Nghiên cứu sự sinh trưởng của hệ sợi nấm linh chi ganoderma lucidum trên môi trường nuôi cấy dịch thể

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƯỜNG PHẠM HUỲNH HƯƠNG NGHIÊN CỨU SỰ SINH TRƯỞNG CỦA HỆ SỢI NẤM LINH CHI GANODERMA LUCIDUM TRÊN MƠI TRƯỜNG NI CẤY DỊCH THỂ KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Đà Nẵng – Năm 2016 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƯỜNG PHẠM HUỲNH HƯƠNG NGHIÊN CỨU SỰ SINH TRƯỞNG CỦA HỆ SỢI NẤM LINH CHI GANODERMA LUCIDUM TRÊN MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY DỊCH THỂ Ngành: Công nghệ sinh học GVHD Th.S Nguyễn Thị Bích Hằng Đà Nẵng – Năm 2016 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu khóa luận trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Đà Nẵng, ngày 10 tháng năm 2016 Phạm Huỳnh Hương LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp nhận nhiều giúp đỡ cá nhân tập thể Trước hết xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới Th.S Nguyễn Thị Bích Hằng tạo điều kiện tốt cho tơi thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn BCN khoa thầy cô giáo khoa Sinh – Môi trường trường Đại học Sư Phạm Đại học Đà Nẵng giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu để hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn bạn lớp 12CNSH động viên giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài Và cuối xin cảm ơn Ba, Mẹ gia đình lo lắng, chăm sóc tạo điều kiện suốt thời gian học tập hồn thành khóa luận tốt nghiệp Đà Nẵng, ngày 10 tháng năm 2016 Sinh viên thực tập Phạm Huỳnh Hương MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài 3.Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học 3.2 Ý nghĩa thực tiến CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Nấm linh chi 1.1.1 Phân loại 1.1.2 Giới thiệu nấm linh chi 1.1.3 Đặc điểm hình thái – cấu trúc – sinh thái 1.1.4 Điều kiện sinh trưởng phát triển nấm Linh chi 1.1.5 Tác dụng trị liệu nấm linh chi 1.1.6 Hoạt chất sinh học nấm linh chi 10 1.2 Quy trình nhân giống ni trồng nấm linh chi 15 1.3 Tình hình nghiên cứu nước ngồi nước 18 1.3.1 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 18 1.3.2 Tình hình nghiên cứu nước 20 CHƯƠNG 2.ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Đối tượng nghiên cứu 22 2.2 Nội dung nghiên cứu 22 2.3 Phương pháp nghiên cứu 22 2.3.1 Quan sát hình thái giải phẫu thể nấm linh chi 22 2.3.2 Khảo sát ảnh hưởng môi trường đến trình nhân giống cấp 23 2.3.3 Khảo sát sinh trưởng sợi nấm linh chi môi trường lỏng 25 2.3.4 Phương pháp xác định sinh khối tươi khô 26 2.3.5 Xác định dược chất có nấm linh chi 26 2.3.6 Kiểm tra khả thủy phân CMC nấm linh chi 28 2.3.7 Xác định khả kháng khuẩn nấm linh chi 28 2.3.8 Xác định khả kháng oxi hóa nấm linh chi 28 2.3.9 Xử lý số liệu 29 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 30 3.1 Quan sát hình thái giải phẫu thể linh chi thu hái khoa SMT 30 3.2 Khảo sát ảnh hưởng mơi trường đến q trình nhân giống cấp I 31 3.3 Khảo sát sinh trưởng sợi nấm linh chi môi trường dịch thể 34 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng môi trưởng dinh dưỡng đến sinh trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể 34 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng pH đến sinh khối hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể 36 3.3.3 Đường cong sinh trưởng hệ sợi nấm môi trường dịch thể 38 3.4 Xác định dược chất có linh chi 40 3.4.1 Đinh tính alkaloid 40 3.4.2 Định tính hợp chấp saponin 41 3.4.3 Đinh tính acid hữu 43 3.4.4 Khả kháng khuẩn linh chi 44 3.4.5 Khả kháng oxy hóa linh chi 45 3.4.6 Kiểm tra khả thủy phân CMC nấm linh chi 46 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 PHỤ LỤC 54 DANH MỤC VIẾT TẮT ACE: Chất ức chế enzyme chuyển đổi angiotensin AZT: Azidothimidine CMC: Carboxymetyl cellulose DDL: Didanosin GLPs: Ganoderma polysaccharide MDA: 3,4-Methylenedioxyamphetamine DANH MỤC BẢNG BIỂU Số hiệu Tên bảng bảng Số trang 1.1 Lục bảo linh chi tác dụng trị liệu (Lý Thời Trân, 1590) 1.2 Thành phần hoạt chất có hoạt tính sinh học linh chi 11 3.1 3.2 3.3 3.4 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến tốc độ tăng trưởng hệ sợi giống cấp Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến tăng trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể Ảnh hưởng pH đến tốc độ tăng trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể Ảnh hưởng thời gian đến tốc độ sinh trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể 31 34 37 38 3.5 Khả kháng khuẩn hệ sợi thể linh chi 44 3.6 Mật độ quang số chống oxy hóa dịch chiết hệ sợi 45 3.7 Mật độ quang số chống oxy hóa dịch chiết thể 46 DANH MỤC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ Số hiệu Tên hình hình ảnh Số trang 1.1 Chu trình phát triển nấm linh chi 1.2 Sơ đồ quy trình nhân giống ni trồng nấm linh chi 15 3.1 Hình thái thể nấm linh chi 30 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 Hệ sợi nấm linh chi môi trường nghiệm thức sau 12 ngày nuôi sợi Biểu đồ thể ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến đến tốc độ tăng trưởng hệ sợi giống cấp Biểu đồ ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến tốc độ tăng trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể Hệ sợi nấm linh chi môi trường nuôi cấy sau ngày Biều đồ ảnh hưởng pH đến tốc độ tăng trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể Biểu đồ thể đường cong sinh trưởng hệ sợi linh chi môi trường dịch thể Hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể sau 12 ngày nuôi cấy 32 33 34 35 37 39 40 3.9 Định tính alkaloid thuốc thử Mayer 40 3.10 Định tính saponin thử nghiệm tạo bọt 41 3.11 Thử nghiệm Foutan – Kaudel 42 3.12 Định tính acid hữu 43 3.13 Khả kháng khuẩn hệ sợi thể linh chi 45 3.14 Dung dịch đánh giá khả kháng oxy hóa linh chi 46 3.15 Vòng thủy phân CMC linh chi 47 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Nấm linh chi (Ganoderma lucidum) dược thảo quý y học cổ truyền Số lượng loại nấm linh chi sử dụng công nghệ dược liệu ngày tăng, đặc biệt quốc gia Á Đông [21] Linh chi sử dụng để điều trị nhiều loại bệnh khác người (như bệnh viên gan mãn tính, cao huyết áp, cholesteron hóa mạch máu, tiểu đường, tắc nghẽn động mạch vành, hen xuyển, viêm loét dày, …) nước phương Đơng từ 2000 năm trước [38] Chính thị trường Việt Nam, nhu cầu sử dụng nấm linh chi làm thuốc chữa bệnh nước xuất ngày tăng Nhiều sở tiến hành nghiên cứu nuôi trồng chế biến thăm dị hoạt chất sinh học có nấm linh chi Các nghiên cứu cho thấy thành phần hóa học có nấm linh chi phong phú bao gồm nhóm acid amin, protein, chất béo, đường khử, hợp chất phenol, nguyên tố khác Ag, Fe, Na, Cu,… [9] Ngồi nấm linh chi cịn cung cấp lượng đáng kể chất có hoạt tính sinh học polysaccharide, steroid, saponin, … Tuy nhiên để sản xuất nấm nói chung nấm linh chi nói riêng cịn gặp nhiều khó khăn Thời tiết, yếu tố môi trường, sâu bệnh làm cho sản lượng nấm khơng ổn định Loại hình sản xuất liên quan chặt chẽ với vi sinh vật, khâu làm giống phải làm riêng phịng thí nghiệm, đồi hỏi kỹ thuật cao, vấn đề sản xuất giống nấm cịn nhiều hạn chế Hiện nay, q trình nuôi sinh khối nấm môi trường dịch thể xem phương pháp đầy triển vọng thay cho trồng nấm trồng nấm thường phải vài tháng chăm sóc thể gặp khó khăn việc kiểm sốt chất lượng sản phẩm q trình ni trồng [29] Bên cạnh việc cho phép rút ngắn thời gian, nuôi cấy hệ sợi môi trường dịch thể không địi hỏi điều kiện khắt khe ni trồng nấm thu thể [34] 56 ngay6 nt N Subset for alpha = 0.05 Duncana 3.00 4.00 5.1667 2.00 5.3333 1.00 Sig 4.5000 6.3333 1.000 580 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 ngay9 nt N Subset for alpha = 0.05 Duncana 3.00 8.0000 4.00 8.5000 2.00 8.8333 1.00 9.8333 Sig .075 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 ngay12 nt N Subset for alpha = 0.05 Duncana 3.00 8.6667 4.00 9.1667 2.00 9.3333 1.00 Sig 10.5000 108 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 DATASET ACTIVATE DataSet1 ONEWAY klt klk BY nt /STATISTICS DESCRIPTIVES /MISSING ANALYSIS 1.000 1.000 57 /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) Oneway Notes Output Created 29-APR-2016 16:25:35 Comments C:\Users\HUONG Data HUYNH\Desktop\so lieu kl\MTL.sav Input Active Dataset DataSet1 Filter Weight Split File N of Rows in Working Data File Definition of Missing 12 User-defined missing values are treated as missing Statistics for each analysis are Missing Value Handling Cases Used based on cases with no missing data for any variable in the analysis ONEWAY klt klk BY nt /STATISTICS DESCRIPTIVES Syntax /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) Processor Time 00:00:00.05 Elapsed Time 00:00:00.05 Resources 58 [DataSet1] C:\Users\HUONG HUYNH\Desktop\so lieu kl\MTL.sav Multiple Comparisons Dependent (I) nt (J) nt Variable Mean Std Difference (I- Error Sig J) 1.00 2.00 ngay6 4.00 1.00 2.00 ngay9 LSD 3.00 4.00 1.00 ngay12 LSD 2.00 3.00 Lower Upper Bound Bound 2.00 1.00000* 28868 009 3343 1.6657 3.00 1.83333* 28868 000 1.1676 2.4990 4.00 1.16667* 28868 004 5010 1.8324 1.00 -1.00000* 28868 009 -1.6657 -.3343 3.00 83333* 28868 020 1676 1.4990 4.00 16667 28868 580 -.4990 8324 1.00 -1.83333* 28868 000 -2.4990 -1.1676 2.00 -.83333* 28868 020 -1.4990 -.1676 4.00 -.66667* 28868 050 -1.3324 -.0010 1.00 -1.16667* 28868 004 -1.8324 -.5010 2.00 -.16667 28868 580 -.8324 4990 3.00 66667* 28868 050 0010 1.3324 2.00 1.00000* 39087 034 0987 1.9013 3.00 1.83333* 39087 002 9320 2.7347 4.00 1.33333* 39087 009 4320 2.2347 1.00 -1.00000* 39087 034 -1.9013 -.0987 3.00 83333 39087 066 -.0680 1.7347 4.00 33333 39087 419 -.5680 1.2347 1.00 -1.83333* 39087 002 -2.7347 -.9320 2.00 -.83333 39087 066 -1.7347 0680 4.00 -.50000 39087 237 -1.4013 4013 1.00 -1.33333* 39087 009 -2.2347 -.4320 2.00 -.33333 39087 419 -1.2347 5680 3.00 50000 39087 237 -.4013 1.4013 2.00 1.16667* 35355 011 3514 1.9820 3.00 1.83333* 35355 001 1.0180 2.6486 4.00 1.33333* 35355 005 5180 2.1486 1.00 -1.16667* 35355 011 -1.9820 -.3514 3.00 66667 35355 096 -.1486 1.4820 4.00 16667 35355 650 -.6486 9820 1.00 -1.83333* 35355 001 -2.6486 -1.0180 LSD 3.00 95% Confidence Interval 59 4.00 2.00 -.66667 35355 096 -1.4820 1486 4.00 -.50000 35355 195 -1.3153 3153 1.00 -1.33333* 35355 005 -2.1486 -.5180 2.00 -.16667 35355 650 -.9820 6486 3.00 50000 35355 195 -.3153 1.3153 * The mean difference is significant at the 0.05 level Descriptives N klt klk Mean Std Std 95% Confidence Interval Minimu Maximu Deviation Error for Mean m m Lower Upper Bound Bound 1.00 8.2167 22546 13017 7.6566 8.7767 8.00 8.45 2.00 9.3233 20502 11837 8.8140 9.8326 9.12 9.53 3.00 26627 15373 9.6285 10.9515 10.01 10.54 4.00 8.5167 33020 19064 7.6964 9.3369 8.18 8.84 Total 12 9.0867 86881 25080 8.5347 9.6387 8.00 10.54 1.00 5787 01490 00860 5416 6157 56 59 2.00 3459 01507 00870 3084 3833 33 36 3.00 3156 02382 01376 2564 3748 29 33 4.00 3369 00543 00313 3234 3503 33 34 Total 12 3943 11265 03252 3227 4658 29 59 10.290 ANOVA Sum of Squares Between Groups klt Mean Square 7.757 2.586 546 068 8.303 11 Between Groups 137 046 Within Groups 002 000 Total 140 11 Within Groups Total klk df F Sig 37.915 000 175.191 000 60 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent (I) nt (J) nt Variable Mean Std Difference (I- Error Sig J) 1.00 2.00 klt 4.00 1.00 2.00 klk Lower Upper Bound Bound 2.00 -1.10667* 21323 001 -1.5984 -.6150 3.00 -2.07333* 21323 000 -2.5650 -1.5816 4.00 -.30000 21323 197 -.7917 1917 1.00 1.10667* 21323 001 6150 1.5984 3.00 -.96667* 21323 002 -1.4584 -.4750 4.00 80667* 21323 005 3150 1.2984 1.00 2.07333* 21323 000 1.5816 2.5650 2.00 96667* 21323 002 4750 1.4584 4.00 1.77333* 21323 000 1.2816 2.2650 1.00 30000 21323 197 -.1917 7917 2.00 -.80667* 21323 005 -1.2984 -.3150 3.00 -1.77333* 21323 000 -2.2650 -1.2816 2.00 23280* 01321 000 2023 2633 3.00 26307* 01321 000 2326 2935 4.00 24180* 01321 000 2113 2723 1.00 -.23280* 01321 000 -.2633 -.2023 3.00 03027 01321 051 -.0002 0607 4.00 00900 01321 515 -.0215 0395 1.00 -.26307* 01321 000 -.2935 -.2326 2.00 -.03027 01321 051 -.0607 0002 4.00 -.02127 01321 146 -.0517 0092 1.00 -.24180* 01321 000 -.2723 -.2113 2.00 -.00900 01321 515 -.0395 0215 3.00 02127 01321 146 -.0092 0517 LSD 3.00 95% Confidence Interval LSD 3.00 4.00 * The mean difference is significant at the 0.05 level 61 Homogeneous Subsets klt nt N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1.00 8.2167 4.00 8.5167 2.00 3.00 3 9.3233 10.2900 Sig .197 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 klk nt N Subset for alpha = 0.05 Duncana 3.00 3156 4.00 3369 2.00 3459 1.00 Sig .5787 059 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 GET FILE='C:\Users\HUONG HUYNH\Desktop\so lieu kl\pH.sav' DATASET NAME DataSet3 WINDOW=FRONT ONEWAY klt klk BY nt /STATISTICS DESCRIPTIVES /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) 62 Oneway Notes Output Created 29-APR-2016 16:26:45 Comments C:\Users\HUONG Data HUYNH\Desktop\so lieu kl\pH.sav Input Active Dataset DataSet3 Filter Weight Split File N of Rows in Working Data File 15 User-defined missing values are Definition of Missing treated as missing Statistics for each analysis are Missing Value Handling based on cases with no missing Cases Used data for any variable in the analysis ONEWAY klt klk BY nt /STATISTICS DESCRIPTIVES Syntax /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) Processor Time 00:00:00.05 Elapsed Time 00:00:00.09 Resources [DataSet3] C:\Users\HUONG HUYNH\Desktop\so lieu kl\pH.sav Descriptives N klt Mean Std Std 95% Confidence Interval Minimu Maximu Deviation Error for Mean m m Lower Upper Bound Bound 1.00 6.3867 14295 08253 6.0316 6.7418 6.23 6.51 2.00 7.2097 16432 09487 6.8015 7.6179 7.03 7.34 3.00 5.4177 43281 24988 4.3426 6.4929 5.04 5.89 4.00 8.2612 81355 46971 6.2402 10.2822 7.38 8.98 5.00 8.3607 79690 46009 6.3811 10.3403 7.47 9.01 63 Total 15 7.1272 1.25124 32307 6.4343 7.8201 5.04 9.01 1.00 5037 01949 01125 4553 5521 49 52 2.00 5263 02825 01631 4562 5965 50 56 3.00 5373 03746 02163 4442 6304 51 58 4.00 6168 00550 00318 6031 6304 61 62 5.00 5339 01190 00687 5043 5635 52 55 Total 15 5436 04443 01147 5190 5682 49 62 klk ANOVA Sum of Squares Between Groups klt Mean Square 18.855 4.714 3.063 10 306 21.918 14 Between Groups 022 006 Within Groups 006 10 001 Total 028 14 Within Groups Total klk df F Sig 15.388 000 10.048 002 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent (I) nt (J) nt Variable Mean Std Difference Error Sig (I-J) LSD Lower Upper Bound Bound 2.00 -.82303 45191 099 -1.8300 1839 3.00 96893 45191 058 -.0380 1.9759 4.00 -1.87453* 45191 002 -2.8815 -.8676 5.00 -1.97407* 45191 001 -2.9810 -.9671 1.00 82303 45191 099 -.1839 1.8300 3.00 1.79197* 45191 003 7850 2.7989 4.00 -1.05150* 45191 042 -2.0584 -.0446 5.00 -1.15103* 45191 029 -2.1580 -.1441 1.00 -.96893 45191 058 -1.9759 0380 2.00 -1.79197* 45191 003 -2.7989 -.7850 4.00 -2.84347* 45191 000 -3.8504 -1.8365 5.00 -2.94300* 45191 000 -3.9499 -1.9361 1.00 klt 95% Confidence Interval 2.00 3.00 64 1.00 1.87453* 45191 002 8676 2.8815 2.00 1.05150* 45191 042 0446 2.0584 3.00 2.84347* 45191 000 1.8365 3.8504 5.00 -.09953 45191 830 -1.1065 9074 1.00 1.97407* 45191 001 9671 2.9810 2.00 1.15103* 45191 029 1441 2.1580 3.00 2.94300* 45191 000 1.9361 3.9499 4.00 09953 45191 830 -.9074 1.1065 2.00 -.02263 01916 265 -.0653 0201 3.00 -.03360 01916 110 -.0763 0091 4.00 -.11307* 01916 000 -.1558 -.0704 5.00 -.03020 01916 146 -.0729 0125 1.00 02263 01916 265 -.0201 0653 3.00 -.01097 01916 580 -.0537 0317 4.00 -.09043* 01916 001 -.1331 -.0477 5.00 -.00757 01916 701 -.0503 0351 1.00 03360 01916 110 -.0091 0763 2.00 01097 01916 580 -.0317 0537 4.00 -.07947* 01916 002 -.1222 -.0368 5.00 00340 01916 863 -.0393 0461 1.00 11307* 01916 000 0704 1558 2.00 09043* 01916 001 0477 1331 3.00 07947* 01916 002 0368 1222 5.00 08287* 01916 002 0402 1256 1.00 03020 01916 146 -.0125 0729 2.00 00757 01916 701 -.0351 0503 3.00 -.00340 01916 863 -.0461 0393 4.00 -.08287* 01916 002 -.1256 -.0402 4.00 5.00 1.00 2.00 klk LSD 3.00 4.00 5.00 * The mean difference is significant at the 0.05 level 65 Homogeneous Subsets klt nt N Subset for alpha = 0.05 Duncana 3.00 5.4177 1.00 6.3867 2.00 4.00 8.2612 5.00 8.3607 6.3867 7.2097 Sig .058 099 830 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 klk nt N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1.00 5037 2.00 5263 5.00 5339 3.00 5373 4.00 Sig .6168 133 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 DATASET ACTIVATE DataSet1 GET FILE='C:\Users\HUONG HUYNH\Desktop\so lieu kl\tocdo.sav' DATASET NAME DataSet4 WINDOW=FRONT ONEWAY skt skk BY nt /STATISTICS DESCRIPTIVES /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) 66 Oneway Notes Output Created 29-APR-2016 16:28:11 Comments C:\Users\HUONG Data HUYNH\Desktop\so lieu kl\tocdo.sav Input Active Dataset DataSet4 Filter Weight Split File N of Rows in Working Data File 21 User-defined missing values are Definition of Missing treated as missing Statistics for each analysis are Missing Value Handling based on cases with no missing Cases Used data for any variable in the analysis ONEWAY skt skk BY nt /STATISTICS DESCRIPTIVES Syntax /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) Processor Time 00:00:00.13 Elapsed Time 00:00:00.14 Resources [DataSet4] C:\Users\HUONG HUYNH\Desktop\so lieu kl\tocdo.sav Descriptives N Mean Std Std 95% Confidence Minimu Maxim Deviation Error Interval for Mean m um Lower Upper Bound Bound 1.00 2.8033 37166 21458 1.8801 3.7266 2.39 3.11 2.00 4.3267 37541 21674 3.3941 5.2592 4.10 4.76 3.00 6.2367 26502 15301 5.5783 6.8950 6.05 6.54 4.00 8.6500 39661 22898 7.6648 9.6352 8.21 8.98 5.00 9.3267 10017 05783 9.0778 9.5755 9.23 9.43 6.00 9.7200 07000 04041 9.5461 9.8939 9.65 9.79 skt 67 7.00 Tota l skk 11.096 21 7.4514 29297 16915 10.3689 11.8245 10.88 11.43 2.91471 63604 6.1247 8.7782 2.39 11.43 1.00 1100 00000 00000 1100 1100 11 11 2.00 2567 00577 00333 2423 2710 25 26 3.00 4400 01732 01000 3970 4830 42 45 4.00 6867 00577 00333 6723 7010 68 69 5.00 7367 02082 01202 6850 7884 72 76 6.00 7933 00577 00333 7790 8077 79 80 7.00 8100 01000 00577 7852 8348 80 82 21 5476 26627 05810 4264 6688 11 82 Tota l ANOVA Sum of df Mean Square F Sig Squares Between Groups skt Within Groups Total Between Groups skk Within Groups Total 168.696 28.116 1.215 14 087 169.910 20 1.416 236 002 14 000 1.418 20 324.041 000 1770.143 000 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent (I) nt (J) nt Variable Std Error Sig 95% Confidence Interval Lower Upper Bound Bound 2.00 -1.52333* 24051 000 -2.0392 -1.0075 3.00 -3.43333* 24051 000 -3.9492 -2.9175 4.00 -5.84667* 24051 000 -6.3625 -5.3308 5.00 -6.52333* 24051 000 -7.0392 -6.0075 6.00 -6.91667* 24051 000 -7.4325 -6.4008 7.00 -8.29333* 24051 000 -8.8092 -7.7775 1.00 1.52333* 24051 000 1.0075 2.0392 3.00 -1.91000* 24051 000 -2.4258 -1.3942 4.00 -4.32333* 24051 000 -4.8392 -3.8075 5.00 -5.00000* 24051 000 -5.5158 -4.4842 1.00 skt Mean Difference (I-J) LSD 2.00 68 6.00 -5.39333* 24051 000 -5.9092 -4.8775 7.00 -6.77000* 24051 000 -7.2858 -6.2542 1.00 3.43333* 24051 000 2.9175 3.9492 2.00 1.91000* 24051 000 1.3942 2.4258 4.00 -2.41333* 24051 000 -2.9292 -1.8975 5.00 -3.09000* 24051 000 -3.6058 -2.5742 6.00 -3.48333* 24051 000 -3.9992 -2.9675 7.00 -4.86000* 24051 000 -5.3758 -4.3442 1.00 5.84667* 24051 000 5.3308 6.3625 2.00 4.32333* 24051 000 3.8075 4.8392 3.00 2.41333* 24051 000 1.8975 2.9292 5.00 -.67667* 24051 014 -1.1925 -.1608 6.00 -1.07000* 24051 001 -1.5858 -.5542 7.00 -2.44667* 24051 000 -2.9625 -1.9308 1.00 6.52333* 24051 000 6.0075 7.0392 2.00 5.00000* 24051 000 4.4842 5.5158 3.00 3.09000* 24051 000 2.5742 3.6058 4.00 67667* 24051 014 1608 1.1925 6.00 -.39333 24051 124 -.9092 1225 7.00 -1.77000* 24051 000 -2.2858 -1.2542 1.00 6.91667* 24051 000 6.4008 7.4325 2.00 5.39333* 24051 000 4.8775 5.9092 3.00 3.48333* 24051 000 2.9675 3.9992 4.00 1.07000* 24051 001 5542 1.5858 5.00 39333 24051 124 -.1225 9092 7.00 -1.37667* 24051 000 -1.8925 -.8608 1.00 8.29333* 24051 000 7.7775 8.8092 2.00 6.77000* 24051 000 6.2542 7.2858 3.00 4.86000* 24051 000 4.3442 5.3758 4.00 2.44667* 24051 000 1.9308 2.9625 5.00 1.77000* 24051 000 1.2542 2.2858 6.00 1.37667* 24051 000 8608 1.8925 2.00 -.14667* 00943 000 -.1669 -.1264 3.00 -.33000* 00943 000 -.3502 -.3098 4.00 -.57667* 00943 000 -.5969 -.5564 5.00 -.62667* 00943 000 -.6469 -.6064 6.00 -.68333* 00943 000 -.7036 -.6631 7.00 -.70000* 00943 000 -.7202 -.6798 1.00 14667* 00943 000 1264 1669 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 1.00 skk LSD 2.00 69 3.00 -.18333* 00943 000 -.2036 -.1631 4.00 -.43000* 00943 000 -.4502 -.4098 5.00 -.48000* 00943 000 -.5002 -.4598 6.00 -.53667* 00943 000 -.5569 -.5164 7.00 -.55333* 00943 000 -.5736 -.5331 1.00 33000* 00943 000 3098 3502 2.00 18333* 00943 000 1631 2036 4.00 -.24667* 00943 000 -.2669 -.2264 5.00 -.29667* 00943 000 -.3169 -.2764 6.00 -.35333* 00943 000 -.3736 -.3331 7.00 -.37000* 00943 000 -.3902 -.3498 1.00 57667* 00943 000 5564 5969 2.00 43000* 00943 000 4098 4502 3.00 24667* 00943 000 2264 2669 5.00 -.05000* 00943 000 -.0702 -.0298 6.00 -.10667* 00943 000 -.1269 -.0864 7.00 -.12333* 00943 000 -.1436 -.1031 1.00 62667* 00943 000 6064 6469 2.00 48000* 00943 000 4598 5002 3.00 29667* 00943 000 2764 3169 4.00 05000* 00943 000 0298 0702 6.00 -.05667* 00943 000 -.0769 -.0364 7.00 -.07333* 00943 000 -.0936 -.0531 1.00 68333* 00943 000 6631 7036 2.00 53667* 00943 000 5164 5569 3.00 35333* 00943 000 3331 3736 4.00 10667* 00943 000 0864 1269 5.00 05667* 00943 000 0364 0769 7.00 -.01667 00943 099 -.0369 0036 1.00 70000* 00943 000 6798 7202 2.00 55333* 00943 000 5331 5736 3.00 37000* 00943 000 3498 3902 4.00 12333* 00943 000 1031 1436 5.00 07333* 00943 000 0531 0936 6.00 01667 00943 099 -.0036 0369 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 * The mean difference is significant at the 0.05 level 70 Homogeneous Subsets skt nt N Subset for alpha = 0.05 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 9.3267 6.00 9.7200 7.00 2.8033 4.3267 6.2367 8.6500 Duncana Sig 11.0967 1.000 1.000 1.000 1.000 124 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 skk nt N Subset for alpha = 0.05 1.00 1100 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7933 7.00 8100 2567 4400 6867 Duncana Sig .7367 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 1.000 1.000 099 ... triển hệ sợi nấm linh chi 3.3 Khảo sát sinh trưởng sợi nấm linh chi môi trường dịch thể 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng môi trưởng dinh dưỡng đến sinh trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể Sinh. .. linh chi môi trường dịch thể - Nghiên cứu ảnh hưởng pH đến sinh trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể - Xác định đường cong sinh trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể - Định... thể Hệ sợi nấm linh chi môi trường nuôi cấy sau ngày Biều đồ ảnh hưởng pH đến tốc độ tăng trưởng hệ sợi nấm linh chi môi trường dịch thể Biểu đồ thể đường cong sinh trưởng hệ sợi linh chi môi trường