Nghiên cứu bào chế hệ micro tích hợp nano mang thuốc kháng lao ethambutol phân phối đến phổi

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN THÁI DƯƠNG NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ MICRO TÍCH HỢP NANO MANG THUỐC KHÁNG LAO ETHAMBUTOL PHÂN PHỐI ĐẾN PHỔI LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – Năm 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN THÁI DƯƠNG NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ MICRO TÍCH HỢP NANO MANG THUỐC KHÁNG LAO ETHAMBUTOL PHÂN PHỐI ĐẾN PHỔI Ngành: Công nghệ dược phẩm Bào chế thuốc Mã số: 8720202 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS Phạm Đình Duy Thành phố Hồ Chí Minh – Năm 2019 .i LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Người cam đoan, Nguyễn Thái Dương ii Luận văn tốt nghiệp Thạc sĩ Dược học – Khóa 2017-2019 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ MICRO TÍCH HỢP NANO MANG THUỐC KHÁNG LAO ETHAMBUTOL PHÂN PHỐI ĐẾN PHỔI Nguyễn Thái Dương Người hướng dẫn khoa học: TS Phạm Đình Duy Đặt vấn đề Đề tài thực nhằm xây dựng công thức quy trình bào chế hệ micro tích hợp nano mang thuốc kháng lao ethambutol đạt đặc tính lý hóa phù hợp phân phối đến phổi Phương pháp nghiên cứu Tiểu phân nano acid poly-(D, L-lactid-co-glycolid) tải ethambutol xây dựng thơng qua thiết kế mơ hình thực nghiệm Taguchi L16 (4^5) phần mềm DesignExpert phiên 10.0.7 gồm 16 thực nghiệm với biến số độc lập, yếu tố khảo sát mức Thông qua phân tích phương sai biến phụ thuộc ảnh hưởng biến độc lập lên biến phụ thuộc mà phần mềm đưa công thức tối ưu với số mong muốn (desirability) khác Khảo sát đặc tính khí động học cơng thức phun sấy với tỷ lệ tiểu phân nano : leucin khác để chọn cơng thức trojan có đặc tính lý hóa khí động phù hợp để phân phối đến phổi Kết bàn luận Phần mềm Design-Expert thiết lập thực nghiệm tối ưu với số mong muốn cao (0,897) Các giá trị tối ưu biến độc lập bao gồm: tỷ lệ ethambutol/poly(D,L-lactid-co-glycolid) 1:1; tỷ lệ ethyl acetat/dicloromethan 0:10; mức độ siêu âm giai đoạn 150 W; mức độ siêu âm giai đoạn 150 W; áp suất cô quay 150 mbar Công thức trojan đạt đặc tính lý hóa khí động học chọn có tỷ lệ nano : leucin 0,32 : 0,08 Kết luận Đề tài xây dựng cơng thức quy trình điều chế hệ micro tích hợp nano mang thuốc kháng lao ethambutol đạt tính chất lý hóa khí động học để phân phối đến phổi iii Master thesis in Pharmacy – Academic courses 2017-2019 FORMULATION OF ETHAMBUTOL - LOADED MICROPARTICLES INTEGRATED NANOPARTICLES FOR THE PULMONARY ROUTE Nguyen Thai Duong Instructor: PhD Pham Dinh Duy Introduction The aim of this study was formulation of ethambutol – loaded microparticles integrated nanoparticles with suitable physicochemical and aerodynamic properties for pulmonary route Methods Ethambutol – loaded poly - (D, L-lactide-co-glycolide) nanoparticles were constructed through the design of the Taguchi L16 experimental model (4 ^ 5) by Design-Expert software version 10.0.7 including 16 experiments with independent variables Each independent variable was studied at four levels Based on ANOVA results and the influence of independent variables on dependent variables, DesignExpert software offered optimal formulas with different desirability values Investigate aerodynamic characteristics of spray drying powder with different ratio of nanoparticles : leucin to choose the formula with physicochemical and aerodynamic properties that are most suitable for distribution to the lungs Results and dicussion The experiment with the highest desirability value (0.897) was selected; optimized parameters of independent variables included: ethambutol/poly-(D,L-lactide-coglycolide) ratio was 1:1; acetate ethyl/dichloromethane ratio was 0:10; amplitude of first-stage was 150 (W); amplitude of second-stage was 150 (W) The trojan formula with suitable physicochemical and aerodynamic properties was selected with nano: leucin ratio of 0.32: 0.08 Conclusion Ethambutol – loaded microparticles integrated nanoparticles were successfully formulation with suitable physicochemical and aerodynamic properties for pulmonary route iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i MỤC LỤC iv DANH MỤC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG ix DANH MỤC CÁC HÌNH, ĐỒ THỊ xi MỞ ĐẦU .1 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương ethambutol dihydroclorid (ETB) 1.1.1 Cấu trúc 1.1.2 Tính chất vật lý 1.1.3 Dược lý chế tác động 1.1.4 Dược động học 1.1.5 Chỉ định 1.1.6 Tác dụng không mong muốn 1.1.7 Liều lượng cách dùng 1.2 Bệnh lao - tình hình dịch tễ, bệnh sinh, chẩn đốn điều trị 1.2.1 Dịch tễ học bệnh lao 1.2.2 Bệnh sinh, chẩn đoán phác đồ điều trị lao .7 1.3 Tiểu phân (TP) nano polymer (polymeric nanoparticles – PNPs) 10 1.3.1 Khái niệm đặc điểm .10 1.3.2 Phương pháp bào chế PNP .12 1.4 Hệ TP nano dùng điều trị lao phổi 13 1.4.1 Giải phẫu sinh lý phổi 13 1.4.2 TP nano ứng dụng điều trị lao phổi 15 1.4.3 Các nghiên cứu TP nano tải ETB 16 1.5 TP micro tích hợp nano (TP trojan) 17 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .19 2.1 Đối tượng nghiên cứu .19 .v 2.1.1 Nguyên liệu hóa chất 19 2.1.2 Thiết bị phần mềm .20 2.2 Phương pháp nghiên cứu 21 2.2.1 Khảo sát quy trình định lượng ETB phương pháp quang phổ UV-Vis 21 2.2.2 Xây dựng cơng thức quy trình bào chế TP nano PLGA tải ETB 23 2.2.3 Xây dựng công thức quy trình bào chế TP micro tích hợp TP nano PLGA tải ETB (trojan) .30 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 37 3.1 Khảo sát quy trình định lượng ETB phương pháp quang phổ UV-Vis 37 3.1.1 Kết khảo sát ảnh hưởng pH đến độ hấp thu phức màu ETB 37 3.1.2 Kết thẩm định quy trình định lượng ETB quang phổ UV-Vis 38 3.2 Kết xây dựng cơng thức quy trình bào chế TP nano PLGA tải ETB 41 3.2.1 Kết khảo sát ảnh hưởng thông số công thức quy trình đến tính chất TP nano PLGA tải ETB .41 3.2.2 Kết thiết kế, tối ưu hóa cơng thức quy trình bào chế TP nano tải ETB 45 3.2.3 Kết khảo sát nâng tỷ lệ dược chất TP nano PLGA tải ETB .56 3.2.4 Kết khảo sát đặc tính phóng thích dược chất in-vitro từ TP nano PLGA tải ETB 58 3.3 Kết xây dựng công thức quy trình bào chế TP micro tích hợp TP nano PLGA tải ETB (trojan) 60 3.3.1 Kết khảo sát đặc tính khí động học TP trojan .60 3.3.2 Kết đánh giá đặc tính lý hóa TP trojan 63 CHƯƠNG BÀN LUẬN 71 4.1 Khảo sát quy trình định lượng ETB phương pháp quang phổ UV-Vis 71 4.2 Xây dựng cơng thức quy trình bào chế TP nano PLGA tải ETB 71 Về quy trình bào chế TP nano PLGA tải ETB: 71 4.2.1 Khảo sát ảnh hưởng yếu tố cơng thức quy trình đến tính chất TP nano PLGA tải ETB .72 .vi 4.2.2 Thiết kế tối ưu hóa cơng thức 75 4.2.3 Khảo sát nâng tỷ lệ pha phân tán TP nano PLGA tải ETB .76 4.2.4 Đặc tính phóng thích dược chất in-vitro từ TP nano PLGA tải ETB .79 4.3 Xây dựng cơng thức quy trình bào chế TP micro tích hợp TP nano PLGA tải ETB (trojan) 80 Bào chế TP trojan: sở lựa chọn cơng thức quy trình .80 4.3.1 Khảo sát đặc tính khí động học TP trojan 82 4.3.2 Khảo sát đặc tính lý hóa TP trojan 83 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 86 Kết luận 86 Về nghiên cứu cơng thức, quy trình điều chế đánh giá đặc tính lý hóa TP nano PLGA tải ETB .86 Về nghiên cứu cơng thức quy trình điều chế TP trojan chứa ETB đánh giá đặc tính lý hóa tính chất khí động học in-vitro 86 Kiến nghị 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Kết xây dựng thẩm định quy trình định lượng ETB quang phổ UV-Vis .7 PHỤ LỤC Kết thử phóng thích dược chất từ TP nano PLGA tải ETB PHỤ LỤC Kết khảo sát đặc tính khí động học TP trojan 10 PHỤ LỤC Kết khảo sát đặc tính lý hóa TP trojan 11 PHỤ LỤC Kết thử phóng thích dược chất từ cơng thức trojan DS4 13 vii DANH MỤC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT AF Alveolar fraction (Tỷ lệ hạt vào đến phế nang) Acquired immunodeficiency syndrome (Hội chứng suy giảm AIDS miễn dịch mắc phải) DCM Dicloromethan DĐVN V Dược điển Việt Nam V DL Drug loading (Khả tải dược chất) DSC Differential scanning calorimetry (Phân tích nhiệt quét vi sai) DPI Dry powder inhaler (Bột hít dạng khơ) EA Ethyl acetat EE Entrapment efficacy (Hiệu suất bắt giữ dược chất) ETB Ethambutol hydroclorid FCA Force controlling agent (tá dược kiểm soát lực liên kết) FPF Fine particle fraction (Tỷ lệ hạt mịn) Fourier Transform Infrared Spectroscopy (Phân tích phổ hồng FTIR ngoại) GSD Geometric standard deviation (Độ lệch chuẩn hình học) Human immunodeficiency virus (Virus gây suy giảm miễn dịch HIV người) INH Isoniazid KTTP Kích thước tiểu phân LPP Large porous particle (Tiểu phân lớn có cấu trúc xốp) LOD Limit of detection (Giới hạn phát hiện) LOQ Limit of quantification (Giới giạn định lượng) LTBI Latent tuberculosis infection (Nhiễm lao tiềm ẩn) MDI Metered dose inhaler (Bình xịt định liều) MDR-TB Multidrug – resistant tuberculosis (Lao kháng đa thuốc) viii Mass median aerodynamic diameter (Đường kính khí động học MMAD trung bình) MWCO Molecular weight cut-off (Giới hạn khối lượng phân tử) PDI Polydispersity index (Chỉ số đa phân tán) PLGA Acid poly (lactid-co-glycolid) PNP Polymeric nanoparticle (Tiểu phân nano polymer) PVA Poly (vinyl alcol) PZA Pyrazinamid RIF Rifampicin RR-TB Rifanpicin – resistant tuberculosis (Lao kháng rifampicin) SEM Scanning Electron Microscope (Kính hiển vi điện tử quét) TP Tiểu phân UV-Vis Ultra violet – Visible (Quang phổ tử ngoại khả kiến) WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế giới) XDR-TB Extensively drug – resistant tuberculosis (Lao siêu kháng thuốc) XRD X-ray Diffraction (Phân tích nhiễu xạ tia X) Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh.87 0,2 ± 0,01 MPa, tốc độ dịng khí 20 Hz, nhiệt độ đầu vào 160 ± oC, nhiệt độ đầu dao động khoảng 70 – 80 oC - Đã khảo sát đặc tính lý hóa TP bột phun sấy: Phương pháp nhiễu xạ tia X DSC cho thấy có ETB chuyển sang trạng thái vơ định hình sau q trình tích hợp vào TP nano PLGA trình phun sấy tạo trojan Phân tích FTIR cho thấy pic tương ứng với nhóm chức đặc trưng nguyên liệu thành phần cơng thức - Đã khảo sát chế phóng thích dược chất từ TP trojan: Tương đồng với trình phóng thích dược chất từ TP nano Kiến nghị - Xây dựng thẩm định quy trình định lượng ETB HPLC - Nâng cấp quy mô bào chế TP nano PLGA tải ETB TP trojan, đồng thời xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cho thành phẩm - Nghiên cứu độ ổn định TP trojan - Đánh giá tác dụng ức chế trực khuẩn lao in-vivo TP trojan Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Bộ Y tế (2015), Hướng dẫn chẩn đốn, điệu trị dự phịng bệnh lao Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V (tập 2), tr PL-91, PL-101-108 Bộ Y tế (2018), Dược thư quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, tr 631 – 633 Trần Văn Sáng (2007), Bệnh học lao, NXB Y Học, Hà Nội, tr 13-46 TIẾNG ANH Adebileje Tajudeen, et al (2017), "Effect of formulation parameters on the size of PLGA nanoparticles encapsulating bovine serum albumin: a response surface methodology", Contemp Med Sci, (12), pp 306-312 Ahmad Md Iftekhar, et al (2014), "The development of dimple-shaped chitosan carrier for ethambutol dihydrochloride dry powder inhaler", Drug Dev Ind Pharm, pp 1-10 Chawla Ruchi, et al (2014), "Polylactide-co-glycolide nanoparticles of antitubercular drugs: formulation, characterization and biodistribution studies", Therapeutic delivery, (12), pp 1247–1259 Chow A H., et al (2007), "Particle engineering for pulmonary drug delivery", Pharm Res, 24, pp 411 – 437 Cohen-Sela E (2009), "A new double emulsion solvent diffusion technique for encapsulating hydrophilic molecules in PLGA nanoparticles", J Control Release, 133 (2), pp 90-95 10 Copley Scientific (2015), "Quality Solutions for Inhaler Testing" 11 Dauda Kabiru, et al (2017), "Poly(D,L-lactic-co-glycolic acid)-based artesunate nanoparticles: formulation, antimalarial and toxicity assessments", Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology), 18 (11), pp 977-985 12 Edwards David A., et al (2002), "Bioengineering of Therapeutic Aerosols", Annual Review of Biomedical Engineering, (1), pp 93-107 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 13 European Medicines Agency (2018), "ICH guideline Q3C (R7) on impurities: guideline for residual solvents" 14 Gómez-Gaete Carolina, et al (2008), "Dexamethasone acetate encapsulation into Trojan particles", Journal of Controlled Release, 128, pp 41–49 15 Haidl Peter, et al (2016), "Inhalation device requirements for patients' inhalation maneuvers", Respiratory Medicine, 118, pp 65-75 16 Hao Zhong, et al (2018), "Review: A Comprehensive Map of FDA-Approved Pharmaceutical Products", Pharmaceutics 2018, 10, 263, 10 (4), pp 1-19 17 Hassan Saad S M., et al (1992), "Determination of Ethambutol in Pharmaceutical Preparations by Atomic Absorption Spectrometry, Spectrophotometry and Potentiometry", Mikrochimica Acta, 109, pp 193-199 18 He Yongju, et al (2018), "Influence of probe-sonication process on drug entrapment efficiency of liposomes loaded with a hydrophobic drug", International journal of polymeric materials and polymeric biomaterials, pp 193-197 19 Heurtault Beatrice, et al (2003), "Physico-chemical stability of colloidal lipid particles", Biomaterials, 24, pp 4283–4300 20 Huijser S., et al (2006), "Topology characterization by MALDI-ToF-MS of enzymatically synthesized poly (lactide-co-glycolide)", Biomacromolecules, 7, pp 2465–2469 21 Iurian Sonia, et al (2015), "Optimization of the sonication process for meloxicam nanocrystals preparation", Clujul Medical, 88 (3), pp 366-372 22 Kim Ki Do, et al (2005), "Applying the Taguchi method to the optimization for the synthesis of TiO2 nanoparticles by hydrolysis of TEOT in micelles", Colloids and Surfaces A: Physicochem Eng Aspects, 254, pp 99–105 23 Lamy Barbara, et al (2019), "Use of leucine to improve aerodynamic properties of ciprofloxacinloaded maltose microparticles for inhalation", European Journal of Pharmaceutical Research, (1), pp 2-11 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 24 Lin Yawen, et al (2018), "Optimization of drying conditions and components to reduce wall sticking during spray drying of infant formula milk", Int J Agric & Biol Eng, 11 (2), pp 214-218 25 Mahler Donald A (2017), "Peak Inspiratory Flow Rate as a Criterion for Dry Powder Inhaler Use in Chronic Obstructive Pulmonary Disease", Ann Am Thorac Soc, 14 (7), pp 1103–1107 26 Mehta Piyush (2018), "Imagine the Superiority of Dry Powder Inhalers from Carrier Engineering", Journal of Drug Delivery Science and Technology, pp 1-19 27 Mirakabad Fatemeh Sadat Tabatabaei, et al (2014), "PLGA-Based Nanoparticles as Cancer Drug Delivery Systems", Asian Pacific Journal of Cancer Prevention, 15 (2), pp 517-535 28 Moon S.I., et al (2004), "Synthesis of polyglactin by melt/solid polycondensation of glycolic/L-lactic acids", Polymer International, 53, pp 254–258 29 Mora-Huertasa C.E., et al (2010), "Polymer-based nanocapsules for drug delivery", International Journal of Pharmaceutics, 385, pp 113–142 30 Mudshinge Sagar R., et al (2011), "Nanoparticles: Emerging carriers for drug delivery", Saudi Pharmaceutical Journal, 19, pp 129-141 31 Najafabadi Abdolhossien Rouholamini, et al (2004), "The effect of vehicle on physical properties and aerosolisation behaviour of disodium cromoglycate microparticles spray dried alone or with l-leucine", International Journal of Pharmaceutics, 285, pp 97–108 32 Nemati Elham, et al (2019), "Ethambutol-Loaded Solid Lipid Nanoparticles as Dry Powder Inhalable Formulation for Tuberculosis Therapy", AAPS Pharm Sci Tech., 20 (12), pp 1-9 33 O'Neil Maryadele J (2001), The Merck Index: An encyclopedia of chemicals, drugs and biologicals 13th edition, Royal Society of Chemistry, pp 663 34 Ohashi Katsuya, et al (2008), "One-step preparation of rifampicin/poly(lacticco-glycolic acid) nanoparticle-containing mannitol microspheres using a four- Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh fluid nozzle spray drier for inhalation therapy of tuberculosis", Journal of Controlled Release, 135, pp 19-24 35 Pandey Rajesh, et al (2003), "Poly (DL-lactide-co-glycolide) nanoparticlebased inhalable sustained drug delivery system for experimental tuberculosis", Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 52, pp 981–986 36 Pham Dinh-Duy, et al (2015), "Pyrazinamide-loaded poly(lactide-coglycolide) nanoparticles: Optimization by experimental design", Journal of Drug Delivery Science and Technology, 30, pp 1-7 37 Pham Dinh-Duy, et al (2015), "Pulmonary drug delivery systems for tuberculosis treatment", International Journal of Pharmaceutics, 478, pp 517-529 38 Piepera Sebastian, et al (2017), "Doxorubicin-loaded PLGA nanoparticles - a systematic evaluation of preparation techniques and parameters", Materials Today: Proceedings, 4, pp 188-192 39 Rad Maryam, et al (2018), "Effect of incubation time, CuSO4 and glucose concentrations on biosynthesis of copper oxide (CuO) nanoparticles with rectangular shape and antibacterial activity: Taguchi method approach", Nano Biomed Eng., 10, pp 25-33 40 Rang H.P., et al (2012), Rang and Dale’s Pharmacology 7th edition, Churchill Livingstone: New York, pp 336 41 Rao J.P., et al (2011), "Polymer nanoparticles: preparation techniques and size control parameters", Prog Polym Sci., 36, pp 887–913 42 Rizvi Syed A A., et al (2018), "Applications of nanoparticle systems in drug delivery technology", Saudi Pharmaceutical Journal, 26, pp 64–70 43 Rubin-Preminger Janice M., et al (2004), "[R,S]-Ethambutol Dihydrochloride: Variable-Temperature Studies of a Dimorphic System with Very Similar Packing", Journal of Pharmaceutical Sciences, 93 (11), pp 2810-2819 44 Rubin-Preminger Janice M., et al (2004), "Variable Temperature Studies of a Polymorphic System Comprising Two Pairs of Enantiotropically Related Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Forms: [S,S]-Ethambutol Dihydrochloride", Crystal growth and design, (3), pp 431-439 45 Saifullah Bullo, et al (2017), "Novel Anti-Tuberculosis Nanodelivery Formulation of Ethambutol with Graphene Oxide", Molecules, 22 (1560), pp 1-12 46 Seil Justin T., et al (2012), "Antimicrobial applications of nanotechnology: methods and literature", International Journal of Nanomedicine, 7, pp 2767 47 Seville Peter C., et al (2007), "Spray-Dried Powders for Pulmonary Drug Delivery", Therapeutic Drug Carrier Systems, 24 (4), pp 307-360 48 Shetty Nivedita, et al (2018), "Influence of excipients on physical and aerosolization stability of spray dried high-dose powder formulations for inhalation", Int J Pharm, 544 (1), pp 222–234 49 Smallwood Ian M (1996), Handbook of organic solvent properties, Arnold 50 Steckel Hartwig, et al (2003), "In-situ-micronization of disodium cromoglycate for pulmonary delivery", European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 55, pp 173–180 51 Stevanovic Magdalena, et al (2009), "Poly(lactide-co-glycolide)-based Micro and Nanoparticles for the Controlled Drug Delivery of Vitamins", Current Nanoscience, (1-15) 52 Suffredini G., et al (2013), "New Applications of Nanotechnology for Neuroimaging", American Journal of Neuroradiology, 35 (7), pp 1246-1253 53 Sung Jean C., et al (2007), "Nanoparticles for drug delivery to the lungs", TRENDS in Biotechnology, 25 (12), pp 563-570 54 Taghipour B., et al (2014), "The effects of technical and compositional variables on the size and release profile of bovine serum albumin from PLGA based particulate systems", Res Pharm Sci, (6), pp 407-420 55 Tena Ana Fernández, et al (2012), "Review: Deposition of Inhaled Particles in the Lungs", Arch Bronconeumol, 48 (7), pp 240–246 56 The US Pharmacopeia 41 (2018), Aerosols, nasal sprays, metered-dose inhalers and dry powder inhalers, pp 232-252 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 57 Thirugnanasambandham K., et al (2017), "Influence of process conditions on the physicochemical properties of pomegranate juice in spray drying process: Modelling and optimization", Journal of the Saudi Society of Agricultural Sciences 16, pp 358-366 58 Tingting Peng, et al (2016), "Influence of physical properties of carrier on the performance of dry powder inhalers", Acta Pharmaceutica Sinica B, (4), pp 308-318 59 Tsapis N., et al (2002), "Trojan particles: Large porous carriers of nanoparticles for drug delivery", Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 99 (19), pp 12001–12005 60 Turk Ceyda Tuba Sengel, et al (2014), "Formulation and optimization of nonionic surfactants emulsified nimesulide - loaded PLGA-based nanoparticles by design of experiments", AAPS Pharm Sci Tech, 15 (1), pp 161-176 61 Urbaniak Tomasz, et al (2019), "Influence of Solvent Evaporation Technique Parameters on Diameter of Submicron Lamivudine-Poly-ε-Caprolactone Conjugate Particles", Nanomaterials, (1240), pp 1-18 62 US Food and Drug Administration (2018), "Metered Dose Inhaler (MDI) and Dry Powder Inhaler (DPI) Products - Quality Considerations Guidance for Industry" 63 WHO (2018), Global Tuberculosis Report 2018 64 Yanga Wei, et al (2008), "Inhaled nanoparticles - A current review", International Journal of Pharmaceutics, 356, pp 239–247 65 Zuo Jieyu, et al (2014), "Evaluation of the DDSolver Software Applications", Journal of Biomedicine and Biotechnology, 4, pp 1-9 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC Kết xây dựng thẩm định quy trình định lượng ETB quang phổ UV-Vis Quy trình pha dung dịch đệm: Dung dịch đệm pH 2,2 Trộn 6,7 ml acid phosphoric (TT) với 50 ml dung dịch % (tt/tt) dung dịch natri hydroxyd M (TT), thêm nước vừa đủ 1000 ml Dung dịch đệm phosphat pH 3,0 Trộn 0,7 ml acid phosphoric (TT) với 900 ml nước, điều chỉnh pH tới 3,0 dung dịch natri hydroxyd 10 M (TT) thêm nước vừa đủ 1000 ml Dung dịch đệm phosphat 0,05 M pH 4,5 Hòa tan 6,8 g kali dihydrophosphat (TT) 1000 ml nước, pH dung dịch 4,5 Dung dịch đệm phosphat pH 5,0 Hòa tan 2,72 g kali dihydrophosphat (TT) 800 ml nước Điều chỉnh pH dung dịch kali hydroxyd M (TT) thêm nước vừa đủ 1000 ml Dung dịch đệm phosphat pH 5,6 Trộn 94,4 ml dung dịch kali dihydrophosphat 0,908 % (TT) với 5,6 ml dung dịch dikali hydrophosphat 1,16% (TT) Điều chỉnh pH cần hai dung dịch thành phần Đệm citro - phosphat pH 6,8 (Dung dịch đệm phosphat pH 6,8) Trộn 77,3 ml dung dịch dinatri hydrophosphat 7,15% (TT) với 22,7 ml dung dịch acid citric 2,1% (TT) Dung dịch đệm pH 7,4 Hòa tan 0,6 g kali dihydrophosphat (TT); 6,4 g dinatri hydrophosphat (TT) 5,85 g natri clorid (TT) nước vừa đủ 1000 ml Điều chỉnh pH cần Dung dịch đệm pH 8,0 (TT1) Hòa tan 20 g dikali hydrophosphat (TT) 900 ml nước, điều chỉnh pH acid phosphoric (TT) thêm nước vừa đủ 1000 ml Đệm phosphat hỗn hợp pH 10 Thêm ml dung dịch natri phosphat 0,25 M (TT) vào 100 ml dung dịch dinatri hydrophosphat 0,2 M (TT) Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Độ hấp thu PHỤ LỤC Kết thử phóng thích dược chất từ TP nano PLGA tải ETB 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 y = 2.5712x r² = 0.9984 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 Nồng độ (mg/ml) Hình PL-2.1 Đồ thị tương quan độ hấp thu nồng độ ETB (môi trường pH 7,4) Bảng PL-2.1 Các thơng số phóng thích TP nano Thời % ETB log log (% Căn bậc log(% ETB Căn bậc (% gian phóng (thời ETB phóng (thời chưa phóng ETB chưa (giờ) thích gian) thích) gian) thích) phóng thích) 0,25 31,76 -0,60 1,50 0,50 1,83 4,09 0,5 41,61 -0,30 1,62 0,71 1,77 3,88 50,73 0,00 1,71 1,00 1,69 3,67 56,60 0,30 1,75 1,41 1,64 3,51 63,10 0,48 1,80 1,73 1,57 3,33 70,26 0,60 1,85 2,00 1,47 3,10 72,88 0,78 1,86 2,45 1,43 3,00 76,13 0,90 1,88 2,83 1,38 2,88 12 81,33 1,08 1,91 3,46 1,27 2,65 24 83,29 1,38 1,92 4,90 1,22 2,56 48 92,38 1,68 1,97 6,93 0,88 1,97 Bậc 100.00 log (% ETB chưa phóng thích) % ETB phóng thích Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 80.00 y = 0,8307x + 59,817 r² = 0,6084 60.00 40.00 20.00 0.00 10 20 30 40 50 2.00 1.80 1.60 1.40 1.20 1.00 0.80 0.60 ‐10 Bậc y = -0,0164x + 1,6103 r² = 0,8611 10 30 Thời gian (giờ) 100.00 log(% ETB phóng thích) Higuchi 80.00 60.00 y = 7,3914x + 48,561 r² = 0.8112 40.00 20.00 0.00 0.00 5.00 (thời gian)1/2 5.00 (% ETB chưa phóng thích)1/3 % ETB phóng thích Thời gian (giờ) Korsmeyer-Peppas 2.50 2.00 1.50 1.00 0.50 0.00 ‐1.00 10.00 50 y = 0,172x + 1,7078 r² = 0,9478 0.00 1.00 2.00 log(thời gian) Hisxon Crowell 4.00 y = -0,0343x + 3,4265 r² = 0,782 3.00 2.00 1.00 10 20 30 40 50 Thời gian (giờ) Hình PL-2.2 Đồ thị phương trình động học phóng thích dược chất từ TP nano PLGA tải ETB Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC Kết khảo sát đặc tính khí động học TP trojan % khối lượng tầng 40 35 DS1 DS2 30 DS3 DS4 25 20 15 10 -1 -0 F Tầng Hình PL-3.1 Phần trăm khối lượng trojan tích lũy tầng y = 8,4678x + 14,185 r² = 0,9735 10 Kích thước giới hạn (µm) Cơng thức DS1 Phần trăm khối lượng trojan (%) 100.00 80.00 60.00 40.00 20.00 0.00 y = 8,5787x + 12,849 r² = 0,9959 Công thức DS3 10 Kích thước giới hạn (µm) Phần trăm khối lượng trojan (%) 100.00 80.00 60.00 40.00 20.00 0.00 100.00 80.00 60.00 40.00 20.00 0.00 y = 10,758x r² = 0,9619 Công thức DS2 Phần trăm khối lượng trojan (%) Phần trăm khối lượng trojan (%) công thức (n = 3) 10 Kích thước giới hạn (µm) 150.00 y = 6,8083x + 38,749 R² = 0,9581 100.00 50.00 0.00 10 Kích thước giới hạn (µm) Cơng thức DS4 Hình PL-3.2 Đồ thị tương quan phần trăm khối lượng trojan tích lũy kích thước giới hạn tầng Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC Kết khảo sát đặc tính lý hóa TP trojan Phổ nhiễu xạ tia X mẫu ETB mẫu trojan 2-Theta - Scale File: ETB.DC.raw - Type: 2Th/Th locked Start: 5.000 ° - End: 45.000 ° - Step: 0.020 ° Step time: 0.5 s - 2-Theta: 5.000 ° - Theta: 2.500 ° Hình PL-4.1 Phổ nhiễu xạ tia X dược chất ETB Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh   2-Theta - Scale File: ETB.SP.raw - Type: 2Th/Th locked - Start: 5.000 ° - End: 45.000 ° - Step: 0.020 ° - Step time: 0.5 s - 2Theta: 5.000 ° - Theta: 2.500 ° Hình PL-4.2 Phổ nhiễu xạ tia X TP trojan DS4 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn  tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh   PHỤ LỤC Kết thử phóng thích dược chất từ cơng thức trojan DS4 Bảng PL-5.1 Các thơng số phóng thích cơng thức trojan DS4 Thời % ETB log log (% Căn bậc log(% ETB Căn bậc (% gian phóng (thời ETB phóng (thời chưa phóng ETB chưa (giờ) thích gian) thích) gian) thích) phóng thích) 0,25 27,22 -0,60 1,43 0,50 1,86 4,18 0,5 34,46 -0,30 1,54 0,71 1,82 4,03 43,57 0,00 1,64 1,00 1,75 3,84 54,62 0,30 1,74 1,41 1,66 3,57 57,26 0,48 1,76 1,73 1,63 3,50 62,46 0,60 1,80 2,00 1,57 3,35 65,72 0,78 1,82 2,45 1,54 3,25 71,56 0,90 1,85 2,83 1,45 3,05 12 78,07 1,08 1,89 3,46 1,34 2,80 24 84,58 1,38 1,93 4,90 1,19 2,49 48 88,49 1,68 1,95 6,93 1,06 2,26 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn  tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh   Bậc 100.00 80.00 60.00 y = 0,9207x + 54,09 r² = 0,6191 40.00 20.00 0.00 10 20 30 40 50 log(% ETB chưa phóng thích) % ETB phóng thích Bậc 2.10 y = -0,0148x + 1,6618 r² = 0,821 1.60 1.10 0.60 ‐10 10 % ETB phóng thích Higuchi 100.00 80.00 60.00 y = 8,2081x + 41,571 r² = 0,8288 40.00 20.00 0.00 0.00 50 Thời gian (giờ) 2.00 4.00 6.00 1/2 (thời gian) 8.00 log(% ETB phóng thích) Thời gian (giờ) 30 Korsmeyer-Peppas 2.50 2.00 1.50 y = 0,2067x + 1,648 r² = 0,9521 1.00 0.50 0.00 ‐0.50 0.00 0.50 1.00 Thời gian (giờ) 1.50 (% ETB phóng thích)1/3 Hixson Crowell 5.00 y = -0,0334x + 3,5753 r² = 0,7574 4.00 3.00 2.00 1.00 0.00 10 20 30 40 Thời gian (giờ) 50 Hình PL-5.1 Đồ thị phương trình động học phóng thích dược chất từ cơng thức trojan DS4 Tn thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn  tài liệu trích dẫn 2.00 ... MINH - NGUYỄN THÁI DƯƠNG NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ MICRO TÍCH HỢP NANO MANG THUỐC KHÁNG LAO ETHAMBUTOL PHÂN PHỐI ĐẾN PHỔI Ngành: Công nghệ dược phẩm Bào chế thuốc Mã số: 8720202 LUẬN VĂN THẠC... trình bào chế hệ micro tích hợp nano mang thuốc kháng lao ethambutol đạt đặc tính lý hóa phù hợp phân phối đến phổi Phương pháp nghiên cứu Tiểu phân nano acid poly-(D, L-lactid-co-glycolid) tải ethambutol. .. phổi [59] Trên sở đó, đề tài ? ?Nghiên cứu bào chế hệ micro tích hợp nano mang thuốc kháng lao ethambutol phân phối đến phổi? ?? thực với mục tiêu cụ thể sau: - Xây dựng cơng thức quy trình điều chế