Khảo sát thành phần hóa học cao ethyl acetate của lá cây sú trắng aegiceras floridum roem schult họ sú aegicerataceae

TRƢỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2015 - 2016 ĐỀ TÀI KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETH ACETATE CỦA Á C SÖ TRẮNG AEGICERAS FLORIDUM ROEM.& SCHULT HỌ SÖ AEGICERATACEAE) TRƢỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2015 – 2016 ĐỀ TÀI KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETH ACETATE CỦA Á C SÖ TRẮNG AEGICERAS FLORIDUMROEM.& SCHULT HỌ SÖ AEGICERATACEAE) Sinh viên thực hiện: Mai Thị Tuyết Nam/ Nữ : Nữ Dân tộc: Kinh Năm thứ: 4/ Số năm đào tạo: Lớp D12HHHC – Khoa Khoa Học Tự Nhiên Ngành học: Hóa Học Ngƣời hƣớng dẫn: ThS Lƣu Huỳnh Vạn Long UBND TỈNH BÌNH DƢƠNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Thông tin chung: - Tên đề tài: Khảo s t thành ph n hóa học cao ethyl acetate c a l s tr ng Aegiceras floridum Roem.& Schult Họ S Aegicerataceae) - Sinh viên thực hiện: Mai Thị Tuyết - Lớp: D12HHHCKhoa: Khoa Học Tự Nhiên Năm thứ: Số năm đào tạo:4 - Ngƣời hƣớng dẫn: ThS Lƣu Huỳnh Vạn Long Mục tiêu đề tài: - Khảo s t thành ph n hóa học c a cao ethyl acetate l S tr ng Tính sáng tạo: - Cho đến chƣa có nghiên cứu giới c ng nhƣ Việt Nam nghiên cứu thành ph n hóa học hoạt t nh chống ung thƣ c a loài Aegiceras floridum (cây Sú tr ng) Kết nghiên cứu: - Kết c a đề tài s góp ph n sung vào đ c m Hóa- Thực v t c a chi Aegiceras - Gi p cho việc định hƣớng đ u tƣ nghiên cứu sử dụng c ch hiệu nguồn tài nguyên thiên nhiên - Ngoài kết c a đề tài nguồn tài liệu tham khảo hữu ch cho sinh viên học viên Cao học Nghiên cứu sinh chuyên ngành Hóa học - Báo cáo t ng kết đề tài Đóng góp mặt kinh tế - xã hội, giáo dục đào tạo, an ninh, quốc phòng khả áp dụng đề tài: - Đề tài cung cấp cho sinh viên khoa Ho học kiến thức về: phƣơng ph p cô l p tinh chế c c hợp chất có nguồn gốc thiên nhiên phƣơng ph p x c định cấu tr c c c hợp chất thông qua c c phƣơng ph p ph đại IR NMR1D 2D khối ph MS - Đề tài s tài liệu tham khảo cho c c sinh viên chuyên ngành Hóa học Kết c a đề tài dự kiến s đƣợc công ố c c tạp ch hóa học Cơng bố khoa học sinh viên từ kết nghiên cứu đề tài (ghi rõ họ tên tác giả, nhan đề yếu tố xuất có) ho c nh n xét đ nh gi c a s p dụng c c kết nghiên cứu (nếu có): Ngày tháng năm 2016 Sinh viên chịu trách nhiệm thực đề tài (ký, họ tên) Nhận xét ngƣời hƣớng dẫn đóng góp khoa học sinh viên thực đề tài (phần người hướng dẫn ghi): ……………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………… Ngày tháng năm 2016 Xác nhận lãnh đạo khoa Ngƣời hƣớng dẫn (ký, họ tên) (ký, họ tên) UBND TỈNH BÌNH DƢƠNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc THÔNG TIN VỀ SINH VIÊN CHỊU TRÁCH NHIỆM CHÍNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI I SƠ ƢỢC VỀ SINH VIÊN: Ảnh 4x6 Họ tên: Mai Thị Tuyết Sinh ngày: 12 th ng 10 năm 1994 Nơi sinh: Quảng Nam Lớp: D12HHHC Khóa: 2012-2016 Khoa: Khoa Học Tự Nhiên Địa liên hệ: Ph Hòa - TP Th D u Một- Bình Dƣơng Điện thoại: 01685751291 Email: maituyet1210@gmail.com II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP kê khai thành t ch c a sinh viên từ năm thứ đến năm học): * Năm thứ 1: Ngành học: Hóa Học Khoa: Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học t p: TB- Khá * Năm thứ 2: Ngành học: Hóa Học Khoa: Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học t p: Kh * Năm thứ 3: Ngành học: Hóa Học Khoa: Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học t p: Kh * Năm thứ 4: Ngành học: Hóa Học Khoa: Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học t p: Kh Xác nhận lãnh đạo khoa (ký, họ tên) Ngày tháng năm 20 Sinh viên chịu trách nhiệm thực đề tài (ký, họ tên) LỜI CẢM ƠN Trong trình làm việc để hồn thành đề tài nghiên cứu khoa học em nhận giúp đỡ, hướng dẫn tận tình Thầy Lưu Huỳnh Vạn Long Thầy Cơ mơn hóa hữu cơ, khoa Khoa học tự nhiên trường Đại Học Thủ Dầu Một Qua em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Thầy Lưu Huỳnh Vạn Long , người trực tiếp hướng dẫn em làm đề tài nghiên cứu khoa học này, rèn luyện cho em cách thức thực - quản lý công việc hoạt động NCKH Qua việc hoàn thành đề tài giúp em hiểu sâu kiến thức ứng dụng khoa học mơn Hóa Hữu Cơ sống Trong khoảng thời gian nghiên cứu ngắn ngủi, kiến thức em nhiều bỡ ngỡ Do vậy, khơng tránh khỏi thiếu sót điều chắn, em mong nhận ý kiến đóng góp q báu q Thầy, Cơ giúp cho đề tài nghiên cứu khoa học hoàn thiện Cuối lời em xin chúc quý Thầy Cô dồi sức khỏe, hạnh phúc niềm tin để tiếp tục người truyền đạt kiến thức ươn mầm cho hệ mai sau Sinh viên Mai Thị Tuyết i MỤC ỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU iii DANH MỤC BẢNG BIỂU iv DANH MỤC SƠ ĐỒ iv DANH MỤC HÌNH iv MỞ ĐẦU 1 T ng quan tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực đề tài Lý chọn đề tài Mục tiêu đề tài Phƣơng ph p nghiên cứu Đối tƣợng, phạm vi nghiên cứu 5.1 Đối tƣợng 5.2 Phạm vi nghiên cứu Bố cục c a đề tài CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đ c tính thực v t 1.1.1 Mô tả thực v t 1.1.2 Phân bố 1.2 Nghiên cứu dƣợc tính 1.2.1 Nghiên cứu dƣợc tính chi Aegiceras corniculatum 1.3 Nghiên cứu hóa học 1.3.1 Nghiên cứu hóa học chi Aegiceras corniculatum 1.3.2 Cấu trúc hợp chất cô l p đƣợc S đỏ - Aegiceras corniculatum CHƢƠNG THỰC NGHIỆM 10 2.1 Hóa chất thiết bị 10 2.1.1 Hóa chất 10 2.1.2 Thiết bị 10 2.2 Nguyênliệu 10 2.2.1.Nh n danh 10 ii 2.2.2 Thu h i mẫu 11 2.3 Điều chế c c loại cao 11 2.4 Ly tr ch cô l p số hợp chất hữu từ cao ethyl acetate c a l Aegiceras floridum 12 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 15 3.1 Khảo sát cấu trúc hóa học c a hợp chất AF.EA1 15 3.2 Khảo sát cấu trúc hóa học c a hợp chất AF.EA2 17 3.3 Khảo sát cấu trúc hóa học c a hợp chất AF.EA3 18 3.4 Khảo sát cấu trúc hóa học c a hợp chất AF.EA4 20 CHƢƠNG KẾT UẬN 22 TÀI LIỆU THAM KHẢO 24 PHỤ LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU d : Dou let m i đôi) dd : Doublet-dou let m i đôi-đôi) DMSO : Dimethyl sulfoxide (CH3)2SO EA : Ethyl acetate H : Hexane IR : Infrared spectroscopy J : Hằng số ghép c p (coupling constant, ph M : Methanol NMR : Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy ppm : Part per million (ph n triệu) Rf : Retardation factors s : Single m i đơn) SKLM : S c ký lớp mỏng STT : Số thứ tự AF : Kí hiệu hợp chất l p đƣợc từ câyAegiceras floridum UV : Ultraviolet tử ngoại) H-NMR) iv DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 2.1 Khối lƣợng thu suất loại cao c a c c nguyên liệu………………….11 Bảng 2.2 Kết s c k cột nhanh silica gel cao ethyl acetate (350,0 g) 13 Bảng 3.1 So s nh liệu ph NMR c a hợp chất AF.EA1 với quercetin………… 16 Bảng 3.2 So s nh liệu ph NMR c a hợp chất AF.EA2 với acid protocatechuric………………………………………………………… 18 Bảng 3.3 So s nh liệu ph NMR c a hợp chất AF.EA3 với acid vanillic……… 20 Bảng 3.4 So s nh liệu ph NMR c a hợp chất AF.EA4 với acid 4-hydroxibenzoic……………………………………………… …………….21 Bảng 4.1 Cấu tr c tên gọi c c hợp chất cô l p đƣợc từ cao ethyl acetate Aegiceras floridum…………………………………………………… …23 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Qui trình điều chế loại cao l S tr ng Aegiceras floridum) phƣơng ph p tr ch pha r n silica gel……………………… ……… 12 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây sú tr ng - Aegiceras floridum………………………………………… Hình 2.2 SKLM hợp chất l p đƣợc từ cao ethyl acetate 14 Hình 3.1.Cấu tr c hóa học c a quercetin (AF.EA1) 16 Hình 3.2.Cấu tr c hóa học c a acid protocatechuric (AF.EA2) 17 Hình 3.3 Cấu tr c hóa học c a acid vanillic (AF.EA3) 19 Hình 3.4 Cấu trúc hóa học c a acid 4-hydroxibenzoic (AF.EA4)………………… 21 20 3.4 Khảo sát cấu trúc hóa học hợp chất AF.EA4 Hợp chất AF.EA4 đƣợc cô l p từ phân đoạn Fea.5 c a cao ethyl acetate c a Bảng 2.2 có c c đ c m sau: * Có dạng tinh th khơng màu * Nhiệt độ nóng chảy: 213-214 oC [17] (kết tinh lại CH3OH) * SKLM cho giải ly hệ dung môi CH2Cl2 : CH3OH (95 : 5), hình dƣới đèn UV 254, cho vết tròn, với giá trị Rf = 0,4 * Ph * Ph 13 H-NMR (DMSO-d6) (Phụ lục 4a): trình bày bảng 3.4 C-NMR (DMSO-d6) (Phụ lục 4b): trình bày bảng 3.4 Biện luận cấu trúc: Ph H-NMR c a hợp chất AF.EA4 xuất tín hiệu m i đơi m i tín hiệu chứa proton vùng nhân thơm H 6.82 (J=8.8 Hz) 7.78 (J=8.8 Hz) Điều cho thấy hợp chất có chứa vịng benzene, có hai c p proton ghép c p ortho nên vịng benzene có hai nhóm Ph 13 vị trí para C-NMR c a hợp chất AF.EA4xuất tín hiệu >C=O (C 167.17), tín hiệu car on hƣơng phƣơng tứ cấp (C 161.52, 121.45) tín hiệu c a carbon methine hƣơng phƣơng C 131.46 115.07) Trong hai t n hiệu C 131.46 ppm C 115.07 ppm có chiều cao hẳn tín hiệu cịn lại nên có th m i tín hiệu tƣơng ứng hai carbon trùng nhau, hay hợp chất AF.EA4 có đối xứng So sánh liệu ph acid 4-hydroxybenzoic [17] H- 13C-NMR c a hợp chất AF.EA4 với số liệu ph c a cho thấy có tƣơng hợp (Bảng 3.4) cấu trúc c a hợp chất AF.EA4 đƣợc đề nghị acid 4-hydroxybenzoic Hình 3.4 Cấu tr c hóa học c a acid 4-hydroxibenzoic (AF.EA4) 21 Bảng 3.4 So s nh liệu ph NMR c a hợp chất AF.EA4 với acid 4-hydroxibenzoic STT HỢP CHẤT AF.EA4 (DMSO-d6) Acid 4-hydroxibenzoic [17] (DMSO-d6) H, J (Hz) C H, J (Hz) C - 161.52 - 161.55 7.69 d (8.4) 115.07 7.83 d (8.8) 115.06 6.82 d (8.8) 131.46 6.85 d (8.8) 131.47 121.45 121.35 6.82 d (8.8) 131.46 6.85 d (8.8) 131.47 7.69 d (8.4) 115.07 167.17 7.83 d (8.8) 115.06 167.11 -COOH 22 CHƢƠNG KẾT UẬN Quá trình nghiên cứu thành ph n hóa học cao ethyl acetate c a l S tr ng Aegiceras floridum Roem & Schult họ S Aegicerataceae) thu hái rừng C n Giờ– Thành phố Hồ Ch Minh ƣớc đ u thu đƣợc số kết định  Bằng c c phƣơng ph p li tr ch chiết t ch ản dùng phân l p hợp chất hữu ch ng cô l p đƣợc hợp chất, kí hiệu l n lƣợt AF.EA1 đến AF.EA4  Bằng c c phƣơng pháp phân tích hóa lí đại (1D-NMR) đối chiếu với tài liệu tham khảo x c định đƣợc cấu trúc hóa học c a hợp chất nhƣ sau: AF.EA1 : Quercetin AF.EA2 : Acid protocatechuric AF.EA3 : Acid vanillic AF.EA4 : Acid p-hydroxybenzoic Trong số hợp chất cô l p:  Hợp chất AF.EA1 flavon thƣờng diện nhiều c c loài  Hợp chất AF.EA2, AF.EA3 AF.EA4 c c acid phenolic ph biến có thực v t Cấu trúc tên gọi hợp chất hữu cô l p đƣợc từ số phân đoạn cao ethyl acetate Aegiceras floridum đƣợc trình bày Bảng 4.1 Hƣớng nghiên cứu đề tài Tiếp tục khảo s t c c phân đoạn chƣa khảo sát c a cao ethyl acetate Tiến hành thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn c ng nhƣ độc tính số dòng tế ung thƣ c a c c hợp cô l p đƣợc 23 Bảng 4.1 Cấu tr c tên gọi c c hợp chất cô l p đƣợc từ cao ethyl acetate Aegiceras floridum Quercetin (AF.EA1) Acid vanillic (AF.EA3) Acid protocatechuric (AF.EA2) Acid p-hydroxybenzoic (AF.EA4) 24 TÀI IỆU THAM KHẢO [1] Jun Wu, Qiang Xiao, Jing Xu, Min-Yi Li, Jian-Yu Pana, Mei-hua Yang (2008), Natural products from true mangrove flora: source chemistry and ioactivities Natural Product Reports 25, 955-981 [2] Talat Roome, Assana Dar, Shamsher Ali, Sabira Naqvi, Muhammad Iqbal Choudhary (2008) A study on antioxidant, free radical scavenging, antiinflammatory and hepatoprotective actions of Aegiceras corniculatum (stem) extraxts Journal of Ethnopharmacology 118, 514-521 [3] Pham Hoang Ho (1999) Vietnamese Plant I, II Young Publishing House, 711, 385386 [4] Sundaram Ravikumar, Ganesan Ramanathan, Murugesan Gnanadesigan (2012) In vitro antiplasmodial activity of spiro benzofuran compound from mangrove plant of Southern India Asian Pacific Journal of Tropical Medicine (2012) 358-361 [5] Edgardo Gomez, Offlia De La Cruz-Giron (1989) Toxicants from mangrove plants, V Isolation of the piscicide, 2-hydroxy-5-methoxy-3-undecyl-1,4benzoquinone (5-O-methylembelin) from Aegiceras corniculatum Journal of Natural Products 52(3), 649–651 [6] Minjuan Xu, Zhiwei Deng, Min Li, Jun Li, Hongzheng Fu, Peter Proksch, Wenhan Lin (2004) Chemical constituents from the mangrove plant, Aegiceras corniculatum Journal of Natural Products 67, 762–766 [7] K Venkateswara Rao, P K Bose (1962) Chemistry of Aegiceras majus gaertn – III structure of aegiceradiol Tetrahedron 18, 461–464 [8] K Venkateswara Rao, P K Bose (1962) Chemistry of Aegiceras majus Gaertn IIb Isolation of 28-noroleana-12,17-dien-3β-ol Journal of Organic Chemistry 27, 1470-1472 [9] O D Hensens, K G Lewis (1965) Reactions of primula genin A – Part I Tetrahedron Letter 51, 4639-4643 [10] Daojing Zhang, Jun Wu, Si Zhang, Jianshe Huang (2005) Oleanane triterpenes from Aegiceras corniculatum.Fitoterapia 76, 131–133 [11] M Gowri Ponnapalli, S CH V A Rao Annam, Saidulu Ravirala, Sushma Sukki, Madhu Ankireddy, V Raju Tuniki (2012) Unusual isomeric corniculatolides 25 from mangrove, Aegiceras corniculatum Journal of Natural Products 75, 275– 279 [12] M Chandrasekaran, A Senthil Kumar, K Kannathasan, V Venkatesalu (2010) Fatty-acid composition of some mangroves Chemistry of Natural Compounds 46(1), 92-94 [13] Priya D Patil A, Niranjana S Chavan A (2012) Potential testing of fatty acids from mangrove Aegiceras corniculatum (L.) Blanco International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 4(3), 569-571 [14] Vo Van Chi (1999) Dictionary ofVietnamese medicinal plants Medical Publishing House, Hanoi, 1070 [15] K Venkateswara Rao (1964) Chemistry of Aegiceras majus Gaertn – V structure of the triterpene aegicerin Tetrahedron 20, 973–977 [16] Z Yang, Y Wang, Y Wang, Y Zhang (2012), Bioassay guided screening and isolation of a glucosidase and tyrosinase inhibitors from leaves of Morus alba, Food Chemistry, 131, 617–625 [17] Yang Yu, Huiyuan Gao, Zhishu Tang, Xiaomei Song, Lijun Wu (2006), Several Phenolic Acids from the Fruit of Capparis spinosa, Asian Journal of Traditional Medicines, 1, 1-4 26 PHỤ LỤC Aegiceras floridum 2’ 5’ 6’ OH H-NMR (DMSO) AF.EA1 Aegiceras floridum 6’ 3’ 4’ 2’ 5’ ’ 10 b: 13 C-NMR (DMSO AF EA Aegiceras floridum 2a: H-NMR (DMSO AF EA Aegiceras floridum COOH 2b 13 C-NMR (DMSO AF EA Aegiceras floridum OMe 3a H-NMR (DMSO AF EA Aegiceras floridum OMe COOH 3b 13 C-NMR (DMSO AF EA Aegiceras floridum 2, 3, P 4a H-NMR (DMSO AF EA Aegiceras floridum 2, 3, COOH 4b 13 C-NMR (DMSO AF EA ... Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học t p: Kh * Năm thứ 3: Ngành học: Hóa Học Khoa: Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học t p: Kh * Năm thứ 4: Ngành học: Hóa Học Khoa: Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học. .. TRÌNH HỌC TẬP kê khai thành t ch c a sinh viên từ năm thứ đến năm học) : * Năm thứ 1: Ngành học: Hóa Học Khoa: Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học t p: TB- Khá * Năm thứ 2: Ngành học: Hóa Học Khoa:... ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2015 – 2016 ĐỀ TÀI KHẢO SÁT THÀNH PHẦN