Sàng lọc và gây nhiễm một số loài nấm ngoại cộng sinh thu thập từ rừng phòng hộ đầu nguồn đa nhim trên cây thông ba lá pinus kesiya

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA - PHẠM HOÀNG PHI PHỤNG SÀNG LỌC VÀ GÂY NHIỄM MỘT SỐ LOÀI NẤM NGOẠI CỘNG SINH THU THẬP TỪ RỪNG PHÒNG HỘ ĐẦU NGUỒN ĐA NHIM TRÊN CÂY THƠNG BA LÁ Pinus kesiya Chun ngành: Cơng nghệ Sinh học Mã số: 60420201 LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, tháng 01 năm 2021 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA – ĐHQG – HCM Cán hướng dẫn khoa học 1: TS Phạm Nguyễn Đức Hoàng (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Cán hướng dẫn khoa học 2: PGS TS Lê Thị Thủy Tiên (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Cán chấm nhận xét 1: PGS TS Phan Thị Phượng Trang (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Cán chấm nhận xét 2: TS Nguyễn Tiến Dũng (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Luận văn thạc sĩ bảo vệ Trường Đại học Bách Khoa, ĐHQG Tp HCM ngày 26 tháng 01 năm 2021 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị Hội đồng chấm bảo vệ luận văn thạc sĩ) Chủ tịch: PGS TS Nguyễn Đức Lượng Thư ký: TS Huỳnh Ngọc Oanh Phản biện 1: PGS TS Phan Thị Phượng Trang Phản biện 2: TS Nguyễn Tiến Dũng Ủy viên: PGS TS Lê Thị Thủy Tiên Xác nhận Chủ tịch Hội đồng đánh giá LV Trưởng Khoa quản lý chuyên ngành sau luận văn sửa chữa (nếu có) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG TRƯỞNG KHOA ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP.HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: Phạm Hoàng Phi Phụng MSHV: 1670718 Ngày, tháng, năm sinh: 22/09/1993 Nơi sinh: Bình Dương Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Mã số : 60420201 TÊN ĐỀ TÀI: Sàng lọc gây nhiễm số lồi nấm ngoại cộng sinh thu thập từ rừng phịng hộ đầu nguồn Đa Nhim thông ba Pinus kesiya NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: Thu thập phân lập thể loài nấm ngoại cộng sinh khu rừng thông ba Pinus kesiya thuộc rừng phòng hộ đầu nguồn Đa Nhim Định danh chủng nấm phân lập thành công phương pháp sinh học phân tử chọn loài nấm tiềm cho mơ hình gây nhiễm Xây dựng phát sinh lồi, mơ tả hình thái để định danh xác đến lồi chủng nấm chọn Khảo sát sinh lý (điều kiện nuôi cấy) chủng nấm chọn xây dựng mô hình gây nhiễm nấm lên thơng Pinus kesiya NGÀY GIAO NHIỆM VỤ : 10/02/2020 NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ : 03/01/2021 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN : TS Phạm Nguyễn Đức Hoàng, PGS TS Lê Thị Thủy Tiên Tp HCM, ngày 18 tháng 01 năm 2021 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS Phạm Nguyễn Đức Hồng CHỦ NHIỆM BỘ MƠN ĐÀO TẠO PGS.TS Lê Thị Thủy Tiên PGS.TS Lê Thị Thủy Tiên TRƯỞNG KHOA GS.TS Phan Thanh Sơn Nam i LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy Phạm Nguyễn Đức Hồng nhiệt tình giúp đỡ, dạy cho em kiến thức, kinh nghiệm, kỹ thuật nghiên cứu định hướng cho em suốt thời gian thực đề tài Em gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Lê Thị Thủy Tiên ln quan tâm, theo dõi góp ý cho em nhiều suốt thời gian thực luận văn Em xin cảm ơn tất Thầy, Cô môn Công nghệ sinh học – Khoa Kỹ thuật Hóa học truyền đạt cho em kiến thức khoa học quý báu suốt năm em ngồi ghế giảng đường Xin gửi lời cảm ơn đến anh chị, bạn em Viện Nấm Công nghệ sinh học tạo điều kiện sở vật chất, thiết bị kỹ thuật ln nhiệt tình góp ý chia sẻ kinh nghiệm trình thực luận văn Cuối cùng, muốn gửi lời cảm ơn đến gia đình ln bên cạnh, tin tưởng nguồn động lực lớn để hồn thành luận văn ii TÓM TẮT LUẬN VĂN Ứng dụng kỹ thuật công nghệ sinh học để gây nhiễm nhân tạo loài nấm ngoại cộng sinh lên trồng nhằm hỗ trợ công tác trồng rừng nhiều nhà khoa học khai thác giới Trong nghiên cứu này, thu thập phân lập thể lồi nấm ngoại cộng sinh tìm thấy khu vực trồng thông ba Pinus kesiya thuộc rừng phòng hộ đầu nguồn Đa Nhim (Đà Lạt), chọn hai loài nấm tiềm Suillus luteus Scleroderma sinnamariense, tiến hành khảo sát điều kiện nuôi cấy xây dựng mơ hình gây nhiễm nhân tạo lên thông Pinus kesiya tuần tuổi Kết nghiên cứu cho thấy ảnh hưởng tích cực từ hai loài nấm lên liệu tăng trưởng chủ Sau 12 tuần gây nhiễm nấm lên thông con, tất gây nhiễm xuất cấu trúc xâm nhiễm nấm đầu chóp rễ Kết tiền đề cho nghiên cứu sâu tiến đến việc ứng dụng kỹ thuật gây nhiễm nấm ngoại cộng sinh lên thông phục vụ cho công tác trồng rừng SUMMARY There were many experiments using biological technique for artificial innoculation of a host plant with specific ectomycorrhizal fungi (EMF) in plantation strategies over the world In this research, we collected and isolated the ectomycorrhizal sporocaps found in plots of natural forest of Pinus kesiya in Da Nhim Forest Enterprise (Da Lat), then chose two species – Suillus luteus and Scleroderma sinnamariense for innoculation to 7-week-old P kesiya seedlings Identification of these two species were based on morphology and phylogenetic analysis In this research, we also report the optimum culture conditions of S luteus and S sinnamariense The results show that both of these EMF species had positive effects on plants productivity comparing with non-innoculated ones After 12 weeks of innoculation with S luteus and S sinnamariense, all the roots of inoculated seedlings appeared structures of EMF colonisation This results will be the premise for EMF application in platation strategies in the future iii LỜI CAM ĐOAN Tơi tên Phạm Hồng Phi Phụng, học viên cao học ngành Cơng nghệ Sinh học, khóa 2016 đợt 2, khoa Kỹ thuật Hóa học, trường đại học Bách khoa thành phố Hồ Chí Minh, xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi thực hiện, số liệu kết nghiên cứu thực hướng dẫn khoa học TS Phạm Nguyễn Đức Hoàng Tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm kết nghiên cứu luận văn tốt nghiệp Tp Hồ Chí Minh, ngày 18 tháng 01 năm 2021 Học viên thực Phạm Hoàng Phi Phụng iv MỤC LỤC Trang phụ bìa Nhiệm vụ luận văn thạc sĩ Lời cảm ơn i Tóm tắt luận văn ii Lời cam đoan iii Mục lục iv Danh mục từ viết tắt vii Danh mục bảng ix Danh mục hình ảnh xi Mở đầu Chương Tổng quan tài liệu 1.1 Nấm rễ ngoại cộng sinh (Ectomycorrhizas) .3 1.1.1 Sơ lược nấm rễ cộng sinh (Mycorrhizas) .3 1.1.2 Sơ lược nấm rễ ngoại cộng sinh 1.1.3 Hình thái học phát triển nấm rễ ngoại cộng sinh 1.1.3.1 Hệ rễ nấm (Ectomycorrhizal roots) 1.1.3.2 Thể sinh bào tử (Reproductive structures) 1.1.4 Vai trò nấm rễ ngoại cộng sinh .13 1.2 Nấm rễ ngoại cộng sinh thông ba Pinus kesiya 14 1.2.1 Sơ lược thông ba Pinus kesiya 14 1.2.2 Một số chi nấm ngoại cộng sinh với thông ba Pinus kesiya .15 1.2.2.1 Pisolithus 15 1.2.2.2 Suillus 16 1.2.2.3 Scleroderma 17 1.2.2.4 Rhizopogon 18 1.2.2.5 Laccaria 19 1.2.2.6 Hebeloma 20 v 1.2.3 Một số nghiên cứu liên quan 21 1.2.3.1 Nghiên cứu phương pháp gây nhiễm EMF 21 1.2.3.2 Nghiên cứu EMF thuộc chi Pinus 23 Chương Vật liệu phương pháp 2.1 Sơ đồ thí nghiệm 25 2.2 Đối tượng nghiên cứu 26 2.3 Vật liệu 26 2.3.1 Hóa chất 26 2.3.2 Thiết bị 26 2.4 Phương pháp nghiên cứu 28 2.4.1 Thu thập thể nấm 28 2.4.2 Mô tả cấu trúc đại thể thể 29 2.4.3 Phân lập lưu trữ mẫu thể nấm 29 2.4.4 Định danh kỹ thuật sinh học phân tử 30 2.4.5 Mơ tả hình thái cấu trúc vi thể thể nấm .33 2.4.6 Khảo sát sinh lý nấm .34 2.4.7 Gây nhiễm nấm ngoại cộng sinh lên thông Pinus kesiya 35 Chương Kết biện luận 3.1 Thu thập phân lập mẫu thể nấm 36 3.2 Định danh sinh học phân tử chọn nấm cho mơ hình gây nhiễm 38 3.2.1 Kết giải trình tự đoạn ITS .38 3.2.2 Kết giải trình tự đoạn LSU-28S chủng 4131 5208 .42 3.2.3 Kết xây dựng phát sinh loài hai chủng nấm chọn 43 3.3 Định danh hình thái mẫu thể hai chủng nấm chọn 45 3.3.1 Chủng 4131 (Suillus sp.) 45 3.3.2 Chủng 5208 (Scleroderma sp.) .47 3.4 Khảo sát sinh lý hai chủng nấm chọn 48 3.5 Gây nhiễm Suillus luteus Scleroderma sinnamariense thông ba Pinus kesiya 52 3.5.1 Kết thu nhận thông Pinus kesiya 52 vi 3.5.2 Kết kiểm tra hình thái chóp rễ nhiễm nấm .55 Chương Kết luận kiến nghị 4.1 Kết luận 58 4.2 Kiến nghị 58 Chương Tài liệu tham khảo 59 Chương Phụ lục vii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT AA Acetylacetone AICs Akaike ATGC Alignable Tight Genomic Clusters BLAST Basic Local Alignment Search Tool CB cotton blue CIA Chloroform Isoamyl alcohol cs cộng CTAB Cetyl trimethylammonium bromide DNA Deoxyribonucleic acid dNTP Deoxynucleoside triphosphate E East ECM Ectomycorrhizas EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid EMF Ectomycorrhizal fungi GPS Global Positioning System HEPES 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid ITS Internal transcribed spacer KL Khối lượng LSU Large subunit MMN Modified Melin Norkans MYB Malt-Yeast broth N North NCBI National Center for Biotechnology Information PCR Polymerase Chain Reaction Bảng 6.5: Khối lượng sinh khối khô Suillus luteus khảo sát điều kiện nhiệt độ khác Nhiệt độ 10oC 15oC 20oC 25oC KL mẫu (g) KL mẫu thể tích (mg/ml) 0,0075 0,0069 0,0065 0,0082 0,0074 0,0089 0,0060 0,0072 0,0079 0,0049 0,0129 0,0076 0,0088 0,0143 0,0140 0,0156 0,0087 0,0190 0,0088 0,0134 0,0143 0,0282 0,0386 0,0269 0,0190 0,0180 0,0492 0,0256 0,0189 0,0176 0,0675 0,0817 0,0425 0,0965 0,0732 0,0354 0,0385 0,0885 0,0631 0,0609 0,3750 0,3450 0,3250 0,4100 0,3700 0,4450 0,3000 0,3600 0,3950 0,2450 0,6450 0,3800 0,4400 0,7150 0,7000 0,7800 0,4350 0,9500 0,4400 0,6700 0,7150 1,4100 1,9300 1,3450 0,9500 0,9000 2,4600 1,2800 0,9450 0,8800 3,3750 4,0850 2,1250 4,8250 3,6600 1,7700 1,9250 4,4250 3,1550 3,0450 Hình ảnh mẫu ni cấy Bảng 6.2 (tt): Khối lượng sinh khối khô Suillus luteus khảo sát điều kiện nhiệt độ khác KL mẫu KL mẫu Hình ảnh Nhiệt độ thể tích (g) mẫu ni cấy (mg/ml) 0,0049 0,2450 0,0067 0,3350 0,0059 0,2950 0,0056 0,2800 0,0060 0,3000 30oC 0,0028 0,1400 0,0028 0,1400 0,0036 0,1800 0,0041 0,2050 0,0031 0,1550 0,0011 0,0550 0,0012 0,0600 0,0030 0,1500 0,0033 0,1650 0,0015 0,0750 35oC 0,0031 0,1550 0,0021 0,1050 0,0023 0,1150 0,0033 0,1650 0,0038 0,1900 Bảng 6.6: Khối lượng sinh khối khô Suillus luteus khảo sát điều kiện pH khác pH KL mẫu (g) 0,0063 0,0064 0,0052 0,0069 0,0046 0,0054 0,0073 0,0056 0,0056 0,0057 0,0762 0,0664 0,0649 0,0889 0,0736 0,0646 0,1012 0,0747 0,0792 0,0423 0,1056 0,0713 0,0883 0,0860 0,1014 0,0731 0,0792 0,0533 0,0342 0,0688 0,0375 0,0309 0,0494 0,0150 0,0362 0,0373 0,0257 0,0240 0,0406 0,0216 KL mẫu thể tích (mg/ml) 0,3150 0,3200 0,2600 0,3450 0,2300 0,2700 0,3650 0,2800 0,2800 0,2850 3,8100 3,3200 3,2450 4,4450 3,6800 3,2300 5,0600 3,7350 3,9600 2,1150 5,2800 3,5650 4,4150 4,3000 5,0700 3,6550 3,9600 2,6650 1,7100 3,4400 1,8750 1,5450 2,4700 0,7500 1,8100 1,8650 1,2850 1,2000 2,0300 1,0800 Hình ảnh mẫu ni cấy Bảng 6.3 (tt): Khối lượng sinh khối khô Suillus luteus khảo sát điều kiện pH khác KL mẫu KL mẫu Hình ảnh pH thể tích (g) mẫu ni cấy (mg/ml) 0,0074 0,3700 0,0081 0,4050 0,0056 0,2800 0,0062 0,3100 0,0089 0,4450 0,0071 0,3550 0,0065 0,3250 0,0073 0,3650 0,0081 0,4050 0,0033 0,1650 0,0022 0,1100 0,0021 0,1050 0,0026 0,1300 0,0019 0,0950 0,0025 0,1250 0,0024 0,1200 0,0025 0,1250 0,0023 0,1150 0,0022 0,1100 0,0026 0,1300 0,0022 0,1100 0,0023 0,1150 0,0029 0,1450 0,0022 0,1100 0,0015 0,0750 8,5 0,0021 0,1050 0,0024 0,1200 0,0024 0,1200 0,0017 0,0850 0,0024 0,1200 Bảng 6.7: Khối lượng sinh khối khô Scleroderma sinnamariense khảo sát môi trường dinh dưỡng khác Môi trường MYB PDB MMN Ohta KL mẫu (g) 0,0017 0,0020 0,0019 0,0018 0,0020 0,0022 0,0018 0,0021 0,0021 0,0024 0,0072 0,0070 0,0067 0,0076 0,0080 0,0071 0,0071 0,0065 0,0062 0,0064 0,0049 0,0121 0,0179 0,0050 0,0051 0,0047 0,0172 0,0073 0,0050 0,0054 0,0178 0,0186 0,0201 0,0195 0,0184 0,0147 0,0232 0,0166 0,0214 0,0157 KL mẫu thể tích (mg/ml) 0,0850 0,1000 0,0950 0,0900 0,1000 0,1100 0,0900 0,1050 0,1050 0,1200 0,3600 0,3500 0,3350 0,3800 0,4000 0,3550 0,3550 0,3250 0,3100 0,3200 0,2450 0,6050 0,8950 0,2500 0,2550 0,2350 0,8600 0,3650 0,2500 0,2700 0,8900 0,9300 1,0050 0,9750 0,9200 0,7350 1,1600 0,8300 1,0700 0,7850 Hình ảnh mẫu ni cấy Bảng 6.8: Khối lượng sinh khối khô Scleroderma sinnamariense khảo sát điều kiện nhiệt độ khác Nhiệt độ 10oC 15oC 20oC 25oC KL mẫu (g) KL mẫu thể tích (mg/ml) 0,0027 0,0021 0,0026 0,0021 0,0022 0,0025 0,0025 0,0022 0,0027 0,0025 0,0032 0,0034 0,0034 0,0019 0,0023 0,0026 0,0034 0,0035 0,0030 0,0021 0,0095 0,0078 0,0110 0,0092 0,0134 0,0098 0,0130 0,0072 0,0101 0,0141 0,0260 0,0233 0,0201 0,0217 0,0168 0,0192 0,0209 0,0157 0,0326 0,0234 0,1350 0,1050 0,1300 0,1050 0,1100 0,1250 0,1250 0,1100 0,1350 0,1250 0,1600 0,1700 0,1700 0,0950 0,1150 0,1300 0,1700 0,1750 0,1500 0,1050 0,4750 0,3900 0,5500 0,4600 0,6700 0,4900 0,6500 0,3600 0,5050 0,7050 1,3000 1,1650 1,0050 1,0850 0,8400 0,9600 1,0450 0,7850 1,6300 1,1700 Hình ảnh mẫu ni cấy Bảng 6.5 (tt): Khối lượng sinh khối khô Scleroderma sinnamariense khảo sát điều kiện nhiệt độ khác KL mẫu KL mẫu Hình ảnh Nhiệt độ thể tích (g) mẫu ni cấy (mg/ml) 0,0122 0,6100 0,0364 1,8200 0,0269 1,3450 0,0123 0,6150 0,0273 1,3650 30oC 0,0222 1,1100 0,0098 0,4900 0,0138 0,6900 0,0133 0,6650 0,0106 0,5300 0,0032 0,1600 0,0015 0,0750 0,0023 0,1150 0,0007 0,0350 0,0021 0,1050 35oC 0,0012 0,0600 0,0020 0,1000 0,0020 0,1000 0,0021 0,1050 0,0017 0,0850 Bảng 6.9: Khối lượng sinh khối khô Scleroderma sinnamariense khảo sát điều kiện pH khác pH KL mẫu (g) 0,0108 0,0143 0,0138 0,0201 0,0092 0,0124 0,0031 0,0069 0,0114 0,0146 0,0227 0,0192 0,0233 0,0179 0,0208 0,0162 0,0158 0,0153 0,0237 0,0202 0,0179 0,0268 0,0214 0,0244 0,0219 0,0264 0,0207 0,0156 0,0180 0,0213 0,0225 0,0132 0,0206 0,0188 0,0266 0,0165 0,0132 0,0272 0,0179 0,0118 KL mẫu thể tích (mg/ml) 0,5400 0,7150 0,6900 1,0050 0,4600 0,6200 0,1550 0,3450 0,5700 0,7300 1,1350 0,9600 1,1650 0,8950 1,0400 0,8100 0,7900 0,7650 1,1850 1,0100 0,8950 1,3400 1,0700 1,2200 1,0950 1,3200 1,0350 0,7800 0,9000 1,0650 1,1250 0,6600 1,0300 0,9400 1,3300 0,8250 0,6600 1,3600 0,8950 0,5900 Hình ảnh mẫu ni cấy Bảng 6.6 (tt): Khối lượng sinh khối khô Scleroderma sinnamariense khảo sát điều kiện pH khác KL mẫu KL mẫu Hình ảnh pH thể tích (g) mẫu nuôi cấy (mg/ml) 0,0116 0,5800 0,0121 0,6050 0,0146 0,7300 0,0106 0,5300 0,0119 0,5950 0,0085 0,4250 0,0097 0,4850 0,0288 1,4400 0,0104 0,5200 0,0040 0,2000 0,0027 0,1350 0,0026 0,1300 0,0025 0,1250 0,0020 0,1000 0,0021 0,1050 0,0013 0,0650 0,0031 0,1550 0,0029 0,1450 0,0021 0,1050 0,0017 0,0850 0,0019 0,0950 0,0015 0,0750 0,0033 0,1650 0,0022 0,1100 0,0022 0,1100 8,5 0,0015 0,0750 0,0020 0,1000 0,0042 0,2100 0,0027 0,1350 0,0024 0,1200 Bảng 6.10: Dữ liệu tăng trưởng thông Pinus kesiya sau 12 tuần gây nhiễm với Suillus luteus Mã số Chiều cao thân (cm) Chiều dài rễ (cm) KL sinh khối tươi (g) KL sinh khối khô (g) Độ ẩm sinh khối (%) Số chóp rễ nhiễm nấm 01 14,3 6,8 0,4682 0,0919 80,37 110 02 15,6 6,0 0,4457 0,0692 84,47 72 03 10,7 4,5 0,2851 0,0491 82,78 58 04 12,6 8,2 0,4221 0,0677 83,96 36 05 15,3 5,4 0,3924 0,0644 83,59 48 06 15,0 13,9 0,4714 0,0639 86,44 128 07 12,3 8,6 0,2412 0,0418 82,67 42 08 13,4 5,5 0,3534 0,0537 84,80 142 09 11,8 4,9 0,2660 0,0450 83,08 100 10 12,7 9,7 0,3495 0,0564 83,86 166 11 14,3 9,8 0,3248 0,0595 81,68 62 12 12,6 5,2 0,3106 0,0543 82,52 136 13 15,2 8,5 0,4344 0,0656 84,90 184 14 15,7 10,6 0,4112 0,0679 83,49 44 15 9,8 7,6 0,2180 0,0344 84,22 40 Bảng 6.11: Dữ liệu tăng trưởng thông Pinus kesiya sau 12 tuần gây nhiễm với Scleroderma sinnamariense Mã số Chiều cao thân (cm) Chiều dài rễ (cm) KL sinh khối tươi (g) KL sinh khối khô (g) Độ ẩm sinh khối (%) Số chóp rễ nhiễm nấm 01 12,6 7,2 0,2876 0,0564 80,39 76 02 12,2 6,0 0,2855 0,0553 80,63 46 03 12,6 9,7 0,3711 0,0682 81,62 74 04 14,0 10,0 0,3862 0,0846 78,09 92 05 15,1 10,5 0,4740 0,0910 80,80 146 06 17,3 10,1 0,5405 0,1231 77,22 120 07 11,9 10,0 0,3103 0,0521 83,21 20 08 14,9 8,9 0,3858 0,0663 82,81 18 09 13,3 7,8 0,3812 0,0769 79,83 132 10 11,7 8,9 0,3486 0,0647 81,44 42 11 15,3 9,1 0,5365 0,0988 81,58 224 12 13,8 8,0 0,4522 0,0904 80,01 128 13 9,1 11,0 0,2049 0,0453 77,89 36 14 16,0 10,3 0,3721 0,0845 77,29 74 15 12,4 11,5 0,2553 0,0548 78,54 32 Bảng 6.12: Dữ liệu tăng trưởng thông Pinus kesiya 20 tuần tuổi không gây nhiễm nấm rễ Mã số Chiều cao thân (cm) Chiều dài rễ (cm) KL sinh khối tươi (g) KL sinh khối khô (g) Độ ẩm sinh khối 01 7,5 2,2 0,0968 0,0202 79,13 02 9,2 3,8 0,1410 0,0244 82,70 03 10,1 3,9 0,1690 0,0288 82,96 04 8,6 2,1 0,1204 0,0229 80,98 05 8,9 5,7 0,1226 0,0242 80,26 06 10,0 4,7 0,1446 0,0256 82,30 07 11,0 3,5 0,1565 0,0307 80,38 08 9,4 2,7 0,1167 0,0247 78,83 09 10,5 6,1 0,1672 0,0316 81,10 10 7,9 2,9 0,1264 0,0229 81,88 11 6,5 3,1 0,1218 0,0212 82,59 12 7,6 2,5 0,1196 0,0188 84,28 13 7,7 3,5 0,1199 0,0207 82,74 14 9,7 1,9 0,1386 0,0256 81,53 15 6,5 4,7 0,1153 0,0197 82,91 Hình 6.5: Cây thơng Pinus kesiya sau 12 tuần đồng nuôi cấy với Suillus luteus Hình 6.6: Cây thơng Pinus kesiya sau 12 tuần đồng ni cấy với Scleroderma sinnamariense Hình 6.7: Cây thông Pinus kesiya 20 tuần tuổi không gây nhiễm nấm rễ LÝ LỊCH TRÍCH NGANG Họ tên: Phạm Hoàng Phi Phụng Ngày, tháng, năm sinh: 22/09/1993 Nơi sinh: Bình Dương Địa liên lạc: 37/1 khu phố 2, phường Tân An, thành phố Thủ Dầu Một, tỉnh Bình Dương QUÁ TRÌNH ĐÀO TẠO Từ 2011 đến 2016 : Sinh viên Khoa Khoa Học Ứng Dụng – Chuyên ngành Công Nghệ Sinh Học - Trường Đại học Tôn Đức Thắng thành phố Hồ Chí Minh Từ 2016 đến nay: Học viên cao học Khoa Kỹ thuật Hóa học – Chuyên ngành Công nghệ Sinh học – Đại học Bách Khoa thành phố Hồ Chí Minh Q TRÌNH CƠNG TÁC Từ 04/2017 đến 08/2019: Cơng tác phịng Quản lý chất lượng – Công ty TNHH Naris Cosmetics Việt Nam ... sinh thu thập từ rừng phòng hộ đầu nguồn Đa Nhim thông ba Pinus kesiya? ?? với mục tiêu: - Định danh số loài nấm ngoại cộng sinh rừng thông ba Pinus kesiya thu? ??c rừng phòng hộ đầu nguồn Đa Nhim -... Nhim thông ba Pinus kesiya NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: Thu thập phân lập thể loài nấm ngoại cộng sinh khu rừng thông ba Pinus kesiya thu? ??c rừng phòng hộ đầu nguồn Đa Nhim Định danh chủng nấm phân lập... năm sinh: 22/09/1993 Nơi sinh: Bình Dương Chun ngành: Cơng nghệ Sinh học Mã số : 60420201 TÊN ĐỀ TÀI: Sàng lọc gây nhiễm số loài nấm ngoại cộng sinh thu thập từ rừng phòng hộ đầu nguồn Đa Nhim thông