KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược học FULL (CND và BC) góp phần nghiên cứu lên men tổng hợp kháng sinh nhờ streptomyces 155 21

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU LÊN MEN TỔNG HỢP KHÁNG SINH NHỜ STREPTOMYCES 155.21 KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Hà Nội LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất đến thầy giáo PGS -TS Cao Văn Thu - người đa tận tình hướng dẫn tư những bước đầu tiên cho đến hoàn thiện khóa luận này Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo , các cán bô, kỹ thuật viên giảng dạy, công tác tại Bô môn Vi sinh - Sinh học, Bô môn Công nghiệp dược trường Đại học Dược Ha Nôi , Bô môn Hóa vật liệu - khoa Hóa trường Đại học Khoa học tự nhiên Ha Nội đa giúp thời gian làm thực nghiệm Nhân dịp này cũng xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu cùng toàn thê các thầy cô giáo trường Đại học Dược Ha Nôi đa dạy dỗ va tạo mọi điều kiện thuận lợi cho thời gian học tập tại trường Va cuối cùng là lời cảm ơn gửi tới gia đình va bạn be đa đông viên , giúp suốt thời gian thực hiện khóa luận Do thời gian làm thực nghiệm cũng kiến thức của bản thâ n có hạn, khóa luận này có nhiều thiếu sót Tôi rất mong nhận được góp ý của các thầy cô, bạn be đê khóa luận được hoàn thiện Tôi xin chân thành cảm ơn! Ha Nôi, 16, tháng 5, năm Sinh viên MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Đại cương vê kháng sinh 1.1.1 Định nghĩa kháng sinh 1.1.2 Phân loại kháng sinh 1.1.3 Sơ đồ tổng quát sản xuất kháng sinh 1.1.4 Ứng dụng của kháng sinh 1.2 Đại cương vê xạ khuẩn (Actinomycetes) 1.2.1 Đặc điểm hình thái xạ khuẩn 1.2.2 Đặc điểm cấu tạo tế bào xạ khuẩn 1.2.3 Phân loại xạ khuẩn 1.3 Phương pháp phân lập vi sinh vật sinh kháng sinh 1.4 Tuyển chọn, cải tạo, bảo quản giống xạ khuẩn 1.4.1 Chọn chủng co hoạt tính cao nhờ sàng lọc ngẫu nhiên 1.4.2 Đột biến cải tạo giống 1.4.3 Bảo quản giống xạ khuẩn 1.5 Lên men sinh tổng hợp kháng sinh 1.6 Chiết tách tinh chế sản phẩm 1.7 Một số phương pháp phổ để xác định cấu trúc kháng sinh .10 1.7.1 Phổ hồng ngoại (IR) 10 1.7.2 Phổ tử ngoại (UV) 10 1.7.3 Khối phổ (MS) 11 1.8 Một số nghiên cứu liên quan 11 1.8.1 Tối ưu hóa thống kê của quá trình lên men để tăng cường hoạt tính kháng sinh của Streptomyces sp.CS392 11 1.8.2 Một chủng Streptomyces sp với nhiều đặc điểm hứa hẹn thúc đẩy phát triển cúa nông nghiệp dịch bệnh 12 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 13 2.1.1 Nguyên vật liệu 13 2.1.2 Máy moc, thiết bị, dụng cụ 15 2.2 Nội dung nghiên cứu 15 2.3 Phương pháp thực nghiệm 16 2.3.1 Phương pháp nuôi cấy và giữ giống 16 2.3.2 Đánh giá hoạt tính kháng sinh bằng phương pháp khuếch tán 16 2.3.3 Phương pháp xác định môi trường nuôi cấy thích hợp 17 2.3.4 Phương pháp chọn chủng co hoạt tính cao bằng sàng lọc ngẫu nhiên 17 2.3.5 Phương pháp đột biến 18 2.3.6 Phương pháp lên men mẻ 19 2.3.7 Phương pháp xác định độ bền nhiệt, bền pH của kháng sinh dịch lên men 20 2.3.8 Phương pháp chiết kháng sinh từ dịch lọc bằng dung môi hữu 20 2.3.9 Phương pháp tách kháng sinh bằng sắc ky 20 2.3.10 Phương pháp thu tinh thể kháng sinh tinh khiết 22 2.3.11 Phương pháp xác định cấu trúc kháng sinh tinh khiết thu được 22 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ, BÀN LUẬN 23 3.1 Kết quả trình chọn lọc ngẫu nhiên 23 3.2 Kết quả đột biến cải tạo giống lần 24 3.3 Kết quả đột biến cải tạo giống lần 25 3.4.Kết quả cải tạo giớng lần tác nhân hóa học 27 3.5 Kết quả lên men sinh tổng hợp kháng sinh 28 3.6 Kết quả đánh giá ảnh hưởng pH nhiệt độ đến độ bền kháng sinh dịch lọc 30 3.7 Kết quả chọn dung môi chiết xuất kháng sinh 31 3.8 Kết quả sắc ký lớp mỏng chọn hệ dung môi 32 3.9 Kết quả sắc ký cột 33 3.10 Kết quả đo nhiệt độ nóng chảy sơ xác định nhóm chức đặc trưng kháng sinh thu được 40 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ADN Acid 2’- deoxyribonucleic CLNN Chọn lọc ngẫu nhiên CW Thanh tế bao - Cell wall DMHC Dung môi hữu ĐB Đôt biến Gr Gram IR Hồng ngoại - Infrared KH Khoa học KS Kháng sinh L-DAP L - diaminopimelat MTdt Môi trường dịch thê MTth Mơi trường thích hợp TB Tế bao TĐC Trao đổi chất VK Vi khuẩn VSV Vi sinh vật UV Tử ngoại – Ultraviolet B subtilis Bacillus subtilis P mirabilis Proteus mirabilis G(+) Gram dương G(-) Gram âm SK Sắc ký DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ HÌNH Bảng 1: Phân loại các chất kháng sinh dựa theo cấu trúc hóa học Bảng 2: Các môi trường nuôi cấy xạ khuẩn Bảng 3: Các môi trường kiểm định Bảng 4: Các dung môi đa sử dụng Bảng 5: Kết quả chọn lọc ngẫu nhiên Streptomyces 155.21 Bảng 6: Kết quả hoạt tính KS sau đơt biến UV lần Bảng 7: Kết quả hoạt tính KS sau đơt biến UV lần Bảng 8:Kết quả hoạt tính KS sau đơt biến hóa học Bảng 9: Kết quả chọn môi trường lên men Bảng 10: Kết quả lên men của các dạng chủng, biến chủng MT2dt Bảng 11: Ảnh hưởng của nhiệt đô đến đô bền của kháng sinh dịch lọc Bảng 12: Ảnh hưởng của pH đến đô bền của KS sau ngày va sau ngày Bảng 13: Kết quả chiết kháng sinh DMHC pH khác Bảng 14: Kết quả SK lớp mỏng chọn dung môi (hiện hình VSV P mirabilis) Bảng 15: Kết quả thử hoạt tính KS của các phân đoạn sau chạy côt lần Bảng 16: Kết quả SK lớp mỏng các phân đoạn 1-15 (hiện hình P mirabilis) Bảng 17: Kết quả thử hoạt tính KS của các phân đoạn sau chạy cơt lần Bảng 18: Kết quả SK lớp mỏng các phân đoạn 1-15 (hiện hình P mirabilis) Bảng 19: Kết quả thử hoạt tính KS của các phân đoạn sau chạy côt lần Bảng 20: Kết quả SK lớp mỏng các phân đoạn 1-10 (hiện hình P mirabilis) Bảng 21: Kết quả thử hoạt tính kháng sinh sau chạy côt lần Bảng 22: Kết quả SK lớp mỏng các phân đoạn tư 1-4 ( hiện hình P.mirabilis) Hình 1: Sơ đồ tổng quát sinh tổng hợp kháng sinh PHỤ LỤC Phụ lục 1: Biến chủng Streptomyces 155.21 được cấy zizag ống thạch nghiêng vào đĩa Petri cho vao tủ ấm va đĩa Petri chứa biến chủng Streptomyces 155.21 sau nuôi cấy tủ ấm Phụ lục 2: Kết quả thử hoạt tính kháng sinh phương pháp khới thạch va phương pháp giếng thạch Phụ lục 3: Bình lên men được đặt máy lắc bắt đầu trình nhân giống cấp 1, bình nhân giống cấp va bình chứa sản phẩm lên men kết thúc trình lên men Phụ lục 4: Côt sắc ký trình chạy côt lần va kết quả thử hoạt tính kháng sinh sau q trình chạy cơt Phụ lục 5: Phổ MS chất kháng sinh KS1 phân lập được Phụ lục 6: Phổ UV chất kháng sinh KS1 phân lập được Phụ lục 7: Phổ IR chất kháng sinh KS1 phân lập được ĐẶT VẤN ĐỀ Tác dụng của kháng sinh được phát hiện vao tháng 10/1928 va Penicillin được sử dụng vào năm 1943, đa mở kỷ nguyên mới y học lâm sang va nganh công nghê lên men sản xuất kháng sinh Ngoài được sử dụng dự phòng va điều tri bệnh nhiễm khuẩn, nhiễm nấm, bệnh ung thư cho người, kháng sinh cịn được dùng chăn ni, trồng trọt va công nghiệp thực phẩm Do được sử dụng tran lan va không đúng cách nên tình trạng kháng kháng sinh cang trở nên nghiêm trọng Kháng sinh la lớp hoạt chất hữu ích có tác dụng sinh học rất mạnh, được tổng hợp tư vi khuẩn, xạ khuẩn, vi nấm tư môt số thực vật bậc cao Ngay nay, với phát triển mạnh mẽ của sinh học hiện đại cùng hỗ trợ của nhiều nganh khoa học khác giúp cho việc tìm kiếm va ứng dụng kháng sinh đạt được những tựu rực rơ Con người không tìm kiếm những chủng vi sinh vật sinh kháng sinh tư tự nhiên ma cải tạo chúng nhiều phương pháp dùng kỹ thuật di truyền, công nghê gen, gây đôt biến đinh hướng, chọn dịng gen sinh tổng hợp Trong sớ 15000 kháng sinh hiện đa được biết đến thế giới thì khoảng 60% la xạ khuẩn tạo ra, đó khoảng 55% chi Streptomyces sản xuất Đây la chi xạ khuẩn lớn, gồm nhiều vi sinh vật có khả sinh tổng hợp kháng sinh, môt số loai có khả sinh tổng hợp chất chữa ung thư, điều tri HIV Do đó, chi xạ khuẩn này được nước va thế giới tập trung nghiên cứu Tại Bô môn Vi sinh- Sinh học trường ĐH Dược Ha Nôi, chúng đa chọn đê tai “Góp phần nghiên cứu lên men tởng hợp kháng sinh nhờ Streptomyces 155.21” với mục tiêu sau: - Nghiên cứu cải tạo giống theo hướng tăng sinh tổng hợp kháng sinh va lựa chọn môi trường lên men thích hợp của chủng Streptomyces 155.21 - Nghiên cứu mơt vài đặc tính của kháng sinh đa sinh tổng hợp được CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Đại cương vê kháng sinh 1.1.1 Định nghĩa kháng sinh Có rất nhiều định nghĩa khác vê kháng sinh Theo định nghĩa kinh điển hẹp: Kháng sinh la những hợp chất hóa học vi sinh vật tiết có tác dụng ức chế phát triển hay tiêu diệt môt cách chọn lọc môt nhóm vi sinh v ật xác đinh (vi khuẩn, nấm, xạ khuẩn, protozoa, virus…) hay cả t ế bào ung thư, nồng đô thấp [6] Đinh nghĩa rông hơn: Kháng sinh phải bao hàm c ả các chất tổng hợp hóa học có tác dụng diệt khuẩn các dẫn chất quinolon (pefloxacin, norfloxacin…).[7] 1.1.2 Phân loại kháng sinh Có nhiều cách đê phân loại các kháng sinh : theo nguồn gốc theo phổ tác dụng (phổ rông hay chọn lọc), theo chế tác dụng, theo cấu trúc hóa học… Các chất kháng sinh được phân loại theo cấu trúc hóa học (bảng 1) Bảng 1: Phân loại chất kháng sinh dựa theo cấu trúc hóa học [3] Nhóm KS KS cụ thê β- lactam Penicillin, Cephalexin Phenicol Chloramphenicol Aminosid Streptomycin, Tobramycin Macrolid Erythromycin, Clarithromycin Lincosamid Lincomycin, Lindamycin Tetracyclin Tetracyclin, Doxycyclin Peptid Vancomycin, Polymycin Quinolon Floxacin, Levofloxacin Cotrimoxazol Cotrimoxazol 40 24,46 0,56 20,35 0,42 14,32 0,56 Bảng 22: Kết quả SKLM phân đoạn từ 1-4 hình VSV( P.mirabilis) Rf Các phân đoạn Vết Vết 0,45 - 0,45 - 0,46 - 0,46 - Nhận xét: Các phần sau có vết rất mờ bản mỏng va khơng hiện hình thử hoạt tính P mirabilis Các phân đoạn tư 1-4 của chạy côt lần được góp chung với các phân đoạn chứa KS1 các lần chạy côt trước (phân đoạn tư 1-4 của chạy côt lần va phân đoạn 1-5 của chạy côt lần 2) Kết tinh lại nhiều lần thu được 0,031 g chất kháng sinh tinh KS1, hiệu suất tách 14,72% so với lượng kháng sinh thô chạy côt ban đầu 3.10 Kết quả đo nhiệt độ nóng chảy sơ xác định nhóm chức đặc trưng kháng sinh thu được  Nhiệt đô nóng chảy của kháng sinh đo được là: 217,3 C -1 Phổ IR (KBr) νmax cm (Phụ lục ): 3455 (-OH; =NH); 3045,93 (-C=C-; Ar); 2925,79 va 2826,18 (-COOH có liên kết cầu hydroxyl); 1659,7(-C=N; C=C); 1582 (C=O); 1268,83 va 1100,38 ( R-OH; -C-O-C-; -COOH; RCOOR1)  Phổ UV (MeOH) λmax (Phụ lục ): Phổ UV có đỉnh hấp thụ các bước sóng 443nm va 226,5 nm chứng tỏ cấu trúc kháng sinh có thê có nhân thơm, có các liên kết bôi liên hợp có các di tố O, N, Halogen… + Phổ khối (ESI-MS) (Phụ lục ): m/z = 1267 [M-Na] , 1291 [M+H] Tư đó suy khối lượng phân tử dự kiến la 1268đvC 49 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Sau trình nghiên cứu, chúng đa bản hoàn các mục tiêu của khóa luận tốt nghiệp, kết quả thu được sau:  Chủng Streptomyces 155.21 đa được sang lọc ngẫu nhiên va gây đôt biến 02 lần ánh sáng UV (lần 1, 2) va 01 lần tác nhân acid nitrơ HNO2 (lần 3), biến chủng sau đôt biến lần có hoạt tính kháng sinh tăng lên rõ rệt tăng 140% so với chủng xuất phát  Lựa chọn được mơi trường lên men tới thích la MT2dt (hoạt tính kháng sinh của chủng lên men cao 123,89% đối với MT1dt, 138,74% đối với MT5dt thử hoạt tính VSV kiểm định B.subitilis)  Kháng sinh Streptomyces 155.21 sinh tổng hợp được chiết kiệt tư dịch lên men Ethylacetat pH  Kháng sinh sau tinh chế có nhiệt đô nóng chảy 217,3 C, tư phổ IR va UV có thê sơ bô dự đoán cấu trúc kháng sinh có thê có nhân thơm, có các liên kết bôi liên hợp va môt số nhóm chức -OH, =NH-, -C=C-, -COOH, C=O, Ar-, RCOOR1  Khối lượng phân tử dự kiến la 1268 đvC  Hiệu suất tách va tinh chế KS1: 14,72% Kiến nghị  Giải trình tự gen đê xác định xác tên khoa học của Streptomyces 155.21 đê dễ dàng nghiên cứu  Tiếp tục nghiên cứu cải tạo giống nhiều phương pháp khác đê tạo các biến chủng siêu tổng hợp kháng sinh  Nghiên cứu tối ưu hóa điều kiện lên men (Bằng cách thay đổi điều kiện lên men, thành phần môi trường, tốc đô lắc…)  Tìm quy trình chiết tách kháng sinh đê nâng cao hiệu suất tinh chế va tạo kháng sinh tinh khiết  Tiếp tục đo phổ cộng hưởng tư hạt nhân đê xác định cấu trúc hóa học của kháng sinh sinh tổng hợp được  Thử tác dụng sinh học invivo, in vitro đê có ứng dụng thực tế TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bô mơn Hóa phân tích (2006), Hoa phân tích II, trường Đại học Dược Ha Nôi, Ha Nôi, tr 23-69, 125-147, 215-219, 318 Bô môn Vi sinh- Sinh học (2005), Thực tập vi sinh- ky sinh, trường Đại học Dược Ha Nôi, Ha Nôi, tr 37-54 Bô Y tế (2007), Dược ly học, Nha xuất bản Y học, Ha Nội, tập 2, tr 130-142 Bô Y tế (2007), Hoa hữu cơ, Nha xuất bản Y học, Ha Nội, tập 1, tr.105-119 Bô Y tế (2007), Kiểm nghiệm dược phẩm, Nha xuất bản Y học, Ha Nôi, tr 68-82, 115-133 Bô Y tế (2007), Kỹ thuật sản xuất dược phẩm, Nha xuất bản Y học, Ha Nôi, tập 2, tr.26-40, 81-93 Bô Y tế (2008), Vi sinh vật học, Nha xuất bản Giáo dục, Ha Nôi, tr 22-87 Trần Tử An (2002), Phương pháp chiết ứng dụng kiểm nghiệm và độc chất, Trung tâm Thông tin- Thư viện ĐH Dược, Ha Nôi, tr 40-41, 49-59 Kiều Hữu Ảnh (1999), Vi sinh vật học công nghiệp, Nha xuất bản Khoa học kỹ thuật, Ha Nôi, tr 167-172 10 Nguyễn Văn Cách (2004), Công nghệ lên men các chất kháng sinh, Nha xuất bản Khoa học kỹ thuật, Ha Nôi, tr 11-16 11 Lê Huy Chính (2007), Vi sinh vật Y học, Nha xuất bản Y học, Ha Nôi, tr 1516, 50-56 12 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2001), Vi sinh vật học, Nha xuất bản Giáo dục, tr 38-40 13 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Kim Nữ Thảo (2006), Các nhom vi khuẩn chủ yếu-Phân loại xạ khuẩn http://vietsciences.free.fr/khaocuu/nguyenlandung/phanloaixakhuan01.htm 14 Bùi Thi Ha (2008), Nghiên cứu xạ khuẩn thuộc chi Streptomyces sinh chất kháng sinh chống nấm gây bệnh chè Thái Nguyên Luận văn thạc sỹ Sinh học, trường Đại học Sư Phạm, Thái Nguyên, tr.3-16 15 Tư Minh Koóng (2004), Cơ sở công nghệ sinh học và sản xuất dược phẩm, Nha xuất bản Y học, Ha Nôi, tr.42-54 16 Lê Đình Lương, Phan Cự Nhân (2000), Cơ sở di truyền học, Nha xuất bản Giáo dục, Ha Nôi, tr 40-49 17 Hồ Viết Quý (2002), Chiết tách, phân chia, xác định các chất bằng dung môi hữu cơ, Nha xuất bản Khoa học kỹ thuật, Ha Nôi, tập 1, tr.9-27 18 Khuất Hữu Thanh (2005), Cơ sở di truyền phân tử và kỹ thuật gen, Nha xuất bản Khoa học kỹ thuật, Ha Nôi, tr 185-191 19 Nguyễn Văn Thanh (2009), Công nghệ sinh học dược, Nha xuất bản Giáo dục, Ha Nội, tr 14-57 20 Trần Thi Thanh (2001), Công nghệ vi sinh, Nha xuất bản Giáo dục, Ha Nôi, tr 9-49 21 Trịnh Thi Thịnh (2009), Nghiên cứu sinh tổng hợp kháng sinh từ Streptomyces 80.259 Khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ, Trường ĐH Dược Ha Nôi, Ha Nội Tiếng Anh 22 Alan M, Phamis, Abdul-Khaliq, Srivastavask, Samad A, Gupta MK (2012), A promising strain of streptomyces sp with agricultural traits for growth promotion and diesea management, Department of Plant Phathology, CSIRcentral institute of Medicinal &Aromatic, Plants (CIMAP), Lucknown 226015, India 23 Mander P, Choi YH, Seong JH, Na BH, Choss, Lee Hyun Joong, Yoo JC (2013), Statistical optimization of a multivariate fermention process for enhacing antibiotic activity of Streptomyces sp.CS 392, Department of Pharmacy, Chosun University, Gwagju, South Korea 24 Tomoniko Tanura, Yuumi Ishida, Misaotoguro, Kazunori Hatano and KenIchiro Suzuki (2008), Classification of Streptomyces tenebrarius, Higgins and kaster as Steptoalloterichus tenebarius nom, rev, comb and emended description of the genus Streptoalloteichus, Biological Resource center (NBRC), National Insitute of Techology and Evaluation, 2-5-8 Kazusaka Matari, Kisarazu, Chiba, Japan [ International journal of Systematic and Evolution Microbiology] 25 Poulsen M, Oh DC, Clardy J, Currie CR (2011), Chemical analyses of waspassociated streptomyces bacteria reveal a prolific potential for natural products discovery, Department of Bacteriology, University of WisconsinMadison, Madison, Wisconsin, United States of America Phụ lục : Biến chủng Streptomyces 155.21 được cấy zizag ống thạch nghiêng đĩa Petri cho vào tủ ấm đĩa Petri chứa biến chủng Streptomyces 155.21 sau ngày nuôi cấy tủ ấm Tủ ấm Memmert ,Binder Đĩa Petri chứa xạ khuẩn Streptomyces 155.21 Phụ lục 2: Kết quả thử hoạt tính kháng sinh phương pháp khối thạch phương pháp giếng thạch Thử hoạt tính KS biến chủng sau ĐB2 phương pháp khối thạch (VSV kiểm định P.mirabilis.) pH pH pH 11 pH pH Thử ảnh hưởng của pH đến đô bền KS phương pháp giếng thạch (VSV kiểm định P mirabilis) Phụ lục 3: Bình lên men được đặt máy lắc bắt đầu q trình nhân giớng cấp 1, bình nhân giớng cấp bình chứa sản phẩm lên men kết thúc trình lên men Bình lên men được đặt vao máy lắc bắt đầu trình tạo giống cấp Bình nhân giống cấp Bình chứa sản phẩm lên men sau kết thúc trình lên men Phụ lục 4: Cột sắc kí trình chạy lần kết quả thử hoạt tính kháng sinh sau q trình chạy cột Hình dạng cơt sắc kí chạy cơt lần Thử hoạt tính phân đoạn chạy cơt lần phương pháp khoanh giấy lọc (VSV kiểm định P.mirabilis) Hiện hình VSV sắc ký lớp mỏng vết kháng sinh tách được (VSV kiểm định P.mirabilis) Phụ lục 5: Phổ MS chất kháng sinh KS1 phân lập được Phụ lục 6: Phổ UV chất kháng sinh KS1 phân lập được Phụ lục 7: Phổ IR chất kháng sinh KS1 phân lập được ... Tại Bô môn Vi sinh- Sinh học trường ĐH Dược Ha Nôi, chúng đa chọn đê tai ? ?Góp phần nghiên cứu lên men tởng hợp kháng sinh nhờ Streptomyces 155. 21? ?? với mục tiêu sau: - Nghiên cứu cải... sinh  Chọn môi trường lên men tốt nhất:  Mục đích: Chọn mơi trường lên men đê Streptomyces 155. 21 sinh kháng sinh tốt nhất  Tiến hành lên men Streptomyces 155. 21 (biến chủng ĐB1.10)... theo hướng tăng sinh tổng hợp kháng sinh va lựa chọn môi trường lên men thích hợp của chủng Streptomyces 155. 21 - Nghiên cứu mơt vài đặc tính của kháng sinh đa sinh tổng hợp được CHƯƠNG