Nghiên cứu phân lập chất tinh khiết trong dịch chiết n hexan của vỏ cây hoa sữa trên địa bàn thành phố đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM  TRẦN THỊ THÙY ANH NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP CHẤT TINH KHIẾT TRONG DỊCH CHIẾT n - HEXAN CỦA VỎ CÂY HOA SỮA TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC ĐÀ NẴNG, 2019 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP CHẤT TINH KHIẾT TRONG DỊCH CHIẾT n – HEXAN CỦA VỎ CÂY HOA SỮA TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG Sinh viên thực hiện: Trần Thị Thùy Anh Chuyên ngành : Hóa học MSSV : 314033151102 Lớp : 15CHD1 Người hướng dẫn : GS.TS Đào Hùng Cường ĐÀ NẴNG, 2019 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan là công triǹ h nghiên cứu của riêng em Các số liê ̣u, kế t quả nêu luâ ̣n văn là trung thực Tác giả luâ ̣n văn Trầ n Thi ̣Thùy Anh i LỜI CẢM ƠN Hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, xin chân thành cảm ơn: Cảm ơn GS.TS Đào Hùng Cường nhiệt tình hướng dẫn, giúp đỡ, cung cấp kiến thức khích lệ em suốt thời gian thực đề tài khóa luận tốt nghiệp Em thấy vô may mắn Thầy hướng dẫn em làm đề tài năm học cuối trường đại học Sư phạm Cảm ơn tất q Thầy Cơ khoa Hóa tận tình dạy dỗ em bốn năm qua để em có kiến thức hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cảm ơn chị Nguyễn Thị Như Ngọc nhiệt tình giúp đỡ, truyền thụ kinh nghiệm quý báu cho em từ ngày đầu thực đề tài ii MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục tiêu nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Đối tượng phạm vi nghiên cứu 4.1 Đối tượng .1 4.2 Hoá chất phương tiện nghiên cứu 4.2.1 Các loại hoá chất, dụng cụ 4.2.2 Các máy móc, thiết bị phân tích 4.3 Phạm vi nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu 5.1 Nghiên cứu lý thuyết 5.2 Phương pháp thực nghiệm Bố cục luận văn CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu hoa sữa 1.1.1 Đặc điểm sinh thái .4 1.1.2 Đặc tính thực vật .4 1.1.3 Công dụng vỏ hoa sữa 1.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam giới hoa 1.2.1 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 1.2.2 Tình hình nghiên cứu giới 1.3 Ancaloit 11 1.3.1 Khái niệm 11 1.3.2 Một số ancaloit vỏ hoa sữa 11 1.3.3 Tính chất chung ancaloit 11 1.3.4 Chiết tách ancaloit 12 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Nguyên liệu, hóa chất thiết bị thí nghiệm 15 2.1.1 Nguyên liệu .15 2.1.2 Hóa chất thiết bị nghiên cứu .15 2.2 Phương pháp nghiên cứu 16 2.2.1 Các phương pháp xác định tiêu hóa lí .16 2.2.2 Phương pháp chiết mẫu thực vật .18 2.2.3 Phương pháp định tính số lớp chất vỏ hoa sữa 18 2.2.4 Phương pháp phân tích vật lí 21 2.2.5 Phương pháp phân lập hợp chất 23 2.2.6 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học chất .27 2.3 Các sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm 27 2.3.1 Sơ đồ khảo sát sơ số yếu tố 27 2.3.2 Sơ đồ điều chế phân lập chất tinh khiết 28 iii CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 3.1 Xác định số số vật lý 29 3.1.1 Độ ẩm 29 3.1.2 Hàm lượng tro 29 3.1.3 Hàm lượng kim loại 30 3.2 Xác định thời gian chiết 31 3.3 Xác định lớp chất vỏ hoa sữa 31 3.4 Xác định số thành phần hóa học dịch chiết n - hexan phương pháp GC - MS 33 3.5 Hàm lượng cao chiết so với mẫu khô 36 3.6 Xác định cấu trúc hợp chất tách ASVH10 36 3.6.1 Hằng số vật lí số liệu phổ hợp chất tách .36 3.6.2 Xác định cấu trúc hợp chất tách 39 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 46 Kế t luâ ̣n 46 Kiế n nghi 46 ̣ TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 PHỤ LỤC 49 iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ASVH10: Tên hợp chất phân lập 13 C-NMR: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C - Carbon Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy DEPT: Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer ESI-MS: Phổ khối lượng phun mù điện tử - Electron Spray Ionization Mass Spectroscopy FT-IR: Phổ hồng ngoại biến đổi Fourier - Fourier Transform Infrared Spectroscopy GC-MS: Sắc kí khí ghép khối phổ - Gas Chromatography - Mass Spectrometry H-NMR: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H - Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy J, δ: Hằng số tương tác (Hz), độ dịch chuyển hóa học (ppm) Rf: Thời gian lưu - Retention factor v DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu Tên bảng bảng Trang 2.1 Hóa chất sử dụng đề tài 15 2.2 Sắc ký mỏng V8 26 3.1 Kết khảo sát độ ẩm bột nguyên liệu 29 3.2 Kết khảo sát hàm lượng tro bột nguyên liệu 30 3.3 Hàm lượng số kim loại bột nguyên liệu 30 3.4 Kết khảo sát thời gian chiết với dung môi n-hexan 31 3.5 Kết định tính lớp chất thiên nhiên vỏ hoa sữa 31 3.6 Một số thành phần hóa học dịch chiết n-hexane 33 3.7 Hàm lượng % cao chiết so với mẫu khơ 36 3.8 Phân tích phổ hồng ngoại (FT - IR) chất ASVH10 37 3.9 Dữ liệu phổ 1H - NMR chất ASVH10 37 3.10 Dữ liệu phổ 13C - NMR, DEPT chất ASVH10 38 3.11 So sánh liệu phổ NMR hợp chất ASVH10 với β - amyrin 39 vi DANH MỤC CÁC HÌNH Số hiệu Tên hình hình Trang 1.1 Cây hoa sữa 2.1 Vỏ hoa sữa 15 2.2 Mẫu gắn silicagel 24 2.3 Cột sắc ký sau nạp mẫu 25 2.4 Mẫu rắn ASVH 26 2.5 Sắc ký mỏng VH4 27 2.6 Sơ đồ khảo sát sơ số yếu tố 27 2.7 Sơ đồ điều chế phân lập chất tinh khiết 28 3.1 Sắc ký đồ GC-MS dịch chiết n-hexane vỏ hoa sữa 33 3.2 Chất ASVH10 36 3.3 Phổ hồng ngoại (FT - IR) chất ASVH1 37 3.4 Phổ 1H - NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 41 3.5 Phổ 1H - NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 (giãn từ 0.7 - 1.7) 41 3.6 Phổ 1H - NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 41 3.7 Phổ 13C - NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 42 3.8 3.9 Phổ 13C - NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 (giãn từ - 50) Phổ 13C - NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 (giãn từ 50 - 145) 43 43 3.10 Phổ DEPT hợp chất ASVH10 44 3.11 Phổ DEPT hợp chất ASVH10 (giãn từ 10 - 55 ) 44 3.12 Cấu trúc hóa học tương tác hợp chất ASVH10 45 vii MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Trong thời gian qua, hợp chất tự nhiên phân lập từ thực vật ứng dụng rộng rãi nhiều ngành công nghiệp, nông nghiệp, Việc nghiên cứu thuốc giúp cho hiểu rõ thành phần cấu trúc hóa học, hoạt tính sinh học, tác dụng dược lí thuốc Trên sở nghiên cứu tạo chất có hoạt tính sinh học cao mong muốn để làm thuốc chữa bệnh, đặc biệt bệnh nan y [3] Cây hoa sữa thường xanh đạt chiều cao lên đến 40 m Vỏ sử dụng chủ yếu y học Nó coi loại thuốc bổ, hạ sốt, chữa sốt rét, bệnh phong, bệnh da, ngứa, khối u, ung loét mãn tính, hen suyễn, viêm phế quản, suy nhược thể, tiêu chảy, kiết lỵ khó tiêu Lá sắc lên sử dụng chống lại bệnh tê phù Hạt có tác dụng kích thích tình dục tinh thần [18] Cho đến nước ta chưa có nghiên cứu mang tính thành phần, tính chất, khả ứng dụng hợp chất ancaloit có vỏ hoa sữa Với lí trên, định chọn đề tài: “Nghiên cứu phân lập chất tinh khiết dịch chiết n - hexan vỏ hoa sữa điạ bàn thành phố Đà Nẵng” nhằm góp phần nâng cao giá trị khoa học giá trị sử dụng vỏ hoa sữa y học Mục tiêu nghiên cứu - Xác định cấu trúc số hợp chất ancaloit quan trọng vỏ hoa sữa - Phân lập chất tinh khiết dịch chiết n - hexan vỏ hoa sữa - Xác định cấu trúc hợp chất phân lập Nhiệm vụ nghiên cứu - Xây dựng quy trình chiết với dung mơi n – hexan - Nghiên cứu, xác định cấu trúc số hợp chất hóa học vỏ hoa sữa - Phân lập chất tinh khiết dịch chiết n - hexan vỏ hoa sữa - Xác đinh ̣ cấ u trúc của hơ ̣p chấ t phân lâ ̣p đươ ̣c Đối tượng phạm vi nghiên cứu 4.1 Đối tượng - Vỏ hoa sữa trường Đại học Sư phạm Đà Nẵng Độ dịch chuyển hóa học Vị trí mũi cộng hưởng ( (J,Hz), ppm) proton Độ dịch chuyển hóa học Vị trí mũi cộng hưởng ( (J,Hz), ppm) proton 0.87 (3H, s) H - 29 1.55 (1H, m) H - 18 0.87 (3H, s) H - 30 1.60 (1H, m), 1.55 (1H, m) H-2 0.94 (3H, s) H - 25 1.64 (1H, m), 1.60 (1H, m) H-1 0.97 (3H, s) H - 26 1.00 (3H, s) H - 24 1.90 (1H, d, 3,5), 1.86 (1H, m) H - 11 1.14 (3H, s) H - 27 1.93 (1H, dd, 3.5, 3.5) H-9 3.20 (dd, 4.5, 11.0) H-3 5.18 (1H, t, 3.5) H - 12 1.40 (1H, m), 1.22 (1H, dt, 3.0, 3.0)  Phổ 13 1.76 (1H, ddd, 4.0, 4.0, 4.0), H - 15 1.00 (1H, m) H - 21 C - NMR DEPT (Hình 3.7→ 3.11): Phổ 13 C - NMR tín hiệu cacbon olefinic  145.22 121.75 Ngoài ra, tín hiệu δC 79.07 thuộc nhóm oxymethine (C - 3) Dữ liệu phổ 13C - DEPT cho thấy ASVH10 có nhóm –CH3, 10 nhóm >CH2, nhóm >CH–, nhóm –CH=, nhóm >CH–OH, carbon bậc (nhóm >CCH2 >CH2 >CH – OH >C< >CH– 16 17 18 19 20 27.0 32.5 47.7 46.9 31,1 >CH2 >C< >CH– >CH2 >C< 18.4 >CH2 21 37.2 >CH2 32.7 >CH2 22 34.8 >CH2 39.8 >C< 23 28.1 –CH3 47.3 >CH– 24 15.5 –CH3 10 37.0 >C< 25 15.6 –CH3 11 23.6 >CH2 26 16.8 –CH3 12 121.8 –CH= 27 26.0 –CH3 13 145.2 >C< 28 28.4 –CH3 14 41.8 >C< 29 33.4 –CH3 15 26.2 >CH2 30 23.7 –CH3 38 3.6.2 Xác định cấu trúc hợp chất tách  Phổ khối Peak ion phân tử [M+H]+ có số khối m/z = 427.3, ứng với khớ i lươ ̣ng phân tử của chấ t ASVH10 là 426 tương ứng CTPT C30H50O Peak m/z = 409.2 có cường độ mạnh, cho thấy phù hợp ASVH10 có nhóm chức ancol bậc 2: phân cắt nhóm OH  Phổ 1H - NMR, 13C - NMR DEPT So sánh độ dịch chuyển hóa học mũi peak cộng hưởng hạt nhân phổ -NMR hợp chất ASVH10 β - amyrin cho thấy trùng khớp giá trị peak cộng hưởng Dữ liệu so sánh trình bày Bảng 3.11 [12] Bảng 3.11 So sánh liệu phổ NMR hợp chất ASVH10 với β - amyrin Vị trí β - amyrin ASVH10 Vị trí C δC (CDCl3, 125Hz) 38.7 38.6 27.2 27.3 79.3 79.1 38.5 38.8 55.1 55.2 18.6 18.4 32.4 32.7 39.8 39.8 47.6 47.3 10 36.9 37.0 10 11 23.6 23.6 11 proton Β - amyrin ASVH10 δH (J, Hz) (CDCl3, 500 Hz) 1.55 (1H) 1.64 (1H, m), 1.49 (1H) 1.60 (1H, m) 1.52 (1H) 1.60 (1H, m), 1.55 (1H) 1.55 (1H, m) 3.20 (dd, 4.4, 3.20 (dd, 11.5) 4.5, 11.0) 0.71 0.73 (1H, m) 1.53 (1H), 1.54 (1H, m), 1.30 (1H) 1.41 (1H, m) 1.51 (1H, d, 4.0), 1.33 (1H, m) 1.95 39 1.84 1.93 (1H, dd, 3.5, 3.5) 1.90 (1H, d, 3.5), 1.86 (1H, m) Vị trí β - amyrin ASVH10 Vị trí C δC (CDCl3, 125Hz) 12 121.7 121.8 12 13 145.2 145.2 13 14 41.7 41.8 14 proton Β - amyrin ASVH10 δH (J, Hz) (CDCl3, 500 Hz) 5.16 5.18 (1H, t, 3.5) (t, 3.5) 1.76 (1H, ddd, 4.0, 15 26.2 26.2 15 4.0, 4.0), 1.00 (1H, m) 16 26.1 27.0 16 17 32.6 32.5 17 18 47.2 47.7 18 1.89 1.55 (1H, m) 19 46.8 46.9 19 1.59 1.52 (1H, m) 20 31.0 31.1 20 21 34.7 37.2 21 22 37.1 34.8 22 23 28.0 28.1 23 0.77s 0.79 (3H, s) 24 15.4 15.5 24 0.98s 1.00 (3H, s) 25 15.4 15.6 25 0.92s 0.94 (3H, s) 26 16.8 16.8 26 0.94s 0.97 (3H, s) 27 25.9 26.0 27 1.11s 1.14 (3H, s) 28 28.4 28.4 28 0.81s 0.83 (3H, s) 29 33.8 33.4 29 0.85s 0.87 (3H, s) 30 23.7 23.7 30 0.85s 0.87 (3H, s) 1.40 (1H, m), 1.22 1.66 (1H, dt, 3.0, 3.0)  Kết luận: Từ phân tích trên, chứng tỏ hợp chất ASVH10 sở hữu triterpene alcol có khung oleanane với nối đơi C - 12/C - 13 Đối chiếu với tài khảo [10], [11], hợp chất khẳng định 3β - hydroxylolean – 12 - ene (hay gọi β - amyrin) Công thức cấu tạo hợp chất thể Hình 3.12 40 Hình 3.4 Phổ 1H-NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 Hình 3.5 Phổ 1H-NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 (giãn từ 0.7-1.7) 41 Hình 3.6 Phổ 1H-NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 Hình 3.7 Phổ 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 42 Hình 3.8 Phổ 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 (giãn từ 0-50) Hình 3.9 Phổ 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz) hợp chất ASVH10 (giãn từ 50-145) 43 Hình 3.10 Phổ DEPT hợp chất ASVH10 Hình 3.11 Phổ DEPT hợp chất ASVH10 (giãn từ 10-55) 44 Hình 3.12 Cấu trúc hóa học hợp chất ASVH10 Theo các công trình công bố thế giới cho thấ y hợp chất 3β - hydroxylolean - 12 - ene (β - amyrin) có hoạt tính kháng khuẩn, kháng viêm, chống oxi hóa có độc tính tế bào ung thư phổi người A549 ung thư máu người HL - 60, ung thư gan người Hep3B Ngoài β - amyrin cịn có hoạt tính gây độc hại tế bào ung thư bàng quang người NTUB1 β - amyrin tham gia vào trình tổng hợp đường dẫn hợp chất có hoạt tính sinh học khác avenacine, centelloside, glycyrrhizin ginsenosides  - amyrin xem nguồn chất chuyển hóa trung gian để tạo hợp chất thực vật có hoạt tính sinh học cao phân bố thực vật [8], [14] 45 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kế t luâ ̣n Xác định thơng số hóa lý nguyên liệu: độ ẩm bột nguyên liệu vỏ hoa sữa 10.20%; hàm lượng tro 8.80%, hàm lượng kim loại nặng Cu, Pb, Zn, Cd, As nằm khoảng cho phép theo quy định tiêu chuẩn Việt Nam hàm lượng kim loại nặng tối đa cho phép dược liệu Đã định tính sơ lớp chất thường gặp thực vật phản ứng hóa học cho kết mẫu bột vỏ hoa sữa dùng nghiên cứu có 12 lớp chất alkaloid, flavonoid, steroid, đường khử, polyphenol, sterol, coumarin, saponin, polysaccarid, carotene, chất béo, iridoid Đã khảo sát thời gian chiết tối ưu với dung môi n - hexan 6h thu hàm lượng cao n - hexane 12.83% Bằng phương pháp GC - MS, định danh 22 cấu tử dịch chiết từ vỏ hoa sữa bao gồm ankan, xicloankan, ester, dẫn xuất phenol, triterpene, ancol Trong đó, triterpene α - amyrin, β - amyrin, α - lupenol, β - lupenone, lupenyl acetate hoạt chất quý có khả chống ung thư cao Đã phân lập hợp chất ASVH10 tinh Các phương pháp phổ: phổ hồng ngoại FT - IR, phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều 1H - NMR , 13 C - NMR, DEPT phổ khối ESI - MS cho phép xác định cấu trúc hợp chất phân lập Hợp chất ASVH10 3β-hydroxylolean-12-ene (β-amyrin) Hợp chất có hoạt tính sinh học tốt Đây lần chất phân lập từ vỏ hoa sữa Việt Nam Kiế n nghi ̣ Tiếp tục phân lập phân đoạn lại cao chiết n - hexane Đồng thời, thử hoạt tính sinh học chất tách được, góp phần làm tăng giá trị sử dụng loài y học Nghiên cứu phận khác hoa sữa Việt Nam, đặc biệt rễ Bởi theo thử nghiệm hoạt tính sinh học cơng bố dịch chiết từ rễ cho hoạt tính tốt 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Y tế (2009), Dược điển IV, Hà Nội [2] Bộ Y tế (2011), Thông tư 02/2011/TT-BYT - Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia giới hạn nhiễm hóa học, Hà Nội [3] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương tác giả (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội [4] Nguyễn Hữu Đĩnh, Trần Thị Đà (1999), Ứng dụng số phương pháp phổ nghiên cứu cấu trúc phân tử, Nhà xuất giáo dục [5] Nguyễn Thị Thanh Huyền (2011), Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học vỏ hoa sữa Đà Nẵng, Luận văn thạc sĩ khoa học, Đại học Đà Nẵng [6] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Các phương pháp cô lập hợp chất tự nhiên, NXB ĐHQG Tp HCM Tiếng Anh [7] Angela A Salim, Mary J Garson, and David J Craik (2004), “New Indole Alkaloids from the Bark of Alstonia scholaris ”, American Chemical Society and American Society of Pharmacognosy, 67, pp 1591 - 1594 [8] Ashutosh Sharma1, Maheep K Chahar, Mahesh C Sharma, Pradeep Parashar and Mahabeer P Dobhal (2013), “A Novel Steroid from Stem Bark of Alstonia Scholaris”, International Journal of Recent Research and Review, Vol V ,pp 2277 - 8322 [9] Chao - Min Wang, Kue - Lin Yeh , Shang - Jie Tsai , Yun - Lian Jhan and Chang - Hung Chou (2017), “Anti - Proliferative Activity of Triterpenoids and Sterols Isolated from Alstonia scholaris against Non - Small - Cell Lung Carcinoma Cells ”, Molecules, 22, pp - 13 [10] Dirsch, V.M., H Stuppner, and A.M Vollmar (1998), “The Griess assay: suitable for a bio - guided fractionation of anti - inflammatory plant extracts?”, Planta Med, 64(5), pp 423 - 436 [11] Hasandeep Singh, Rohit Arora, Saroj Arora and Balbir Singh (2017), “Ameliorative potential of Alstonia scholaris (Linn.) R.Br against chronic 47 constriction injury - induced neuropathic pain in rats”, BMC Complementary and Alternative Medicine, 17:63, pp - [12] Liliana Hernández Vázquez, Javier Palazon and Arturo Navarro - Ocaña (2012),“ThePentacyclicTriterpenesα, β - amyrins”, A Review of Sources and Biological Activities, 23, pp 487 - 497 [13] Nilubon Jong - Anurakkun, Megh Raj Bhandari, Jun Kawabata (2006), “α-Glucosidase inhibitors from Devil tree (Alstonia scholaris)”, Food Chemistry, 103, pp 1319–1323 [14] Ogwuche CE, Amupitan JO, NdukweIG and Ayo RG (2014), “Isolation and Biological Activity of the Triterpene Β - Amyrin from the Aerial Plant Parts of Maesobotrya Barteri (Baill) ” , Medicinal chemistry, vol 4, pp 729 - 733 [15] P Steve Thomas, Anil Kanaujia, Dipankar Ghosh, Rajeev Duggar & Chandra Kant Katiyar (2008), “Alstonoside, a secoiridoid glucoside from Alstonia scholaris”, Indian Journal of Chemistry, 47B, pp 1298 - 1302 [16] Tao Feng, Xiang - Hai Cai, Zhi - Zhi Du and Xiao - Dong Luo (2008), “Iridoids from the Bark of Alstonia scholaris”, Helvetica Chimica Acta, 91, pp 2247 - 2251 [17] Tao Feng, Xiang - Hai Cai, Pei - Ji Zhao, Zhi - Zhi Du, Wei -Qi Li, Xiao-Dong Luo (2009), “Monoterpenoid Indole Alkaloids from the Bark of Alstonia scholaris”, Planta Med, 75, pp 1537 - 1541 Website [18] https://indiabiodiversity.org/species/show/7455 48 PHỤ LỤC Phụ lục Phổ MS ASVH10 Phụ lục Phổ HSQC ASVH10 Phụ lục Phổ HSQC ASVH10 ( phổ giãn 1) Phụ lục Phổ HSQC ASVH10 ( phổ giãn 2) ... ĐÀ N? ??NG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM  KHÓA LU? ?N TỐT NGHIỆP NGHI? ?N CỨU PH? ?N LẬP CHẤT TINH KHIẾT TRONG DỊCH CHIẾT n – HEXAN CỦA VỎ CÂY HOA SỮA TR? ?N ĐỊA B? ?N THÀNH PHỐ ĐÀ N? ??NG Sinh vi? ?n thực hi? ?n: ... hợp chất ancaloit quan trọng vỏ hoa sữa - Ph? ?n lập chất tinh khiết dịch chiết n - hexan vỏ hoa sữa - Xác định cấu trúc hợp chất ph? ?n lập Nhiệm vụ nghi? ?n cứu - Xây dựng quy trình chiết với dung... tình dục tinh th? ?n [18] Cho đ? ?n nước ta chưa có nghi? ?n cứu mang tính thành ph? ?n, tính chất, khả ứng dụng hợp chất ancaloit có vỏ hoa sữa Với lí tr? ?n, định ch? ?n đề tài: ? ?Nghi? ?n cứu ph? ?n lập chất