Trong nghiên cứu này, cao chiết từ sinh khối nấm và quả thể nấm C. takaomontana DL0038A được nuôi cấy lỏng – tĩnh và khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa in vitro bằng phương pháp thử năng lực khử, bắt gốc tự do DPPH (1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl) và ABTS (2,2´azinobis(3-ethylbenzothiazonline-6-sulfonate); và hoạt tính kháng viêm bằng phương pháp ức chế xanthine oxidase (XO) và ức chế biến tính bovine serum albumin (BSA).
Tạp chí khoa học Đại học Thủ Dầu Một Số 2(51)-2021 HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HĨA VÀ KHÁNG VIÊM IN VITRO CỦA CAO CHIẾT NẤM CORDYCEPS TAKAOMONTANA DL0038A PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM Lâm Khắc Kỷ , Lê Thị Kim Cương3, Văn Thị Xuân Thương3, 1,2,3 Đinh Minh Hiệp4, Ngô Đại Hùng5 (1) Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Thành phố Hồ Chí Minh; (2) Đại học Quốc gia Hồ Chí Minh (3) Trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh (4) Sở Nơng nghiệp Phát triển nơng thơn Thành phố Hồ Chí Minh (5) Trường Đại học Thủ Dầu Một, Bình Dương Liên hệ Email: lamkhacky@iuh.edu.vn, hungnd@tdmu.edu.vn https://doi.org/10.37550/tdmu.VJS/2021.02.168 Tóm tắt Nấm Cordyceps takaomontana tìm thấy đỉnh núi LangBiang, Đà Lạt, tỉnh Lâm Đồng, Việt Nam độ cao 1650m mực nước biển C takaomontana thuộc nhóm nấm ký sinh trùng sử dụng y học cổ truyền nước Châu Á hàng trăm năm qua hoạt tính sinh học có giá trị cao kháng oxy hóa, kháng viêm, kháng ung thư Trong nghiên cứu này, cao chiết từ sinh khối nấm thể nấm C takaomontana DL0038A nuôi cấy lỏng – tĩnh khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa in vitro phương pháp thử lực khử, bắt gốc tự DPPH (1,1diphenyl-2-picrylhydrazyl) ABTS (2,2´azinobis(3-ethylbenzothiazonline-6-sulfonate); hoạt tính kháng viêm phương pháp ức chế xanthine oxidase (XO) ức chế biến tính bovine serum albumin (BSA) Kết cho thấy tất loại cao chiết sinh khối nấm có hoạt tính cao thể Phân đoạn cao chiết ethyl acetate (EtOAc) sinh khối nấm có lực khử cao với mật độ quang 0,124 1000µg/ml, hoạt tính bắt gốc tự DPPH cao (IC50 = 785,4 ± 15,689g/ml); cao polysaccharides (IPS) từ sinh khối nấm cho khả bắt gốc ABTS cao (IC50 = 822,370 ± 6,210g/ml) Thêm vào đó, phân đoạn cao chiết petroleum ether (PE) sinh khối nấm có khả ức chế biến tính BSA nhiệt cao (IC50 = 139,790 ± 18,044g/ml) cao tổng ethanol (EtOH) sinh khối nấm ức chế XO cao (IC50 = 236,564 ± 5,533µg/ml) Kết cho thấy C takaomontana DL0038A ứng dụng nguồn nguyên liệu hoạt tính sinh học tiềm sản xuất thực phẩm chức Từ khóa: Cordyceps takaomontana, kháng oxy hóa, kháng viêm, ức chế xanthine oxydase (XO), ức chế biến tính bovine serum albumin (BSA) http://doi.org/10.37550/tdmu.VJS/2021.02.168 Abstract ANTIOXIDANT AND ANTIINFLAMMATORY ACTIVITIES IN VITRO OF CORDYCEPS TAKAOMONTANA DL0038A EXTRACTS ISOLATED IN VIETNAM Cordyceps takaomontana was found on the LangBiang mountain – Da Lat, Lam Dong province, Vietnam at the height of 1650m above sea level C takaomontana belongs to the group of insect parasitic fungi used in traditional medicine in Asian countries for hundreds of years because of high value biological activities such as antioxidant, antiinflammatory, anticancer In this study, extracts from C takaomontana DL0038A fungi biomass and fruiting body were cultured in liquid – static media and investigated antioxidant activity by the methods of reducing power, free radicals scavenging such as DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) and ABTS (2,2´azinobis (3-ethylbenzothiazonline-6-sulfonate); and antiinflammatory effect by the techniques of inhibiting xanthine oxydase (XO) and bovine serum albumine (BSA) denaturation The results demonstrated that all seven fungal biomass extracts possessed antioxidant and antiinflammatory activities higher than the fruiting bodies The ethyl acetate (EtOAc) extract from fungal biomass exhibited the strongest reducing power with the absorbance of 0.124 at the concentration of 1000µg/ml, and DPPH scavenging activity (IC50 = 785.4 ± 15.689g/ml); meanwhile the polysaccharides (IPS) extract from fungal biomass showed the highest ABTS scavenging capacity (IC50 = 822.370 ± 6.210g/ml) Moreover, the petroleum ether (PE) extract from fungal biomass inhibited the thermal denaturation of BSA with the IC50 value of 139.790 ± 18.044g/ml and the ethanol (EtOH) extract from fungal biomass showed the highest XO inhibitory effect with the IC50 value of 236.564 ± 5.533µg/ml All results showed that C takaomontana DL0038A could be applied as potential bioactive materials in the production of funtional food ingredients Keywords: Cordyceps takaomontana, antioxidant, antiinflammatory, xanthine oxydase (XO) inhibition, bovine serum albumine (BSA) inhibition Giới thiệu Gốc tự gây nhiều bệnh nguy hiểm ung thư, viêm, tim mạch bệnh suy giảm miễn dịch phản ứng mạnh với phân tử protein, DNA axit béo thể Các hợp chất chống oxi hóa polyphenol flavonoid có tác dụng làm gốc tự Cordyceps nhóm nấm ký sinh trùng có giá trị dược liệu cao, chứa hoạt chất sinh học có tác dụng kháng oxy hóa, kháng viêm, kháng dị ứng, điều hịa miễn dịch, kháng ung thư, kháng đái tháo đường, kháng khuẩn… (Nxumalo cs., 2020; Olatunji cs., 2018) Cordyceps phân bố nhiều nơi giới chủ yếu Tạp chí khoa học Đại học Thủ Dầu Một Số 2(51)-2021 tìm thấy Châu Á (đáng ý Trung Quốc, Thái Lan, Nhật Bản Việt Nam) (Sung cs., 2007) Việt Nam nước có điều kiện khí hậu thích hợp cho phát triển nấm Cordyceps Đặc biệt, C takaomontana tìm thấy Vườn Quốc Gia, Ba Vì, Hà Nội Vườn Quốc gia, Tam Đảo, Vĩnh Phúc Phạm Quang Thu Nguyễn Mạnh Hà (2010); vùng núi Langbiang, Đà Lạt, tỉnh Lâm Đồng Đinh Minh Hiệp cs., (2017) Đáng ý, Nguyễn Thị Thanh Lan cs., (2018) tiến hành nghiên cứu liều gây độc cao chiết C takaomontana cho thấy chiết xuất loại nấm an tồn khơng gây độc thử nghiệm chuột bạch Hama cs., (2019) tách chiết hai hợp chất cordytakaoamides A B từ C takaomontana NBRC 101754 Tuy nhiên, chưa có nhiều cơng bố hoạt tính sinh học nấm C takaomontana Vì vậy, nghiên cứu này, hoạt tính kháng oxy hóa kháng viêm cao chiết từ nấm C takaomontana xác định nhằm ứng dụng làm thực phẩm chức hỗ trợ điều trị viêm bệnh liên quan Vật liệu – phương pháp 2.1 Vật liệu Chủng giống C takaomontana DL0038A độ cao 1650m đỉnh núi Lang Biang, tỉnh Lâm Đồng, Việt Nam nhóm tác giả Đinh Minh Hiệp thu nhận (Đinh Minh Hiệp cs., 2017) 2.2 Phương pháp nhân giống Nhân giống cấp 1: Hoạt hóa giống để khơi phục lại hoạt tính giống vi sinh vật sau trình giữ giống Chuẩn bị giống cấp 2: Cấy chuyển giống cấp từ môi trường thạch sang môi trường lỏng giàu dinh dưỡng để nhân nhanh số lượng hệ sợi nấm C takaomontana DL0038A trước cấy giống vào môi trường nuôi cấy Cấy khoanh giống cấp vào erlen chứa 200ml môi trường Potato Glucose hấp khử trùng Ủ 20-25oC, từ 10-12 ngày 2.3 Phương pháp nuôi cấy lỏng – tĩnh Sinh khối (hệ sợi nấm): Chủng nấm nuôi cấy môi trường lỏng – tĩnh hộp nhựa polypropylen (dung tích 500ml, đường kính 120mm) Thành phần mơi trường gồm: 200ml dịch dinh dưỡng có tỷ lệ 20% dịch khoai tây; 0,05% sucrose; 0,006% peptone; 0,004% cao nấm men; 0,0005% KH2PO4 0,0002% MgSO4.7H2O Tỷ lệ giống lỏng nuôi tĩnh ngày, cấy vào 4%, nuôi nhiệt độ 23oC Sinh khối thu sau 40 ngày kể từ cấy giống 2.4 Phương pháp chiết cao Quy trình chiết dựa theo phương pháp chiết Nguyễn Kim Phi Phụng (2007) http://doi.org/10.37550/tdmu.VJS/2021.02.168 Sinh khối thể C takaomontana DL0038A sấy khô, xay nhỏ ethanol 96o Sinh khối chiết ngấm kiệt ethanol 96o 24 giờ, cô cạn dịch chiết thu cao ethanol (EtOH – cao tổng) Cao tổng tiếp tục chiết phân đoạn theo độ phân cực tăng dần petroleum ether (PE), ethyl acetate (EtOAc), n-butanol (n-BuOH) nước Sử dụng phương pháp cô quay để cô đuổi dung môi thu cao Dịch nuôi cấy sinh khối tủa với ethanol 96o lạnh thu cao exopolysaccharide (EPS) Bã sinh khối sau chiết với ethanol 96o, bã sinh khối giữ lại đem phơi khô Tiến hành chiết cao nước cách đun sôi bã sinh khối với nước theo tỷ tệ 1:10 (w/v) Lượng nước chia làm ba phần để đun sôi bã sinh khối, lần 60 phút Dịch lọc, ly tâm loại cặn cô quay đuổi nước để thu cao polysaccharide (IPS) 2.5 Phương pháp xác định lực khử Dựa khả khử Fe3+ phân tử [Fe(CN)6]3- thành Fe2+ Fe(CN)6]4, chất tạo phức màu xanh với Fe3+ có độ hấp thu cực đại bước sóng 700nm Phương pháp thực theo Ferreira cs., (2007) có thay đổi cho phù hợp với điều kiện phịng thí nghiệm Cho 0,5ml đệm sodium phosphat 0,2 M pH vào 0,2ml dung dịch mẫu Thêm 0,5ml dung dịch K3[Fe(CN)6]) 1% vào hỗn hợp trên, lắc Ủ 50oC 20 phút Thêm 0,5ml dung dịch Trichloroacetic acid 10%, lắc Hút 0,8ml dịch vào 2ml nước cất Thêm vào 0,4ml FeCl3 1% Đo mật độ quang bước sóng 700nm Mật độ quang dung dịch bước sóng 700nm cao thể lực khử dung dịch thử nghiệm cao Các thí nghiệm lặp lại lần 2.6 Phương pháp xác định hoạt tính bắt gốc tự DPPH Nguyên tắc phương pháp dựa khả bắt gốc tự DPPH chất kháng oxy hóa theo Sharma Bhat có thay đổi phù hợp với điều kiện phịng thí nghiệm (Sharma cs., 2009) Cho 0,5ml dung dịch mẫu vào 0,75ml dung dịch DPPH, vortex cho ủ 30 phút tối nhiệt độ phòng Đo mật độ quang bước sóng 517nm Mẫu trắng gồm 0,5ml dung dịch mẫu thử vào 0,75ml dung dịch methanol 80% Ống không gồm 0,5ml dung dịch methanol 80% 0,75ml dung dịch DPPH Các thí nghiệm lặp lại lần Nồng độ ức chế 50% (IC50) thấp chứng tỏ hoạt tính cao Tỷ lệ bắt gốc DPPH (%) = ODống khơng - (ODmẫu - ODtrắng) × 100/ODống khơng Với ODtrắng: mật độ quang mẫu trắng, ODmẫu: mật độ quang mẫu thử, ODống không: mật độ quang ống khơng 2.7 Phương pháp xác định hoạt tính bắt gốc tự ABTS (2,2´azinobis(3ethylbenzothiazonline-6-sulfonate)) Thử nghiệm hoạt tính bắt gốc tự ABTS tiến hành theo phương pháp Nenadis cs., (2004) với thay đổi cho phù hợp điều kiện phịng thí nghiệm Dung dịch gốc tự ABTS chuẩn bị cách cho 2ml dung dịch ABTS nồng độ 7mM vào Tạp chí khoa học Đại học Thủ Dầu Một Số 2(51)-2021 2ml dung dịch K2S2O8 nồng độ 2,45mM ủ dung dịch bóng tối 16 giờ, sau pha lỗng ethanol (khoảng 50 lần) điều chỉnh độ hấp thu dung dịch bước sóng 734nm có mật độ quang 0,7 ± 0,02 Thí nghiệm tiến hành cách cho 3000μl dung dịch ABTS vào 100μl dung dịch mẫu cần phân tích, ủ tối 30 phút, đo OD 734nm Các thí nghiệm lặp lại lần kết biểu diễn giá trị IC50µg/ml 2.8 Phương pháp xác định hoạt tính ức chế xanthine oxidase (XO) Xanthine oxidase (XO) enzyme xúc tác chuyển hóa hình thành acid uric, xem nguyên nhân gây nên tình trạng tăng acid uric (Huỳnh Thư cs., 2017) Axit uric có bước sóng hấp thu cực đại 290nm Nếu mẫu thử có khả ức chế XO cao hạn chế hình axit uric, làm giảm giá trị mật độ quang Mẫu có chất thử so sánh với mẫu khơng có chất thử để đánh giá tác dụng ức chế XO Hỗn hợp phản ứng ban đầu chứa XO 0,05 UI (XO pha loãng dung dịch đệm kali phosphate 50mM pH 7,5 lạnh) mẫu thử nồng độ khác (mẫu gốc dung dịch DMSO 5%), ủ nhiệt độ phòng (25oC) 15 phút Sau phản ứng bổ sung xanthine với nồng độ 400g/ml, ủ nhiệt độ phòng 30 phút Sau cho dung dịch HCl N để dừng phản ứng Hỗn hợp phản ứng sau đo độ hấp thu máy đo quang phổ bước sóng 290nm Song song với mẫu thử có mẫu trắng tiến hành tương tự không cho enzyme XO vào giếng thay thể tích enzyme đệm Đồng thời khơng ủ mẫu mà cho HCl vào để kết thúc phản ứng Các thí nghiệm lặp lại lần Phần trăm ức chế = (ODtrắng - ODmẫu) × 100/ODtrắng (%) Với ODtrắng: mật độ quang mẫu trắng (thay enzyme XO đệm), ODmẫu: mật độ quang mẫu thử 2.9 Phương pháp xác định hoạt tính ức chế biến tính bovine serum albumin nhiệt Hoạt tính kháng viêm đánh giá thơng qua khảo sát ức chế biến tính bovine serum albumin (BSA) mơ hình in vitro Trần Quốc Tuấn cộng (2014) Hút 2ml đệm acetate 0,025M (pH 5,5), bổ sung thêm 1ml albumin huyết bò 0,16% 1ml cao chiết (hòa tan với dung dịch DMSO 5% pha đệm acetate 0,025M, pH 5,5) với nồng độ khác Sau ủ 37oC 20 phút, tiếp tục ủ 67oC phút, sau làm lạnh vịi nước Đo dung dịch bước sóng 660nm Các thí nghiệm thực lần Phần trăm ức chế = [(ODtrắng - ODmẫu) × 100]/ODtrắng Với ODtrắng: mật độ quang mẫu trắng (thay cao chiết đệm), ODmẫu: mật độ quang mẫu 2.10 Xử lý số liệu http://doi.org/10.37550/tdmu.VJS/2021.02.168 Số liệu phân tích xử lý thống kê phần mềm SPSS Các biểu đồ vẽ phần mềm Sigma plot 2010 Kết thảo luận 3.1 Nuôi sinh khối Sau 40 ngày nuôi cấy lỏng – tĩnh, sinh khối C takaomontan DL0038A thu gồm sinh khối tươi sinh khối khơ hình Hình (A) Sinh khối tươi (B) Sinh khối khô C takaomontan DL0038A Sinh khối nấm thể chiết với dung môi ethanol 96o Từ cao ethanol tổng, cao phân đoạn thu nhận cách lắc phân đoạn với dung môi hữu với tính phân cực tăng dần: PE, EtOAc, n-BuOH nước Từ dịch nuôi cấy sinh khối thu cao EPS từ bã sinh khối thu cao IPS Tất cao chiết sử dụng cho thí nghiệm xác định hoạt tính kháng oxi hóa kháng viêm 3.2 Kết lực khử Năng lực khử hoạt tính quan trọng việc thể khả kháng oxy hóa mẫu cho thấy diện chất khử Năng lực khử cao chiết nồng độ 1000µg/ml trình bày bảng 1, cao chiết có mật độ quang cao thể lực khử mạnh Bảng Kết mật độ quang thử lực khử loại cao chiết C takaomontana DL0038A nồng độ 1000µg/ml Cao chiết Cao EtOH Cao PE Cao EtOAc Cao n-BuOH Cao nước Cao IPS Cao EPS Sinh khối 0,186 0,060 0,124 0,076 0,107 0,071 Quả thể 0,093 0,048 0,088 0,076 0,196 0,113 - (-) Không tìm giá trị khoảng khảo sát Tạp chí khoa học Đại học Thủ Dầu Một Số 2(51)-2021 Dựa vào số liệu bảng 1, cao tổng EtOH sinh khối nấm cao có lực khử vượt trội với mật độ quang 0,186 nồng độ 1000µg/ml Đây cao tổng nên chứa hợp chất có khả khử Phân đoạn cao EtOAc sinh khối nấm có mật độ quang 0,124 cao phân đoạn cao thu cho thấy hợp chất có khả khử tập trung phân đoạn cao 3.3 Kết hoạt tính bắt gốc tự DPPH Các mẫu cao chiết mà có khả bắt gốc tự DPPH chứng tỏ cao chiết có chứa hợp chất có khả cho H+ chuyển điện tử, thế, có khả ngăn chặn phản ứng gốc tự (Oh JY cs., 2005) Kết bắt gốc tự DPPH caco chiết thể bảng Bảng Giá trị IC50 chứng dương vitamin C (2,45 ± 0,07µg/ml) cao chiết khảo sát khả bắt gốc DPPH Cao chiết Cao EtOH Cao PE Cao EtOAc Cao n-BuOH Cao nước Cao IPS Cao EPS Sinh khối (µg/ml) 626,613 ± 10,655 1998,072 ± 28,291 785,4 ± 15,689 1735,789 ± 31,785 1119,188 ± 25,387 X X Quả thể (µg/ml) 889,196 13,561 X X (-) Khơng tìm giá trị IC50 khoảng khảo sát (X) Khơng tiến hành thí nghiệm cao khơng hịa tan dung mơi khảo sát Kết bảng cho thấy IC50 cao EtOAc sinh khối nấm C takaomontana DL0038A thấp khảo sát (785,4 ± 15,689µg/ml), điều cho thấy cao chiết có chứa số chất có hoạt tính bắt gốc tự DPPH cao Do đó, phân đoạn cao chiết EtOAc cao tiềm có chứa hợp chất có khả trung hồ gốc tự lực khử trước 3.4 Kết hoạt tính bắt gốc tự ABTS Mẫu khảo sát có khả bắt gốc tự ABTS chứng tỏ mẫu có chứa hợp chất có khả nhường H+ chuyển electron cho gốc tự cách trực tiếp, tạo thành sản phẩm ổn định (Nenadis cs., 2004) Khả bắt gốc tự ABTS cao chiết giúp kiểm tra đối chứng với kết phương pháp DPPH, đồng thời giúp khảo sát tiếp khả bắt gốc tự cao phân đoạn không tan nước phương pháp DPPH Kết bắt gốc tự ABTS thể bảng Bảng Giá trị IC50 khảo sát khả bắt gốc tự ABTS cao chiết Cao chiết Sinh khối (µg/ml) Quả thể (µg/ml) http://doi.org/10.37550/tdmu.VJS/2021.02.168 Cao EtOH Cao PE Cao EtOAc Cao n-BuOH Cao nước Cao IPS Cao EPS 2058,397 ± 16,648 1235,235 ± 18,256 1009,756 ± 10,917 1646,487 ± 34,656 1488,214 ± 14,563 822,370 ± 6,210 1072,845 ± 12,230 1921,285 ± 8,983 1536,123 ± 9,253 1132,214 ± 2,145 991,365 ± 11,192 2473,634 ± 21,198 970,385 ± 13,249 - (-) khơng tìm giá trị IC50 khoảng khảo sát Kết bảng cho thấy phân đoạn cao EtOAc sinh khối với giá trị IC50 = 1009,756 ± 10,917µg/ml phù hợp với kết thử DPPH phân đoạn cao EtOAc tiềm có chứa hợp chất kháng oxy hoá Đồng thời, cao IPS sinh khối thể (IC50 822,370 ± 6,21 970,385 ± 13,249µg/ml) có chứa hợp chất kháng oxy hoá tiềm Kết cho thấy phân đoạn cao chiết tiềm có chứa hợp chất có khả kháng oxy hố nấm C takaomontana DL0038A phân đoạn cao EtOAc phân đoạn cao IPS 3.5 Kết hoạt tính ức chế xanthine oxydase Xanthine oxidase (XO) enzyme có khả oxy hóa purin thành sản phẩm cuối axit uric Tăng acid uric nguyên nhân gây viêm khớp (bệnh gout) bệnh liên quan chuyển hóa tiểu đường, béo phì, cao huyết áp tim mạch (Huỳnh Thư cs., 2017) Do đó, sau xác định phân đoạn cao tiềm có chứa hợp chất có hoạt tính kháng oxy hoá, khả ức chế enzyme XO cao chiết tiếp tục thực Kết hình bảng cho thấy khả ức chế enzyme XO cao chiết Hình Khả ức chế xanthine oxydase cao sinh khối nấm Bảng Khả ức chế xanthine oxydase cao chiết với giá trị IC50 Cao chiết Sinh khối (µg/ml) 10 Quả thể (µg/ml) Tạp chí khoa học Đại học Thủ Dầu Một Cao EtOH Cao PE Cao EtOAc Cao n-BuOH Cao nước Cao IPS Cao EPS Số 2(51)-2021 236,564 ± 5,533 536,530 ± 13,942 400,712 ± 9782 - - (-) khơng tìm giá trị IC50 khoảng khảo sát Theo kết bảng 4, ba phân đoạn có khả ức chế XO với giá trị IC50 EtOH, PE cao nước sinh khối nấm Kết hình cho thấy cao EtOH có khả ức chế enzyme XO mạnh 97,233% nồng độ 500µg/ml IC50 236,564 ± 5,533µg/ml, cao chiết khác có khả ức chế XO thấp Khả ức chế XO cao EtOH cao so với cao phân đoạn cịn lại chứa hợp chất kháng oxy hóa tiềm Kết tương tự nghiên cứu trước số thành phần hoạt tính kháng oxy hóa diện cao chiết C takaomontana flavonoid hợp chất polyphenol có khả ức chế hoạt động XO 3.6 Kết hoạt tính ức chế biến tính bovine serum albumin nhiệt Tổ chức tế bào thể bị oxy hóa đẫn đến tổn thương viêm nhiễm Để xác định khả bảo vệ biến tính protein gốc tự gây ra, chọn phương pháp xác định khả bảo vệ biến tính BSA (Nenadis cs., 2004; Huỳnh Thư cs., 2017) Hình Khả ức chế biến tính bovine serum albumin cao chiết sinh khối Bảng Giá trị IC50 cao chiết Cao chiết Cao EtOH Cao PE Sinh khối (µg/ml) 531,885 ± 11,561 139,790 ± 18,044 11 Quả thể (µg/ml) 693,84 ± 18,833 - http://doi.org/10.37550/tdmu.VJS/2021.02.168 Cao EtOAc Cao n-BuOH Cao nước Cao IPS Cao EPS 738,136 ± 17,954 898,805 ± 12,420 - (-) Khơng tìm giá trị IC50 khoảng khảo sát Theo kết thể hình bảng 5, phân đoạn cao PE sinh khối phân đoạn có chứa hợp chất có khả ức chế biến tính BSA cao thể giá trị IC50 thấp (139,790 ± 18,044) µg/ml khả ức chế biến tính albumin cao cịn nồng độ từ 0-200µg/ml Trong đó, phân đoạn cao thể khơng có hoạt tính Kết cho thấy cao PE có tiềm kháng viêm chứa hợp chất có khả ức chế biến tính albumin Kết luận Từ việc tiến hành nuôi thành công sinh khối thể chủng nấm C takaomontana DL0038A phân lập Việt Nam, kết nghiên cứu hoạt tính kháng oxy hóa cho thấy cao EtOAc sinh khối nấm có chứa hoạt chất tan dung môi hữu cao tiềm bắt gốc tự DPPH cao (IC50 = 785,4 ± 15,689g/ml) lực khử cao với mật độ quang 0,124 1000µg/ml, cao IPS sinh khối nấm có chứa hợp chất tan nước lại có khả bắt gốc tự ABTS cao (IC50 = 822,370 ± 6,210µg/ml) Cao tổng EtOH sinh khối nấm có chứa hợp chất tiềm ức chế XO cao (IC50 = 236,564 ± 5,533µg/ml) cao PE sinh khối cao có khả ức chế biến tính albumin nhiệt cao (IC50 = 139,790 ± 18,044µg/ml) Từ kết cho thấy sinh khối nấm C takaomontana DL0038A phân lập Việt Nam nguồn ngun liệu hoạt tính sinh học tiềm ứng dụng sản xuất thực phẩm chức nhằm phục vụ sức khoẻ cộng đồng Lời cảm ơn Đề tài thực phịng thí nghiệm mơn sinh hóa, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên – Đại học Quốc gia Thành Phố Hồ Chí Minh TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Dinh cộng (2017) Discovery of entomopathogenic fungi Cordyceps takaomontana at Langbian Mountain, Lam Dong, Vietnam Vietnam J Sci Technol, 55, 19-26 [2] Ferreira cộng (2007) Free-radical scavenging capacity and reducing power of wild edible mushrooms from northeast Portugal: Individual cap and stipe activity, Food Chem, 100, 1511-1516 12 Tạp chí khoa học Đại học Thủ Dầu Một Số 2(51)-2021 [3] Hama cộng (2019) New alkaloidal metabolites from cultures of entomopathogenic fungus Cordyceps takaomontana NBRC 101754 Fitoterapia, 139, 104364 [4] Huỳnh Thư cộng (2017) Nghiên cứu hoạt tính ức chế xanthine oxidase số cao chiết từ nấm dược liệu Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, 33, 192-198 [5] Nenadis cộng (2004) Estimation of scavenging activity of phenolic compounds using the ABTS•+ assay J Agric Food Chem, 52, 4669-4674 [6] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007) Phương pháp cô lập hợp chất hữu Nhà xuất Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh, TP Hồ Chí Minh [7] Nguyen cộng (2018) Research on acute toxicity and semi-chronic toxicity of medical fungus Cordyceps takaomontana Vestnik of Astrakhan State Technical University, 2018, 101-109 [8] Nxumalo cộng (2020) Cordyceps cicadae be used as an alternative to Cordyceps militaris and Cordyceps sinensis? A review J Ethnopharmacol 257, 112879 [9] Oh JY cộng (2005) The ethyl acetate extract of Cordyceps militaris inhibits IgEmediated allergic responses in mast cells and passive cutaneous anaphylaxis reaction in mice J Ethnopharmacol, 135, 422-429 [10] Olatunji cộng (2018) The genus Cordyceps: An extensive review of its traditional uses, phytochemistry and pharmacology Fitoterapia, 129, 293-316 [11] Phạm Quang Thu cộng (2010) Phát nấm đông trùng hạ thảo Cordyceps takaomontana Yakushiji Kumazawa Việt Nam Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nông thôn, 6, 127-130 [12] Sharma cộng (2009) DPPH antioxydant assay revisited, Food Chem, 113, 1202-1205 [13] Sung cộng (2007) Phylogenetic classification of Cordyceps and the clavicipitaceous fungi Stud Mycol, 57, 5-59 [14] Trần Quốc Tuấn cộng (2014) Chuẩn hóa mơ hình sàng lọc in vitro hợp chất kháng viêm dựa khả ức chế biến tính albumin bị nhiệt Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, 52, 532-538 13 ... kháng oxy hoá tiềm Kết cho thấy phân đoạn cao chiết tiềm có chứa hợp chất có khả kháng oxy hoá nấm C takaomontana DL0038A phân đoạn cao EtOAc phân đoạn cao IPS 3.5 Kết hoạt tính ức chế xanthine... cao EPS từ bã sinh khối thu cao IPS Tất cao chiết sử dụng cho thí nghiệm xác định hoạt tính kháng oxi hóa kháng viêm 3.2 Kết lực khử Năng lực khử hoạt tính quan trọng việc thể khả kháng oxy hóa. .. PE sinh khối cao có khả ức chế biến tính albumin nhiệt cao (IC50 = 139,790 ± 18,044µg/ml) Từ kết cho thấy sinh khối nấm C takaomontana DL0038A phân lập Việt Nam nguồn nguyên liệu hoạt tính sinh