisic acid DNA : Deoxynucleotic acid IAA : 3- indoleacetic acid IBA : 3- indolebutyric acid GA3 : Gibberellic acid MS : Murashige Skoog, 1962 NAA : Napthaleneaxetic acid PLB : Protocorm like body 2,4-D : 2,4-dichlopophenoxyacetic acid 2,4,5-T : 2,4,5-trichlorophenoxyacetic acid 4ii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Khảo sát ảnh hưởng chitosan lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 54 Bảng 2.2 Khảo sát ảnh hưởng gibberellin lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 55 Bảng 2.3 Khảo sát ảnh hưởng AgNO3 lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 55 Bảng 2.4 Khảo sát ảnh hưởng Co(NO3)2 lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 56 Bảng 2.5 Khảo sát ảnh hưởng dịch chiết lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 57 Bảng 3.1 Ảnh hưởng chitosan lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis sau tuần nuôi cấy 60 Bảng 3.2 Ảnh hưởng gibberellin lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis sau tuần nuôi cấy 68 Bảng 3.3 Ảnh hưởng bạc nitrate lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis sau tuần nuôi cấy 75 Bảng 3.4 Ảnh hưởng cobalt nitrate lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis sau tuần nuôi cấy 82 Bảng 3.5 Ảnh hưởng dịch chiết lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis sau tuần nuôi cấy 90 5ii Trọng lượng khô Sum of DF Squares Source Mean Square F Value Pr > F Model 0.08629067 0.01725813 40.43 F nt 0.08629067 0.01725813 40.43 F Model 2204.277778 440.855556 7.43 0.0022 Error 12 712.000000 59.333333 Corrected Total 17 2916.277778 R-Square Coeff Var Root MSE kq Mean 0.755853 21.03955 7.702813 36.61111 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F nt 2204.277778 440.855556 7.43 0.0022 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 59.33333 Critical Value of t 3.05454 Least Significant Difference 19.211 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N nt A 56.667 B3 A B A 44.000 B0 B B C 36.000 B1 B C B C 32.000 B2 B C B C 27.667 B5 C C 23.333 B4 Chồi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 2.54791111 0.50958222 1.09 0.4163 Error 12 5.63193333 0.46932778 Corrected Total 17 8.17984444 R-Square Coeff Var Root MSE KQ Mean 0.311486 45.50314 0.685075 1.505556 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NT 2.54791111 0.50958222 1.09 0.4163 CHOI 12:21 Thursday, January 8, 2004 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for KQ NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.469328 Critical Value of t 2.17881 Least Significant Difference 1.2187 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 2.0267 B3 A A 1.8567 B1 A A 1.5567 B4 A A 1.4467 B5 A A 1.2667 B0 A A 0.8800 B2 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng bạc nitrate lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis Trọng lượng tươi The ANOVA Procedure Dependent Variable: kq Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 7.28440733 1.45688147 28.85 F nt 7.28440733 1.45688147 28.85 F Model 0.05150047 0.01030009 6.22 0.0045 Error 12 0.01985673 0.00165473 Corrected Total 17 0.07135721 R-Square Coeff Var Root MSE kq Mean 0.721728 22.61374 0.040678 0.179883 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F nt 0.05150047 0.01030009 6.22 0.0045 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.001655 Critical Value of t 3.05454 Least Significant Difference 0.1015 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N nt A 0.29743 C4 B 0.16977 C5 B B 0.16707 C0 B B 0.15387 C1 B B 0.15070 C2 B B 0.14047 C3 PLB The ANOVA Procedure Dependent Variable: kq Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 5758.277778 1151.655556 11.34 0.0003 Error 12 1218.666667 101.555556 Corrected Total 17 6976.944444 R-Square Coeff Var Root MSE kq Mean 0.825329 24.61256 10.07748 40.94444 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F nt 5758.277778 1151.655556 11.34 0.0003 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 101.5556 Critical Value of t 3.05454 Least Significant Difference 25.133 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N nt A 79.000 C4 B 41.000 C1 B B 38.000 C5 B B 35.000 C2 B B 26.667 C0 B B 26.000 C3 Chồi The ANOVA Procedure Dependent Variable: kq Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 208.2777778 41.6555556 10.71 0.0004 Error 12 46.6666667 3.8888889 Corrected Total 17 254.9444444 R-Square Coeff Var Root MSE kq Mean 0.816954 39.88368 1.972027 4.944444 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F nt 208.2777778 41.6555556 10.71 0.0004 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 3.888889 Critical Value of t 3.05454 Least Significant Difference 4.9183 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N nt A 9.667 C4 A A 9.000 C3 A B A 5.000 C5 B B 3.333 C1 B B 2.333 C0 B B 0.333 C2 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng cobalt nitrate lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis Trọng lượng tươi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 2.99234016 0.59846803 29.45 F nt 2.99234016 0.59846803 29.45 F Model 0.01773844 0.00354769 2.69 0.0745 Error 12 0.01583929 0.00131994 Corrected Total 17 0.03357773 R-Square Coeff Var Root MSE kq Mean 0.528280 18.96959 0.036331 0.191522 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F nt 0.01773844 0.00354769 2.69 0.0745 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.00132 Critical Value of t 2.17881 Least Significant Difference 0.0646 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N nt A 0.25800 D3 A B A 0.19777 D5 B B 0.18240 D4 B B 0.17383 D1 B B 0.17007 D2 B B 0.16707 D0 PLB Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 1653.777778 330.755556 6.22 0.0045 Error 12 638.000000 53.166667 Corrected Total 17 2291.777778 R-Square Coeff Var Root MSE kq Mean 0.721613 20.31701 7.291548 35.88889 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F nt 1653.777778 330.755556 6.22 0.0045 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 53.16667 Critical Value of t 3.05454 Least Significant Difference 18.185 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N nt A 55.333 D3 A B A 38.333 D2 B B 36.000 D5 B B 30.000 D1 B B 29.000 D4 B B 26.667 D0 Chồi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 122.2777778 24.4555556 5.43 0.0077 Error 12 54.0000000 4.5000000 Corrected Total 17 176.2777778 R-Square Coeff Var Root MSE kq Mean 0.693665 48.33388 2.121320 4.388889 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F nt 122.2777778 24.4555556 5.43 0.0077 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 4.5 Critical Value of t 3.05454 Least Significant Difference 5.2906 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N nt A 7.667 D2 B B B B B B B A A A A A A C C C C C 6.667 D3 6.333 D5 2.667 D1 2.333 D0 0.667 D4 Thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng dịch chiết lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis Trọng lượng tươi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 6.98346686 1.74586671 46.95 F nt 6.98346686 1.74586671 46.95 F Model 0.04550814 0.01137704 9.69 0.0018 Error 10 0.01174539 0.00117454 Corrected Total 14 0.05725353 R-Square Coeff Var Root MSE kq Mean 0.794853 16.10454 0.034272 0.212807 Source nt DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 0.04550814 0.01137704 9.69 0.0018 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.001175 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 0.0887 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N nt A 0.31363 E2 B 0.20320 E3 B B 0.20290 E4 B B 0.19960 E1 B B 0.14470 E0 PLB Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 1902.933333 475.733333 7.19 0.0054 Error 10 662.000000 66.200000 Corrected Total 14 2564.933333 R-Square Coeff Var Root MSE KQ Mean 0.741904 18.95110 8.136338 42.93333 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NT 1902.933333 475.733333 7.19 0.0054 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 66.2 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 21.054 t Grouping Mean N NT A 64.000 E2 B A 44.667 E3 B 38.000 E4 B 35.333 E1 B 32.667 E0 Chồi Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 170.2666667 42.5666667 2.79 0.0859 Error 10 152.6666667 15.2666667 Corrected Total 14 322.9333333 R-Square Coeff Var Root MSE kq Mean 0.527250 Source nt 53.76961 3.907258 7.266667 DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F 170.2666667 42.5666667 2.79 0.0859 Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 15.26667 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 7.1083 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N nt A 11.667 E2 A A 9.333 E1 A B A 7.667 E0 B A B A 6.000 E4 B B 1.667 E3 ... 2.5 Khảo sát ảnh hưởng dịch chiết lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis 57 Bảng 3.1 Ảnh hưởng chitosan lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis. .. PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis; - Khảo sát ảnh hưởng bạc nitrate lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis; - Khảo sát ảnh hưởng cobalt nitrate lên tăng sinh PLB. .. trình nhân giống lan Hồ điệp, tơi tiến hành đề tài: Khảo sát ảnh hưởng chitosan, gibberellin, số muối kim loại dịch chiết tự nhiên lên tăng sinh PLB tạo chồi lan Hồ điệp Phalaenopsis amabilis Mục
Ngày đăng: 23/01/2019, 18:19
Xem thêm:
