Kiểm chứng mô hình gây nhiễm candida albicans âm đạo chuột nhắt trắng

BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC TP HỒ CHÍ MINH CHƢƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC KIỂM CHỨNG MƠ HÌNH GÂY NHIỄM CANDIDA ALBICANS ÂM ĐẠO CHUỘT NHẮT TRẮNG Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: KHOA Y HỌC CỔ TRUYỀN Chủ trì nhiệm vụ: ThS DS Lê Thị Lan Phƣơng ThS Phan Thị Mỹ Linh TP HỒ CHÍ MINH - 2019 BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC TP HỒ CHÍ MINH CHƢƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC KIỂM CHỨNG MƠ HÌNH GÂY NHIỄM CANDIDA ALBICANS ÂM ĐẠO CHUỘT NHẮT TRẮNG (Đã chỉnh sửa theo kết luận Hội đồng nghiệm thu ngày 19/11/2019) Cơ quan chủ quản Chủ trì nhiệm vụ (ký tên đóng dấu) (ký tên) Cơ quan chủ trì nhiệm vụ (ký tên đóng dấu) CỘNG HỒ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc TP Hồ Chí Minh, ngày tháng 11 năm 2019 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC I THÔNG TIN CHUNG Tên đề tài: Kiểm chứng mơ hình gây nhiễm Candida albicans âm đạo chuột nhắt trắng Thuộc lĩnh vực (tên lĩnh vực): Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: Lê Thị Lan Phƣơng Ngày, tháng, năm sinh: 17/10/1986 Nam/ Nữ: Nữ Học hàm, học vị: Thạc sĩ Chức danh khoa học: Chức vụ: Trƣởng phịng Thí nghiệm YDCT, Phó trƣởng BM Bào chế Đơng dƣợc, Phó trƣởng đơn vị ĐBCLGD Điện thoại: Tổ chức: Nhà riêng: Mobile: 0907748591 Fax: E-mail: ltlphuong@ump.edu.vn Họ tên: Phan Thị Mỹ Linh Ngày, tháng, năm sinh: 17/3/1990 Nam/ Nữ: Nữ Học hàm, học vị: Thạc sĩ Chức danh khoa học: Chức vụ: Nghiên cứu viên Điện thoại: Mobile: 0931101250 E-mail: phanlinh173@ump.edu.vn Tên tổ chức công tác: Khoa YHCT – ĐH Y dƣợc TP Hồ Chí Minh Địa tổ chức: 221B Hồng Văn Thụ, P8, Phú Nhuận, TP Hồ Chí Minh Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Khoa Y học cổ truyền Điện thoại: 3844 2756 - 38468938 Fax: E-mail: khoayhct@ump.edu.vn Website: yds.edu.vn Địa chỉ: 221B Hồng Văn Thụ, P8, Phú Nhuận, TP Hồ Chí Minh Tên quan chủ quản đề tài: Đại học Y Dƣợc thành phố Hồ Chí Minh II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực nhiệm vụ: - Theo Hợp đồng ký kết: từ tháng năm 2018 đến tháng năm 2019 - Thực tế thực hiện: từ tháng năm 2018 đến tháng 11 năm 2019 - Đƣợc gia hạn (nếu có): Từ tháng năm 2019 đến tháng 11 năm 2019 Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: triệu đồng, đó: + Kính phí hỗ trợ từ ngân sách khoa học nhà trƣờng: tr.đ + Kinh phí từ nguồn khác: tr.đ b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn ngân sách khoa học: Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt Ghi Thời gian Kinh phí Thời gian Kinh phí (Số đề nghị (Tháng, năm) (Tr.đ) (Tháng, năm) (Tr.đ) toán) 2018 2018 5 c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đơn vị tính: Triệu đồng Theo kế hoạch Số Nội dung TT khoản chi Tổng NSKH Thực tế đạt Nguồn Tổng NSKH khác Trả công lao động (khoa học, Nguồn khác 2.395 2.395 2.395 2.395 1.905 1.905 1.905 1.905 1.905 phổ thông) Nguyên, vật liệu, lƣợng Thiết bị, máy móc 0 0 0 Xây dựng, sửa chữa 0 0 0 0.7 0.7 0.7 0.7 5 5 nhỏ Chi khác Tổng cộng - Lý thay đổi (nếu có): Tổ chức phối hợp thực nhiệm vụ: Không Số TT Tên tổ chức Tên tổ chức Nội dung Sản phẩm đăng ký theo tham gia thực tham gia chủ chủ yếu đạt Thuyết minh yếu Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ: Không (Người tham gia thực đề tài thuộc tổ chức chủ trì quan phối hợp, không 10 người kể chủ nhiệm) Số TT Tên cá nhân Tên cá nhân Nội dung Sản phẩm đăng ký theo tham gia tham gia chủ yếu đạt Thuyết minh thực Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Tình hình hợp tác quốc tế: Khơng Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham số đoàn, số lượng người tham gia ) gia ) Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Không Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, (Nội dung, thời gian, địa điểm) - Lý thay đổi (nếu có): kinh phí, địa điểm) Ghi chú* Tóm tắt nội dung, công việc chủ yếu: Thời gian Số TT Các nội dung, công việc (Bắt đầu, kết thúc Người, chủ yếu - tháng … năm) quan (Các mốc đánh giá chủ yếu) Khảo sát nồng độ gây nhiễm Theo kế Thực tế hoạch đạt đƣợc 06/2018- vi nấm C albicans thời 10/2018 thực 06/2018- ThS Lê Thị Lan 10/2018 Phƣơng gian đánh giá mức độ bệnh ThS Phan Thị Mỹ sau gây nhiễm Linh Xây dựng kiểm chứng mô 11/2018- 11/2018- ThS Lê Thị Lan hình gây nhiễm C albicans 03/2019 8/2019 Phƣơng âm đạo chuột nhắt trắng với ThS Phan Thị Mỹ Fluconazol Linh Viết tổng kết, báo cáo nghiệm 4/2019 – 9/2019 – ThS Lê Thị Lan thu 11/2019 Phƣơng 5/2019 - Lý thay đổi (nếu có): Gia hạn tháng có Chủ nhiệm đề tài nghỉ việc từ tháng 3/2019 nên tiến độ nghiên cứu bị ảnh hƣởng III SẢN PHẨM KH&CN CỦA ĐỀ TÀI Sản phẩm KH&CN tạo ra: a) Sản phẩm Dạng I: Số Tên sản phẩm tiêu Đơn TT chất lượng chủ yếu vị đo Mơ hình gây nhiễm Mơ Số lượng Theo kế Thực tế hoạch đạt 1 Candida albican âm đạo hình chuột nhắt trắng - Lý thay đổi (nếu có): b) Sản phẩm Dạng II: Số TT Tên sản phẩm Yêu cầu khoa học cần đạt Theo kế hoạch Thực tế đạt đƣợc Ghi - Lý thay đổi (nếu có): c) Sản phẩm Dạng III: Không Số TT Tên sản phẩm Yêu cầu khoa học Số lượng, nơi cần đạt công bố Theo Thực tế (Tạp chí, nhà kế hoạch đạt đƣợc xuất bản) - Lý thay đổi (nếu có): d) Kết đào tạo: Khơng Số Cấp đào tạo, Chuyên TT ngành đào tạo Số lượng Theo kế hoạch Ghi Thực tế đạt (Thời gian kết đƣợc thúc) - Lý thay đổi (nếu có): đ) Tình hình đăng ký bảo hộ quyền sở hữu cơng nghiệp: Không Số Tên sản phẩm TT đăng ký Kết Ghi Theo Thực tế (Thời gian kết kế hoạch đạt đƣợc thúc) - Lý thay đổi (nếu có): e) Thống kê danh mục sản phẩm KHCN đƣợc ứng dụng vào thực tế Địa điểm Số Tên kết TT ứng dụng Thời gian (Ghi rõ tên, địa Kết nơi ứng sơ dụng) Đánh giá hiệu đề tài mang lại: a) Hiệu khoa học công nghệ: Gây nhiễm C albicans âm đạo chuột nhắt trắng Estradiol valerat chủng nấm C albicans ATCC 90028TM Trong trình thử nghiệm đánh giá đƣợc mức độ nhiễm nấm C albicans lô thử nghiệm dựa vào thang điểm đƣợc quy từ số lƣợng khúm nấm phết dịch mẫu từ âm đạo chuột lên đĩa petri Với lô đối chứng sử dụng Fluconazol liều 30 mg/kg chuột cho thấy tác dụng điều trị nấm C albicans âm đạo chuột nhắt trắng Có thể áp dụng mơ hình gây nhiễm C albicans âm đạo chuột nhắt trắng vào nghiên cứu tác dụng chất kháng nấm in vivo b) Hiệu kinh tế xã hội: Mơ hình hồn tồn phù hợp thực Phịng Thí nghiệm YDCT, góp phần việc giảng dạy triển khai đề tài nghiên cứu Tình hình thực chế độ báo cáo, kiểm tra đề tài: Thời Số TT Nội dung gian thực Ghi (Tóm tắt kết quả, kết luận chính, người chủ trì…) I Báo cáo tiến độ Lần 1: Gia hạn đề tài 4/2019 Khảo sát nồng độ gây nhiễm vi nấm C albicans thời gian đánh giá mức độ bệnh sau gây nhiễm Xây dựng mơ hình gây nhiễm C albicans âm đạo chuột nhắt trắng Thực hiện: ThS Lê Thị Lan Phƣơng, ThS Phan Thị Mỹ Linh II Báo cáo giám định kỳ Không Chủ nhiệm đề tài Thủ trƣởng tổ chức chủ trì (Họ tên, chữ ký) (Họ tên, chữ ký đóng dấu) MỤC LỤC Trang Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt i Danh mục bảng i Danh mục hình vẽ, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ, biểu đồ i MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1- TỔNG QUAN .3 1.1 Nấm Candida 1.1.1 Candida sp .3 1.1.2 Candida albicans 1.2 Bệnh nhiễm nấm Candida âm đạo 1.2.1 Dịch tễ học 1.2.2 Các yếu tố thuận lợi dẫn tới nhiễm nấm Candida âm đạo 1.2.3 Sinh lý bệnh 1.2.4 Triệu chứng lâm sàng 1.2.5 Chẩn đoán viêm âm đạo nấm Candida 1.2.6 Điều trị 1.3 Giới thiệu số mơ hình gây nhiễm C albicans âm đạo chuột nhắt trắng 1.3.1 Mô hình 1.3.2 Mơ hình 1.3.3 Mơ hình 1.3.4 Mơ hình 1.3.5 Mơ hình đề nghị kiểm chứng gây nhiễm C albicans âm đạo chuột nhắt trắng 10 CHƢƠNG 2- PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Phƣơng tiện .12 2.1.1 Chủng vi sinh vật 12 2.1.2 Thuốc dối chứng .12 2.1.3 Hóa chất 12 2.1.4 Thiết bị dụng cụ 12 2.1.5 Động vật thử nghiệm 13 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 13 2.2.1 Phƣơng pháp .13 2.2.2 Chuẩn bị 13 2.2.4 Tiến hành 14 2.2.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu 16 CHƢƠNG 3- KẾT QUẢ 17 3.1 Kết 17 3.2 Nhận xét 20 CHƢƠNG 4- KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .22 4.1 Kết luận 22 4.2 Kiến nghị 22  Tỷ lệ nhiễm chuột liên quan đến liều lƣợng E2 nồng độ C albicans  Khơng có sợi tơ nấm phát âm đạo nhóm E0I0, E1I0, E2I0, E3I0, E0I1, E1I1, E2I1 E3I1  Các nhóm cịn lại, vào ngày thứ sau gây nhiễm phát vi nấm phát triển mức thấp tăng dần, đạt đỉnh vào ngày thứ  Tỷ lệ nhiễm khoảng 80% vào ngày thứ 4, đạt 100% vào ngày kết thúc thí nghiệm sau tiêm chủng âm đạo vào nhóm E2I3 (E2 liều 0,025 mg / chuột, tiêm dƣới da bơm chủng C albicans blastoconidia vào tử cung với x 104 CFU/ mL), E3I3, E2I4,E3I4 Tỷ lệ nhóm khác thấp, thấp 11,11% ngày thứ 4, 70,0% vào ngày thứ Đánh giá mơ hình:  Ƣu điểm: Kết nghiên cứu cho thấy thay đổi yếu tố: Estrogen Benzoate, nồng độ C albicans có ảnh hƣởng đến tỷ lệ nhiễm bệnh chuột Đƣa đƣợc nồng độ Estrogen Benzoate nồng độ C albicans gây nhiễm để xây dựng mơ hình  Nhƣợc điểm: Đƣa đƣợc thang điểm đánh giá mức độ nhiễm bệnh nhiên kết dựa vào quan sát trực quan âm đạo chuột nên độ xác khơng cao Quy trình thực chƣa đề cập rõ liều lƣợng Estrogen Benzoate C albicans sử dụng chuột 1.3.5 Mơ hình đề nghị kiểm chứng gây nhiễm C albicans âm đạo chuột nhắt trắng Thông qua đánh giá điểm chung, ƣu – nhƣợc điểm mơ hình, mơ hình sử dụng nghiên cứu đƣợc tiến hành theo Junko Yano [12] Mơ hình có ƣu điểm so với mơ hình khác bƣớc tiến hành đƣợc trình bày rõ ràng, tác giả lý giải rõ phải thực bƣớc, viết có hình ảnh, video hƣớng dẫn chi tiết cách gây nhiễm C albicans âm đạo chuột, cách thu mẫu, dịch âm đạo chuột Tuy nhiên, mơ hình có số thông số đánh giá mức độ bệnh nhƣ quan sát tế bào biểu mơ, bạch cầu trung tính từ dịch thu từ âm đạo chuột; Phân tích mơ học, thu tế bào lympho từ âm đạo chuột chƣa thể thực đƣợc điều kiện phịng thí nghiệm Vì vậy, đề tài đánh giá mức độ bệnh chuột sau gây nhiễm thông qua mật độ khúm nấm men cấy từ dịch âm đạo chuột, mức độ khúm nấm men cấy môi trƣờng thạch Sabouraud đƣợc mã hóa thành điểm để so sánh nhóm thử nghiệm [5] 10 11 CHƢƠNG 2- PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Phƣơng tiện 2.1.1 Chủng vi sinh vật Chủng nấm Candida albicans chủng chuẩn quốc tế mã ATCC 90028TM hãng Microbioligics – Mỹ (Dạng đông khô KwikStik, LOT 264-30-2, hạn sử dụng 31/03/2019, bảo quản điều kiện -20C đến -80C) 2.1.2 Thuốc dối chứng Fluconazole 150mg – STADA, Việt Nam Là thuốc kháng nấm thuộc nhóm triazol có tác dụng kháng nấm ngoại vi hay toàn thân (nhất nấm Candida) Liều sử dụng: Dùng đƣờng uống: - Nhiễm nấm Candida hầu họng: 50 – 100 mg/ngày 1-2 tuần - Nhiễm nấm Candida âm đạo: liều 150 mg - Nhiễm nấm chân, thân, bẹn: 150 mg/ lần/ tuần - Viêm màng não Crytococcus: liều khởi đầu 400 mg/ngày Sau 200 mg/ngày, dùng – tuần Nếu dự phòng tái phát Cryptococcus 100 – 200 mg/ngày Liều sử dụng thử nghiệm 30 mg/kg chuột nhắt quy đổi từ liều sử dụng ngƣời (150 mg/ngày) 2.1.3 Hóa chất Estradiol valerat (EV) dạng bột pha tiêm, mã số lô: 00493/001pNt Môi trƣờng nuôi cấy: Môi trƣờng thạch Sabouraud (BD - USA), lot 7109920, hạn sử dụng 28/2/2022 Đƣờng Glucose, NaCl (Merck) 2.1.4 Thiết bị dụng cụ Lồng ni chuột có lọc kháng khuẩn – Ý Tủ cấy vô trùng (Esco – Singapore), tủ ấm (Bider – Đức), tủ sấy quạt gió đối lƣu (Contherm – Newzealand), nồi hấp tiệt trùng (Hirayama – Nhật), lò nung (Nabertherm – Đức), cân phân tích (Kern ABJ 220-4NM – Đức) , cân sấy ẩm (Mettler Toledo – Thụy Sĩ), bếp cách thủy (Grant – Anh Quốc), bếp điện (Alma – Nhật) 12 Ống nghiệm, bercher, ống đong, bình định mức, đũa thủy tinh, đĩa petri, kẹp, pipet dụng cụ thí nghiệm thơng thƣờng khác 2.1.5 Động vật thử nghiệm Chuột nhắt trắng chủng Albino Swiss, khỏe mạnh, 6-8 tuần tuổi, trọng lƣợng trung bình 20 - 22 g, chƣa sinh sản, cung cấp Viện Pasteur Thành phố Hồ Chí Minh đƣợc ni ổn định tuần trƣớc thử nghiệm Chuột đƣợc thành nhóm lồng nhựa có nắp đậy với kháng khuẩn phịng thí nghiệm Y Dƣợc Cổ Truyền Chuột đƣợc cho ăn cám viên mua Viện Pasteur Thành phố Hồ Chí Minh, cho nƣớc uống đầy đủ 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp Chuột nhắt trắng cái, cân nặng khoảng 20-22g, chƣa sinh sản, đƣợc làm bong tróc niêm mạc thành âm đạo Estradiol valerat, sau đƣợc gây nhiễm với vi nấm C albicans vào âm đạo Sau gây nhiễm, lô chuột đƣợc đánh giá mức độ nhiễm C albicans thông qua số lƣợng khúm nấm men cấy từ dịch âm đạo chuột, mức độ khúm nấm men đƣợc mã hóa thành điểm để thống kê kết từ so sánh đƣợc mức độ nhiễm C albicans tác dụng điều trị thuốc đối chứng Fluconazol nhóm thử nghiệm [5,12] 2.2.2 Chuẩn bị Độ đục chuẩn McFarland 0.5 đƣợc sử dụng để điều chỉnh độ đục huyền dịch vi nấm Đĩa thạch Sabouraud: Cân thạch theo công thức nhà sản xuất, đun sôi cho tan hết thạch, hấp thạch 121oC/ 15 phút Để thạch nguội khoảng 40 – 50oC đổ vào đĩa petri (đƣờng kính 100 mm, vơ trùng) dày khoảng 4mm (tƣơng ứng với khoảng 25mL thạch) Dùng đĩa thạch ngày, chƣa dùng gói kín bảo quản nhiệt độ – 8oC, sử dụng vòng ngày kể từ ngày chuẩn bị Chủng nấm C albicans: đƣợc nuôi cấy môi trƣờng Sabouraud 24 – 48 để tạo khuẩn lạc riêng lẽ 13 Huyền dịch vi nấm C albicans: Lấy vài khuẩn lạc riêng lẽ, khiết từ môi trƣờng nuôi C albicans hòa vào mL nƣớc muối sinh lý (NaCl 0,85%) Pha loãng, so sánh với ống độ đục chuẩn McFarland 0.5 dƣới giấy trắng có kẻ vạch đen để có huyền dịch nấm C albicans (Khoảng 1-1.5×108 CFU/mL) Hình 2.1 Huyền dịch nấm so với McFarland 0,5 Dung dịch EV: Hòa tan EV vào dầu mè cho tan hết để đạt tỷ lệ 0,05 mg/100mL Thuốc Fluconazol hòa tan nƣớc cất để đạt liều 30 mg/kg chuột Tiến hành ngày trƣớc gây nhiễm: Tiến hành phết dịch âm đạo chuột để chọn chuột không bị nhiễm nấm (0 điểm) đƣa vào thử nghiệm mơ hình gây nhiễm C albicans âm đạo chuột nhắt trắng ngày trƣớc gây nhiễm: Tiêm 100μL EV/ 20g chuột dƣới da vùng bụng dƣới liều 0,05 mg/100mL, ngày lần, liên tục ngày lặp lại tiêm lần hàng tuần suốt thời gian nghiên cứu Hình 2.2 Âm đạo chuột nhắt trắng sau tiêm EV ngày liên tục 14 Vào ngày gây nhiễm: Đƣa 20 μL huyền dịch vi nấm C albicans nồng độ 2.5×106 CFU/mL vào âm đạo chuột cách đƣa đầu pipette vào sâu khoảng 5mm âm đạo chuột, nhanh chóng bơm huyền dịch vi nấm vào nhẹ nhàng rút pipette ngày sau gây nhiễm: Thu dịch âm đạo chuột cách: Cho 50 – 100 μL nƣớc muối sinh lý vào âm đạo chuột, rửa nhẹ nhàng thu dịch cho vào eppendorf vô trùng Láng dịch vi nấm thu đƣợc lên bề mặt thạch Sabouraud, mang ủ nhiệt độ 30 – 32oC Sau 24 – 48 ủ, đếm số lƣợng khúm nấm mọc bề mặt thạch đĩa petri Hình 2.3 Cách gây nhiễm C albicans thu dịch âm đạo chuột Số lƣợng khúm nấm C albicans phát triển đĩa petri đƣợc đổi sang điểm từ đến (Bảng 2.1) [5] Bảng 2.1 Thang điểm theo lƣợng khúm nấm C albicans Lƣợng khúm nấm C albicans đĩa petri Điểm 0 300 Các chuột bị nhiễm C albicans với số lƣợng khúm nấm đĩa petri có điểm từ 0.5 (Bảng) trở lên đƣợc chia thành lô (n = 6): Cho uống kim đầu tù: - Lô bệnh (Lô nhiễm C albicans mà không điều trị): Uống nƣớc cất liều 0,1 ml/10g chuột/ngày - Lô điều trị (Lô nhiễm C abicans sử dụng thuốc đối chứng): Uống Fluconazol liều 30 mg/20 mL/Kg chuột/ngày liên tục ngày 15 Trong trình điều trị, vào ngày thứ sau gây nhiễm, ngày thứ sau kết thúc trình điều trị thu dịch âm đạo chuột để đánh giá so sánh mức độ lô bệnh lô điều trị (Nhƣ sơ đồ 2.1) EV -5 -4 -3 -2 -1 Điều trị với Flu Gây nhiễm Thu dịch + Cấy lên đĩa Petri Ngày Sơ đồ 2.1 Mơ hình gây nhiễm C albicians âm đạo chuột nhắt trắng 2.2.3 Phương pháp xử lý số liệu Các liệu đƣợc trình bày dƣới dạng Mean ± SEM So sánh khác nhóm phép kiểm ANOVA chiều, yếu phần mềm SPSS phiên 20.0, khác đƣợc xem có ý nghĩa giá trị p< 0,05, đồ thị đƣợc vẽ theo giá trị Mean ± SEM phần mềm MS.EXCEL 2013 16 CHƢƠNG 3- KẾT QUẢ 3.1 Kết Bảng 3.1 Điểm số phết dịch âm đạo chuột thời điểm ngày trƣớc gây nhiễm Chuột Đĩa Điểm 1.1 1.2 1.3 2.1 2.2 2.3 Chuột Đĩa Điểm 7.1 7.2 7.3 8.1 8.2 0 8.3 3.1 9.1 3.2 9.2 3.3 9.3 4.1 12.1 4.2 12.2 4.3 12.3 5.1 13.1 5.2 13.2 5.3 13.3 6.1 14.1 6.2 14.2 6.3 14.3 12 13 14 Bảng 3.2 Điểm số phết dịch âm đạo chuột thời điểm ngày thứ 1, thứ thứ sau gây nhiễm điều trị Chuột Lô Bệnh Đĩa Ngày Ngày Ngày 1.1 1.2 1.3 2.1 17 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh FLUCO 30 12 13 14 2.2 2.3 3.1 3 3.2 3 3.3 3 4.1 4.2 4.3 5.1 2 5.2 2 5.3 2 6.1 2 6.2 2 6.3 2 7.1 0,5 7.2 0,5 7.3 0,5 8.1 0,5 8.2 0,5 8.3 0,5 9.1 0,5 0,5 9.2 0,5 0,5 9.3 0,5 0,5 12.1 0,5 12.2 0,5 12.3 0,5 13.1 0,5 0,5 13.2 0,5 0,5 13.3 0,5 0,5 14.1 0,5 14.2 0,5 14.3 0,5 18 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh ngày trƣớc gây nhiễm: Kết cho thấy tất chuột kiểm tra ban đầu không nhiễm C albicans (Phụ lục 1.1) Tất chuột đƣợc chọn để gây nhiễm C albicans âm đạo Bảng 3.3 Điểm số phết dịch âm đạo chuột lô thử nghiệm theo thời gian Ngày Ngày Ngày Lô bệnh 2,333 ±0,516 2,667 ± 1,032 2,333 ± 0,516 Lô Flu 30 2,5 ± 0,836 0,833 ± 0,605 0,333 ± 0,258 Điểm số LÔ 2.5 1.5 0.5 Ngày Ngày Lô bệnh Ngày Lô FLU30 Đồ thị 3.1 Điểm số phết dịch âm đạo chuột lô thử nghiệm theo thời gian Kết bảng 3.1 đồ thị 3.1 cho thấy: Ở lô bệnh từ ngày đến ngày lƣợng khúm nấm có xu hƣớng tăng, từ ngày đến ngày giảm nhẹ Ở lô điều trị Flu 30 từ ngày đến ngày 9, lƣợng khúm nấm có xu hƣớng giảm đáng kể so với lô bệnh Từ ngày đến ngày giảm nhiều so với từ ngày đến ngày Kết bảng 3.1 biểu đồ 3.1 cho thấy: Vào ngày 1, điểm số lƣợng khúm nấm trung bình lơ khơng có khác biệt ý nghĩa thống kê với p = 0,922 > 0,05 Vào ngày thứ thứ sau gây nhiễm: Điểm số lƣợng khúm nấm trung bình lơ Flu 30 so với lơ bệnh có khác biệt ý nghĩa thống kê với p = 0,01 < 0,05 Vào ngày thứ 9, điểm số lƣợng khúm nấm trung bình lơ điều trị Flu 30 so với lơ bệnh có khác biệt ý nghĩa thống kê với p = 0,00 < 0,05 19 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Điểm số * * Ngày Lô bệnh Ngày Ngày Lô FLU30 Biểu đồ 3.1 Điểm số phết dịch âm đạo chuột lô thử nghiệm theo thời gian *: p