Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học của một số dịch chiết từ lá chùm ruột

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA TRƯƠNG THỊ VƯƠNG MÃO NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ DỊCH CHIẾT TỪ LÁ CHÙM RUỘT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM Đà Nẵng, 04/2015 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ DỊCH CHIẾT TỪ LÁ CHÙM RUỘT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM Sinh viên thực : Trương Thị Vương Mão Lớp : 11SHH Giáo viên hướng dẫn : TS Trần Mạnh Lục Đà Nẵng, 04/2015 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐHSP Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên : Trương Thị Vương Mão Lớp : 11SHH Tên đề tài: “Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết từ chùm ruột” Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị: 2.1 Nguyên liệu Nguyên liệu nghiên cứu chùm ruột hái vào cuối tháng năm 2014 quận Liên Chiểu, TP Đà Nẵng 2.2 Hóa chất Hóa chất vơ cơ: dung dịch HNO3, dung dịch H2SO4 Hóa chất hữu cơ: n-hexane, chloroform, ethyl acetate, methanol 2.3 Dụng cụ thiết bị: - Bình tam giác, cốc thuỷ tinh, cốc sứ, bình định mức, ống đong, phễu lọc, pipet, nhiệt kế, bình hút ẩm, … - Tủ sấy, lò nung, bếp điện, bếp cách thủy, cân phân tích, chiết soxhlet, chưng ninh, máy đo quang phổ hấp thụ phân tử UV-Vis (phòng thí nghiệm khoa Hố, trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng), máy đo quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS 100 Perkin Elmer, máy đo sắc ký khí ghép khối phổ GC – MS (Trung tâm kỹ thuật đo lường chất lượng II, số 2, Ngô Quyền, Đà Nẵng) Nội dung nghiên cứu: - Khảo sát thành phần khối lượng bột chùm ruột: xác định độ ẩm, hàm lượng tro, hàm lượng kim loại - Bằng phương pháp GC-MS định danh thành phần hóa học dịch chiết soxhlet từ chùm ruột - Khảo sát thời gian, nhiệt độ, tỉ lệ rắn – lỏng, số lần chiết bột chùm ruột phương pháp chưng ninh Giáo viên hướng dẫn: TS Trần Mạnh Lục Ngày giao đề tài: 27/04/2014 Ngày hoàn thành: 25/04/2015 Chủ nhiệm Khoa Giáo viên hướng dẫn (Kí ghi rõ họ tên) (Kí ghi rõ họ tên) Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho khoa ngày … tháng … năm 2015 Kết điểm đánh giá:….…….… Ngày …… tháng …… năm 2015 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (Kí ghi rõ họ tên) LỜI CẢM ƠN Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy Trần Mạnh Lục – người thầy đầy tâm huyết trực tiếp truyền thụ cho em kiến thức quý báu từ ngày đầu làm quen với ngành học, hôm – em học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thầy! Em xin cảm ơn thầy Nguyễn Bốn (cán quản lý phòng thí nghiệm Hóa lý), Võ Thị Kiều Oanh (cán quản lý phịng thí nghiệm Phương pháp) thầy cô khác khoa tạo điều kiện thuận lợi cho em thời gian làm khóa luận Cuối cùng, em xin cảm ơn gia đình, bạn bè ủng hộ lớn mặt tinh thần cho em thời gian học tập giảng đường Đại học thời gian em làm khóa luận tốt nghiệp Đà Nẵng, ngày 25 tháng 04 năm 2015 Sinh viên Trương Thị Vương Mão MỤC LỤC TRANG BÌA PHỤ NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Đối tượng mục đích nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Bố cục tài liệu CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương chùm ruột 1.1.1 Tên gọi 1.1.2 Nguồn gốc phân bố 1.1.3 Điều kiện sinh trưởng, phát triển 1.1.4 Hoa hạt chùm ruột 1.1.5 Thân chùm ruột 1.1.6 Lá chùm ruột 10 1.1.7 Quả chùm ruột 11 1.1.8 Rễ chùm ruột 12 1.2 Phương pháp phân tích trọng lượng 13 1.3 Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS 14 1.4 Kỹ thuật chiết rắn – lỏng 15 1.4.1 Kỹ thuật chiết máy chiết soxhlet 15 1.4.2 Kỹ thuật chiết chưng ninh 17 1.5 Phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) 18 CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Nguyên liệu, hóa chất thiết bị nghiên cứu sơ đồ nghiên cứu 19 2.1.1 Nguyên liệu 19 2.1.2 Xử lí nguyên liệu 19 2.1.3 Hoá chất 19 2.1.4 Dụng cụ - Thiết bị 20 2.1.5 Sơ đồ nghiên cứu 20 2.2 Xác định số tiêu hóa lý 21 2.2.1 Xác định độ ẩm 21 2.2.2 Xác định hàm lượng tro 21 2.2.3 Xác định hàm lượng kim loại 22 2.3 Chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết khác từ chùm ruột 23 2.3.1 Với dung môi n-hexane 23 2.3.2 Với dung môi chloroform 23 2.3.3 Với dung môi ethyl acetate 23 2.3.4 Với dung môi methanol 23 2.4 Khảo sát điều kiện chiết bột chùm ruột phương pháp chưng ninh 24 2.4.1 Chọn dung mơi chiết thích hợp 24 2.4.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian đến trình chiết bột chùm ruột 25 2.4.3 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến trình chiết bột chùm ruột 25 2.4.4 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ rắn – lỏng đến trình chiết bột chùm ruột 25 2.4.5 Khảo sát ảnh hưởng số lần chiết đến trình chiết bột chùm ruột 25 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 26 3.1 Kết xác định số tiêu hóa lý 26 3.1.1 Độ ẩm 26 3.1.2 Hàm lượng tro 26 3.1.3 Hàm lượng kim loại 27 3.2 Kết xác định thành phần, cấu tạo số hợp chất dịch chiết khác từ chùm ruột 28 3.2.1 Dịch chiết dung môi n-hexane 28 3.2.2 Dịch chiết dung môi chloroform 30 3.2.3 Dịch chiết dung môi ethyl acetate 32 3.2.4 Dịch chiết dung môi methanol 33 3.3 Khảo sát điều kiện chiết bột chùm ruột phương pháp chưng ninh 43 3.3.1 Chọn dung mơi chiết thích hợp 43 3.3.2 Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian đến trình chiết bột chùm ruột 44 3.3.3 Kết khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến trình chiết bột chùm ruột 45 3.3.4 Kết khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ rắn – lỏng đến trình chiết bột chùm ruột 46 3.3.5 Kết khảo sát ảnh hưởng số lần chiết đến trình chiết bột chùm ruột 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS : Atomic Absorption Spectrophotometric GC : Gas Chromatography MS : Mass Spectrometry STT : Số thứ tự TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam UV/VIS : Ultraviolet-Visible Spectroscopy DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu Tên bảng bảng Trang 3.1 Kết xác định độ ẩm bột chùm ruột 26 3.2 Kết xác định hàm lượng tro chùm ruột 27 3.3 Hàm lượng kim loại chùm ruột 27 3.4 Thành phần hóa học dịch chiết n-hexane 28 chùm ruột 3.5 Thành phần hóa học dịch chiết chloroform 30 chùm ruột 3.6 Thành phần hóa học dịch chiết ethyl acetate 32 chùm ruột 3.7 Thành phần hóa học dịch chiết methanol 34 chùm ruột 3.8 Thành phần hóa học dịch chiết từ chùm ruột 35 3.9 Khối lượng cao dịch chiết n-hexane, chloroform, 43 ethyl acetate, methanol 3.10 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi ethyl 44 acetate 3.11 Kết khảo sát nhiệt độ chiết dung môi ethyl 45 acetate 3.12 Kết khảo sát tỉ lệ rắn – lỏng chiết dung môi ethyl 46 acetate 3.13 Kết chưng ninh bột chùm ruột dung mơi ethyl acetate điều kiện thích hợp 47 51 [12] Sousa, M.; Ousingsawat, J, Seitz R, Puntheeranurak S, Regalado A, Schmidt A, Grego T, Jansakul C et al (2006), An Extract from the Medicinal Plant Phyllanthus acidus and Its Isolated Compounds Induce Airway Chloride Secretion: A Potential Treatment for Cystic Fibrosis Molecular Pharmacology 71 (1): 366–76 [13] Venkata Raman, Samuel La, Pardha Saradhi, Narashimha Rao, Naga Vamsi Krishna, Sudhakar and Radhakrishnan, (2012), Antibacterial, antioxidant activity and GC-MS analysis of Eupatorium odoratum, Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, pp 6-7 Internet [14] http://duocthaothucdung.blogspot.com/2014/05/chum-ruot-otaheitegooseberry.html (04/01/2015) [15] http://en.wikipedia.org/wiki/Phyllanthus_acidus (17/01/2015) [16] http://vi.wikipedia.org/wiki/Axit_gallic (25/01/2015) [17] https://sites.google.com/site/raurungvietnam/rau-than-go-lon/cay-chumruot (03/02/2015) [18] http://www.benhvienlongxuyen.com/nuke/modules.php?name=News&op= viewst&sid=4932 (03/02/2015) [19] http://www.kilobooks.com/archive/index.php/t-103150.html (04/02/201) [20] http://123doc.vn/document/1214910-luan-van-tot-nghiep-nghien-cuuche-bien-nuoc-giai-khat-len-men-tu-trai-chum-ruot.htm?page=6 (19/03/2015) [21] http://en.wikipedia.org/wiki/Stigmasterol (02/04/2015) [22] http://en.wikipedia.org/wiki/Phytol (02/04/2015) [23] http://en.wikipedia.org/wiki/Squalene (02/04/2015) [24] http://en.wikipedia.org/wiki/Alpha-Linolenic_acid (07/04/2015) PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1.1 Sắc ký đồ xác định thành phần hóa học dịch chiết n-hexane 1.2 Sắc ký đồ xác định thành phần hóa học dịch chiết chloroform 1.3 Sắc ký đồ xác định thành phần hóa học dịch chiết ethyl acetate 1.4 Sắc ký đồ xác định thành phần hóa học dịch chiết methanol PHỤ LỤC 2.1 Phổ khối Pinane 2.2 Phổ khối Palmitic acid 2.3 Phổ khối Phytol 2.4 Phổ khối α-Linolenic acid 2.5 Phổ khối All-trans- Squalene 2.6 Phổ khối 9-Octylheptadecane 2.7 Phổ khối Vitamin E 2.8 Phổ khối 1,19-Eicosadiene 2.9 Phổ khối Stigmasterol 2.10 Phổ khối Octacosyl trifluoroacetate 2.11 Phổ khối γ-Sitosterol 2.12 Phổ khối 2,6,6-Trimethylbicyclo[3.1.1]heptane 2.13 Phổ khối Stearic acid 2.14 Phổ khối 1-Iodo-2-methylundecane 2.15 Phổ khối 1-Heptacosanol 2.16 Phổ khối 2-Hexadecyloxirane 2.17 Phổ khối Ergost-5-en-3β- ol 2.18 Phổ khối Methyl palmitate 2.19 Phổ khối Campesterol ... tro chùm ruột 27 3.3 Hàm lượng kim loại chùm ruột 27 3.4 Thành phần hóa học dịch chiết n-hexane 28 chùm ruột 3.5 Thành phần hóa học dịch chiết chloroform 30 chùm ruột 3.6 Thành phần hóa học dịch. ..ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ DỊCH CHIẾT TỪ LÁ CHÙM RUỘT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN... phần hóa học dịch chiết ethyl acetate 32 chùm ruột 3.7 Thành phần hóa học dịch chiết methanol 34 chùm ruột 3.8 Thành phần hóa học dịch chiết từ chùm ruột 35 3.9 Khối lượng cao dịch chiết n-hexane,