Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa hoc cao dichloromethane từ tổng cao ethanol của thân cây mật gấu ở cao bằng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA VĂN THỊ MỸ HẠNH NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO DICHLOROMETHANE TỪ TỔNG CAO ETHANOL CỦA THÂN CÂY MẬT GẤU Ở CAO BẰNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM Đà Nẵng - Năm 2017 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO DICHLOROMETHANE TỪ TỔNG CAO ETHANOL CỦA THÂN CÂY MẬT GẤU Ở CAO BẰNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM Sinh viên thực : VĂN THỊ MỸ HẠNH Lớp : 13SHH Giáo viên hướng dẫn : TS TRẦN MẠNH LỤC Đà Nẵng - Năm 2017 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐHSP Độc lập - Tự - Hạnh phúc KHOA HÓA _ _ NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: VĂN THỊ MỸ HẠNH Lớp: 13SHH Tên đề tài: Nghiên cứu chiế t tách và xác ̣nh thành phần hó a ho ̣c cao dichloromethane từ tổng cao ethanol thân Mật gấu Cao Bằng Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị: - Nguyên liệu: thân Mật gấu thái lát thu mua Cao Bằng tháng 5/2015 - Thiết bị: + Máy đo sắc ký khí ghép khối phổ GC/MS 7890A/5975C hãng Agilent (Trung tâm kỹ thuật tiêu chuẩn đo lường chất lượng - Đà Nẵng) + Tủ sấy, cân phân tích, bếp cách thủy, sinh hàn hồi lưu, bếp điện, cốc thủy tinh, đũa thủy tinh, bình tam giác, ống đong, phễu lọc, phễu chiết, loại pipet, bình định mức, bình hút ẩm, lọ thủy tinh, mỏng, cột chạy sắc ký Nội dung nghiên cứu: - Xác định thành phần hóa học cao chiết dichloromethane từ tổng cao ethanol thân Mật gấu - Phân lập phân đoạn cao dichloromethane từ tổng cao ethanol thân Mật gấu Giáo viên hướng dẫn: TS Trần Mạnh Lục Ngày giao đề tài: 15/07/2016 Ngày hoàn thành: 28/04/2017 Chủ nhiệm khoa Giáo viên hướng dẫn (Ký ghi rõ họ, tên) (Ký ghi rõ họ, tên) Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày … tháng… năm 2017 Kết điểm đánh giá: Ngày … tháng … năm 2017 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (Kí ghi rõ họ tên) LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả khóa luận Văn Thị Mỹ Hạnh MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài .1 Mục tiêu nghiên cứu .2 Đối tượng phạm vi nghiên cứu Nội dung nghiên cứu .2 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài .2 Bố cục luâṇ văn .2 CHƯƠNG TỔNG QUAN .4 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CHI MAHONIA 1.2 GIỚI THIỆU VỀ CÂY M ẬT G ẤU 1.2.1 Tên gọi .4 1.2.2 Phân bố .5 1.2.3 Đặc điểm thực vật .5 1.2.4 Tình hình nghiên cứu ngồi nước mật gấu 1.2.5 Giá trị sử dụng mật gấu Việt Nam CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 2.1 NGUYÊN LIỆU , DỤN G CỤ, HÓ A CHẤ T 10 2.1.1 Nguyên liê ̣u 10 2.1.2 Thiế t bi,̣ du ̣ng cu ̣, hó a chấ t 11 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGÂM DẦM TẠO TỔNG CAO ETHANOL TỪ BỘT TH ÂN CÂY M ẬT GẤU 11 2.3 PHƯƠNG PHÁP CHIẾT PHÂN BỐ LỎNG – LỎNG TỪ TỔNG CAO ETH ANOL 12 2.4 PHÂN LẬP PHÂN ĐOẠN BẰNG SẮC KÝ CỘT VÀ SẮC KÝ BẢN MỎNG 13 2.4.1 Sắ c ký cô ̣t 13 2.4.2 Sắ c ký bản mỏ ng 15 2.5 XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC/MS 19 2.5.1 Nguyên tắc 19 2.5.2 Cấu tạo thiết bị 19 2.5.3 Chương trình chạy GC/MS 21 CHƯƠNG KẾ T QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 3.1 KẾT QUẢ CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TỪ TỔNG CAO ETH ANOL BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾT PHÂN BỐ 23 3.1.1 Kết điều chế tổng cao ethanol phương pháp ngâm chiết 23 3.1.2 Kết chiết phân bố lỏng-lỏng tổng cao ethanol 24 3.2 KẾT QUẢ PHÂN LẬP PHÂN ĐOẠN CAO DICHLOROMETHANE TỪ TỔNG CAO ETHANOL 29 3.2.1 Kết chạy sắc ký cột cao dichloromethane (4,344 g) tách từ tổng cao ethanol 29 3.2.2 Kết chạy sắc ký cột phân đoạn DA27.81 (0,442 g) 32 3.2.3 Kết chạy sắc ký cột phân đoạn Da18.39 (0,201 g) 34 3.2.4 Định danh thành phần hóa học phân đoạn DA13.21 36 3.2.5 Định danh thành phần hóa học phân đoa ̣n Da2 38 3.2.6 Định danh thành phần hóa học phân đoa ̣n da1.2 40 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT GC : Sắc kí khí (Gas Chromatography) MS : Phổ khối (Mass Spectrometry) TCCS : Tiêu chuẩn sở STT : Số thứ tự DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu Tên bảng bảng 2.1 3.1 3.2 3.3 Hóa chất sử dụng q trình làm thí nghiệm Khối lượng cao ethanol thu sau cô quay chân không Sự thay đổi lượng chất theo số lần chiết cao chiết dichloromethane từ tổng cao ethanol Thành phần hóa học cao dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu Trang 11 `23 24 25 3.4 Thành phầ n hóa ho ̣c phân đoạn DA13.21 36 3.5 Thành phầ n hóa ho ̣c phân đoaṇ Da2 39 3.6 Thành phầ n hóa ho ̣c phân đoaṇ da1.2 40 DANH MỤC CÁC HÌNH Số hiệu Tên hình hình Trang 1.1 Hoa (a), (b), (c) mật gấu 1.2 Cây mật gấu (Mahonia Nepalensis DC.) 1.3 Berberin `7 1.4 Magnoflorin 1.5 Berbamin 1.6 Oxyacanthin 1.7 Columbamin 2.1 Thân mật gấu thái lát 10 2.2 Thân mật gấu nghiền nhỏ 10 2.3 Hộp đựng mỏng có kích thước x 10 cm 17 2.4 Các bình triển khai cho sắc ký mỏng 17 2.5 Sơ đồ thiết bị sắc kí khí ghép khối phổ 20 2.6 Chương trình nhiệt độ lị cột 22 3.1 3.2 Bột thân mật gấu ngâm ethanol tuyệt đối (a) cao tổng ethanol (b) Lượng chất chiết theo số lần chiết cao chiết dichloromethane từ tổng cao ethanol 23 24 Sắc ký đồ GC dịch chiết lỏng - lỏng với dung môi 3.3 dichloromethane từ tổng cao ethanol thân 25 mật gấu Kế t quả chaỵ sắ c ký bản mỏ ng với ̣ dung môi 3.4 hexane:ethyl acetate theo các tỉ lê ̣ 9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5 (từ trái qua phải) soi dưới đèn UV taị bước 31 sóng 366 nm 3.5 Cột sắc ký (d = 3.5 cm, h = 50 cm) lọ dung 31 Số hiệu Tên hình hình Trang dịch hứng (15 ml) 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 3.12 Các vết chất mỏng lọ DA1 đến lọ DA81 Các vết chất mỏng phân đoạn DA13.21 Các vết chất mỏng lọ DB1 đến lọ DB87 Cột sắc ký (d=1.5 cm, h=45 cm) lọ dung dịch hứng (15 ml) Các vết chất mỏng lọ Da1 đến lọ Da39 Cột sắc ký (d=1.0 cm, h=45 cm) lọ dung dịch hứng (15 ml) Các vết chất mỏng phân đoạn da1.2, da3.30, da31.37 31 32 32 33 33 34 34 3.13 Sơ đồ phân lập phân đoạn cao dichloromethane 35 3.14 Sắc ký đồ GC phân đoạn DA13.21 36 3.15 Sắc ký đồ GC phân đoaṇ Da2 39 3.16 Sắc ký đồ GC phân đoaṇ da1.2 40 31 Hình 3.5 Cột sắc ký (d = 3.5 cm, h = 50 cm) lọ dung dịch hứng (15 ml) Hình 3.6 Các vết chất mỏng lọ DA1 đến lọ DA81 Dựa theo kết thu từ sắc ký mỏng ta gộp lại thành phân đoạn, kí hiệu là: DA1.12 (gộp lọ đến lọ 12), DA13.21 (gộp lọ 13 đến lọ 21), DA22.26 (gộp lọ 22 đến lọ 26), DA27.81 (gộp lọ 27 đến lọ 81) - Phân đoạn DA1.12: 0,356 g - Phân đoạn DA13.21: 0,141 g - Phân đoạn DA22.26: 0,208 g - Phân đoạn DA27.81: 0,442 g Nhận xét: Phân đoạn DA1.12 (0,356 g), DA22.26 (0,208 g) mỏng có nhiều vết chất mờ, lượng chất nên khơng khảo sát Phân đoạn DA13.21 32 mỏng thấy chấm sáng rõ khối lượng cao cân 0,141 g nên tiến hành đo GC/MS để xác định chất có phân đoạn Phân đoạn DA27.81 (0,442 g) có nhiều vết chất tròn nên chọn chạy sắc ký tiếp tục Hình 3.7 Các vết chất mỏng phân đoạn DA13.21 Kết giải ly hệ dung môi B Đối với hệ dung môi hexane:ethyl acetate = 7:3, thu 87 lọ kí hiệu từ DB1 đến DB87 Kết sắc ký mỏng dung dịch giải ly lọ thể hình 3.8 Hình 3.8 Các vết chất mỏng lọ DB1 đến lọ DB87 Theo kết sắc ký mỏng ta thu phân đoạn DB1.87 (gộp lọ đến lọ 87) Cho phân đoạn bay tự nhiên cịn lại khoảng 1/3 thể tích chấm mỏng Đuổi dung môi áp suất thấp phân đoạn thu cao có khối lượng 0,355g Phân đoạn DB1.87 mỏng cho vệt mờ nên không tiếp tục khảo sát 3.2.2 Kết chạy sắc ký cột phân đoạn DA27.81 (0,442 g) Phân đoạn DA27.81 (0,442 g) có lươ ̣ng cao nhiề u và có hơ ̣p chấ t cầ n phân lâp̣ 33 (khi định danh GC/MS) để tiế p tu ̣c khảo sát Sử dụng cột sắc ký có d = 1,5 cm, h = 45 cm lượng silica gel cho vào cột 20 g, triển khai chạy với hệ dung môi hexane: ethyl acetate = 9:1 (dựa vào kế t quả chaỵ sắ c ký bản mỏng) hình 3.9 Hình 3.9 Cột sắc ký (d=1.5 cm, h=45 cm) lọ dung dịch hứng (15 ml) Cao phân đoạn DA27.81 trộn với 1,000 g silicagel nghiền mịn, cho chạy cột với tốc độ hứng 4-5 giọt/ phút Thu 39 lọ kí hiệu từ Da1 đến Da39 gộp lại thành phân đoạn Da1 (lọ 1), Da2 (lọ 2), Da3.7 (gộp lọ đến lọ 7), Da8.17 (gộp lọ đến lọ 17), Da18.39 (gộp lọ 18 đến lọ 39) Sau cho phân đoạn bay tự nhiên cịn lại khoảng 1/3 thể tích chấm mỏng Đuổi dung môi áp suất thấp phân đoạn thu cao phân đoạn Hình 3.10 Các vết chất mỏng lọ Da1 đến lọ Da39 34 Dựa vào kết sắc ký mỏng, phân đoạn Da1 (0,005 g), Da3.7 (0,009 g), Da8.17 (0,010 g) mỏng có nhiều vết chất mờ, lượng chất nên khơng khảo sát Phân đoạn Da2 (0,011 g) có chấm sáng rõ nên đem đo GC/MS để xác định chất có phân đoạn Phân đoạn Da18.39 (0,201 g) có nhiều vết chất trịn lẫn vào nên lựa chọn chạy sắc ký 3.2.3 Kết chạy sắc ký cột phân đoạn Da18.39 (0,201 g) Cao phân đoạn Da18.39 trộn với 1,000 g silica gel nghiền mịn Sử dụng cột sắc ký có d = 1.0 cm, h = 45 cm lượng silica gel cho vào cột 10,000 g, triển khai chạy với hệ dung môi hexane:ethyl acetate = 9:1 (dựa vào kế t quả chaỵ sắ c ký bản mỏng) hình 3.11 Hình 3.11 Cột sắc ký (d=1.0 cm, h=45 cm) lọ dung dịch hứng (15 ml) Cho chạy cột với tốc độ hứng 4-5 giọt/ phút Thu 37 lọ kí hiệu từ da1 đến da37 gộp lại thành phân đoạn da1.2 (gộp lọ lọ 2), da3.30 (gộp từ lọ đến lọ 30), da31.37 (gộp lọ 31 đến lọ 37) Sau cho phân đoạn bay tự nhiên cịn lại khoảng 1/3 thể tích chấm mỏng Đuổi dung môi áp suất thấp phân đoạn thu cao phân đoạn Kết sắc ký mỏng dung dịch giải ly phân đoạn thể hình 3.12 Hình 3.12 Các vết chất mỏng phân đoạn da1.2, da3.30, da31.37 35 Dựa vào kết sắc ký mỏng, phân đoạn da3.30 (0,019 g) da31.37 (0,005 g) mỏng có nhiều vết chất mờ, lượng chất nên khơng khảo sát Phân đoạn da1.2 (0,010 g) có chấm sáng rõ nên tiến hành đo GC/MS để xác định chất có phân đoạn Kết trình phân lập phân đoạn cao dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu Cao Bằng tóm tắt thể sơ đồ hình 3.13 Tổng cao ethanol (39,038g) Chiết lỏng - lỏng với dichloromethane Cao Dichloromethane (4,344g) Cột sắc ký 50 x 3.5 cm Hệ hexane:ethyl acetate = 9:1→ 7:3 DA1.12 (0,356g) DA13.21 (0,141g) DA22.26 (0,208g) ĐO GC/MS Da1 (0,005g) DA27.81 (0,442g) DB1.87 (0,355g) Cột sắc ký 45 x 1.5 cm Hệ hexane:ethyl acetate = 9:1 Da2 (0,011g) ĐO GC/MS Da3.7 (0,009g) Da8.17 (0,010g) Da18.39 (0,201g) Cột sắc ký 45 x 1.0 cm Hệ hexane:ethyl acetate = 9:1 da1.2 (0,010g) da3.30 (0,019g) ĐO GC/MS Hình 3.13 Sơ đồ phân lập phân đoạn cao dichloromethane da31.37 (0,005g) 36 3.2.4 Định danh thành phần hóa học phân đoạn DA13.21 Phân đoạn DA13.21 mỏng thấy chấm sáng rõ khối lượng cao cân 0,141 g nên tiến hành đo GC/MS để xác định chất có phân đoạn Sắc ký đồ GC kết định danh thành phần hóa học phân đoạn DA13.21 thể hình 3.14 bảng 3.4 Hình 3.14 Sắc ký đồ GC phân đoạn DA13.21 Bảng 3.4 Thành phầ n hóa học phân đoạn DA13.21 STT Thời Diện gian tích lưu peak (phút) (%) 23,366 1,45 Tên gọi Tetradecanal (C14H28O) Công thức cấu tạo 37 STT Thời Diện gian tích lưu peak (phút) (%) 27,016 2,22 Tên gọi 1,2Benzenedicarboxyli c acid, bis(2methylpropyl)ester (C16H22O4) 29,370 5,19 Dibutyl phthalate (C16 H22 O4) Hexadecanoic acid, 30,320 10,15 ethyl ester (C18H36O2) 9,12Octadecadienoic 35,420 10,57 acid, methyl ester, (E,E), (C19H34O2) 35,619 8,50 E-11Hexadecenoic acid, ethyl ester (C18H34O2) Công thức cấu tạo 38 STT Thời Diện gian tích lưu peak (phút) (%) Tên gọi Công thức cấu tạo 1,2Benzenedicarboxyl 39,507 15,35 ic acid, diisooctyl ester (C24H38O4) Nhâ ̣n xét: Từ kế t quả ở Bảng 3.4 cho thấ y phương pháp GC/MS định danh cấu tử chiếm 53,43% tổng số cấu tử phát Các cấu tử có hàm lượng lớn 1,2-Benzenedicarboxylic acid, diisooctyl ester (15,35%); 9,12-Octadecadienoic acid, methyl ester, (E,E) (10,57%); Hexadecanoic acid, ethyl ester (10,15%); E-11-Hexadecenoic acid, ethyl ester (8,50%); Dibutyl phthalate (5,19%) Trong đó, cấu tử Hexadecanoic acid, ethyl ester xuất phân đoạn DA13.21 dịch chiết lỏng – lỏng với dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu 3.2.5 Định danh thành phần hóa học phân đoa ̣n Da2 Phân đoạn Da2 mỏng thấy chấm sáng rõ khối lượng cao cân 0,011 g nên tiến hành đo GC/MS để xác định chất có phân đoạn Sắc ký đồ GC kết định danh thành phần hóa học phân đoạn Da2 thể hình 3.15 bảng 3.5 39 Hình 3.15 Sắc ký đồ GC phân đoạn Da2 Bảng 3.5 Thành phầ n hóa học phân đoạn Da2 STT Thời Diện gian tích lưu peak (phút) (%) Tên gọi Công thức cấu tạo n-Hexadecanoic 29,877 25,40 acid (C16H32O2) Hexadecenoic acid, 35,202 32,04 Z-11(C16H30O2) Nhâ ̣n xét: Từ kế t quả ở Bảng 3.5 cho thấ y phương pháp GC/MS định danh cấu tử chiếm 57,44% tổng số cấu tử phát Cả hai cấu tử có hàm lượng lớn 25% n-Hexadecanoic acid (25,40%); 40 Hexadecenoic acid, Z-11- (32,04%) Trong cấu tử có hoạt tính sinh học quan tâm n-Hexadecanoic acid có tính kháng khuẩn Cấu tử n-Hexadecanoic acid phân đoạn Da2 (25,40%) làm giàu lần so với dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu (7,56%) 3.2.6 Định danh thành phần hóa học phân đoa ̣n da1.2 Phân đoạn da1.2 mỏng thấy chấm sáng khối lượng cao cân 0,010 g nên tiến hành đo GC/MS để xác định chất có phân đoạn Sắc ký đồ GC kết định danh thành phần hóa học phân đoạn da1.2 thể hình 3.16 bảng 3.6 Hình 3.16 Sắc ký đồ GC phân đoạn da1.2 Bả ng 3.6 Thà nh phầ n hó a học phân đoạn da1.2 STT Thời gian lưu (phút) Diện tích peak (%) 25,527 2,65 Tên gọi Nonadecane (C19H40) Công thức cấu tạo 41 STT Thời gian lưu (phút) Diện tích peak (%) 27,022 3,92 29,357 5,43 39,500 31,57 Tên gọi Công thức cấu tạo 1,2Benzenedicarboxyl icacid,bis(2methylpropyl)ester (C16H22O4) 1,2Benzenedicarboxyl ic acid, butyl 2ethylhexyl ester (C20H30O4) Di-n-octyl phthalate (C24H38O4) Nhận xét: Từ Bảng 3.6 cho thấy phương pháp GC/MS định danh cấu tử chiếm 43,7% tổng số cấu tử phát Cấu tử có hàm lượng lớn Di-n-octyl phthalate (31,57%), ngồi cịn có cấu tử với hàm lượng nhỏ 1,2-Benzenedicarboxylic acid, butyl 2-ethylhexyl ester (5,43%); 1,2- Benzenedicarboxylicacid, bis(2-methylpropyl) ester (3.92%); Nonadecane (2,65%) * Nhận xét chung: Kết phân lập phân đoạn cao dichloromethane (từ tổng cao ethanol) sắc ký cột sắc ký mỏng, cho thấy tổng số cấu tử định danh ba phân đoạn DA13.21, Da2, da1.2 (12 cấu tử) nhỏ hai lần so với số cấu tử định danh dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu (25 cấu tử) Trong đó, cấu tử Hexadecanoic acid, ethyl ester cấu tử n-Hexadecanoic acid xuất phân lập phân đoạn cao dichloromethane dịch chiết lỏng – lỏng với dung môi dichloromethane (Cấu tử n-Hexadecanoic acid phân đoạn Da2 (25,40%) làm giàu lần so với dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol (7,56%)) 42 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Sau thực đề tài “Nghiên cứu chiế t tách, xác ̣nh thành phần hóa học cao dichloromethane từ tổng caoethanol thân mật gấu Cao Bằng”, thu số kết sau: Dùng phương pháp chiết ngâm dầm chiết tách tổng cao ethanol từ Mật gấu 9,68% Từ tổng cao ethanol, dùng phương pháp chiết phân bố lỏng – lỏng với dung môi dichloromethane định danh GC/MS xác định 25 cấu tử, Các cấu tử có hàm lượng lớn 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z)- (14,44%); Hexadecanoic acid, ethyl ester (11,53%); n-Hexadecanoic acid (7,56%); betaSitosterol (6,84) Đã phân lập phân đoạn cao dichloromethane (từ tổng cao ethanol) sắc ký cột sắc ký mỏng, kết cho thấy tổng số cấu tử định danh ba phân đoạn DA13.21, Da2, da1.2 (12 cấu tử) nhỏ hai lần so với số cấu tử định danh dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu (25 cấu tử) Trong đó, cấu tử Hexadecanoic acid, ethyl ester cấu tử n-Hexadecanoic acid xuất phân lập phân đoạn cao dichloromethane dịch chiết lỏng – lỏng với dung môi dichloromethane (Cấu tử n-Hexadecanoic acid phân đoạn Da2 (25,40%) làm giàu lần so với dịch chiết lỏng – lỏng dung môi dichloromethane từ tổng cao ethanol (7,56%) Kiến nghị Do thời gian nghiên cứu có hạn, thơng qua kết đề tài mong muốn đề tài phát triển rộng số vấn đề sau: 43 - Thân mật gấu có chứa số chất có ứng dụng y học thực phẩm Stigmasterol; Stigmast-4-en-3-one; Beta-sitosterol; Campesterol Vitamin E Vì vậy, cần nghiên cứu phương pháp tách cấu tử nhằm đáp ứng nhu cầu sống Đồng thời thử hoạt tính sinh học chất tách để có nhìn tổng qt hoạt tính sinh học thân mật gấu, góp phần làm tăng giá trị sử dụng chữa bệnh thân mật gấu thuốc dân gian - Nghiên cứu hoạt tính chống oxy hóa số dịch chiết thân mật gấu 44 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Lê Thị Thu Hà, Nghiên cứu thành phần alkaloid hồng liên rơ, Khóa luận tốt nghiệp đại học khóa (2005-2009) [2] Nguyễn Thu Hằng, Bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng kháng khuẩn Hồng liên rơ mọc Đèo gió, tỉnh cao Bằng, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ khóa (1996-2001) [3] Trần Văn Lâm (2006), Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học tác dụng chống oxi hóa hồng liên rơ thu hái đèo gió – Cao Bằng, Luận văn thạc sĩ dược học, Đại học Dược Hà Nội [4] Nhà xuất Từ điển bách khoa Hà Nội(1999), Từ điển bách khoa Dược học, Hà Nội [5] Phạm Thị Hồng Nhung, Nghiên cứu alcaloid số tác dụng sinh học Hồng liên rơ mọc Đèo Gió- Cao Bằng, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ khóa (1997-2002) [6] Nguyễn Kim Phi Phụng (2006), Phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ, Nhà xuất đại học quốc gia TP Hồ Chí Minh Tiếng Anh [7] BezakovaI; Misik V; Malekova I; Svajdlenka E; Kostalova D (1996), Lipoxygenase inhibition and antioxidant properties of bisbenzyl isoquinolin alkaloid isolated from M aquifolium Pharmazie, page 758-761 [8] Fujimoto K (1980), Screening test for marine antioxygenic compounds from marine algal, Bul Jap.Sci Fisheries 9,12 [9] Gieler U; Vonder Weth A; Heger M (1995), Mahonia aquifolium- A new type of topical treatment for psoriasis, Juornal of Dermatological treatment, page 31-34 [10] Misik V; Bezakova L; Malakova I; Kostalova D (1995), Lipoxygenese inhibition and antioxidant propertise of protoberberine and ap orphine alkakoid isolated from M.aquifolium, Planta Medica, page 372-373 45 [11] Muller K; Ziereis K; Ganlik I (1995), The antipsoriatic Mahonia aquifolium and its active constituents; II Antiproliferative activity against cell growth of human keratinocyte, Planta Medica, page 74- 75 Websites [12] http://blogcaycanh.vn/cay_canh/d/cay-mat-gau-cay-hoang-lien-o-ro (25/05/2016) [13] http://caythuoc.org/hoang-lien-o-ro-ten-khac-cua-cay-mat-gau.htm (25/05/2016) ... đề tài: Nghiên cứu chiế t tách và xác ̣nh thành phần hó a ho ̣c cao dichloromethane từ tổng cao ethanol thân Mật gấu Cao Bằng Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị: - Nguyên liệu: thân Mật gấu thái... chiết cao chiết dichloromethane từ tổng cao ethanol b Kết xác định thành phần hóa học dịch chiết dichloromethane từ tổng cao ethanol thân mật gấu 25 Sắc kí đồ GC dịch chiết dichloromethane từ tổng. .. nghiên cứu thành phần hóa học có thân mật gấu cịn Để tiếp tục nghiên cứu sâu mật gấu tỉnh Cao Bằng làm sở cho việc tạo chế phẩm thuốc, chọn đề tài ? ?Nghiên cứu chiế t tá ch, xác ̣nh thành phần