Nghiên cứu ảnh hưởng của chất điều hòa sinh trưởng và thể nền đến kết quả giâm hom loài bò khai ( erythropalum scandens blume

LỜI NÓI ĐẦU Để đánh giá kết học tập rèn luyện sinh viên, sau thời gian đào tạo khóa trƣờng Đại học Lâm nghiệp tổ chức đợt thực tập tốt nghiệp cho sinh viên khóa học 2006 – 2010 Đƣợc đồng ý Nhà trƣờng, Khoa Lâm học Bộ môn Lâm sinh , tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hoà sinh trƣởng thể đến kết giâm hom lồi Bị khai (Erythropalum scandens Blume)” Trong suốt trình triển khai nghiên cứu, để hồn thành khóa luận tốt này, ngồi cố gắng thân tơi cịn nhận đƣợc hƣớng dẫn thầy giáo T.S Lê Xuân Trƣờng cô giáo ThS Khuất Thị Hải Ninh với giúp đỡ, tạo điều kiện thầy cô giáo Trƣờng Đại học Lâm nghiệp, ban quản lý vƣờn ƣơm trƣờng Đại học Lâm nghiệp, đến tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Nhân dịp này, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tất tình cảm quý báu Mặc dù có nhiều cố gắng, song khả năng, kinh nghiệm thân thời gian cịn hạn chế nên khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót định Do vậy, tơi kính mong nhận đƣợc góp ý từ phía thầy bạn bè để báo cáo đƣợc hoàn thiện Hà nội, ngày 20 tháng 05 năm 2010 Sinh viên thực Phạm Thị Yến MỤC LỤC CHƢƠNG I: ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG II: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 Giới thiệu loài nghiên cứu: 2.1 Lịch sử vấn đề nghiên cứu 2.1.1 Trên giới 10 2.1.2 Ở Việt Nam 10 2.2 Cơ sở khoa học phƣơng pháp nhân giống hom 12 2.2.1 Cơ sở tế bào hình thành rễ bất định 13 2.2.2 Cơ sở sinh lý hình thành chồi rễ bất định 13 2.2.2.1 Các nhân tố nội sinh 14 2.2.2 Các nhân tố ngoại sinh 19 CHƢƠNG III: MỤC TIÊU – NỘI DUNG – ĐỐI TƢỢNG 26 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Mục tiêu nghiên cứu 26 3.2 Nội dung nghiên cứu 26 3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 26 3.4.1 Phƣơng pháp ngoại nghiệp 26 3.4.1.1 Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm 26 3.4.1.2 Phƣơng pháp tiến hành thí nghiệm 27 3.4.2 Phƣơng pháp thu thập xử lý số liệu 27 3.4.2.1 Phƣơng pháp thu thập số liệu 27 3.4.2.2 Phƣơng pháp nội nghiệp : 28 CHƢƠNG IV: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31 4.1 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến kết giâm hom 31 4.1.1 Ảnh hƣởng loại nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng IBA đến kết giâm hom 31 4.1.2 Ảnh hƣởng loại nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng NAA đến kết giâm hom 37 4.3 So sánh nồng độ tốt IBA NAA đến kết giâm hom 42 4.2 Ảnh hƣởng thể đến kết giâm hom 48 CHƢƠNG V: KẾT LUẬN, TỒN TẠI, KHUYẾN NGHỊ 53 5.1 Kết luận: 53 5.2 Tồn Tại 53 5.3 Khuyến Nghị 53 CHƢƠNG I: ĐẶT VẤN ĐỀ Trong số “cây xóa đói giảm nghèo” tỉnh miền núi, năm gần ngƣời ta hay nhắc đến rau Bò Khai Đây loại dây leo tua cuốn, có nhiều tên địa phƣơng khác Đồng bào Tày gọi dây bò khai, dây hiến, Rau Bò Khai, phắc hiến; đồng bào Dao gọi lòng châu sói, cịn tên khoa học Erythropalum scandens Blume, thuộc họ Elythropalaceae Cây thƣờng mọc hoang ven rừng thứ sinh, rừng phục hồi rừng nghèo bị tác động mạnh kiểu rừng thƣờng xanh mƣa ẩm nhiệt đới; tập trung nhiều ven rừng mọc núi đá vôi Từ lâu đồng bào miền núi dùng Rau Bị Khai nhƣ thứ rau ăn, thu hái gần nhƣ quanh năm Đây loại thực phẩm giàu dinh dƣỡng, qua phân tích có thành phần chính: nƣớc 78,8 g, protein 6g, gluxit 6,1g; xơ 7,5 g, canxi 138 mg, phốt 40,7mg, caroten 2,6mg, vitamin C 60mg… Rau Bò Khai vị thuốc quý chữa bệnh thận, gan, mật Khi mệt mỏi, nƣớc tiểu vàng, cần ăn vài Rau Bò Khai nƣớc tiểu trở lại Ở Bắc Kạn kinh nghiệm dân gian dùng tồn Rau Bị Khai sắc lấy nƣớc uống chữa viêm gan siêu vi trùng hiệu Nam Trung Quốc mọc nhiều loài này, việc làm thực phẩm bạn dùng làm vị thuốc chữa bệnh gan, thận, tiết niệu với liều dùng 12 – 14g khô sắc uống ngày Về mặt bảo tồn, Rau Bò Khai thuộc họ thực vật đơn chi chi đơn lồi, việc phát triển lồi có nghĩa bảo tồn nguồn gen q nƣớc ta.[11] Trong khoảng 10 năm trở lại đây, rau Bò Khai trở thành hàng hoá từ rừng núi mọc hoang dã, trồng vƣờn nhiều hộ, đƣợc đƣa bán thị xã nhƣ Cao Bằng, Lạng Sơn, Quảng Ninh… chí cịn có siêu thị Hà Nội, Hải Phòng với giá 25 – 30 nghìn đồng/kg Do lồi cần đƣợc phát triển nhân rộng Rau Bò Khai loại rau cổ truyền đồng bào miền núi phía Bắc Trƣớc đây, nhu cầu cịn ngƣời dân địa phƣơng chủ yếu thu hái từ rừng Khoảng 10 năm gần đây, có thị trƣờng, bƣớc đầu đƣợc gieo trồng hạt Cây trồng hạt có nhƣợc điểm lâu cho rau ăn, chất lƣợng sản phẩm không đồng Biện pháp nhân giống sinh dƣỡng thích hợp để phát triển lồi rau đặc sản Các phƣơng pháp nhân giống sinh dƣỡng áp dụng bao gồm giâm hom nuôi cấy mô - tế bào Tuy nhiên nhân giống phƣơng pháp ni cấy mơ tế bào cần có thời gian nghiên cứu thử nghiệm, yêu cầu trang thiết bị đại nên vùng kinh tế khó khăn chƣa thể thực đƣợc Nhân giống phƣơng pháp giâm hom đơn giản, hệ số nhân giống cao, có độ đồng cao, chất lƣợng cao, yêu cầu trang thiết bị kỹ thuật tƣơng đối đơn giản, giá thành hạ , phù hợp áp dụng để phát triển lồi rau Bị Khai Tuy nhiên kết giâm hom phụ thuộc nhiều yếu tố nội sinh, ngoại sinh để đƣa phƣơng thức giâm hom thích hợp tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hoà sinh trưởng thể đến kết giâm hom lồi Bị khai (Erythropalum scandens Blume) ” CHƢƠNG II: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 Giới thiệu loài nghiên cứu: Rau Bị Khai cịn có tên khác là: Dây bò khai, rau hiến, khau hƣơng, phắc hiển (Tày), lòng châu sói (Dao); tên khoa học: Erythropalum scandens Blume thuộc họ Rau Bò Khai (Elythropalaceae) Là dây leo tua cuốn, có cành mềm thịng xuống, vỏ xanh Lá mọc so le, hình trứng rộng, đầu nhọn, gốc trịn hay hình tim, dài 10-15cm, rộng 57cm, có gân gốc, 3-5 đôi gân bên; mặt dƣới mốc mốc; cuống dài 5-10cm, phù hai đầu dính vào phía phiến lá, tua nách dài 1520cm thƣờng chẻ hai Cụm hoa xim hai ngả, có cuống chung dài 10-15cm Hoa nhỏ, đơn tính Quả mọng, hình trái xoan dài 10-15mm, màu vàng hay đỏ, chứa hạt lớn Phân bố Cây phổ biến tỉnh phía Bắc Việt Nam Cũng gặp tỉnh miền Trung Tây Nguyên duyên hải nam Trung bộ; tập trung nhiều khu Đông Bắc bao gồm tỉnh : Cao Bằng, Lạng Sơn, Hà Giang, Tuyên Quang, Phú Thọ, Bắc Kạn, Thái Nguyên, Bắc Giang Rau Bò Khai phân bố Nam Trung Quốc, Lào Campuchia Sinh thái Cây thƣờng mọc hoang ven rừng thứ sinh, rừng phục hồi rừng nghèo bị tác động mạnh kiểu rừng thƣờng xanh mƣa ẩm nhiệt đới; tập trung nhiều ven rừng mọc núi đá vơi Nơi có nhiều rau hƣơng có lẽ đảo Hịn Mê, tỉnh Thanh Hóa Do khơng bị tàn phá nên phát triển mạnh; nhiều có đƣờng kính thân 5-6cm, leo cao gỗ đến 10m hay Rau Bò Khai mọc nhanh, hầu nhƣ chồi, mọc quanh năm, trừ vài tháng mùa đông nhiệt độ thấp Hoa mọc chồi cũ thân già Tháng tƣ, bắt đầu mùa mƣa, cụm hoa xuất phía đầu cành với hoa nhỏ; tháng 7-9 mùa quả, nhƣng tồn đến tận mùa hoa năm sau Khi chín mọng, trơng giống xoan ta, nhƣng nhỏ màu vàng tƣơi hay đỏ Cây chồi mạnh Để có nhiều non, tháng 2-3 cần phát cành già Sau bị phát đốt, đến mùa mua, nhiều chồi lại nảy từ gốc thân cũ Gieo trồng Trƣớc đây, nhu cầu cịn ngƣời dân địa phƣơng chủ yếu thu hái từ rừng Khoảng 10 năm gần đây, có thị trƣờng, bƣớc đầu đƣợc gieo trồng Có thể trồng hạt đoạn cành bánh tẻ Nhiều gia đình đồng bào dân tộc Tày huyện Chợ Rã Ba Bể, tỉnh Bắc Kạn huyện Na Hang, tỉnh Tuyên Quang trồng rau Bị Khai Có gia đình trồng đƣợc 50-100 vƣờn rừng hay quanh nhà Vƣờn quốc gia Xuân Sơn, tỉnh Phú Thọ nhân đƣợc giống rau Bò Khai để cung cấp cho dân sống vùng đệm trồng loại rau Trung tâm Nghiên cứu Lâm đặc sản - Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam nghiên cứu thử nghiệm nhân giống rau Bị Khai bƣớc đầu thành cơng cách giâm hom Trƣớc hết chọn cành bánh tẻ, không non không già quá, cắt đoạn hom dài 5-7cm, thƣờng gồm đốt Do phần vỏ rau Bò Khai dễ tách khỏi phần lõi nên cắt hom phải dùng dao thật sắc hay kéo cắt cành, tránh làm dập nát vết cắt làm thay vòng lõi vụ thân Khi vận chuyển nên đƣa vào túi nhựa kín, giữ ẩm để đảm bảo tỷ lệ sống cao Hom đem nhúng đoạn cành muốn giâm vào dung dịch thuốc kích thích rễ 5-10 phút sau đem giâm luống đất khử trùng (độ sâu khoảng 1/3 chiều dài đoạn hom), giâm vào bầu có kích thƣớc 16 x 22cm Thành phần đất bầu 90% đất, 1% vi sinh, có phân chuồng ủ hoại tốt Sau 2-3 tuần rễ bắt đầu xuất Khoảng tháng sau, mang trồng Mùa trồng thích hợp vụ xuân, đầu mùa mƣa vụ thu: Nhiệt độ trung bình thích hợp để phát triển 25-300C, giai đoạn đầu cần nhiệt độ độ ẩm thấp Thu hái chế biến Rau Bị Khai thu hái gần quanh năm, trừ vài tháng mùa đông lạnh, non không mọc đƣợc; nhƣng mùa thu hái nhiều mùa mƣa từ tháng đến tháng 9-10 Khi chế biến để ăn, ngƣời ta thƣờng lấy non vò kỹ, rửa cho hết mùi khai luộc, nấu canh xào với thịt hay lòng gan gia súc, gia cầm Có lẽ non rau Bị Khai xào thịt bị ngon Ngồi giá trị làm thực phẩm, rau Bò Khai vị thuốc q, thƣờng đƣợc dùng để chữa bệnh thận, gan nƣớc tiểu vàng Đi xa mệt mỏi, nƣớc tiểu vàng đục, cần ăn rau hƣơng hai lần, nƣớc tiểu trở lại Ở Trung Quốc rau Bò Khai đƣợc sử dụng để chữa bệnh viêm thận, gan, viêm đƣờng tiết niệu, tiểu tiện không thông… với liều lƣợng hàng ngày 12-14g, sắc nƣớc uống Để làm thuốc dùng rau Bị Khai tƣơi phơi khô Muốn chữa phù thận, lợi tiểu, đái vàng, đái rắt dùng 20-40g tƣơi, rũ sạch, giã nát, thêm nƣớc gạn uống, dùng riêng phối hợp với bòng bong Theo kinh nghiệm dân gian đồng bào tỉnh Bắc Thái (cũ), tồn rau Bị Khai sắc lấy nƣớc uống chữa viêm gan siêu vi trùng đạt kết tốt Thân cành tƣơi bỏ lá, thái mỏng phơi khô, ngâm rƣợu uống chữa sốt, tê thấp Gía trị kinh tế, khoa học bảo tồn Rau Bò Khai loại rau cổ truyền đồng bào miền núi Mỗi năm gia đình bình quân thu hái 5-10kg rau Bò Khai để làm thức ăn Khoảng gần mƣời năm nay, rau Bò Khai đƣợc bán nhiều chợ thị xã Lạng Sơn Cao Bằng, trở thành ăn đặc sản đƣợc nhiều ngƣời ƣa thích Vì cần phát triển gieo trồng loại rau để cung cấp cho thị trƣờng nƣớc ngày mở rộng Rau Bò Khai xóa đói giảm nghèo Một số gia đình xã Khang Ninh, thuộc vùng đệm Vƣờn quốc gia Ba Bể trồng thử quanh hàng rào vƣờn gia đình nhƣng hàng năm bán đƣợc hàng trăm nghìn đồng Về mặt bảo tồn, rau Bò Khai thuộc họ thực vật đơn chi chi đơn lồi, việc phát triển lồi có nghĩa bảo tồn nguồn gen quí nƣớc ta Các nhà khoa học cần tạo nhiều giống rau Bị Khai có suất cao để giúp cho dân có nguồn giống trồng vƣờn rừng vƣờn nhà tạo thành nguồn hàng hóa bán thị trƣờng, góp phần xóa đói giảm nghèo cho đồng bào miền núi Hiện nay, Trung tâm Nghiên cứu Lâm đặc sản triển khai nhân giống rau Bò Khai để phát triển gieo trồng Hoành Bồ - Quảng Ninh, Vĩnh Phúc, Bắc Giang nhằm cung cấp loài rau đặc sản cho nhà hàng khách sạn địa phƣơng thủ đô Hà Nội 2.1 Lịch sử vấn đề nghiên cứu Nhân giống hom phƣơng pháp nhân giống có từ lâu đời ngày có hiệu kỹ thuật nhân giống nhiều lồi có khả nhân giống hom Nhƣ vào cuối kỷ 19, đầu kỷ 20 loài Cryptomeria Japonica đƣợc trồng phổ biến giâm hom Việc giâm hom tỏ có hiệu cho nghiên cứu để nhanh chóng đánh giá khả di truyền tính trạng mong muốn qua kiểm tra dịng vơ tính, để đánh giá kiểu gen mơi trƣờng, nhƣ để có tăng thu di truyền tối đa trồng trọt Giâm hom sử dụng trực tiếp ƣu lai F1 vào sản xuất, khắc phục tƣợng phân ly lai giống Nhân giống hom- phƣơng pháp truyền nguyên vẹn đặc tính di truyền đời trƣớc cho đời sau, phát huy hết khả chúng Khác với mọc từ hạt, hom có ƣu điểm giữ đƣợc đặc tính di truyền tốt mẹ, sớm hoa kết Vì phƣơng pháp nhân giống hom từ lâu đƣợc áp dụng rộng rãi nghề làm vƣờn nhƣ trồng ăn quả, rau mầu, trồng hoa cảnh mang lại hiệu kinh tế cao Ngoài ra, nhân giống hom thƣờng đƣợc áp dụng loài mà hạt giống (cây khó hoa kết quả) trồng hạt khó trồng hom [1] Cùng với thành tựu chọn giống, kỹ thuật nhân giống sinh dƣỡng ngày đƣợc ứng dụng rộng rãi Ngay với loài trồng hạt dễ dàng, nhƣng ngày để đƣa nhanh kết chọn giống vào sản xuất giữ đƣợc đặc tính chọn, ngƣời ta nhân giống sinh dƣỡng Nhân giống sinh dƣỡng hom có kỹ thuật đơn giản, chi phí thấp, dễ áp dụng, tạo số lƣợng lớn, chất lƣợng đồng 2.1.1 Trên giới Trong Lâm nghiệp, nhân giống sinh dƣỡng cho rừng đƣợc sử dụng 100 năm Ngay từ năm 1840, Merrier de Boisdyver (Pháp) ghép 10000 Thông Đen Năm 1883, Velinski A.H công bố cơng trình nhân giống số lồi kim rộng thƣờng xanh hom Ở Pháp năm 1969, trung tâm Lâm Nghiệp nhiệt đới bắt đầu chƣơng trình nhân giống cho lồi bạch Đàn, năm 1973 có 1ha rừng trồng hom đến năm 1986 có khoảng 24000 rừng trồng hom, rừng đạt tăng trƣởng bình quân 35m3/ha/năm [2] Năm 1974 Martin Quilet nghiên cứu nhân giống hom Bạch Đàn thấy xử lý thuốc IBA cho tỷ lệ rễ Bạch Đàn tăng lên 12%- 15% so với đối chứng, nhƣng lại gây tử vong nhiều cho Theo nghiên cứu Wong Haines năm 1991, nhân giống hom cho vƣờn ƣơm keo tai tƣợng thấy tỷ lệ rễ đạt 54% đối chứng 71-79% công thức xử lý IBA Trihoocmon Cho đến nay, Nhật Bản hàng năm sản xuất 49 triệu hom Liễu Sam (Cryptomeria) vào phục vụ trồng rừng chiếm 20% tổng diện tích 2.1.2 Ở Việt Nam 10 Phụ biểu 01: Số liệu thu thập ngoại nghiệp Kết xử lý số liệu ngoại nghiệp công thức xử lý IBA Số Hom rễ Hom không rễ Nồng độ hom N % N % NC 300ppm 90 39 43.33 51 56.67 500ppm 90 47 52.22 43 47.78 700ppm 90 59 65.56 31 34.44 CTTN Lần lặp Số rễ tb/hom Chiều dài rễ tb/hom Chỉ số rễ tb/hom 3 2.4 2.7 3.1 2.9 3.6 3.6 4.4 4.5 4.5 1.0 1.1 1.3 1.6 1.6 1.9 1.8 1.9 2.1 0.93 1.29 2.00 2.10 3.47 4.81 4.81 6.02 7.09 300ppm 500ppm 700ppm 2 Kết xử lý số liệu ngoại nghiệp công thức xử lý NAA (nền cát) Hom rễ Hom không rễ Số hom Nồng độ NC Số lƣợng Tỷ lệ % Số lƣợng Tỷ lệ % 300 90 37 41.11 53 58.89 500 90 45 50.00 45 50.00 700 90 51 56.67 39 43.33 Công thức đối chứng (nền cát) Lần lặp Số rễ tb/hom 2.0 2.0 2.2 Chiều dài rễ tb/hom 1.2 1.3 1.5 Chỉ số rễ tb/hom 0.4 0.5 0.7 Thể đất (IBA 700ppm) CTTN Lần lặp Số rễ tb/hom IBA 2.3 58 Chiều dài rễ tb/hom 0.8 Chỉ số rễ tb/hom 0.6 700ppm 2.5 2.7 59 1.1 1.3 1.0 1.4 Phụ biểu 02: Kiểm tra thống kê mô tả ảnh hƣởng nhân tố thí nghiệm đến tiêu giâm hom 2.1 Ảnh hƣởng nồng độ IBA đến kết giâm hom *) Tỷ lệ rễ hom Nồng độ Hom rễ Hom không rễ Tai 300ppm 500ppm 700ppm Tbj 39 47 59 145 51 43 31 125 90 90 90 270 Loại nồng độ Chỉ tiêu ft fl (ft-fl)^2/fl hom rễ hom không rễ hom rễ hom không rễ hom rễ hom không rễ 39 51 47 43 59 31 48.33 41.67 48.33 41.67 48.33 41.67 1.80 2.09 0.04 0.04 2.35 2.73 9.06 5.99 300ppm 500ppm 700ppm n1 m1 90 Xác định công thức tốt p1 n2 m2 p2 59 0.66 90 47 0.52 U05 1.83473 2.2 Ảnh hƣởng nồng độ NAA đến kết giâm hom *) Tỷ lệ rễ hom Nồng độ Hom rễ Hom không rễ Tai 300ppm 34 56 90 500ppm 45 45 90 700ppm 51 39 90 60 1.96 Tbj Nồng độ 300ppm 500ppm 700ppm 130 140 Chỉ tiêu hom rễ hom không rễ hom rễ hom không rễ hom rễ hom không rễ ft 270 fl 34 56 45 45 51 39 43.3 46.7 43.3 46.7 43.3 46.7 (ft-fl)^2/fl 2.01 1.87 0.06 0.06 1.36 1.26 6.62 5.99 Xác định công thức tốt n1 m1 90 p1 51 n2 m2 0.57 90 p2 45 0.5 U05 0.90 1.96 2.3.So sánh ảnh hƣởng nồng độ tốt chất điều hòa sinh trƣởng đến kết giâm hom *) Tỷ lệ rễ Nồng độ Hom rễ Hom không rễ Tai IBA 500ppm IBA 700ppm NAA 500ppm NAA 700ppm Tbj 47 59 45 51 202 43 31 45 39 158 90 90 90 90 360 CTTN IBA 500ppm IBA 700ppm NAA 500ppm NAA 700ppm Chỉ tiêu ft fl (ft-fl)^2/fl hom rễ 47 50.50 0.24 hom không rễ hom rễ hom không rễ hom rễ hom không rễ hom rễ hom không rễ 43 59 31 45 45 51 39 39.50 50.50 39.50 50.50 39.50 50.50 39.50 0.31 1.43 1.83 0.60 0.77 0.005 0.01 61 5.19 7.81 2.4 Ảnh hƣởng thể *) tỷ lệ rễ hom Xác định công thức tốt n1 m1 p1 n2 m2 p2 90 59 0.66 90 47 0.52 U 1.83 U05 1.96 Phụ biểu 03: Kiểm tra thống kê ảnh hƣởng nhân tố thí nghiệm tới tiêu giâm hom 3.1 Ảnh hƣởng IBA *) Số rễ/ hom Lần lặp 300ppm 500ppm 700ppm 2.4 2.9 4.4 2.7 3.6 4.5 3.1 3.6 4.5 Anova: Single Factor SUMMARY Groups 300ppm Count 500ppm 700ppm ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 4.496 0.595 5.091 Varianc Sum Average e 8.1804 2.7268 0.1081 10.070 3.3568 0.1876 13.315 4.4384 0.002 df MS 2.2481 0.0992 F 22.658 P-value 0.00159847 Xác định công thức tốt nhât tiêu chuẩn t Student t-Test: Two-Sample Assuming Unequal Variances IBA 500ppm 700ppm Mean 4.438359788 3.356793 Variance 0.002007013 0.187575 62 F crit 5.1432528 Observations Hypothesized Mean Difference df t Stat 4.302442386 P(T