LUẬN án TIẾN sĩ dược học FULL (CND và BC) nghiên cứu bào chế và bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên lornoxicam giải phóng có kiểm soát

LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình Tác giả i LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Nguyễn Đăng Hòa TS Nguyễn Thạch Tùng ngƯời thầy nhiệt tình hƯớng dẫn hết lịng giúp đỡ tơi q trình thực luận án Tơi xin chân thành cảm ơn PGS TS Nguyễn Văn Long, GS TS Phạm Thị Minh Huệ, TS Nguyễn Trần Linh, PGS TS Vũ Thị Thu Giang gợi ý quý báu giành cho tơi q trình nghiên cứu Tơi xin cảm ơn PGS TS Nguyễn Thị Thanh Duyên, DS Bùi Văn Thuấn tồn thể thầy giáo, kỹ thuật viên Bộ môn Bào chế TrƯờng Đại học DƯợc Hà Nội, Viện Công nghệ DƯợc Phẩm Quốc Gia, Bộ mơn Bào chế - Cơng nghiệp DƯợc, Bộ mơn Hóa DƯợc - TrƯờng Đại học Y DƯợc - Đại học Thái Nguyên, Trung tâm đánh giá TƯơng đƯơng sinh học - Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung Ương giúp đỡ tơi q trình học tập thực đề tài Tôi xin cảm ơn phối hợp giúp đỡ em sinh viên K69 trình thực luận án Tơi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Sau đại học - TrƯờng Đại học DƯợc Hà Nội quan tâm tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập nghiên cứu TrƯờng Tôi xin cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Tổ chức- TrƯờng Đại học Y DƯợc Đại học Thái Nguyên động viên tạo điều kiện để tơi hồn thành luận án - Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè đồng nghiệp ln động viên, giúp đỡ tơi để tơi hoàn thành luận án Hà Nội, Ngày tháng… năm 2019 Tác giả ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC .iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH xii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 LORNOXICAM 1.1.1 C ơng thức hóa học .3 1.1.2 Tính chất .3 1.1.3 DƯợc động học 1.1.4 Chỉ định chống định .4 1.1.5 Tác dụng không mong muốn 1.1.6 Một số chế phẩm lornoxicam thị trƯờng 1.1.7 PhƯơng pháp định lƯợng lornoxicam chế phẩm dịch sinh học 1.2 MỘT SỐ KỸ THUẬT VÀ CÔNG NGHỆ BÀO CHẾ ĐƯỢC ÁP DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN DẠNG THUỐC VỚI L OR NO XIC AM 10 1.2.1 Bào chế hệ phân tán rắn 11 1.2.2 Bào chế viên giải phóng nhanh 12 1.2.3 Bào chế viên giải phóng kéo dài 14 1.2.4 Bào chế viên giải phóng theo nhịp 16 1.2.5 Bào chế viên lƯu dày 18 1.2.6 Bào chế viên kiểm sốt giải phóng hệ đa đơn vị liều 20 1.2.7 Bào chế viên kiểm sốt giải phóng hệ viên nén nhiều lớp 21 1.3 SINH KHẢ DỤNG .30 1.3.1 Đánh giá sinh khả dụng thuốc .30 1.3.2 Quy định đánh giá s inh khả dụng in vivo .33 1.3.3 Một số nghiên cứu sinh khả dụng in vivo lornoxicam 34 CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .37 2.1 NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 37 2.1.1 Nguyên liệu 37 2.1.2 Thiết bị dụng cụ 38 2.1.3 Đối tƯợng nghiên cứu 40 2.1.4 Động vật thí nghiệm .40 2.1.5 Địa điểm nghiên cứu 40 2.1.6 Nội dung nghiên cứu 40 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 41 2.2.1 PhƯơng pháp bào chế 41 2.2.2 PhƯơng pháp đánh giá 46 2.2.3 PhƯơng pháp nghiên cứu độ ổn định viên 55 2.2.4 PhƯơng pháp đánh giá sinh khả dụng in vivo 56 2.2.5 PhƯơng pháp thiết kế thí nghiệm, tối Ưu hóa cơng thức xử lý số liệu 60 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 61 3.1 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG CÔNG THỨC 61 3.1.1 Nghiên cứu bào chế lớp bao giải phóng nhanh 61 3.1.2 Nghiên cứu xây dựng cơng thức viên nhân lornoxicam giải phóng kéo dài 72 3.1.3 Xây dựng cơng thức viên lornoxic am giải phóng có kiểm sốt 78 3.2 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH BÀO CHẾ VIÊN LORNOXICAM GIẢI PHĨNG CĨ KIỂM SỐT QUY MƠ 2000 VIÊN 87 3.2.1 Mơ tả quy trình bào chế viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt phƯơng pháp bao dập 88 3.2.2 Thẩm định quy trình sản xuất viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt .90 3.3 THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG, XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ VÀ ĐỘ ỔN ĐỊNH VIÊN LORNOXICAM GIẢI PHĨNG CĨ KIỂM SỐT 104 3.3.1 Thẩm định phƯơng pháp định lƯợng .104 3.3.2 Nghiên cứu xây dựng tiêu chuẩn sở .113 3.3.3 Đánh giá độ ổn định 113 3.4 NGHIÊN CỨU SINH KHẢ DỤNG 116 3.4.1 Xây dựng phƯơng pháp phân tích .116 3.4.2 Kết thẩm định phƯơng pháp .120 3.4.3 Định lƯợng lornoxicam huyết tƯơng chó .126 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 130 4.1 NGHIÊN CỨU CẢI THIỆN ĐỘ TAN CỦA LORNOXICAM .130 4.2 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN LORNOXICAM 12 MG GIẢI PHĨNG CĨ KIỂM SỐT 133 4.2.1 Nghiên cứu bào chế lớp bao giải phóng nhanh .133 4.2.2 Nghiên cứu bào chế viên nhân giải phóng kéo dài 135 4.2.3 Bào chế viên lornoxicam giải phóng có kiểm soát 136 4.2.4 Lựa chọn phƯơng pháp bào chế 138 4.3 QUY TRÌNH BÀO CHẾ 140 4.4 TIÊU CHUẨN CHẤT LƯỢNG VÀ ĐÁNH GIÁ ĐỘ ỔN ĐỊNH 144 4.4.1 Tiêu chuẩn chất lƯợng 144 4.4.2 Đánh giá độ ổn định .145 4.5 Đ ÁN H GIÁ SINH KHẢ DỤNG .146 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 153 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC .155 TÀI LIỆU THAM KHẢO 156 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AUC Diện tích dƯới đƯờng cong (Area under the curve) BCS Hệ thống phân loại Sinh dƯợc học bào chế (Biopharmaceutics Classification System) DC DƯợc chất DĐH DƯợc động học DĐVN DƯợc điển Việt Nam ĐLC Độ lệch chuẩn FDA Cơ quan quản lý thực phẩm dƯợc phẩm (Food Drug Administration) GPKD Giải phóng kéo dài GPN Giải phóng nhanh HL Hàm lƯợng HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High performance liquid chromatography) HPTR Hệ phân tán rắn HQC Mẫu kiểm chứng khoảng nồng độ cao (High quality control) HSHQ Hệ số hồi quy HT Huyết tƯơng HPMC Hydroxypropylmethyl cellulose IS Chất chuẩn nội (Internal Standard) KL Khối lƯợng KLRBK Khối lƯợng riêng biểu kiến kl/kl Khối lƯợng/khối lƯợng kl/tt Khối lƯợng/thể tích KSGP Giải phóng có kiểm sốt LC - MS Sắc ký lỏng ghép nối khối phổ (Liquid chomatography - mass spectrometry) LLOQ Giới hạn định lƯợng dƯới (Lower limit of quantification) LQC Mẫu kiểm chứng khoảng nồng độ thấp (Low quality control) LNX Lornoxicam MS Khối phổ (Mass spectrometry) MELO Meloxicam MQC Mẫu kiểm chứng khoảng nồng độ trung bình (Medium quality control) MRT Mean residence time (Thời gian lƯu thuốc trung bình) Na CMC Natri carboxymethyl cellulose NSAID Thuốc chống viêm không steroid (Nonsteroidal anti- inflammatory drug) NTN NgƯời tình nguyện PEG Polyethylen glycol PVP Polyvinyl pyrrolidon QC Kiểm nghiệm chất lƯợng (Quanlity control) RSD Độ lệch chuẩn tƯơng đối (Relative Standard Deviation) SD Độ lệch chuẩn (Standard deviation) SEM Kính hiển vi điện tử quét (Scanning electron microscope) SKD Sinh khả dụng STT Số thứ tự TB Trung bình TD Tá dƯợc TDSR Tá dƯợc siêu rã TEM Kính hiển vi điện tử truyền qua (Transmission electron microscope) Tmax Thời gian đạt nồng độ tối đa tt/tt Thể tích/thể tích UPLC Sắc ký lỏng siêu hiệu (Ultra performance liquid chromatography) USP DƯợc điển Mỹ (United States Pharmacopoeia) vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Độ tan lornoxicam môi trƯờng pH khác o o nhiệt độ 25 C± 0,5 C Bảng 1.2 Một số chế phẩm chứa lornoxicam thị trƯờng Bảng 1.3 Một số phƯơng pháp định lƯợng lornoxicam huyết tƯơng Bảng 2.1 Các nguyên liệu hóa chất sử dụng nghiên cứu 37 Bảng 2.2 Công thức lớp bao chứa mg lornoxicam 42 Bảng 3.1 Độ tan lornoxicam trƯớc giảm kích thƯớc tiểu phân o o môi trƯờng khác 25 C ± 0,5 C 61 Bảng 3.2 Độ tan lornoxicam sau giảm kí ch thƯớc tiểu phân o o môi trƯờng khác 25 C ± 0,5 C .63 Bảng 3.3 Cơng thức lớp giải phóng nhanh sử dụng tá dƯợc độn khác 65 Bảng 3.4 Công thức lớp giải phóng nhanh sử dụng tá dƯợc rã khác 67 Bảng 3.5 Cơng thức lớp giải phóng nhanh sử dụng tá dƯợc kiềm chất diện hoạt 69 Bảng 3.6 Thời gian rã viên lornoxicam giải phóng nhanh 71 Bảng 3.7 Công thức lớp bao giải phóng nhanh .72 Bảng 3.8 Cơng thức nghiên cứu ảnh hƯởng loại hydroxypropyl methylcellulose tới % lornoxicam giải phóng 73 Bảng 3.9 Công thức đánh giá ảnh hƯởng tỷ lệ Methocel K4M : Methocel E15LV tới % lornoxicam giải phóng 76 Bảng 3.10 Giá trị AIC R Bảng 3.11 Khoảng thiết kế biến đầu vào yêu cầu biến đầu 79 Bảng 3.12 Thiết kế thí nghiệm % giải phóng mẫu viên adjusted theo mơ hình dƯợc động học 78 lornoxicam kiểm sốt giải phóng 80 Bảng 3.13 Hệ số hồi quy thể ảnh hƯởng biến đầu vào tới % lornoxicam giải phóng thời điểm giờ, giờ, 10 81 Bảng 3.14 Công thức tối Ưu thiết kế phần mềm MODDE 12.0 % lornoxicam giải phóng 85 Bảng 3.15 Tỷ lệ % lornoxicam giải phóng từ viên bào chế theo cơng thức tối Ưu (n = 5) 86 Bảng 3.16 Công thức cho lô 2000 viên .88 Bảng 3.17 Đánh giá nguy ảnh hƯởng đến độ ổn định quy trình bào chế .91 Bảng 3.18 Các thông số trọng yếu cần thẩm định 93 Bảng 3.19 Độ phân tán hàm lƯợng lornoxicam trộn bột kép .94 Bảng 3.20 Phân bố kích thƯớc hạt viên nhân giải phóng kéo dài quy mơ 2000 viên 95 Bảng 3.21 Một số đặc tính hạt với tốc độ trộn tá dƯợc trơn 50 vòng/phút 96 Bảng 3.22 Đặc tí nh viên thời điểm với tốc độ dập vòng/ phút96 Bảng 3.23 Đặc tính viên thời điểm với tốc độ dập 10 vòng/ phút 97 Bảng 3.24 Đặc tính hạt viên nhân quy mô 2000 viên 97 Bảng 3.25 Đặc tính viên quy mơ 2000 viên 98 Bảng 3.26 Tỷ lệ % lornoxicam giải phóng từ viên nhân quy mô 2000 viên (TB ± SD; n = 6) 98 Bảng 3.27 Đề xuất tiêu chuẩn viên nhân 99 Bảng 3.28 Phân bố kích thƯớc hạt lớp bao giải phóng nhanh quy mơ 2000 viên 100 Bảng 3.29 Một số đặc tính hạt lớp bao giải phóng nhanh với tốc độ trộn 50 vịng/phút (n= 3) 100 Bảng 3.30 Đặc tí nh viên thời điểm với tốc độ dập vòng/ phút 101 Bảng 3.31 Đặc tí nh viên thời điểm với tốc độ dập vòng/ phút 101 Bảng 3.32 Đặc tính hạt lớp bao quy mơ 2000 viên 102 Bảng 3.33 Đặc tính viên quy mơ 2000 viên 102 Bảng 3.34 Tỷ lệ % lornoxicam giải phóng từ viên bao lơ quy mô 2000 viên 103 Bảng 3.35 Độ hấp thụ dung dịch lornoxicam môi trƯờng acid hydrocloric 0,1N pH 1,2 đệm phosphat pH 6,8 (n = 3) .105 Bảng 3.36 Kết độ thí ch hợp hệ thống 105 Bảng 3.37 Ảnh hƯởng mẫu placebo đến kết định lƯợng 107 Bảng 3.38 Nồng độ mức đƯờng chuẩn 107 Bảng 3.39 Kết khảo sát độ tuyến tính .108 Bảng 3.40 Kết khảo sát độ .110 Bảng 3.41 Kết khảo sát độ xác 111 Bảng 3.42 Kết khảo sát độ xác 112 Bảng 3.43 Đề xuất tiêu chuẩn chất lƯợng viên lornoxicam 12 mg giải phóng có kiểm sốt 113 Bảng 3.44 Hàm lƯợng (%) lơ viên lornoxicam 12 mg giải phóng có kiểm sốt đƯợc bảo quản điều kiện thực sau 06 tháng .114 Bảng 3.45 Hàm lƯợng (%) lô viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt đƯợc bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc sau 06 tháng .114 Bảng 3.46 % dƯợc chất giải phóng lơ viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt đƯợc bảo quản điều kiện thực sau 06 tháng 115 Bảng 3.47 % dƯợc chất giải phóng lơ viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt đƯợc bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc sau 06 tháng 116 Bảng 3.48 Các thông số detector khối phổ để định lƯợng LNX 117 Bảng 3.49 Các thông số detector khối phổ để định lƯợng LNX MELO .119 PL 5.4 Sắc ký đồ định lƯợng lornoxicam huyết tƯơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 30 phút PL 5.5 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 60 phút PL 5.6 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 90 phút PL 5.7 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm PL 5.8 Sắc ký đồ định lƯợng lornoxicam huyết tƯơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm PL 5.9 Sắc ký đồ định lƯợng lornoxicam huyết tƯơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm PL 5.10 Sắc ký đồ định lƯợng lornoxicam huyết tƯơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm PL 5.11 Sắc ký đồ định lƯợng lornoxicam huyết tƯơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 10 PL 5.12 Sắc ký đồ định lƯợng lornoxicam huyết tƯơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 12 PL 5.13 Sắc ký đồ định lƯợng lornoxicam huyết tƯơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 24 PHỤ LỤC MỘT SỐ SẮC KÝ ĐỒ ĐỊNH LƯỢNG LORNOXICAM TRONG CHẾ PHẨM PL 6.1 Sắc ký đồ định lƯợng viên lornoxicam 12 mg KSGP lần PL 6.2 Sắc ký đồ định lƯợng viên lornoxicam 12 mg KSGP lần PL 6.3 Sắc ký đồ định lƯợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện thƯờng (lô 1) PL 6.4 Sắc ký đồ định lƯợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện thƯờng (lô 2) PL 6.5 Sắc ký đồ định lƯợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện thƯờng (lô 3) PL 6.6 Sắc ký đồ định lƯợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc (lơ 1) PL 6.7 Sắc ký đồ định lƯợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc (lô 2) PL 6.8 Sắc ký đồ định lƯợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc (lơ 3) PHỤ LỤC PHIẾU KIỂM NGHIỆM NGUYÊN LIỆU LORNOXICAM ... khoa học thực tiễn trên, tiến hành đề tài ? ?Nghiên cứu bào chế bƯớc đầu đánh giá sinh khả dụng viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt” với mục tiêu sau: Xây dựng cơng thức quy trình bào chế viên. .. bao giải phóng nhanh .133 4.2.2 Nghiên cứu bào chế viên nhân giải phóng kéo dài 135 4.2.3 Bào chế viên lornoxicam giải phóng có kiểm soát 136 4.2.4 Lựa chọn phƯơng pháp bào chế ... Bào chế hệ phân tán rắn 11 1.2.2 Bào chế viên giải phóng nhanh 12 1.2.3 Bào chế viên giải phóng kéo dài 14 1.2.4 Bào chế viên giải phóng theo nhịp 16 1.2.5 Bào