Đang tải... (xem toàn văn)
Mục tiêu nghiên cứu của Luận án nhằm xác định đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và tính đa hình gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A, 1173C>T ở bệnh nhân thay van tim cơ học. Xác định mối liên quan giữa đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và đa hình gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A, 1173C>T với liều thuốc acenocoumarol ở bệnh nhân thay van tim cơ học. Mời các bạn cùng tham khảo!
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI PHẠM THỊ THÙY NGHIÊN CỨU TÍNH ĐA HÌNH GEN CYP2C9, VKORC1 VÀ LIỀU THUỐC CHỐNG ĐÔNG KHÁNG VITAMIN K Ở BỆNH NHÂN THAY VAN TIM CƠ HỌC Chuyên ngành : Hoá sinh y học Mã số : 62720112 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: GS.TS TẠ THÀNH VĂN PGS.TS PHẠM TRUNG KIÊN HÀ NỘI - 2020 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận án này, trước hết, tơi xin bày tỏ lòng tri ân sâu sắc tới GS TS Tạ Thành Văn, Chủ tịch Hội đồng Trường, Nguyên Hiệu trưởng, Trưởng Bộ mơn Hóa sinh Trường Đại học Y Hà Nội PGS TS Phạm Trung Kiên, Phó chủ nhiệm khoa Y Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội, người thầy tận tụy giúp đỡ, động viên hướng dẫn tơi q trình học tập, nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau Đại Học, tồn thể q thầy cơ, cán Bộ mơn Hóa Sinh, Trường Đại học Y Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ trình thực luận án Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến Ban Giám hiệu, quý thầy cô, cán Bộ môn Y Dược học sở, Trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến Ban Giám đốc, Phịng kế hoạch tổng hợp tồn thể bác sỹ, điều dưỡng kỹ thuật viên Khoa Xét nghiệm, Khoa Khám bệnh, Bệnh viện Tim Hà Nội giúp đỡ tơi q trình thực luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn bệnh nhân gia đình họ, người đóng góp lớn cho thành công luận án Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Ban Giám hiệu, Trường Đại học Y Dược Thái Nguyên, toàn thể quý thầy cô, bạn bè, đồng nghiệp giúp đỡ tơi q trình học tập, nghiên cứu thực luận án Cuối cùng, xin ghi nhớ cơng ơn sinh thành, ni dưỡng tình u thương bố mẹ ủng hộ, động viên chồng, hai anh chị em gia đình, người ln bên tơi, chỗ dựa vững để yên tâm học tập hoàn thành luận án Hà Nội, Ngày tháng năm 2020 Phạm Thị Thùy LỜI CAM ĐOAN Tôi Phạm Thị Thùy, nghiên cứu sinh khóa 35 Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Hóa Sinh Y Học, xin cam đoan: Đây luận án thân trực tiếp thực hướng dẫn Thầy Tạ Thành Văn Thầy Phạm Trung Kiên Công trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Người viết cam đoan Phạm Thị Thùy CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Từ gốc tiếng Anh ACC/AHA American College of Cardiology/American Heart Association BMI Body Mass Index Bp Base pair CYP2C9 Cytochrome P450 2C9 DNA Deoxyribonucleic acid EF HMWK Hight molecular weigh kininogen IDI & International Diabetes Institute WPRO & Regional Office for the Western Pacific I359L Isoleucine359Leucine INR ISI PCR PTA PT R144C RNA TTR VKA TM TF UTR VKORC1 Nghĩa tiếng Việt Hội Tim mạch học Hoa Kỳ Hiệp hội Tim mạch Hoa Kỳ Chỉ số khối thể Cặp bazơ Axít deoxyribonucleic Chức tâm thu thất trái Kininogen phân tử lượng cao Hiệp hội đái đường nước châu Á Đa hình ba mã hố 359, mã hố Isoleucine Leucine International Normalized Ratio Chỉ số chuẩn hóa quốc tế International Sensitivity Index Độ nhạy lô thromboplastin dùng so với thromboplastin chuẩn Tổ chức Y tế Thế giới Polymerase Chain Reaction Phản ứng chuỗi khuếch đại gen Plasma- thromboplastin antecedent Tiền chất thromboplastin huyết tương Prothrombin time Thời gian prothrombin Arginin144Cystein Đa hình ba mã hoá 144, mã hoá Arginin Cystein Ribonucleic acid Axit ribonucleic Time in Therapeutic Range Thời gian khoảng điều trị Vitamin K antagonists Thuốc chống đông kháng vitamin K Transmembrane helices Vòng xoắn xuyên màng Yếu tổ tổ chức Untranslated region Vùng không dịch mã Vitamin K epoxide reductase complex subunit MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan thay van tim học 1.1.1 Bệnh lý van tim 1.1.2 Phẫu thuật thay van tim học 1.2 Huyết khối bệnh nhân sau thay van tim học .5 1.2.1 Sinh lý q trình đơng cầm máu 1.2.2 Cơ chế hình thành huyết khối bệnh nhân sau thay van tim học 10 1.2.3 Điều trị phòng ngừa huyết khối bệnh nhân sau thay van tim học 12 1.3 Tổng quan thuốc chống đông acenocoumarol 14 1.3.1 Dược lý chế tác dụng 14 1.3.2 Chỉ định chống định 16 1.3.3 Điều trị thuốc acenocoumarol bệnh nhân sau thay van tim học 17 1.3.4 Các yếu tố tương tác với thuốc acenocoumarol 20 1.4 Tổng quan gen CYP2C9 VKORC1 .21 1.4.1 Đa hình đơn nucleotid 21 1.4.2 Tổng quan gen CYP2C9 mối liên quan với liều thuốc acenocoumarol 23 1.4.3 Gen VKORC1 mối liên quan với liều thuốc acenocoumarol 31 1.5 Tình hình nghiên cứu giới 37 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 40 2.1 Đối tượng nghiên cứu .40 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn bệnh nhân 40 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 40 2.2 Phương pháp nghiên cứu 40 2.2.1 Cỡ mẫu nghiên cứu 40 2.2.2 Các số, biến số nghiên cứu 41 2.2.3 Hóa chất trang thiết bị nghiên cứu 43 2.2.4 Sơ đồ thiết kế nghiên cứu 45 2.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu 49 2.3.1 Địa điểm nghiên cứu 49 2.3.2 Thời gian nghiên cứu 49 2.4 Xử lý số liệu 49 2.5 Các loại sai số cách khắc phục 49 2.5.1 Sai số mắc phải 49 2.5.2 Cách khắc phục sai số 50 2.6 Vấn đề đạo đức nghiên cứu y sinh .50 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 51 3.1 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng tính đa hình gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A, 1173C>T bệnh nhân thay van tim học 51 3.1.1 Một số đặc điểm lâm sàng nhóm nghiên cứu 51 3.1.2 Một số đặc điểm cận lâm sàng nhóm nghiên cứu 57 3.1.3 Tính đa hình gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A 1173C>T nhóm nghiên cứu 60 3.2 Mối liên quan đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đa hình gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A, 1173C>T với liều thuốc acenocoumarol bệnh nhân thay van tim học 69 3.2.1 Mối liên quan đặc điểm lâm sàng với liều thuốc acenocoumarol 69 3.2.2 Mối liên quan đặc điểm cận lâm sàng với liều thuốc acenocoumarol 75 3.2.3 Mối liên quan kiểu gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A 1173C>T với liều thuốc acenocoumarol 77 3.2.4 Phân tích hồi quy tuyến tính yếu tố ảnh hưởng đến liều thuốc acenocoumarol 81 CHƯƠNG BÀN LUẬN 87 4.1 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng tính đa hình gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A, 1173C>T bệnh nhân thay van tim học 87 4.1.1 Một số đặc điểm lâm sàng nhóm nghiên cứu 87 4.1.2 Một số đặc điểm cận lâm sàng nhóm nghiên cứu 96 4.1.3 Tính đa hình gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A 1173C>T nhóm nghiên cứu 97 4.2 Mối liên quan đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đa hình gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A, 1173C>T với liều thuốc acenocoumarol bệnh nhân thay van tim học 102 4.2.1 Mối liên quan đặc điểm lâm sàng với liều thuốc acenocoumarol 102 4.2.2 Mối liên quan đặc điểm cận lâm sàng với liều thuốc acenocoumarol 107 4.2.3 Mối liên quan kiểu gen CYP2C9*3, VKORC1-1639G>A 1173C>T với liều thuốc acenocoumarol 108 4.2.4 Phân tích hồi quy tuyến tính yếu tố ảnh hưởng đến liều thuốc acenocoumarol 112 KẾT LUẬN 120 KIẾN NGHỊ 123 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số loại thuốc chống đông kháng Vitamin K 13 Bảng 1.2 Một số đa hình đơn nucleotid gen CYP2C9 27 Bảng 1.3 Tần số xuất đa hình gen CYP2C9 số chủng tộc giới 28 Bảng 1.4 Tần số xuất biến thể di truyền gen VKORC1 1639G>A 1173C>T số quốc gia 34 Bảng 2.1 Trình tự mồi khuếch đại đoạn gen chứa alen 47 Bảng 3.1 Đặc điểm tuổi giới nhóm nghiên cứu 51 Bảng 3.2 Đặc điểm số BMI nhóm nghiên cứu 52 Bảng 3.3 Một số yếu tố nguy cơ, nguyên nhân vị trí thay van tim nhóm nghiên cứu 53 Bảng 3.4 Đặc điểm thời gian sau thay van học 54 Bảng 3.5 Đặc điểm tiền sử biến chứng xuất huyết 54 Bảng 3.6 Đặc điểm tiền sử huyết khối nhóm nghiên cứu 55 Bảng 3.7 Một số thuốc dùng phối hợp nhóm nghiên cứu 56 Bảng 3.8 Một số số xét nghiệm hóa sinh nhóm nghiên cứu 57 Bảng 3.9 Một số số huyết học nhóm nghiên cứu 58 Bảng 3.10 Một số số đông máu nhóm nghiên cứu 58 Bảng 3.11 Đặc điểm điện tim siêu âm tim nhóm nghiên cứu 59 Bảng 3.12 Tần số alen kiểu gen CYP2C9*3 nhóm nghiên cứu 62 Bảng 3.13 Tần số alen kiểu gen VKORC1-1639G>A 64 Bảng 3.14 Tần số alen kiểu gen VKORC1 1173C>T nhóm nghiên cứu 67 Bảng 3.15 Mối liên quan tuổi với liều thuốc acenocoumarol 69 Bảng 3.16 Mối liên quan giới với liều thuốc acenocoumarol 70 Bảng 3.17 Mối liên quan số BMI với liều thuốc acenocoumarol 70 Bảng 3.18 Mối liên quan số yếu tố nguy với liều thuốc acenocoumarol 71 Bảng 3.19 Mối liên quan nguyên nhân thay van tim với liều thuốc acenocoumarol 72 Bảng 3.20 Mối liên quan vị trí thay van tim với liều thuốc acenocoumarol 72 Bảng 3.21 Mối liên quan thời gian sau thay van với liều thuốc acenocoumarol 73 Bảng 3.22 Mối liên quan số loại thuốc dùng phối hợp với acenocoumarol 74 Bảng 3.23 Mối liên quan đặc điểm điện tim với liều thuốc acenocoumarol 75 Bảng 3.24 Mối liên quan số đặc điểm siêu âm tim với liều thuốc acenocoumarol 76 Bảng 3.25 Mối liên quan kiểu gen CYP2C9*3 với liều thuốc acenocoumarol 77 Bảng 3.26 Mối liên quan kiểu gen phối hợp VKORC1-1639G>A 1173C>T với liều thuốc acenocoumarol 80 Bảng 3.27 Phân tích hồi quy đơn biến đa biến số nhân trắc ảnh hưởng đến liều thuốc acenocoumarol 81 Bảng 3.28 Phân tích hồi quy đơn biến đa biến yếu tố di truyền ảnh hưởng đến liều thuốc acenocoumarol 82 Bảng 3.29 Phân tích hồi quy đa biến yếu tố lâm sàng, cận lâm sàng di truyền ảnh hưởng đến liều thuốc acenocoumarol 83 Bảng 3.30 Phân tích hồi quy đa biến số nhân trắc di truyền ảnh hưởng đến liều thuốc acenocoumarol 85 Bảng 4.1 Tần số alen kiểu gen CYP2C9*3 số quốc gia giới 98 Bảng 4.2 Tần số alen kiểu gen VKORC1-1639G>A số quốc gia/dân tộc giới 100 Bảng 4.3 Tần số alen kiểu gen VKORC1 1173C>T số quốc gia giới 101 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Sơ đồ đơng máu theo mơ hình dịng thác đơng máu Hình 1.2 Sơ đồ hình thành fibrin Hình 1.3 Sơ đồ trình tiêu fibrin Hình 1.4 Cơ chế hình thành huyết khối van học 11 Hình 1.5 Hình ảnh huyết khối van học 12 Hình 1.6 Hình ảnh cấu trúc thuốc acenocoumarol 14 Hình 1.7 Cơ chế tác dụng thuốc acenocoumarol 15 Hình 1.8 Hình ảnh SNP 22 Hình 1.9 Hình ảnh cấu trúc gen CYP2C9 23 Hình 1.10 Hình ảnh mơ cấu trúc bậc enzym CYP2C9 24 Hình 1.11 Hình ảnh cấu trúc enzym CY2C9 25 Hình 1.12 Hình ảnh vị trí liên kết thuốc chống đông enzym CYP2C9 26 Hình 1.13 Phân bố kiểu gen CYP2C9 số dân số châu Á 29 Hình 1.14 Chuyển hóa thuốc acenocoumarol 30 Hình 1.15 Hình ảnh cấu trúc gen VKORC1 32 Hình 1.16 Hình ảnh cấu trúc enzym Vitamin K epoxide reductase complex subunit 33 Hình 1.17 Ảnh hưởng đa hình gen VKORC1 CYP2C9 lên liều thuốc aenocoumarol 35 Hình 3.1 Hình ảnh điện di sản phẩm phản ứng khuếch đại đoạn gen chứa SNP CYP2C9*3 60 Hình 3.2 Hình ảnh giải trình tự giải trình exon xác định SNP CYP2C9*3 gen CYP2C9 61 ...GHIÊN CỨU TÍNH ĐA HÌNH GEN CYP2C9, VKORC1 VÀ ĐÁP ỨNG THUỐC CHỐNG ĐÔNG KHÁNG VITAMIN K Ở BỆNH NHÂN THAY VAN TIM CƠ HỌC BỘ CÂU HỎI PHỎNG VẤN Mã số phiếu: Nơi tiếp cận bệnh nhân: Bệnh viện T... CYP2C9, VKORC1 liều thuốc chống đông kháng vitamin K bệnh nhân thay van tim học? ?? với hai mục tiêu: Xác định đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng tính đa hình gen CYP2C9*3, VKORC1- 1639G>A, 1173C>T bệnh nhân. .. huyết khối tắc mạch k? ??t van tim, nguyên nhân hàng đầu g? ?y tử vong bệnh nhân sau thay van tim học [4], [10], [11] Một số tin c? ?y để nhà lâm sàng đánh giá hiệu thuốc chống đông bệnh nhân thay van tim