Nghiên cứu ứng dụng chủng bacillus licheniformis tt01 xử lý mùi hôi tại chuồng nuôi chim cút

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƯỜNG - Võ Văn Tiền Khôi NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CHỦNG BACILLUS LICHENIFORMIS TT01 XỬ LÝ MÙI HÔI TẠI CHUỒNG NUÔI CHIM CÚT Đà Nẵng – Năm 2019 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƯỜNG - Võ Văn Tiền Khôi NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CHỦNG BACILLUS LICHENIFORMIS TT01 XỬ LÝ MÙI HÔI TẠI CHUỒNG NUÔI CHIM CÚT Chuyên ngành : Quản lý tài nguyên môi trường Mã số : 315032151121 GVHD : TS Đoàn Thị Vân Đà Nẵng – Năm 2019 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả Võ Văn Tiền Khôi LỜI CÁM ƠN Tơi xin gửi lời cảm ơn tới TS Đồn Thị Vân – Đại học sư phạm Đà Nẵng Người định hướng, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành khóa ḷn Tơi xin cám ơn thầy cô giáo khoa Sinh – Môi trường – Đại học sư phạm Đà Nẵng trang bị những kiến thức, cũng tạo điều kiện cho tơi hồn thành khóa ḷn Cuối cùng, tơi xin chân thành cám ơn gia đình bạn bè động viên, giúp đỡ, tạo điều kiện cho suốt thời gian qua Do điều kiện thời gian kiến thức hạn chế, nên viết khơng tránh khỏi những thiếu sót Tơi mong nhận được góp ý thầy giáo cũng các bạn để ḷn văn tơi được hồn thiện Xin chân thành cám ơn Đà Nẵng, ngày tháng 05 năm 2019 Võ Văn Tiền Khôi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT CFU Colony Forming Unit ppm Parts Per Million CPVS Chế phẩm vi sinh LB Lysogeny Broth E.coli Escherichia coli ĐC Đối chứng TN Thí nghiệm DANH MỤC HÌNH ẢNH STT TÊN HÌNH Hình 1.1 Mơ hình ni chim cút chuồng trại Hình 1.2 Chế phẩm vi sinh SUPER BIO.GS Hình 1.3 Sản lượng thịt chim cút một số SỐ TRANG nước thế giới (2007) Hình 1.4 Đặc điểm hình thái Bacillus licheniformis TT01 Hình 1.5 Thí nghiệm Bio Plus 11 heo 11 theo mẹ Hình 1.6 Thí nghiệm BioPlus gà thịt Ross 12 308 nuôi 40 ngày Hình 2.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm Hình 2.2 Sơ đồ bố trí thí nghiệm phun thử nghiệm Hình 3.1: Biểu diễn ảnh hưởng môi trường 15 16 21 bột gạo, nhiệt độ, thời gian đến tốc độ sinh trưởng phát triển chủng Bacillus licheniformis TT01 10 Hình 3.2 Biểu diễn ảnh hưởng môi trường 22 LB, nhiệt độ, thời gian đến tốc độ sinh trưởng phát triển chủng Bacillus licheniformis TT01 11 Hình 3.3 Tính đối chủng Bacillus 23 licheniformis TT01 với vi khuẩn E coli 12 Hình 3.4 Tính đối chủng Bacillus licheniformis TT01 với vi khuẩn Salmonella 23 Hình 3.5 Khả sinh enzym amylase (a), 13 14 24 enzyme protease (b), enzyme cellulase (c) Hình 3.6 Mật đợ Salmonella chất thải chăn 26 ni chim cút 15 Hình 3.7 Mật đợ E coli chất thải chăn 27 nuôi chim cút 16 Hình 3.8 Nồng đợ khí NH3 mơi trường 28 khơng khí chăn ni chim cút 17 Hình 3.9 Nồng đợ khí H2S mơi trường khơng khí chăn ni chim cút 29 DANH MỤC BẢNG STT TÊN BẢNG Bảng 1.1 Thống kê tình hình chăn ni chim cút Việt Nam Bảng 1.2 Sản lượng thịt chim cút năm 2007 một số nước cao thế giới (Nguồn: Worldpoultry, Vol 25 số 2) Bảng 3.1 Kết phân tích mơi trường, nhiệt đợ thời gian cho phát triển, sinh trưởng tốt đối với chủng Bacillus licheniformis TT01 Bảng 3.2 Mật độ Salmonella chất thải qua tháng Bảng 3.3 Mật độ E coli chất thải qua tháng Bảng 3.4 Nồng đợ khí NH3 mơi trường khơng khí chăn ni chim cút qua tháng Bảng 3.5 Nồng đợ khí H2S mơi trường khơng khí chăn ni chim cút qua tháng Bảng 3.6 Kết phân tích vi sinh vật mẫu khí chuồng trại chăn ni chim cút MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CÁM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC HÌNH ẢNH DANH MỤC BẢNG MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 4.1 Ý nghĩa khoa học 4.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Tổng quan về tình hình ni xử lý mùi phân chim cút 1.1.1 Tình hình ni xử lý mùi hôi phân chim cút Việt Nam 1.1.2 Tình hình ni chim cút thế giới 1.2.Tổng quan về chủng Bacillus lichenformis 1.2.1 Nguồn gốc 1.2.2 Phân loại 1.2.3 Cấu trúc 1.2.4 Đặc tính 1.2.5 Ứng dụng 10 1.2.6 Chế phẩm xử lý mùi hôi Bacillus sp 12 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1.Thời gian thời phạm vi nghiên cứu 13 2.2.Đối tượng nghiên cứu 13 2.3.Thiết bị, dụng cụ hoá chất 13 2.3.1 Thiết bị, dụng cụ 13 2.3.2 Hoá chất 14 2.4.Phương pháp nghiên cứu 14 2.4.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 14 2.4.2 Sơ đồ bố trí các cơng thức thí nghiệm 16 2.4.3 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng môi trường, nhiệt độ, thời gian đến tốc độ sinh trưởng phát triển Bacillus licheniformis TT01 16 2.4.4 Phương pháp xác định Salmonella 17 2.4.5 Phương pháp xác định E coli 17 2.4.6 Phương pháp phân lập chủng vi sinh vật 17 2.4.7 Phương pháp hoạt hóa chủng 17 2.4.8 Phương pháp xác định hoạt tính đối kháng 18 2.4.9 Phương pháp xác định hoạt tính enzym 18 2.4.10.Phương pháp tạo chế phẩm dạng lỏng 19 2.4.11.Phương pháp sử dụng chế phẩm vi sinh 19 2.4.12.Phương pháp thu mẫu khí phân tích các khí NH3 H2S 19 CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 3.1.Kết khảo sát ảnh hưởng môi trường, nhiệt độ thời gian đến tốc độ sinh trưởng phát triển chủng Bacillus licheniformis TT01 21 3.2.Khả đối kháng với Salmonella, E coli sinh enzym ngoại bào 23 3.2.1 Khả đối kháng với Salmonella, E coli 23 3.2.2 Khả sinh enzym ngoại bào 24 3.3.Đánh giá hiệu chủng Bacillus licheniformis TT01 chế phẩm EM1, Balasa N01 25 3.3.1 Xác định mật độ Salmonella, E coli phân chim cút 26 3.3.2 Đánh giá hiệu xử lý mùi chế phẩm vi sinh bổ sung vào chuồng nuôi chim cút 27 3.4.Đánh giá hiệu sử dụng chủng Bacillus licheniformis TT01 30 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 31 TÀI LIỆU KHAM KHẢO 32 PHỤ LỤC 36 Khóa luận tốt nghiệp giảm mật đợ Salmonella cịn góp phần làm giảm khí H2S, từ làm giảm mùi hôi thối khu vực chăn nuôi chim cút Mật độ E Coli (CFU/g) 100000000 10000000 1000000 100000 10000 1000 100 10 1/1/2019 14/1/2019 28/1/2019 14/2/2019 28/2/2019 Thời gian ĐC TN1 TN2 TN3 Hình 3.7 Mật độ E coli chất thải chăn nuôi chim cút Vi khuẩn gây bệnh E coli các yếu tố gây các bệnh tiêu chảy vật nuôi người Kết phân tích được trình bày hình 3.6 cho thấy các số E coli phân chim cút lớn, lên tới 3,7x107 CFU/g lô đối chứng chim cút 28/2/2019 Kết cho thấy, mật độ E coli các lơ thí nghiệm tăng nhẹ theo thời gian thấp các lô đối chứng đặc biệt với chế phẩm EM1 giảm gần 104 CFU/g so với lô đối chứng Việc hạn chế phát triển các vi sinh vật gây bệnh làm tăng sức đề kháng vật nuôi, giảm dịch bệnh đảm bảo suất chăn nuôi 3.3.2 Đánh giá hiệu xử lý mùi chế phẩm vi sinh bổ sung vào chuồng nuôi chim cút Để đánh giá hiệu xử lý các thông số gây mùi hôi chuồng trại chăn nuôi chim cút chủng Bacillus licheniformis TT01 chế phẩm EM1, Balasa N01 thông qua phân tích nồng đợ các khí H2S, NH3 (ngun nhân gây mùi hôi thối, mùi khai xung quanh khu vực chăn ni chim cút) Tiến hành thu mẫu khí các lơ thí nghiệm, phân tích thu được kết sau: Kết phân tích nồng đợ các khí lơ thí nghiệm đối chứng được trình bày hình 3.8 3.9 SVTH: Võ Văn Tiền Khơi Lớp: 15CTM 27 Khóa luận tốt nghiệp Nồng đợ khí NH3 (ppm) 25 20 15 10 1/1/2019 14/1/2019 28/1/2019 14/2/2019 28/2/2019 Thời gian ĐC TN1 TN2 TN3 Hình 3.8 Nồng đợ khí NH3 mơi trường khơng khí chăn ni chim cút Kết hình 3.8 cho thấy hiệu xử lý lô thí nghiệm nồng đợ khí NH3 ln thấp lơ đối chứng, nồng đợ khí NH3 các lơ thí nghiệm có xu hướng tăng nhẹ theo thời gian thấp nhiều so với nồng đợ khí NH3 lô đối chứng Cụ thể nồng độ khí NH3 sử dụng chủng Bacillus licheniformis TT01 giảm tới 81% Với chế phẩm EM1 Balasa N01 lần lượt 69%, 65%; Khi so sánh nồng độ các khí các lơ thí nghiệm, lơ đối chứng với tiêu chuẩn QCVN 01 - 15: 2010/BNNPTNT cho thấy sau tháng lơ đối chứng nồng đợ khí NH3 vượt quá mức cho phép Trong các lơ thí nghiệm nồng đợ khí NH3 vẫn đạt tiêu chuẩn SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM 28 Khóa luận tốt nghiệp Nồng đợ khí H2S (ppm) 1/1/2019 14/1/2019 28/1/2019 14/2/2019 28/2/2019 Thời gian ĐC TN1 TN2 TN3 Hình 3.9 Nồng đợ khí H2S mơi trường khơng khí chăn ni chim cút Kết hình 3.9 cho thấy hiệu xử lý lơ thí nghiệm nồng đợ khí H2S ln thấp lơ đối chứng, nồng đợ khí H2S các lơ thí nghiệm có xu hướng tăng nhẹ theo thời gian thấp nhiều so với nồng đợ khí H2S lơ đối chứng Cụ thể nồng đợ khí H2S khí sử dụng chế phẩm EM1 giảm tới 83% Với chế phẩm được tạo từ chủng Bacillus licheniformis TT01 chế phẩm Balasa N01 lần lượt 77%, 68% Điều cho thấy hiệu xử lý mùi H2S (mùi trứng thối) chế phẩm vi sinh Bên cạnh qua bảng có thể thấy nồng đợ khí H2S lô đối chứng sau tháng vượt quá tiêu chuẩn QCVN 01 - 15: 2010/BNNPTNT, các lơ thí nghiệm nồng đợ khí H2S vẫn đạt tiêu chuẩn Việc giảm được nồng đợ các khí NH3, H2S lý giải cho việc giảm rõ rệt mùi hôi thối khu vực chăn nuôi chim cút, điều có ý nghĩa đối với mơi trường, cũng sức khỏe sinh hoạt thường ngày người chăn ni chim cút Với các mơ hình chăn ni chim cút xen kẽ các khu dân cư với mật độ dày đặc Sau tháng bổ sung chủng Bacillus licheniformis TT01 chế phẩm EM1, Balasa N01 vào chuồng chim cút lơ thí nghiệm lơ đối chứng không bổ sung chế phẩm Kết được thể hiện bảng 3.2 SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM 29 Khóa luận tốt nghiệp Bảng 3.6 Kết phân tích vi sinh vật mẫu khí chuồng trại chăn ni chim cút Chỉ tiêu phân tích ĐC TN1 TN2 TN3 Salmonella (CFU/g) 9,5x103 4,1x102 9,4x101 8,7x102 E coli (CFU/g) 3,7x107 1,1x104 8,9x103 5,5x103 Khí NH3 (ppm) 21,4 4,2 6,6 7,5 Khí H2S (ppm) 7,3 1,2 1,7 2,3 STT Sau tháng nghiên cứu, lô đối chứng mật độ vi sinh vật gây bệnh Salmonella, E coli mức cao Điều ngun nhân dẫn tới nồng đợ các khí NH3, H2S tăng cao vượt 1,5 - lần so với quy định cho phép Nhưng các lơ thí nghiệm sau tháng sử dụng chủng Bacillus licheniformis TT01 chế phẩm EM1, Balasa N01 được bổ sung vào chuồng trại mật đợ vi sinh vật gây bệnh Salmonella, E coli giảm 101 – 104 lần so với lơ đối chứng, cịn nồng đợ các khí NH3, H2S giảm – lần so với lô đối chứng khơng vượt quá QCVN 01 - 15: 2010/BNNPTNT Ngồi ra, tiến hành lấy mẫu phải lặp lại lần để tránh bị sai số quá trình lấy mẫu 3.4 Đánh giá hiệu sử dụng chủng Bacillus licheniformis TT01 Tiến hành thử nghiệm chế phẩm tạo từ chủng Bacillus licheniformis TT01 cho thấy hiệu như: Giảm mùi hôi, mùi khai chuồng trại chăn nuôi chim cút Qua cũng góp phần làm giảm lượng ruồi khu vực chăn nuôi cũng đảm bảo môi trường cho người vật nuôi Mật độ vi sinh vật gây bệnh phân chim cút cũng giảm nhiều, việc có ý nghĩa lớn việc phòng chống bệnh dịch cho người vật ni Ngồi ra, cịn góp phần thúc đẩy nhanh quá trình phân hủy các chất hữu có phân chim cút rút ngắn thời gian ủ phân chuồng trại SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM 30 Khóa luận tốt nghiệp KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết Luận Qua các kết nghiên cứu chủng Bacillus licheniformis TT01 quá trình sử dụng chế phẩm Bacillus licheniformis TT01 xử lý mùi hôi chuồng trại chăn nuôi chim cút xã Thắng Trung, thị xã Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam, rút một số kết luận sau: - Chủng Bacillus licheniformis TT01 sinh trưởng phát triển tốt môi trường bột gạo, nhiệt độ 300C, có thể thu sinh khối để tạo chế phẩm sau 20 ni cấy - Chủng Bacillus licheniformis TT01 có khả đối kháng cao với vi sinh vật gây bệnh E Coli, Salmonella chủng Bacillus licheniformis TT01 có khả sinh enzym ngoại bào cao - Mật độ vi sinh vật Salmonella, E coli giảm nhiều sau tháng sử dụng chế phẩm được tạo từ chủng Bacillus licheniformis TT01, EM1, Balasa n01 giảm nhiều với lô sử dụng chế phẩm EM1 - Nồng độ khí NH3, H2S giảm rõ rệt so với lơ đối chứng nồng đợ khí đều khơng vượt q QCVN 01 – 15: 2010/BNNPTNT Nồng đợ khí NH3 giảm nhiều đối với lơ thí nghiệm dùng chế phẩm tạo từ chủng Bacillus licheniformis TT01 nồng độ khí H2S giảm nhiều đối với lơ thí nghiệm sử dụng chế phẩm EM1 Kiến nghị, đề xuất - Cần tiếp tục theo dõi để đánh giá thời gian sử dụng hiệu chế phẩm Bacillus licheniformis TT01 đối với việc xử lý môi trường chuồng nuôi chim cút đồng thời tiến hành thử nghiệm đánh giá đối với các chuồng nuôi gia cầm (gà, vịt) - Nguyên cứu thời gian sử dụng chế phẩm được tạo từ chủng Bacillus licheniformis TT01 sau xử lý mùi hôi chuồng trại chăn nuôi chim cút - Kết hợp chủng Bacillus licheniformis TT01 với một số chủng vi sinh vật khác để tăng hiệu tiêu diệt vi sinh vật gây bệnh cũng gia tăng khả xử lý mùi hôi chuồng trại chăn nuôi chim cút - Khi sử dụng chế phẩm nên che bạc làm lô riêng biệt, lấy mẫu nên lấy lần để giảm thiểu khả sai số đảm bảo tính khách quan SVTH: Võ Văn Tiền Khơi Lớp: 15CTM 31 Khóa luận tốt nghiệp TÀI LIỆU KHAM KHẢO Tài liệu nước Lê Văn Duy (2014) Nguyên cứu, ứng dụng chế phẩm vi sinh Sagi Bio xử lý chất lót chuồng ni gà Vĩnh Phúc, Đại học Thái Nguyên Lê Gia Hy (2012) Công nghệ sản xuất kháng sinh, Viện hàn lâm công nghệ khoa học Việt Nam TS Bùi Hữu Đồn (2009) Chăn ni bồ câu chim cút, Nhà xuất Nông nghiệp Nguyễn Trọng Hiếu (2013) Nguyên cứu khả xử lý nước thải chăn nuôi kỹ thuật tần vi sinh chuyển động, Đại học quốc gia Hà Nội Nguyễn Thị Kiều Trang (2014) Đánh giá suất sinh sản chim cút Nhật có nguồn gốc từ Tiền Giang, Đại học Cần Thơ Nguyễn Phúc Quân (2017) Nghiên cứu ảnh hưởng một số yếu tố đến khả tổng hợp nano bạc Trichoderma spp Và Aspergrillus spp, Đại học sư phạm Đà Nẵng Ngô Xuân Mạnh (2008) Chọn lựa điều kiện cấy tối ưu vi khuẩn Bacillus licheniformis (chủng BCRP) để sinh tổng hợp α-Amylase chịu nhiệt, Tạp chí Khoa học Phát triển, Tập VI, Số 5: 460-466 Nguyễn Quốc Trung (2015) Phân lập đánh giá hoạt tính enzim ngoại bào vi khuẩn Bacillus licheniformis KG7 ưa nhiệt nguồn nước nóng kênh gà Ninh Bình, Hợi nghị khoa học tồn quốc về sinh thái tài nguyên sinh vật lần Võ Thị Thứ, Trưng Ba Hùng, Nguyễn Minh Dương, La Thị Nga, Lê Thụ Thu Hiền, Phạm Thị Minh Hà, Lê Danh Toại, Nguyễn Trường Sơn, Đào Thị Thanh Xuân (2009) Nguyên cứu sử dụng Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Bacillus licheniformis Lactobacillus cidophilus để sản xuất chế phẩm sinh học biochie xử lý nước nuôi thủy sản, Tuyển tập hội thảo tồn quốc NC & ƯD KHCN ni trồng thủy sản 10 Lê Trần Diệu Linh (2018) Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn tạo chế phẩm thô vi sinh vật sinh EM1zyme phytase từ đất thuộc địa bàn huyện Hòa Vang – Thành phố Đà Nẵng, Đại học sư phạm Đà Nẵng SVTH: Võ Văn Tiền Khơi Lớp: 15CTM 32 Khóa luận tốt nghiệp 11 Trần Lê Thu Trang, Võ Thị Lời, Trần Thị Nguyên, Bùi Thị Uyên Nghi, Nguyễn Đỗ Kim Diệu (2011) Ứng dụng chế phẩm vi sinh chăn nuôi, Đại học nơng lâm Hồ Chí Minh 12 Ngơ Hữu Tồn (2012) Vai trò tác dụng enzyme phytase thúc ăn thủy sản, Đại học nông lâm Huế 13 Phan Thị Thu Mai (2012) Phân lập tuyển chọn ci sinh vật EM1zym phytase, Đại học khoa học tự nhiên Hà Nội 14 Võ Đức Tuấn, Nguyễn Thị Thanh Trúc, Lê Thị Ngọc Hân, Trương Phước Thiên Hoàn (2013) Nguyên cứu tổng hợp enzyme phytase từ chủng vi khuẩn Bacillus subtilis, Viện công nghê sinh học môi trường 15 TS Bùi Hữu Tồn (2010) Ni phịng trị bệnh cho chim cút, Trung tâm khuyến nông Quốc gia 16 Đoàn Thị Phương Tuyên (2012) Khảo sát ảnh hưởng việc gừng lên khả sản xuất chất lượng trứng chim cút, Đại học nơng lâm Hồ Chí Minh 17 Trần Hồng Nhung, Nguyễn Kiều Băng Tâm (2016) Ứng dụng đệm lót sinh học cải thiện số tiêu môi trường khu chăn nuôi gia cầm hai xã tỉnh Hà Nam, Tạp chí khoa học ĐHQGHN, tập 32, 296-300 18 Nguyễn Thiết, Bùi Xuân Mến, Nguyễn văn Hớn, Nguyễn thị Hồng Nhân (2016) Ảnh hưởng nguyên liệu làm đệm lót men balasa n01 lên sinh trưởng môi trường chuồng nuôi gà tàu vàng giai đoạn từ đến 12 tuần tuổi, Tạp chí khoa học Cần Thơ lần 44, 119-126 19 Phạm Bích Hiên ̣(2012) Nguyên cứu vi sinh vật để xử lý chất thải chăn nuôi dạng rắn, Đại học khoa học tự nhiên Hà Nội 20 Phạm Thị Trân Châu, Trần Thị Áng (1992), Hóa sinh học, NXB Giáo dục 21 GS.TS Trần Ngọc Chấn (2002), Ơ nhiễm khơng khí xử lý khí thải – tập 1: Ơ nhiễm khơng khí tính tốn khuếch tán chất nhiễm Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội 22 Tăng Thị Chính, Đặng Đình Kim, Phan Thị Tút Minh, Lê Thanh Xuân (2006) Nghiên cứu ứng dụng số chế phẩm vi sinh vật để xử lý chất thải hữu TC khoa học – Đại học Quốc gia Hà Nội SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM 33 Khóa luận tốt nghiệp 23 Võ Văn Cường (2009), Cảnh báo ô nhiễm môi trường từ chăn nuôi, giải pháp phát triển Sở nông nghiệp & PTNT Quảng Nam 24 Tạp chí số - 2004, Cơng nghệ EM – Một giải pháp phịng bệnh cho gia cầm có hiệu Tạp chí hoạt đợng khoa học 25 Đoàn Đức Lâm (2005), Chế phẩm EM – Một sản phẩm độc đáo công nghệ sinh học Nhật Bản Đề tài nghiên cứu khoa học Đại học Tây Bắc 26 Phạm Ngọc Đăng (1997), Môi trường không khí NXB Khoa học kỹ 27 Báo cáo tổng quan: Các nghiên cứu ngành chăn nuôi Việt Nam Viện thuật Kinh tế nông nghiệp, 2005 28 Phạm Thị Trân Châu, Trần Thị Áng (1992), Hóa sinh học, NXB Giáo dục Tài liệu nước 29 Forgaty W M and Kelly C.T (1990) Amylases, amyloglucosidase and related glucanase, In: “ Microbial enzym and Biotechnology 2nd Ed, ed By W.M Forgaty and C,T Kelly, Elsevier Applied Science, London and New York., pp.71-183 30 Pradyot Patnaik (1997), Handbook of Environmental Analysis Lewis Publishers 31 Teruo Higa (2002) Technology of Effective Microorganisms: Concept and Phisiology Royal Agricultural College, Cirencester, UK 32 Daruosh Abdollahi-Arpanahi, Elahe Soltani, Hojatollah Jafaryan, Mehdi Soltani (2018) Efficacy of two commercial and indigenous probiotics, Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis on growth performance, immuno-physiology and resistance response of juvenile white shrimp (Litopenaeus vannamei), 496, pp 43-49 33 Qiaoge Zhang, Ye Han, Huazhi Xia (2017) Microbial α-amylase: A biomolecular overview, 53, pp 88-101 34 RaziqaHadjidj, AbdelmalekBadis, SondesMechri (2018) Purification, biochEM1ical, and molecular characterization of novel protease from Bacillus licheniformis strain K7A, 144, pp 1033-104 SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM 34 Khóa luận tốt nghiệp 35 KalimuthuKalishwaralalVenkataramanDeepakSureshbabuRam Kumar Pandian (2009) Biological synthesis of gold nanocubes from Bacillus licheniformis, 100, pp.5356-5358 36 SathappanShanthi, BarbanasDavid Jayaseelan, PalaniyandiVelusamy (2016) Biosynthesis of silver nanoparticles using a probiotic Bacillus licheniformis Dahb1 and their antibiofilm activity and toxicity effects in Ceriodaphnia cornuta, 93, pp 70-77 37 Ghani M, Ansari A, Aman A, Zohra RR, Siddiqui NN, Qader SA (2013) Isolation and characterization of different strains of Bacillus licheniformis for the production of commercially significant enzymes 38 S.Shajahan, I GaneshMoorthy (2008) Statistical modeling and optimization of cellulase production by Bacillus licheniformis NCIM 5556 isolated from the hot spring, Maharashtra, India, 29, pp 302-310 39 Charles OluwaseunAdetunjI, Isaac OluseunAdejumo (2008) Efficacy of crude and immobilizedenzymes from Bacillus licheniformis for production of biodegraded feather meal and their assessment on chickens, 11, pp 116-124 Nes I.F., Yoon S.S.& Diep D.B (2007) Ribosomally synthesiszed antimicrobial peptides (bacteriocin) in lactic acid bacteria: a review, Food Sci Biotechnol 16: 675– 690 SVTH: Võ Văn Tiền Khơi Lớp: 15CTM 35 Khóa luận tốt nghiệp PHỤ LỤC 1.1 Môi trường Lysogeny Broth (LB) 1.2 Môi trường xác định hoạt tính emzyme cellulase NaCl : 10 g/l NaNO3 :3 g/l Pepton : 10 g/l MgSO4 : 0,5 g/l K HPO : 01 g/l Cao nấm men : g/l KCl :0,5 g/l Thạch : 20 g/l FeSO4 : 0,1 g/l Agar :20 g/l pH: :7 CMC : 10 g/l pH :7 Môi trường xác định hoạt tính emzyme amylase NaNO3 :3g/l MgSO4 :0.5g/l K2HPO4 :1g/l KCl :0.5g/l FeSO4 :0.1g/l Agar :20g/l Tinh bột tan :10g/l pH :7 1.3 1.4 Môi trường xác địn hoạt tính enzym protease NaNO3 :3 g/l MgSO4 :0.5 g/l K2HPO4 :1 g/l KCl :0.5g/l FeSO4 :0.1g/l Agar :20g/l Casein :10g/l pH :7 Thành phần môi trường nuôi cấy vi sinh vật nghiên cứu Bảng 1.3 Sản lượng thịt chim cút năm 2007 một số nước cao thế giới Nước TT Sản lượng (tấn) Trunng Quốc 163.000 Tây Ban Nha 9.300 Pháp 8.200 Italia 3.800 Hoa Kỳ 3.400 Úc 1.800 Bồ Đào Nha 1.200 Brazil 1.100 Nhật Bản Cộng SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM 200 192.000 36 Khóa luận tốt nghiệp Nguồn: Worldpoultry, Vol 25 số 3.1 Kết phân tích mơi trường, nhiệt đợ thời gian cho phát triển, sinh trưởng tốt đối với chủng Bacillus licheniformis TT01 Nhiệt độ: 250C 12 16 20 24 28 Môi trường LB (108) 1,1 2,0 3,9 5,8 6,3 5,9 Môi trường cám gạo (108) 1,9 2,2 4,1 6,4 7,6 6,9 6,4 16 20 24 28 Nhiệt độ: 300C 12 Môi trường LB (108) 2,43 4,9 7,3 8,8 8,1 7,6 Môi trường cám gạo (108) 2,7 3,3 5,8 8,3 10 9,5 8,9 Nhiệt độ: 350C Môi trường LB (108) Môi trường cám gạo (108) 12 16 20 24 28 2,3 4,1 6,9 7,5 6,9 6,5 1,9 2,6 4,5 7,6 9,2 8,7 7,3 Nhiệt độ: 400C Môi trường LB (108) 1,1 1,9 2,9 3,9 6,2 5,9 5,3 Môi trường cám gạo (108) 1,6 2,2 3,2 4,7 6,6 6,2 5,8 SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM 12 16 20 24 28 37 Khóa luận tốt nghiệp Bảng 3.2 Mật độ Salmonella chất thải qua tháng Ngày lấy mẫu Mật độ Salmonella (CFU/g) ĐC TN1 TN2 TN3 1/1/2019 6,9x100 7,5x100 7,2x100 7,4x100 14/1/2019 5,4x101 1,3x101 9,8x100 3,2x101 28/1/2019 2,4x102 3,8x101 3,4x101 6,3x101 14/2/2019 3,6x103 8,7x101 7,9x101 3,5x102 28/2/2019 9,5x103 4,1x102 9,4x101 8,7x102 Bảng 3.3 Mật độ E coli chất thải qua tháng Mật độ E coli (CFU/g) Ngày lấy mẫu ĐC TN1 TN2 TN3 1/1/2019 9,1x100 8,7x100 9,4x100 9x100 14/1/2019 5,5x104 1,9x102 4,9x101 8,5x101 28/1/2019 4,8x105 7,8x102 8,0x102 6,2x102 14/2/2019 6,7x106 8,6x103 3,2x103 6,6x103 28/2/2019 3,7x107 1,1x104 5,5x103 8,9x103 Bảng 3.4 Nồng độ khí NH mơi trường khơng khí chăn ni chim cút qua tháng Nồng độ khí NH3 (ppm) Ngày lấy QCVN 01 - 15: mẫu ĐC TN1 TN2 TN3 2010/BNNPTNT (ppm) 1/1/2019 1,4 1,4 1,4 1,4 10 14/1/2019 8,2 2,1 2,8 3,2 10 28/1/2019 13,1 3,2 4,2 4,4 10 14/2/2019 17,8 3,9 5,4 6,3 10 28/2/2019 21,4 4,2 6,6 7,5 10 SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM 38 Khóa luận tốt nghiệp Bảng 3.5 Nồng đợ khí H2S mơi trường khơng khí chăn ni chim cút qua tháng Nồng độ H2S (ppm) Ngày lấy QCVN 01 – 15: mẫu ĐC TN1 TN2 TN3 2010/BNNPTNT (ppm) 1/1/2019 0,09 0,09 0,09 0,09 14/1/2019 2,1 0,1 0,1 0,3 28/1/2019 2,9 0,4 0,3 1,0 14/2/2019 5,7 1,1 0,7 1,5 28/2/2019 7,3 1,7 1,2 2,3 Máy thu mẫu khơng khí (GilAir 5) SVTH: Võ Văn Tiền Khơi Lớp: 15CTM 39 Khóa luận tốt nghiệp Chế phẩm tạo từ chủng Bacillus licheniformis TT01 Chế phẩm Balasa n01 SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM Chế phẩm EM1 40 Khóa luận tốt nghiệp Trại ni cút ông Nguyễn Văn Rạng SVTH: Võ Văn Tiền Khôi Lớp: 15CTM 41 ... ? ?Nghiên cứu ứng dụng chủng Bacillus licheniformis TT01 xử lý mùi hôi chuồng nuôi chim cút? ?? Mục tiêu đề tài Ứng dụng chủng Bacillus licheniformis TT01 để xử lý mùi hôi chuồng trại chăn nuôi chim. .. TRƯỜNG - Võ Văn Tiền Khôi NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CHỦNG BACILLUS LICHENIFORMIS TT01 XỬ LÝ MÙI HÔI TẠI CHUỒNG NUÔI CHIM CÚT Chuyên ngành : Quản lý tài nguyên môi trường Mã số : 315032151121... thời gian sử dụng chế phẩm được tạo từ chủng Bacillus licheniformis TT01 sau xử lý mùi hôi chuồng trại chăn nuôi chim cút - Kết hợp chủng Bacillus licheniformis TT01 với một số chủng vi sinh