Nghiên cứu nhân giống in vitro cây trầm hương aquilaria crassna pierre ex lecomte tại bình thuận

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP & PTNT TRƯỜNG ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP - TRẦN THỊ CẢNH ĐÀI NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY TRẦM HƯƠNG (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) TẠI BÌNH THUẬN LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC LÂM NGHIỆP Đồng Nai, 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP & PTNT TRƯỜNG ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP - TRẦN THỊ CẢNH ĐÀI NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY TRẦM HƯƠNG (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) TẠI BÌNH THUẬN CHUYÊN NGÀNH: LÂM HỌC MÃ SỐ: 60.62.60 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC LÂM NGHIỆP NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS DƯƠNG MỘNG HÙNG Đồng Nai, 2012 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan, cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Tác giả Trần Thị Cảnh Đài LỜI CẢM ƠN  Con xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Ba, Mẹ, người thân tận tình giúp đỡ mặt vật chất tinh thần để có điều kiện học tập Tơi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu, Khoa sau Đại học Trường Đại học Lâm nghiệp quý Thầy Cô tạo điều kiện cho học tập, trang bị nhiều kiến thức chuyên môn lĩnh vực chọn Trong thời gian làm luận văn tốt nghiệp nhận giúp đỡ, bảo tận tình PGS.TS Dương Mộng Hùng người thầy hướng dẫn khoa học ln nhiệt tình bảo, giúp đỡ tơi hoàn thành luận văn tốt nghiệp Với tất lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin chân thành cảm ơn Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Trung tâm giống trồng Bình Thuận, anh chị em bạn hữu, người tạo điều kiện, động viên giúp đỡ tơi hồn thành tốt luận văn tốt nghiệp Do thời gian kinh nghiệm cịn hạn chế, luận văn chắn khơng tránh khỏi thiếu sót Tơi mong nhận ý kiến đóng góp q báu thầy, giáo, nhà khoa học bạn bè đồng nghiệp để luận văn hồn thiện Một lần tơi xin chân thành cảm ơn ! Bình Thuận, tháng 07 năm 2012 TRẦN THỊ CẢNH ĐÀI MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình vẽ, đồ thị viii ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1.TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu Trầm hương 1.1.1 Đặc điểm thực vật học 1.1.2 Đặc điểm sinh thái phân bố 1.1.3 Công dụng Trầm hương 1.1.3.1 Hương liệu mỹ phẩm 1.1.3.2 Dược Liệu 1.1.3.3 Các lĩnh vực khác 1.1.4 Tình hình khai thác Trầm hương tự nhiên 1.1.5 Giải pháp bảo tồn phát triển nguồn gien 10 1.2 Khái niệm nuôi cấy mô 11 1.3 Các giai đoạn q trình nhân giống 13 1.3.1 Giai đoạn chuẩn bị 13 1.3.2 Giai đoạn cấy khởi động 14 1.3.3 Giai đoạn nhân nhanh 14 1.3.4 Tạo hoàn chỉnh (ra rễ) 15 1.3.5 Đưa môi trường tự nhiên 15 1.4 Những thành tựu Trầm hương giới Việt Nam 16 1.4.1 Trên giới 16 1.4.2 Ở Việt Nam 17 CHƯƠNG MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 Mục tiêu 21 2.1.1 Mục tiêu tổng quát 21 2.1.2 Mục tiêu cụ thể 21 2.2 Đối tượng 21 2.2.1 Cây mẹ lấy vật liệu 21 2.2.2 Vật liệu nuôi cấy (mẫu cấy) .22 2.3 Phạm vi nghiên cứu 22 2.4 Nội dung nghiên cứu 23 2.5 Phương pháp nghiên cứu 24 2.5.1 Lựa chọn phương pháp khử trùng mẫu vật nuôi nồng độ khác HgCl2 Ca (0Cl)2 khoảng thời gian khác 26 2.5.2 Chọn loại môi trường phù hợp 26 2.5.3 Ảnh hưởng vitamin B2 đến hệ số nhân chồi tỷ lệ chồi hữu hiệu 27 2.5.4 Ảnh hưởng chất điều hoà sinh trưởng đến hệ số nhân chồi chất lượng chồi 28 2.5.4.1 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến hệ số nhân chồi tỷ lệ chồi hữu hiệu 28 2.5.4.2 Ảnh hưởng nồng độ BAP + NAA đến hệ số nhân chồi tỷ lệ chồi hữu hiệu.…………………………………………………………………… 28 2.5.4.3 Ảnh hưởng nồng độ IBA đến tỷ lệ rễ, số rễ trung bình/cây chiều dài trung bình rễ 29 2.5.4.4 Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao vườn ươm 29 2.5.4.5 Điều kiện thí nghiệm 31 2.5.5 Bố trí thí nghiệm 31 2.5.6 Thu thập xử lý số liệu 32 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35 3.1 Lựa chọn phương pháp khử trùng mẫu cấy 35 3.2 Nghiên cứu loại mơi trường thích hợp cho nhân nhanh chồi 38 3.3 Ảnh hưởng việc bổ sung vitamine B2 vào môi trường đến hệ số nhân chồi tỷ lệ chồi hữu hiệu 43 3.4 Ảnh hưởng chất điều hồ sinh trưởng mơi trường đến hệ số nhân chồi tỷ lệ chồi hữu hiệu 47 3.4.1 Ảnh hưởng BAP đến hệ số nhân chồi tỷ lệ chồi hữu hiệu 46 3.4.2 Ảnh hưởng phối hợp nồng độ BAP + NAA môi trường đến hệ số nhân chồi tỷ lệ chồi hữu hiệu 52 3.4.3 Ảnh hưởng phối hợp nồng độ IBA môi trường tỷ lệ chồi rễ, số rễ trung bình/cây chiều dài rễ 57 3.4.4 Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao vườn ươm 62 Chương KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ KIẾN NGHỊ 65 4.1 Kết luận .65 4.2 Tồn 65 4.3 Kiến nghị 66 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT CHỮ VIẾT TẮT TÊN ĐẦY ĐỦ BAP 6- Benzyl amino purine B2 Riboflavil Bộ NN&PTNT Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn Ca (0Cl)2 Hypoclorit canxi Na0Cl Hypoclorit natri HgCl2 Clorua thuỷ ngân IBA 3-Indol butyric acid NAA Nathyl acetic acid PVP polyvinin pyrroline CW Nước dừa MTĐC Môi trường chọn ĐC Đối chứng CT Công thức HSNC Hệ số nhân chồi TLCHH Tỉ lệ chồi hữu hiệu TLCS Tỉ lệ sống CCTB Chiều cao trung bình TLCRR Tỉ lệ chồi rễ SRTB Số rễ trung bình CDTBR Chiều dài trung bình rễ DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu bảng Tên bảng Trang 2.1 Công thức khử trùng mẫu cấy 26 2.2 Công thức ảnh hưởng loại môi trường đến hệ số nhân 27 chồi tỉ lệ chồi hữu hiệu 2.3 Công thức ảnh hưởng vitamin B2 đến khả nhân 27 chồi 2.4 Công thức thí nghiệm nhân chồi ảnh hưởng nồng độ 28 BAP 2.5 Cơng thức thí nghiệm nhân chồi ảnh hưởng nồng độ BAP 29 NAA 2.6 Công thức thí nghiệm rễ 29 3.1 Tổng hợp kết khử trùng mẫu 36 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng loại môi trường đến 39 HSNC 3.3 Ảnh hưởng việc bổ sung vitamin B2 đến HSNC 43 TLCHH 3.4 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến HSNC TLCHH 48 3.5 Ảnh hưởng phối hợp nồng độ BAP + NAA đến HSNC 53 TLCHH 3.6 Ảnh hưởng nồng độ IBA đến tỷ lệ chồi rễ, số rễ trung bình 58 chiều dài rễ 3.7 Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống vườn ươm 62 10 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Số hiệu hình vẽ Tên hình vẽ Trang 1.1 Một số hình ảnh Trầm hương ngồi thực địa 1.2 Nước hoa từ trầm 1.3 Nhang từ Trầm 1.4 Đồ thủ công mỹ nghệ 2.1 Hình cung cấp vật liệu đưa mẫu vào 22 3.1 Biểu đồ tỉ lệ mẫu sống khử trùng mẫu 36 3.1 Hình khử trùng mẫu sau tuần nuôi cấy 38 3.2 Biểu đồ ảnh hưởng mơi trường ni cấy đến 40 HSNC 3.2 Hình mẫu nuôi cấy sau tuần môi trường MS* 41 3.3 Hình mẫu ni cấy sau tuần môi trường WPM 42 3.3 Biều đồ ảnh hưởng vitamin B2 đến HSNC 44 3.4 Hình mẫu ni cấy sau tuần môi trường Litvay 42 3.4 Biểu đồ ảnh hưởng vitamin B2 đến TLCHH 44 3.5 Hình mẫu ni cấy mơi trường WPM khơng bổ 46 sung B2 sau tuần nuôi cấy 3.5 Biểu đồ ảnh hưởng BAP đến HSNC 48 3.6 Biểu đồ ảnh hưởng BAP đến TLCHH 49 3.6 Hình mẫu ni cấy mơi trường có bổ sung 46 2.0mg/l B2 sau tuần ni cấy 3.7 Hình mẫu ni cấy mơi trường có bổ sung 2mg/l 51 BAP sau tuần ni cấy 3.8 Hình chồi Trầm hương môi trường không bổ 52 sung BAP sau tuần nuôi cấy 3.7 Biểu đồ ảnh hưởng phối hợp nồng độ BAP+NAA 54 đến HSNC 3.8 Biểu đồ ảnh hưởng phối hợp nồng độ BAP+NAA 55 91 92 93 Phụ lục 09 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến HSNC TLCHH 94 95 96 97 Phụ lục 10 Ảnh hưởng phối hợp nồng độ BAP + NAA đến HSNC TLCHH 98 99 100 Phụ lục 11 Ảnh hưởng IBA đến hiệu rễ 101 102 103 Phụ lục 12 Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao 104 105 ... tài ? ?Nghiên cứu nhân giống In vitro Trầm Hương (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) Bình Thuận? ?? 14 Chương TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu Trầm hương Tên Việt Nam: Trầm hương. .. ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP - TRẦN THỊ CẢNH ĐÀI NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY TRẦM HƯƠNG (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) TẠI BÌNH THUẬN CHUYÊN NGÀNH: LÂM HỌC MÃ SỐ: 60.62.60 LUẬN... hành nghiên cứu phịng ni cấy mô vườn ươm Trung tâm giống trồng Bình Thuận thuộc Sở Nơng nghiệp phát triển nơng thơn tỉnh Bình Thuận 2.3 Phạm vi nghiên cứu Nghiên cứu Cây Trầm hương trồng tỉnh Bình