KHẢO sát NGUỒN GEN DUY TRÌ và PHỤC hồi hữu dục một số DẠNG CMS NGÔ BẰNG CHỈ THỊ PHÂN tử DNA

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN XUÂN CAO KHẢO SÁT NGUỒN GEN DUY TRÌ VÀ PHỤC HỒI HỮU DỤC MỘT SỐ DẠNG CMS NGÔ BẰNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ DNA LUẬN VĂN THẠC SĨ HÀ NỘI, NĂM 2014 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN XUÂN CAO KHẢO SÁT NGUỒN GEN DUY TRÌ VÀ PHỤC HỒI HỮU DỤC MỘT SỐ DẠNG CMS NGÔ BẰNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ DNA Chuyên ngành : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Mã số : 60.42.02.01 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS PHAN HỮU TÔN HÀ NỘI, NĂM 2014 LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ học vị Tơi xin cam đoan, giúp ñỡ cho việc thực luận văn cám ơn thơng tin trích dẫn ñều ñã ñược rõ nguồn gốc Tác giả luận văn Nguyễn Xuân Cao Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới: PGS.TS Phan Hữu Tôn, Trưởng môn Sinh học phân tử Công nghệ sinh học Ứng dụng, khoa CNSH, người thầy tận tình giúp đỡ, hướng dẫn, tạo điều kiện tốt cho tơi suốt thời gian thực đề tài q trình hồn chỉnh luận văn Tập thể thầy cô giáo khoa Cơng nghệ sinh học, đặc biệt thầy giáo thuộc môn Sinh học phân tử Công nghệ sinh học Ứng dụng nhiệt tình giúp đỡ tơi suốt q trình thực luận văn Cuối cùng, xin cảm ơn người thân gia ñình, bạn bè ñồng nghiệp ñã giúp ñỡ, ñộng viên suốt thời gian làm luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 12 tháng 06 năm 2014 Tác giả luận văn Nguyễn Xuân Cao Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii MỤC LỤC LỜI CAM ðOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT viii MỞ ðẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục đích u cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn ñề tài 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung ngô 2.2 Tình hình nghiên cứu sử dụng ngơ lai giới Việt Nam 2.2.1 Tình hình sản xuất ngơ lai giới 2.2.2 Tình hình sản xuất ngô Việt Nam 2.3 Hiện tượng ưu lai 2.3.1 Khái niệm 2.3.2 Cơ sở khoa học ưu lai 2.4 Hệ thống ngơ lai ba dịng 10 2.4.1 Cơ chế bất dục ñực tế bào chất 10 2.4.2 Tầm quan trọng bất dục ñực tế bào chất 13 2.5 Hệ thống ngơ lai ba dịng sử dụng bất đực tế bào chất 14 2.5.1 Khái niệm hệ thống ngô lai ba dịng 14 2.5.2 Dịng bất dục đực tế bào chất (CMS) 14 2.5.3 Dịng trì bất dục 17 2.5.4 Dịng phục hồi hữu dục 18 Học viện Nơng nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 2.6 Tình hình nghiên cứu sử dụng giống ngô lai sử dụng bất dục ñực tế bào chất giới Việt Nam 2.7 20 Tình hình nguyên cứu, ứng dụng ưu ñiểm thị phân tử chọn giống ngơ lai 2.7.1 21 Tình hình nghiên cứu ứng dụng thị phân tử chọn tạo giống ngô lai ba dịng có sử dụng bất dục tế bào chất 21 2.7.2 Ưu ñiểm việc sử dụng thị phân tử 22 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 3.1 Vật liệu nghiên cứu, thời gian ñịa ñiểm nghiên cứu 24 3.1.1 Vật liệu nghiên cứu 24 3.1.2 Thời gian nghiên cứu: Tháng 8/2013 ñến tháng 5/2014 24 3.1.3 ðịa ñiểm nghiên cứu 24 3.2 Nội dung nghiên cứu 25 3.3 Phương pháp nghiên cứu 25 3.3.1 Bố trí thí nghiệm 25 3.3.2 Theo dõi số tiêu nơng sinh học dịng CMS, dịng ngơ tự phối F1 chúng 26 3.3.3 Lai cưỡng dòng CMS với dịng ngơ tự phối 27 3.3.4 ðánh giá khả bất dục, hữu dục tổ hợp lai F1 27 3.3.5 Xác định khả chứa gen trì phục hồi hữu dục cho dạng CMS dịng ngơ tự phối thị phân tử DNA 28 3.3.6 Phương pháp ñiện di phát sản phẩm PCR 32 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 4.1 Kiểm tra dạng CMS thị phân tử DNA 33 4.2 Lai thử tạo vật liệu khởi ñầu 34 4.3 Xác định dịng trì phục hồi hữu dục qua ñánh giá khả bất dục, hữu dục tổ hợp lai F1 35 4.3.1 ðánh giá khả bất dục, hữu dục hạt phấn cách nhuộm I-KI 1% 35 4.3.2 Xác định dịng trì phục hồi hữu dục phương pháp quan sát nảy mầm hạt phấn môi trường thạch Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 38 Page iv 4.4 Một số đặc điểm nơng sinh học, suất yếu tố cấu thành suất dòng CMS, trì, phục hồi tổ hợp lai F1 hữu dục 4.4.1 42 Một số đặc điểm nơng sinh học, suất yếu tố cấu thành suất dịng CMS 4.4.2 42 Một số đặc điểm nơng sinh học, suất yếu tố cấu thành suất dịng trì 4.4.3 44 Một số đặc điểm nông sinh học, suất yếu tố cấu thành suất dòng phục hồi 4.4.4 47 Một số ñặc ñiểm nông sinh học, suất yếu tố cấu thành suất tổ hợp lai F1 hữu dục 51 4.5 Kết tiến hành phản ứng PCR 54 4.5.1 Kiểm tra ñộ nguyên vẹn tinh DNA tổng số 54 4.5.2 Kết xác ñịnh gen rf3 trì cho dạng CMS-S cặp mồi CAPSE3P1 sử dụng ezyme cắt giới hạn MseI 55 4.5.3 Kết xác định gen rf4 trì cho dạng CMS-C cặp mồi b0329-13.1 55 4.5.4 Tiến hành phản ứng PCR cặp mồi 76755P2 phát gen Rf3 phục hồi hữu dục cho dạng CMS-S 4.5.5 56 Tiến hành phản ứng PCR mồi b0440-16.2 nhằm phát gen Rf4 phục hồi hữu dục hạt phấn cho dạng CMS-C 57 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 62 5.1 Kết luận 62 5.2 ðề nghị 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO 64 PHỤ LỤC 67 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Diện tích, suất, sản lượng ngơ giới giai đoạn 2004-2008 Bảng 2.2 Diện tích, suất sản lượng ngô số nước giới giai đoạn 2006-2009 Bảng 2.3 Tình hình sản xuất ngơ Việt Nam giai đoạn 2000-2013 dự đốn 2014 Bảng 2.4 Sự tương tác tế bào chất nhân 12 Bảng 4.1 Các tổ hợp F1 bất dục hạt phấn nhuộm I-KI 1% 36 Bảng 4.2 Các tổ hợp F1 hữu dục hạt phấn nhuộm I-KI 1% 37 Bảng 4.3 Kết nảy mầm hạt phấn tổ hợp F1 bất dục hạt phấn nuôi cấy môi trường thạch Bảng 4.4 40 Kết nảy mầm hạt phấn tổ hợp F1 hữu dục hạt phấn nuôi cấy môi trường thạch 41 Bảng 4.5 Một số đặc điểm nơng sinh học dòng CMS 43 Bảng 4.6 Năng suất yếu tố cấu thành suất dòng CMS 44 Bảng 4.7 Một số đặc điểm nơng sinh học dịng trì 45 Bảng 4.8 Năng suất yếu tố cấu thành suất dịng trì 46 Bảng 4.9 Một số đặc điểm nơng sinh học dịng phục hồi 48 Bảng 4.10 Năng suất yếu tố cấu thành suất dịng phục hồi 50 Bảng 4.11 Một số đặc ñiểm nông sinh học tổ hợp F1 hữu dục 51 Bảng 4.12 Năng suất yếu tố cấu thành suất tổ hợp lai F1 53 Bảng 4.13 Kết phát gen trì rf3, rf4 gen phục hồi Rf3, Rf4 PCR 59 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH MỤC HÌNH Hình 4.1 Kích thước đoạn băng DNA nhân mồi phát dạng CMS 33 Hình 4.2 Soi hạt phấn kính hiển vi nhuộm với I-KI 1% 35 Hình 4.3 Sự phát triển hạt phấn ni cấy mơi trường thạch 39 Hình 4.4 Dạng bắp dịng CMS 43 Hình 4.5 Kết ñiện di kiểm tra ñộ nguyên vẹn tinh số mẫu DNA Hình 4.6 54 Ảnh ñiện ñi sản phẩm PCR sử dụng cặp mồi CAPSE3P1 sau cắt enzyme MseI Hình 4.7 55 Ảnh ñiện ñi sản phẩm PCR phát gen rf4 sử dụng cặp mồi 56 b0329-13.1 Hình 4.8 Hình 4.9 Ảnh ñiện di sản phẩm PCR sử dụng cặp mồi 76755p2 phát gen Rf3 (M: 1kb) 56 Ảnh ñiện ñi sản phẩm cắt với enzyme MseI phát gen Rf3 57 Hình 4.10 Ảnh điện di sản phẩm PCR sử dụng cặp mồi b0440-16.2 phát gen Rf4 phục hồi cho dạng CMS-C Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 58 Page vii Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT CMS Cytoplasmic Male Sterility CMS- C Cytoplasmic Male Sterility Charrua CMS-S Cytoplasmic Male Sterility Texas CMS- N Cytoplasmic Male Sterility Normal CS Cộng DNA Deoxyribonucleic acid dNTP Deoxyribonucleotit triphotphat EDTA Ethylene Diamin Tetraaxetic acid Kb Kilobase M Marker PCR Polymerase Chain Reaction (Phản ứng chuỗi Polymerase) TE Tris – EDTA Tris Trioxymetylaminometan TAE Tris Hcl – Acetate – EDTA Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page viii Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 15 121 CML 121 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 122 CML 122 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 123 CML 123 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 124 CML 124 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 125 CML 125 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 126 CML 126 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 131 CML131 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 22 132 CML 132 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 23 138 CML 138 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 24 139 CML 139 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 25 153 CML153 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 26 160 CML 160 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 27 161 CML 161 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 28 163 CML 163 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 29 165 CML 165 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 30 167 CML 167 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 16 17 18 19 20 21 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 68 31 168 CML 168 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 32 183 CML 183 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 33 184 CML 184 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 34 185 CML 185 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 35 190 CML 190 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 36 202 CML 202 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 37 203 CML 203 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 38 210 CML 210 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 39 211 CML 211 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 40 212 CML 212 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 41 213 CML 213 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 216 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 217 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 219 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 220 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 221 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 42 43 44 45 46 216 217 219 220 221 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 69 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 222 231 236 239 240 241 242 245 247 250 251 252 253 254 273 274 CML 222 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 231 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 236 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 239 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 240 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 241 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 242 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 245 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 247 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 250 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 251 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 252 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 253 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 254 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 273 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 274 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 70 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 275 276 285 294 295 296 312 330 CML 275 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 276 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 285 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 294 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 295 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 296 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 312 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng CML 330 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 334 CML334 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 335 CML 335 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 336 CML 336 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 340 CML 340 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 366 CML 366 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 450 CML 450 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 454 CML 454 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 478 CML 478 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 71 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 79 80 81 82 488 CML 488 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 518 CML 518 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 520 CML 520 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng 535 CML 535 Trung tâm bảo tồn phát triển nguồn gen trồng Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 72 Bảng Danh sách tổ hợp lai F1 tỷ lệ hạt phấn hữu dục, bất dục F1 STT Tỉ lệ bất dục Dòng bố Số hạt hữu dục Số hạt bất duc 1 13 115 89,8 49 116 96,7 90 15 115 88,4 121 15 122 89,0 161 120 93,0 163 114 95,8 216 16 105 86,7 245 14 112 88,9 294 19 122 86,5 10 334 17 123 87,8 11 335 16 122 88,4 450 14 119 89,5 13 478 18 124 87,3 14 488 13 114 89,7 15 518 10 116 92,0 16 520 20 114 85,0 17 535 13 103 88,8 18 153 20 72 78,3 19 273 25 81 76,4 20 211 27 59 68,6 21 185 29 84 74,3 22 160 31 76 71,0 23 295 33 83 71,6 12 Dòng mẹ Soi hạt phấn C437JA Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp (%) Page 73 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 24 242 23 72 79,6 25 241 25 81 70,2 Dòng bố Số hạt hữu duc Số hạt bất dục 26 114 14 89,0 27 127 15 89,4 28 25 136 93,8 29 32 106 15 87,6 30 41 134 16 89,3 31 43 142 94,7 32 126 130 14 90,3 33 203 105 13 89,0 34 219 119 15 88,8 35 222 165 13 92,7 36 240 134 94,4 37 247 102 91,9 38 312 153 16 90,5 39 336 124 14 89,8 40 340 142 20 87,6 41 285 124 40 75,6 330 123 42 74,5 251 122 38 76,2 276 136 36 79,0 Dòng bố Số hạt hữu dục Số hạt bất duc 33 109 96,5 122 115 95,8 42 43 C437JA 44 45 46 C836A Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Tỷ lệ hữu dục (%) Tỉ lệ bất dục (%) Page 74 47 125 15 121 89,0 48 132 17 126 88,1 49 139 11 109 90,8 50 168 110 94,8 51 183 116 92,8 52 231 34 107 75,9 53 239 32 104 76,5 Dòng bố Số hạt bất duc Số hạt hữu dục 54 14 142 14 91,0 55 28 136 19 87,7 56 108 152 15 91,0 57 202 134 18 88,2 58 274 129 13 90,9 59 366 131 15 89,7 60 454 128 10 92,8 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Tỷ lệ hữu dục (%) Page 75 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi Bảng Các tiêu đánh giá đặc điểm nơng sinh học ñược tiến hành theo quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia QCVN 01-56: 2001/BNNPTNT Chỉ tiêu phương pháp ñánh giá TT Giai ñoạn Mức ñộ biểu ðiểm Ngày gieo Ngày mọc Ngày có 50% số có bao mầm lên khỏi mặt đất (mũi chơng) Ngày tung phấn Ngày có ≥ 50% số có hoa nở 1/3 trục Ngày phun râu Ngày có ≥ 50% số có râu nhú dài từ 2-3cm Ngày chín (ngày) Ngày có ≥ 75% có bi khơ chân hạt có chấm ñen Chiều cao (cm) ðo từ gốc sát mặt đất đến đỉnh bơng cờ 30 mẫu vào giai đoạn chín sữa Chiều cao đóng bắp (cm) ðo từ gốc sát mặt ñất ñến mắt ñóng bắp (bắp thứ nhất) 30 mẫu vào giai đoạn chín sữa Trạng thái Tốt ðánh giá sinh trưởng, mức ñộ ñồng chiều cao cây, chiều cao đóng bắp, kích thước bắp, sâu bệnh, ô vào giai đoạn chín sáp Khá Trung bình Kém Rất Số bắp/cây Tổng số bắp/tổng số ô ðếm số bắp số ô lúc thu hoạch Chiều dài bắp (không kể bi) ðo từ ñáy bắp ñến mút bắp 10 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 76 (cm) 30 mẫu lúc thu hoạch Chỉ ño bắp thứ mẫu 11 ðường kính bắp (khơng kể bi) (cm) ðo bắp 30 mẫu lúc thu hoạch Chỉ ño bắp thứ mẫu 12 Số hàng hạt/bắp ðếm số hàng hạt bắp 30 mẫu lúc thu hoạch Chỉ ñếm bắp thứ mẫu 13 Số hạt/hàng ðếm số hạt hàng có chiều dài trung bình bắp 30 mẫu lúc thu hoạch Chỉ ñếm bắp thứ mẫu 14 Dạng hạt, màu sắc hạt Quan sát 30 mẫu lúc thu hoạch 15 Khối lượng 1000 hạt (g) Cân mẫu, mẫu 100 hạt ñộ ẩm 14%, lấy chữ số sau dấu phẩy 16 Năng suất hạt (tạ/ha) - Thu ñánh dấu bắp thứ ñể tiện cho việc theo dõi tiêu 11, 12, 13, 14, 15 16 Cân khối lượng bắp tươi 10 mẫu - Thu cân toàn số bắp lại hàng (hàng thứ hàng thứ 3) ô, sau cộng thêm khối lượng bắp tươi 10 mẫu để có khối lượng bắp tươi/ơ Tiếp theo + Tính suất theo phương pháp chung Học viện Nơng nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 77 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi - Gộp chung cân khối lượng bắp tươi lần nhắc (30 cây) vào túi, tách hạt phơi khô tiếp ñến ñộ ẩm khoảng 14% Cân khối lượng hạt khô 30 mẫu tính suất hạt khơ theo công thức: P1 P2 NS (tạ/ha)= x 103m2 S0 x P3 P1: Khối lượng bắp tươi hàng thứ hàng thứ ô (cân lúc thu hoạch) S0: Diện tích hàng ngơ thứ hàng thứ thu hoạch (7m2) P2: Khối lượng hạt khô 30 mẫu ñộ ẩm khoảng 14% P3: Khối lượng bắp tươi 30 mẫu ñã cân lúc thu hoạch + Tính suất theo phương pháp tính nhanh (tạ/ha) P1 P2 (100-A0) NS(tạ/ha)= -x x x P1: Khối lượng bắp tươi hàng thứ hàng thứ ô (cân lúc thu hoạch) A0: ẩm ñộ hạt cân khối lượng hạt mẫu Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 78 S0: Diên tích hàng ngơ thứ hàng thứ thu hoạch (7m2) P2: Khối lượng hạt mẫu (cân lúc ño ñộ ẩm hạt "A0") P3: Khối lượng bắp tươi mẫu (cân lúc thu hoạch) (100 – A0) = Hệ số qui ñổi NS ñộ (100 - 14) 14% Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp ẩm hạt Page 79 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi MỘT SỐ HÌNH ẢNH NHUỘM HẠT PHẤN VỚI I-KI 1% VÀ NUÔI CẤY TRÊN MÔI TRƯỜNG THẠCH C437JA x 245 C437JA x 294 C437JA x 334 C437JA x 478 C437JA x C437JA x 43 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 80 C437JA x 125 C437JA x 222 C437JA x 336 C437JA x 312 Một số hình ảnh nhuộm hạt phấn với I-KI 1% số tổ hợp F1 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 81 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi Ảnh nuôi cấy hạt phấn tổ hợp C437JA x 247 sau 24h nuôi cấy môi trường thạch Ảnh quan sát phát triển ống phấn tổ hợp C437JA x 312 môi trường thạch Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 82 ... phi phi BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN XUÂN CAO KHẢO SÁT NGUỒN GEN DUY TRÌ VÀ PHỤC HỒI HỮU DỤC MỘT SỐ DẠNG CMS NGÔ BẰNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ DNA Chuyên ngành... bất dục đực có gen trì phục hồi tương ứng Hiện nay, người ta ñã phát ñược gen phục hồi khác cho dạng CMS Trong gen Rf1, Rf2, Rf8, Rf* phục hồi cho dạng CMS- T; gen Rf3, Rf9 phục hồi cho dạng CMS- S... đích Tìm số dịng ngơ tự phối có chứa gen trì bất dục, gen phục hồi hữu dục cho số dạng CMS ðánh giá sổ tổ hợp lai F1 hữu dục dòng phục hồi số dòng CMS 1.2.2 Yêu cầu - Tiến hành lai dịng bất dục đực