KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược học FULL (CND và BC) nghiên cứu bào chế nano berberin

LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, xin bày tỏ kính trọng biết ơn tới thầy giáo PGS.TS Nguyễn Thanh Hải (giảng viên môn Bào chế Công nghiệp Dược, Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội), người thầy tận tình dạy bảo, hướng dẫn khơi gợi niềm đam mê nghiên cứu khoa học Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới ThS Nguyễn Văn Khanh (cán bộ môn Bào chế Công nghiệp Dược, Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội), người thầy nhiệt tình tận tâm, giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn tồn thể thầy giáo, cô giáo, anh, chị làm việc công tác Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội bảo, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập rèn luyện khoa Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè người thân – người đồng hành Hà Nội, ngày 10 tháng 05 năm 2019 Sinh viên DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT BBR Berberin DĐVN Dược điển Việt Nam DSC Phân tích nhiệt vi sai HPMC Hydroxypropyl methylcellulose KTTP Kích thước tiểu phân NaLS Natri lauryl sulfat NSX Nhà sản xuất PVP Polyvinyl pyrrolidon PDI Chỉ số phân bố kích thước tiểu phân TKHH Tinh khiết hóa học TT Thuốc thử w/v Khối lượng / thể tích DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Tên Nội dung Trang Hình 1.1 Cơng thức hóa học berberin clorid Hình 1.2 Thiết bị nghiền bi 10 Hình 2.1 Điều kiện quy trình bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 17 Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn độ hấp thụ quang berberin theo nồng độ bước sóng 348 nm 20 Hình 3.2 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo loại polyme 21 Hình 3.3 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo nồng độ polyme 23 Hình 3.4 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo loại chất diện hoạt 24 Hình 3.5 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo nồng độ chất diện hoạt 26 Hình 3.6 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo kích cỡ bi 27 Hình 3.7 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo tốc độ nghiền 28 Hình 3.8 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo thời gian nghiền 30 Hình 3.9 Sơ đồ bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 31 Hình 3.10 Berberin nguyên liệu (bên trái) bột nano berberin (bên phải) 32 Hình 3.11 KTTP, PDI hỗn dịch nano berberin bột nano berberin 33 Hình 3.12 Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin 34 DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Tên Nội dung Trang Bảng 1.1 Một số chế phẩm chứa berberin thị trường Bảng 2.1 Nguyên liệu hóa chất 15 Bảng 3.1 Độ hấp thụ quang theo nồng độ berberin bước sóng 348 nm 20 Bảng 3.2 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo loại polyme 21 Bảng 3.3 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo nồng độ polyme 22 Bảng 3.4 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo loại chất diện hoạt 24 Bảng 3.5 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo nồng độ chất diện hoạt 25 Bảng 3.6 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo kích cỡ bi 27 Bảng 3.7 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin theo tốc độ nghiền 28 Bảng 3.8 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo thời gian nghiền 29 Bảng 3.9 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin bột nano berberin 32 Bảng 3.10 Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin 33 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vài nét berberin 1.1.1 Cơng thức hóa học tên gọi 1.1.2 Tính chất lý, hóa 1.1.3 Định tính 1.1.4 Định lượng 1.1.5 Tác dụng dược lý 1.1.6 Dược động học 1.1.7 Một số chế phẩm chứa berberin thị trường 1.2 Tổng quan hạt nano thuốc 1.2.1 Vài nét công nghệ nano 1.2.2 Ảnh hưởng kích thước nano đến sinh khả dụng thuốc .6 1.2.3 Các phương pháp bào chế hạt nano thuốc 1.2.4 Kỹ thuật nghiền bi 1.2.5 Đông khô 11 1.3 Một số nghiên cứu nano berberin 12 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Nguyên liệu, thiết bị đối tượng nghiên cứu 15 2.1.1 Nguyên liệu, hóa chất 15 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 15 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 16 2.2 Nội dung nghiên cứu 16 2.3 Phương pháp nghiên cứu 16 2.3.1 Xây dựng đường chuẩn phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS 16 2.3.2 Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 16 2.3.3 Phương pháp đánh giá số đặc tính nano berberin 18 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 19 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 20 3.1 Định lượng berberin phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS 20 3.2 Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 21 3.2.1 Ảnh hưởng loại polyme tới kích thước tiểu phân 21 3.2.2 Ảnh hưởng nồng độ polyme tới kích thước tiểu phân 22 3.2.3 Ảnh hưởng loại chất diện hoạt tới kích thước tiểu phân 24 3.2.4 Ảnh hưởng nồng độ chất diện hoạt tới kích thước tiểu phân .25 3.2.5 Ảnh hưởng kích cỡ bi tới kích thước tiểu phân 26 3.2.6 Ảnh hưởng tốc độ nghiền tới kích thước tiểu phân 28 3.2.7 Ảnh hưởng thời gian nghiền tới kích thước tiểu phân 29 3.3 Đánh giá số đặc tính bột nano berberin 32 3.3.1 Hình thức 32 3.3.2 Kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân, zeta 32 3.3.3 Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin 33 3.3.4 Kết phân tích nhiệt vi sai 34 3.4 Bàn luận 34 3.4.1 Về phương pháp bào chế nano bererin 34 3.4.2 Về xây dựng quy trình bào chế nano berberin 35 3.4.3 Về đặc tính bột nano berberin thu 35 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 37 4.1 Kết luận 37 4.2 Đề xuất 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, bên cạnh việc sử dụng dược chất có nguồn gốc hóa tổng hợp việc sử dụng hợp chất có nguồn gốc từ thiên nhiên ngày nhà khoa học quan tâm Berberin alcaloid thuộc nhóm isoquinolin, có rễ, thân rễ, vỏ thuộc chi Berberis, Hydrastis candensis, Coptis [4] Các nghiên cứu chứng tỏ berberin có nhiều tác dụng dược lý tốt chống viêm [32], chống nhiễm khuẩn [10], chống tiêu chảy có ảnh hưởng đáng kể đến bệnh đái tháo đường [16] Nó cho thấy tác dụng khác hệ thần kinh, tim mạch sử dụng phương pháp điều trị ung thư [12], [26], [28], [31] Mặc dù có nhiều ưu điểm, berberin lại bị hạn chế sử dụng lâm sàng Nguyên nhân chủ yếu berberin tan nước, khó hấp thu qua ruột, sinh khả dụng thấp khoảng 5% [25], [27] Bào chế berberin kích thước nano cải thiện độ tan tốc độ hòa tan, từ giúp nâng cao sinh khả dụng Có hai phương pháp để tạo hạt nano thuốc là: phương pháp từ lên (bottom-up) từ xuống (top-down) Trong đó, phương pháp bottom-up sử dụng thường phải hịa tan dược chất dung mơi hữu độc hại khó có phân bố kích thước hẹp [23] Với phương pháp top-down sử dụng số kỹ thuật nghiền bi, đồng hóa, đồng hóa áp suất cao Kỹ thuật nghiền bi có nhiều ưu điểm nghiền hạt có kích thước tiểu phân bé trì trạng thái vơ khuẩn ngun liệu Chính vậy, tiến hành “Nghiên cứu bào chế nano berberin” với hai mục tiêu sau: Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi Đánh giá số đặc tính bột nano berberin CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vài nét berberin Berberin loại isoquinolin alcaloid, màu vàng [28] Berberin dễ dàng chiết xuất từ thực vật tổng hợp hóa học, thường có rễ, thân rễ, vỏ thuộc chi Berberis, Hydrastis candensis, Coptis với hàm lượng khoảng 1,5 – 3% chiếm 82% so với alcaloid toàn phần [4] Berberin thường sử dụng lâm sàng dạng berberin clorid, berberin sulfat [28] 1.1.1 Cơng thức hóa học tên gọi Cơng thức hóa học: Hình 1.1 Cơng thức hóa học berberin clorid Công thức phân tử: C20H18NO4Cl.2H2O Tên khoa học: 5,6-dihydro-8,9-dimethoxy-1,3-dioxa-6a-azoniaindeno(5,6-a)anthracen clorid dihydrat [6] 1.1.2 Tính chất lý, hóa Lý tính: - Cảm quan: tinh thể hay bột kết tinh màu vàng, khơng mùi, có vị đắng - Độ chảy dạng base 145 C (bị phân hủy) [6] - Độ tan: Dạng base tan chậm nước, tan ethanol, khó tan ether Dạng muối clorid tan tỉ lệ 1/400 nước, dễ tan nước sôi, tan ethanol, thực tế không tan chloroform ether Dạng muối sulfat dễ tan nước tỷ lệ 1/30, tan ethanol [6] Độ tan nước berberin phụ thuộc vào pH, độ tan cao pH xấp xỉ [9] - Berberin khơng có C bất đối nên khơng có đồng phân quang học [6] Hóa tính: - Hóa tính N: berberin có tính chất base yếu, tạo muối cách thay nhóm OH, việc tạo muối berberin không giống alcaloid khác mà muối tạo thành giống muối hydroxyd kim loại, nghĩa có loại phân tử nước [6] - - Hóa tính oxy: berberin ổn định môi trường kiềm mạnh, N không vững bền, môi trường kiềm mạnh dễ hỗ biễn mở vòng, cho chức aldehyd gọi berberinal [6] Hóa tính mạch kép: berberin mạch kép nhân hydro alkaloid khơng màu [6] 1.1.3 Định tính Theo Dược điển Việt Nam V, phương pháp định tính berberin clorid [3]: - Phương pháp A: so sánh phổ hấp thụ hồng ngoại chế phẩm với phổ hấp thụ hồng ngoại berberin clorid chuẩn - Phương pháp B: hòa tan 0,1 g chế phẩm 20 ml nước cách đun nóng Thêm 0,5 ml acid nitric đậm đặc (TT), làm lạnh, để yên 10 min, lọc Lấy ml dịch lọc thêm ml dung dịch bạc nitrat % (TT), xuất tủa trắng Tủa khơng tan acid nitric lỗng (TT), tan dung dịch amoniac (TT) thừa - Phương pháp C: hòa tan mg chế phẩm 10 ml dung dịch acid hydrocloric 10% (TT) Lắc đều, thêm bột cloramin B (TT) có màu đỏ anh đào 1.1.4 Định lượng Để định lượng berberin clorid dùng phương pháp sau: - Phương pháp sắc kí lỏng [3] - Phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS [2] - Phương pháp cân [1] - Phương pháp thể tích [1] 1.1.5 Tác dụng dược lý Berberin có nhiều tác dụng dược lý kháng khuẩn [10], kháng virut [14], hạ sốt, chống tiêu chảy chống viêm [32] Tác dụng chống viêm berberin thông qua ức chế protein hoạt hóa (AP-1), yếu tố phiên mã quan trọng trình - Thế zeta: Giá trị tuyệt đối zeta mẫu lớn cho thấy hỗn dịch nano berberin có độ ổn định cao Kết luận: Sử dụng 400g bi gồm: 04 bi loại 25g, 10 bi loại 10 g, 20 bi loại g, 50 bi loại 2g thu KTTP nhỏ nhất, nên lựa chọn dùng đồng thời nhiều cỡ bi để áp dụng cho nghiên cứu 3.2.6 Ảnh hưởng tốc độ nghiền tới kích thước tiểu phân Nano berberin bào chế theo quy trình mơ tả mục 2.3.2 với thông số: - Công thức hỗn dịch: 20% berberin (1 g), 1% (0,05g) HPMC E6, 0,4% NaLS (0,02g) Thể tích nước khoảng 5ml - Bi zirconium oxid: khoảng 400 g gồm 04 bi loại 25g, 10 bi loại 10 g, 20 bi loại g, 50 bi loại 2g - Tần số: 25;30;35 Hz - Thời gian nghiền: 40 phút Hỗn dịch berberin thu sau nghiền đánh giá KTTP, số đa phân tán PDI, zeta Kết thể Bảng 3.7 Hình 3.7 Bảng 3.7 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo tốc độ nghiền Tần số (Hz) 25 30 35 K T T P (n KTTP (nm) 648,5 ± 19,4 538,7 ± 20,6 846,1 ± 12,9 PDI 0,441 ± 0,009 0,543 ± 0,011 0,612 ± 0,015 Thế zeta (mV) 29,4 ± 1,2 28,7 ± 0,8 25,3 ± 1,1 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 P 0.2 DI 0.1 25 30 Tần số (Hz) KTTP (nm) 35 PDI Hình 3.7 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo tốc độ nghiền Nhận xét: - KTTP: KTTP nhỏ 538,7 nm nghiền tần số 30Hz Điều giải thích tốc độ thấp (tần số 25 Hz) lực mài mịn chế gây gãy vỡ tiểu phân nên KTTP chưa giảm nhiều tốc độ cao (tần số 35 Hz) viên bi bị lực ly tâm ép vào thành, khơng có q trình mài mịn hay va đập xảy hiệu suất trình giảm hay kích thước tiểu phân lớn - - PDI: Phân bố KTTP nghiền tần số 25; 30; 35 Hz có PDI 0,441; 0,543; 0,612 lớn 0,3 chứng tỏ KTTP có khoảng phân bố rộng Công thức nghiền tần số 25 Hz có khoảng phân bố nhỏ Thế zeta: Giá trị tuyệt đối zeta mẫu lớn cho thấy hỗn dịch nano berberin có độ ổn định cao Kết luận: Khi nghiền tần số 30 Hz thu KTTP nhỏ nên tần số 30 Hz lựa chọn 3.2.7 Ảnh hưởng thời gian nghiền tới kích thước tiểu phân Nano berberin bào chế theo quy trình mơ tả mục 2.3.2 với thông số: - Công thức hỗn dịch: 20% berberin (1 g), 1% (0,05g) HPMC E6, 0,4% NaLS (0,02g).Thể tích nước khoảng 5ml - Bi zirconium oxid: khoảng 400 g gồm 04 bi loại 25g, 10 bi loại 10 g, 20 bi loại g, 50 bi loại 2g - Tần số: 30Hz - Thời gian nghiền: 30; 40; 50; 60 phút Hỗn dịch nano berberin thu sau nghiền đánh giá KTTP, số đa phân tán PDI, zeta Kết thể Bảng 3.8 Hình 3.8 Bảng 3.8 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin theo thời gian nghiền Thời gian (phút) 30 40 50 60 KTTP (nm) 925,8 ± 19,4 563,6 ± 10,9 618,5 ± 24,7 625,3 ± 9,3 PDI 0,823 ± 0,019 0,518 ± 0,012 0,707 ± 0,026 0,713 ± 0,021 Thế zeta (mV) -29,4 ± 1,2 -28,6 ± 0,7 -30,4 ± 1,3 -32,5 ± 0,8 K T T P (n 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3P 0.2DI 0.1 3040 50 Thời gian nghiền (phút) 60 KTTP (nm)PDI Hình 3.8 KTTP, PDI hỗn dịch nano berberin theo thời gian nghiền Nhận xét: - KTTP: KTTP nhỏ 563,6 nm thời gian nghiền 40 phút Điều giải thích thời gian nghiền dài phân chia hạt tốt thời gian nghiền dài (50; 60 phút) tiểu phân nano có xu hướng kết tập lại với làm tăng kích thước - PDI: Phân bố KTTP nghiền 30;40;50;60 phút 0,823; 0,518; 0,707; 0,713 lớn 0,3, chứng tỏ KTTP có khoảng phân bố rộng Trong đó, nghiền thời gian 40 phút có khoảng phân bố nhỏ - Thế zeta: Giá trị tuyệt đối zeta mẫu lớn cho thấy hỗn dịch nano berberin có độ ổn định cao Kết luận: Thời gian nghiền 40 phút cho KTTP PDI nhỏ nhất, nên thời gian nghiền 40 phút lựa chọn Từ kết khảo sát, chúng tơi đề xuất quy trình bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi sau: - 20% Berberin nguyên liệu (1 g) - 1% HPMC E6 (0,05 g) - 0,4% NaLS (0,02 g) Nghiền ướt: 400 g bi zirconium oxid gồm 04 bi loại 25 g, 10 bi loại 10 g, 20 bi loại 5g, 50 bi loại g Tần số: 30Hz Thời gian: 40 phút Pharma cy, and Đông khô: Nhiệt độ: -850 C đến -800C Thời gian: 24 Bảo quản bột nano berberin bình tránh ẩm nhiệt độ phịng Hình 3.9 Sơ đồ bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 3.3 Đánh giá số đặc tính bột nano berberin 3.3.1 Hình thức Màu sắc: bột nano berberin có màu vàng giống nguyên liệu Hình 3.10 Berberin nguyên liệu (bên trái) bột nano berberin (bên phải) 3.3.2 Kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân, zeta Bột nano berberin (thu sau đơng khơ) đo kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân, so sánh với hỗn dịch nano berberin (thu sau nghiền bi), thu kết Bảng 3.9 Hình 3.11 Bảng 3.9 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin bột nano berberin Loại KTTP (nm) PDI Thế zeta (mV) Hỗn dịch nano berberin 563,4 ± 10,9 0,548 ± 0,029 -28,1 ± 1,5 Bột nano berberin 570,7 ± 13,6 0, 576 ± 0,034 -28,6 ± 1,1 K T T P (n 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 P DI 0.3 0.2 0.1 Hỗn dịch nano berberinBột nano berberin KTTP (nm) PDI Hình 3.11 KTTP, PDI hỗn dịch nano berberin bột nano berberin Nhật xét: Sau đông khô, bột nano berberin có KTTP 570,7 nm PDI 0,576 (> 0,3), chứng tỏ có phân bố KTTP rộng KTTP PDI bột nano berberin tăng lên không nhiều so với hỗn dịch nano berberin Cả hai mẫu có giá trị tuyệt đối zeta cao chứng tỏ có độ ổn định cao 3.3.3 Độ hịa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin môi trường pH=6,8 thể bảng Bảng 3.10 Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin Thời gian (phút) Độ hòa tan (%) 10 15 30 60 Berberin nguyên liệu 16,22 19,17 19,98 20,76 20,87 Bột nano berberin 26,31 29,57 29,86 30,39 30,92 100 90 80 Đ 70 ộ 60 hò a 50 ta 40 n 30 ( 20 10 0 10 20 30 40 50 Thời gian (phút) Berberin nguyên liệuBột nano berberin 60 Hình 3.12 Độ hịa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin Nhận xét: Độ hòa tan bột nano berberin tốt so với berberin nguyên liệu Sau phút, nano berberin hòa tan 26,31% cao gấp 1,6 lần so với berberin nguyên liệu Sau 60 phút, độ hòa tan nano berberin gấp khoảng 1,5 lần nguyên liệu Từ phút thứ đến phút 60, độ hịa tan tăng lên khơng nhiều, nano berberin (từ 26,31% lên 30,92%) berberin nguyên liệu (từ 16,22% lên 20,87%) 3.3.4 Kết phân tích nhiệt vi sai Phổ DSC cho thấy berberin nguyên liệu có điểm chảy 72,4; 105,9; 206,2; 0 215,0 C (phụ lục 1), cịn mẫu nano berberin có điểm chảy 69,2; 101,4; 205,4; 221,4 C (phụ lục 2) thay đổi không nhiều so với berberin nguyên liệu Điều chứng tỏ nghiền bi không làm thay đổi trạng thái kết tinh nguyên liệu berberin ban đầu, thay đổi nhỏ điểm chảy có mặt HPMC E6 NaLS có cơng thức 3.4 Bàn luận 3.4.1 Về phương pháp bào chế nano bererin Nghiên cứu sử dụng kĩ thuật nghiền bi để bào chế nano berberin, kĩ thuật đơn giản, nhanh, mở rộng quy mơ công nghiệp Phương pháp sử dụng hexan độc hại phương pháp kết tủa bay dung môi Sahibzada cộng áp dụng năm 2018 [22] Sau nghiền bi, hỗn dịch nano tiếp tục xử lý đông khô để loại bỏ dung mơi thu chất rắn với hiệu suất cao 3.4.2 Về xây dựng quy trình bào chế nano berberin Qua tham khảo số tài liệu bào chế hạt nano phương pháp nghiền ướt, nồng độ polyme thường dùng 1-10% (w/v) [23], hay tỉ lệ dược chất/ polyme nằm khoảng 10:1 đến 1:0.8 (w/w) [34], nồng độ chất diện hoạt thường dùng nhỏ 1% [23], hay tỉ lệ dược chất/ chất diện hoạt 20/1 đến 1/0,5 [25] Nghiên cứu lựa chọn polyme HPMC E6 chất diện hoạt NaLS với nồng độ 1% 0,4%, nghiền bi cho nano berberin có KTTP bé Nồng độ chứng tỏ sử dụng tá dược, đặc biệt NaLS (một chất diện hoạt ion hóa dùng với nồng độ cao gây độc tính cho thể) tăng tính an tồn Một nghiên cứu sử dụng bi nhỏ thường có xu hướng dẫn đến hạt nano nhỏ tăng diện tích tiếp xúc[34] Kết nghiên cứu cho thấy, sử dụng đồng thời bốn loại bi 25; 10; 5; g cho KTTP khơng khác nhiều so với dùng bi nhỏ (thậm chí thu KTTP nhỏ hơn) 3.4.3 Về đặc tính bột nano berberin thu a) Về KTTP: Với quy trình bào chế đưa hình 3.2.8, sau đơng khơ thu bột nano berberin có KTTP 570,7 ± 13,7 nm Nhận thấy, KTTP bào chế phương pháp nghiền bi có kích thước lớn nhiều so với nano berberin bào chế phương pháp khác, ví dụ phương pháp kết tủa bay (71,53 nm) [22], phương pháp kết tủa thay đổi dung mơi (102,62 nm) [22], đồng hóa áp suất cao (72,4 nm) [26] Phân bố KTTP điều chế phương pháp nghiền bi PDI= 0,576 chứng tỏ KTTP có khoảng phân bố rộng, cịn phương pháp đồng hóa có PDI= 0,3 chứng tỏ có khoảng phân bố hẹp b)Về độ hòa tan Bột nano berberin điều chế phương pháp nghiền bi sau phút có % hịa tan khoảng 26, 31% cao gấp khoảng 1,6 lần berberin nguyên liệu Sau 60 phút, độ hòa tan nano berberin 30,92% So sánh với nano berberin điều chế phương pháp kết tủa bay phương pháp kết tủa thay đổi dung mơi (có độ hịa sau 15 phút 70%, hòa tan hết sau 60 phút), nhận thấy phương pháp nghiền bi giúp cải thiện độ hòa tan berberin, mức độ cải thiện chưa cao 4.1 Kết luận CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Sau thời gian nghiên cứu, rút kết luận sau: 1) Nghiên cứu bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi Công thức hỗn dịch gồm 20% berberin, 1% HPMC E6, 0,4% NaLS nước Quy trình nghiền bi sử dụng bi zirconium oxid đồng thời bốn cỡ bi 25; 10; 2g, thời gian nghiền 40 phút, tần số nghiền 30 Hz Hỗn dịch nano berberin có KTTP trung bình 563,4 nm, PDI = 0,548, giá trị tuyệt đối zeta 28,1 mV Hỗn dịch 0 đông khô nhiệt độ -85 C đến -80 C, 24 để thu bột nano berberin 2) Nghiên cứu đánh giá số đặc tính bột nano berberin hình thức, KTTP (570,7 nm), phân bố KTTP (0, 576), giá trị tuyệt đối zeta (28,6 mV), phân tích nhiệt vi sai, tốc độ hòa tan (khoảng 30,92% sau 60 phút) 4.2 Đề xuất 1) Thử tác dụng sinh học bột nano berberin bào chế khả kháng nấm, kháng khuẩn,… 2) Ứng dụng bột nano berberin vào số dạng bào chế viên nén, viên nang cứng, viên nang mềm,… TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt: [1] Bộ Y tế (1994), Dược điển Việt Nam II, Nhà xuất Y học tr 71-74 [2] Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, Nhà xuất Y học Hà Nội tr 178179 [3] Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V, Nhà xuất y học [4] Nguyễn Văn Dương (2017), "Nghiên cứu đánh giá viên bao bồi chứa berberin clorid", Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội [5] Phạm Văn Giang (2013), "Nghiên cứu bào chế hệ tiểu phân nano curcurmin", Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội [6] Đồng Quang Huy (2014), "Nghiên cứu chiết xuất berberin từ vàng đắng dung dịch kiểm", Luận văn thạc sĩ dược học [7] Từ Minh Koóng (2009), Kỹ thuật sản xuất dược phẩm, Nhà xuất y học tr 25 [8] La Vũ Thùy Linh (2010), Công nghệ nano – cách mạng khoa học kỹ thuật kỷ 21, Đại học Tôn Đức Thắng [9] Nguyễn Thị Thơi (2018), "Nghiên cứu tạo vi nang alginat chứa berberin", Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội Tài liệu tiếng nước ngoài: [10] Amin A H, Subbaiah T V, Abbasi K M (1969), "Berberine sulfate: antimicrobial activity, bioassay, and mode of action", Canadian journal of microbiology, 15 pp 1067-1076 [11] Caruthers S D, Wickline S A, Lanza G M (2007), "Nanotechnological applications in medicine", Current opinion in Biotechnology, 18 (1), pp 26-30 [12] Chun Y T, Yip T T, Lau K L, Kong Y C, et al (1979), "A biochemical study on the hypotensive effect of berberine in rats", Gen Pharmacol, 10 (3), pp 177182 [13] Duroudier J (2016), Freeze-drying Heat Transfer in the Chemical, Food and Pharmaceutical Industries, pp 359–377 [14] Hayashi K, Minoda K, Nagaoka Y, Hayashi T, et al (2007), "Antiviral activity of berberine and related compounds against human cytomegalovirus", Bioorg Med Chem Lett, 17 (6), pp 1562-1564 [15] Kong W, Wei J, Abidi P, Lin M, et al (2004), "Berberine is a novel cholesterollowering drug working through a unique mechanism distinct from statins", Nat Med, 10 (12), pp 1344-1351 [16] Lee Y S, Kim W S, Kim K H, Yoon M J, et al (2006), "Berberine, a natural plant product, activates AMP-activated protein kinase with beneficial metabolic effects in diabetic and insulin-resistant states", Diabetes, 55 (8), pp 2256-2264 [17] Lin Y C, Kuo J Y, Hsu C C, Tsai W C, et al (2013), "Optimizing manufacture of liposomal berberine with evaluation of its antihepatoma effects in a murine xenograft model", Int J Pharm, 441 (1-2), pp 381-388 [18] Lin Y H, Lin J H, Chou S C, Chang S J, et al (2015), "Berberine-loaded targeted nanoparticles as specific Helicobacter pylori eradication therapy: in vitro and in vivo study", Nanomedicine (Lond), 10 (1), pp 57-71 [19] Malamatari M, Taylor K M G, Malamataris S, Douroumis D, et al (2018), "Pharmaceutical nanocrystals: production by wet milling and applications", Drug Discov Today, 23 (3), pp 534-547 [20] Peng W H, Lo K L, Lee Y H, Hung T H, et al (2007), "Berberine produces antidepressant-like effects in the forced swim test and in the tail suspension test in mice", Life Sci, 81 (11), pp 933-938 [21] Pragasam Viswanathan, Yuvashree Muralidaran, Ragavan G (2017), Challenges in oral drug delivery: a nano-based strategy to overcome Nanostructures for oral medicine, pp 173-201 [22] Sahibzada M U K, Sadiq A, Faidah H S, Khurram M, et al (2018), "Berberine nanoparticles with enhanced in vitro bioavailability: characterization and antimicrobial activity", Drug Des Devel Ther, 12 pp 303-312 [23] Vijaykumar Nekkanti, Vabalaboina V, Pillai R (2009), The Delivery of Nanoparticles pp 111-132 [24] Wang T, Wang N, Song H, Xi X, et al (2011), "Preparation of an anhydrous reverse micelle delivery system to enhance oral bioavailability and antidiabetic efficacy of berberine", Eur J Pharm Sci, 44 (1-2), pp 127-135 [25] Wang Z, Wang Y S, Chang Z M, Li L, et al (2017), "Berberine-loaded Janus nanocarriers for magnetic field-enhanced therapy against hepatocellular carcinoma", Chem Biol Drug Des, 89 (3), pp 464-469 [26] Wang Z, Wu J, Zhou Q, Wang Y, et al (2015), "Berberine nanosuspension enhances hypoglycemic efficacy on streptozotocin induced diabetic C57BL/6 mice", Evid Based Complement Alternat Med, 2015 pp 239749 [27] Xue M, Zhang L, Yang M X, Zhang W, et al (2015), "Berberine-loaded solid lipid nanoparticles are concentrated in the liver and ameliorate hepatosteatosis in db/db mice", Int J Nanomedicine, 10 pp 5049-5057 [28] Ye M, Fu S, Pi R, He F (2009), "Neuropharmacological and pharmacokinetic properties of berberine: a review of recent research", J Pharm Pharmacol, 61 (7), pp 831-837 [29] Abdelwahed W, Degobert G, Stainmesse S, Fessi H (2006), "Freeze-drying of nanoparticles: formulation, process and storage considerations", Advanced drug delivery reviews, 58 (15), pp 1688-1713 [30] Junyaprasert V B, Morakul B (2015), "Nanocrystals for enhancement of oral bioavailability of poorly water-soluble drugs", asian journal of pharmaceutical sciences, 10 (1), pp 13-23 [31] Khemani M, Sharon M, Sharon M (2012), "Encapsulation of berberine in nanosized PLGA synthesized by emulsification method", ISRN Nanotechnology, 2012 [32] Kuo C-L, Chi C-W, Liu T-Y (2004), "The anti-inflammatory potential of berberine in vitro and in vivo", Cancer letters, 203 (2), pp 127-137 [33] Loh Z H, Samanta A K, Heng P W S (2015), "Overview of milling techniques for improving the solubility of poorly water-soluble drugs", Asian journal of pharmaceutical sciences, 10 (4), pp 255-274 [34] Peltonen L (2018), "Design space and QbD approach for production of drug nanocrystals by wet media milling techniques", Pharmaceutics, 10 (3), pp 104 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Phân tích DSC berberin nguyên liệu Phụ lục 2: Phân tích DSC bột nano berberin ... "Nghiên cứu đánh giá viên bao bồi chứa berberin clorid", Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội [5] Phạm Văn Giang (2013), "Nghiên cứu bào chế hệ tiểu phân nano curcurmin", Khóa luận. .. hành ? ?Nghiên cứu bào chế nano berberin? ?? với hai mục tiêu sau: Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi Đánh giá số đặc tính bột nano berberin CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vài nét berberin Berberin... cải thiện độ hòa tan berberin, mức độ cải thiện chưa cao 4.1 Kết luận CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Sau thời gian nghiên cứu, rút kết luận sau: 1) Nghiên cứu bào chế nano berberin phương pháp