Khảo sát ảnh hưởng của tyloxapol lên hoạt tính hmg coa reductase và tác động ức chế hmg coa reductase của cao chiết toàn phần từ lá dứa pandanus amaryllifolius (r ) pandanaceae

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN DƢƠNG NGỌC THỚI KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA TYLOXAPOL LÊN HOẠT TÍNH HMG-COA REDUCTASE VÀ TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ HMG-COA REDUCTASE CỦA CAO CHIẾT TOÀN PHẦN TỪ LÁ DỨA PANDANUS AMARYLLIFOLIUS (R.) PANDANACEAE Luận văn Thạc sĩ Dƣợc học Thành phố Hồ Chí Minh – 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN DƢƠNG NGỌC THỚI KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA TYLOXAPOL LÊN HOẠT TÍNH HMG-COA REDUCTASE VÀ TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ HMG-COA REDUCTASE CỦA CAO CHIẾT TOÀN PHẦN TỪ LÁ DỨA PANDANUS AMARYLLIFOLIUS (R.) PANDANACEAE Chuyên ngành: Dƣợc lý Dƣợc lâm sàng Mã số: 60 72 04 05 Luận văn Thạc sĩ Dƣợc học NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Huỳnh Ngọc Trinh Thành phố Hồ Chí Minh – 2017 ii Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình Tác giả NGUYỄN DƢƠNG NGỌC THỚI c Thới iii Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Luận văn thạc sĩ dƣợc học – Khoá: 2015 - 2017 Chuyên ngành: Dƣợc lý - Dƣợc lâm sàng - Mã số: 60 72 04 05 KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA TYLOXAPOL LÊN HOẠT TÍNH HMG-COA REDUCTASE VÀ TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ HMG-COA REDUCTASE CỦA CAO CHIẾT TOÀN PHẦN TỪ LÁ DỨA PANDANUS AMARYLLIFOLIUS (R.) PANDANACEAE Học viên: Nguyễn Dƣơng Ngọc Thới Hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Huỳnh Ngọc Trinh Mục tiêu Khảo sát tác động hạ lipid huyết cao toàn phần từ Pandanus amaryllifolius Roxb (PA) qua ức chế in vitro in vivo hoạt tính HMG-CoA reductase Vật liệu phƣơng pháp Lá khô PA đƣợc chiết xuất phƣơng pháp ngấm kiệt với ethanol 50% Ở mơ hình in vitro, enzym HMG-CoA reductase đƣợc phân lập từ gan chuột nhắt trắng dùng để xác định hoạt tính ức chế cao PA dựa phƣơng pháp đo quang Chuột đƣợc gây tăng lipid huyết cách tiêm tĩnh mạch triton WR-1339 (250 mg/kg), sau cho uống cao nghiên cứu (25 g bột khơ/kg) thuốc đối chứng (atorvastatin) Định lƣợng lipid huyết hoạt tính HMG-CoA reductase sau tiêm triton 24 Kết bàn luận Cao PA ức chế in vitro enzym HMG-CoA reductase với IC50 khoảng 126 μg/ml Triton WR-1339 làm tăng có ý nghĩa cholesterol, triglycerid nhƣng làm giảm HDL-c Hơn nữa, hoạt tính HMG-CoA reductase tăng gấp lần so với chuột sinh lý Cao PA làm giảm đáng kể cholesterol triglycerid so với chuột không đƣợc điều trị Cao PA ức chế 32% hoạt tính HMG-CoA reductase Những tác động đƣợc so sánh với thuốc đối chứng, atorvastatin Kết luận Cao P.amaryllifolius cho thấy tác động hạ lipid hiệu cách ức chế hoạt tính HMG-CoA reductase c Thới iv Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Final assay for the Master of Pharmacology - Courses: 2015 - 2017 Specialization: Pharmacology - Clinical Pharmacy - Code: 60 72 04 05 EFFECTS OF TYLOXAPOL ON HMG-COA REDUCTASE ACTIVITY AND INHIBITORY EFFECTS ON HMG-COA REDUCTASE OF PANDANUS AMARYLLIFOLIUS (R.) PANDANACEAE LEAF EXTRACTION Student: Nguyen Duong Ngoc Thoi Supervisor: Assoc Prof PhD Huynh Ngoc Trinh Purpose The present work aimed at investigating the hypolipidemic effect of total extract from Pandanus amaryllifolius Roxb (PA) leaves through the inhibition of HMG-CoA reductase activity in vitro and in vivo Materials and methods: Dry PA leaves were extracted by percolation method with ethanol 50% In the in vitro setting, HMG-CoA reductase enzyme was isolated from livers of Swiss albino mice The obtained enzyme was used to determine the inhibitory activity of PA extract based on spectrophotometric measurements The in vivo hyperlipidemia was induced by single intravenous injection of triton WR-1339 at the dose of 250 mg/kg b.w, followed by oral administration of studied extract (equivalent to 25 g dried plant powders/kg b.w.) or reference drug (atorvastatin) The determination of lipid profiles and HMG-CoA reductase activity were performed at twenty-four hours after triton injection Results and discussion PA extract demonstrated in vitro inhibitory effect on HMG-CoA reductase activity with IC50 value at range of 126 μg/ml The injection of triton WR-1339 markedly increased levels of cholesterol, triglyceride levels but decreased HDL-c levels Moreover, HMGCoA reductase activity increased 4-fold higher than physiological control mice The administration of PA extract significantly reduced total cholesterol and triglyceride levels as compared to untreated mice Furthermore, PA extract also inhibited HMG-CoA reductase activity with reduction of 32% These effects were comparable to those of positive control, atorvastatin Conclusion: P amaryllifolius extract clearly showed promising hypolipidemic effect by inhibiting HMG-CoA reductase activity c Thới v Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 LỜI CẢM ƠN Luận văn đƣợc thực Phịng thí nghiệm Dƣợc lý, Khoa Dƣợc, trƣờng Đại học Lạc Hồng Đầu tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến ban lãnh đạo trƣờng đại học Lạc Hồng tạo điều kiện để em đƣợc thực đề tài nghiên cứu quý trƣờng Em xin chân thành cảm ơn PGS.TS Huỳnh Ngọc Trinh hết lịng hƣớng dẫn cho em lời khuyên hữu ích giúp em hoàn thành đề tài nghiên cứu nhƣ luận văn tốt nghiệp cách tốt Xin cảm ơn bạn DS Vƣơng Tố Uyên, ngƣời bạn đặc biệt, bạn khóa đại học tơi gắn bó suốt thời gian làm khóa luận đại học nhóm nghiên cứu đậu bắp, vừa bạn khóa cao học lại tơi chung hƣớng đề tài để chia sẻ vƣợt qua lúc khó khăn Cuối cùng, em chân thành cảm ơn gia đình ln ủng hộ động viên em để hoàn thành tốt luận văn c Thới vi Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ix DANH MỤC BẢNG x DANH MỤC HÌNH xi ĐẶT VẤN ĐỀ TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 RỐI LOẠN LIPID HUYẾT 2.1.1 Định nghĩa 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Các biến chứng rối loạn lipid huyết 2.2 ĐIỀU TRỊ 2.2.1 Điều trị không dùng thuốc 2.2.2 Điều trị thuốc 2.3 MƠ HÌNH TĂNG LIPID HUYẾT BẰNG TYLOXAPOL 10 2.4 ENZYM HMG-CoA REDUCTASE 12 2.4.1 Giới thiệu enzym 12 2.4.2 Cấu trúc HMGR 13 2.4.3 Tác động xúc tác HMGR 13 2.5 PHƢƠNG PHÁP PHÂN LẬP HMGR TỪ GAN CHUỘT 14 2.6 TỔNG QUAN VỀ CÂY LÁ DỨA 15 2.6.1 Tên gọi 15 2.6.2 Mô tả thực vật 16 2.6.3 Phân bố sinh thái 17 2.6.4 Thành phần hóa học hóa thực vật 17 2.6.5 Bài thuốc dân gian 18 2.6.6 Tác dụng dƣợc lý 18 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 3.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 20 3.1.1 Động vật thử nghiệm 20 c Thới vii Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 3.1.2 Hóa chất thiết bị dụng cụ 20 3.1.3 Dƣợc liệu 21 3.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 3.2.1 Phƣơng pháp chiết cao toàn phần 21 3.2.2 Phƣơng pháp xác định độ tro độ ẩm 22 3.2.3 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật 23 3.2.4 Phƣơng pháp tạo hỗn dịch protein từ gan chuột nhắt 24 3.2.5 Phƣơng pháp định lƣợng protein toàn phần phƣơng pháp Biuret 25 3.2.6 Phƣơng pháp định lƣợng hoạt tính HMG-CoA reductase 26 3.2.7 Phƣơng pháp khảo sát tác động ức chế in vitro HMG-CoA reductase 28 3.2.8 Khảo sát ảnh hƣởng tyloxapol HMG-CoA reductase 30 3.2.9 Phƣơng pháp khảo sát tác động ức chế in vivo HMG-CoA reductase 31 3.3 PHÂN TÍCH KẾT QUẢ THỐNG KÊ 34 KẾT QUẢ 35 4.1 ĐỘ ẨM, HIỆU SUẤT CHIẾT VÀ ĐỘ TRO 35 4.1.1 Độ ẩm, hiệu suất chiết bột dƣợc liệu khơ cao tồn phần Dứa 35 4.1.2 Độ tro bột dƣợc liệu khô Dứa 35 4.2 PHÂN TÍCH SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA THỰC VẬT LÁ DỨA 36 4.3 TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ IN VITRO HMGR 37 4.3.1 Kiểm chứng quy trình chiết enzym HMGR 37 4.3.2 Tác động ức chế in vitro enzym HMGR atorvastatin 38 4.3.3 Tác động ức chế in vitro enzym HMGR cao Dứa 40 4.4 THỜI GIAN TÁC ĐỘNG CỦA TYLOXAPOL TRÊN LIPID HUYẾT 41 4.5 ẢNH HƢỞNG CỦA TYLOXAPOL TRÊN HMGR 43 4.5.1 Nồng độ lipid huyết 43 4.5.2 Hoạt độ enzym HMGR 44 4.6 TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ IN VIVO HMGR CỦA CAO TOÀN PHẦN LÁ DỨA 45 4.6.1 Lipid huyết 45 4.6.2 Hoạt độ enzym HMGR 47 BÀN LUẬN 49 5.1 Mơ hình gây tăng lipid huyết cấp tính tyloxapol hoạt tính enzym HMGR 49 5.2 Tác động ức chế in vitro HMGR 50 c Thới viii Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 5.3 Hoạt tính ức chế in vivo HMGR 50 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 52 Tài liệu tham khảo 53 c Thới ix Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Tiếng Anh Apo Apoprotein DTT D,L-Dithiothreitol HDL High density lipoprotein HDL-c HMG-CoA Tiếng Việt Lipoprotein tỉ trọng cao HDL-cholesterol -hydroxy -methylglutanyl coenzyme A HMGR IV LDL HMG-CoA reductase Intravenous Tiêm tĩnh mạch Low density lipoprotein Lipoprotein tỉ trọng thấp LDL-c LDL-cholesterol Lp(a) Lipoprotein α LPL Lipoprotein lipase NADPH NPC1L1 PPAR SEM TG VLDL D,L-3-Hydroxy-3-MethylglutarylCoenzym A Niemann-Pick C1-Like protein Peroxisome proliferator activated receptor Standard error of mean Sai số chuẩn trung bình Triglyceride Very low density lipoprotein c Thới Lipoprotein tỉ trọng thấp Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 54 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Tiếng Anh 12 Bertges L.C., C.A.Mourão Jr, J B Souza, V A C Cardoso (2011), “Hyperlipidemia induced by Triton WR1339 (Tyloxapol) in Wistar rats”, Rev Bras Cien Med Saude., 1(1), pp.32-4 13 Borensztajn J., M S Rone and T J Kotlar (1976), “The Inbibition in vivo of Lipoprotein Lipase (Clearing-Factor Lipase) Activity by Triton WR-1339”, Biochem J., 156, pp.539-543 14 Buerki S., Callmander M.J., Devey D.S., Chappell L., Gallaher T., Munzinger J., Haevermans and Forest F (2012), “Straightening out the screwpines: A first step in understanding relationships within Pandanaceae”, Taxon 61(5), pp.10101020 15 Chen XK, Ge FH (2014), “Chemical components from essential oil of Pandanus amaryllifolius leaves”, Zhong Yao Cai, 37(4), pp.616-20 16 Chiabchalard A., Nooron N (2015), “Antihyperglycemic effects of Pandanus amaryllifolius Roxb leaf extract”, Phcog Mag, 11(41), pp.117-122 17 Chong HZ, Yeap SK, Rahmat A, Akim AM, Alitheen NB, Othman F, Gwendoline-Ee CL (2012), “In vitro evaluation of Pandanus amaryllifolius ethanol extract for induction of cell death on non-hormone dependent human breast adenocarcinoma MDA-MB-231 cell via apoptosis”, BMC Complementary and Alternative Medicine, 12, pp.134 18 Clay F Semenkovich, Anne C Goldberg, Ira J Goldberg (2011), Disorders of Lipid Metabolism, Williams Textbook of Endocrinology 12th edition, Saunders Elsevier, pp.1639-1650,1664-1668 19 DeBose-Boyd R A (2008), "Feedback regulation of cholesterol synthesis: sterol-accelerated ubiquitination and degradation of HMG CoA reductase", Cell Res, 18(6), 609-621 20 Friedman M And Byers S O (1952), “The mechanism responsible for the hypercholesterolemia induced by Triton WR-1339”, pp.117-130 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn Am J Physiol, 18, Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 55 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 21 Gibson G., Skett P (2001), Introduction to drug metabolism, 2nd ed., Blackie academic & Professional, Chapman & Hall, pp.217-259 22 Goldfarb S (1975), “Rapid stimulation of hepatic HMG-CoA reductase and cholesterol synthesis by Triton WR-1339”, Federation Proc., 34, pp.662 23 Goldfarb S (1978), “Rapid increase in hepatic HMG CoA reductase activity and in vivo cholesterol synthesis after Triton WR 1339 injection”, Journal of Lipid Research, 19, pp.489-494 24 Gunti Gowtham Raj Hyma Sara Varghese, Sarita Kotagiri, B M Vrushabendra Swamy, Archana Swamy and Rafi Khan Pathan, (2014), “Anticancer Studies of Aqueous Extract of Roots and Leaves of Pandanus Odoratissimus f ferreus (Y Kimura) Hatus: An In Vitro Approach”, J Tradit Complement Med., 4(4), pp.279-284 25 Hetal R Chaudhary, Dion R Brocks (2013), “The Single Dose Poloxamer 407 Model of Hyperlipidemia; Systemic Effects on Lipids Assessed Using Pharmacokinetic Methods, and its Effects on Adipokines”, J Pharm Pharmaceut Sci, 16(1), pp.65-73 26 Hirangi D Patel, Gaurang B Shah, and Vandit Trivedi (2011), “Investigation of HMG-CoA reductase inhibitory activity of antihyperlipidemic herbal drugs study”, Asian J Exp Biol Sci., 2(1), pp.63-68 27 T Huynh Ngoc, Q Nguyen Ngoc, A Tran T Van and N Vo Phung (2008), “Hypolipidemic Effect of Extracts from Abelmoschus esculentus L (Malvaceae) on Tyloxapol-Induced Hyperlipidemia”, Mah Uni Jour of Pharm Sci., 35(14), pp.42-46 28 Jamkhande P G., Chandak P G., Dhawale S C., Barde S R., Tidke P S., Sakhare R S (2014), “Therapeutic approaches to drug targets in atherosclerosis”, Saudi Pharm J., 22, pp.179-190 29 Joseph T Dipiro, Robert L Talbert, Gary Yee, Gary Matzke, Barbara Wells, L Michael Posey (2011), Pharmacotherapy: A Pathophysiologic Approach 8th edition, The McGraw-Hill Companies, pp.830-855 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 56 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 30 Kathleen M Botham & Peter A Mayes (2015) “Cholesterol Synthesis, Transport, & Excretion”, Harper’s Illustrated Biochemistry, The McGraw-Hill Education, pp.266-281 31 Kellner A., Correll J.W., Ladd A.T (1951), “Sustained hyperlipemia induced in rabbits by means of intravenously injected surface-active agents”, J Exp Med., 93, pp.373-384 32 Kourounakis A P., Victoratos P., Perulis N., Stefanou N., Jiangou M., Hadjipetrou L., Kourounakis P N (2002), “Experimental hyperlipidemia and the effect of NSAIDs”, Exp and Mol Path., 73, pp.135-138 33 Kuroda M K., Tanzawa Y Tsujita, and Endo A (1977), “Mechanism for elevation of hepatic cholesterol synthesis and serum cholesterol levels in Triton WR- 1339-induced hyperlipidemia”, Biochim Biophys Acta., 489, pp.119-125 34 Levine S., Saltzman A (2007), “A procedure for inducing sustained hyperlipemia in rats by administration of a surfactant”, J Pharmacol Toxicol Methods, 55(2), pp.224-226 35 Phuong Mai Mai, Ngoc Trinh Huynh (2005), “Study of antihyperlipidemic activity of Cao Bang bitter tea (Ilex kaushue S.Y.Hu-Aquifoliaceae) leaves extract against tyloxapol induced hyperlipidemia in mice”, Pharma Indochina IV, 2, pp.259-263 36 Mario A Tan, Mariko Kitajima , Noriyuki Kogure , Maribel G Nonato , Hiromitsu Takayama (2010), “Isolation of Pandamarilactonine-H from the Roots of Pandanus amaryllifolius and Synthesis of epi-Pandamarilactonine-H”, J Nat Prod., 73, pp.1453-1455 37 Mishra G, Khosa R L, Singh P, Jha K K (2015), “Hepatoprotective potential of ethanolic extract of Pandanus odoratissimus root against paracetamol-induced hepatotoxicity in rats”, J Pharm Bioall Sci, 7, pp.45-8 38 Mitropoulos K A., Venkatesan S., Balasubramaniam S (1978), “Compartmentation and supply of cholesterol: two important factors in the co- Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 57 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 ordinate regulation of hydroxymethyglutary-CoA reductase and cholesterol 7alpha-hydroxylase”, Biochem Soc Trans., 6(5), pp.878-883 39 Mukherjee, Maiti, Mukherjee, & Houghton (2006), “Leads from medicinal plants with hypoglycaemic potentials”, Indian Journal of Ethnopharmacology, 106(1), pp.1-28 40 Nagata Y and Zilversmit D B (1987), “Blockade of intestinal lipoprotein clearance in rabbits injected with Triton WR 1339-ethyl oleate”, J Lipid Res., 28, pp.684-692 41 Nor F M., Mohamed S., Idris N A., Ismail R (2008), ”Antioxidative Propertiesof Pandanus amaryllifolius Leaf Extracts in Accelerated Oxidation and Deep Frying Studies”, Food Chemistry, 110, pp.319-327 42 Ooi L S M., Sun S S M., Ooi V E C (2004), “Purification and Characterizationof a New Antiviral Protein from the Leaves of Pandanus amaryllifolius (Pandanaceae)”, The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 36, pp.1440-1446 43 Otway S and Robinson D.S (1967), “The use of a non-ionic detergent (Triton WR1339) to determine rate of triglyceride entry into the circulation of the rat under difference physiological conditions” , J Physiol., 190, pp.321-332 44 Peungvicha P., Temsiririrkkul S, Thirawarapan SS, Watanabe H R, Prasain JK, Tezuka Y, Kadota (1998), “4-Hydroxybenzoic acid: a hypoglycemic constituent of aqueous extract of Pandanus odorus root”, Journal of Ethnopharmacology, 62, pp.79-84 45 Pulok K Mukherjee (2015), Evidence-Based Validation of Herbal Medicine, Elsevier, pp.385 46 Shechter J R a I (1983), "Regulation of Rat Liver 3-Hydroxy-3-methylglutaryl Coenzym A Reductase", J Biol Chem, 259(2), 870-877 47 Schotz M.C., Scanu A and Page I H (1957), “Effect of Triton on lipoprotein lipase of rat plasma”, Am J Physiol., 188, pp.399-402 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 58 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 48 Schurr PE (2006), “Triton – induced hyperlipidemia in rats as an animal model for screening hyperlipidemic drugs”, Lipids, 7, pp.68-74 49 Stone J Robinson JG, Lichtenstein AH, Bairey Merz CN, Blum CB, Eckel RH, Goldberg AC, Gordon D, Levy D, Lloyd-Jones DM, McBride P, Schwartz JS, Shero ST, Smith SC Jr, Watson K, Wilson PW (2013), "2013 ACC/AHA Guildline on the Treatment of Blood Cholesterol to reduce Atheroscleotic Cardiovascular Risk in adults", J Am Coll Cardiol 63(25), pp.2889-2934 50 Takayama H, Ichikawa T, Kitajima M, Nonato MG, Aimi N (2001), “Isolation and characterization of two new alkaloids, norpandamarilactonine-A and -B, from Pandanus amaryllifolius by spectroscopic and synthetic methods”, J Nat Prod., 64(9), pp.1224-5 51 Takayama H, Ichikawa T, Kitajima M, Nonato MG, Aimi N (2002), “Isolation and structure elucidation of two new alkaloids, pandamarilactonine-C and -D, from Pandanus amaryllifolius and revision of relative stereochemistry of pandamarilactonine-A and -B by total synthesis”, 50(9), pp.1303-4 52 Taylor & Francis (2010), “Chemical Constituents and Post-Harvest Prospects of Pandanus amaryllifolius Leaves: A Review”, Food Reviews International, 26, pp.230-245 53 Thomas Fleming RPh (2000), PDR For Herbal Medicines, Medical Economics Company, pp.64 54 Thomas P Berso (2011), Drug Therapy for Hypercholesterolemia and Dyslipidemia, Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics 12th edition, The McGraw-Hill Companies, pp.877-908 55 Tsai YC, Yu ML, El-Shazly M, Beerhues L, Cheng YB, Chen LC, Hwang TL, Chen HF, Chung YM, Hou MF, Wu YC, Chang FR (2015), “Alkaloids from Pandanus amaryllifolius: Isolation and Their Plausible Biosynthetic Formation”, J Nat Prod., 78(10), pp.2346-54 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 59 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 56 Wakte K.V., Nadaf A.B., Thengane R.J and Jawali N (2009), “Pandanus amaryllifolius Roxb cultivated as a spice in coastal regions of India”, GeneticResources and Crop Evolution, 56, pp.735-740 57 W Mastura BT Mohamad Azlan (2010), “Extracts of the aerial roots from Pandanus amaryllifolius, Dissertation submitted in partial fulfillment of therequirements for the degree of Bachelor of Pharmacy (Hons.)”, Universiti Teknologi Mara, pp.7-9 58 Zeggwagh N.A., Sulpice T and Eddouks M (2007), “Anti-hyperglycaemic and Hypolipidemic Effects of Ocimum basilicum Aqueous Extract in Diabetic Rats”, American Journal of Pharmacology and Toxicology, 2(3), pp.123-129 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL1 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Quy trình phân tích chất dịch chiết ether Dịch chiết ether Acid sulfuric đặc Màu lụcxanh dƣơng đậm Thuốc thử Carr-Price Màu xanh chuyển sang đỏ Lớp phân cách có màu đỏ nâu-tím vịng màu lục hay tím khuếch tán lên Bốc chén sứ đến cắn Cho tác dụng với kiềm, soi UV365 Phản ứng Borntrager Có tủa Tăng cƣờng độ phát quang soi UV Dung dịch kiềm có màu đỏ Bốc đến cắn, hòa cắn nƣớc acid Phản ứng với thuốc thử chung alkaloid Bốc đến cắn Hòa tan cồn Làm phản ứng cyanidin Có màu đỏ Flavonoid Triterpenoid Carotenoid Tinh dầu Chất béo Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi Nguyễn rõ nguồnDương trích Ngọcdẫn Thới Bốc chén sứ đến cắn Làm phản ứng LiebermannBurchard Anthraquino n Cắn có mùi thơm Bốc chén sứ đến cắn Coumarin Có vết mờ Bốc chén sứ Có mùi thơm, thêm vài giọt cồn, bốc hết cồn Alkaloid Nhỏ lên giấy mỏng Bay ether Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL2 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Quy trình phân tích chất dịch chiết cồn Dịch chiết cồn Bốc đến cắn, hòa nƣớc acid Phản ứng với thuốc thử chung alkaloid Bốc đến cắn Cho tác dụng với kiềm, soi UV365 Đun cách thủy 10 phút với HCl 10% Xanh rêuxanh đen với FeCl3, tủa với gelatin muối Phản ứng với thuốc thử Fehling Có tủa đỏ gạch Thêm tinh thể Na2CO3 Có bọt khí bay lên Acid hữu Có bọt bền 15 phút Hợp chất khử Đỏ với dung dịch acid Xanh với dung dịch kiềm Bốc tới cắn, hòa nƣớc, lắc mạnh Saponin Phản ứng với dung dịch FeCl3 dung dịch gelatin muối Tanin Có màu đỏ Thêm vài giọt HCl 10% KOH 10% Fla.-anthocyanin Coumarin Có màu đỏ Fla.-Proanthocyanidin Alkaloid Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi Nguyễn rõ nguồnDương trích Ngọcdẫn Thới Làm phản ứng cynanidin Flavonoid-γ-pyron Tăng cƣờng độ phát quang Tím với TT RaymondMarthoud, đỏ với Xanthydrol Glycosid tim Có vết mờ Bốc đến cắn Phản ứng với TT RaymondMarthoud Xanthydrol Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL3 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Quy trình phân tích chất dịch chiết nƣớc Có bọt bền 15 phút Có bọt khí bay lên Có tủa đỏ gạch Có tủa bơng trắng Polyuronid Xanh rêu-xanh đen với FeCl3, tủa trằng ngà với gelatin muối Hợp chất khử Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi Nguyễn rõ nguồnDương trích Ngọcdẫn Thới Đỏ với dung dịch acid Xanh với dung dịch kiềm Bốc tới cắn, hòa lại cồn 25%.Phản ứng với thuốc thử Fehling Acid hữu Có màu đỏ Thêm tinh thể Na2CO3 Saponin Có màu đỏ Phản ứng với dung dịch FeCl3 dung dịch gelatin muối Tanin Tím với TT RaymondMarthoud, đỏ với Xanthydrol Thêm vài giọt HCl 10% KOH 10% Fla.-anthocyanidin Đun cách thủy 10 phút với HCl 10% Glycosid tim Alkaloid Bốc đến cắn, hòa lại cồn 25% Làm phản ứng cyanidin Fla.-Proanthocyanidin Có tủa Bốc đến cắn Phản ứng với TT RaymondMarthoud Xanthydrol Flavonoid-γ-pyron Chiết ether/kiềm, chiết lại nƣớc acid Phản ứng với thuốc thử chung alkaloid Dịch chiết nƣớc Bốc tới cắn, hịa tan cồn 25% Pha lỗng với nƣớc, lắc mạnh Pha lỗng thể tích cồn 95% hay ceton Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL4 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Nồng độ cholesterol triglycerid thời điểm vịng 48 [Chol] (mg/dl) Lơ 8h 12h 24h [Tri] (mg/dl) 48h 8h 12h 24h 48h 125,03 129,39 129,17 135,56 194,71 196,957 133,551 149,28 128,01 139,92 115,51 125,46 180,29 176,087 141,739 115,94 116,67 158,66 115,51 142,54 186,449 159,13 128,551 121,88 151,04 134,54 112,31 146,89 155,797 164,058 153,261 129,64 Sinh lý 129,53 143,33 150,89 120,16 180,29 199,058 171,884 118,77 113,26 139,85 145,01 109,19 181,522 207,899 132,536 119,64 146,48 136,3 187,24 163,67 183,303 177,906 154,503 133,26 108,82 107,68 124,93 96,619 166,236 120,51 101,17 131,31 151,91 134,91 TB SEM 131 143,775 123,788 111,624 176,29 146,1 141,74 197,562 157,044 168,745 166,44 129,12 132,58 135,80 131,28 4,96 5,32 146,42 149,192 143,26 7,17 6,14 176,99 170,83 5,35 8,24 144,56 137,44 5,91 6,64 206,18 230,58 250,71 137,16 503,696 371,449 473,841 133,99 292,92 264,58 255,5 131,06 843,696 909,638 308,46 307,45 268,43 585,87 121,45 149,8 1203,84 1183,55 609,348 100,07 328,47 338,52 366,64 114,57 3676,84 3311,93 2880,06 198,23 Bệnh 397,16 356,02 263,38 97,378 745,918 3612,16 1886,99 109,62 401,77 407,01 259,4 102,94 5028,15 3077,91 307,93 342,05 323,54 93,839 617,88 2839,26 1978,6 103 1305 112,24 379,4 355,32 300,16 135,67 737,052 2763,05 2482,06 198,38 335,17 367,27 410,74 141,42 796,897 4003,23 3937,03 197,69 TB SEM 328,6 329,87 299,83 20,33 18,08 18,88 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn 122,7 1572,66 2452,46 1793,20 141,63 6,94 215,81 374,32 286,93 5,73 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL5 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Độ giảm độ hấp thu dãy nồng độ atorvastatin Nồng độ atorvastatin (ng/ml) trắng 0,1 10 20 30 50 100 1000 OD 0,004 0,004 0,005 0,082 0,083 0,085 0,075 0,073 0,072 0,061 0,066 0,063 0,048 0,042 0,049 0,04 0,039 0,035 0,028 0,032 0,03 0,03 0,026 0,02 0,01 0,014 0,009 0,006 0,004 -0,013 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn OD TB SEM 0,004 0,083 0,001 0,073 0,001 0,063 0,001 0,046 0,002 0,038 0,002 0,030 0,001 0,025 0,003 0,011 0,002 -0,001 0,006 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL6 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Độ giảm độ hấp thu dãy nồng độ cao toàn phần Dứa Nồng độ cao Dứa (μg/ml) tr 50 75 100 250 300 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn OD 0,002 0,007 0,002 0,067 0,083 0,076 0,069 0,072 0,067 0,066 0,032 0,05 0,038 0,039 0,042 0,034 0,036 0,039 0,032 0,019 0,05 0,029 0,03 0,031 OD TB SEM 0,004 0,002 0,075 0,005 0,069 0,001 0,049 0,01 0,040 0,001 0,036 0,001 0,034 0,009 0,030 0,001 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL7 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Nồng độ cholesterol, triglycerid, HDL-c, protein gan hoạt độ enzym lô chuột thử nghiệm Lô Sinh lý TB SEM Bệnh TB SEM Ator TB SEM [Chol] (mg/dl) 106,46 72,82 114,65 113,87 85,03 124,46 102,88 8,08 406,17 453,39 330,17 394,48 467,62 394,48 426,37 580,77 431,68 25,96 351,93 328,35 274,63 335,04 309,78 374,80 355,05 259,30 323,61 14,2 [Tri] [HDL] [Prot] Hoạt độ (mg/dl) (mg/dl) (mg/ml) (nmol/phút) 113,57 98,73 51,89 5,36 95,28 47,98 45,81 5,36 188,03 65,25 47,01 3,43 93,73 62,29 83,37 2,14 91,68 39,24 54,05 4,72 105,78 57,09 63,94 8,25 114,68 61,76 57,68 4,88 15,06 8,36 5,78 0,85 1377,12 29,94 43,17 15,01 2364,00 29,55 43,22 15,65 2150,39 24,28 55,64 18,22 1792,05 29,94 40,88 13,72 1853,96 29,75 49,87 28,19 1917,92 31,18 37,11 14,04 2032,31 36,18 61,92 16,61 2524,31 54,52 46,21 16,93 2001,51 33,17 47,25 17,30 126,09 3,26 2,9 1,64 1720,71 49,25 42,27 3,75 1675,19 68,24 90,77 0,54 1759,66 54,97 56,63 -11,36 1816,65 33,58 84,36 2,47 1750,23 51,14 62,33 6,32 1949,49 47,82 70,82 8,25 1716,61 48,08 54,43 7,29 1615,33 40,80 44,49 -5,25 1750,48 49,24 63,26 1,50 35,36 3,58 6,23 2,39 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL8 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 Nồng độ cholesterol, triglycerid, HDL-c, protein gan hoạt độ enzym lô chuột thử nghiệm Lô Sinh lý TB SEM Bệnh TB SEM Ator TB SEM Lá Dứa [Chol] (mg/dl) 104,78 116,24 144,36 83,22 111,04 113,43 112,18 8,06 296,00 250,87 444,78 297,97 215,82 306,81 327,04 305,61 27,18 259,94 135,40 159,40 184,78 130,27 259,58 252,54 197,42 22,24 100,36 104,06 176,00 160,54 119,70 212,24 [Tri] (mg/dl) 146,62 110,08 163,77 163,00 143,46 98,54 137,58 11,15 1396,08 920,69 2938,38 1604,54 1412,23 1598,38 1342,23 1601,79 238,85 1286,08 699,92 872,23 1061,46 667,62 1363,77 1546,85 1071,13 128,95 532,23 402,23 703,00 460,69 576,85 641,46 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn [HDL] (mg/dl) 57,28 58,32 63,62 56,76 52,57 56,60 57,53 1,46 40,38 38,49 36,61 45,84 40,38 31,53 35,50 38,39 1,7 42,20 48,50 39,08 30,43 44,67 35,63 46,49 41,00 2,42 37,58 41,55 40,77 61,25 52,99 40,83 [Prot] Hoạt độ (mg/ml) (nmol/phút) 39,97 4,07 36,15 5,04 39,05 8,57 46,02 8,25 50,00 4,72 42,97 6,97 42,36 6,27 2,06 0,79 35,68 26,90 67,05 16,29 52,10 20,15 37,63 21,76 36,53 15,65 34,91 17,58 33,78 21,11 42,53 19,92 4,72 1,47 48,97 14,68 44,70 -6,86 50,44 14,04 62,17 2,47 44,49 -7,50 33,16 16,61 40,65 17,58 46,37 7,29 3,4 4,18 19,54 3,11 42,14 17,26 53,54 18,54 23,30 4,72 51,35 18,22 55,87 17,90 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PL9 Luận văn Thạc sĩ dược học 2017 TB SEM 301,49 398,21 304,78 278,75 215,61 32,01 943,77 2039,15 1302,23 1606,08 920,77 174,54 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn nàyDương tríchNgọc dẫn Thới Nguyễn 36,87 53,71 36,80 38,56 44,09 2,73 26,59 36,79 28,97 26,82 36,49 4,25 9,86 15,65 13,40 16,93 13,56 1,81 ... 05 KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA TYLOXAPOL LÊN HOẠT TÍNH HMG- COA REDUCTASE VÀ TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ HMG- COA REDUCTASE CỦA CAO CHIẾT TOÀN PHẦN TỪ LÁ DỨA PANDANUS AMARYLLIFOLIUS (R. ) PANDANACEAE Học viên: Nguyễn... gồm ba phần sau đây: - Thử nghiệm in vitro đánh giá tác động ức chế enzym HMG- CoA reductase (HMGR) cao chiết toàn phần từ Dứa - Khảo sát hoạt tính HMGR chuột tăng lipid huyết cấp tính gây tyloxapol. .. Mục tiêu Khảo sát tác động hạ lipid huyết cao toàn phần từ Pandanus amaryllifolius Roxb (PA) qua ức chế in vitro in vivo hoạt tính HMG- CoA reductase Vật liệu phƣơng pháp Lá khô PA đƣợc chiết xuất