Trước tình hình dịch bệnh xảy ra trên diện rộng, kéo dài, Lãnh đạo Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn xác định việc tìm nguyên nhân gây bệnh và giải pháp phòng trị là nhiệm vụ cấp bách. Bộ đã giao nhiệm vụ nghiên cứu khẩn cấp xác định nguyên nhân, tác nhân gây bệnh hoại tử gan tụy cho các Viện Nghiên cứu nuôi trồng thuỷ sản I, II, III,
Hội chứng hoại tử gan tụy cấp tôm nuôi nước lợ: nguyên nhân giải pháp phòng ngừa Trước tình hình dịch bệnh xảy diện rộng, kéo dài, Lãnh đạo Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thơn xác định việc tìm ngun nhân gây bệnh giải pháp phòng trị nhiệm vụ cấp bách Bộ giao nhiệm vụ nghiên cứu khẩn cấp xác định nguyên nhân, tác nhân gây bệnh hoại tử gan tụy cho Viện Nghiên cứu nuôi trồng thuỷ sản I, II, III, Viện Môi trường nông nghiệp Cục Thú Y Tổng cục Thuỷ sản chủ trì Nghiên cứu có hợp tác Trường Đại học Cần Thơ, Viện Công nghệ sinh học, Viện Hải dương học chuyên gia bệnh môi trường thuỷ sản : Gs Donal Lightner (Đại học Arizona, Hoa Kỳ), Gs Tim Flegel (Đại Học Mahidol, Thái Lan), Gs Claude Boyd (Đại học Auburn, Hoa Kỳ) Báo cáo tổng hợp kết chủ yếu, nhóm nghiên cứu nước Hội chứng hoại tử gan tuỵ tôm nuôi nước lợ Hội chứng hoại tử gan tụy cấp tôm nước lợ 1 Hội chứng gan tụy cấp tính (tên tiếng Anh Acute Hepatopancreatic Necrosis Syndrome - AHPNS) hay gọi Hội chứng chết sớm (Early Mortality Syndrome - EMS) xuất lần Trung Quốc (2009), Việt Nam (2010), Malaysia (2010) Thái Lan (2012) gây thiệt hại nặng nề cho nghề nuôi tôm Tại Trung Quốc, hội chứng hoại tử gan tụy cấp tính xuất lần đầu năm 2009 khơng ý Đến năm 2011, dịch lan rộng tỉnh gồm Quảng Đông, Quảng Tây, Phúc Kiến Hải Nam (Leaño Mohan, 2012) Tại Malaysia AHPNS/EMS xuất lần đầu vào năm 2010 bang Pahang and Joho, sau lan bang Sabah Sarawak (Othman, 2012) Tại Thái Lan mẫu tôm chân trắng thu tỉnh Chantaburi Rayong vào cuối năm 2011 đầu năm 2012 cho thấy tơm có dấu hiệu giống Hội chứng AHPNS/EMS (Prachumwat ctv 2012) Ở nước ta, hội chứng hoại tử gan tụy cấp xuất vùng nuôi tôm đồng sông Cửu long từ năm 2010 Năm 2011, 2012 dịch bệnh tiếp tục xảy ra, tập trung Trà Vinh, Sóc trăng, Kiên Giang số tỉnh ven biển phía Bắc: Hải Phịng, Quảng Ninh, Bắc Trung bộ: Thanh Hóa, Nghệ An, Nam Trung bộ: Quảng Ngãi, Bình Định, Khánh Hịa, Ninh Thuận Bình Thuận Nghiên cứu Hội chứng hoại tử gan tụy tôm Để xác định nguyên nhân, tác nhân gây bệnh, nghiên cứu tập trung vào vấn đề sau : Xây dựng định nghĩa bệnh, đồ dịch tễ, vai trị yếu tố vơ sinh nhiệt độ, độ mặn, Amonia tổng số, H2S, NH3, NO2, thuốc bảo vệ thực vật, vai trò yếu tố hữu sinh tảo độc, vi khuẩn, vi-rút, ký sinh trùng bacteriophage chế phẩm sinh học liên quan, thức ăn dùng nuôi tôm đến hội chứng hoại tử gan tụy tôm Định nghĩa bệnh Hội chứng hoại tử gan tụy cấp tính gây chết tơm sú tôm thẻ chân trắng giai đoạn 15 - 40 ngày sau thả nuôi Tôm ngừng ăn, bơi chậm, vỏ mỏng, màu tôm nhợt nhạt Gan tụy có biểu sưng, nhũn, teo Dựa biến đổi cấu trúc mơ học, tiêu chí để xác định hội chứng hoại tử gan tụy cấp tính là: Thoái hoá cấp gan tụy Thiếu hoạt động phân bào đẳng nhiễm tế bào có nguồn gốc từ mô phôi (tế bào E, Embyonalzellen) 2 Rối loạn chức tế bào trung tâm tổ chức gan tuỵ: Tế bào tiết - B (Basenzellen), tế bào xơ - F (Fibrillenzellen), tế bào dự trữ - R (Restzellen) Các tế bào có nhân lớn bất thường bong tróc tế bào Giai đoạn cuối tế bào máu tập hợp khoảng ống gan nhiễm khuẩn Dịch tễ hội chứng hoại tử gan tụy tôm Năm 2012, hội chứng hoại tử gan tụy tôm nuôi xảy 19 tỉnh thành ven biển miền Bắc, miền Trung Nam Tổng diện tích bị bệnh theo báo cáo 46.093 Các tỉnh bị bệnh nặng Trà Vinh, Sóc Trăng, Bạc liêu, Cà Mau, Bến Tre Kiên Giang Diện tích ni tơm báo cáo bị hội chứng hoại tử gan tụy cấp chủ yếu vào dấu hiệu hình thái bệnh, thiếu phân tích mô bệnh học đặc trưng 3 để khẳng định, diện tích tơm ni nước ta bị hội chứng hoại tử gan tuỵ cấp thực tế (46.903 ha) số liệu báo cáo Hội chứng hoại tử gan tụy xảy tôm sú tôm thẻ chân trắng, chủ yếu vùng nuôi tôm thâm canh bán thâm canh, xảy hầu hết tháng năm Mức độ dịch bệnh trầm trọng từ tháng đến tháng 7, chiếm 75% tổng diện tích báo cáo bị bệnh năm Các vùng nuôi có độ mặn thấp tỷ lệ mắc bệnh so với vùng ni có độ mặn cao Các tháng nhiệt độ thấp, vào mùa mưa, tỷ lệ xuất bệnh thấp tháng mùa khô, nhiệt độ cao Hội chứng hoại tử gạn tụy tôm giống Phân tích 322 mẫu tơm giống, bao gồm: 203 mẫu tơm giống từ 53 trại sản xuất tôm giống tỉnh Phú n, Bình Định, Khánh Hịa Ninh Thuận, mẫu tôm giống trước thả nuôi tỉnh Phía Bắc 113 mẫu tơm giống khu vực đồng sông Cửu Long cho thấy, nhiều mẫu tôm giống nhiễm vi khuẩn 53,8% mẫu tôm giống thu trại giống khu vực miền Trung nhiễm vi khuẩn Vibrio, phổ biến loài V parahaemolyticus, V harveyi V vulnificus Đã phát mẫu tôm giống bị hoại tử gan tụy cấp với dấu hiệu mô học đặc trưng theo định nghĩa bệnh Số mẫu tơm khác khơng có dấu hiệu mơ bệnh học đặc trưng hội chứng hoại tử gan tụy cấp, khoảng 15% số mẫu tơm có dấu hiệu bất thường tổ chức gan tụy Số lượng hạt mỡ bình thường, tế bào gan có nhân phình to, nhân bị chia thành nhiều phần có hình dạng kích thước khác Thuốc bảo vệ thực vật, tảo độc hoại tử gan tụy tôm Thuốc bảo vệ thực vật phát thấy nước bùn đáy hầu hết ao nuôi tôm địa phương phía Bắc, miền Trung đồng sơng Cửu Long Đó Cypermethrin, Deltamethrin, Permethrin, Chlopyrifos, Fenitrothion, Hexaconazole Lượng thuốc bảo vệ thực vật tồn dư nước ao dao động từ 0,04 – 0,17 µg/L 0,12 – 9µg/kg bùn đáy ao, tương đương, chí cao nồng độ thuốc bảo vệ thực vật gây chết tôm giống điều kiện thực nghiệm Tồn dư thuốc bảo vệ thực vật phát ao tôm bị hội chứng hoại tử gan tụy ao tơm khơng có hội chứng hoại tử gan tụy Nghiên cứu thực nghiệm đánh giá ảnh hưởng Cypermethrin (0.01-0,5 ppb nước 50 – 400 ppb bùn) đến hoại tử gan tụy tôm giống Tuy gây tôm chết nồng độ thấp, khơng thấy tơm chết có dấu hiệu hoại tử gan tụy cấp đặc trưng Phân tích thành phần số lượng tảo độc ao nuôi tôm phát số loại tảo độc Microcystis, Oscillatoria, Prorocentrum minimum … Tuy 4 nhiên, không thấy khác biệt rõ rệt ao tôm bị bệnh ao tôm không bị bệnh thành phần số lượng tảo độc Thức ăn, chế phẩm sinh học hoại tử gan tụy tôm Phân tích số loại thức ăn ni tơm khơng thấy diện loại chất độc Hexaconazole, Abamectin, Emamectin Benzoate thức ăn Kiểm tra 25 loại chế phẩm sinh học dùng phổ biến nuôi tôm cho thấy, nhiều loại chế phẩm sinh học có chất lượng thấp, số chế phẩm chí khơng có dịng vi sinh hàm lượng vi sinh vật thấp nhiều so với chất lượng đăng ký cơng bố nhãn hàng hố Điều nguy hiểm đáng quan tâm số chế phẩm sinh học có nhiễm vi khuẩn thuộc giống Vibrio, có chế phẩm nhiễm vi khuẩn V parahaemolyticus tới 3x103 CFU/g Ký sinh trùng, vi-rút, vi khuẩn, bacteriophage hoại tử gan tụy tôm Nghiên cứu vai trò ký sinh trùng, vi-rút, vi khuẩn với hội chứng hoại tử gan tụy tôm nuôi thu mẫu tôm hoại tử gan tụy từ vùng nuôi tơm nước Kết phân tích cho thấy, không thấy ngoại ký sinh trùng tôm bệnh, vài mẫu tôm bệnh phát trùng tế bào Tuy nhiên, khơng thấy vai trị trùng tế bào đến hoại tử gan tụy tôm nuôi Các vi-rút biết WSSV, YHV, TSV, IHHNV thấy vài mẫu tôm hoại tử gan tụy, không thấy vai trị loại vi-rút nói với hội chứng hoại tử gan tụy tôm Phát nhiều vi khuẩn tôm bị hội chứng hoại tử gan tụy tất vùng nuôi tôm, vi khuẩn Vibrio chiếm thành phần chủ yếu phổ biến loài V parahaemolyticus, V harveyi, V vulnificus Nghiên cứu khả lây nhiễm hội chứng hoại tử gan tuỵ tôm, loạt thực nghiệm cảm nhiễm bệnh tiến hành Tôm giống khoẻ thí nghiệm lây nhiễm thơng qua ni chung với tơm bệnh, cho ăn thức ăn có trộn gan tuỵ thu từ tôm bệnh, ngâm tôm môi trường có gan tuỵ thu từ tơm bệnh, tiêm dịch chiết gan tuỵ tôm bệnh Các thực nghiệm tiến hành nồng độ gây nhiễm khác nhau, thời gian khác Kết cho thấy: Hiện tượng lây nhiễm xảy tơm thí nghiệm, nhiên mức độ lây nhiễm không cao, dường mức độ lây nhiễm phụ thuộc vào điều kiện môi trường Tôm bị hội chứng hoại tử gan tụy chuyển tới môi trường nước giảm tỷ lệ chết, có khả phục hồi 5 Để làm rõ vai trò vi khuẩn, virus gây lây nhiễm hội chứng hoại tử gan tuỵ tôm, thực nghiệm gây nhiễm, tiêm tôm khoẻ với dịch lọc thô gan tuỵ tôm bệnh (có virus loại vi khuẩn), dịch lọc qua lưới 0,45 μm cho phép virus vi khuẩn có kích thước nhỏ qua, dịch lọc qua lưới 0,20 μm có virus Hiện tượng tơm chết ghi nhận lô gây nhiễm dịch lọc thô, không ghi nhận tượng chết lô gây nhiễm dịch qua lọc 0,45 μm 0,2 μm Kết cho thấy virus tác nhân gây hội chứng hoại tử gan tuỵ tôm nuôi Kết số nghiên cứu cho biết phage chuyển vào vi khuẩn gen độc gây chết, phage beta chuyển vào vi khuẩn C diphtheriae tạo độc tố diphtheria, phage CTX với vi khuẩn V cholera tạo độc tố cholera phage VHS1 phage VHML với vi khuẩn V harveyi tạo độc tố gây chết tôm (Flegel 2012) Nghiên cứu sàng lọc phage từ chủng vi khuẩn phân lập từ tơm có hội chứng hoại tử gan tuỵ phát thấy bacteriophage,đó là: phage vi khuẩn V parahaemolyticus (thu từ Đồng sông Cửu Long từ Rayong-Thái Lan) phage vi khuẩn V fluvialis Đánh giá vai trị Bacteriophage, thí nghiệm tiêm tôm với vi khuẩn tiêm tôm với vi khuẩn có thêm phage Khơng thấy tơm chết, tỷ lệ chết thấp lơ thí nghiệm tiêm với vi khuẩn, thấy tơm chết 100% sau 24 lô tiêm hỗn hợp vi khuẩn với phage Kết luận đề xuất Kết luận Phát hội chứng hoại tử gan tuỵ đặc trưng giai đoạn tôm giống, tượng tôm giống nhiễm vi khuẩn Vibrio với tỷ lệ cao, số tôm giống có dấu hiệu bất thường gan tuỵ giải thích tơm chết sớm ao nuôi, xuất dịch bệnh hoại tử gan tuỵ giai đoạn đầu q trình ni tơm Nhiều chế phẩm sinh học dùng sản xuất giống, nuôi tôm, chất lượng không đảm bảo đăng ký, diện số loại chế phẩm sinh học số vi khuẩn thuộc giống Vibrio với mật độ cao đặc biệt nguy hiểm, không mang lại hiệu mong muốn sử dụng chế phẩm sinh học, chí cịn lan truyền, phát tán vi khuẩn có hại mơi trường nước ni tơm Sự khác biệt không rõ rệt yếu tố thuỷ lý, thuỷ hoá (nhiệt độ, độ mặn, Amonia tổng số, H2S, NH3, NO2), tảo độc loại thuốc bảo vệ thực vật 6 ao ni tơm có hội chứng hoại tử gan tuỵ ao nuôi tôm không bị bệnh, cộng với thực nghiệm dùng thuốc bảo vệ thực vật gây bệnh tơm khơng có kết cho thấy yếu tố môi trường, tảo độc thuốc bảo vệ thực vật tác nhân trực tiếp gây hoại tử gan tuỵ cấp tơm Diễn biến dịch bệnh có khuynh hướng mùa vụ, khác biệt tỷ lệ chết, khả phục hồi tôm bệnh kết khác thực nghiệm lây nhiễm điều kiện môi trường khác cho thấy yếu tố môi trường nhiệt độ, độ mặn, diện thuốc bảo vệ thực vật khơng đóng vai trị tác nhân trực tiếp, đóng vai trị quan trọng ảnh hưởng đến bùng phát mức độ trầm trọng dịch bệnh Kết thử nghiệm gây nhiễm nhân tạo hội chứng hoại tử gan tuỵ cho thấy vi sinh vật có vai trị tác nhân gây hội chứng hoại tử gan tuỵ tôm nuôi Mặc dù phát ký sinh trùng, vi khuẩn, virus, bacteriophage từ tôm bệnh, kết nghiên cứu-đặc biệt thí nghiệm cảm nhiễm bệnh cho thấy ký sinh trùng, virus không tác nhân gây hội chứng hoại tử gan tuỵ tôm nuôi Sự diện vi khuẩn - đặc biệt số loài thuộc giống Vibrio V parahaemolyticus, V harveyi…chiếm thành phần chủ yếu hầu hết mẫu tôm giống, tơm ni thương phẩm có hội chứng hoại tử gan tuỵ, với việc cảm nhiễm nhân tạo có kết dùng Vibrio nguồn gây nhiễm cho thấy Vibrio tác nhân mang đến hội chứng hoại tử gan tuỵ tôm nuôi Thực nghiệm dùng Vibrio làm nguồn gây nhiễm không mang lại kết quả, với phát phage Vibrio thực nghiệm lây nhiễm kết hợp Vibrio bổ sung phage có kết cho thấy Vibrio với phage tác nhân trực tiếp gây hoại tử gan tuỵ tôm nuôi Từ tổng hợp phân tích nói bước đầu đề xuất ngun nhân gây tôm chết sớm, xuất hội chứng hoại tử gan tuỵ tôm nuôi : Tôm giống với chất lượng xấu (nhiễm Vibrio, có dấu hiệu bất thường gan tuỵ, chí hoại tử gan tuỵ cấp), thả nuôi điều kiện môi trường bất lợi (hiện diện thuốc bảo vệ thực vật, oxy hoà tan thấp, độ mặn cao, ô nhiễm hữu cơ…), diện vi khuẩn Vibrio phage dẫn đến gây chết sớm hội chứng hoại tử gan tuỵ tơm ni Để có kết luận chắn ngun nhân gây hoại tử gan tuỵ cấp tôm nuôi, nghiên cứu cần tiếp tục, tập trung vào vai trò Vibrio phage, đặc biệt ảnh hưởng vi sinh vật đến hội chứng hoại tử gan tuỵ tôm điều kiện môi trường nuôi tôm khác Các thực nghiệm dùng loài vi khuẩn Vibrio (V parahaemolyticus V fluvialis) Vibrio nhiễm phage gây nhiễm 7 bệnh tôm nuôi điều kiện môi trường ao nuôi tôm khác (độ mặn, diện thuốc bảo vệ thực vật…) cần thiết Đề xuất giải pháp phòng ngừa hội chứng hoại tử gan tuỵ Tổng kiểm tra chất lượng loại chế phẩm sinh học dùng sản xuất tôm giống, nuôi tôm lưu hành thị trường, nghiêm cấm sản xuất kinh doanh loại chế phẩm không đảm bảo chất lượng, thông tin rộng rãi chất lượng chế phẩm đến cộng đồng sản xuất giống ni tơm Kiểm sốt chặt chẽ chất lượng tơm giống, ngồi tác nhân gây bệnh như: đốm trắng, đầu vàng, MBV…, cần thiết đưa Vibrio đối tượng kiểm sốt chất lượng tơm giống Để triển khai cần nhanh chóng tập huấn phương pháp kiểm tra Vibrio cho cán quản lý chất lượng giống địa phương Rà soát điều kiện sản xuất trại tôm giống từ chất lượng tôm bố mẹ, nguồn nước, sử dụng chế phẩm, chất tẩy trùng, quy trình quản lý trại giống…áp dụng quy trình sản xuất đảm bảo tơm giống có chất lượng tốt, khơng nhiễm virus vi khuẩn Vibrio Tẩy dọn ao nuôi triệt để, cần có ao lắng, xử lý nước riêng biệt, không sử dụng thuốc bảo vệ thực vật diệt giáp xác, ln đảm bảo oxy hồ tan tầng nước ao cao, trì độ mặn nhiệt độ nước không cao, định kỳ diệt khuẩn ao ni Mùa vụ ni tơm tránh tháng có nhiệt độ cao (tháng 4-7), không thả nuôi mật độ cao, mật độ thả tôm sú 10-15 con/m2, tôm thẻ 40-60 con/m2 Sử dụng chế phẩm sinh học có chất lượng Sử dụng thức ăn thích hợp, khơng để dư thừa thức ăn ao ni tơm Khuyến khích mơ hình ni tơm có thả rơ phi đơn tính để làm môi trường Các ao bị bệnh phải tẩy trùng triệt để, khoanh vùng, cách ly, không xả nước thải, tơm chết bừa bãi ngồi mơi trường Vụ NTTS 8 ... trùng, vi-rút, vi khuẩn, bacteriophage hoại tử gan tụy tơm Nghiên cứu vai trị ký sinh trùng, vi-rút, vi khuẩn với hội chứng hoại tử gan tụy tôm nuôi thu mẫu tôm hoại tử gan tụy từ vùng nuôi tôm nước. .. ao tôm bị hội chứng hoại tử gan tụy ao tơm khơng có hội chứng hoại tử gan tụy Nghiên cứu thực nghiệm đánh giá ảnh hưởng Cypermethrin (0.0 1-0 ,5 ppb nước 50 – 400 ppb bùn) đến hoại tử gan tụy tôm. .. vi-rút, ký sinh trùng bacteriophage chế phẩm sinh học liên quan, thức ăn dùng nuôi tôm đến hội chứng hoại tử gan tụy tôm Định nghĩa bệnh Hội chứng hoại tử gan tụy cấp tính gây chết tơm sú tôm