Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học một số dịch chiết của cây cà gai leo (solanum hainanense hance)

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA  NGUYỄN THỊ VĂN THẢO Đề tài: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC MỘT SỐ DỊCH CHIẾT TRONG CÂY CÀ GAI LEO (SOLANUM HAINANENSE HANCE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM Đà Nẵng, tháng năm 2018 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA  Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết cà gai leo (Solanum hainanense hance) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM Ngành Cử nhân Hóa dược Sinh viên thực : Nguyễn Thị Văn Thảo Lớp : 14CHD Giảng viên hướng dẫn : Th.S Đỗ Thị Thúy Vân Đà Nẵng, tháng năm 2018 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên : NGUYỄN THỊ VĂN THẢO Lớp : 14 CHD Tên đề tài: “Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết cà gai leo (Solanum Hainanense Hance)” Nguyên liệu, dụng cụ, thiết bị hóa chất Nguyên liệu: Thân cà gai leo Đà Nẵng – Việt Nam Dụng cụ thiết bị: Bộ chiết Soxhlet, bình cầu, cốc thủy tinh, ống đong, bếp điện, ống nghiệm, bình tam giác,bình định mức, loại pipet, cân phân tích, lị nung, tủ sấy, chén nung, bình hút ẩm, bếp cách thủy,… Hóa chất: n-hexane, chloroform, ethyl acetate, thuốc thử Wagner, dung dịch HCl, HNO3, NaOH, nước cất,… Nội dung nghiên cứu 3.1 Nghiên cứu lý thuyết  Tìm hiểu tư liệu, sách báo nước đặc điểm, thành phần hóa học, cơng dụng cà gai leo  Trao đổi với giáo viên hướng dẫn đặc điểm, công dụng cà gai leo 3.2 Nghiên cứu thực nghiệm  Xử lí nguyên liệu  Xác định số tiêu hóa lí: độ ẩm, hàm lượng tro, hàm lượng kim loại SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp  Khảo sát thời gian chiết  Định tính  Xác định thành phần hóa học số dịch chiết cà gai leo  Thử hoạt tính sinh học từ cao chiết cà gai leo Giáo viên hướng dẫn: ThS Đỗ Thị Thúy Vân Ngày giao đề tài: 4/2017 Ngày hoàn thành: 3/2018 Chủ nhiệm khoa (Kí ghi rõ họ tên) Giáo viên hướng dẫn (Kí ghi rõ họ tên) Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày… tháng … năm 2018 Kết điểm đánh giá: Ngày … tháng … năm 2018 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (Kí ghi rõ họ tên) SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Lời em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến cô giáo Th.S Đỗ Thị Thúy Vân giao đề tài, hướng dẫn tận tình sẵn sàng giúp đỡ em suốt trình thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn thầy khoa, nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho em thời gian học tập thực đề tài Bên cạnh đó, em xin chân thành cảm ơn thầy Nguyễn Văn Din thầy Đoàn Văn Dương tạo điều kiện cho em sử dụng phịng thí nghiệm thiết bị cần thiết để em hồn thành tốt đề tài Em xin chân thành cảm ơn thầy Khoa Hóa – khu D – trường ĐH Bách Khoa Đà Nẵng, đài khí tượng thủy văn khu vực Trung Trung Bộ số 660 Trưng Nữ Vương, Quận Hải Châu, TP Đà Nẵng tạo điều kiện giúp đỡ em hoàn thành đề tài Trong q trình làm khóa luận, thân có nhiều cố gắng bước đầu làm quen với việc nghiên cứu khoa học nên khó tránh khỏi hạn chế, thiếu sót Vì em mong nhận đóng góp ý kiến q thầy giáo bạn để khóa luận hồn chỉnh Đà Nẵng, ngày … tháng … năm 2017 Sinh viên SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN 13 MỞ ĐẦU .1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu .1 Đối tượng nghiên cứu .2 Nội dung nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu 5.1 Phương pháp nghiên cứu lí thuyết .2 5.2 Phương pháp thực nghiệm Bố cục đề tài CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 1.1 Sơ lược họ Cà Solanaceae [7], [8] 1.2 Giới thiệu cà gai leo 1.2.1 Tên gọi [9] 1.2.2 Phân loại khoa học [9] 1.2.3 Đặc điểm thực vật học [3], [10] 1.2.4 Phân bố 1.2.5 Đặc điểm sinh thái 1.3 Phân biệt cà gai leo cà độc dược [3], [11] 1.4 Một số nghiên cứu thành phần hóa học cà gai leo [12] .7 1.5 Công dụng cà gai leo [1], [15] 10 1.5.1 Kinh nghiệm sử dụng cà gai leo dân gian 10 1.5.2 Các nghiên cứu tác dụng cà gai leo 11 1.6 Các sản phẩm thuốc làm từ cà gai leo có mặt thị trường 12 CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 Nguyên liệu, hóa chất, dụng cụ 13 2.1.1 Nguyên liệu 13 2.1.2 Thiết bị - dụng cụ 13 SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Khóa luận tốt nghiệp 2.1.3 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Hóa chất 13 2.2 Nghiên cứu thực nghiệm .14 2.3 Các phương pháp xác định tiêu hóa lí .15 2.3.1 Độ ẩm [18] 15 2.3.2 Xác định hàm lượng tro [18], [6] 16 2.3.3 Xác định hàm lượng số kim loại nặng 17 2.4 Phương pháp khảo sát điều kiện chiết hợp chất hữu từ cà gai 17 2.4.1 Cơ sở lí thuyết chung 17 2.4.2 Phương pháp chiết cà gai leo 19 2.4.3 Khảo sát thời gian chiết thích hợp dung mơi .20 2.5 Định tính nhóm hợp chất có cà gai leo [4] 20 2.5.1 Định tính alkaloid 20 2.5.2 Định tính flavonoid .21 2.5.3 Định tính coumarin .21 2.5.4 Định tính saponin 21 2.5.5 Định tính đường khử .22 2.5.6 Định tính steroid 22 2.5.7 Định tính poliphenol .22 2.6 Xác định thành phần hóa học có cà gai leo .22 2.6.1 Lí thuyết chung [19] .22 2.6.2 Phương pháp xác định thành phần hóa học có 24 2.7 Thử hoạt tính kháng sinh .24 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 25 3.1 Kết xác định số tiêu hóa lý bột cà gai leo 25 3.1.1 Độ ẩm 25 3.1.2 Hàm lượng tro .25 3.1.3 Xác định hàm lượng kim loại .26 3.2 Kết khảo sát thời gian chiết phương pháp chiết Soxhlet .26 3.2.1 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi n-hexane 26 SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân 3.2.2 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi chloroform .27 3.2.3 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi ethyl acetate .28 3.3 Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết cà gai leo 29 3.4 Kết xác định thành phần hóa học có cà gai leo 30 3.4.1 Dung môi n-hexane .30 3.4.2 Dung môi Chloroform 32 3.4.3 Dung môi Ethyl acetate .35 3.4.4 Nhận xét 37 3.5 Kết thử hoạt tính kháng sinh 38 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 Kết luận 39 Kiến nghị 40 PHỤ LỤC 43 SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt AAS GC-MS Tên Quang phổ hấp thụ nguyên tử Sắc kí khí ghép khối phổ DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu bảng 1.1 STT Tên bảng Trang Phân loại khoa học họ Cà Solanaceae 1.2 Phân biệt cà gai leo cà độc dược 3.1 Kết khảo sát độ ẩm thân cà gai leo 25 3.2 Kết khảo sát hàm lượng tro thân cà gai leo 25 3.3 Kết khảo sát hàm lượng số kim loại thân cà gai leo 26 3.4 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi n-hexane 26 3.5 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi chloroform 27 3.6 Kết khảo sát thời gian chiết dung môi ethyl acetate 28 3.7 Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết thân cà gai leo 29 10 3.8 Thành phần hoá học dịch chiết nhexane thân cà gai leo 30 SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 11 3.9 Thành phần hoá học dịch chiết Chloroform thân cà gai leo 32 12 3.10 Thành phần hoá học dịch chiết Ethyl acetate thân cà gai leo 35 13 3.11 Kết đo hoạt tính kháng sinh 38 DANH MỤC CÁC HÌNH STT Số hiệu hình 1.1 Thân cà gai leo 1.2 Quả cà gai leo 1.3 Hoa cà gai leo 1.4 Cao dẻo hoà tan cà gai leo 12 1.5 Giải độc gan Bảo An Khang 12 1.6 12 2.1 2.2 Trà túi lọc cà gai leo Thân cà gai leo sau rửa sạch, phơi khô Bột cà gai leo 2.3 18 10 3.1 11 3.2 12 3.3 Cấu tạo chiết Soxhlet Sắc kí đồ GC-MS thành phần hoá học hợp chất dịch chiết n-hexane thân cà gai leo Sắc kí đồ GC-MS thành phần hoá học hợp chất dịch chiết chloroform thân cà gai leo Sắc kí đồ GC-MS thành phần hoá học hợp chất dịch chiết ethyl acetate thân cà gai leo SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Tên hình Trang 13 13 31 34 36 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khối lượng cao chiết (gam) Khóa luận tốt nghiệp 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.752 0.79 0.796 0.653 Khối lượng cao chiết (gam) 0.402 10 12 Thời gian chiết (giờ) Biều đồ 3.3 Ảnh hưởng thời gian chiết dung môi ethyl acetate Nhận xét: Qua kết bảng 3.5 biểu đồ 3.3 ta thấy, thời gian chiết tăng khối lượng cao chiết thu nhiều Tuy nhiên từ đến 10 giờ, khối lượng cao chiết lại tăng chậm Nguyên nhân tăng thời gian chiết, cấu tử có cà gai leo hịa tan dung mơi nhiều Chiết lâu hàm lượng cấu tử có cao chiết tăng dẫn đến khối lượng cao chiết tăng lên Đến lúc đó, cấu tử hịa tan gần hết dung mơi khối lượng cao chiết tăng khơng đáng kể có xu hướng không đổi Như thời gian chiết tối ưu dung môi ethyl acetate 3.3 Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết cà gai leo Sử dụng mẫu dịch chiết thu sau ngâm mẫu 24 để định tính nhóm hợp chất có với dung mơi Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết thân cà gai leo.trình bày bảng 3.7 Bảng 3.7 Kết định tính nhóm hợp chất có dịch chiết thân cà gai leo STT Nhóm chất Saponin Alkaloid Thuốc thử đặc hiệu Phản ứng tạo bọt Mayer Wagner SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Hiện tượng Kết Kết luận sơ Tạo cột bọt bền + Có Kết tủa trắng Kết tủa nâu ++ + Có Trang 29 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp Phản ứng đóng Tạo dung dịch đục mở vòng lacton 1% NaOH Dung dịch màu vàng /ethanol Dung dịch màu đỏ H2SO4 đậm thẫm đặc Coumarin Flavonoid Đường khử Fehling A Fehling B Polyphenol Dung dịch FeCl3 5% Steroid Ghi chú: Dấu Kết tủa đỏ gạch Dung dịch không chuyển sang màu xanh thẫm Thuốc thử Dung dịch chuyển Salkowski sang màu đỏ đậm (+): Phản ứng dương tính + Có ++ Có ++ ++ Có - Khơng có ++ Có (++): Phản ứng dương tính rõ (+++): Phản ứng dương tính rõ (-): Khơng có Nhận xét: Sơ kết luận thân cà gai leo có chứa hoạt chất: Alkaloid, Flavonoid, saponin, đường khử , steroid 3.4 Kết xác định thành phần hóa học có cà gai leo 3.4.1 Dung mơi n-hexane Bảng 3.8 Thành phần hoá học dịch chiết n-hexane thân cà gai leo Peak TR Base m/z Area % Name 13,78 278 0,67 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol; C20H40O 14,22 220 0,34 2,4-difluorobenzene, 1benzyloxy; C13H10F2O SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Structure Trang 30 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 16,09 256 3,44 n-hexadecanoic acid; C16H32O2 19,32 294 1,32 9,12-octadecadienoic acid, methyl ester; C19H40O 19,95 284 0,98 Octadecanoic acid; C18H36O2 40,94 412 1,44 Stigmasterol; C29H48O 41,68 414 2,05 𝛽 − sitosterol; C29H50O Hình 3.4 Sắc kí đồ GC-MS thành phần hoá học hợp chất dịch chiết nhexane thân cà gai leo Nhận xét: Qua bảng 3.8 thấy, phương pháp GC – MS định danh chất có dịch chiết n-hexane thân cà gai leo Thành phần hóa học chủ yếu có dịch chiết rễ cà gai leo axit hữu cơ, dẫn xuất SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 31 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp phenol, phytosterol Các cấu tử có hàm lượng < 5% nhexadecanoic acid (3,44%), 𝛽 − sitosterol (2,05%), stigmasterol (1,44%), 9,12octadecadienoic acid, methyl ester (1,32%), octadecanoic acid (0,98%), 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (0,67%), 2,4-difluorobenzene, 1-benzyloxy (0,34%) 3.4.2 Dung môi Chloroform Bảng 3.9 Thành phần hoá học dịch chiết Chloroform thân cà gai leo Peak TR 4,45 144 37,08 1,4-dioxane-2,5dione-3,6-dimethyl; C6H8O4 6,24 89 2,97 L(+)Milchsaeure; C3H6O3 10,39 146 0,51 Propanoid acid – – hydroxy butyl ester; C7H14O3 0,82 3,7,11,15 – tetramethyl -2hexandecen-1-ol; C20H40O 13,78 Base Area% m/z 278 Name 14,22 228 2,09 Benzoic acid, – hydroxy-, phenylmethyl ester; C14H12O3 16,14 256 11,82 n-hexadecanoid acid; C16H32O2 SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Structure Trang 32 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 19,37 280 8,43 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z); C18H32O2 19,98 284 6,09 Octadecanoic acid; C18H36O2 29,92 200 0,47 Butyl – – methyl heptanoate; C12H24O2 10 36,74 323 0,59 Propionylpromazine; C20H24N2OS 11 40,93 412 1,93 Stigmasterol; C29H48O 12 41,68 414 3,91 𝛽 − Sitosterol; C29H50O SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 33 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 13 42,76 207 1,39 5-nitro-2,3-dihydro phthalazine -1,4dione; C8H5N3O4 Hình 3.2 Sắc kí đồ GC-MS thành phần hoá học hợp chất dịch chiết chloroform thân cà gai leo Nhận xét: Qua bảng 3.9 thấy, phương pháp GC – MS định danh 13 chất có dịch chiết chloroform thân cà gai leo Thành phần hóa học chủ yếu có dịch chiết rễ cà gai leo axit hữu cơ, dẫn xuất phenol, phytosterol Các cấu tử có hàm lượng ≥ 5% bao gồm 1,4-dioxane2,5-dione-3,6-dimethyl (37,08%), n – hexadecanoic acid (11,82%), 9,12 – octadecanoic acid (z,z)- (8,43%), octadecanoic acid (6,09%) Các cấu tử cịn lại có hàm lượng ≤ 5% bao gồm 𝛽 − Sitosterol (3,91%), L(+)Milchsaeure (2,97%), benzoic acid, – hydroxy phenylmethyl ester (2,09%), stigmasterol (1,93%), SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 34 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 3.4.3 Dung môi Ethyl acetate Bảng 3.10 Thành phần hoá học dịch chiết Ethyl acetate thân cà gai leo Peak TR 2,66 Base m/z 211 Area % 3,37 Name 2-azido-2,4,4,6,6pentamethylheptane; C12H25N3 1,2,3-propanetriol, 1-acetate; C5H10O4 3,92 117 4,42 19,32 67 9,1215,08 octadecadienoic acid (Z,Z); C18H32O2 19,43 234 19,94 284 40,51 650 18,07 13,51 7,27 SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Structure Cis,cis,cis-7,10,13hexadecatrienal; C16H26O Octadecanoic acid; C18H36O2 Cholest-5-en-3-ol,9octadeceonate, (Z); C45H78O2 Trang 35 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp 40,94 412 12,60 Stigmasterol; C29H48O 41,69 332 11,88 Adrographolide; C20H30O5 Hình 3.3 Sắc kí đồ GC-MS thành phần hố học hợp chất dịch chiết ethyl acetate thân cà gai leo Nhận xét: Qua bảng 3.10 thấy, phương pháp GC – MS định danh chất có dịch chiết ethyl acetate thân cà gai leo Thành phần SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 36 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp hóa học chủ yếu có dịch chiết rễ cà gai leo axit hữu cơ, dẫn xuất phenol, phytosterol Các cấu tử có hàm lượng ≥ 5% bao gồm cis,cis,cis7,10,13-hexadecatrienal (18,07%), 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z) (15,08%), octadecanoic acid (13,51%), stigmasterol (12,60%), adrographolide (11,88%) Các cấu tử cịn lại có hàm lượng ≤ 5% bao gồm cholest-5-en-3-ol,9-octadeceonate, (Z) (7,27%), 1,2,3-propanetriol, 1-acetate (4,42%), 2-azido-2,4,4,6,6- pentamethylheptane (3,37%) 3.4.4 Nhận xét Từ kết thể ba bảng trên, định danh cấu tử dịch chiết n-hexane, cấu tử dịch chiết ethyl acetate 13 cấu tử dịch chiết chloroform thân cà gai leo Thành phần hoá học chủ yếu acid hữu n-hexandecanoic acid, octadecanoic acid, phytosterol β − sitosterol, stigmasterol, 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (hay gọi phytol) có hoạt tính sinh học cao Có thể nhận thấy so với dịch chiết n-hexane ethyl acetate , dịch chiết chloroform cà gai leo có nhiều cấu tử hàm lượng cấu tử có hoạt tính sinh học thấp dịch chiết ethyl acetate Stigmasterol dịch chiết chloroform chiếm 1,93% stigmasterol dịch chiết ethyl acetate chiếm 12,60% Tuy nhiên dịch chiết chloroform chứa cấu tử có hoạt tính sinh học stigmasterol; β − Sitosterol; 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (hay gọi phytol), trong dịch chiết ethyl acetate chứa cấu tử stigmasterol Stigmasterol, β – sitosterol phyltol phytosterol có tác dụng chống oxi hóa, giảm cholesterol máu làm tăng hàm lượng chất HDL – C (high density lipid – cholesterol) thành phần quan trọng để bảo vệ tim mạch, phòng chống xơ vữa động mạch, tăng sức đề kháng cho thể Các nghiên cứu stigmasterol chất cịn có tác dụng phịng chống ung thư ung thư tuyến tiền liệt, ung thư vú, ung thư ruột già, 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (hay cịn gọi phyltol) có tác dụng chống oxi hố, có khả loại bỏ gốc tự nguy hiểm tất SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 37 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp tế bào mô, từ DNA đến protein chất béo Ngồi phytol cịn có hoạt tính như: tổng hợp vitamin E, K, chữa rắn cắn, chống viêm nhiễm, tăng hệ miễn dịch tác nhân làm giảm phát triển ung thư buồng trứng, có khả kháng khuẩn 3.5 Kết thử hoạt tính kháng sinh Bột cà gai leo tiến hành chiết với dung môi Chloroform thời gian Cô đuổi dung môi thu cao chiết Gửi mẫu chiết tới phịng thử hoạt tính sinh học – Viện hố học, 18 – Hoàng Quốc Việt – c Cầu Giấy – Hà Nội Kết thử hoạt tính kháng sinh trình bày bảng 3.11 Bảng 3.11 Kết thử hoạt tính kháng sinh Giá trị IC50 chủng (µg/ml) Tên Gram (+) Gram (-) Nấm mẫu Staphylococcus Bacillus Lactocillus Salmonella Escherichia Pseudomnas Candida aureus subtis fermentum enterica coli aeruginosa albican Cà gai >128 >128 >128 >128 >128 >128 >128 leo Theo kết cho thấy dịch chiết cà gai leo khơng có hoạt tính kháng chủng vi sinh vật kiểm định nồng độ < 128 µg/ml SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 38 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua q trình nghiên cứu thực nghiệm, tơi thu kết sau:  Độ ẩm trung bình bột cà gai leo 8,920%  Hàm lượng tro trung bình bột cà gai leo 5.028%  Hàm lượng kim loại nặng: Pb 7,489.10-4mg/l, Cr 0,49129mg/l, As 0,60409 mg/l, Hg 0,00696  Thời gian chiết tối ưu cà gai leo: Dung môi n-hexane giờ, dung môi chloroform giờ, dung môi ethyl acetat  Định tính nhóm hợp chất xác định nhóm hợp chất có như: alkaloid, đường khử, steroid, flavonoid  Bằng phương pháp GC - MS định danh thành phần hóa học số hợp chất có dịch chiết: ➢ Dung môi n-hexane: n-hexadecanoic acid (3,44%), 𝛽 − sitosterol (2,05%), stigmasterol (1,44%), 9,12-octadecadienoic acid, methyl ester (1,32%), octadecanoic acid (0,98%), 3,7,11,15 – tetramethyl -2- hexandecen-1-ol (0,67%), 2,4-difluorobenzene, 1-benzyloxy (0,34%) ➢ Dung môi Chloroform: 1,4-dioxane-2,5-dione-3,6-dimethyl (37,08%), n – hexadecanoic acid (11,82%), 9,12 – octadecanoic acid (z,z)- (8,43%), octadecanoic acid (6,09%) Các cấu tử cịn lại có hàm lượng ≤ 5% bao gồm 𝛽 − Sitosterol (3,91%), L(+)Milchsaeure (2,97%), benzoic acid, – hydroxy phenylmethyl ester (2,09%), stigmasterol (1,93%) ➢ Dung môi ethyl acetate: 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z) (18,88%), cis,cis,cis-7,10,13-hexadecatrienal (18,07%), octadecanoic acid (13,51%), stigmasterol (12,60%) Các cấu tử cịn lại có hàm lượng ≤ 5% bao gồm cholest-5en-3-ol,9-octadeceonate, (Z) (7,27%), 1,2,3-propanetriol, 1-acetate (4,42%), 2azido-2,4,4,6,6-pentamethylheptane (3,37%) SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 39 Khóa luận tốt nghiệp GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Kiến nghị  Tiếp tục nghiên cứu chiết tách thành phần hóa học cà gai leo dung mơi chiết khác để tìm dung môi tối ưu  Tiếp tục nghiên cứu chiết tách phân lập cấu tử có hoạt tính sinh học cao có cà gai leo để ứng dụng vào cơng tác chăm sóc sức khỏe  Khảo sát hoạt tính sinh học cà gai leo  Tiếp tục nghiên cứu cà gai leo địa phương khác SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 40 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Y Tế (2010), Dược Điển Việt Nam IV, NXB Y học, Hà Nội [2] Bộ Y tế (2011), “Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia giới hạn ô nhiễm kim loại nặng thực phẩm”, tr 4-8 [3] Đỗ Tất Lợi (2003), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học Hà Nội, tr 546 [4] Nguyễn Kim Phụng (2007), Phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ, NXB ĐH Quốc Gia TP.HCM, tr 80-148 [5] Nguyễn Cẩm Hà (2014), “Nghiên cứu sàng lọc squalene từ số chủng vi tảo biển phân lập Việt Nam”, Luận văn thạc sĩ Sinh học, tr – 11 [6] Trường Cao đẳng Nguyễn Tất Thành (2009), Giáo trình thực hành trường Đại học Nguyễn Tất Thành, Khoa dược, tr 7-9 Internet [7] https://en.wikipedia.org/wiki/Solanaceae [8] http://www.botanyvn.com/cnt.asp?param=edir&v=Solanaceae&list=familia [9] http://www.botanyvn.com/cnt.asp?param=edir&v=Solanum%20procumbens &list=s pecies [10] http://camnangcaytrong.com/cay-ca-gai-leo-cd48.html [11] https://vi.wikipedia.org/wiki/C%C3%A0_%C4%91%E1%BB%99c_d%C6% B0%E1%BB%A3c [12] http://thaoduocminhtam.com/cay-thuoc-vi-thuoc/ca-gai-leo- solanumprocumbens-lour.html [13] http://tratruongsinhthang.com/tam-quan-trong-cua-alkaloid-trong-duoc-lieu [14] https://vi.wikipedia.org/wiki/Ancaloit [15] http://www.cagaileo.vn/tac-dung-cua-cay-ca-gai-leo-1.html SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 41 Khóa luận tốt nghiệp [16] GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân http://thaoduoccagaileo.com/vi/2016/06/13/suu-tam-bo-xung-cong-dung- itduoc-nhac-toi-cua-ca-gai-leo/ [17] http://agarwood.org.vn/ca-gai-leo-chua-viem-gan-110.html [18] http://www.vietpaper.com.vn/cong-nghe/274-xac-nh m phng-phap-sy- khotcvn-18672001.html [19] www.impe-qn.org.vn/impe- qn/vn/portal/InfoDetail.jsp?area=58&cat=1092&ID=2115 [20] http://suckhoe.vnexpress.net/tin-tuc/khoe-dep/tham-my/tinh-chat-tu-hoa- cucgiup-bao-ve-da-2327159.html [21] https://en.wikipedia.org/wiki/Stigmasterol [22] https://hellobacsi.com/thuoc/beta-sitosterol/ SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 42 GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân Khóa luận tốt nghiệp PHỤ LỤC Kết đo hoạt tính kháng sinh SVTH: Nguyễn Thị Văn Thảo Trang 43 ... rõ thành phần hóa học cà gai leo thực đề tài ? ?Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học cà gai leo? ?? Mục đích nghiên cứu  Xây dựng quy trình chiết tách dung mơi hữu  Định danh thành phần. ..ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA  Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết cà gai leo (Solanum hainanense hance) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP... máy để nhận dạng chúng, nhà nghiên cứu xác định nồng độ thành phần hóa chất 2.6.2 Phương pháp xác định thành phần hóa học có Thành phần hóa học có cà gai leo xác định phương pháp sắc ký khí ghép