Hoàn thiện quy trình thu hồi Chitin tù vỏ tôm bằng men Lactic

Hoàn thiện quy trình thu hồi Chitin tù vỏ tôm bằng men Lactic Hoàn thiện quy trình thu hồi Chitin tù vỏ tôm bằng men Lactic Hoàn thiện quy trình thu hồi Chitin tù vỏ tôm bằng men Lactic luận văn tốt nghiệp,luận văn thạc sĩ, luận văn cao học, luận văn đại học, luận án tiến sĩ, đồ án tốt nghiệp luận văn tốt nghiệp,luận văn thạc sĩ, luận văn cao học, luận văn đại học, luận án tiến sĩ, đồ án tốt nghiệp

ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan nội dung đồ án tốt nghiệp trích lọc tổng hợp từ nguồn tài liệu rõ ràng, khơng chép hình thức nào, số liệu trích dẫn trung thực em xin chịu trách nhiệm lời cam đoan TP HCM, tháng năm 2014 Sinh viên Dương Quốc Xuân ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP LỜI CẢM ƠN Em xin chân thành cám ơn tất quý thầy cô trường Đại Học Kỷ Công Nghệ TP.HCM, thầy Khoa Cơng nghệ Sinh Học tận tình giãng dạy, truyền đạt kinh nghiệm kiến thức hướng dẫn giúp đỡ em suốt thời gian học tập tạo điều kiện thực để em hoàn thành đồ án tốt nghiệp Đặc biệt em cám ơn Tiến sĩ Nguyễn Hồi Hương tận tình hướng dẫn tạo điều kiện để em thực hoàn thành tốt đồ án Sinh viên thực Dương Quốc Xuân ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP MỤC LỤC Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục i Danh mục hình iii Danh mục bảng v CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan tôm sú nghề nuôi trồng tôm sú Việt Nam 1.1.1 Vị trí phân loại 1.1.2 Vùng phân bố tôm sú giới 1.1.3 Các vùng nuôi tôm chủ yếu Việt Nam 1.1.4 Các sản phẩm chủ yếu sản xuất từ tôm sú 1.1.5 Các phương pháp xử lý vỏ tôm thải 1.2 Tổng quan chitin – chitosan 1.2.1 Lịch sử phát chitin – chitosan 1.2.2 Nguồn gốc Chitin 1.2.3 Cấu tạo hóa học đặc điểm củaChitin – Chitosan 110 1.2.4 Cấu trúc chitin – chitosan 110 1.2.5 Tính chất hóa học chitin – chitosan 121 1.2.6Ứng dụng chitin – chitosan 143 1.2.7 Tình hình sản xuất chitin – chitosan 187 1.3 Tổng quan vi khuẩn lactic 243 1.3.1 Khái niệm 243 1.3.2 Đặc tính chung 254 1.3.3 Đặc điểm hình thái số giống LAB chủ yếu 265 i ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 1.3.4 Đặc điểm sinh lý – sinh hóa 320 1.3.5Giới thiệu nghiên cứu ứng dụng vi khuẩn lactic vào lên men thu hồi chitin.376 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 2.1 Vật liệu nghiên cứu 38 2.1.1Địa điểm nghiên cứu 398 2.1.2 Thời gian thực 398 2.1.3Thiết bị dụng cụ 398 2.2 Phương pháp luận 410 2.3 Phương pháp nghiên cứu 421 2.3.1Thu thập mẫu nguyên liệu 421 2.3.2 Xác định thơng số thành phần hóa học ngun liệu đầu vỏ tơm 421 2.3.3Quy trình lên men kéo dài 443 2.3.4Xác định nguồn đường 454 2.3.5So sánh hiệu thu hồi chitin- chitosan quy trình hóa học lên men lactic 465 2.3.6 Phương pháp tiến hành 487 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 565 3.1 Xác định thành phần hoá học nguyên liệu vỏ đầu tôm 565 3.2 Quá trình lên men kéo dài 565 3.3 Xác định nguồn đường 60 3.4 So sánh phương pháp hóa học lên men lactic 604 3.4.1 So sánh thông số chitin thu từ phương pháp xử lý hóa học lên men lactic 665 3.4.2 So sánh thông số chitosan thu từ phương pháp xử lý hóa học lên men lactic 676 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 69 3.1 Kết luận 69 ii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 3.2 Kiến nghị 709 Tài liệu tham khảo 710 Phụ lục .73 iii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo chitin 11 Hình 1.2Cấu tạo chitin chitosan 11 Hình 1.3 Quy trình tổng quát thu nhận chitin sản xuất chitosan từ vỏ đầu tôm 17 Hình 1.4 Quy trình sản xuất chitin, chitosan từ nguyên liệu vỏ đầu tôm phương pháp túy hóa học Robert, đại học Nottingham Trent (1998) 19 Hình 1.5 Quy trình lên men vỏ tôm thu nhận chitin Bhaskar, viện nghiên cứu công nghệ thực phẩm, Ấn Độ, 2010 21 Hình 1.6 Cây phát sinh loài vi khuẩn lactic (OwenR Fennema cộng sự, 2004) 24 Hình 1.7 Lactobacillus species 26 Hình 1.8 Streptococcus 27 Hình 1.9 Leuconostoc 29 Hình 1.10 Pediococcus sp 30 Hình 1.11Con đường lên men glucose 34 Hình 2.1 Sơ đồ xử lý vỏ tơm trước thí nghiệm 38 Hình 2.2 Sơ đồ tóm tắt thí nghiệm xác định thành phần nguyên liệu 42 Hình 2.3 Sơ đồ thu hồi chitin-chitosan phương pháp hóa học 46 iv ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Hình 2.4 Quy trình lên men phương pháp sinh học sử dụng rỉ đường 47 Hình 2.5 Nhớt kế Ostwald 53 Hình 3.1 Hàm lượng acid lactic (%) sinh trình lên men kéo dài 0, ngày, ngày, 10 ngày 56 Hình 3.2 Hàm lượng N-amin (mg/g) sinh trình lên men kéo dài với thời gian 0h, ngày, ngày, 10 ngày 56 Hình 3.3 Biểu đồ thể Hàm lượng N-protein (mg/g) sinh trình lên men kéo dài với thời gian 0h, ngày, ngày, 10 ngày 57 Hình 3.4 Hiệu khử protein (%)sauthời gian lên men 0h, ngày, ngày, 10 ngày 58 Hình 3.5 Hiệu khoáng (%)sau thời gian lên men 0h, ngày, ngày, 10 ngày 59 Hình 3.6 Hàm lượng acid lactic (%) sinh q trình lên men lactic vỏ, đầu tơm sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường sau thời gian 10 ngày 60 Hình 3.7 Hàm lượng N-amin (mg/g) sau 10 ngàylên men lactic vỏ, đầu tôm sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường 61 Hình 3.8 Hàm lượng nito protein (mg/g) sau 10 ngày lên men lactic vỏ, đầu tôm sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường 61 Hình 3.9 Hiệu khử protein (%)sau 10 ngày lên men lactic vỏ, đầu tôm sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường 62 Hình 3.9 Biểu đồ thể hiệu khử khoáng (%) môi trường sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường sau thời gian 10 ngày 63 Hình 3.10 Chitin chitosan thu 64 v ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Hình 3.11 Phản ứng màu xác định chitosan mẫu xử lý phương pháp hóa học lên men lactic 66 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần chất hữu loài động vật chân đốt Bảng 2.1 Chuẩn bị dung dịch albumin chuẩn 50 Bảng 3.1 Thành phần hóa học vỏ tôm 55 Bảng 3.2 Hiệu khử protein (%) trình lên men kéo dài với thời gian 0h, ngày, ngày, 10 ngày 57 Bảng 3.3 Hiệu khống (%) q trình lên men sau thời gian lên men 0h, ngày, ngày, 10 ngày 58 Bảng 3.4 Hiệu khử protein (%)sau 10 ngày lên men lactic vỏ, đầu tôm sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường 62 Bảng 3.5 Hiệu khử khống (%)sau 10 ngày lên men lactic vỏ, đầu tơm sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường 62 Bảng 3.6 Hiệu khử protein phương pháp xử lý hóa học lên men lactic sau 10 ngày sử dụng rỉ đường 65 Bảng 3.7 Hiệu khử khoáng phương pháp xử lý hóa học lên men lactic sau 10 ngày sử dụng rỉ đường 65 Bảng 3.8 So sánh số đặc tính chất vật lý chitosan từ chitin theo hương pháp xử lý hóa học hóa học trình lên men lactic 67 Bảng 3.9 Giá thành nguyên liệu lên men phương pháp hóa học phương pháp lên men lactic xử lý 1000g vỏ tôm tạo chitin 67 vi ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Nước ta có nguồn thủy sản dồi dào, lượng vỏ giáp xác phế liệu hàng năm lớn (năm 2005 70.000 tấn) Trong có vỏ tơm Tôm mặt hàng chủ lực thủy sản Việt Nam, chủ yếu tôm đông lạnh Theo báo cáo thủy sản, sản lượng tôm năm 2012 nước có 1.529 sở sản xuất tơm sú giống, sản xuất 37 tỷ giống có 185 sở sản xuất tôm chân trắng giống, sản xuất gần 30 tỷ giống Hiện có 30 tỉnh/thành nuôi tôm nước lợ, thả nuôi 657.523 ha, đạt sản lượng 476.424 diện tích ni tôm sú chiếm 94,1% 67.2% sản lượng Tương ứng với sản lượng tơm hàng năm có khối lượng phế liệu khổng lồ gồm đầu vỏ tôm thải môi trường Hiện nước ta nguồn phế liệu đầu vỏ tôm chưa tận dụng quy mô lớn, chủ yếu làm thức ăn gia súc hay thải mơi trường gây nhiễm tình trạng đặt yêu cầu cấp bách nghiên cứu sử dụng hợp lý hiệu lượng phế liệu để sản xuất sản phẩm có giá trị cao Trên giới có nhiều nghiên cứu tái sử dụng vỏ tôm làm thức ăn gia súc, gia cầm đặc biệt thu nhận hợp chất quý vỏ tôm chitin carotenoid Hiện chitin-chitosan sản phẩm nhận từ chitin –chitosan ứng dụng rộng rãi nhiều lĩnh vực đời sống y học , nông nghiệp, bảo vệ môi trường… đặc biệt y học chitin-chitosan coi polymer dược phẩm Các quy trình sản xuất chitin trước quy trình xử lý vỏ tơm phương pháp hóa học dùng nhiều hóa chất gây nhiễm mơi trường Nhưng bên cạnh quy trình hóa học xuất quy trình sản xuất chitin-chitosan sinh học dựa vi khuẩn lactic cho hiệu cao, thân thiện với mơi trường Quy trình ứng dụng công nghệ sinh học vào sản xuất chitin-chitosan bắt đầu ý Việt Nam Những nghiên cứu trước đề nghị quy trình lên men lactic thu hồi chitin từ vỏ, đầu tơm cịn nhiều vấn đề cần giải để triển khai thực tế Do đó,tơi xin thực đề tài “Hồn thiện quy trình thu hồi chitin từ vỏ tơm lên men lactic” ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Tình hình nghiên cứu Có nhiều cơng trình nghiên cứu vấn đề giới, đặc biệt Ấn Độ, Nhật Bản, Anh, Pháp…đều tìm điểm chung phương pháp lên men lactic vỏ tôm thu nguồn chitin dễ dàng tinh hiệu suất cao so với phương pháp xử lý hóa học ((Rao Stevens2005; Prameela cộng 2010).?) Tại trường đại học cơng nghệ Hồ Chí Minhđã có nghiên cứu lên men lactic vỏ tôm từ năm 2012 Nguyễn Thị Ngọc Thu 08DSH: khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ nước trình lên men vỏ tôm L acidophilus xác định tỉ lệ nước 2,5:1 với vỏ tôm nguyên liệu thời gian lên men 96 Lê Thị Hồng Thủy 09 DSH: “Phân lập, tuyển chọn vi khuẩn lactic từ nem chua cho trình lên lactic thu hồi chitin từ vỏ đầu tôm” cho thấy vi khẩn LAB phân lập mang kí hiệuL5 cho kết lên men vỏ đầu tôm tốt nhất; khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ đường lên trình lên men lactic cho kết cho thấy lượng đường cho kết tốt 20% giảm nữa; ảnh hưởng mật độ giống lên trình lên men lactic cho thấy mật độ giống cho kết lên men tốt 6,13x106 cfu/ml Những vấn đề tồn tại: Thời gian lên men kéo dài không, tối đa ngày Ảnh hưởng lên men kéo dài đến hiệu khử khoáng khử protein nào? Có thể sử dụng nguồn đường rẻ tiền glucose không ? So sánh phương pháp lên men lactic với phương pháp hóa học có khác biệt chitin sản phẩm cuối chitosan khơng? Mục đích nghiên cứu Hồn thiện quy trình thu hồi chitin-chitosan từ vỏ tơm lên men lactic giải vấn đề tồn nêu ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 3.4.2 So sánh thông số chitosan thu từ phương pháp xử lý hóa học lên men lactic Chitin sau lên men ngâm NaOH 40%, w:v =1:10, đun 100-110oC 5h Rửa phơi khô tự nhiên thu chitosan 3.4.2.1 Định tính chitosan Đối chứng Phương pháp hóa học Lên men lactic Hình 3.11 Phản ứng màu xác định chitosan mẫu xử lý phương pháp hóa học lên men lactic Qua hình 3.11 Ta thấy phương pháp hóa học lên men lactic tạo chitosan Chitosan tan acid acetic 1% phản ứng màu với KMnO4 Cho màu dung dịch chuyển từ màu tím sang vàng nhạt Khơng có khác biệt phản ứng màu chitosan thu từ chitin – phương pháp hóa học chitin-lên men lactic 3.4.2.2 Độ nhớt độ hòa tancủa chitosan thu từ phương pháp xử lý hóa học lên men lactic 67 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Bảng 3.8 So sánh số đặc tính chất vật lý chitosan từ chitin theo hương pháp xử lý hóa học hóa học q trình lên men lactic Thơng số Độ hịa tan (%) Độ nhớt (m2/s) Phương pháp xử lý hóa học Phương pháp lên men lactic 95,730a ± 3,010 96,002a ± 4,328 9,013a ± 0,165 8,977a ± 0,196 Kết thí nghiệm thu chitosan từ chitin q trình lên men phương pháp xử lý hóa học lên men lactic sử dụng rỉ đường xử lý statgraphics cho thấy: % độ hòa tan phương pháp hóa học lên men lactic khơng có khác biệt với mức ý nghĩa =0,05; độ nhớt khơng có khác biệt phương pháp hóa học lên men lactic với mức ý nghĩa =0,05 Bảng 3.9 Giá thành nguyên liệu lên men phương pháp hóa học phương pháp lên men lactic xử lý 1000g vỏ tơm tạo chitin: Giá thành Phương pháp hóa học Phương pháp sinh học HCl 0,25N 40000ml 260000 đồng NaOH 1M 40000 ml 1500 00đồng NaCl 250g 6500đồng Rỉ đường 910 ml 6370 đồng Giống vi khuẩn 5000đồng 2,88x109cfu Tổng 410000 đồng 17870 đồng Qua bảng 3.9cho thấy độ hịa tan độ nhớt khơng khác biệt so với phương pháp hóa học Nhưng phương pháp lên men lactic không ô nhiễm môi trường giá thành nguyên liệu rẻ tiền cụ thể để xử lý 100g vỏ tơm tạo chitin, phương pháp xử lý hóa học sử dụng 410000 đồng lên men lactic sử dụng 17870 đồng bảng 3.9 Qua tơi xin đề nghị quy trình thu hồi chitin-chitosan từ vỏ đầu tơm lên men lactic: : 68 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Vỏ tôm Rỉ đường xử lý lên men (20 g/l đường khử, 37oC, giống 2,88x106 cfu/g, 10 ngày) chitin Ngâm NaOH( 40%, 100oC, 5h) Rửa trung tính Khử màu H2O2 Phơi khô tự nhiên chitosan 69 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 3.1 Kết luận Thời gian lên men lactic vo đầu tôm thu chitin tốt từ 7-10 ngày làm hiệu xử lý khoáng tăng từ 69% lên 82% (tăng 13%), hiệu khử protein tăngtừ 56% lên 68% (tăng 12%)Có thể thay đường glucose rỉ đường sau xử lý điều chỉnh 20g/l đường khử cho hiệu khử khoáng cao glucoselà từ 83% lên 88% ( tăng 5%)và khử protein cao glucose từ 76% lên 84 %(tăng 8%)và chi phí rẻ phương pháp xử lý hóa học sử dụng 410000 đồng lên men lactic sử dụng 17870 đồng Phương pháp lên men lactic so với phương pháp hóa học thu nhận chitin có hiệu khử khống tăng từ 73% lên 88%( tăng 15%)và khử protein tăng từ 69% lên 84% (tăng 15%) Chitosan thu từ phương pháp xử lý hóa học lên men lactic có độ hòa tan độ nhớt màu sắc phân biệt Giá thành sản phẩm lên men lactic rẻ xử lý hóa học nhiều phương pháp lactic lại không gây ô nhiễm môi trường 3.2 Kiến nghị Kiến nghị tăng quy mơ thí nghiệm Tập trung nghiên cứu tuyển chọn vi khuẩn lên men lactic có khả lên men lactic mạnh sinh protease cao để phát triển khả xử lý vỏ đầu tôm phương pháp lên men lactic 70 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Tài liệu tham khảo  Tài liệu sách: Nguyễn Văn Mùi (2007) Thực hành hóa sinh học, NXB Đại học quốc gia Hà Nội Phạm Văn Tình (2005) Kỹ thuật ni tơm sú, NXB nông nghiệp Trang Sĩ Trung, Nguyễn Anh Tuấn, Trần Thị Luyến Nguyễn Thị Hằng Phương, 2010 Chitin – Chitosan từ phế liệu thủy sản ứng dụng NXB Nông nghiệp  Tài liệu chương sách: Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến Phạm Văn Tỵ (2000) Vi sinh vật học Nhà xuất Giáo Dục, trang 141 – 160, 221 – 299 Nguyễn Đức Lượng (2002).Công nghệ vi sinh tập Vi sinh vật học công nghiệp Nhà xuất Đại Học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh, trang 33 – 34 Nguyễn Văn Thiết, Đỗ Ngọc Tú (2007) “Nghiên cứu tách chiết chitin từ đầu – vỏ tôm phương pháp sinh học-sử dung bromelatin dịch ép vỏ dứa”.Tạp chí khoa học công nghệ Tập 45, số Tr 51-58  Tài liệu báo tạp chí Đỗ Đình Ràng, Phạm Đình Cường (2000) Xác định hàm lượng chitin số lồi thủy sản Việt Nam.Tạp chí HH CNHH, số Nguyễn Hữu Đức, Nguyễn Hoàng Hà, Hoàng Minh Châu, Nguyễn Kim Hùng (1998) Bước đầu nghiên cứu bán tổng hợp dẫn chất chitosan từ vỏ tôm ứng dụng kỹ thuật bao phim thuốc, Tạp chí Dược học, 1, 1998, 6-7 Nguyễn Hồi Hương, Nguyễn Thị Ngọc Thu (2013).Thu nhận chitin từ vỏ, đầu tôm sú phương pháp lên men lactic.Kỷ yếu Hội thảo Khoa học Khoa MTCNSH 2013 Ứng dụng Khoa học Cơng nghệ mục tiêu phát triển bền vững, TP HCM 31/05/2013, 247-260 Balcke, J (1884).Ueber fauligen Geruch des Bieres.Wochenschr.Brau.1:257 71 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Dicks, LMT; M Silvester, PA Lawson, MD Collins (2000).Lactobacillus fornicalis sp nov., isolated from the posterior fornix of the human vagina InternationalJournal of Systematic and Evolutionary Microbiology (Society for General Microbiology) 50 (3): 1253–8 Facklam R (2002) What happened to the streptococci: overview of taxonomic and nomenclature changes Clin.Microbiol Rev 15 (4): 613–30 Gunsalus, I C.,and C F Niven (1942) The effect of pH on the lactic acid fermentation.J Biol Chem 145:131 – 136 Kandra Prameela, Ch Murali Mohan, P.V Smitha, K.P.J Hemalatha (2010) “bioremediation of shrimp biowaste by using natural probiotic for chitin and carotenoid production an alternative method to hazardous chemical method” Department of Biotechnology, GITAM Institute of Technology, Rushikonda, GITAM University,Visakhapatnam 530 045, India Volume:I, Issue – Makarova, K.; Slesarev, A.; Wolf, Y.; Sorokin, A.; Mirkin, B.; Koonin, E.; Pavlov, A.; Pavlova, N et al (Oct 2006) Comparative genomics of the lactic acid bacteria Proc Natl Acad Sci U S A 103 (42): 15611–6 N.G Fransen, M B O’Conell, E K Arendt (1997) Short communication A modified agar medium for the screening of proteolyric activity of starter cultures for meat fementation purposes International Journal of Food Microbiology 36, 235239 ORLA-JENsEN, S (1919)The lactic acid bacteria Mem Acad Roy Sci Danemark, Sect.sci., – Owen R Fennema et al (2004).Lactic Acid Bacteria.Food Science and Teachnology  Tài liệu luận văn luận án Ngọc Thu (2012) “Nghiên cứu khử khoáng thu nhận chitin lên men lactic từ vỏ đầu tôm sú”.Trường Đại học Kỹ thuật công nghệ TpHCM Dương Thúy Vy (2010) “Xây dựng sưu tập giống vi khuẩn lên men lactic có hoạt tính probiotics”.Trường Đại học Kỹ thuật công nghệ TpHCM 72 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP  Tài liệu trích dẫn từ internet Ann C Smith, University of Maryland, 7/2013, http://lib.jiangnan.edu.cn/asm/116-introduce.htm GrahamColm, 7/2013, http://ookaboo.com/o/pictures/picture/12289587/Gramstained_smear_of_streptococ ci 7/2013, http://bacterioweb.univfcomte.fr/photo2detail.php?id=227 7/2013,http://bacterioweb.univfcomte.fr/photo2detail.php?id=228 7/2013,http://doc.edu.vn/tai-lieu/do-an-nghien-cuu-tim-hieu-ung-dung-chitinchitosan-8908/ 73 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Phụ lục Bảng A : Thành phần môi trường MRS – Broth : Glucose 20g Pepton 10g Beef extract powder 8g Sodium acetate 5g Yeast extract 4g K2HPO4 3H2O 2g MgSO4 7H2O 0.2g MnSO4 H2O 0.05g Triamonium citrate 2g Tween 80 ml Nước cất lít  Xử lý rỉ đường đinh lượng 20g/l đường khử: Rỉ đường: sau thu nhận từ nhà máy đường, 100 ml dung dịch mật đường đường mật mía thủy phân cách thêm ml dung dịch H2SO4 20% Đung cách thủy 20 phút chỉnh pH môi trường lên 6,5 với KOH 4,0 M Xác định lượng đường phản ứng DNS Rỉ đường pha loãng thực phản ứng DNS kết vào dường chuẩn glucose Tính lượng đường 1ml rỉ đường 0,22g Tính lượng rỉ đường cần cho vào 91ml Đường chuẩn glucose: Nồng độ 0,2 0,4 0,6 mg/m 74 0,8 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP OD540 0,167 0,373 0,536 0,878 1,177 Bảng B : Nồng độ acid lactic (%) sinh trình lên men kéo dài với thời gian 0h, ngày, ngày, 10 ngày Tim e Co unt 0h 10 ngày Ave rage Standard deviation 0,1 93 Coeff.of 0,52 26,65% 5,4 0,225 4,16% 5,5 0,72 13,21% 0,11 2,23% 5,0 Homogene ous Groups variation 3 Mean 0,193 X 5,4 X 5,5 X 5,07 X Bảng C : Hàm lượng Namin (mg/g) sinh trình lên men kéo dài với thời gian 0h, ngày, ngày, 10 ngày 75 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Tim e Co unt 0h Ave rage 22, 05 ngày 10 14, ngày 1,26 5,72% 2,1 13,49% 4,15 28,66% 63 46 Mean Homogene ous Groups variation 9,5% 15, Coeff.of 0,7 ngày deviation 7,3 Standard 7,35 22,05 X X 15,63 X 14,46 X Bảng D : Hàm lượng N protein (mg/g) sinh trình lên men kéo dài với thời gian 0h, ngày, ngày, 10 ngày Tim e Co unt 0h Ave rage 0,6 ngày 0,3 ngày 10 0,3 ngày deviation 1,0 Standard Coeff.of Mean ous Groups variation 0,038 3,8% 0,085 13,75% 0,07 19,9% 0,021 5,8% Homogene 1,01 0,62 X X 0,35 X 0,036 X Bảng E: Nồng độ acid lactic (%) môi trường sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường sau thời gian 10 ngày Môi trường Gluc Co unt rage Ave Standar d deviation 7,05 Coeff.of Mean ous Groups variation 0,069 0,97% 76 Homogene 7,05 X ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ose Sach arose Rỉ 8,28 11,0 đường 0,09 1,08% 0,16 1,46% 8,28 11,07 X X Bảng F Hàm lượng Namin (mg/g) môi trường sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường sau thời gian 10 ngày Môi trường Co unt Gluc rage Sach Rỉ 30,1 35,5 đường d deviation arose Standar 22,1 ose Ave Coeff.of Mean ous Groups variation 0,2 0,91% 0,7 2,32% 1,01 2,8% Homogene 22,16 X 30,1 35,58 X X Bảng G Hàm lượng nito protein (mg/g) môi trường sử dụng đường glucose, saccharose rỉ đường sau thời gian 10 ngày Môi trường unt Gluc ose Sach arose Rỉ đường Co Ave rage Standar d deviation 0,48 Coeff.of Mean ous Groups variation 0,017 3,5% 0,4 0,017 4,2% 0,75 0,05 6,8% Homogene 0,489 X 0,4 0,075 X X Bảng H Độ hòa tan chitosan phương pháp hóa học lên men lactic 77 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Phươ ng pháp Co unt Hóa rage Lên men lactic Standar d deviation 95,7 học Ave 3 96 Coeff.of Mean ous Groups variation 3,01 3,14% 4,32 4,51% Homogene 95,73 X 96 X Bảng I Độ nhớt chitosan phương pháp hóa học lên men lactic Phươ ng pháp Co unt Hóa học Lên men lactic rage Ave Standar d deviation Coeff.of Mean ous Groups variation 9,01 0,165 1,83% 8,98 0,195 2,18% Hình phụ lục Máy ly tâm 78 Homogene 9,01 X 8,98 X Hình phụ lục Máy kjendal ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Hình phụ lục Máy cất đạm Hình phụ lục Máy sấy Hình phụ lục Lị nung Hình phụ lục Nồi hấp khử trùng 79 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Hình phụ lục Máy đo OD Hình phụ lục Tủ ủ 370C Hình phụ lục Lên men lactic hình phụ lục 10 Xử lý hóa học 80 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Hình phụ lục 11: Lên men rỉ đường 81 Hình phụ lục 12: Cốc nung ... nghị quy trình lên men lactic thu hồi chitin từ vỏ, đầu tơm cịn nhiều vấn đề cần giải để triển khai thực tế Do đó,tơi xin thực đề tài “Hồn thiện quy trình thu hồi chitin từ vỏ tôm lên men lactic? ??... khuẩn lactic vào lên men thu hồi chitin Lên men acid lactic phương pháp lên men sử dụng quy trình sinh học để khử khống chitin Nó thu hồi chitin cách thủy phân protein liên kết với chitin vỏ đầu tôm. .. dụng trực tiếp Bacillus spp Hình 1.10 trình bày quy trình lên men lactic Ấn Độ để thu nhận chitin 21 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Hình 1.5 Quy trình lên men vỏ tôm thu nhận chitin Bhaskar, viện nghiên cứu công